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TSQ Series Getting Started Guide Version C [FR]

1. 109 Solution de r glage et d talonnage de polytyrosine 1 3 6 110 Pr paration d une solution de r glage et d talonnage de polytyrosine 1 3 6 l aide d un produit solide pr m lang 110 Pr paration d une solution de r glage et d talonnage de polytyrosine 1 3 6 l aide de produits chimiques secs de votre stock 111 Solution d talonnage en masse lev e Ultramark 1621 112 Solution d etalonnase en masse pr cise nn ana 113 Solution m rede PEG un ioneina asa a a a ee 113 Solution talonnage en masse pr cise nn Dre rel 114 Solutions de r serpine a a iD pas Die 114 Directives de d veloppement de m thodes instrumentales 117 ders rn en ee a 121 x Guide de d marrage rapide de la gamme TSO Thermo Scientific es I Preface A propos de ce guide Le Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ fournit des informations sur la configuration P talonnage et le r glage du spectrom tre de masse TSQ et l acquisition des donn es MS Toutes ces proc dures peuvent tre effectu es partir EZ Tune ou de Tune Master Documentation connexe En compl ment de ce guide Thermo Fisher Scientific propose galement les ouvrages suivants pour les spectrom tres de masse TSQ e Guide de pr installation de la gamme TSQ Guide de connexion de la
2. 2010 Thermo Fisher Scientific Inc Tous droits r serv s Les marques suivantes sont d pos es aux Etats Unis et ventuellement dans d autres pays TSQ Quantum est une marque d pos e de Thermo Fisher Scientific Inc Windows est une marque d pos e de Microsoft Corporation Tygon est une marque d pos e de Saint Gobain Performance Plastics Co Unimetrics est une marque d pos e de SGE International Pty Ltd Corp Teflon est une marque d pos e de E I du Pont de Nemours amp Co Rheodyne et RheFlex sont des marques d pos es de Rheodyne L P PEEK est une marque commerciale de Victrex plc Les autres marques d pos es sont des marques commerciales ou d pos es de Thermo Fisher Scientific Inc et de ses filiales Thermo Fisher Scientific Inc fournit le pr sent document ses clients lors de lachat d un produit pour qu ils puissent s y reporter dans le cadre de l utilisation de celui ci Ce document est une oeuvre prot g e par les lois en vigueur sur la propri t intellectuelle Sa reproduction partielle ou int grale est interdite sans l accord crit de Thermo Fisher Scientific Inc Le contenu de ce document peut tre modifi sans pr avis Toutes les informations techniques contenues dans le pr sent document sont fournies titre de r f rence uniquement Les configurations et sp cifications qui y sont indiqu es pr valent sur toute autre information pr c demment communiqu e l acheteur
3. gt 5 S Q K T T T 30 40 Collision Energy 5 Si des erreurs sont survenues pendant la proc dure d optimisation restaurez les r glages pr c dents des dispositifs d pendant du compos comme suit a Cliquez sur Undo pour restaurer les r glages pr c dents des dispositifs b Cliquez sur Accept pour recharger les r glages pr c dents des dispositifs sur le spectrom tre de masse c Analysez et corrigez les probl mes l origine de l chec de l optimisation d Allez P tape 4 de cette proc dure et relancez la proc dure d optimisation 54 Guide de d marrage rapide de la gamme TSO Thermo Scientific 4 Optimisation du spectrom tre de masse l aide d un compos en mode ESI MS MS ou H ESI MS MS Optimisation automatique l aide d un compos en mode ESI MS MS ou H ESI MS MS 6 Cliquez sur Accept pour accepter les r sultats de l optimisation Remarque Si les r glages de la source d ions ont t modifi s enregistrez la m thode de r glage pendant que le spectrom tre de masse est sous tension dans le cas contraire ces r glages seront perdus 7 Enregistrez le fichier de m thode de r glage comme suit a Cliquez sur Save Tune As dans la vue Compound Optimization pour ouvrir la boite de dialogue Save As b Dans la zone File Name entrez le nom du fichier de m thode de r glage tel que ESI_r serpine TSQTune ou le nom du compos utilis c Cliquez sur Sa
4. Perfusion d une solution de r glage et d talonnage de faible concentration contenant de la polytyrosine 1 3 6 directement dans la source ESI H ESI ou HESI II l aide d une pompe seringue e Test de lefficacit et de la stabilit du spray de la solution de r glage et d talonnage dans le spectrom tre de masse Vous pouvez observer les ions positifs 4 charge unique suivants pour la polytyrosine monom re trim re et hexam re m z 182 m z 508 et m z 997 respectivement e Execution du r glage et de l talonnage automatiques e Enregistrement des fichiers de r glage et d talonnage Contenu e Configuration en vue de l introduction d chantillons par perfusion directe e Configuration pour le r glage et l talonnage automatiques e Cr ation d un faisceau d ions stable e V rification du fonctionnement en mode ESI MS et H ESI MS e R glage et talonnage automatiques en polarit ions positifs en mode ESI MS ou H ESI MS e R glage et talonnage automatiques en polarit ions n gatifs en mode ESI MS et H ESI MS e Nettoyage du syst me apr s le r glage et l talonnage Thermo Scientific Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ 23 3 Reglage et talonnage du spectrometre de masse Configuration en vue de l introduction d chantillons par perfusion directe Configuration en vue de l introduction d chantillons par perfusion directe Jonction de mise la terre Ligne de transfert
5. Recommencez les tapes 15a 15c plusieurs fois Remarque Vous pouvez optimiser le r glage en le variant et en r p tant tape 14 16 Pour terminer l acquisition des donn es cliquez sur Stop dans la bo te de dialogue Acquire Data Voir la Figure 47 Un fichier raw des donn es r serpine en mode de balayage SRM est d sormais stock sur le disque dur Figure 47 Acquisition de balayage SRM dans l espace de travail Instrument Method Development Workspace ESI_reserpine TSQTune Quantum Tune Master ESI Instrument Method Development Workspace AutoTune TSOCalib Fie Workspace View Control Scan Parameters Display Setup Help er gt jan vet Lu AMRDBMNElLS S e Ra Ube oes Scan Type Full Scan SIM SRM aber pi ir m Parent Product E ethair oat Mass Mass er F 1 609 281 195 ss Filename C Xcalibur Data reserpine_01 Raw can Time IV Sample Name Reserpine Collision Energy M 38 gy a Comment SRM ESI 10 pg loop idth 0 70 Q1 Peak Width IV 4 Acquisition Status Acquire Time Start Q3 Peak With F 070 H ae igs 2 qe Time min 0 00 ni a Use Tuned Tube Lens Value IV gt Minutes View 7 Skimmer Offset IV Data Processina FN 02CID Gas Micro Scans Average i SIC Chrom Fiter 115 i H Abort S 2857 SRM 609 CE 38 ST 0 21 C 3 CR 3 97e7 1 0287 Total Ion Cur
6. a Dans Tune Master cliquez sur le bouton AS LC Direct Control de la barre d outils Control Scan Mode pour afficher la vue Inlet Direct Control dans la partie sup rieure droite de l espace de travail Bal b Dans la zone du panneau de commande directe cliquez sur LI Arr ter pour arr ter le d bit de solvant a A 3 Cliquez sur le bouton On Standby de la barre d outils Control Scan Mode pour mettre le arche spectrom tre de masse en mode veille Veille fl 4 Retirez la seringue du porte seringue a Soulevez le manche de la seringue tout en appuyant sur le bouton noir du manche de la pompe seringue b Retirez la seringue c Retirez l extr mit de l aiguille du tube Teflon de l adaptateur de seringue Voir la Figure 41 58 Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ Thermo Scientific 5 Acquisition de donn es ESI SRM ou H ESI SRM Configuration en vue de l introduction d chantillons par injection boucle manuelle en mode ESI ou H ESI Figure 41 Seringue et adaptateur de seringue Jonction LC Raccord Fingertight oan oo Lumen Ferrule Tube Teflon 5 Retirez la ligne de transfert des chantillons entre l adaptateur de seringue et l orifice 5 de la vanne de d rivation d injection L orifice 5 constitue d sormais l orifice d injection Voir la Figure 42 Figure 42 Raccordement pour injection par boucle manuelle dans la vanne de d rivation d injection Se Orifice d injecti
7. En mode Full Scan le spectre doit ressembler celui illustr la Figure 79 Figure 79 Spectre d ions n gatifs Ultramark 1621 S 15883 FULL QIMS CT 1 06 A 10 7 2606 1007 1579 88 1479 99 J 1379 89 24 1679 84 804 4 704 J 1779 73 2 itil 1279 93 Relative Abundance ai T 404 4 1879 90 305 1180 04 204 104 1080 15 1980 14 4005 95 1196 05 1366 45 1466 06 1566 93 1766 43 J 1005 1705 81 oO 1900 1000 1100 1200 1300 1400 1500 2000 miz 1600 1700 1800 Thermo Scientific A Etalonnage en masse lev e Le Tableau 7 r pertorie les ions n gatifs Ultramark 1621 Tableau 7 Rapports masse charge des ions n gatifs Ultramark 1621 lons n gatifs Ultramark m z 880 0228 980 0164 1080 0100 1180 0036 1279 9972 1379 9908 1479 9844 1579 9781 1679 9717 1779 9653 1879 9589 1979 9525 2079 9461 2179 9397 3 Cliquez sur le bouton Instrument Method Development Workspace pour afficher l espace de travail Instrument Method Development Workspace 4 Dans la vue Define Scan d finissez les r glages sur les valeurs indiqu es la Figure 80 puis cliquez sur Apply Figure 80 R glages dans la vue Define Scan de l talonnage en masse lev e en polarit ions n gatifs Scan Type Full Scan SIM SRM Scan Mode Ms QIMS Q3MS MS MS Parent Product Neutral Loss Scan Parameters r Scan
8. a Dans EZ Tune cliquez sur le bouton Define Scan pour afficher la bo te de dialogue Define Scan b Dans la bo te de dialogue Define Scan s lectionnez Full Scan dans la zone Scan Type La zone Scan Parameters est activ e Voir la Figure 22 c Dans la zone Scan Mode s lectionnez Q1MS afin d utiliser le mode de balayage Q1MS d Dans la zone Scan Range situ e dans la zone Scan Parameters s lectionnez l option Center Mass La liste Center Mass et la zone Scan Width sont activ es e Dans la liste Center Mass s lectionnez 508 208 pour d finir le centre de la plage de balayage sur 508 208 u f Dans la zone Scan Width entrez 10 000 pour d finir la largeur de balayage sur 10 000 u g Dans la zone Scan Time entrez 0 20 pour fixer la vitesse de balayage 0 20 s h Pour appliquer ces r glages de balayage cliquez sur Apply Voir la Figure 22 Figure 22 R glages standard permettant de cr er un courant d ions stable dans la bo te de dialogue Define Scan Define Scan Scan Type Full Scan HSRM SRM Scan Mode QIMS Q3MS Product Scan Parameters Scan Range Scan Time 0 200 C FM LM Center Mass 5082 v Bye r50 0000 Entry Mode Center Mass Scan Width 10 0000 token Erai Q2 CID Gas Abort Cancel Help 2 Cliquez sur le bouton Display TIC de la barre d outils Control Scan Mode pour d marrer l affichage d un courant d ions dans la vue graphique situ e dans la partie inf rieure droit
9. l AutoS ampler Start Save Report Help 2 Definissez les r glages d optimisation afin de surveiller la transition de la r serpine de m z 609 281 m z 195 066 a Dans la zone Optimization Modes s lectionnez SRM Vous pouvez ainsi optimiser une r action sp cifique Dans la zone Optimization Options s lectionnez l option Standard pour r gler les dispositifs s lectionn s par d faut L nergie de collision et le d calage de la lentille tubulaire TSQ Quantum Access TSQ Quantum Access MAX et TSQ Quantum Ultra ou Pamplitude RF de la lentille S lens TSQ Vantage sont les dispositifs par d faut d pendant du compos optimis s par le systeme TSQ si cette option est s lectionn e Dans le tableau Optimization tapez 609 281 dans la colonne Parent Mass pour d finir la masse des ions parents de la r action SRM m z 609 281 Dans la colonne Product Mass tapez 195 066 pour d finir la masse des ions produits de la r action SRM sur m z 195 066 Remarque Vous devez s lectionner le mode d entr e utilis pour introduire chantillon dans le spectrom tre de masse Cette proc dure utilise option Auto Loop Injection Dans la zone Inlet Types s lectionnez option Auto Loop Injection pour que le systeme TSQ injecte automatiquement la solution d optimisation Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ 83 7 Optimisation du spectrometre de masse en mode APCI MS MS Optimisation automatique l aide d un
10. temp rature ambiante pendant environ 20 minutes avant de retirer ou de toucher ce composant Veillez ne jamais toucher l extr mit du tube de transfert des ions lorsqu elle est expos e 2 Tenez les saillies ext rieures du c ne de balayage ionique et tirez ce dernier hors du joint du c ne API 3 Placez le c ne de balayage ionique dans son emballage d origine Passez la section Installation de l aiguille de d charge de Corona Installation de l aiguille de d charge de Corona Pour installer l aiguille de d charge de Corona MISE EN GARDE VEILLEZ NE PAS VOUS BLESSER L aiguille de d charge de Corona est particuli rement pointue Manipulez la avec pr caution pour ne pas vous blesser 1 Positionnez le bo tier de la source Ion Max pour y acc der depuis l arri re 2 l aide d une pince maintenez l aiguille par le contact dor et poussez aiguille dans la prise Voir la Figure 51 Figure 51 Vue arri re de l aiguille de d charge de Corona Contact dor amp 3 Veillez ce que l extr mit de laiguille soit align e sur la trajectoire entre la sonde APCI et Pinterface avec la source d ions sur l instrument Passez a la section Installation du boitier de la source Ion Max ou Ion Max S 70 Guide de d marrage rapide de la gamme TSO Thermo Scientific 6 Configuration de la source d ions pour l acquisition de donn es en mode APCI MS MS Installation du boitier de la sour
11. 112 Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ Thermo Scientific C Pr paration de solutions Solution d talonnage en masse pr cise Solution d talonnage en masse pr cise Pour effectuer un talonnage en masse pr cise la sym trie des pics des compos s doit tre correcte sur toute la gamme de masses qui permettra d talonner laxe de masse La proc dure d talonnage standard utilise des d riv s ammonium de glycols poly thyl niques PEG ammoniums dont les masses sont comprises entre 124 et 1268 u Vous pouvez modifier la liste ci dessous et utiliser d autres compos s ou cr er une liste personnalis e et r duire la plage de masses talonner Remarque Les PEG n cessaires l talonnage de votre syst me sont livr s dans le kit d accessoires TSQ Quantum Accurate Mass Calibration Compounds r f rence 70111 62029 Vous devez fournir de l ac tate d ammonium et les solvants n cessaires pour effectuer l talonnage n cessaire pendant la d monstration de votre syst me Proc dures suivre pour la pr paration des solutions suivantes e Solution m re de PEG e Solution d etalonnage en masse pr cise Solution mere de PEG Pour pr parer une solution m re de 1 000 pmol ul de PEG dans un m lange m thanol eau 50 50 Remarque Tous les r actifs doivent tre de classe A C S American Chemical Society ou sup rieure La r ussite des exp riences d pend de la qualit des r actifs 1 Pesez
12. La compatibilit lectromagn tique CEM a t valu e par l organisme de certification U L Underwriter s Laboratory Inc EN 55011 1998 EN 61000 4 4 1995 A1 2001 A2 2001 EN 61000 3 2 1995 Al 1998 A2 1998 A14 2000 EN 61000 4 5 1995 Al 2001 EN 61000 3 3 1998 EN 61000 4 6 2001 EN 61000 4 2 2000 EN 61000 4 11 1994 Al 2001 EN 61000 4 3 2002 EN 61326 1 1998 FCC Classe A CFR 47 Partie 15 2005 CISPR 11 1999 Al 1999 A2 2002 Conformit aux normes de s curit relatives aux basses tensions Cet instrument est conforme la directive 73 23 CEE relative aux basses tensions et la norme EN 61010 1 2001 harmonis e 2001 TSQ Vantage CEM Directive 2004 108 CE La compatibilit lectromagn tique CEM a t valu e par l organisme de certification TUV Rheinland of North America Inc EN 55011 1998 Al 1999 A2 2002 EN 61000 4 4 2004 EN 61000 3 2 2006 EN 61000 4 5 2006 EN 61000 3 3 1995 Al 2001 A2 2005 EN 61000 4 6 2001 EN 61000 4 2 2001 EN 61000 4 11 2004 EN 61000 4 3 2006 EN 61326 1 2006 FCC Classe A CFR 47 Partie 15 2007 CISPR 11 1999 Al 1999 A2 2002 Conformit aux normes de s curit relatives aux basses tensions Cet instrument est conforme 4 la directive 2006 95 CE relative aux basses tensions et 4 la norme EN 61010 1 harmonisee TSQ Quantum Access Directives CEM 89 336 CEE 92 31 CEE 93 68 CEE La
13. c Effectuez les tapes tape 4a et b pour tous les dispositifs indiqu s dans la Figure 19 ou la Figure 20 d Patientez jusqu ce que les valeurs actuelles des dispositifs soient similaires aux valeurs d finies Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ 27 3 Reglage et talonnage du spectrometre de masse Configuration pour le r glage et l talonnage automatiques Figure 19 Bo te de dialogue lon Source Devices Dispositifs de la source d ions du TSQ Quantum Ultra TSQ Quantum Access et TSO Quantum Access MAX lon Source Devices LC Flow Rate ul min 1 00 Spray Voltage of Yaporizer Temperature f Sheath Gas Pressure 4f lon Sweep Gas Pressure of Aux Gas Pressure f Capillary Temperature 4f S Lens RF Amplitude af Declustering Voltage Sheath Gas Pressure LC Flow Rate ul min 1 00 Apply wv Spray Voltage f Yaporizer Temperature 0 0 4f Sheath Gas Pressure 5 5 af Aux Gas Pressure 0 0 f Capillary Temperature 270 271 4f Tube Lens Offset 90 90 f Skimmer Offset Sheath Gas Pressure 5 Configurez la pompe seringue de sorte qu elle injecte la solution de r glage et d talonnage de polytyrosine 1 3 6 Ensuite d marrez la pompe seringue a Choisissez Setup gt Syringe Pump amp Sample Loop pour afficher la bo te de dialogue Syringe Pump and Sample Loop Voir la Figure 21 b Dans la zone Syringe Flow Control s lectionnez option On pour activer la zone Flow Rate c Dans la
14. essuyer l extr mit de l aiguille avec un tissu propre et non pelucheux avant de la r ins rer dans l adaptateur de seringue Thermo Scientific Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ 25 3 Reglage et talonnage du spectrometre de masse Configuration en vue de l introduction d chantillons par perfusion directe 2 Tout en maintenant le piston de la seringue en place ins rez avec pr caution l extr mit de l aiguille dans le tube Teflon de l adaptateur de seringue Voir la Figure 17 Figure 17 Seringue et adaptateur de seringue Jonction LC Raccord Fingertight r f rence 00101 18202 r f rence 00101 18081 Ferrule Tube Teflon P N 00101 18196 r f rence 00301 22915 3 Raccordez l adaptateur de seringue la jonction LC 4 Raccordez le tube de transfert PEEK aux jonctions LC et de mise la terre voir la Figure 18 Les jonctions LC et de mise la terre sont dot es d orifices d entr e 10 32 bas conique 5 Ins rez la jonction de mise la terre dans le support ou la barre de mise la terre MISE EN GARDE V rifiez que la jonction de mise la terre est enti rement ins r e dans le support ou la barre de mise la terre Dans le cas contraire une lectrocution pourrait se produire Figure 18 Raccordements de la ligne de perfusion entre la jonction LC et la jonction de mise la terre Barre de mise la terre de la source lon Max ou lon Max S Jonction de mi
15. nergie de collision la tension de modulation de la lentille tubulaire TSQ Quantum Access TSQ Quantum Access MAX et TSQ Quantum Ultra ou l amplitude rf de la lentille S TSQ Vantage et les tensions appliqu es l optique ionique jusqu ce que la transmission des ions de votre analyte soit optimale Pour une optimisation personnalis e vous pouvez choisir lequel des r glages ci dessus le TSQ optimise La configuration optimale de ces r glages d pend du d bit du solvant et de la structure de l analyte En g n ral vous devez modifier les r glages du spectrom tre de masse chaque fois que les conditions de d bit du solvant de l application changent Remarque V rifiez que le r glage et l talonnage du spectrom tre de masse TSQ ont t r alis s dans les trois mois pr c dant l optimisation des r glages pour le compos Si vous devez r gler et talonner le syst me suivez la proc dure d crite dans le Chapitre 3 R glage et talonnage du spectrom tre de masse Pour optimiser le spectrom tre de masse l aide d un compos en mode APCI MS MS vous devez effectuer les op rations suivantes d crites dans ce chapitre 1 Configurez la pompe seringue et la vanne de d rivation d injection pour l injection automatique par boucle 2 Configurez le spectrom tre de masse pour un compos sp cifique partir de EZ Tune Thermo Scientific Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ 75 7 Optimisati
16. talonnage automatiques 27 Cr ation d un faisceau d ions stable 2 4 Be aa ets 30 V rification du fonctionnement en mode ESI MS et H ESI MS 32 R glage et talonnage automatiques en polarit ions positifs en mode ESI MS ou FI ESUMS sus date bases saute ane nadia tds 35 R glage et talonnage automatiques en polarit ions n gatifs en mode ES MS et H ESI MS sn NN er Mara 38 Nettoyage du syst me apr s le r glage et P talonnage 40 Chapitre 4 Optimisation du spectrom tre de masse l aide d un compos en mode ESI MS MS ou H ESUMS MS 22 2 ni nn eus 43 Configuration en vue de l introduction d chantillons par boucle d injection automatique en mode ES ou H ESI 22244054000 ee RB aan ade 45 Configuration de l optimisation l aide d un compos en mode ESI MS MS ou H ESI MS MS yop Si sy aus Reseed n hae peees dus 49 Thermo Scientific Guide de d marrage rapide de la gamme TSO ix Table des matieres Chapitre 5 Chapitre 6 Chapitre 7 Chapitre 8 Annexe A Annexe B Annexe C Annexe D Optimisation automatique l aide d un compos en mode ESI MS MS ou H ESI MS MS Weis Brass Pera he Wale aS RE de 52 Acquisition de donn es ESI SRM ou H ESI SRM 57 Configuration en vue de l introduction d chantillons par injection boucle manuelle en mode ESI ou H ESI un an ee en 57 Acquisition de donn es ESI MS MS ou H ESI MS
17. 18 Guide de d marrage rapide de la gamme TSO Thermo Scientific 2 Configuration de la source d ions pour le r glage et l talonnage du spectrom tre de masse Installation de la sonde ESI H ESI ou HESI II Figure 10 Sonde ESI Orifice d arriv e du gaz auxiliaire A Orifice d arriv e Prise du connecteur haute d chantillons tension de l aiguille ESI Orifice d arriv e du gaz gaine S Tige de guidage Orifice d arriv e du liquide de gainage calibrant C Figure 11 Sonde H ESI Prise du c ble de Prise de raccordement chauffage du de l aiguille H ESI 8 kV vaporisateur Arriv e de l chantillon Support de jonction de mise la terre Thermo Scientific Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ 19 2 Configuration de la source d ions pour le r glage et l talonnage du spectrom tre de masse Installation de la sonde ESI H ESI ou HESI II Figure 12 Sonde HESI I chauffage du vaporisateur Prise du c ble de Arriv e de gaz auxiliaire A Arriv e de gaz gaine S Reperes de profondeur de sonde 4 Enfoncez la sonde dans l orifice jusqu a ce que la tige de guidage atteigne l anneau de serrage qui se trouve sur le boitier de la source d ions 5 Tournez la sonde de 45 degres dans le sens des aiguilles d une montre et alignez la tige de guidage sur le logement du bloc de verrouillage ESI il vous faudra peut tre tirer l g rement la sonde vers vous pour aligner corr
18. 4 lt lt rifice d injection Boucle Vers la source d ions Vers le conteneur de r cup ration Depuis la LC des liquides 6 Ins rez le raccord d aiguille r f rence 00110 22030 dans la vanne de d rivation d injection a Ins rez le tube d admission la ferrule RheFlex et la partie filet e de l amp crou RheFlex voir la Figure 43 dans l orifice 5 de la vanne de d rivation d injection b Serrez manuellement l crou avec pr caution Le spectrom tre de masse est d sormais configur pour l injection par boucle manuelle Passez la section Acquisition de donn es ESI MS MS ou H ESI MS MS en mode de balayage SRM Figure 43 Raccord d aiguille Ferrule RheFlex Se Tube d admission Teflon Ecrou PEEK RheFlex Thermo Scientific Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ 59 5 Acquisition de donn es ESI SRM ou H ESI SRM Acquisition de donn es ESI MS MS ou H ESI MS MS en mode de balayage SRM Acquisition de donn es ESI MS MS ou H ESI MS MS en mode de balayage SRM Marche A Veille ll hr NL LS Pour acqu rir un fichier de donn es de r serpine en mode de balayage SRM Remarque Tune Master enregistre automatiquement les donn es acquises sur le disque dur 1 Si ce nest pas d j fait ouvrez Tune Master a Cliquez sur D marrer avec le bouton droit de la souris et choisissez Explorer b Naviguez jusqu au dossier C
