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Sonificateur haute intensite?

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1. l chantillon Immerger la sonde dans l chantillon Pour un fonctionnement continu avec certain mod le metter PULSE CONTINUOUS pulsation continu sur CONTINUOUS puis r gler la commande d AMPLITUDE sur 40 Pour un fonctionnement en pulsation 1 metter PULSE CONTINUOUS pulsation continu sur PULSE 2 R gler la commande d AMPLITUDE sur 40 3 Appuyer sur la touche d activation manuelle des pulsations sur le convertisseur Pour un fonctionnement en continu avec certain mod les r gler la commande d amplitude sur 40 Pour un fonctonnement en pulsation utiliser la p dale optionnelle ou le PULSEUR Pour un fonctionnement minut 1 R gler la minuterie sur le temps d sir 2 R gler la commande d AMPLITUDE sur 40 3 Appuyer sur le bouton TIMER minuterie Si n cessaire tourner la commande d AMPLITUDE pour augmenter ou diminuer l intensit la demande IMPORTANT Il est essentiel d apporter un soin particulier la sonde pour assurer un fonctionnement fiable Une cavitation intense causera apr s une p riode prolong e une rosion de la pointe et provoquera une baisse de puissance sans que cela soit visible sur l indicateur de puissance Plus la pointe est propre plus grande sera la puissance transmise l chantillon Une rosion de la pointe de la sonde acc l re le processus d rosion Nous conseillons pour cette raison d examiner la pointe apr s 5 ou 6 heures d utilisation et
2. ATEUR Le sonificateur doit tre dans un endroit l abri d un exc s de poussi re de salet de vapeurs explosives et corrosives et des conditions extr mes de temp rature et d humidit CHAPITRE II FONCTIONNEMENT PRINCIPE DE LA DESINTEGRATION ULTRASONIQUE Le g n rateur ultrasonique convertit la tension du secteur 50 60 Hz en nergie lectrique de haute fr quence 20 kHz 20 000 cycles par seconde suivant le mod le Cette nergie lectique de haute fr quence est transmise un transducteur pi zo lectrique dans le convertisseur o elle est chang e en vibration m caniques Les vibrations du convertisseur sont intensifi es par la sonde cr ant des ondes de compression dans le liquide Cette action g n re des millions de bulles microscopiques cavit s qui se propagent pendant la phase de pression n gative et qui implosent violemment pendant la phase de pression positive C est ce ph nom ne appel cavitation qui dissipe une nergie consid rable au niveau de la pointe de la sonde permettant ainsi une agitation intense des mol cules pr sentes dans le liquide FONCTION DES TOUCHES INDICATEURS ET CONNECTEURS PANEAU FRONTAL Commande d AMPLITUDE Lorsqu elle est appuy e met le generareur sous ou hors tension Lorsqu elle est tourn e contr le l amplitude des vibrations la pointe de la sonde Touche d IMPULSION Situ e sur le convertisseur Appuyer dessus pour act
3. E CONTINUOUS pulsion continu sur CONTINUOUS Avec la sonde l air hors de l chantillons l indicateur de puissance doit indiquer une valeur inf rieure 20 watts Si la lecture d passe 20 watts r gler la commande d AMPLITUDE sur OFF arr t et d brancher la sonde du convertisseur 4 R gler la commande d AMPLITUDE sur 100 Si l indicateur de puissance indique une valeur inf rieure 10 watts la sonde es d faillante et doit tre remplac e Si l indicateur de puissance indique une valeur sup rieure 10 watts soit le convertisseur soit le generateur sont d fillants et doit tre renvoy s pour r paration Aller Au D but du Document
4. E TEE ET TE SONIFICATEUR HAUTE INTENIT S RIE AUTOTUNE Mod le 130 watts R f rences 75022 GUIDE D UTILISATION Rev 01 6 28 02 MESURES DE SECURITE IMPORTANTES LIRE ATTENTIVEMENT AVANT D INSTALLER OU DE FAIRE FONCTIONNER CET APPAREIL Ce sonificateur a t con u pour assurer un maximum de s curit l utilisateur Cependant aucune conception ne peut assurer une protection totale en cas de mauvaise utilisation qui peut entra ner des blessures corporelles et ou des dommages mat riels Pour la protection de l utilisateur et de l appareil respecter les avertissiments suivants tout monent lire attentivement les instructions de fonctionnement avant de tenter de faire fonctionner l appareil et conserver ce manuel d instructions pour le consulter plus tard gt Une haute tension est pr sente au niveau de l alimentation Le capot ne peut tre retir que par une personne qualifi e gt Pour viter les chocs lectriques d brancher le cordon d alimentation avant de retirer le capot pour effectuer une r paration gt V rifier que le sonificateur est correctement reli la terre avec une fiche 3 broches Avant de brancher v rifier que la prise lectrique est correctement reli e la terre gt Ne jamais faire fonctionner le g n rateur s il n est pas connect au convertisseur gt Ne jamais faire fonctionner la sonde embout rempla able sans embout gt Ne jamais toucher un