19. Acquisition de donn es APCI MS MS en mode de balayage SRM f Sp cifiez l utilisation d un filtre de chromatographie de 3 s pour l acquisition des donn es i Cochez la case Data Processing pour activer la zone Data Processing et ses options ii S lectionnez l option Chrom Filter pour indiquer l utilisation d un filtre de chromatographie iii Dans la zone Data Processing entrez la valeur 3 pour indiquer l utilisation d un filtre de chromatographie de 3 s g Definissez les r glages de gaz de collision i Cochez la case Q2 CID Gas pour indiquer l utilisation d un gaz de collision ii Dans la zone Q2 CID Gas entrez 1 5 pour d finir le gaz de collision sur 1 5 mTorr h V rifiez que la zone Micro Scans est d finie sur 1 6 Cliquez sur Apply pour appliquer les r glages de balayage au spectrom tre de masse 7 Cliquez sur le bouton Display TIC de la barre d outils Control Scan Mode pour lancer Penregistrement du courant ionique total dans la vue graphique situ e dans la partie inf rieure droite de l espace de travail Voir la Figure 72 Figure 72 Type de balayage SRM dans l espace de travail Instrument Method Development Workspace APCI_reserpine TSQTune Quantum Tune Master APCI Instrument Method Development Workspace AutoTune TSQCalib File Workspace View Control Scan Parameters Display Setup Help AMAR REEL HS ALN ones t 1
20. Par ailleurs Thermo Fisher Scientific Inc ne garantit pas l exhaustivit l exactitude des informations fournies ni que le pr sent document est exempt d erreur et d cline toute responsabilit pour les erreurs omissions dommages ou pertes li s l utilisation de ce document m me dans le cas o les instructions qu il contient seraient scrupuleusement respect es Ce document ne fait pas partie int grante d un quelconque contrat de vente pass entre Thermo Fisher Scientific Inc et un acheteur Ce document ne r git ou ne modifie en aucune mani re les Conditions de vente lesquelles r gissent la r solution de tous les conflits pouvant survenir entre ces deux documents Historique de la version R vision A publi e en avril 2008 Revision B publi e en mars 2009 R vision C publi e en juin 2010 Ressources logicielles Xcalibur 2 1 TSQ 2 1 Usage exclusivement r serv la recherche Non r glement pour un usage de diagnostic m dical ou v t rinaire par la FDA Federal Drug Administration am ricaine ni aucune autre autorit comp tente Conformite reglementaire Thermo Fisher Scientific soumet ses produits une s rie de tests et une valuation compl te afin de s assurer de leur conformit totale aux r glementations locales et internationales Une fois le syst me livr il r pond aux exigences de l ensemble des normes de s curit et de compatibilit lectromagn tique CEM telles que d crit
21. Proc dez comme suit pour pr parer un stock de solution de r serpine 2 pg ul Elle peut tre utilis e comme solution d optimisation du TSQ Quantum Access ou TSQ Quantum Access MAX Utilisez ensuite les dilutions en s rie de la solution de base pour r aliser la solution d optimisation pour le TSQ Quantum Ultra 200 fg ul ou le TSQ Vantage 100 fg ul Pour pr parer une solution de r serpine 2 pg pl 1 Pr parez une solution de r serpine 1 mg ml comme suit a Ajoutez 100 mg de r serpine dans une fiole jaug e de 100 ml b Remplissez la fiole jaug e de 100 ml d une solution de m thanol contenant 1 d acide ac tique M langez le contenu 2 Pr parez une solution de r serpine 10 ng ul comme suit a A l aide d une pipette volum trique transf rez 1 ml de solution 1 mg ml dans une fiole jaug e de 100 ml b Remplissez la fiole jaug e de 100 ml d une solution de m thanol contenant 1 d acide ac tique M langez le contenu 3 Pr parez une solution de r serpine 100 pg ul comme suit a l aide d une pipette volum trique transf rez 1 ml de solution 10 ng ml dans une fiole jaug e de 100 ml b Remplissez la fiole jaug e de 100 ml d une solution de m thanol contenant 1 d acide ac tique M langez le contenu 4 Pr parez une solution de r serpine 2 pg ul comme suit a A l aide d une pipette volum trique transf rez 2 ml de solution 100 pg yl dans une
22. aD Directives de developpement de methodes instrumentales Cette annexe fournit des directives de d veloppement de m thodes instrumentales Les r glages indiqu s dans cette section peuvent ne pas s appliquer directement votre application car ils sont utilis s par diff rentes techniques analytiques employant un chantillon de polytyrosine Lorsque vous d veloppez une m thode instrumentale pour votre application vous devez d abord r gler l instrument en optimisant sur votre compos Les tableaux ci apr s contiennent les r glages de l instrument appliquer au spectrom tre de masse dans l espace de travail Instrument Method Development Workspace de Tune Master Ces r glages permettent d valuer imm diatement les performances de l instrument en fonction de l analyte avant de cr er la m thode Apr s avoir obtenu le r sultat souhait dans Tune Master vous pouvez copier et coller l v nement de balayage dans la fen tre Instrument Setup Pour copier l v nement de balayage partir de Tune Master Cliquez avec le bouton droit de la souris dans la vue Define Scan D finir le balayage de l espace de travail Instrument Method Development D veloppement de la m thode de l instrument et aa s lectionnez Copy Scan Event Copier l v nement de balayage dans le menu de raccourcis Pour coller l v nement de balayage dans la fen tre Instrument Setup Cliquez avec le bouton droit de la souris
23. aide de la solution de r glage et d talonnage ce qui permet de cr er un spray de solution stable et garantit qu une quantit d ions suffisante est d tect e pour effectuer l talonnage du spectrom tre de masse L talonnage de l instrument s effectue alors automatiquement Effectuez la proc dure de r glage et d talonnage r guli rement tous les mois tous les trois mois pour garantir des performances optimales du spectrom tre de masse Pour r gler et talonner le spectrom tre de masse automatiquement en polarit ions positifs en mode ESI MS ou H ESI MS 1 Dans EZ Tune choisissez Setup gt System Tune and Calibration pour afficher la bo te de dialogue System Tune and Calibration Voir la Figure 28 Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ 35 3 Reglage et talonnage du spectrometre de masse R glage et talonnage automatiques en polarit ions positifs en mode ESI MS ou H ESI MS Figure 26 Bo te de dialogue System Tune and Calibration System Tune and Calibration Compound Polytyrosine 1 3 6 v 1820820 508 2080 997 3980 Y Open optimization graph of gt Save Report Help 2 Dans la bo te de dialogue System Tune and Calibration s lectionnez Polytyrosine 1 3 6 dans la liste Compound Les trois ions positifs de la polytyrosine utilis s pour le r glage et l talonnage automatiques de l instrument sont automatiquement s lectionn s Figure 28 3 Pour lancer
24. des chantillons Le dispositif d introduction d chantillon que vous utilisez pour le r glage et l talonnage de PESI ou H ESI est une pompe seringue Une pompe seringue permet de perfuser la solution de r glage et d talonnage directement dans la source ESI H ESI ou HESI II pendant des p riodes prolong es La seringue et la pompe seringue se trouvent sur le panneau avant du spectrom tre de masse TSQ Les raccordements de tubes pour l introduction des chantillons ESI MS et H ESI MS depuis la pompe seringue sont illustr s la Figure 15 et la Figure 16 Figure 15 Raccordements ESI MS pour l introduction d chantillons par perfusion directe l aide de la pompe seringue m Pompe seringue Jonction LC 24 Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ Thermo Scientific 3 Reglage et talonnage du spectrometre de masse Configuration en vue de l introduction d chantillons par perfusion directe Figure 16 Raccordements H ESI MS pour l introduction d chantillons par injection directe l aide de la pompe seringue FINNIGAN TSQ Quantum JITRA Pompe serin
25. dure d talonnage int gr e application afin d obtenir une largeur et une sym trie de pic optimales Pour effectuer un talonnage en haute r solution 1 l aide de Tune Master effectuez la proc dure standard automatique de r glage et d talonnage d crite dans le Chapitre 3 R glage et talonnage du spectrom tre de masse 2 Avec la pompe seringue contenant la solution de polytyrosine 1 3 6 cliquez sur le bouton System Tune and Calibration Workspace pour ouvrir l espace de travail Tuning and Calibration I Workspace 3 Cliquez sur Hi Res pour ouvrir la vue High Resolution Calibration dans l espace de travail 4 Cliquez sur Start 5 Surveillez la progression de la proc dure de r glage l aide de la vue Status La proc dure dure environ 30 minutes Remarque L talonnage Hi Res est un algorithme qui optimise automatiquement les tensions de d calage CC afin d obtenir une sym trie de pic optimale pour des r solutions inf rieures 0 5 LMH largeur mi hauteur Dans certains cas l algorithme ne parvient pas r soudre tous les probl mes Pour obtenir une sym trie de pic optimale vous devez alors terminer la proc dure de r glage puis analyser chaque r glage de l instrument dans l espace de travail Full Instrument Control Workspace Thermo Scientific Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ 105 B Etalonnage en masse pr cise Etalonnage en masse pr cise 6 Une fois la
26. glage et d talonnage de polytyrosine 111 R capitulatif des standards de polytyrosine fournis avec le kit pour pr parer une solution de r glage et d talonnage 110 Technique d introduction des chantillons 4 Tampon recommandation 5 TSQ Quantum Access MAX talonnage en masse lev e 97 97 TSQ Quantum Ultra EMR talonnage en masse lev e 97 97 TSQ Vantage EMR talonnage en masse lev e 97 97 Tube de transfert des ions capillaire Br lures mise en garde 12 15 Optimisation de la temp rature 6 6 43 R glage de la temp rature tableau 7 Tune Master Acquisition de donn es APCI 87 acquisition de donn es H ESI 60 Optimisation des r glages APCI 75 U Ultramark 1621 Masses des ions n gatifs tableau 102 Masses des ions positifs tableau 98 solution d talonnage en masse lev e pr paration 112 Spectre des ions n gatifs 102 Spectre des ions positifs 98 V Vanne de d rivation d injection Contournement 1 Mode d injection explication 1 Mode de d rivation explication 1 Raccordement pour injection automatique par boucle Figure 47 77 Proc dure 45 76 Raccordement pour injection par boucle manuelle Figure 59 89 Proc dure 58 87 Tableau 4 Vaporisateur APCI Br lures mise en garde 12 15 70 Optimisation de la temp rature 6 Temp rature tableau 7 vaporisateur APCI r glage de la temp rature pr sentation du 6 Thermo Scientific Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ 125
27. ne de balayage ionique Installation du c ne de balayage ionique Le c ne de balayage ionique est un c ne m tallique qui couvre le tube de transfert des ions Il canalise le gaz de balayage et l oriente vers l entr e du tube de transfert des ions Ceci permet d viter tout contaminant l entr e du tube de transfert des ions et augmente ainsi consid rablement le nombre d chantillons pouvant tre analys s sans perte d intensit du signal De plus si l entr e du tube de transfert d ions est propre les besoins d entretien de la source d ions sont moindres Pour installer le c ne de balayage ionique 1 Sortez le c ne de balayage ionique de son emballage Inspectez la et nettoyez la si n cessaire 2 Rep rez l emplacement de l orifice d arriv e du gaz de balayage dans le joint du c ne API L arriv e de gaz du c ne de balayage ionique se place sur cet orifice Voir la Figure 5 et la Figure 6 Figure 5 Orifice d arriv e du gaz de balayage dans le joint du c ne API de la cage du dispositif de chauffage du capillaire Orifice d arriv e du gaz de balayage 14 Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ Thermo Scientific 2 Configuration de la source d ions pour le r glage et l talonnage du spectrom tre de masse Installation du c ne de balayage ionique Figure 6 C nes de balayage ionique FAIMS et APPI a gauche et H ESI ESI et APCI droites pr sentant les arriv es de gaz Orifices d
28. s avoir correctement r gl et talonn ce dernier Pour optimiser automatiquement le spectrometre de masse en mode ESI MS MS ou H ESI MS MS pour une transition de reserpine de m z 609 281 m z 195 066 1 Dans la barre des t ches Windows s lectionnez D marrer gt Tous les programmes gt Thermo Instruments gt TSQ gt TSQ Tune pour ouvrir la fen tre EZ Tune 2 Choisissez Setup gt bouton Compound Optimization pour afficher la boite de dialogue Compound Optimization Voir la Figure 37 Guide de d marrage rapide de la gamme TSO Thermo Scientific 4 Optimisation du spectrom tre de masse l aide d un compos en mode ESI MS MS ou H ESI MS MS Optimisation automatique l aide d un compos en mode ESI MS MS ou H ESI MS MS Figure 37 Bo te de dialogue Compound Optimization illustration des r glages d optimisation l aide de la r serpine Compound Optimization Optimization Modes MS Only MS MS MS SEM Optimization Options _ Parent Mass Product Mass 4 609 2810 195 0661 Standard C Custom Adjust Parent Mass F Sample Introduction Status Manual Loop Injection C Syringe Pump Infusion AutoSampler Start Save Report Help 3 Definissez les r glages d optimisation afin de surveiller la transition de la r serpine de m z 609 281 a m z 195 066 a Dans la zone Optimization Modes s lectionnez SRM Vous pouvez ainsi optimiser une r action sp cifique Dans la zone
29. sent install e sur le spectrom tre de masse Remarque Avant d analyser les chantillons avec la source d ions ESI H ESI ou HESI II vous devez passer en mode ESI ou H ESI avec Quantum EZ Tune ou Tune Master Choisissez Setup Configuration gt Change Ion Source Changer la source d ions gt ESI ou Setup gt Change Ion Source gt HESI Maintenez le systeme LC MS en mode veille et passez au chapitre suivant R glage et talonnage du spectrom tre de masse en mode ESI MS ou H ESI MS 22 Guide de d marrage rapide de la gamme TSO Thermo Scientific ee I Reglage et etalonnage du spectrometre de masse Ce chapitre d crit les proc dures de r glage et d talonnage du spectrom tre de masse Ces proc dures utilisent une solution de r glage et d talonnage introduite directement dans l instrument un d bit lent Pour des performances optimales sur toute la gamme de masses du d tecteur vous devez r gler et talonner l instrument tous les mois ou au moins tous les trois mois Remarque En plus du r glage et de l talonnage d crits dans ce chapitre vous devez effectuer un talonnage en masse lev e pour les mod les TSQ Quantum Access TSQ Quantum Access MAX TSQ Quantum Ultra EMR et TSQ Vantage EMR et un talonnage en masse pr cise pour les TSQ Quantum Ultra AM et TSQ Vantage AM Le r glage et l talonnage du spectrom tre de masse requiert les actions suivantes d crites dans ce chapitre
30. talonnage une autre seringue et une autre ligne de transfert des chantillons que celles employ es pour les chantillons et la solution d optimisation Chargez une seringue Unimetrics propre de 500 ul avec 420 ul de solution chantillon de r serpine 2 pg ul TSQ Quantum Access et TSQ Quantum Access MAX 200 fg ul TSQ Quantum Ultra TSQ Quantum Ultra AM TSQ Quantum Ultra EMR ou de 100 fg ul TSQ Vantage TSQ Vantage AM et TSQ Vantage EMR ou de votre analyte Pour la proc dure de pr paration de la solution de r serpine voir la section Solutions de r serpine la page 114 Remarque Pour minimiser les risques de contamination crois e de l adaptateur veillez essuyer l extr mit de l aiguille avec un tissu propre et non pelucheux avant de la r ins rer dans l adaptateur de seringue Tout en maintenant le piston de la seringue en place ins rez avec pr caution l extr mit de l aiguille dans le tube Teflon de l adaptateur de seringue voir la Figure 32 Placez la seringue dans le porte seringue de la pompe seringue Appuyez sur le bouton noir du manche de la pompe seringue tout en appuyant sur le manche jusqu ce qu il entre en contact avec le piston Installez une ligne de transfert des chantillons entre la vanne de d rivation d injection et la jonction de mise la terre de la source d ions a Rassemblez les raccords n cessaires l installation de la ligne de transfert de
31. tre de masse Toutefois pour certaines applications il vous faudra peut tre optimiser plusieurs r glages du spectrom tre de masse Par exemple les r glages suivants ont une incidence sur les performances ESI ou H ESI et la qualit du signal Tension du spray e Pression du gaz gaine e D bit du gaz auxiliaire e Temp rature du capillaire tube de transfert des ions Tension de d calage de la lentille tubulaire TSQ Quantum Access TSQ Quantum Access MAX et TSQ Quantum Ultra e Amplitude RF de la lentille S TSQ Vantage En mode H ESI il est important de prendre en compte outre les r glages pr cit s la temp rature du vaporisateur Remarque Le TSQ peut effectuer une optimisation standard ou personnalis e Pendant l optimisation standard le TSQ optimise l nergie de collision la tension de modulation de la lentille tubulaire TSQ Quantum Access TSQ Quantum Access MAX et TSQ Quantum Ultra ou l amplitude rf de la lentille S TSQ Vantage et les tensions appliqu es l optique ionique jusqu ce que la transmission des ions de votre analyte soit optimale Pour une optimisation personnalis e vous pouvez choisir lequel des r glages ci dessus le TSQ optimise La configuration optimale de ces r glages d pend du d bit du solvant et de la structure de l analyte En g n ral vous devez modifier les r glages du spectrom tre de masse chaque fois que les conditions de d bit du solvant de l application
32. Cliquez sur Mass Calib et Both puis cliquez sur Start Guide de d marrage rapide de la gamme TSO 101 A Etalonnage en masse lev e Polarit ions positifs Polarit ions n gatifs 102 l Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ 23 24 Figure 78 S lection des ions positifs Ultramark dans l espace de travail System Tune and Calibration Workspace Quantum lune Master HESI System lune And Calibration Workspace Fie Workspace View Control Scan Parameters Display Setup Help lia A MANARE BILGE ma 1 FU _Sain Both a a Auto Tune amp Calib M Compound Ultramark Pos lons v 1 1421976 2 1821 952 E a Open optimization graph of Start Save Calib As Save Report Une fois l talonnage termin choisissez File gt Save Tune As pour ouvrir la bo te de dialogue Save Tune File Enregistrez le fichier d talonnage sous le nom Ions positifs Ultramark TSQTune m Cliquez sur Save Choisissez File gt Save Calibration As pour ouvrir la boite de dialogue Save Calibration File Enregistrez le fichier d talonnage sous le nom Ions positifs Ultramark TSQCalib Cliquez sur Save Pour effectuer un talonnage en masse lev e en polarit ions n gatifs D finissez le spectrom tre de masse sur la polarit ions n gatifs V rifiez que le bouton Polarity se trouve en polarit ions n gatifs Perfusez le calibrant Ultramark un d bit de 1 3 ul min
33. Dans la zone APCI Vaporizer Temperature entrez 350 R glez la pression du gaz gaine sur 30 unit s i Dans le tableau Device Display s lectionnez option Sheath Gas Pressure pour la mettre en surbrillance ii Dans la zone Device intitul e present Sheath Gas Pressure entrez 30 R glez le d bit du gaz auxiliaire sur 0 unit s i Dans le tableau Device Display s lectionnez l option Aux Valve Flow pour la mettre en surbrillance ii Dans la zone Aux Valve Flow entrez 0 pour r gler le d bit du gaz auxiliaire sur 0 unit s R glez la temp rature du capillaire de transfert des ions sur 200 C i Dans le tableau Device Display s lectionnez l option Capillary Temperature ii Dans la zone Capillary Temperature entrez 200 pour r gler la temp rature du capillaire sur 200 C R glez la fragmentation de la source ions d calage du skimmer sur 0 i Dans le tableau Device Display s lectionnez option Skimmer Offset ii Dans la zone Skimmer Offset entrez 0 pour r gler l nergie de collision sur 0 V R glez la pression du gaz de collision sur 1 5 mTorr i Dans le tableau Device Display s lectionnez l option Collision Pressure ii Dans la zone Collision Pressure entrez 1 5 pour r gler la pression de collision sur 1 5 mTorr R glez l nergie de collision sur 38 eV i Dans le tableau Device Display s lectionnez l option Collision Energy ii Dans la zone Collision Energy entrez 38 pour r gle
34. M X no file X no file 7 X no file 5 o X no file S X no file 2 50 40 z 30 20 10 0 00 05 10 15 20 25 30 35 40 45 50 Time min reserpne_01 1 RT 0 00 AV 1 NL 106E3 T c SRM ms2 609 28 42 00 193 57 196 57 1 100 195 2 5 8 Relative Abundance 7 rror 193 6 193 8 1940 194 2 194 4 194 6 194 8 195 0 195 2 mz Thermo Scientific 195 4 1956 1959 1960 1962 196 4 NUM Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ 95 es I Etalonnage en masse elevee Les instruments TSQ Quantum Access TSQ Quantum Access MAX TSQ Quantum Ultra EMR et TSQ Vantage EMR peuvent fonctionner des gammes de masses lev es m z 1 500 3 000 Pour obtenir une pr cision de masse et une force de signal optimales vous devez effectuer un talonnage en masse lev e sur ces instruments outre l talonnage automatique d crit au Chapitre 3 R glage et talonnage du spectrom tre de masse La proc dure d talonnage en masse lev e suppose Poptimisation des r glages des lentilles pour les pics de masse lev e un talonnage de masse et l enregistrement du fichier d talonnage pour la polytyrosine La proc dure utilise le calibrant Ultramark 1621 Pour effectuer l talonnage en masse lev e des instruments TSQ Quantum Access TSO Quantum Access MAX TSO Quantum Ultra EMR et TSQ Vantage EMR 1 l aide de Tune Master effectuez la proc dure standard automa
35. Optimization Options s lectionnez l option Standard pour r gler les dispositifs s lectionn s par d faut Dans cette configuration nergie de collision et le d calage de la lentille tubulaire TSQ Quantum Access TSQ Quantum Access MAX et TSQ Quantum Ultra ou Pamplitude RF de la lentille S lens TSQ Vantage sont les r glages par d faut optimis s Dans le tableau Optimization tapez 609 281 dans la colonne Parent Mass pour d finir la masse des ions parents de la r action SRM m z 609 281 Dans la colonne Product Mass tapez 195 066 pour d finir la masse des ions produits de la r action SRM sur m z 195 066 Remarque Vous devez s lectionner le mode d entr e utilis pour introduire l chantillon dans le spectrom tre de masse Cette proc dure utilise option Auto Loop Injection Dans la zone Sample Introduction s lectionnez l option Auto Loop Injection pour que le syst me TSQ injecte automatiquement la solution d optimisation 4 Cliquez sur Start pour lancer la proc dure de r glage automatique Remarque Si la seringue vient manquer d chantillon pendant la proc dure d optimisation l instrument met le r glage automatique en pause et affiche le message suivant Syringe out of sample Reload and click OK Si vous recevez ce message rechargez la seringue et cliquez sur OK pour continuer l optimisation Une fois l optimisation termin e le message Finish compound optimization s affiche dans la
36. R glages de l instrument pour un balayage SIM MS MS des ions parents Largeur de Temps de Masse Engrgig Largan MA D calage Utiliser un Masse des ions de de pic valeur de Traitement des balayage balayage Le du gt gaz m z u s produits collision 01 la lentille ee donn es 02 CID m 2 eV u tubulaire 182 082 6 000 0 20 0 70 Oui D sactiv 10 spectres en moy 0 8 136 076 20 x 508 208 6 000 0 20 0 70 Oui D sactiv 10 spectres en moy 0 8 La pression du gaz CID Q2 est r duite en mode de balayage MS MS des ions parents pour pr server la sym trie et la r solution du pic Tableau 18 R glages de l instrument pour un balayage SIM MS MS des ions produits Largeur de Temps de Masse Energie Largent RUE D calage Utiliser un Masse des ions de de pic valeur de Traitement des balayage balayage De du gaz m 2 u s parents collision 01 la lentille nos donn es 02 CID myz eV u tubulaire 136 076 6 000 0 20 ings ig 0 70 Oui D sactiv 10 spectres en moy 1 5 165 055 6 000 0 20 0 70 Oui D sactiv 10 spectres en moy 1 5 Tableau 19 R glages de l instrument pour un balayage SIM MS MS de perte de neutre Largeur de Temps de Masse de Largeur Engrats bel zul Decalage gt Utiliser un Masse perte de de valeur de Traitement des balayage balayage de pic eee 2 du gaz m 2 u s neutre u collision la lentille kimmer donn es 02 CID m z eV tubulaire 182 082 6 000 0 20 17 027 0 70 18 Oui D sactiv 10 spectres en moy 1