5. d sint gr s sont ceux en forme de b tonnet bacilles alors que les organismes sph riques coques sont beaucoup plus r sistants Le groupe des mycobact rs auquel appartient le micro organisme responsable de la tuberculose est particuli rement difficile d sint grer G n ralement les cellules animales sont plus facilement d sint gr es que les cellules v g tales et les globules rouges sont plus facilement d sint gr s que les cellules musculaires car ces cellules ne poss dent pas de paroi cellulaire Avec le traitement par ultrasons l agitation mol culaire dans l chantillon provoque g n ralement une l vation de temp rature surtout avec de petits volumes Les temp ratures lev es r duisant la cavitation la temp rature de l chantillon doit tre conserv e aussi basse que possible de pr f rence juste au dessus de son point de cong lation Ceci peut tre r alis en immergeant le r cipient contenant l chantillon san un bain de glace et d eau sal e L l vation de temp rature peut galement tre r duite en utilisant le pulseur ou en soumettant l chantillion plusieurs s ries de courtes sonications La d sint gration des cellules peut tre am lior e en augmentant la pression hydrostatique habituellement 1 4 bar et la viscosit Pour les micro organismes l addition de billes de verre d une taille comprise entre 0 05 et 0 5 mm favorise la d sint gration des cell
6. e sonde vibrante gt Nous conseillons l utilsation de protection acoustique pendant le fonctionnement du sonificateur Le sonificateur livr avec ce manuel d instructions est fabrqu avec les meilleurs mat riaux et sa fabrication r pond aux normes les plus lev es Il a t soigneusement v rifi et inspect avant de quitter lusine et il fournira l utilisateur de nombreuses ann es de fonctionnement fiable er en toute s curit s il est utilis en respectant les proc dures d crites dans ce manuel LIQUIDES A FAIBLE TENSION DE SURFACE e SOLVANT ORGANIQUES Toutes les sondes y compris celles avec pointes rempla ables sont ajest es pour r sonner une cetaine fr quence Si le bout de Remplacement est retir e ou isol e du reste de la sonde l l ment ne r sonnera plus cette fr quence et l alimentation sera d faillante Les liquides faible tension de surface p n trent dans l interface entre la sonde et le bout de Remplacement et am nent des particules dans la partie filet e isolant le bout de Remplacement de la sonde TOUJOURS ultiliser une sond solide pour traiter les liquides faible tension de surface avec une sonde de 13 mm _Aller Au D but du Document CHAPITRE I INSTALLATION INSPECTION Avant d installer le sonificateur inspecter visuellement le colis et relever toute trace de dommage qui aurait pu survenir pendant le transport Avant de jeter l emballage v rifier so
7. igneusement qu il ne contient pas de petites pi ces Le processeur ultrasonique a t soigneusement emball et inspect avant de quitter notre usine La responabilit de sa livraison en bon tat est assum e par le transporteur du fait de l acceptation du transport Les reclamations pour perte ou dommage cons cutifs au transport doivent de ce fait tre adress es au transporteur En cas de dommage contacter le transporteur dans les 48 heures compter de la date de livraison NE PAS FAIRE FONCTIONNER UN APPAREIL ENDOMMAGE Conserver tous les mat riaux d emballage pour une future exp dition EXIGENCES ELECTRIQUE Le sonificateur n cessite une prise de courant monophas 3 broches reli e la terre quip e d un fusible capable de d livrer 50 60 Hz 100 volts 115 volts 220 volts ou 240 volts suivant l option de tension choisie Pour les exigences lectriques se r f rer l arri re de l appareil Avant de brancher le cordon d alimentation dans la prise secteur v rifier que le module de courant l arri re de l appareil d livre la tension correcte Si ce n est pas le cas d brancher le cordon d alimentation et ouvir le module de courant l aide d un tournevis retirer le support du fusible changer les fusibles tourner le module et r ins rer le Pour 100 et 115 volts la tension affich e sera 115 Pour 220 et 240 volts la tension affich e sera 220 INSTALLATION DU SONIFIC
8. imentation et abrite le s fusible s SUB CONNECTEUR D 9 BROCHES Broche N Description Non connect e Non connect e Non connect e Permet une connexion un computeur de frequences Permet une connexion un moniteur de puissance externe 10 mV 1 watt Terre Excite les ultrasons quand connect la terre Permet de r gler distantce l intensit l aide d un potentiom tre 10K vers broche 9 10K vers broche 8 vers broche 6 PREPARATION AVANT UTILISATION CR on LE a ATTENTION S assurer que la commande d AMPLITUDE est OFF arr t Brancher le cordon lectrique dans la prise de courant Si la sonde n est pas d j mont e passer l tape 4 Monter la sonde la main sur le convertisseur Utiliser les cl e vis fournies et serrer correctement ATTENTION Installer le montage convertisseur sonde sur une paillasse Fixer la pince uniquement sur le logement du convertisseur de diam tre 32 mm Connecter le c ble du convertisseur sur l alimentation lectrique Si la p dale optionnelle est utilis e ins re la fiche de la p dale dans la prise jack sur le panneau arri re S assurer que la fiche est enti rement ins r e _Aller Au D but du Document UTILISATION DU SONIFICATEUR Un r gulateur de vitesse sur une automoble peut dans une certaine mesure tre compar un sonificateur Ce dispositif est con u p
9. iver les ultrasons Commutateur IMPULSION CONTINU Choisit entre le mode d application des ultrasons en pulsations ou en continu MINUTERIE R gle la dur e de l application des ultrasons de 1 minute 10 minutes Appuyer dessus pour activer les ultrasons pour la dur e choisie sur la minuterie GENERATEUR D IMPULSION Active les ultrasons en mode pulsations La dur e des pulsations peut varier de 1 seconde OFF arr t 1 seconde ON marche 1 seconde OFF 10 secondes ON Le cycle OFF est toujours de 1 seconde Le cycle ON peut varier de 1 10 secondes En position OFF les ultrasons sont mis en continu Un fonctionnement intermittent amenuise la formation de chaleur dans le liquide et permet au mat riau de se stabiliser sous la pointe de la sonde apr s chaque groupe d impulsions INDICATEUR DE PUISSANCE Pour certain models Indique en watts la quantit de puissance ultrasonique d livr e la sonde PANNEAU ARRIERE Sub connecteur D9 broches Se connecte au dispositif de commande et permet l activation et le contr le distance Jack pour p dale Se connecte au c ble de la p dale Connecteur 4 broches Se connecte au convertisseur avec touche d activation manuelle des impulsion Connecteur BNC Se connecte au convertisseur sans touche d activation manuelle des impulsions Module de courant Se connecte au cordon d al
10. our maintenir le v hicule une vitesse constante Lorsque le terrain change les n cessit s de puissance changent galement Le r gulateur de vitesse d tecte ces n cessit s et ajuste automatiquement la quantit de puissance d livr e par le moteur pour compenser ces conditions sans cesse changeantes Plus l inclinaison est importante plus la r sistance du v hicule au mouvement augmente et plus importante sera la puissance d livr e par le moteur pour compenser cette r sistance Le sonificateur est con u pour d livrer une amplitude constante Lorsque la r sistance au mouvement de la sonde augmente les exigences de puissance augmentent galement L alimentation en puissance d tecte ces n cessit s et augmente automatiquiment la quantit de courant d livr e afin de maintenir constante le d placement de la sonde Dans des conditions de charge identiques la quantit de watts d livr e par deux sonificateur avec des puissances differentes sera identique condition que les deux disposent d une capacit de puissance suffisante La commande d AMPLITUDE permet de r gler les vibrations ultrasoniques la pointe de la sonde sur le niveau d sire Bien que le degr de cavitation n cessaire pour traiter l chantillon puisse ais ment tre d termin l oeil nu la quantit de courant n cessaire ne peut pas tre pr d termin e Un r seau sensible contr le en continu les exigences de sortie et ajuste a