37. Range Scan Time 0 500 C FM LM Center Mass 1473 350 v Set Mass fom Entry Mode a an 5 GAMES Center Mass Scan width 5 000 akan Enea Fo Peak width Energy Ramp fa Qt 0 0 F AutoSIM J Skimmer Offset IV Data Processing M Q2CID Gas p Micro Scans aj Average fio E fi fi Chrom Filter Apply Abort OK Cancel Help 5 Cliquez sur le bouton Full Instrument Control pour afficher l espace de travail Full Instrument Control Workspace 6 Cliquez sur l onglet Q1 de la vue Device Thermo Scientific Guide de d marrage rapide de la gamme TSO 103 A Etalonnage en masse lev e 7 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 22 25 24 20 21 S lectionnez l option Tube Lens Offset puis cliquez sur Optimize Une fois la proc dure d optimisation termin e cliquez sur Accept S lectionnez l option Lens 1 2 Offset puis cliquez sur Optimize Une fois la proc dure d optimisation termin e cliquez sur Accept S lectionnez l option Lens 2 1 Offset puis cliquez sur Optimize Une fois la proc dure d optimisation termin e cliquez sur Accept Cliquez sur l onglet Q3 de la vue Device S lectionnez P option Tube Lens Offset puis cliquez sur Optimize Une fois la proc dure d optimisation termin e cliquez sur Accept S lectionnez option Lens 3 3 Offset puis cliquez sur Optimize Une fois la proc dure d optimisation termin e cl
38. Thermo Instruments TSQ System Programs C Cliquez deux fois sur TSQTune 2 Dans Tune Master cliquez sur le bouton On Standby de la barre d outils Control Scan Mode pour mettre le spectrom tre de masse sous tension e Si vous souhaitez acqu rir les donn es avec la m thode de r glage actuellement affich e allez P tape 4 e Si vous souhaitez acqu rir les donn es avec une autre m thode que celle affich e ouvrez d abord la m thode de r glage souhait e comme indiqu l tape 3 3 Ouvrez le fichier contenant les r glages de la r serpine ou ceux de l analyte utiliser a Cliquez sur le bouton Open File de la barre d outils File Display pour afficher la bo te de dialogue Open V rifiez que le dossier C Xcalibur methods affiche S lectionnez le fichier ESI_reserpine TSQTune ou celui correspondant la m thode de r glage voulue Cliquez sur Open pour ouvrir le fichier Tune Master t l charge les r glages sur le spectrom tre de masse 4 D marrez le flux de solvant a Cliquez sur le bouton AS LC Direct Control de la barre d outils Control Scan Mode pour afficher la vue Inlet Direct Control dans la partie sup rieure droite de l espace de travail Voir la Figure 44 Remarque La proc dure suivante part du principe que les bouteilles tiquet es A et B contiennent respectivement de l alcool isopropylique et de l eau de qualit LCMS Configurez la pompe MS Surveyor
39. arriv e du gaz MISE EN GARDE VEILLEZ A NE PAS VOUS BR LER La temp rature de fonctionnement du tube de transfert des ions est normalement comprise entre 200 et 400 C Laissez le toujours refroidir temp rature ambiante pendant environ 20 minutes avant de retirer ou de toucher le c ne de balayage ionique Veillez ne jamais toucher l extr mit du tube de transfert des ions lorsqu elle est expos e 3 Une fois que la temp rature du tube de transfert des ions est redescendue temp rature ambiante alignez avec soin l orifice d arriv e du gaz du c ne de balayage ionique sur l orifice d arrivee du gaz de balayage situ sur le support de la source d ions Appuyez sur le cone de balayage ionique fermement pour le mettre en place Le c ne de balayage ionique est pr sent correctement install sur le spectrom tre de masse Passez la section suivante Installation du bo tier de la source Ion Max ou Ion Max S Thermo Scientific Guide de d marrage rapide de la gamme TSO 15 2 Configuration de la source d ions pour le r glage et l talonnage du spectrom tre de masse Installation du bo tier de la source lon Max ou lon Max S Installation du boitier de la source lon Max ou lon Max S Pour r installer le bo tier de la source lon Max ou lon Max S MISE EN GARDE Veillez ce que les tiges de guidage soient parfaitement align es sur les orifices de guidage lorsque vous placez le bo tier de source d
40. bouton bleu Divert Inject Valve sur le spectrom tre de masse TSQ pour r tablir la vanne de d rivation d injection sur l tat Load Charge Remplissez la boucle avec la solution de r serpine b Appuyez de nouveau sur le bouton Divert Inject Valve pour injecter la solution de r serpine dans le flux de solvant LC Puis observez la vue du spectre c Patientez 1 minute avant de proc der l injection suivante Recommencez les tapes 14a 14c plusieurs fois Remarque Vous pouvez optimiser le r glage en le variant et en r p tant l tape 14 15 Pour terminer Pacquisition des donn es cliquez sur Stop dans la bo te de dialogue Acquire Data Un fichier de donn es de r serpine en mode de balayage SRM est d sormais stock sur le disque dur 16 Pour int grer le chromatogramme dans le fichier brut que vous venez d acqu rir l aide de la fen tre Xcalibur Qual Browser cliquez sur View Voir la Figure 73 Figure 73 Injections boucle de r serpine dans la vue Chromatogram haut et donn es en centroide a m z 195 066 dans la vue du spectre bas dans la fen tre Qual Browser FA Qual Browser reserpine_03 Raw Data File Edit View Display Grid Actions Tools Window Help 1X SEE S ae IR rt 8 8 JE foe lex z Sle CXcaliburidataveserpine_01 0807 01 04 56 24 PM 2 age on BIBH ETETA ne 027 101 191 396 NL Li RawFile 010807165624 1 07E7 X no file 90 ua X no file a
41. branchez pas le tuyau d vacuation de la source API ou tout autre tuyau d vacuation raccord au conteneur de r cup ration des liquides sur le m me syst me d extraction de vapeurs que celui utilis pour la pompe primaire Il existe un risque de contamination du syst me optique de l analyseur en cas de raccordement des tuyaux d vacuation de la source API et de la pompe primaire tuyau bleu au m me syst me d extraction des vapeurs Il convient d quiper le laboratoire d au moins deux syst mes d extraction vacuation Branchez le tuyau d vacuation bleu de la pompe primaire un syst me d vacuation d di Raccordez le tuyau d vacuation la source API un conteneur de r cup ration des liquides Assurez la ventilation de ce conteneur via un syst me d vacuation d di 3 Rebranchez le raccord d vacuation de la source d ions a Branchez le tuyau Tygon de 2 54 cm de diam tre int rieur r f rence 00301 22922 au tuyau d vacuation du bo tier de la source b Fixez l extr mit libre du tuyau un conteneur de r cup ration des liquides L id al est que le conteneur de r cup ration des liquides soit ventil par un syst me d extraction des vapeurs La source d ions Ion Max est d sormais install e correctement sur le spectrom tre de masse Passez la section Installation de la sonde APCI Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ Thermo Scientific 6 Configur
42. changent Le capillaire tube de transfert des ions est chauff pour maximiser la transmission des ions vers le spectrom tre de masse Vous r glez la temp rature du capillaire de sorte qu elle soit proportionnelle au d bit de la solution Se reporter aux directives du Tableau 2 H ESD ou du Tableau 4 ESI la page 7 Remarque V rifiez que le r glage et l talonnage du spectrom tre de masse TSQ ont t r alis s dans les trois mois pr c dant l optimisation des r glages pour le compos Si vous devez r gler et talonner le syst me suivez la proc dure d crite dans le Chapitre 3 R glage et talonnage du spectrom tre de masse Thermo Scientific Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ 43 4 Optimisation du spectrom tre de masse l aide d un compos en mode ESI MS MS ou H ESI MS MS Pour optimiser le spectrometre de masse l aide d un compos en mode ESI MS MS ou H ESI MS MS vous devez effectuer les op rations suivantes d crites dans ce chapitre 1 Configurez la pompe seringue et la vanne de d rivation d injection pour l injection automatique par boucle 2 Configurez le spectrom tre de masse pour un compos sp cifique partir de EZ Tune 3 Ex cutez la proc dure d optimisation automatique des r glages pour le compos choisi afin d affiner les r glages du spectrom tre de masse qui d pendent de ce compos 4 Enregistrez la nouvelle m thode de r glage Contenu e Confi
43. com Base de www thermokb com connaissances T l charger les mises jour et utilitaires logiciels l adresse mssupport thermo com Pour contacter le service client le afin d obtenir des informations sur la commande T l phone 800 532 4752 Fax 561 688 8731 Courriel us customer support analyze thermofisher com Site Web www thermo com ms Pour obtenir un exemplaire des manuels via Internet Consulter le site mssupport thermo com et cliquez sur Customer Manuals Manuels destin s aux clients dans la marge gauche de la fen tre Pour envoyer des commentaires ou suggestions concernant la documentation ou l aide e Cliquez sur le lien ci dessous pour r pondre une br ve enqu te sur ce document Merci par avance pour votre aide SURVEY e Envoyer un courrier lectronique au responsable des publications techniques l adresse techpubs Icms thermofisher com Guide de d marrage rapide de la gamme TSO xiii Introduction Thermo Scientific Les spectrom tres de masse TSQ appartiennent la gamme des spectrom tres de masse Thermo Scientific Les spectrom tres de masse TSQ sont des instruments triples quadrip les de haute performance Ils comprennent tous une pompe seringue une vanne de d rivation d injection une source API atmospheric pressure ionization ionisation pression atmosph rique et le syst me de donn es Xcalibur En g n ral les chantillons sont introduits l aide de l une des m thod
44. comme suit a Cliquez sur Save Tune As pour ouvrir la bo te de dialogue Save As b Dans la zone File Name entrez le nom du fichier de m thode de r glage tel que APCI_reserpine TSQTune ou le nom du compos utilis c Cliquez sur Save pour enregistrer le fichier de m thode de r glage Le spectrom tre de masse est d sormais optimis en mode APCI MS MS pour la r serpine ou le compos utilis Passez la section Chapitre 8 Acquisition de donn es APCI MS MS Thermo Scientific Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ 85 es 1 Acquisition de donn es APCI MS MS Ce chapitre d crit l acquisition de donn es l aide de Tune Master en mode APCI SRM L exp rience ci apr s utilise la r serpine mais vous pouvez suivre la m me proc dure quel que soit l analyte Contenu e Configuration en vue de l introduction d chantillons par injection boucle manuelle en mode APCI e Acquisition de donn es APCI MS MS en mode de balayage SRM Configuration en vue de l introduction d chantillons par injection boucle manuelle en mode APCI Suivez les proc dures ci apr s pour introduire des chantillons par injection boucle manuelle dans le flux de solvant partir d une LC Les raccordements de tubes destin s l introduction d chantillons APCI par injection boucle manuelle sont illustr s la Figure 65 Pour r aliser les raccordements de tubes en vue d une injection par boucle manuelle 1 Si ce
45. compos en mode APCI MS MS 3 Cliquez sur Start pour lancer la proc dure de r glage automatique Remarque Si la seringue vient manquer d chantillon pendant la proc dure d optimisation l instrument met le r glage automatique en pause et affiche le message suivant Syringe out of sample Reload and click OK Si vous recevez ce message rechargez la seringue et cliquez sur OK pour continuer l optimisation La zone Status de la bo te de dialogue Compound Optimization affiche le message Finish compound optimization lorsque l optimisation est termin e Voir la Figure 63 e Sila proc dure d optimisation s est r alis e sans erreur et que la courbe de dissociation du fragment m z 609 3 est une courbe de Gauss comme la Figure 64 ou une courbe lisse pente positive allez l tape 5 e Si des erreurs sont survenues pendant la proc dure d optimisation ou si la courbe de dissociation de lion m z 609 3 oscille pr sente plusieurs pics ou est excessivement bruiteuse allez l tape 4 Figure 63 Optimisation r ussie comme l indique la zone Status dans la vue l espace de travail Compound Optimization Workspace Status 08 11 30 17 Improvement 08 11 41 Optimizing collision energy at 1 0 mT or 08 11 41 Waiting for the collision gas to stabilize 08 11 41 Constructing the breakdown curve of ion 609 281 08 15 17 Collision Energy Optimization Results 08 15 17 Product lons m z Coll Energy v 08 15 17
46. dans la pompe seringue Pour pr parer la solution d talonnage Ultramark 1621 se reporter la section Solution d talonnage en masse lev e Ultramark 1621 la page 112 b Choisissez Setup gt Syringe Pump amp Sample Loop pour afficher la vue Syringe Pump and Sample Loop dans la partie sup rieure droite de l espace de travail c Entrez ou s lectionnez les r glages pertinents puis cliquez sur Apply pour lancer la perfusion En mode Full Scan le spectre doit ressembler celui illustr la Figure 74 Figure 74 Spectre d ions positifs Ultramark 1621 S 15961 FULL QIMS CT 106 A 10 1 4187 1005 1421 82 452185 1321 86 304 804 704 1621 81 1221 83 1721 84 a 1121 87 1821 87 Relative Abundance gt a oO oO EENEREENEEERNERRENEREN w fos 204 1021 91 1921 90 1146 09 1345 80 1789 81 1872 20 0 1000 1100 1200 1300 1400 1500 1600 1700 1800 1900 2000 mz Le Tableau 6 r pertorie les ions positifs Ultramark 1621 Tableau 6 Rapports masse charge des ions positifs Ultramark 1621 Feuille 1 de 2 lons positifs Ultramark m z 822 0162 922 0098 1022 0034 1121 9970 1221 9906 1321 9843 1421 9779 1521 9715 1621 9651 1721 9587 1821 9523 Guide de d marrage rapide de la gamme TSO Thermo Scientific A Etalonnage en masse lev e Tableau 6 Rapports masse charge des ions positifs Ultramark 1621 Feuille 2 de 2 lons
47. de r glage et d talonnage R f rence du Compos Formule Masse mol Fournisseur me L tyrosine CoH11NO3 181 19 Sigma T8566 Tyr Tyr Tyr C27H39N307 507 54 Sigma T2007 Tyr 6 C54H56N6013 997 07 Sigma T1780 Remarque Vous pouvez commander des produits chimiques standard directement aupres de Thermo Fisher Scientific consultez www FisherLCMS com ou contacter les fournisseurs suivants Sigma Chemical Company PO Box 14508 St Louis MO USA 63178 9916 800 325 3010 aux Etats Unis ou au Canada 1 314 771 3750 hors Etats Unis et Canada CS Bio Company 1300 Industrial Road San Carlos CA USA 94070 800 627 2461 aux Etats Unis ou au Canada 1 650 802 0880 hors Etats Unis et Canada Thermo Scientific Guide de d marrage rapide de la gamme TSO 111 C Pr paration de solutions Solution d talonnage en masse lev e Ultramark 1621 Solution d talonnage en masse lev e Ultramark 1621 Proc dez comme suit pour pr parer une solution d Ultramark 1621 pour talonner le TSQ Quantum Access TSQ Quantum Access MAX TSQ Quantum Ultra EMR ou TSQ Vantage EMR pour un fonctionnement en plage de masse lev e m z 1 500 m z 3 000 La proc dure d talonnage en masse lev e suppose l optimisation des r glages de lentilles les pics de masse lev e un talonnage de masse et l enregistrement du fichier d talonnage Voir la section talonnage en masse lev e la page 97 La solution d ta
48. de sorte quelle d livre une solution compos e de 50 d alcool isopropylique et de 50 d eau 400 ul min i Dans la zone Solvents Proportions and Flow Rate de la vue Inlet Direct Control tapez 50 dans la zone A pour indiquer une proportion de 50 de solvant A ii Dans la zone B tapez 50 pour indiquer une proportion de 50 de solvant B iii Dans la zone Flow Rate tapez 400 pour d finir un d bit de 400 ul min 60 Guide de d marrage rapide de la gamme TSO Thermo Scientific 5 Acquisition de donn es ESI SRM ou H ESI SRM Acquisition de donn es ESI MS MS ou H ESI MS MS en mode de balayage SRM Figure 44 Inlet Direct Control vue de la pompe d sactiv e Surveyor MS Pump Surveyor AS Direct Control Panel gt m EF ie Solvents Proportions and Flow Rate So 50 Se 0 0 B 50 50 D 0 0 Flow Rate l min 400 0 Pressure Status Pressure bar 0 0 SD 0 0 c Dans la zone du panneau de commande directe cliquez sur gt D marrer pour d marrer la pompe Surveyor MS 5 Cliquez sur le bouton Instrument Method Development Workspace de la barre d outils Control Scan Mode pour ouvrir l espace de travail Instrument Method Development Workspace Voir la Figure 45 Remarque Si vous avez r alis une optimisation l aide de r serpine comme indiqu au Chapitre 4 les r glages suivants sont s lectionn s par d faut lorsque vous basculez vers
49. des aiguilles d une montre b D branchez le c ble de 8 kV de la prise haute tension de l aiguille ESI 5 Pour la sonde H ESI d branchez le c ble de chauffage du vaporisateur sa prise situ e sur la sonde H ESI ou HESI I 6 D branchez le raccord vert du gaz auxiliaire de l orifice d arriv e correspondant A qui se trouve sur le tube de la sonde voir la Figure 49 7 D branchez le raccord bleu du gaz gaine de l orifice d arrivee correspondant S qui se trouve sur le tube de la sonde 8 Si une sonde ESI est install e retirez la jonction de mise a la terre en acier inoxydable raccord ZDV de la barre de mise la terre du bo tier de la source d ions MISE EN GARDE EVITEZ LES BR LURES Aux temp ratures de service le vaporisateur HESI II ou H ESI peut provoquer des br lures graves Le vaporisateur HESI II ou H ESI fonctionne g n ralement plus de 300 C Laissez toujours le vaporisateur chauffant refroidir temp rature ambiante pendant environ 20 min avant de d poser ou de toucher la sonde H ESI ou HESI II Figure 49 Bo tier de la source d ions lon Max avec sonde ESI Cable du vaporisateur Tube de transfert des chantillons ligne LC 8 kV Prise de verrouillage ESI Orifice d arriv e Orifice d arriv e du gaz d echantillon gaine raccord bleu Jonction de mise la terre Orifice d arriv e du gaz auxiliaire raccord vert Bouton de verrouillage de la so
50. fiole jaug e de 100 ml b Remplissez la fiole jaug e de 100 ml d une solution de m thanol contenant 1 d acide ac tique M langez le contenu 114 Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ Thermo Scientific Thermo Scientific C Pr paration de solutions Solutions de r serpine Transf rez la solution dans un flacon propre et sec et tiquetez le Stock de solution de reserpine 2 pg ul ou Solution d chantillon TSQ Quantum Access MAX 2 pg ul Pour pr parer une solution de r serpine 200 fg ul A l aide d une pipette volum trique transf rez 10 ml de solution m re de r serpine 2 pg ml dans une fiole jaug e de 100 ml Remplissez la fiole jaug e de 100 ml d une solution de m thanol contenant 1 d acide ac tique Melangez le contenu Transf rez la solution dans une bouteille propre et s che inscrivez sur l tiquette Solution dechantillen TSQ Quantum Ultra 200 felul Pour pr parer une solution de r serpine 100 fg pl A l aide d une pipette volum trique transf rez 5 ml de solution m re de r serpine 2 pg ml dans une fiole jaug e de 100 ml Remplissez la fiole jaug e de 100 ml d une solution de m thanol contenant 1 d acide ac tique Melangez le contenu Transf rez la solution dans une bouteille propre et s che inscrivez sur l tiquette Solution d chantillon TSQ Vantage 100 felul Guide de d marrage rapide de la gamme TSO 115
51. g n rent un fort courant d ions en polarit ions n gatifs Bien que le mode APCI produise en g n ral moins d ions n gatifs que d ions positifs la polarit ions n gatifs peut tre plus sp cifique car elle g n re souvent moins de bruit chimique que la polarit ions positifs Le rapport signal sur bruit peut donc tre meilleur en polarit ions n gatifs qu en polarit ions positifs Guide de d marrage rapide de la gamme TSO 3 1 Introduction Comment introduire les chantillons dans le spectrom tre de masse Comment introduire les chantillons dans le spectrometre de masse Il existe diff rentes m thodes d introduction des chantillons dans le spectrom tre de masse voir le Tableau 2 Tableau 2 Techniques d introduction des chantillons dans le spectrom tre de masse Technique d introduction Technique Figure des chantillons analytique Perfusion Perfusion directe avec R glage et talonnage automatiques ESI Figure 15 ESI Figure 16 directe pompe seringue ou H ESI H ESI Figure 17 Fi 1 Analyse ESI H ESI ou APCI d un ee analyte pur en solution Flux LC sans Injection automatique Optimisation automatique ESI H ESI Figure 30 ESI Figure 31 s paration par boucle dans le flux ou APCI avec le compos utilis H ESI Figure 32 chromatogra LC avec pompe Analyse EST ERSTE APCL d un Figure 33 Figure 55 APCI phique seringue analyte pur en solution Injection manuel
52. ines Le mode APCI donne de meilleurs r sultats pour les compos s non polaires tels que les st roides Les ions d chantillon peuvent transporter une ou plusieurs charges Le nombre de charges transport es par les ions d chantillon varie en fonction de la structure de l analyte utilis de la phase mobile et du mode d ionisation Utilisation des modes ESI et H ESI Les modes ESI et H ESI produisent en g n ral des spectres de masse compos s d ions charge unique Toutefois la charge d pend de la structure de l analyte et du solvant Lorsque des ions charges multiples sont produits les spectres de masse peuvent tre transform s math matiquement afin d indiquer les masses mol culaires de l chantillon Les modes ESI et H ESI transf rent les ions dans la solution en phase gazeuse Ils permettent d analyser nimporte quel chantillon qui ne convenait pas auparavant a une analyse de masse par exemple les compos s thermolabiles ou ceux 4 masse mol culaire lev e Les modes ESI et H ESI permettent d analyser nimporte quel compos polaire qui produit un ion pr form en solution L expression ion pr form peut s appliquer aux ions adduits Par exemple les glycols poly thyl niques peuvent tre analys s partir d une solution base d ac tate d ammonium du fait de la formation d adduits entre les ions NH pr sents dans la solution et les atomes d oxygene du polym re En mode ESI ou H ES
53. ions sur la source d ions Dans le cas contraire les connecteurs du bo tier pourraient tre endommag s 1 Alignez avec soin les deux orifices de guidage situ s l arri re du bo tier de la source d ions sur les tiges de guidage du spectrom tre de masse Appuyez d licatement le bo tier de la source contre son ensemble de montage Voir la Figure 7 et la Figure 8 Figure 7 Vue arri re du bo tier de la source d ions lon Max semblable au bo tier de la source lon Max S Leviers de F verrouillage ww oN Orifices de guidage Evacuation du bo tier 16 Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ Thermo Scientific 2 Configuration de la source d ions pour le r glage et l talonnage du spectrom tre de masse Installation du bo tier de la source lon Max ou lon Max S Figure 8 Ensemble de montage de la source d ions avec les orifices de guidage Tiges de guidage du bo tier de la source d ions ee 2 Faites pivoter les leviers de verrouillage du boitier de la source d ions de 90 degr s pour verrouiller le boitier de la source sur son ensemble de montage MISE EN GARDE Veillez ce que les solvants us s ne p n trent pas dans la source d ions ou le spectrom tre de masse Assurez vous que le liquide present dans le tuyau d vacuation puisse toujours s couler dans un conteneur de r cup ration des liquides 3 Rebranchez le tuyau d vacuation de la source d ions comme
54. la fen tre EZ Tune 2 Dans EZ Tune cliquez sur le bouton On Standby de la barre d outils Control Scan Mode pour Marche mettre le spectrom tre de masse sous tension 3 Le cas ch ant passez de la polarit ions positifs la polarit ions n gatifs Cliquez sur le bouton Yale Polarity de la barre d outils Control Scan Mode pour changer le mode de polarit des ions du Polarit ions spectrom tre de masse ositifs sits S pZ il e Si vous souhaitez optimiser la m thode de r glage actuellement affich e allez l tape 5 olarit ions n gatifs e Si vous souhaitez optimiser une autre m thode de r glage que celle affich e ouvrez d abord la m thode de r glage souhait e comme indiqu l tape 4 4 Ouvrez le fichier contenant les r glages de la r serpine ou ceux de l analyte utiliser a Cliquez sur le bouton Open File de la barre d outils File Display pour afficher la boite de dialogue Open b V rifiez que le dossier C Xcalibur methods s affiche S lectionnez un fichier de m thode de r glage c Cliquez sur Open pour ouvrir le fichier Tune Master t l charge les r glages sur le spectrom tre de masse 5 S lectionnez Display gt Compound Dependent Devices pour afficher la boite de dialogue Compound Dependent Devices 6 D finissez les valeurs des dispositifs d pendant du compos a V rifiez que la zone Spray Voltage est s lectionn e en surbrillance dans le tablea
55. la pr sence d un danger n appartenant pas aux cat gories suivantes Ce symbole figure galement sur l instrument Se reporter aux instructions contenues dans le manuel fourni avec l instrument pour obtenir des d tails sur le danger en question Chimique Des produits chimiques dangereux peuvent se trouver dans l instrument Porter des gants pour manipuler tous produits chimiques toxiques canc rig nes mutag nes ou corrosifs irritants Toujours utiliser des r cipients et des proc dures homologu s pour mettre au rebut les huiles usag es Haute temp rature Laisser refroidir les composants chauff s avant toute intervention Danger pour les yeux Les projections chimiques liquides ou solides peuvent tre dangereuses pour les yeux Porter des lunettes de protection lors de toute manipulation de produit chimique ou intervention sur l instrument Objet coupant Un objet coupant se trouve dans l instrument Manipuler avec pr caution Electrocution Linstrument pr sente un risque d lectrocution Manipuler avec pr caution Guide de d marrage rapide de la gamme TSO Thermo Scientific Preface Nous contacter Thermo Scientific Pour nous contacter Thermo Fisher Scientific et obtenir les informations dont vous avez besoin plusieurs solutions NL ww Pour contacter l assistance clientele T l phone 800 532 4752 Fax 561 688 8736 Courriel us techsupport analyze thermofisher
56. le r glage et l talonnage automatiques cliquez sur Start La bo te Status tat affiche des messages en temps r el concernant le r glage et l talonnage du syst me pour vous permettre de surveiller la progression de chaque sous proc dure A la fin d une sous proc dure EZ Tune indique les r sultats r ussite ou chec par exemple la fin de la proc dure compl te la bo te Status tat affiche un r capitulatif Voir la Figure 27 Figure 27 Etat du r glage et de l talonnage syst me System Tune and Calibration Compound Polytyrosine 1 3 6 182 0820 17 03 39 Recording resolution settings vs peak width of 997 508 2060 17 05 00 Successfully fit the resolution curve of 997 4 m z 17 05 00 Recording calibration settings vs peak width 997 3980 17 05 00 Final Calibration 17 05 05 Finished final resolution adjustment calibration and C 17 05 05 Finished Tuning and Calibration Q1 and 03 Status Y Open optimization graph of z Undo Save Report Help e Si des erreurs se produisent pendant le r glage et l talonnage automatiques allez l tape 4 e Sile r glage et l talonnage automatiques se terminent sans erreur allez l tape 5 4 Si des erreurs se produisent pendant le r glage et l talonnage automatiques restaurez les r glages pr c dents du spectrom tre de masse et ex cutez de nouveau le r glage et talonnage de l instrument en suivant les ta
57. le vaporisateur HESI II 68 Pression du gaz auxiliaire Optimisation 6 6 Optimisation remarque 34 R glage tableau 7 Pression du gaz gaine Optimisation 6 6 Optimisation remarque 31 34 R glage tableau 7 Proc dure Configuration de la pompe seringue pour l optimisation l aide d un compos 45 76 Configuration du mat riel pour l utilisation de la sonde APCI 67 Configuration du spectrom tre de masse pour l optimisation l aide d un compos 49 79 Configuration en vue du r glage et de l talonnage 27 Enregistrement d une m thode de r glage 55 85 talonnage en haute r solution 105 talonnage en masse pr cise 105 Thermo Scientific Index N Installation de l aiguille de Corona 70 Installation de la sonde ESI 18 Installation de la sonde H ESI 18 Installation du bo tier Ion Max 16 Installation du bo tier Ion Max S 16 Installation du c ne de balayage ionique 14 Masse lev e talonnage 97 Optimisation l aide d un compos 43 Optimisation l aide d un compos mode APCI MS 83 Optimisation l aide d un compos mode ESI MS 52 Pr paration d une solution d talonnage en masse pr cise 113 Pr paration d une solution de r glage et d talonnage de polytyrosine 110 R glage et talonnage automatiques 35 R glage et talonnage en polarit ions n gatifs 38 Retrait de la source APCI 11 Retrait du c ne de balayage ionique 70 proc dures configuration de la pompe ser
58. lectionnez l option Average puis entrez 10 dans la zone c Cliquez sur Apply puis sur OK 4 Suivez la solution de r glage et d talonnage en mode Q1 a Choisissez Display gt Zoom gt Normalize pour normaliser le spectre b Dans la vue du spectre observez le spectre de masse des ions charge unique de la solution de r glage et d talonnage Les ions sont les suivants e Monom re de la tyrosine m z 182 082 Trim re de la tyrosine m z 508 208 e Hexam re de la tyrosine m z 997 398 Observez les valeurs du signal de courant d ions normalis dans la vue du spectre Voir la Figure 25 Thermo Scientific Guide de d marrage rapide de la gamme TSO 33 3 Reglage et talonnage du spectrometre de masse Verification du fonctionnement en mode ESI MS et H ESI MS Figure 25 Spectre en temps r el de la solution de r glage et d talonnage de polytyrosine dans la vue du spectre S 78212 FULL QIMS CT 1 25 A 10 1 17e8 100 508 16 95 90 85 80 75 70 65 60 55 50 45 40 35 30 25 997 69 Relative Abundance 5 245 12 299 02 816 55 653 40 88962 95171 600 700 800 900 1000 miz 5 Tandis que la solution de r glage et d talonnage est d tect e et que les valeurs appliqu es fluctuent r pondez aux questions suivantes relatives au signal du courant d ions normalis e Les trois ions de la polytyrosine sont ils pr dominants e Les hauteurs des polym res de la tyrosine
59. les PEG r pertori s dans le Tableau 10 Tableau 10 PEG utilis s pour la pr paration de la solution m re Masse moyenne R f rence Thermo Fisher R f rence M BE eles A asse a ajouter par mole Scientific Aldrich 200 g 00301 07712 20 236 3 0 020 g 400 g 00301 07714 20 239 8 0 040 g 600 g 00301 07716 20 240 1 0 060 g 1 000 g 00301 07710 20 242 8 0 100 g 2 Ajoutez les PEG dans une fiole jaug e propre de 100 ml 3 Dissolvez les PEG dans une solution m thanol eau 50 50 pour un volume total de 100 ml 4 V rifiez que les PEG sont compl tement dissous 5 Inscrivez sur l tiquette de la bouteille Solution m re de PEG 1 000 pmol ml Thermo Scientific Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ 113 C Pr paration de solutions Solutions de r serpine Solution d etalonnage en masse pr cise Pour pr parer 100 ml de la solution m re de PEG ammonium de 50 pmol ul dans un m lange m thanol eau 50 50 et d ac tate d ammonium 5 mM 1 A l aide d une pipette d posez 5 ml de solution m re de PEG dans une fiole jaug e propre de 100 ml Ajoutez 0 04 g d ac tate d ammonium NH OAc Ajoutez la solution m thanol eau 50 50 pour un volume total de 100 ml A WO N M langez cette solution 5 Inscrivez sur l tiquette du flacon Solution d talonnage en masse pr cise 50 pmol ml puis placez ce dernier dans un r frig rateur jusqu ce que vous en ayez besoin Solutions de r serpine
60. nest pas d j fait ouvrez Tune Master a Cliquez sur D marrer avec le bouton droit de la souris et choisissez Explorer b Naviguez jusqu au dossier C Thermo Instruments TSQ System Programs c Cliquez deux fois sur TSQTune 2 Arr tez le flux de solvant vers la source APCI a Dans Tune Master cliquez sur le bouton AS LC Direct Control de la barre d outils Control Scan Mode pour afficher la vue Inlet Direct Control dans la partie sup rieure droite de l espace de travail Voir la Figure 66 Ba b Dans la zone du panneau de commande directe cliquez sur CO Arr ter pour arr ter le d bit de solvant Thermo Scientific Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ 87 8 Acquisition de donn es APCI MS MS Configuration en vue de l introduction d chantillons par injection boucle manuelle en mode APC Figure 65 Raccordements APCI MS pour l introduction des chantillons par boucle d injection manuelle dans le flux de solvant partir d une LC Depuis la LC Vers le conteneur de r cup ration des liquides Orifice d arriv e d chantillons Figure 66 La pompe se trouve dans la vue Inlet Direct Control Surve
61. positifs Ultramark m z 1921 9459 2021 9395 2121 9332 3 Dans Tune Master cliquez sur le bouton Instrument Method Development Workspace de la barre d outils Control Scan Mode pour ouvrir l espace de travail Instrument Method Development Workspace 4 Dans la vue Define Scan d finissez les r glages sur les valeurs indiqu es la Figure 75 puis cliquez sur Apply Figure 75 R glages dans la vue Define Scan de l talonnage en masse lev e en polarit ions positifs Scan Type Full Scan SIM SRM Scan Mode Ms QIMS Q3MS MS MS Parent Product Neutral Loss Scan Parameters r Scan Range Scan Time 0 500 _ FM LM Center Mass 1421 980 v Cet Mass 150 000 Entry Mode Center Mass Scan Width 5 000 Colson Era ia Peak Width Enemy Ram of Q1 0 70 F AutoSIM d Skimmer Offset IV Data Processing M Q2 CID Gas Micro Scans fo gt Bo 7 aj ha sj ia z e er za i Apply Abort OK Cancel Help Thermo Scientific Guide de d marrage rapide de la gamme TSO 99 A Etalonnage en masse lev e 5 Cliquez sur le bouton Full Instrument Control pour afficher l espace de travail Full Instrument Control Workspace 6 Cliquez sur l onglet Q1 de la vue Device Voir la Figure 76 Figure 76 Vue Device de l espace de travail Full Instrument Control Workspace A P Ki Q at as me lon Source HESI X Spray Voltage T X Vaporizer Temperature T
62. pour le r glage et l talonnage du spectrom tre de masse Retrait de la sonde APCI Retrait de la sonde APCI Thermo Scientific Cette section d crit le retrait de la sonde APCI Remarque Les proc dures suivantes supposent une connaissance de l instrument et du syst me de donn es Xcalibur Pour plus d informations se reporter l aide en ligne TSQ et aux manuels Guide de connexion de la gamme TSQ Manuel du mat riel de la source API Ion MAX et Ion MAX S et Manuel du mat riel de la gamme TSQ Pour retirer la sonde APCI 1 D branchez le cable du vaporisateur de la prise correspondante sur la sonde APCI Voir la Figure 2 Figure 2 lon Max avec sonde APCI install e C ble de chauffage du vaporisateur C ble 8 kV Gaz gaine 29 6e ae raccord bleu oo Gaz auxiliaire raccord vert Prise du c ble de 60 chauffage du ae vaporisateur 60 66 fore Prise haute tension de l aiguille Corona Tube de transfert d chantillon 0000400 0000000 0000000 00000 CAUTION HOT SURFACE Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ 11 2 Configuration de la source d ions pour le r glage et l talonnage du spectrom tre de masse Retrait de la sonde APCI 2 Si vous envisagez d utiliser le mode ESI branchez le c ble du vaporisateur la prise de verrouillage ESI sur le bo tier de la source ions Voir la Figure 3 Figure 3 Bo tier lo
63. sidu Ce flacon est fourni avec le kit des accessoires La deuxi me proc dure fournit des instructions de pr paration de la solution de r glage et d talonnage partir de votre stock de produits chimiques secs Le kit des accessoires contient galement un flacon de 20 ml de polytyrosine 1 3 6 r f rence 00301 22924 en solution aucune dilution n est n cessaire Les concentrations des composants de cette solution conviennent une injection imm diate dans le spectrom tre de masse Le Tableau 8 r capitule les standards de polytyrosine fournis avec le kit des accessoires Tableau 8 Standards de polytyrosine fournis avec le kit des accessoires Description du standard Reference Thermo Fisher Reference C S Bio sur l tiquette Scientific Company Polytyrosine sous forme liquide 00301 22924 CS0272L Polytyrosine sous forme solide 00301 22925 CS0272S Pr paration d une solution de r glage et d talonnage de polytyrosine 1 3 6 a l aide d un produit solide premelange Pour reconstituer une solution de r glage et d talonnage de polytyrosine 1 3 6 partir d un flacon de polytyrosine solide 1 Prenez le flacon de produits chimiques pr m lang s de polytyrosine r f rence 00301 22925 dans le kit des accessoires 2 Dissolvez le r sidu de polytyrosine dans le flacon pour un volume total de 20 ml dans une solution m thanol eau 50 50 0 1 d acide formique Vous obtenez une solution de
64. suit MISE EN GARDE Ne branchez pas le tuyau d vacuation de la source API ou tout autre tuyau d vacuation raccord au conteneur de r cup ration des liquides sur le m me syst me d extraction de vapeurs que celui utilis pour la pompe primaire Il existe un risque de contamination du syst me optique de l analyseur en cas de raccordement des tuyaux d vacuation de la source API et de la pompe primaire tuyau bleu au m me syst me d extraction des vapeurs Il convient d quiper le laboratoire d au moins deux syst mes d extraction vacuation Branchez le tuyau d vacuation bleu de la pompe primaire un syst me d vacuation d di Raccordez le tuyau d vacuation la source API un conteneur de r cup ration des liquides Assurez la ventilation de ce conteneur via un syst me d vacuation d di a Branchez le tuyau Tygon de 2 54 cm de diam tre int rieur r f rence 00301 22922 au tuyau d vacuation du bo tier de la source b Fixez l extr mit libre du tuyau un syst me d vacuation d di L id al est que le systeme d vacuation soit ventil par un syst me d extraction des vapeurs La bo tier Ion Max ou Ion Max S est pr sent correctement install sur le spectrom tre de masse Passez la section suivante Installation de la sonde ESI H ESI ou HESI II Thermo Scientific Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ 17 2 Configuration de la source d ions pour le
65. un compos en mode ESI MS MS ou H ESI MS MS Configuration en vue de l introduction d chantillons par boucle d injection automatique en mode ESI ou H ESI Figure 31 Raccordements H ESI MS pour l introduction des chantillons par boucle d injection automatique dans le flux de solvant partir d une LC Cr FINNIGAN TSA Quantum DITRA Depuis la LC Vers le conteneur de r cup ration des liquides Jonction de mise a la terre Jonction LC Remarque Vous pouvez utiliser l chantillon de r serpine d crit la section Pr paration de solutions la page 109 ou le compos utilis dans la pr sente section Les proc dures suivantes supposent une connaissance de l instrument TSQ et de Tune Master Pour plus d informations se reporter l aide en ligne TSQ et aux manuels Guide de connexion de la gamme TSQ et Manuel du mat riel de la gamme TSQ Pour effectuer les raccordements en vue de l introduction des chantillons de la pompe seringue dans le flux de solvant partir d une LC 1 Retirez la seringue du porte seringue a Soulevez le manche de la seringue tout e
66. utilisez pour la solution d talonnage en masse pr cise une autre seringue et une autre ligne de transfert des chantillons que celles employ es pour les chantillons et les solutions de r glage et d talonnage Faites passer une faible quantit de solution m thanol eau 50 50 dans les instruments TSQ Quantum Ultra AM ou TSQ Vantage AM Pr parez la solution d talonnage en masse pr cise comme indiqu la section Solution d etalonnage en masse pr cise la page 113 Remplissez une seringue Unimetrics de 500 pl propre de solution d talonnage en masse pr cise Commencez perfuser la solution d talonnage en masse pr cise Patientez plusieurs minutes que le flux et le spray se stabilisent Il vous faudra peut tre effectuer des ajustements manuels aux masses lev es et faibles 1 2 124 et m z 1 268 pour obtenir un spray stable et un signal ad quat Cliquez sur le bouton System Tune and Calibration pour afficher l espace de travail System Tune and Calibration Workspace Voir la Figure 82 Pour afficher la vue AM Calibration dans l espace de travail cliquez sur AM Calib Pour s lectionner l talonnage de laxe de masse pour Q1 et Q3 cliquez sur Both Si la liste Ammoniated PEG ne s affiche pas dans le tableau Calibration Mass importez la Dans la vue Accurate Mass Calibration cliquez sur Start pour lancer l talonnage en masse pr cise Figure 82 Vue AM Calibration dans l espace de travai
67. zone Flow Rate entrez 2 00 pour d finir un d bit de 2 00 pL min Pour obtenir une intensit et une stabilit de faisceau d ions optimale vous pouvez r gler le d bit entre 1 00 et 10 00 p L min 28 Guide de d marrage rapide de la gamme TSO Thermo Scientific 3 Reglage et talonnage du spectrometre de masse Configuration pour le r glage et l talonnage automatiques Figure 21 Bo te de dialogue Syringe Pump and Sample Loop Syringe Pump amp Sample Loop Z Syringe Flow Control C o Flow Rate uL min 15 00 On Syringe Type Syringe Size Hamilton Volume pL 500 Unimetrics C Other Syringe ID mm Sample Loop Sample Loop Size pL 0 Apply Cancel Help e Si vous utilisez une seringue Unimetrics ou Hamilton allez l tape 5d Pour tous les autres types de seringue allez l tape 5f d Dans la zone Syringe Type s lectionnez l option qui convient Unimetrics ou Hamilton e Dans la zone Syringe Size s lectionnez 500 ou le volume de la seringue dans la liste Volume pour indiquer que le volume de la seringue est de 500 pl Lorsque vous indiquez le type et le volume de la seringue Tune Master d finit automatiquement l ID de seringue ad quate Allez l tape 5g f Si vous n utilisez pas de seringue Unimetrics ou Hamilton indiquez manuellement le diam tre int rieur de la seringue comme suit i Dans la zone Syringe Type s lectionnez l option
68. 00 View Total lon Current Plot ZZ Mass 609 gt 195 0 points 1 30 2004 11 26 PM Guide de d marrage rapide de la gamme TSO 63 5 Acquisition de donn es ESI SRM ou H ESI SRM Acquisition de donn es ESI MS MS ou H ESI MS MS en mode de balayage SRM 9 Charge 10 D tecteur Injection R cup ration des liquides 11 12 13 14 15 Indiquez les r glages d acquisition a Dans la vue Acquire Data situ e dans la partie sup rieure droite de l espace de travail entrez le nom et le chemin de fichier C Xcalibur Data reserpine_01 raw dans la zone Filename Si vous le souhaitez cliquez sur le bouton Parcourir 4 pour s lectionner un autre dossier b Dans la zone Sample Name entrez reserpine comme ID d chantillon Si vous n utilisez pas de r serpine tapez le nom de l analyte utilis c Dans la zone Comment tapez un commentaire sur l exp rience Par exemple tapez SRM ESI 10 pg boucle pour indiquer le mode de balayage le mode d ionisation la quantit d chantillons et la m thode d introduction des chantillons Xcalibur inclut le commentaire sur les copies imprim es des donn es d Dans la zone Acquire Time s lectionnez l option Continuously pour indiquer que l acquisition des donn es est continue jusqu son arr t V rifiez que l tat du bouton Divert Inject Valve de la barre d outils Control Scan Mode est Load Charge Si l tat du bou
69. 195 07 38 08 15 17 Finish compound optimization 84 Guide de d marrage rapide de la gamme TSO Thermo Scientific 7 Optimisation du spectrom tre de masse en mode APCI MS MS Optimisation automatique l aide d un compos en mode APCI MS MS Figure 64 Courbe de dissociation de la r serpine indiquant l intensit relative des ions produits m z 195 066 par rapport l nergie de collision Breakdown Curve of lon 609 3 m z Intensity 0 00e 00 Product lons Coll Energy Pressure 1 5 mTorr 195 1 m z 38 v 17 Q Q gt s Q a T T T 30 40 Collision Energy 4 Si des erreurs sont survenues pendant la proc dure d optimisation restaurez les r glages pr c dents des dispositifs d pendant du compos comme suit Cliquez sur Undo pour restaurer les r glages pr c dents des dispositifs b Cliquez sur Accept pour recharger les r glages pr c dents des dispositifs sur le spectrom tre de masse c Analysez et corrigez les probl mes l origine de l chec de optimisation d Allez l etape 3 de cette proc dure et relancez la proc dure d optimisation 5 Cliquez sur Accept pour accepter les r sultats de optimisation Remarque Si les r glages de la source d ions ont t modifi s enregistrez la m thode de r glage pendant que le spectrom tre de masse est sous tension dans le cas contraire ces r glages seront perdus 6 Enregistrez le fichier de m thode de r glage
70. 4 ng pl de tyr 12 ng pl de tyr et 24 ng ul de tyr 3 Inscrivez sur P tiquette du flacon Solution de r glage et d talonnage de polytyrosine 1 3 6 puis placez ce dernier dans un r frig rateur jusqu ce que vous en ayez besoin 110 Guide de d marrage rapide de la gamme TSO C Pr paration de solutions Solution de r glage et d talonnage de polytyrosine 1 3 6 Pr paration d une solution de r glage et d talonnage de polytyrosine 1 3 6 l aide de produits chimiques secs de votre stock NL Pour pr parer une solution de r glage et d talonnage de 250 ml de polytyrosine 1 3 6 partir de votre stock de produits chimiques 1 Pesez 1 mg de L tyrosine 3 mg de tyr et 6 mg de tyr et introduisez les dans un flacon propre et sec de 250 ml 2 Dissolvez le m lange de polytyrosine dans une solution m thanol eau 50 50 0 1 d acide formique pour un volume total de 250 ml Vous obtenez une solution de 4 ng ul de tyr 12 ng ul de tyr 3 et 24 ng pl de tyr 3 Transf rez la solution dans un flacon propre portant une tiquette Solution de r glage et d talonnage de polytyrosine 1 3 6 puis placez la dans un r frig rateur jusqu ce que vous en ayez besoin Le Tableau 9 r capitule les compos s utilis s dans la pr paration d une solution de r glage et d etalonnage Tableau 9 R capitulatif des produits du stock utilis s pour la pr paration de la solution
71. 5 Thermo Scientific Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ 119 Tableau 20 R glages de l instrument pour un balayage SRM MS MS Largeur de Largeur Duel Masse Masse Energie Largeur de Temps de a a valeur de g D calage Utiliser pic de pic des ions des ions de Traitement des balayage balayage la 5 ee du un gaz 01 03 parents produits collision donnees u s u u lentille Una md eV skimmer 02 CID tubulaire 6 000 0 20 0 70 0 70 Oui 182 082 136 076 18 D sactiv 10 spectres en moy 1 5 6 000 0 20 0 70 0 70 Oui 182 082 165 055 10 D sactiv 10 spectres en moy 1 5 6 000 0 20 0 70 0 70 Oui 508 208 136 076 38 D sactiv 10 spectres en moy 1 5 6 000 0 20 0 70 0 70 Oui 508 208 299 140 24 D sactiv 10 spectres en moy 1 5 6 000 0 20 0 70 0 70 Oui 997 398 136 076 60 D sactiv 10 spectres en moy 1 5 6 000 0 20 0 70 0 70 Oui 997 398 299 140 54 D sactiv 10 spectres en moy 1 5 120 Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ Thermo Scientific es 1 Index A Acquisition de donn es Tune Master APCI 87 acquisition de donn es Tune Master H ESI 60 Aiguille de Corona Blessures mise en garde 70 Installation 70 Retrait 13 APCI MS Directives tableau 7 Optimisation l aide d un compos 79 Optimisation l aide de la r serpine exemple 79 Utilisation explication 3 Attention xii C C S Bio Company achat de produits chimiques remarque 111 Cage du dispositif de chauffage du c
72. CEM a t valu e par l organisme de certification TUV Rheinland of North America Inc EN 55011 1998 Al 1999 A2 2002 EN 61000 4 4 1995 Al 2000 A2 2001 EN 61000 3 2 2000 EN 61000 4 5 2001 EN 61000 3 3 1995 Al 2001 EN 61000 4 6 2003 EN 61000 4 2 2001 EN 61000 4 11 2001 EN 61000 4 3 2002 EN 61326 1997 Al 1998 A2 2001 A3 2003 FCC Classe A CFR 47 Partie 15 2005 CISPR 11 1999 Al 1999 A2 2002 Conformit aux normes de s curit relatives aux basses tensions Cet appareil est conforme la Directive relative aux basses tensions EN 61010 1 2001 et la norme harmonis e EN 61010 1 2001 D claration de conformit FCC CE PRODUIT EST CONFORME AUX EXIGENCES DE LA SECTION 15 DES R GLES DE LA FCC SON UTILISATION EST SOUMISE AUX DEUX CONDITIONS SUIVANTES 1 CE PRODUIT NE DOIT PAS PRODUIRE D INTERFERENCES NUISIBLES ET 2 DOIT ACCEPTER TOUTES LES INTERFERENCES RE UES Y COMPRIS CELLES QUI RISQUENT D OCCASIONNER UN FONCTIONNEMENT IND SIRABLE ATTENTION Il est indispensable de lire et de comprendre les diff rentes notes de mise en garde signes et symboles contenus dans ce manuel et associ s l usage et au fonctionnement sans danger de ce produit avant toute utilisation Thermo SCIENTIFIC Mention relative au soulevement et a la manipulation des instruments Thermo Scientific Pour votre s curit et conform ment aux r glementations international