11. s La plus grande concentration d nergie tant proximit immediate de la sonde il est imp ratif de garder l chantillion aussi pr s que possible de la pointe Les liquides sont facilement trait s car les cellules libres circulent sans cesse sous la sonde Les mat riaux solides cependant ont tendance tre repouss s par les ultrasons et doivent tre trait s dans des r cipients suffisamment larges pour contenir la sonde mais galement suffisamment petits pour restreindre le mouvement de l chantillon Pour les petits chantillons nous conseillons d utiliser des tubes essai de forme conique Bien que les tubes plastiques fonctionnent bien les tubes en verre et en acier inoxydable sont un peu plus efficaces que ceux en plastique car ils n absorbent pas les vibrations Le contact de la sonde avec le r cipient diminue la puissance d livr e et entra ne la migration de toutes petites particules de verre dans le liquide M me si ces particules de verre n affectent pas la composition chimique de l chantillon elles formeront une fine couche grise lors de la centrifugation Si la sonde doit entrer en contact avec un _Aller Au D but du Document chantillon solide utiliser un tube de centrifugation en acier in oxydable standard de 20 mm 7 de diam tre coup une longueur de 70 mm 3 Les micropointes ne doivent jamais entrer en contact avec autre chose que le liquide car la friction r sultante a
12. si n cessaire de la polir avec de la toile meri ou avec une meule La sonde vibre une fr quence sp cifique il est tr s important d liminer uniquement la surface contamin e Cette proc dure peut tre r p t e aussi longtemps que l indicateur de puisssance indique moins de 20 watts lorsque la sonde est hors de l chantillon et que la commande d AMPLITUDE est r gl e sur 100 Dans le cas contraire il est n cessaire de changer la sonde ou le bout de Remplacement CONSEILS ET TECHNIQUES D UTILISATION DESINTEGRATION DES CELLULES Les organismes unicellulaires micro oranismes sont constitu s d une paroi cellulaire externe semi perm able solide et rigide entourant la membrane protoplasmique cytoplasmique et le cytoplasme Le cytoplasme est constitu d acides nucl iques de prot ines de glucides de lipides d enzymes d ions inorganiques de vitamines de pigments d inclusions et d environ 80 d eau Pour isoler et extraire n importe quelle de ces substances de l int rieur de la cellule il est n cessaire de briser la paroi cellulaire et la membrane protoplasmique Dans certains cas les cellules peuvent s cr ter la substance d sir e mais dans la plupart des cas la paroi cellulaire doit tre d sint gr e par ultraons pour lib rer ces substances Les micro organismes sont tr s diff rents dans leur sensibilit la d sint gration ultrasonique Par exemple les plus facilement
13. ssez bas et le temps de traitement augument Ins rer la sonde suffisamment profond ment en dessous de la surface de l chantillon pour viter la formation d a rosol ou de mousse La mousse diminue consid rablement la cavitation et peut entra ner une d naturation des prot ines Un traitement une puissance plus faible sans mousse est beaucoup plus efficace qu un traitement une puissance plus lev e avec sans mousse La diminution de la puissance l ugmentation de la temp rature du liquide emp chent g n ralement l apparition d a rosol et de mousse Ne pas utiliser d agent anti moussant ou de surfactant Des radicaux libres se forment pendant la cavitation Si on laisse ces radicaux libres s accumuler ceux ci peuvent affecter de fa on importante l int grit biologique de l chantillion en r agissant avec les prot ines les polysaccharides ou les acides nucl iques La formation de radicaux libres au cours de traitements de courte dur e n est normalement pas consid r e comme un probl me Pour des traitements prolong s il peut tre b n fique d ajouter des fixateurs de radicaux libres comme le N20 la cyst ine la glutathione r duite le dithiothr itol ou d autres compos s SH La saturation de l echantillon par une atomsphere protectrice d helium ou d hydrog ne gazeux ou l ajout d un petit bout de glace carbonique dans l chantillon diminue souvent la formation de radicaux libre