73. Collision Energy est d environ 38 c est dire la valeur entr e avant l optimisation Loptimisation automatique risque d avoir modifi la valeur de l nergie de collision iv Dans la zone Q1 Peak Width entrez 0 70 pour d finir la largeur de pic sur 0 70 u v Dans la zone Q3 Peak Width entrez 0 70 pour d finir la largeur de pic sur 0 70 u d Cochez la case Use Tuned Tube Lens Value e V rifiez que la case Skimmer Offset est d s lectionn e 62 Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ Thermo Scientific 5 Acquisition de donn es ESI SRM ou H ESI SRM Acquisition de donn es ESI MS MS ou H ESI MS MS en mode de balayage SRM Indiquez l utilisation d un filtre de chromatographie de 3 s pour l acquisition des donn es i Cochez la case Data Processing pour activer la zone Data Processing et ses options ii S lectionnez l option Chrom Filter pour indiquer l utilisation d un filtre de chromatographie iii Dans la zone Data Processing entrez la valeur 3 pour indiquer l utilisation d un filtre de chromatographie de 3 s Definissez les r glages de gaz de collision i Cochez la case Q2 CID Gas pour indiquer l utilisation d un gaz de collision ii Dans la zone Q2 CID Gas entrez 1 5 pour d finir le gaz de collision sur 1 5 mTorr h V rifiez que la zone Micro Scans est d finie sur 1 7 Cliquez sur Apply pour appliquer les r glages de balayage au spectrom tre de masse 8 C
74. D marrez le flux de solvant a Choisissez Setup gt bouton Inlet Direct Control pour ouvrir la boite de dialogue Inlet Direct Control Voir la Figure 61 Figure 61 La pompe est d sactiv e dans la bo te de dialogue Inlet Direct Control Surveyor MS Pump Surveyor AS Direct Control Panel gt me ie Solvents Proportions and Flow Rate 50 0 0 B 50 50 D 0 0 Flow Rate ul min 400 0 Pressure Status Pressure bar 0 0 SD 0 0 Remarque La proc dure suivante part du principe que les bouteilles tiquet es A et B contiennent respectivement de l alcool isopropylique et de l eau de qualit LCMS b Configurez la pompe MS Surveyor de sorte qu elle fournisse une solution compos e de 50 d alcool isopropylique et de 50 d eau 400 ul min i Dans la zone Solvents Proportions and Flow Rate de la bo te de dialogue Inlet Direct Control tapez 50 dans la zone A pour indiquer une proportion de 50 de solvant A ii Dans la zone B tapez 50 pour indiquer une proportion de 50 de solvant B iii Dans la zone Flow Rate tapez 400 pour d finir un d bit de 400 ul min c Dans la zone du panneau de commande directe cliquez sur gt D marrer pour d marrer la pompe Surveyor MS Le syst me est d sormais configur de sorte introduire automatiquement la r serpine dans la source d ions pour optimiser le spectrom tre de masse Vous allez ensuite o
75. I Pinstrument TSQ permet d analyser des compos s dont les masses mol culaires sont sup rieures 100000 u en raison de leurs charges multiples Les modes ESI et H ESI s av rent particuli rement utiles pour la caract risation de masses de compos s polaires notamment de polym res biologiques par exemple des prot ines des peptides des glycoprot ines et des nucl otides de produits pharmaceutiques et m tabolites associ s et de polym res industriels Les modes ESI et H ESI peuvent tre utilis s avec les polarit s ions positifs ou ions n gatifs La polarit des ions pr form s en solution d termine le mode de polarit des ions les mol cules acides produisent des ions n gatifs dans une solution pH lev tandis que les mol cules basiques forment des ions positifs dans une solution pH faible Une aiguille d lectrospray charge positive g n re des ions positifs et une aiguille charge n gative g n re des ions n gatifs Vous pouvez modifier le d bit du LC vers le spectrom tre de masse il peut tre compris entre 1 ul min ou moins utilisez une source d ions par nanospray et 1 000 ul min utilisez les sources ESI et H ESI standard Voir le Tableau 4 Dans le cas de prot ines ou de peptides de masse mol culaire sup rieure le spectre de masse obtenu comprend g n ralement une s rie de pics correspondant une distribution d ions analytes charges multiples La taille des gouttelettes la c
76. I MS 6 Enregistrez le fichier de m thode de r glage a Dans la zone File Name entrez le nom du fichier de m thode de r glage par exemple R glage ESI polytyrosine TSQTune b Cliquez sur Save pour enregistrer le fichier de m thode de r glage Le spectrom tre de masse est d sormais r gl et talonn en polarit ions positifs Le r glage et l talonnage en polarit ions n gatifs vous offre deux possibilit s e R glage et talonnage automatiques en polarit ions n gatifs si vous envisagez d effectuer une analyse de haute sensibilit en polarit ions n gatifs allez la section suivante R glage et talonnage automatiques en polarit ions n gatifs en mode ESI MS et H ESI MS Copie du fichier d talonnage en polarit ions positifs dans le mode ions n gatifs choisissez Scan Parameters gt Copy Tune Values pour copier le fichier d talonnage en polarit ions positifs dans le mode ions n gatifs Tous les r glages d pendant de la polarit dans le fichier d talonnage actif voient leur signe modifi Les r glages ind pendants de la polarit demeurent inchang s Ces r glages ne sont pas conserv s si vous n enregistrez pas le fichier R glage et talonnage automatiques en polarit ions n gatifs en mode ESI MS et H ESI MS 38 Une fois instrument r gl et talonn en polarit ions positifs vous avez la possibilit de le r gler et de P talonner en polarit ions n
77. L analyse par perfusion directe ou injection de flux ne permet pas la s paration chromatographique des compos s de l chantillon avant que celui ci ne soit parvenu au spectrom tre de masse Dans ces deux cas les donn es g n r es par le spectrom tre de masse sont ensuite stock es et trait es par le syst me de donn es Xcalibur La pr sente introduction r pond aux questions suivantes e Parmi ces trois modes ESI H ESI et APCI lequel convient le mieux l analyse des chantillons e Comment introduire les chantillons dans le spectrom tre de masse e Quels types de tampon utiliser e Comment configurer le spectrom tre de masse pour plusieurs d bits LC Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ 1 1 Introduction Parmi ces trois modes ESI H ESI et APCI lequel convient le mieux l analyse des chantillons Parmi ces trois modes ESI H ESI et APCI lequel convient le mieux l analyse des chantillons Vous pouvez utiliser le spectrom tre de masse dans l un des trois modes d ionisation pression atmosph rique suivants e ESI Electrospray ionization ionisation par lectrospray e H ESI Heated Electrospray ionization ionisation par lectrospray chaud e APCI Atmospheric pressure chemical ionization ionisation chimique pression atmosph rique En g n ral les modes ESI et H ESI donnent de meilleurs r sultats pour les compos s polaires tels que les amines les peptides et les prot
78. MS en mode de balayage SRM ve ee ee Dee 60 Configuration de la source d ions pour l acquisition de donn es en mode APCI MS MS 2 a a a a Maa een 67 D pose de la sonde ESI H ESI ou HESIIL u 322 2 1 1200 sks 67 D pose du bo tier de la source d ions Ion Max ou Ion Max S 69 Retrait du c ne de balayage ionique an Reh 70 Installation de l aiguille de d charge de Corona 70 Installation du bo tier de la source Ion Max ou Ion Max S 71 Installation de la sonde APCI ss rer aa 73 Optimisation du spectrometre de masse en mode APCI MS MS 75 Configuration en vue de l introduction d chantillons par boucle d injection automatique en mode APG 4 i iu se edel owed Res 76 Configuration de l optimisation en mode APCI MS MS 79 Optimisation automatique l aide d un compos en mode APCI MS MS 83 Acquisition de donn es APCI MS MS 87 Configuration en vue de l introduction d chantillons par injection boucle manuelle en mode APCI a3 Bir 87 Acquisition de donn es APCI MS MS en mode de balayage SRM 90 talonnage en masse lev e cesser 97 Etalonnage en masse pr cise 105 talonnage en haute roland 105 talonnage en masse pr cise fasta seth saad ae ea see 106 Pr paration de solutions
79. Other pour indiquer l utilisation d une seringue autre qu une seringue Unimetrics ou Hamilton et activer la zone Syringe ID situ e dans la zone Syringe Size ii Dans la zone Syringe Size s lectionnez le volume correspondant la seringue dans la liste Volume iii Dans la zone Syringe ID entrez le diam tre int rieur de la seringue g Pour appliquer ces r glages et d marrer la pompe seringue cliquez sur Apply Le flux de solution de r glage et d talonnage de polytyrosine 1 3 6 s coule dans la source d ions Le spectrom tre de masse est d sormais configur pour le r glage et l talonnage Pour cr er un faisceau d ions stable allez la section suivante Cr ation d un faisceau d ions stable Thermo Scientific Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ 29 3 Reglage et talonnage du spectrometre de masse Cr ation d un faisceau d ions stable Cr ation d un faisceau d ions stable Avant d entamer la proc dure de r glage et d talonnage vous devez cr er un faisceau d ions stable Lintensite et la stabilit du faisceau d ions d pendent en grande partie du fonctionnement de la source d ions Pour optimiser l intensit et la stabilit du faisceau d ions r glez la pression du gaz gaine lt Pour cr er un faisceau d ions stable 1 D finissez les r glages de balayage afin de pr parer l analyse de l intensit et de la stabilit du faisceau d ions voir la Figure 22
80. S la zone du panneau de commande directe cliquez sur gt D marrer Thermo Scientific Guide de d marrage rapide de la gamme TSO 51 4 Optimisation du spectrometre de masse l aide d un compos en mode ESI MS MS ou H ESI MS MS Optimisation automatique l aide d un compos en mode ESI MS MS ou H ESI MS MS Figure 36 La pompe est d sactiv e dans la boite de dialogue Inlet Direct Control Surveyor MS Pump Surveyor AS Direct Control Panel gt me Solvents Proportions and Flow Rate a 50 50 cj 0 0 B 50 50 D 0 0 Flow Rate l min 400 0 Pressure Status Pressure bar 0 0 SD 0 0 Le syst me est d sormais configur de sorte introduire automatiquement la r serpine dans la source d ions pour optimiser le spectrometre de masse Vous allez ensuite optimiser les dispositifs d pendant du compos en mode ESI MS MS ou H ESI MS MS Allez la section suivante Optimisation automatique l aide d un compos en mode ESI MS MS ou H ESI MS MS Optimisation automatique l aide d un compos en mode ESI MS MS ou H ESI MS MS Pour maximiser la transmission d ions du compos optimisez le spectrom tre de masse optimisation affine les r glages d pendant du compos tels que la tension du spray la temp rature du capillaire et le d calage de la lentille tubulaire Thermo Fisher Scientific vous recommande d optimiser le spectrom tre de masse uniquement apr
81. Scan Type Full Scan SIM SRM dre een FT TT 4 Parent Product i cen MEERE IV z Mass Mass 1 603281 195 066 1 gE Frerone C XacibunData Ranfie_01 RAW El Scan Time IV o2 Sample Name Collision Energy V 38 Comment Q1 Peak Width IV go Acquisition Status Acquire Time Start Continuously Status Idle Time min 0 00 Su Use Tuned Tube Lens Value IV i Minutes View F Skimmer Offset IV Data Processing MN Q2CID Gas Micto Scans Average fs m z 3 r Chrom Fiter 115 1 Abort S 74738 SRM 609 CE 38 ST 0 10 CR 2 14e4 9728 93 Total lon Current Plot 100 Mass 195 m z 953 902 852 802 Relative Abundance a So L Total lon Current 35 se NIVA Hs Too 2 98e4 2 99e4 194 0 194 5 195 0 195 5 196 0 196 5 80 points miz Rum 08 07 01 5 1 PM Thermo Scientific Guide de d marrage rapide de la gamme TSO 93 8 Acquisition de donn es APCI MS MS Acquisition de donn es APCI MS MS en mode de balayage SRM 8 Charge 9 D tecteur Injecti on 10 11 12 13 Indiquez les r glages d acquisition a Dans la vue Acquire Data situ e dans la partie sup rieure droite de l espace de travail entrez le nom et le chemin de fichier C Xcalibur Data reserpine_01 raw dans la zone Filename Si vous le souhaitez cliquez sur le bouton Parcourir pour selectionner un autre dossier b Dans la zone Sample Name tapez r serpine ou entrez le nom de l anal
82. T 1 enor ne ener rar heen 10 20 30 40 50 60 miz Collision Energy V Mass 196 04 Intensity 99 21 NUM 08 07 01 5 1 PM Remarque Dans la vue Define Scan utilisez la zone Same value for all SRM s pour s lectionner les r glages g n raux de balayage SRM Un r glage d fini comme r glage g n ral aura la m me valeur chaque r action surveill e Pour d finir un r glage g n ral cochez la case correspondante et d finissez sa valeur dans la zone adjacente c Dans la zone Same value for all SRM s assurez vous que tous les r glages g n raux sont s lectionn s Puis v rifiez que les valeurs suivantes figurent dans les zones appropri es ou tapez les i Dans la zone Scan Width entrez 1 000 pour d finir la largeur de balayage sur 1 000 u ii Dans la zone Scan Time entrez 0 20 pour fixer la vitesse de balayage 0 20 s iii V rifiez que la valeur de la zone Collision Energy est d environ 38 c est dire la valeur entr e avant l optimisation Loptimisation automatique risque d avoir modifi la valeur de l nergie de collision iv Dans la zone Q1 Peak Width entrez 0 70 pour fixer la largeur de pic 0 70 u v Dans la zone Q3 Peak Width entrez 0 70 pour d finir la largeur de pic sur 0 70 u d Cochez la case Use Tuned Tube Lens Value e V rifiez que la case Skimmer Offset est d s lectionn e 92 Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ Thermo Scientific 8 Acquisition de donn es APCI MS MS
83. Time Start Q3Peak Width M 070 H ee ne nn Time min 0 00 i ne Use Tuned Tube Lens Value IV Minutes View I Skimmer Offset I Data Processing N Q2CID Gas Micro Scans Lu us c Abort S 74738 SRM 609 CE 38 ST 0 10 CR 2 14e4 Breakdown Curve of lon 609 3 m z 100 P F Intensity 0 00e 00 Product lons Coll Energy Pressure 1 5 mTorr 195 1 miz 38 v 90 100 _ 85 80 75 80 70 u 65 _ 2 60 u 8 55 g 60 2 50 lt o 2 45 o a 40 2 pur 5 40 _ Q 30 K 25 20 20 _ 15 10 u 5 0 T T T T T T T T 1 ar 1940 1980 195 1 1085 19 7 a 30 oo mz Collision Energy Y Mass 196 04 Intensity 99 21 NUM 08707701 5 1 PM Remarque Dans la vue Define Scan utilisez la zone Same value for all SRM s pour s lectionner les r glages g n raux de balayage SRM Un r glage d fini comme r glage g n ral aura la m me valeur chaque r action surveill e Pour d finir un r glage g n ral cochez la case correspondante et d finissez sa valeur dans la zone adjacente c Dans la zone Same value for all SRM s assurez vous que tous les r glages g n raux sont s lectionn s Puis v rifiez que les valeurs suivantes figurent dans les zones appropri es ou tapez les i Dans la zone Scan Width entrez 1 000 pour d finir la largeur de balayage sur 1 000 u ii Dans la zone Scan Time entrez 0 20 pour fixer la vitesse de balayage 0 20 s iii V rifiez que la valeur de la zone
84. Tune EZ Workspace HESI test test TSQCalib File View Control ScanParameters Display Setup Help a ls x 35 Al 11 Ul el 7 KSS XSS ACB FPGA Signature SRC FPGA Signature EIS FPGA Signature 33 V Power Supply 24 Volt aux Supply 24 Volt Protected 15 V Power Supply 5 Y Power Supply 4 14750e 4 4 17290e 4 6 55350e 4 32 7930 24 1034 23 9410 14 9921 4 9135 TSQ Ve S 92991 FULL Q3MS CT 0 11 4 50 1 24e8 100 508 27 90 80 70 60 50 Relative Abundance en w oO T l pitiriitiiis J 503 90 505 24 _ 506 44 uy TT LE LL DL LL K 508 509 510 511 512 513 miz a a a a oO a a Trace 1 042 715 2 69e 009 Trace 2 041 808 2 69e 009 sat S G A ay 4 Thermo TSQ EZ Tune gt 5 E S Total lon Current Plot 462 points num 6 17 2008 3 36 PM ONS 220 sm V rification du fonctionnement en mode ESI MS et H ESI MS A pr sent vous tes pr t a v rifier le fonctionnement correct du spectrom tre de masse Pour cela injectez la solution de r glage et d talonnage de polytyrosine directement dans la source ESI H ESI ou HESI II puis surveillez le spectre de masse de la solution Pour surveiller le spectre de masse de la solution de r glage et d talonnage 1 Dans EZ Tune cliquez sur le bouton Define Scan pour afficher la boite de dialogue D
85. ace et align e sur le logement tournez la de 45 degr s dans le sens inverse des aiguilles d une montre pour la d gager de l encoche Veillez ne pas endommager le tube d chantillonnage en silice fondue ou le manchon de s curit PEEK 12 Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ Thermo Scientific 2 Configuration de la source d ions pour le r glage et l talonnage du spectrom tre de masse Retrait de la sonde APCI c Tirez sur la sonde pour l extraire du bo tier de la source d ions d Placez la sonde APCI dans son emballage d origine 7 Debranchez le c ble de 8 kV de la prise haute tension de l aiguille de Corona comme suit a D verrouillez le c ble en tournant l anneau de serrage dans le sens contraire des aiguilles d une montre b Debranchez le c ble de 8 kV de la prise haute tension de l aiguille de Corona 8 Retirez l aiguille de d charge de Corona comme suit a Retirez le bo tier de source d ions Ion Max ou Ion Max S comme indiqu la section Retrait du bo tier de source d ions Ion Max ou Ion Max S la page 14 MISE EN GARDE Laiguille de d charge de Corona est particuli rement pointue Manipulez la avec pr caution pour ne pas vous blesser b Retirez l aiguille de Corona l aide d une pince maintenez l aiguille par le contact dor et tirez l aiguille hors de la prise Voir la Figure 4 Figure 4 Aiguille de Corona vue arri re Contact dor c Place
86. alement possible d introduire des chantillons dans le flux LC l aide d un chantillonneur automatique LC Cette technique fonctionne en mode ESI H ESI ou APCI et sert introduire en direct une solution d analyte pur dans le spectrom tre de masse La derni re m thode est l introduction d un m lange dans une colonne LC l aide d un chantillonneur automatique LC Cette technique fonctionne en mode ESI H ESI ou APCI et sert s parer les analytes avant leur introduction s quentielle dans le spectrom tre de masse Pour obtenir des sch mas de raccordement concernant ces diff rentes m thodes d introduction des chantillons se reporter aux chapitres suivants du pr sent manuel et au Guide de connexion de la gamme TSQ Quels types de tampon utiliser Pour obtenir les meilleures performances lors de vos exp riences utilisez chaque fois que cela est possible des tampons volatiles au lieu de tampons non volatiles Il existe de nombreuses solutions de tampons volatiles par exemple e Acide ac tique e Ac tate dammonium Formiate d ammonium e Hydroxyde d ammonium e Tri thylamine TEA e Acide trifluoroac tique T FA Certaines application LC utilisent des tampons non volatiles tels que des tampons phosphate ou borate Toutefois les tampons non volatiles peuvent cr er des accumulations de sels dans la source d ions et causer une perte de sensibilit Pour les applications LC requ rant des tam
87. apillaire installation figure 14 Capillaire tube de transfert des ions Optimisation de la temp rature 43 R glage de la temp rature tableau 7 Capillaire de transfert des ions tube Br lures mise en garde 12 15 C ne de balayage ionique Description 14 Explication 14 Installation 14 Retrait 70 conformit CEM ii conformit r glementaire iii DEEE wii Conformit la directive DEEE vii conformit CEM ii Contamination Seringue Nettoyage 41 Remarque 47 77 Syst me nettoyage 40 contamination de seringue remarque 41 Thermo Scientific Contamination du syst me minimisation remarque 4 D D bit Mode APCI tableau 7 Mode ESI tableau 7 Mode H ESI tableau 7 D pannage des probl mes de signal d ions 34 Documentation xi E chantillon introduction dans le syst me M thode 1 Tableau 4 ESI MS Directives tableau 7 mode changement de la source d ions remarque 22 Optimisation l aide d un compos 43 Utilisation explication 2 talonnage en haute r solution 105 talonnage en masse lev e ESI et H ESI r glage 97 Polarit ions n gatifs 102 Polarit ions positifs 98 talonnage en masse lev e proc dure 97 97 solution Ultramark 1621 pr paration 112 EZ Tune Ouverture 27 R glage et talonnage automatiques 27 F Figure Adaptateur de seringue 26 46 77 Bo tier de la source d ions Ion Max 16 71 Bo tier de la source Ion Max S 18 Cage du dispositif de chauffage du
88. ation de la source d ions pour l acquisition de donn es en mode APCI MS MS Installation de la sonde APCI Installation de la sonde APCI Pour installer la sonde APCI 1 Branchez le c ble de 8 kV la prise haute tension de l aiguille de Corona a Branchez le c ble de 8 kV la prise haute tension de l aiguille de Corona sur le c t droit du sommet du bo tier de la sourde d ions Voir la Figure 2 la page 11 b Verrouillez le c ble en tournant l anneau de serrage dans le sens des aiguilles d une montre 2 Tournez le bouton de verrouillage de la sonde dans le sens des aiguilles d une montre pour r gler Panneau de serrage de la sonde sur sa position la plus ouverte 3 Ins rez la sonde APCI dans l orifice du bo tier de la source d ions en alignant la tige de guidage sur le corps de la sonde 45 degr s du bloc de verrouillage ESI Voir la Figure 54 Figure 54 Sonde APCI Prise du c ble de chauffage du vaporisateur Arrivee de gaz gaine S Rep res de profondeur de sonde Arrivee de gaz auxiliaire A Raccord d arrivee de l chantillon 4 Enfoncez la sonde dans l orifice jusqu ce que la tige de guidage atteigne l anneau de serrage du boitier 5 Tournez la sonde de 45 degr s dans le sens des aiguilles d une montre et alignez la tige de guidage sur le logement du bloc de verrouillage ESI il vous faudra peut tre tirer l g rement la sonde vers vous pour aligner correct
89. au 6 Sonde H ESI MS mode changement de la source d ions remarque 22 Sonde HESI II figure 19 installation 18 r glages tableau 6 Source d ions APCI Explication 3 Raccordement pour injection automatique par boucle figure 76 Raccordement pour injection par boucle manuelle figure 88 Ensemble de montage figure 17 ESI Connecteur haute tension figure 16 71 Explication 2 Raccord d azote figure 16 71 Raccordement pour injection automatique par boucle figure 45 Raccordement pour injection par boucle manuelle figure 58 H ESI Explication 2 Raccordement pour injection directe figure 25 HESI II Raccordement pour injection automatique par boucle figure 46 source d ions ESI depose 67 Sonde HESI II depose 67 Systeme LC Debit Mode APCI tableau 7 Mode ESI tableau 7 Mode H ESI tableau 7 T Tableau Directive sur les r glages de balayage Balayage complet MS MS des ions parents 118 Balayage complet QIMS 118 Balayage complet Q3MS 118 Balayage SIM MS MS de perte de neutre 119 Balayage SIM MS MS des ions parents 119 Balayage SIM MS MS des ions produits 119 Thermo Scientific Index U Balayage SIM QIMS ou Q3MS 119 Vaporisateur HESI U SRM MS MS 120 haute temperature attention 68 Directives temp ratures tableau 6 Mode APCI 7 Mode ESI 7 Mode H ESI 7 Masses des ions n gatifs Ultramark 1621 102 Masses des ions positifs Ultramark 1621 98 R capitulatif des produits composant la solution de r
90. c Pour configurer le spectrom tre de masse en vue de l optimisation automatique l aide du compos en mode APCI MS MS Dans la barre des t ches Windows s lectionnez D marrer gt Tous les programmes gt Thermo Instruments gt TSQ gt TSQ Tune pour ouvrir la fen tre EZ Tune Dans EZ Tune cliquez sur le bouton On Standby de la barre d outils Control Scan Mode pour mettre le spectrom tre de masse sous tension Avant de commencer l analyse d chantillons avec la source APCE vous devez activer le mode source APCI du syst me TSQ en choisissant Setup gt Change Ion Source gt APCI Si vous le souhaitez ouvrez une m thode de r glage existante a Cliquez sur le bouton Open File de la barre d outils File Display pour afficher la bo te de dialogue Open b V rifiez le chemin C Xcalibur methods puis s lectionnez le fichier voulu c Cliquez sur Open pour ouvrir le fichier EZ Tune t l charge les r glages sur le spectrom tre de masse S lectionnez Display gt Compound Dependent Devices pour afficher la bo te de dialogue Compound Dependent Devices Voir la Figure 59 Figure 59 R glages APCI de la bo te de dialogue Compound Dependent Devices TSQ Quantum Access TSO Quantum Access MAX et TSQ Quantum Ultra Readback Oly Discharge Current 40 4 0 Oly APCI Vaporizer Tempera 500 499 Oly Sheath Gas Pressure 30 30 Us Aux Valve Flow 0 0 Oly Capillary Temperature 350 350 M Tube Lens Of
91. capillaire installation 14 Espace de travail Tune Master Compound Optimization 53 83 Instrument Method Development Workspace 65 93 Ion Max S 12 Ions positifs de la polytyrosine 33 Montage de la source d ions 17 Raccordement 26 Injection automatique par boucle APCI 76 88 Guide de d marrage rapide de la gamme TSO 121 Index G Injection automatique par boucle ESI 45 Injection automatique par boucle HESI II 46 Injection boucle manuelle ESI 58 Injection directe H ESI 25 Vanne de d rivation d injection vers la jonction de mise la terre 48 Vanne de d rivation d injection vers la sonde APCI 78 Vanne de d rivation d injection injection automatique par boucle 47 77 Vanne d rivation d injection injection par boucle manuelle 59 89 Sonde APCI 11 Vue Tune Master Define Scan 30 33 Inlet Direct Control 52 82 Optimize Compound Dependent Devices 79 Spectre 34 Syringe Pump and Sample Loop 29 51 81 Xcalibur Qual Browser fen tre 66 95 Figures Ion Max S 69 Sonde HESI I 19 G Glycol polyethylenique PEG solution 113 H H ESI MS Directives tableau 7 Optimisation l aide d un compos 43 Utilisation explication 2 Injection automatique par boucle APCI Raccordement 77 Raccordement figure 76 ESI Raccordement 46 Raccordement figure 45 H ESI Raccordement 46 HESI II Raccordement figure 46 Raccordement 45 injection automatique par boucle ESI raccordement physique pour 46 HESI II raccord
92. ce lon Max ou lon Max S Installation du boitier de la source lon Max ou lon Max S Pour r installer le bo tier de la source lon Max ou lon Max S 1 Alignez avec soin les deux orifices de guidage situ s l arriere du bo tier de la source d ions sur les tiges de guidage du spectrom tre de masse Voir la Figure 52 et la Figure 53 Figure 52 Vue arri re du bo tier de la source d ions lon Max Leviers de verrouillage Orifices de guidage Tuyau d vacuation du bo tier de la source d ions Thermo Scientific Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ 71 6 Configuration de la source d ions pour l acquisition de donn es en mode APCI MS MS Installation du bo tier de la source lon Max ou lon Max S 72 Figure 53 Ensemble de montage de la source d ions avec les tiges de guidage Tiges de guidage du bo tier de la source d ions 2 Faites pivoter les leviers de verrouillage du bo tier de la source d ions de 90 degr s pour verrouiller le bo tier de la source sur son ensemble de montage MISE EN GARDE Veillez ce que les solvants us s ne p n trent pas dans la source d ions ou le spectrom tre de masse Assurez vous que le liquide pr sent dans le tuyau d vacuation puisse toujours s couler dans un conteneur de r cup ration des liquides V rifiez que l extr mit du tube d vacuation se trouve au dessus du niveau de liquide du conteneur de r cup ration des liquides Ne
93. cyclers in your country WEEE Konformit t Dieses Produkt muss die EU Waste Electrical amp Electronic Equipment WEEE Richtlinie 2002 96 EC erf llen Das Produkt ist durch folgendes Symbol gekennzeichnet Thermo Fisher Scientific hat Vereinbarungen mit Verwertungs Entsorgungsfirmen in allen EU Mitgliedsstaaten getroffen damit dieses Produkt durch diese Firmen wiederverwertet oder entsorgt werden kann Mehr Information ber die Einhaltung dieser Anweisungen durch Thermo Fisher Scientific ber die Verwerter und weitere Hinweise die n tzlich sind um die Produkte zu identifizieren die unter diese ROHS Anweisung fallen finden Sie unter www thermo com WEEEROHS Conformite DEEE Ce produit doit tre conforme a la directive europ enne 2002 96 EC des D chets d Equipements Electriques et Electroniques DEEE Il est marqu par le symbole suivant Thermo Fisher Scientific s est associ avec une ou plusieurs compagnies de recyclage dans chaque tat membre de l union europ enne et ce produit devrait tre collect ou recycl par celles ci Davantage d informations sur la conformit de Thermo Fisher Scientific ces directives les recycleurs dans votre pays et les informations sur les produits Thermo Fisher Scientific qui peuvent aider la d tection des substances sujettes la directive RoHS sont disponibles sur www thermo com WEEEROHS ES Table des mati res as PP PET ee xi propos de ce guide di
94. d vacuation du syst me LC b Branchez l autre extr mit du tube dot e d un crou et d une ferrule l orifice 2 de la vanne de derivation d injection 11 Installez une ligne de r cup ration des liquides sur la vanne de d rivation d injection et dirigez Porifice d vacuation vers un conteneur de r cup ration des liquides a Branchez un tube de longueur ad quate dot d un crou et d une ferrule l orifice 6 de la vanne de d rivation d injection Vorifice 6 porte le logo Rheodyne SR b Ins rez l autre extr mit du tube dans le conteneur de r cup ration des liquides La configuration de l introduction par boucle d injection automatique est termin e Allez la section suivante Configuration de l optimisation l aide d un compos en mode ESI MS MS ou H ESI MS MS 48 Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ Thermo Scientific 4 Optimisation du spectrom tre de masse l aide d un compos en mode ESI MS MS ou H ESI MS MS Configuration de l optimisation l aide d un compos en mode ESI MS MS ou H ESI MS MS Configuration de l optimisation l aide d un compos en mode ESI MS MS ou H ESI MS MS Pour configurer le spectrom tre de masse en vue d optimiser les dispositifs d pendant du compos en mode ESI MS MS ou H ESI MS MS 1 Dans la barre des t ches Windows s lectionnez D marrer gt Tous les programmes gt Thermo Instruments gt TSQ gt TSQ Tune pour ouvrir
95. dans la page Scan Editor diteur de balayage de Instrument Setup Configuration de l instrument et s lectionnez Paste Scan Event Coller l v nement de balayage dans le menu de raccourcis Thermo Scientific Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ 117 Tableau 11 R glages de l instrument pour un balayage complet O1MS Premi re Derni re Temps de Largeur Mode d entr e masse masse balayage de pic 01 m z m z s u FM LM 150 000 1050 000 0 65 0 70 Tableau 12 R glages de l instrument pour un balayage complet O3MS Masse Largeur de Temps de Mode Wontroe centrale balayage balayage m z u s Masse centrale 182 082 6 000 0 20 Tableau 13 R glages de l instrument pour un balayage complet MS MS Masse Largeur de Tempsde Masse des Energiede Largeur Mode 5 toe entree centrale balayage balayage ions produits collision de pic 01 m z u s m z eV u Masse 182 082 10 000 0 20 136 076 20 0 70 centrale La pression du gaz CID Q2 est r duite en mode de balayage MS MS des ions parents pour pr server la sym trie et la r solution du pic Tableau 14 R glages de l instrument pour un balayage complet MS MS des ions produits Masse Largeurde Temps de Masse des Energie de Largeur Mode 3 se 3 d entr e centrale balayage balayage ions parents collision de pic 01 m z u s m z eV u Masse 182 082 10 000 0 20 182 082 18 0 70 centrale Tableau 15 R glages de l instrument pour un balayage complet MS MS
96. dant une analyse vous risquez de perdre des donn es Pour configurer le spectrom tre de masse en vue du r glage et de l talonnage Dans la barre des t ches Windows s lectionnez D marrer gt Tous les programmes gt Thermo Instruments gt TSQ gt TSQ Tune pour ouvrir la fen tre EZ Tune Dans EZ Tune cliquez sur le bouton On Standby de la barre d outils Control Scan Mode pour mettre le spectrom tre de masse sous tension Les trois diff rents tats du bouton On Standby sont illustr s ci contre La mise sous tension du spectrom tre de masse initialise les op rations suivantes Le spectrom tre de masse commence le balayage Le flux d azote commence passer dans la sonde ESI H ESI ou HESI II e Le spectrom tre de masse applique une haute tension la sonde ESI H ESI ou HESI II e EZ Tune affiche les r sultats en temps r el dans la vue du spectre Cliquez sur le bouton Ion Source Devices pour afficher la bo te de dialogue Ion Source Devices Voir la Figure 19 ou la Figure 20 Fixez les valeurs des diff rents dispositifs d pendant d un compos sur les valeurs indiqu es la Figure 19 ou la Figure 20 a Dans la bo te de dialogue Ion Source Devices s lectionnez un dispositif afin de le mettre en surbrillance V rifiez que la case correspondante n est pas coch e b Dans la zone Device tapez le r glage du dispositif ou utilisez les fl ches vers le haut et vers le bas
97. de perte de neutre Masse Largeur de Temps de Massedeperte Energie de Largeur Mode aye Mentoe centrale balayage balayage de neutre collision de pic 01 m z u s m z eV u Masse 182 082 6 000 0 20 17 027 10 0 70 centrale 118 Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ D calage Traitement des Utiliser un du skimmer donn es gaz 02 CID D sactiv 10 spectres en moy Non D calage Traitement des Utiliser un du skimmer donn es gaz 02 CID D sactiv 10 spectres en moy Non Largeur D calage Utiliser un depicQ3 du Trantemant LE gaz 02 CID donn es u skimmer mTorr 0 70 D sactiv 10 spectres en moy 0 8 Largeur Decalage Utiliser un depic03 du Taten das gaz 02 CID donn es u skimmer mTorr 0 70 D sactiv 10 spectres en moy 1 5 Etat de la Decalage Traitement des een charge donn es gaz u2 cin g skimmer mTorr 1 pour Q1 D sactiv 10 spectres en moy 1 5 et Q3 Thermo Scientific Tableau 16 R glages de l instrument pour un balayage SIM Q1MS ou Q3MS Largeurde Temps de Largeur Largeur Malssrle Decalage Utiliser un Masse 2 valeur de Traitement des balayage balayage depicQ1 de pic 03 du f gaz m z la lentille donn es u s u u skimmer 02 CID tubulaire 182 082 6 000 0 20 0 70 0 70 Oui D sactiv 10 spectres en moy Non 508 208 6 000 0 20 0 70 0 70 Oui D sactiv 10 spectres en moy Non 997 398 6 000 0 20 0 70 0 70 Oui D sactiv 10 spectres en moy Non Tableau 17
98. devient Spray Voltage b Dans la zone Spray Voltage entrez 3000 pour appliquer une tension de spray de 3000 V R glez la pression du gaz gaine sur 15 psi a Dans la colonne Device s lectionnez l option Sheath Gas Pressure pour la mettre en surbrillance Lintitul de la zone Device devient Sheath Gas b Dans la zone Sheath Gas entrez 15 pour r gler la pression du gaz gaine sur 15 psi Choisissez Setup gt System Tune and Calibration pour afficher la boite de dialogue System Tune and Calibration Dans la liste Compound Compos choisissez Polytyrosine Neg Ainsi les trois ions de polytyrosine charg s n gativement que le systeme TSQ utilise pour le r glage et l talonnage automatiques sont s lectionn s Pour lancer le r glage et l talonnage automatiques cliquez sur Start Vous pouvez surveiller la progression du r glage et de l talonnage du syst me dans la zone Status Lorsque l ensemble de la proc dure est termin la zone Status affiche un r sum e Si des erreurs se produisent pendant le r glage et l talonnage automatiques allez l tape 8 e Si le r glage et l talonnage automatiques se terminent sans erreur allez l tape 9 Si des erreurs se produisent pendant le r glage et l talonnage automatiques restaurez les r glages pr c dents du spectrom tre de masse et ex cutez de nouveau le r glage et l talonnage de instrument en suivant les tapes c
99. e EZ Tune n est pas d ja ouverte choisissez D marrer gt Programmes gt Thermo Instruments gt TSQ gt TSQ Tune dans la barre de t ches Windows pour l ouvrir b Choisissez Setup gt Inlet Direct Control pour ouvrir la bo te de dialogue Inlet Direct Control c Affichez la page LC et cliquez sur B Arr t pour arr ter la pompe LC T A Vous pouvez d terminer l tat du spectrom tre de masse en observant celui du bouton On Standby ae Marche Veille dans la barre d outils Control Scan Mode Commande Mode de balayage Les ina Oo trois tats du bouton On Standby Marche Veille sont indiqu s sur la gauche rr amp 2 Si le spectrom tre de masse est en marche cliquez sur le bouton On Standby Marche Veille Veille ll pour le placer en mode veille Lorsque le spectrom tre de masse est en mode veille le TSQ arr te le gaz gaine de la source d ions le gaz auxiliaire et la haute tension 3 D branchez le tube de transfert des chantillons de la jonction de mise a la terre en acier inoxydable raccord ZDV comme illustr la Figure 49 Thermo Scientific Guide de d marrage rapide de la gamme TSO 67 6 Configuration de la source d ions pour l acquisition de donn es en mode APCI MS MS D pose de la sonde ESI H ESI ou HESI II 4 Debranchez le c ble de 8 kV de la prise haute tension de l aiguille ESI voir la Figure 49 a Deverrouillez le c ble en tournant l anneau de serrage dans le sens contraire
100. e de l espace de travail m 3 Mettez le spectrom tre de masse en mode profil pour afficher des donn es en profil Si l tat du Profile Profil bouton Profile Centroid est Centroid Centroide comme illustr ci contre cliquez dessus pour Centroid passer l affichage des donn es en profil Centroide 4 Mettez le spectrom tre de masse en polarit ions positifs D terminez la polarit du spectrom tre de masse pour cela v rifiez la position du bouton Polarity illustr ci contre V rifiez que le bouton Polarity se trouve en polarit ions positifs Polarit ions positifs Polarit ions n gatifs 30 Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ Thermo Scientific Thermo Scientific 3 Reglage et talonnage du spectrometre de masse Cr ation d un faisceau d ions stable 5 V rifiez que les autres param tres d pendant des compos s sont aux valeurs indiqu es la Figure 19 ou la Figure 20 6 V rifiez que le faisceau d ions est stable a Dans la vue du spectre situ e dans la partie inf rieure gauche de l espace de travail observez le spectre de masse de lion m z 508 208 Choisissez Display gt Zoom gt Normalize afin de pouvoir observer l intensit relative des ions m z 508 208 Voir la Figure 23 Remarque Vous pouvez r gler la pression du gaz gaine entre 0 et 15 psi pour obtenir un faisceau d ions stable Une pression de gaz gaine trop faible entra ne une perte d
101. e de transfert des ions et les d bits des gaz gaine et auxiliaire e En mode H ESI r glez les temp ratures du tube de transfert des ions et du vaporisateur ainsi que ceux des debits des gaz gaine et auxiliaire e En mode APCI r glez les temp ratures du tube de transfert des ions et du vaporisateur ainsi que les d bits des gaz gaine et auxiliaire En g n ral plus le d bit de liquide entrant dans le spectrom tre de masse est lev plus la temp rature du tube de transfert des ions et du vaporisateur et les d bits de gaz sont lev s Le Tableau 3 fournit des directives sur les r glages H ESI diff rents d bits de solvant LC le Tableau 4 les r glages ESI et le Tableau 5 les reglages APCI Tableau 3 Directives concernant les r glages LC H ESI MS Debit Temp rature du A Pression du gaz D bit de En I Temp rature du 3 Re Tension du de liquide capillaire tube de allen gaine gaz auxiliaire spray V pl min transfert des ions C ap unit s arbitraires unit s arbitraires pray 5 240 Arr t 50 5 0 10 3000 2500 200 350 250 a 300 35 30 sonde H ESI 3000 2500 10 sonde HESI II 500 380 300 400 sonde 60 50 sonde H ESI 3000 2500 H ESD 300 500 20 sonde sonde HESI II HESI II 1000 400 350 450 sonde 75 60 sonde H ESI 3000 2500 H ESI 500 20 sonde sonde HESI II HESI ID Optimisez toujours la tension de la lentille tubulaire ou la tension rf de la lentil
102. e stabilit du signal et une pression trop lev e peut provoquer une perte d intensite du pic Observez la hauteur du pic m z 508 208 dans la vue du spectre e Si le sommet du pic est r gulier le faisceau d ions est stable vous n avez pas besoin de r gler la pression du gaz gaine La hauteur du pic ne doit pas varier de plus de 30 pour cent environ d un balayage un autre e Sile sommet du pic est irr gulier vous devez r gler la pression du gaz gaine pour cr er un faisceau d ions stable Vous pouvez galement observer les fluctuations du courant d ions dans la vue graphique situ e dans la partie inf rieure droite de l espace de travail Remarque Il existe une relation entre la tension du spray la pression du gaz gaine et le d bit de la solution d chantillon Il vous faudra donc peut tre modifier ces trois r glages pour obtenir un faisceau d ions stable Lorsque vous obtenez un faisceau d ions stable modifiez les param tres de balayage afin d observer les autres pic de la polytyrosine dans la vue du spectre Voir la description la section suivante V rification du fonctionnement en mode ESI MS et H ESI MS Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ 31 3 Reglage et talonnage du spectrometre de masse V rification du fonctionnement en mode ESI MS et H ESI MS Figure 23 Spectre et trac TIC en temps r el de la polytyrosine 3 illustrant un faisceau d ions stable Thermo TSQ EZ
103. ectement la tige sur l encoche Apres avoir suffisamment tourn la sonde pour aligner la tige sur l encoche qui se trouve l arriere de l orifice enfoncez la sonde jusqu ce que la tige de guidage atteigne le fond de l encoche 6 Verrouillez la sonde en tournant le bouton de verrouillage dans le sens des aiguilles d une montre 7 V rifiez que la jonction de mise a la terre raccord ZDV en acier inoxydable est install e dans la barre de terre sur la source Ion Max ou Ion Max S ESI ou sur le support de jonction de mise la terre sur la sonde H ESI ou HESI II Voir la Figure 13 ESI et la Figure 14 HESI II 8 Branchez le raccord bleu du gaz gaine l orifice d arriv e correspondant S qui se trouve sur la sonde 9 Branchez le raccord vert du gaz auxiliaire de l orifice d arriv e correspondant A qui se trouve sur la sonde 10 Pour la sonde H ESI ou HESI IT raccordez le c ble de chauffage du vaporisateur sa prise situ e sur la sonde H ESI ou HESI I 20 Guide de d marrage rapide de la gamme TSO Thermo Scientific Thermo Scientific 2 Configuration de la source d ions pour le r glage et l talonnage du spectrom tre de masse Installation de la sonde ESI H ESI ou HESI II Figure 13 Sonde ESI install e Cable du vaporisateur Cable 8 kV raccord au bloc de raccord a la verrouillage prise haute tension Conduite de gaz gaine raccord bleu Conduire de gaz auxil
104. efine Scan 2 Dans la boite de dialogue Define Scan modifiez les param tres de balayage afin de v rifier le fonctionnement du spectrom tre de masse en mode Q1 a Dans la zone Scan Range de la zone Scan Parameters s lectionnez l option FM LM dans la zone Entry Mode Les zones First Mass et Last Mass s affichent Voir la Figure 24 b Entrez 150 dans la zone First Mass pour d marrer le balayage 150 000 u c Entrez 1050 dans la zone Last Mass pour finir le balayage 1050 000 u d Dans la zone Scan Time entrez 1 20 pour d finir la dur e de balayage sur 1 20 s e Pour appliquer ces r glages de balayage cliquez sur Apply 32 Guide de d marrage rapide de la gamme TSO Thermo Scientific 3 Reglage et talonnage du spectrometre de masse V rification du fonctionnement en mode ESI MS et H ESI MS Figure 24 R glages standard permettant de tester le fonctionnement du spectrometre de masse en mode O1MS dans la bo te de dialogue Define Scan Define Scan Scan Type Full Scan HSRM SRM Scan Mode i Q3MS Product Scan Parameters Scan Time 1 200 FM LM First Mass 150 0000 Cu ace 90m H Scan Range Entry Mode C Center Mass Last Mass 11050 0000 Collision Energy Q2 CID Gas Abort Cancel Help 3 Appliquez une moyenne de spectre a Choisissez Scan Parameters gt Configure Spectrum Averaging pour ouvrir la boite de dialogue Configure Spectrum Averaging b S
105. ement la tige sur l encoche Apr s avoir suffisamment tourn la sonde pour aligner la tige sur encoche qui se trouve l arri re de l orifice enfoncez la sonde jusqu ce que la tige de guidage atteigne le fond de l encoche 6 Ins rez la sonde dans l encoche jusqu au maximum 7 Verrouillez la sonde en tournant le bouton de verrouillage dans le sens des aiguilles d une montre 8 D branchez le c ble du vaporisateur de la prise de verrouillage ESI du bo tier de la source d ions Thermo Scientific Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ 73 6 Configuration de la source d ions pour l acquisition de donn es en mode APCI MS MS Installation de la sonde APCI 9 Branchez le c ble du vaporisateur la prise correspondante sur la sonde APCI 10 Branchez la ligne de gaz auxiliaire raccord vert l orifice d arriv e correspondant A sur la sonde APCI 11 Branchez la ligne de gaz gaine raccord bleu l orifice d arriv e correspondant S sur la sonde APCI 12 Branchez le tube de transfert des chantillons l arriv e sur la sonde APCI La source APCI est pr sent correctement install e sur le spectrom tre de masse MISE EN GARDE Veillez ce que les solvants us s ne p n trent pas dans la source d ions ou le spectrom tre de masse Assurez vous que le liquide pr sent dans le tuyau d vacuation puisse toujours s couler dans un conteneur de r cup ration des liquides V rifiez q
106. ement physique pour 46 Injection boucle manuelle raccordement 58 injection en boucle manuelle raccordement physique APCI figure 58 88 122 Guide de d marrage rapide de la gamme TSO Injection par boucle Raccordement 45 Injection par boucle manuelle APCI Raccordement figure 88 ESI raccordement figure 58 Interface utilisateur Tune Master Acquisition de donn es 60 90 Bascule entre les modes ESI et APCI 79 Contr le direct du syst me LC Surveyor 60 90 Enregistrement d une m thode de r glage 55 85 Mise du spectrom tre de masse en mode veille 10 Mise hors tension du spectrom tre de masse 10 Mise sous tension du spectrom tre de masse 27 Modification des r glages de la pompe seringue et de la boucle d chantillonnage 28 81 Modification manuelle des r glages de balayage 30 32 53 61 83 91 Optimisation en mode APCI MS 83 Optimisation en mode ESI MS 52 53 83 Pr paration de l optimisation 49 52 79 82 Pr paration en vue du r glage et de l talonnage 27 R glage et talonnage en polarit ions n gatifs 39 R glage et talonnage en polarit ions positifs 35 Xcalibur Analyse de donn es Qual Browser 66 95 Mat riel de r f rence suppl mentaire remarque 65 Qual Browser fen tre figure 65 interface utilisateur Tune Master arr t du spectrometre de masser 67 enregistrement de l talonnage 37 40 placement du spectrom tre de masse en veille 67 Ion Max d pose du boitier 14 Installation du boiti
107. ence 2522 3830 r f rence 00301 22912 P N 00101 18196 Installez une boucle d chantillonnage de 5 pl avec des crous et des ferrules entre les orifices 1 et 4 de la vanne de derivation d injection Installez une ligne de solvant entre le syst me LC et la vanne de d rivation d injection a Branchez un tube de longueur ad quate dot d un raccord et d une ferrule l orifice d evacuation du syst me LC b Branchez l autre extr mit du tube dot e d un crou et d une ferrule l orifice 2 de la vanne de d rivation d injection Installez une ligne de r cup ration des liquides sur la vanne de d rivation d injection et dirigez Porifice d vacuation vers un conteneur de r cup ration des liquides a Branchez un tube de longueur ad quate dot d un crou et d une ferrule l orifice 6 de la vanne de d rivation d injection lorifice 6 porte le logo Rheodyne SR b Ins rez l autre extr mit du tube dans le conteneur de r cup ration des liquides La configuration de l introduction par boucle d injection automatique est termin e Passez la section Configuration de l optimisation en mode APCI MS MS 18 Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ Thermo Scientific 7 Optimisation du spectrom tre de masse en mode APCI MS MS Configuration de l optimisation en mode APCI MS MS Configuration de l optimisation en mode APCI MS MS Marche A Veille ll Thermo Scientifi
108. er 16 Ion Max S Boitier de la source figure 18 Figure 12 figure 69 Installation du boitier 16 Masse pr cise talonnage 106 Etalonnage en haute r solution 105 Solution d talonnage pr paration 113 M thode de r glage enregistrement Proc dure 55 85 Remarque 55 Mise en garde Blessures caus es par l aiguille de Corona 70 Br lures caus es par le capillaire de transfert des ions 12 15 Br lures caus es par le tube de transfert des ions 70 Thermo Scientific Br lures caus es par le vaporisateur APCI 12 15 70 Penetration des solvants uses dans le bottier de la source d ions 17 72 74 Symbole xii Ventilation de la source ESI 72 Mises en garde de s curit et autres notices sp ciales xi Nous contacter xii 0 Optimisation l aide d un compos Configuration de la pompe seringue 45 76 Configuration du spectrom tre de masse 49 79 LC ESI MS mode 43 LC H ESI MS mode 43 Optimisation de la sym trie du pic 105 optimisation du compos solutions de r serpine pr paration 114 P Performance optimisation 5 Polytyrosine Polarit ions n gatifs r glage 38 Solution de r glage et d talonnage pr paration 110 Spectre des ions positifs figure 33 Pompe seringue Configuration pour l optimisation l aide d un compos 45 76 D marrage 28 R glages pour la polytyrosine 1 3 6 28 pompe seringue configuration du mat riel pour r glage et talonnage 24 Pr cautions Danger de br lure par