14. u point de contact avec le r cipient briserait la micropointe M me se les sondes plus grandes ne se brisent pas si elles entrent en contact avec le r cipient de traitement elles peuvent cependant briser le r cipient Avant chaque exp rience placer la pointe de la sonde dans l eau ou l alcool et mettre l alimentation sous tension pendant quelques secondes pour retirer tout r sidu Pour viter la perte d chantillon pouvant s accrocher la paroi du tube essai enduire le tube de silicone de la fa on suivante laver et s cher soigneusement le tube essai enduire de silicone puis s cher l air Les sondes peuvent tre autoclav es ou st rilis es en les immergeant soit dans l eau bouillante soit dans un d tergent bact ricide et un d sinfectant Une viscosit et une concentration lev es sont probl matiques 5000 cp et une concentration de 15 en poids constituent les limites maximales Si l chantillon est trop spais pour tre vers ou circuler facilement il est trop pais et ne peut pas tre trait par ultrasons CHAPITRE III REPARATIONS SURCHARGE Le s fusible s prot ge nt le processeur ultrasonique contre une mauvaise utilisation ou un mauvais fonctionnement Si un fusible saute proc der de la fa on suivante 1 S assurer que la sonde et ou la pointe sont correctement fix es Remplacer le fusible 3 R gler la commande d AMPLITUDE sur 100 et le commutateur PULS
15. ules en concentrant l nergie rel ch e par la cavitation et par crasement physique Les billes sont pratiquement indispensables pour la d sint gration de spores ou de levures Le bon dosage est de un volume de billes pour deux volumes de liquide Pour le traitement de cellules difficiles un pr traitement par une enzyme comme le lysozyme ou la hyaluronidase peut tre b n fique La glycosidase est efficace sur la levure la lysostaphine sur les Staphylocoques la collag nase sur la peau et le cartilage et la trypsine hyaluronidase avec des tissues de foie et de reins _Aller Au D but du Document Si l utilisation d enzyme n est pas possible les proc dures suivantes peuvent tre essay es cong lation de l chantillon 70 C pendant la nuit puis d cong lation dans un m lange eau glace imm diatement avant la sonication Chaque fois que cela est possible les tissus doivent tre coup s en tout petits morceaux pour permettre leur mouvement dans le liquide Les tissus r sistants comme la peau et les muscles doivent d abord tre liqu fi s dans un mixer ou un quivalent pendant environ 10 secondes et transvas s dans un petit r cipient pendant le traitement ultrasonique La cong lation suivie d une r duction en poudre peut galement tre tilis e se cette proc dure ne perturbe pas l exp rience Si des particules subcellulaires inactes sont d sir es la commande d amplitude doit tre r gl e a
16. utomatiquement la puissance pour maintenir l amplitude sur le niveau pr s lectionn Plus la r sistance au mouvement de la sonde due une forte viscosit plus la sonde est immerg e profond ment dans l chantillon plus la diam tre de la sonde est lev ou plus la pression est lev e plus la quantit de courant d livr la sond sera importante Le r glage de la commande d AMPLITUDE enti rement dans le sens horaire n entra nera pas la sistribution de la puissace maximale l chantillon La puissance maximale que le processeur ultrasonique est capable de d livrer sera uniquement d livr e lorsque la r sistance au mouvement de la sonde est suffisamment lev e pour soutirer la quantit de watt maximale Ce ph nom ne peut tre d montr de la fa on suivante Appuyer la sonde contre un morceau de bois Plus la pression exerc e vers le bas est importante et par cons quent plus la r sistance au mouvement de la sonde est lev e plus la quantit de courant d livr e par l alimentation lectrique est importante N e Un ATTENTION Ne pas faire fonctionner le g n rateur sans l avoir branch sur le convertisseur Une haute tension est pr sent dans le g n rateur Ne pas le faire fonctionner capot enlev Ne jamais laisser vibrer une microsonde l air au dehors de l echantillon pendant plus de 10 secondes Ne pas laisser une sonde vibrante entrer en contact avec autre chose que

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