109. es la manipulation physique de cet instrument de Thermo Fisher Scientific exige la pr sence de plusieurs personnes notamment pour le soulever et ou le d placer Cet instrument est trop lourd et ou volumineux pour pouvoir tre manipul en toute s curit par une seule personne Mention relative l utilisation appropri e des instruments Thermo Scientific Conform ment aux r glementations internationales toute utilisation de cet instrument non conforme aux instructions de Thermo Fisher Scientific peut nuire la protection qu il offre Mention relative a la susceptibilit aux transmissions lectromagn tiques Votre instrument a t congu pour fonctionner dans un environnement lectromagn tique contr le Ne pas utiliser de transmetteurs RF comme les t l phones portables proximit Pour des informations relatives au site de fabrication consulter l tiquette fix e sur instrument Thermo SCIENTIFIC WEEE Compliance This product is required to comply with the European Union s Waste Electrical amp Electronic Equipment WEEE Directive 2002 96 EC It is marked with the following symbol Thermo Fisher Scientific has contracted with one or more recycling or disposal companies in each European Union EU Member State and these companies should dispose of or recycle this product See www thermo com WEEEROHS for further information on Thermo Fisher Scientific s compliance with these Directives and the re
110. es suivantes e la pompe seringue sans vanne de d rivation d injection ou un syst me LC perfusion directe Vous pouvez brancher la pompe seringue directement sur la source d ions pour que l introduction de l chantillon ou de la solution de r glage et d talonnage soit r guli re e la pompe seringue et un syst me LC sans vanne de d rivation d injection perfusion dans le flux LC Vous pouvez utiliser la pompe seringue pour perfuser un chantillon dans le flux d une phase mobile d un syst me LC e la vanne de d rivation injection dot e d une boucle d chantillonnage et un syst me LC analyse par injection de flux Vous pouvez utiliser une pompe seringue pour remplir la boucle injection automatique par boucle ou remplir la boucle manuellement injection manuelle par boucle e la vanne de d rivation injection et un syst me LC dot d une colonne analytique Vous pouvez configurer le syst me de donn es de sorte qu il d rive le flux de solvant vers un conteneur de r cup ration des liquides afin d viter toute contamination inutile du spectrom tre de masse par des r sidus d chantillon non souhait s e un syst me LC sans vanne de d rivation d injection Vous pouvez brancher le syst me LC directement sur la source d ions pour r duire le volume mort de celui ci Lors d une analyse par LC MS les composants s par s par la colonne LC sont analys s dans le spectrom tre de masse
111. es ci dessous Toute modification apport e l instrument peut annuler sa conformit avec une ou plusieurs de ces normes de s curit et de compatibilit lectromagn tique CEM Les modifications concern es incluent le remplacement d une pi ce ou l ajout de composants d options ou de p riph riques non sp cifiquement autoris s et qualifi s par Thermo Fisher Scientific Pour assurer la conformit durable de l instrument aux normes CEM et de s curit commander les pi ces de rechange et les composants options et p riph riques suppl mentaires aupr s de Thermo Fisher Scientific ou de l un de ses repr sentants agr s e TSQ Quantum Access MAX e TSQ Quantum Ultra e TSQ Vantage e TSQ Quantum Access TSQ Quantum Access MAX Directive CEM 2004 108 CEE La CEM a t valu e par l organisme de certification TUV Rheinland of North America Inc EN 55011 2007 A2 2007 EN 61000 4 4 2004 EN 61000 3 2 2006 EN 61000 4 5 2005 EN 61000 3 3 1995 A1 2001 A2 2005 EN 61000 4 6 2007 EN 61000 4 2 1995 A1 1999 A2 2001 EN 61000 4 11 2004 EN 61000 4 3 2006 EN 61326 1 2006 FCC Classe A CFR 47 Partie 15 2007 Conformit aux normes de s curit relatives aux basses tensions Cet appareil est conforme la directive 2006 95 CE de l Union Europ enne mise en uvre par 61010 1 2001 TSQ Quantum Ultra CEM Directive 89 336 CEE modifi e par les directives 92 31 CEE et 93 68 CEE
112. fiez que l talonnage a r ussi dans les tableaux d talonnage Vous tes pr t passer aux exp riences de masse pr cise 108 Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ Thermo Scientific es 1 Preparation de solutions Cette annexe d crit la pr paration de solutions de r glage et d talonnage pour les gammes de masses normales lev es et l utilisation en masses pr cises Elle fournit galement des instructions sur la pr paration de solutions de r serpine utilis es lors de l optimisation de l instrument l aide d un compos Voir les exemples des chapitres 4 5 7 et 8 Contenu e Solution de r glage et d talonnage de polytyrosine 1 3 6 e Solution d talonnage en masse lev e Ultramark 1621 e Solution d etalonnage en masse pr cise e Solutions de r serpine MISE EN GARDE EVITER TOUTE EXPOSITION A DES SUBSTANCES POTENTIELLEMENT NOCIVES Porter toujours des gants et des lunettes de protection en cas de manipulation de solvants ou de produits corrosifs Confiner les flux de liquides us s et utiliser une ventilation ad quate Se reporter aux fiches techniques sant s curit du fabricant pour plus d informations sur la manipulation d un solvant sp cifique Manipuler les produits chimiques et chantillons inconnus avec pr caution LIRE ET COMPRENDRE LES DANGERS DES PRODUITS CHIMIQUES UTILISES DANS LES PREPARATIONS CI APRES Mettre tous les r actifs et solvants de laboratoire au rebut
113. fset 160 159 Ol Skimmer Offset 0 0 Oly Collision Pressure 1 5 1 5 f Collision Energy 38 38 Discharge Current 4 0 Hy Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ 79 7 Optimisation du spectrometre de masse en mode APCI MS MS Configuration de l optimisation en mode APCI MS MS Remarque Il se peut qu une contamination chimique du vaporisateur APCI cr e un bruit chimique dans le spectre de masse Si tel est le cas remettez le vaporisateur APCI en condition de fonctionnement correct Pour cela lancez le flux de solvant LC augmentez la temp rature du vaporisateur APCI ainsi que les pressions du gaz gaine et du gaz auxiliaire pendant environ 30 minutes afin d eliminer la contamination chimique Voici les valeurs habituelles d un vaporisateur APCI fonctionnant correctement e D bit LC 400 pl min e Temp rature du vaporisateur 600 C e Pression du gaz gaine 80 unit s e D bit du gaz auxiliaire 15 unit s 6 D finissez les valeurs des dispositifs d pendant du compos a V rifiez que l option Discharge Current est s lectionn e en surbrillance dans le tableau Device Display Dans la boite de dialogue Optimize Compound Dependent Devices entrez 4 0 dans la zone Discharge Current afin de fixer le courant de d charge amp 4 0 pA R glez la temp rature du vaporisateur APCI sur 350 C i Dans le tableau Device Display s lectionnez l option APCI Vaporizer Temperature pour la mettre en surbrillance ii
114. gamme TSQ Manuel du mat riel de la gamme TSQ Manuel d utilisation de la sonde H ESI e Manuel d utilisation de la sonde HESI II e Manuel du mat riel de la source API Ion MAX et Ion MAX S Le logiciel propose galement une aide en ligne Mises en garde de s curit et autres notices sp ciales Assurez vous de suivre toutes les consignes de s curit pr sent es dans ce guide Les mises en garde de s curit et autres notices sp ciales apparaissent dans des encadr s Elles incluent notamment ce qui suit MISE EN GARDE Signale des dangers potentiels pour les personnes les quipements ou l environnement Chaque notice ATTENTION est accompagn e du symbole de mise en garde correspondant IMPORTANT Signale des informations importantes destin es pr venir toute alt ration logicielle perte de donn es ou r sultat d essai non valide peut galement souligner des informations essentielles l optimisation des performances du syst me Thermo Scientific Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ xi Preface xii Remarque Signale des informations d int r t g n ral Conseil Signale des informations utiles qui peuvent simplifier l ex cution d une t che Le Tableau 1 dresse la liste des notices Attention apparaissant dans le present Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ Tableau 1 Description et signification des symboles de mise en garde Symbole Explication Danger g n ral Indique
115. gatifs e Si vous avez d j copi les r glages en polarit ions positifs dans le mode ions n gatifs et que vous ne souhaitez pas effectuer d analyse de spectre de masse de haute sensibilit en polarit ions n gatifs ignorez cette section Allez la section Nettoyage du syst me apr s le r glage et l talonnage la page 40 Si vous n avez pas copi lesdits r glages dans le mode ions n gatifs ou si vous envisagez d effectuer une analyse de spectre de masse de haute sensibilit en polarit ions n gatifs r glez et talonnez le spectrom tre de masse en polarit ions n gatifs comme indiqu dans cette section Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ Thermo Scientific Polarit ions 1 positifs Polarit ions n gatifs Thermo Scientific 3 R glage et talonnage du spectrom tre de masse R glage et talonnage automatiques en polarit ions n gatifs en mode ESI MS et H ESI MS Pour r gler et talonner le spectrom tre de masse automatiquement en polarit ions n gatifs en mode ESI MS ou H ESI MS Cliquez sur le bouton Polarity de la barre d outils Control Scan Mode pour passer le d tecteur en polarit ions n gatifs Cliquez sur le bouton Ion Source Devices pour afficher la bo te de dialogue Ion Source Devices Appliquez une tension de spray de 3 000 V a Dans la colonne Device s lectionnez l option Spray Voltage pour la mettre en surbrillance L intitul de la zone Device
116. gue Jonction de mise p 9 la terre Ligne de transfert des chantillons Jonction LC Pour introduire une solution de r glage et d talonnage vous devez installer une seringue contenant ladite solution dans la pompe seringue Avant de commencer la proc dure vous devez galement mettre le syst me LC MS en veille comme indiqu la section Mise du syst me LC MS en veille la page 9 Pour configurer la pompe seringue de sorte introduire une solution de r glage et d talonnage dans la source ESI H ESI ou HESI II Remarque Pour minimiser les risques de contamination crois e utilisez pour la solution de r glage et d talonnage une autre seringue et une autre ligne de transfert des chantillons que celles employ es pour les chantillons et la solution d optimisation 1 Chargez une seringue propre de 500 pL d environ 420 ul solution de r glage et d talonnage de polytyrosine 1 3 6 Pour la proc dure de pr paration de la solution de r glage et d talonnage voir l Annexe C Pr paration de solutions Remarque Pour minimiser les risques de contamination crois e de l adaptateur veillez
117. guille dans le tube d admission Teflon c Remplissez la boucle d chantillonnage avec la solution de r serpine de la seringue Pour injecter la solution de r serpine dans le flux de solvant LC appuyez sur le bouton bleu Divert Inject Valve sur le panneau avant du spectrom tre de masse TSQ Dans la vue du spectre observez le pic des ions produits de la r serpine m z 195 066 ou celui de l analyte utilis Recommencez la s quence suivante plusieurs fois pour obtenir des injections par boucle cons cutives de r serpine en mode de balayage SRM Patientez environ 1 minute entre chaque injection a Appuyez sur le bouton bleu de la vanne de derivation injection sur le spectrom tre de masse TSQ pour la replacer en position de charge Remplissez la boucle d chantillonnage avec la 64 Guide de d marrage rapide de la gamme TSO Thermo Scientific b C d 5 Acquisition de donn es ESI SRM ou H ESI SRM Acquisition de donn es ESI MS MS ou H ESI MS MS en mode de balayage SRM solution de r serpine 2 pg pl TSQ Quantum Access ou TSQ Quantum Access MAX 200 fg ul TSQ Quantum Ultra TSQ Quantum Ultra AM ou TSQ Quantum Ultra EMR ou de 100 fg ul TSQ Vantage TSQ Vantage AM ou TSQ Vantage EMR Appuyez de nouveau sur le bouton Divert Inject Valve pour injecter la solution de r serpine dans le flux de solvant LC Puis observez la vue du spectre Patientez 1 minute environ avant de proc der l injection suivante
118. guration en vue de l introduction d chantillons par boucle d injection automatique en mode ESI ou H ESI e Configuration de l optimisation l aide d un compos en mode ESI MS MS ou H ESI MS MS e Optimisation automatique l aide d un compos en mode ESI MS MS ou H ESI MS MS 44 Guide de d marrage rapide de la gamme TSO Thermo Scientific 4 Optimisation du spectrom tre de masse l aide d un compos en mode ESI MS MS ou H ESI MS MS Configuration en vue de l introduction d chantillons par boucle d injection automatique en mode ESI ou H ESI Configuration en vue de l introduction d chantillons par boucle d injection automatique en mode ESI ou H ESI Pour introduire le compos par boucle d injection automatique suivez les proc dures ci apres Les raccordements de tubes pour l introduction des chantillons ESI MS et H ESI MS de la pompe seringue dans le flux de solvant depuis une LC sont illustr s la Figure 30 et la Figure 31 Figure 30 Raccordements ESI MS pour l introduction des chantillons par boucle d injection automatique dans le flux de solvant a partir d une LC Depuis la LC Vers le conteneur de r cup ration des liquides Jonction de mise la terre Jonction LC Thermo Scientific Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ 45 4 Optimisation du spectrometre de masse l aide d
119. harge de leur surface la tension la surface des gouttelettes le degr de volatilit du solvant et la force de solvatation des ions sont des facteurs qui ont une incidence sur les processus ESI et H ESI Les gouttelettes de grande taille avec une tension de surface lev e une faible 2 Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ Thermo Scientific 1 Introduction Parmi ces trois modes ESI H ESI et APCI lequel convient le mieux l analyse des chantillons volatilit une forte solvatation des ions une charge en surface faible et une haute conductivit peuvent nuire la qualit de l lectrospray En mode ESI ou H ESI le tampon et la concentration de celui ci ont un effet significatif sur la sensibilit c est pourquoi il est important de choisir judicieusement ces variables Les syst mes solvants hydro organiques contenant des solvants organiques tels que le m thanol Pac tonitrile et Palcool isopropylique sont pr f rables l eau en mode H ESI ou ESI Les acides et les bases volatiles sont utiles mais pour une qualit de r sultats optimale n utilisez pas de sels au dela de 10 mM Les acides et les bases min raux forts sont extr mement corrosifs pour l instrument Pour g n rer un lectrospray stable suivez les recommandations ci dessous e N utilisez pas de sels ou de tampons non volatiles dans le syst me solvant Par exemple vitez d utiliser des phosphates et des sels contenant du sodium ou du p
120. i apr s a Cliquez sur Undo pour restaurer les r glages pr c dents de r glage et d talonnage b Cliquez sur Accept pour recharger les r glages pr c dents de r glage et d talonnage du spectrom tre de masse c Analysez et corrigez les probl mes l origine de l chec de la proc dure d Allez l tape 7 et recommencez le r glage et l talonnage Pour accepter les r sultats du r glage et de l talonnage automatiques cliquez sur Accept Apr s avoir accept les r sultats du r glage et de l talonnage un message vous invite ou non copier les r glages de cette proc dure en polarit ions n gatifs dans le mode de polarit ions positifs e Si vous avez d j r gl et talonn l instrument en polarit ions positifs cliquez sur No Ne copiez pas les r glages du mode ions n gatifs dans le mode ions positifs Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ 39 3 Reglage et talonnage du spectrometre de masse Nettoyage du syst me apr s le r glage et l talonnage e Si vous n avez pas r gl et talonn l instrument en polarit ions positifs cliquez sur Yes Remarque Si vous envisagez d effectuer une analyse de spectre de masse de haute sensibilit en polarit ions positifs effectuez un r glage et un talonnage complets de l instrument en polarit ions positifs e Pour enregistrer les nouveaux param tres d talonnage comme talonnage courant cliquez su
121. iaire raccord Capillaire en silice vert fondue avec gaine de s curit PEEK de 0 0025 po Jonction de mise la terre en acier inoxydable LE f Depuis l arriv e Barre de mise la terre Arriv e de l chantillon Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ 21 2 Configuration de la source d ions pour le r glage et l talonnage du spectrom tre de masse Installation de la sonde ESI H ESI ou HESI II Figure 14 Sonde HESI I install e C ble 8 kV raccorde a la prise haute tension C ble du vaporisateur raccorde a la prise correspondante DS Raccordement de la jonction de mise la terre l arriv e de l chantillon Conduite de gaz gaine raccord bleu j 3 Depuis l arriv e N Conduire de gaz auxiliaire raccord vert Bouton de verrouillag de la sonde Support de jonction a la terre avec jonction de mise a la terre en acier inoxydable 11 Branchez le c ble 8 kV la prise haute tension de l aiguille ESI sur la sonde ESI H ESI ou HESI IT Voir la Figure 10 et la Figure 11 Serrez la bague de blocage sur le connecteur 8 kV 12 Branchez le tube de transfert des chantillons ligne LC la jonction de mise la terre La source ESI H ESI ou HESI II est pr
122. if du kit tableau 110 Solution Optimisation du d bit remarque 34 r glage et talonnage configurer la pompe seringue pour 24 Remarque commander des produits chimiques 111 mode changement de la source d ions 22 Remarques Configuration de r glages g n raux de balayage 62 92 Enregistrement d une m thode de r glage 55 85 Mat riel de r f rence suppl mentaire 46 Minimisation de la contamination de la seringue 25 47 77 Minimisation de la contamination du syst me 4 Optimisation l aide d un compos 46 76 Optimisation de la pression du gaz gaine 31 34 Optimisation du d bit du gaz auxiliaire 34 S lection du mode d entr e appropri 53 83 R serpine Acquisition de donn es APCI 90 Optimisation l aide d un compos exemple APCI 79 ESI et H ESI 49 r serpine pr paration des solutions 114 S Seringue Adaptateur figure 26 46 77 Nettoyage 41 Sigma Chemical Company achat de produits chimiques remarque 111 Solution pr paration PEG glycol poly thyl nique solution 113 Solution d talonnage en masse pr cise 113 114 Solution de r glage et d talonnage de polytyrosine 110 solutions pr paration r serpine 114 solution d talonnage en masse lev e 112 Ultramark 1621 112 Solvant recommandation 5 Sonde APCI Figure 11 Installation 73 124 Guide de d marrage rapide de la gamme TSO Retrait 11 Sonde ESI Installation 18 Sonde H ESI figure 19 Installation 18 r glages table
123. ingue pour r glage et talonnage 24 configuration du mat riel pour r glage et talonnage 9 d pose du bo tier Ion Max 14 pr paration de la solution d talonnage en masse lev e 112 pr paration des solutions de r serpine 114 Produit chimique Solution de r glage et d talonnage de polytyrosine Kit tableau 110 Pr paration partir du stock 111 R capitulatif tableau 111 Solution de r glage et talonnage Pr paration partir du kit 110 Solution de r serpine pr par e partir du stock 113 produits chimiques CS Bio Company remarque 111 commander remarque 111 Sigma Chemical Company remarque 111 Raccordement Figure 26 Injection automatique par boucle APCI figure 76 88 ESI figure 45 H ESI ou HESI I figure 46 Injection directe ESI figure 24 Injection directe H ESI figure 25 Injection par boucle manuelle APCI figure 88 ESI figure 58 Reference 26 Vanne de derivation d injection Injection automatique par boucle figure 47 77 Injection par boucle manuelle figure 59 89 Vanne de derivation d injection figure 48 78 Guide de d marrage rapide de la gamme TSO 123 Index S Reglage et talonnage Automatisation procedure 35 Etalonnage en haute r solution 105 Etalonnage en masse lev e 97 EZ Tune 27 Ions positifs de la polytyrosine figure 33 Masse pr cise 105 106 Polarit ions n gatifs 38 Polytyrosine solution Pr paration 110 R capitulatif tableau 111 R capitulat
124. iquez sur Accept Cliquez sur le bouton Instrument Method Development Workspace pour afficher l espace de travail Instrument Method Development Workspace Dans la vue Define Scan voir la Figure 75 s lectionnez 1879 960 dans la zone Center Mass situ e sous la zone Scan Range Cliquez sur Apply Recommencez les op rations de l tape 5 l tape 12 pour le pic Ultramark m z 1879 960 Lintensit du signal doit tre sup rieure 1 5 x 10 unit s Cliquez sur onglet Q1 de la vue Device S lectionnez l option Q1 DC Offset Ajoutez 0 2 la valeur de la masse 995 383 et entrez le r sultat dans la zone Value de la masse 1879 960 Cliquez sur Apply Cliquez sur l onglet Q3 de la vue Device S lectionnez l option Q3 DC Offset Ajoutez 0 2 la valeur de la masse 995 383 et entrez le r sultat dans la zone Value de la masse 1879 960 Cliquez sur Apply Cliquez sur le bouton System Tune and Calibration Workspace pour ouvrir l espace de travail System Tune and Calibration Workspace Dans l espace de travail System Tune and Calibration Workspace s lectionnez Ultramark Neg Ions dans la liste Compound Cliquez sur Mass Calib et Both puis cliquez sur Start Une fois l talonnage termin choisissez File gt Save Tune As pour ouvrir la bo te de dialogue Save Tune File Tapez le nom de fichier Ions n gatifs Ultramark TSQTune puis cliquez sur Save Choisissez File gt Save Calibration As pour ouvrir la bo
125. is la LC 6 Ins rez le raccord d aiguille r f rence 00110 22030 dans la vanne de d rivation d injection a Ins rez le tube d admission la ferrule RheFlex et la partie filet e de l amp crou RheFlex voir la Figure 69 dans l orifice 5 de la vanne de d rivation d injection b Serrez manuellement l crou avec pr caution Le spectrom tre de masse est d sormais configur pour l injection par boucle manuelle Passez la section Acquisition de donn es APCI MS MS en mode de balayage SRM Thermo Scientific Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ 89 8 Acquisition de donn es APCI MS MS Acquisition de donn es APCI MS MS en mode de balayage SRM Figure 69 Raccord d aiguille Ferrule RheFlex Tu Tube d admission Teflon Ecrou PEEK RheFlex Acquisition de donn es APCI MS MS en mode de balayage SRM Pour acqu rir un fichier de donn es de r serpine en mode de balayage SRM ae A 1 Dans Tune Master cliquez sur le bouton On Standby de la barre d outils Control Scan Mode en pour mettre le spectrom tre de masse sous tension Veille Al e Si vous souhaitez acqu rir les donn es avec la m thode de r glage actuellement affich e allez l tape 3 e Si vous souhaitez acqu rir les donn es avec une autre m thode que celle affich e ouvrez d abord la m thode de r glage souhait e comme indiqu l tape 2 2 Ouvrez le fichier conte
126. ite de dialogue Save Calibration File S lectionnez le fichier R glage ESI polytyrosine TSQCalib Tapez le nom de fichier Ions n gatifs Ultramark TSQCalib puis cliquez sur Save 104 Guide de d marrage rapide de la gamme TSO Thermo Scientific ES Etalonnage en masse pr cise Outre les proc dures standard de r glage et d talonnage de tous les instruments TSQ vous devez galement effectuer un talonnage en masse pr cise des instruments TSQ Quantum Ultra AM et TSQ Vantage AM pour r aliser la lin arisation de laxe de masse Les proc dures de r glage et d talonnage des TSQ Quantum Ultra AM et TSQ Vantage AM comprennent galement un talonnage en haute r solution pour faciliter l optimisation de la sym trie de pic Vous n avez r aliser le r glage et P talonnage standard et l talonnage en haute r solution Hi Res qu apr s l arr t ou la maintenance du syst me Toutefois vous devez effectuer l talonnage de masse et l talonnage en masse pr cise selon les besoins pour garantir la pr cision de l axe de masse Contenu e Etalonnage en haute r solution e Etalonnage en masse pr cise talonnage en haute r solution Pour obtenir les meilleurs r sultats lors de vos exp riences de masse pr cise optimisez la sym trie de pic Plus le pic est sym trique plus le syst me est en mesure de d terminer le centro de du pic Les syst mes TSQ Quantum Ultra AM et TSQ Vantage AM disposent d une proc
127. l espace de travail Instrument Method Development Workspace 6 D finissez tous les r glages de balayage requis pour l acquisition de donn es SRM a Dans la zone Scan Type de la vue Define Scan situ e dans la partie sup rieure gauche de l espace de travail s lectionnez SRM comme type de balayage b Dans le tableau SRM correspondant v rifiez qu il existe qu une seule r action Entrez la masse de l ion parent 609 281 et la masse des ions produits 195 066 de la r serpine Ou Entrez les masses des ions parents et des ions produits correspondant l analyte utilis Thermo Scientific Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ 61 5 Acquisition de donn es ESI SRM ou H ESI SRM Acquisition de donn es ESI MS MS ou H ESI MS MS en mode de balayage SRM Figure 45 Espace de travail Instrument Method Development Workspace ESI_reserpine TSQTune Quantum Tune Master ESI Instrument Method Development Workspace AutoTune TSOCalib File Workspace View Control ScanParameters Display Setup Help z A EA gt i R ee ou AMNDEA REELS E ia ALN SNS Scan Type Full Scan SIM SRM er aa 0000 Parent Product E can Width l M Mass 1 609 281 195 066 Filename C Xcalibur Data R awfile_01 RAWw Scan Time M 020 4 Sample Name Collision Energy MV 38 i omment Q1 Peak Width I Eu Acquisition Status Acquire
128. l System Tune and Calibration Workspace Auto Tune amp Calib Mass Calib Hi Res Compound Ammoniated PEG n 2 27 Finnigan Factory a AM Calibration Compound v Status 1 NHS5 OCH2CH2 20H 124 0968 NHS OCH2CH2 30H 168 1230 NHS OCH2CH2 40H 212 1492 NHS OCH2CH2 50H 256 1755 2 3 a 5 NHS5 OCH2CH2 6OH 300 2017 6 7 8 9 NHS5 OCH2CH2 7OH 344 2279 ha NHS OCH2CH2 80H 388 2541 NHS OCH2CH2 30H 432 2803 ieee eee ee TE NHSCOCH2CH2 100H 476 3065 x Pen op BERND Start Print Guide de d marrage rapide de la gamme TSO 107 B Etalonnage en masse pr cise Etalonnage en masse pr cise 14 Surveillez les r sultats dans la vue Status Conseil Au d but de l talonnage en masse pr cise l instrument proc de un balayage bref de chaque masse du tableau Calibration Mass pour v rifier que le signal est suffisant Profitez en pour analyser chaque masse et v rifier que la sym trie du pic est correcte Si la sym trie du pic d une masse n est pas ad quate arr tez l talonnage et effectuez une analyse plus approfondie de Pion 15 Une fois l talonnage termin s lectionnez un graphique d optimisation dans la liste situ e sous la zone Status pour afficher les r sultats de l talonnage 16 Cliquez sur Accept pour accepter l talonnage puis enregistrez le fichier d talonnage sous un nom unique 17 V ri
129. la zone Skimmer Offset entrez 0 pour r gler l nergie de collision sur 0 V iii Pour le TSQ Vantage s lectionnez l option Declustering Voltage dans le tableau Device Display pour la mettre en surbrillance iv Dans la zone Declustering Voltage entrez 0 pour r gler l nergie de collision sur 0 V g Definissez la pression de collision i Dans le tableau Device Display s lectionnez l option Collision Pressure pour la mettre en surbrillance ii Dans la zone Collision Pressure entrez 1 5 pour r gler la pression de collision sur 1 5 mTorr h Definissez l nergie de collision i Dans le tableau Device Display s lectionnez l option Collision Energy pour la mettre en surbrillance ii Dans la zone Collision Energy entrez 38 pour r gler l Energie de collision sur 38 eV i Pour appliquer les r glages cliquez sur Apply V rifiez que les valeurs actuelles du tableau Device Display correspondent approximativement aux valeurs d finies Il vous faudra peut tre attendre quelques minutes que la temp rature du capillaire se stabilise la valeur d finie 7 Configurez la pompe seringue de sorte qu elle injecte automatiquement la solution de r serpine dans la boucle d chantillonnage a Choisissez Setup gt Syringe Pump amp Sample Loop pour afficher la bo te de dialogue Syringe Pump and Sample Loop Voir la Figure 35 b S lectionnez l option Off dans la zone Syringe Flow Control pour d
130. le S TSQ Vantage lorsque vous modifiez la temp rature du tube de transfert des ions D pend du compos Le d bit de gaz auxiliaire doit tre sup rieur 0 lorsque le vaporisateur fonctionne pad P P Mode ions n gatifs 6 Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ Thermo Scientific Tableau 4 Directives concernant les r glages LC ESI MS 1 Introduction Comment configurer le spectrom tre de masse pour plusieurs d bits LC Debit de Diametre interieur Tension Temperature du 3 PE m a Gaz gaine Gaz auxiliaire liquide de colonne tu spray capillars unit arbitraire unit arbitraire pL min recommand mm V C lt 10 Capillaire 3000 2500 De200 250 De5a30 Hors tension De 50 100 1 0 3000 2500 De 250 300 De 10 30 De5 10 De 200 400 De 2 1 4 6 3500 2500 De 300 350 De 20 40 De 10 20 gt 400 4 6 4000 3500 350 De 30 75 De 10 40 Mode ions n gatifs Tableau 5 Directives concernant les r glages LC APCI MS D bit de Temp rature du Temp rature du 2 DE Courant de a ae 2 Gaz gaine Gaz auxiliaire 2 liquide capillaire vaporisateur APCI Or bete d charge uL min C C de Corona pA 200 250 350 25 5 4 10 1000 250 450 45 5 4 10 P F Mode ions n gatifs Thermo Scientific Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ 7 ig Configuration de la source d ions pour le r glage et l talonnage du spectrometre de masse Ce chapitre fournit des i
131. le par Optimisation automatique ESI H ESI Figure 40 EST Figure 42 boucle dans le flux LC ou APCI du r glage de analyte utilis Figure 43 Analyse ESI H ESI ou APCI d un analyte pur en solution Perfusion dans le flux LC Analyse ESI H ESI ou APCI d un Chapitre Raccordements avec pompe seringue analyte pur en solution pour analyse d chantillons l aide de instrument TSQ du Guide de connexion de la gamme TSQ Injections par chant Analyse ESI H ESI ou APCI d une ou illonneur automatique de plusieurs solutions dans le flux LC Flux LC avec Injections par chant Analyse ESI H ESI ou APCI d un ou de s paration illonneur automatique plusieurs m langes chromatogra dans une colonne via le phique flux LC amp ey Introduction r guli r e des chantillons dans le spectrom tre de masse Remarque Pour obtenir des sch mas de raccordement suppl mentaires pour d autres combinaisons d introduction des chantillons de sources d ions se reporter au chapitre Raccordements pour l analyse d chantillons l aide de instrument TSQ du Guide de connexion de la gamme TSQ A de fortes concentrations les solutions d optimisation des compos s telles que la solution d chantillon de r serpine peuvent contaminer le syst me Pour de meilleurs r sultats utilisez la technique d injection automatique par boucle dans le flux LC pour introduire les solutions d optimisation dans le spectrom tre de masse Lors d
132. liquez sur le bouton Display TIC de la barre d outils Control Scan Mode pour lancer l enregistrement du courant ionique total dans la vue graphique situ e dans la partie inf rieure droite de l espace de travail Voir la Figure 46 Figure 46 Type de balayage SRM dans l espace de travail Instrument Method Development Workspace ESI_reserpine ISU lune Quantum Iune Master ESI Instrument Method Development Workspace AutoTune TSQCalib ile Workspace View Control Scan Parameters Display Setup Help ANNRBERMEL Se HA BRA EHE Sa Ss moon 2 can Type Full Scan SIM Same value for all SRM s SRM Scan Width 1 000 H parant proue 1 609 281 195 066 ScanTime 020 H gt Collision Energy M 38 Q1 Peak width M 070 gt Q3Peak wich 070 H Use Tuned Tube Lens Value IV gt Skimmer Offset IV Data Processing IV Q2CID Gas Micro Scans F Average 7 4 13 r Chrom Filter 11 5 1 Bier 65665 SRM 609 CE 38 CT 0 23 A 3 081 1005 195 08 904 804 704 o 4 5 804 f 4 3 1 2 501 v J A a 404 J 304 204 104 0 WS tiaia a To a La iiia EL ET HR Lis Ty 194 6 194 8 195 0 195 2 195 4 miz Thermo Scientific Total lon Current ici Filename C Xcalibur Data Rawfile_01 RAW Sample Name Comment Acquisition Status Status Idle Time min 0 00 Acquire Time Start Continuously se C Scans 10 Pea C Minutes 1
133. lonnage Ultramark 1621 r frig r e se conserve pendant deux mois Pour pr parer la solution m re d Ultramark 1621 1 Obtenir le flacon d Ultramark 1621 du kit Access MAXory 2 Utilisez une pipette pour ajouter 100 ul de produit Ultramark 1621 dans une fiole jaug e de 100 ml Remplissez la fiole jaug e de 100 ml d ac tonitrile A Transf rez la solution dans une bouteille propre et s che WA Fermez la bouteille et secouez le pour m langer la solution 6 Inscrivez sur l tiquette Solution Ultramark 1621 7 Entreposez la solution m re dans un r frig rateur Cette solution est valable pendant six mois Pour pr parer 500 ml de solution d talonnage en masse lev e Ultramark 1621 1 Prenez une bouteille en verre propre de 1 2 Ajoutez 250 ml d ac tonitrile dans la bouteille en verre de 11 3 Introduisez l aide d une pipette 50 ml de solution Ultramark 1621 dans la bouteille en verre de 11 4 Utilisez une seringue de 1 ml pour transf rer 5 ml d acide ac tique glacial dans la bouteille en verre de 11 N utilisez pas de pipette en plastique Ajoutez 200 ml de solution m thanol eau 50 50 dans la bouteille en verre de 1 1 Fermez la bouteille et secouez le pour m langer la solution N A A Inscrivez sur l tiquette Solution d talonnage Ultramark 1621 8 Entreposez la solution d etalonnage dans un r frig rateur Cette solution est valable pendant deux mois
134. n Max S d tail des composants semblables ceux du bo tier lon Max Bloc de verrouillage ESI Prise de verrouillage ESI Barre de mise la terre Leviers de verrouillage du bo tier de la source d ions 2 Bouton de verrouillage de la sonde Prise haute tension de l aiguille Corona 2 vacuation 3 Debranchez le tube de transfert des Echantillons de la sonde APCI Voir la Figure 2 4 Debranchez la ligne du gaz auxiliaire raccord vert de la sonde APCI 5 D branchez la ligne du gaz gaine raccord bleu de la sonde APCI MISE EN GARDE VEILLEZ A NE PAS VOUS BRULER Aux temp ratures de fonctionnement le vaporisateur APCI peut provoquer des br lures graves Ce composant fonctionne g n ralement a une temp rature comprise entre 400 et 600 C Laissez toujours refroidir le vaporisateur 4 temp rature ambiante pendant environ 20 minutes avant de retirer ou de toucher ce composant 6 Retirez la sonde APCI comme suit a Pour desserrer l anneau de serrage de la sonde tournez le bouton de verrouillage de la sonde dans le sens inverse des aiguilles d une montre b Ramenez d licatement la sonde l arriere de l orifice du bo tier de fa on la placer dans le logement qui se trouve au niveau du bloc de verrouillage ESI La tige de guidage du tube de la sonde vite de tordre la sonde jusqu ce que la tige soit align e sur le logement du bloc de verrouillage ESI Une fois la sonde en pl
135. n appuyant sur le bouton noir du manche de la pompe seringue b Retirez la seringue c Retirez l extr mit de l aiguille du tube Teflon de l adaptateur de seringue Voir la Figure 32 Figure 32 Seringue et adaptateur de seringue Jonction LC Raccord Fingertight T_T Pas DIN Ferrule Tube Teflon 46 Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ Thermo Scientific Thermo Scientific 4 Optimisation du spectrom tre de masse l aide d un compos en mode ESI MS MS ou H ESI MS MS Configuration en vue de l introduction d chantillons par boucle d injection automatique en mode ESI ou H ESI 2 Retirez la ligne de transfert des chantillons entre l adaptateur de seringue et la jonction de mise la terre de la source d ions 3 Installez une ligne de transfert des chantillons entre l adaptateur de seringue et la vanne de d rivation d injection a Branchez un tube de longueur ad quate la jonction LC de l adaptateur de seringue b Branchez l autre extr mit du tube dot e d un crou et d une ferrule l orifice 5 de la vanne de d rivation d injection Voir la Figure 33 Figure 33 Raccordement pour injection automatique par boucle dans la vanne de d rivation d injection Depuis la seringue Vers la source d ions Vers le conteneur de r cup ration des liquides Depuis la LC Remarque Pour minimiser les risques de contamination crois e utilisez pour la solution de r glage et d
136. n d crit la section Etalonnage en haute r solution Vous devez pr sent r aliser un talonnage en masse pr cise en vue de la lin arisation de l axe de masse Il mest pas n cessaire d effectuer un talonnage en masse pr cise avant chaque exp rience car dans un environnement stable la d rive de laxe de masse devrait tre insignifiante sur des p riodes moyennes Pour garantir la qualit des donn es cr ez plusieurs chantillons de contr le qualit pour toute la plage de masses Vous pourrez les utiliser afin de d terminer si un r talonnage est n cessaire 106 Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ Thermo Scientific Thermo Scientific 10 11 12 13 B Etalonnage en masse pr cise Etalonnage en masse pr cise Pour effectuer un talonnage en masse pr cise l aide Tune Master effectuez la proc dure automatique de r glage et d talonnage d crite au Chapitre 3 R glage et talonnage du spectrom tre de masse si ce mest pas d j fait Effectuez la proc dure d talonnage en haute r solution comme indiqu la section Etalonnage en haute r solution si ce n est pas d j fait Retirez la solution de polytyrosine de la pompe seringue que vous avez utilis e pour le r glage et P talonnage Retirez la ligne de transfert des chantillons et installez un nouveau tube Remarque Pour minimiser les risques de contamination crois e des solutions d talonnage
137. nant les r glages de la r serpine ou ceux de l analyte utiliser a Cliquez sur le bouton Open File de la barre d outils File Display pour afficher la bo te de dialogue Open b V rifiez que le dossier C Xcalibur methods s affiche S lectionnez le fichier APCI_reserpine TSQTune ou celui correspondant la m thode de r glage voulue c Cliquez sur Open pour ouvrir le fichier Tune Master t l charge les r glages sur le spectrom tre de masse 3 D marrez le flux de solvant a Cliquez sur le bouton AS LC Direct Control de la barre d outils Control Scan Mode pour afficher la vue Inlet Direct Control dans la partie sup rieure droite de l espace de travail Voir la Figure 70 Remarque La proc dure suivante suppose que les bouteilles tiquet es A et B contiennent de l alcool isopropylique et de l eau de qualit LCMS b Configurez la pompe MS Surveyor de sorte qu elle fournisse une solution compos e de 50 d alcool isopropylique et de 50 d eau 400 ul min i Dans la zone Solvents Proportions and Flow Rate de la vue Inlet Direct Control tapez 50 dans la zone A pour indiquer une proportion de 50 de solvant A ii Dans la zone B tapez 50 pour indiquer une proportion de 50 de solvant B iii Dans la zone Flow Rate tapez 400 pour d finir un d bit de 400 ul min 90 Guide de d marrage rapide de la gamme TSO Thermo Scientific 8 Acquisition de donn es APCI MS MS Acquisition de d
138. nde 9 Pour desserrer l anneau de serrage de la sonde tournez le bouton de verrouillage de la sonde dans le sens inverse des aiguilles d une montre 10 Ramenez d licatement la sonde l arri re de l orifice du bo tier de fa on la placer dans le logement qui se trouve au niveau du bloc de verrouillage ESI La tige de guidage du tube de la sonde vite de tordre la sonde jusqu ce que la tige soit align e sur le logement du bloc de verrouillage ESI Une fois la sonde en place et align e sur le logement tournez la de 45 degr s dans le sens inverse des aiguilles d une montre pour la d gager de l encoche Veillez ne pas endommager le tube d chantillonnage en silice fondue ou le manchon de s curit PEEK 68 Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ Thermo Scientific 6 Configuration de la source d ions pour l acquisition de donn es en mode APCI MS MS D pose du bo tier de la source d ions lon Max ou lon Max S 11 Tirez sur la sonde pour lextraire du bo tier de la source d ions 12 Placez la sonde ESI dans son emballage d origine Depose du boitier de la source d ions lon Max ou lon Max S Pour acc der au c ne de balayage ionique et installer l aiguille de d charge de Corona d posez tout d abord le boitier de la source Ion Max ou Ion Max S Remarque D branchez toutes les conduites de liquides externes raccord es au bo tier de la source d ions avant d enlever ce dernier Pour re
139. nformations de configuration du mat riel pour r gler et talonner votre spectrom tre de masse de la gamme TSQ Vous r glez et talonnez en mode ESI ou H ESI avant d acquerir des donn es en mode ESI H ESI ou APCI Contenu e Mise du syst me LC MS en veille e Retrait de la sonde APCI e Retrait du bo tier de source d ions Ion Max ou Ion Max S pour retirer l aiguille de d charge de Corona APCI e Installation du c ne de balayage ionique facultatif e Installation du bo tier de la source Ion Max ou Ion Max S e Installation de la sonde ESI H ESI ou HESI II Mise du systeme LC MS en veille Le systeme LC MS doit tre mis en veille avant le retrait de la source d ions Pour mettre le systeme LC MS en veille 1 Le cas ch ant arr ter le flux de solvant vers la source API comme suit a Sila fen tre EZ Tune n est pas ouverte choisissez D marrer gt Tous les programmes gt Thermo Instruments gt TSQ gt TSQ Tune dans la barre des taches Windows afin d ouvrir cette fen tre Voir la Figure 1 Programs TSQ Log File Viewer T5Q Tune Documents Settings Search Help and Support Run Q Shut Down Windows XP Professional Thermo Scientific Guide de d marrage rapide de la gamme TSO 9 2 Configuration de la source d ions pour le r glage et l talonnage du spectrom tre de masse Mise du syst me LC MS en veille b Choisissez Setup gt Inle
140. ns la zone Syringe Flow Control s lectionnez l option Off puis cliquez sur Apply pour arr ter la pompe seringue Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ Thermo Scientific Marche A Veille A Thermo Scientific 3 R glage et talonnage du spectrometre de masse Nettoyage du syst me apr s le r glage et l talonnage Figure 29 Pompe activ e dans la vue Syringe Pump and Sample Loop Syringe Flow Control C of Flow Rate uL min 5 00 H On Syringe Type Syringe Size C Hamilton Volume pL 500 v Unimetrics Other Syringe ID mm Sample Loop Sample Loop Size uL fo Si n cessaire cliquez sur le bouton On Standby de la barre d outils Control Scan Mode pour mettre le spectrom tre de masse en mode veille a b C Retirez la seringue du porte seringue Soulevez le manche de la seringue tout en appuyant sur le bouton noir du manche de la pompe seringue Retirez la seringue Retirez l extr mit de l aiguille du tube Teflon de l adaptateur de seringue Nettoyez la seringue compl tement avec une solution m thanol eau 50 50 Rincez la conduite de transfert de l chantillon le tube d chantillon et la sonde ESI H ESI ou HESI II d Remarque Le solvant que vous utilisez pour rincer la seringue la conduite de transfert de l chantillon le tube d chantillon et la sonde ESI H ESI ou HESI II d pend du systeme de solvant que vous utilisez pour dissoudre
141. nt l analyte utilis Thermo Scientific Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ 91 8 Acquisition de donn es APCI MS MS Acquisition de donn es APCI MS MS en mode de balayage SRM Figure 71 Espace de travail Instrument Method Development Workspace APCI_reserpine TSQTune Quantum Tune Master APCI Instrument Method Development Workspace AutoTune TSQCalib File Workspace View Control ScanParameters Display Setup Help N A gt lan er ca ARO KK ELO4e NS Ana sos Scan Type Full Scan SIM SRM Same value for all SRM s Parant REI Scan Width IV 1 0000 H an 1 an 603 281 aa 195 066 ie Filename C Xaclibur Data Rawfile_01 RAw Be Scan Tim M 1020 H Sample Name Collision Energy IV 38 Comment Q1 Peak width M 070 zus Acquisition Status Acquire Time Start Continuously Status Idle es N z C Scans Time min 0 00 5 a Use Tuned Tube Lens Value IV Minutes View I Skimmer Offset T Data Processing N 02CID Gas Micro Scans fo y fe is sip Sl Abort S 74738 SRM 609 CE 38 ST 0 10 CR 2 1484 Breakdown Curve of lon 609 3 m z 1005 g Sn 3 Intensity 0 00e 00 Product lons Coll Energy DE Pressure 1 5 mTorr 195 1 miz 38 v 903 100 _ 851 804 E 80 704 u 853 2 603 2 en 8 asd o 60 5 z 504 v J 454 404 3 2 5 BE 40 3 30 14 4 254 204 20 153 103 51 Z 0 T T T T T T T
142. nteneur de r cup ration 6 des liquides EL Raccords d arriv e d chantillons 16 Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ Thermo Scientific 7 Optimisation du spectrom tre de masse en mode APCI MS MS Configuration en vue de l introduction d chantillons par boucle d injection automatique en mode APCI Pour effectuer les raccordements en vue de l introduction des chantillons APCI MS de la pompe seringue dans le flux de solvant partir d une LC 1 Retirez la seringue du porte seringue a Soulevez le manche de la seringue tout en appuyant sur le bouton noir du manche de la pompe seringue b Retirez la seringue c Retirez l extr mit de l aiguille du tube Teflon de l adaptateur de seringue Voir la Figure 56 Figure 56 Seringue et adaptateur de seringue Jonction LC Raccord Fingertight r f rence 00101 18202 r f rence 00101 18081 Ferrule Tube Teflon P N 00101 18196 r f rence 00301 22915 2 Retirez la ligne de transfert des chantillons entre l adaptateur de seringue et la sonde APCI 3 Installez une ligne de transfert des chantillons entre l adaptateur de seringue et la vanne de d rivation d injection a Branchez un tube de longueu
143. on du spectrometre de masse en mode APCI MS MS Configuration en vue de l introduction d chantillons par boucle d injection automatique en mode APC 3 Ex cutez la proc dure d optimisation automatique des r glages pour le compos choisi afin d affiner les r glages du spectrom tre de masse qui d pendent de ce compos 4 Enregistrez la nouvelle m thode de r glage Contenu e Configuration en vue de l introduction d chantillons par boucle d injection automatique en mode APCI e Configuration de l optimisation en mode APCI MS MS e Optimisation automatique l aide d un compos en mode APCI MS MS Configuration en vue de l introduction d chantillons par boucle d injection automatique en mode APCI Pour introduire le compos par boucle d injection automatique suivez les proc dures ci apr s Les raccordements de tubes pour l introduction des chantillons APCI MS de la pompe seringue dans le flux de solvant depuis une LC sont illustr s la Figure 55 Remarque Vous pouvez utiliser l chantillon de r serpine d crit l Annexe C Pr paration de solutions ou le compos utilis dans la pr sente section Figure 55 Raccordements APCI MS pour l introduction des chantillons par boucle d injection automatique dans le flux de solvant partir d une LC 7 ARE Depuis la LC CD Vers le Ll co
144. onn es APCI MS MS en mode de balayage SRM Figure 70 La pompe LC est d sactiv e dans la vue Inlet Direct Control Surveyor MS Pump Surveyor AS Direct Control Panel gt me Solvents Proportions and Flow Rate So 50 Se 0 0 B 50 50 D 0 0 Flow Rate l min 400 0 Pressure Status Pressure bar 0 0 SD 0 0 c Dans la zone du panneau de commande directe cliquez sur gt D marrer pour d marrer la pompe Surveyor MS 4 Cliquez sur le bouton Instrument Method Development Workspace de la barre d outils Control Scan Mode pour ouvrir l espace de travail Instrument Method Development Workspace Voir la Figure 71 Remarque Si vous avez r alis une optimisation a l aide de r serpine comme indiqu au Chapitre 4 les r glages suivants sont s lectionn s par d faut lorsque vous basculez vers l espace de travail Instrument Method Development Workspace 5 D finissez tous les r glages de balayage requis pour l acquisition de donn es SRM a Dans la zone Scan Type de la vue Define Scan situ e dans la partie sup rieure gauche de l espace de travail s lectionnez SRM comme type de balayage b Dans le tableau SRM correspondant v rifiez qu il existe qu une seule r action Entrez la masse de l ion parent 609 281 et la masse des ions produits 195 066 de la r serpine Ou Entrez les masses des ions parents et des ions produits corresponda
145. otassium Si n cessaire pr f rez des sels 4 base d ammonium e Utilisez des syst mes solvants hydro organiques e Utilisez des acides et des bases volatiles e Si possible optimisez le pH du syst me solvant pour l analyte utilis Par exemple si l analyte utilis contient une amine primaire ou secondaire la phase mobile doit tre acide pH compris entre 2 et 5 Le pH acide tend a conserver les ions positifs dans la solution Utilisation du mode APCI MS Thermo Scientific Comme les processus ESI et H ESI le processus APCI est une technique d ionisation douce Il fournit des informations sur les masses mol culaires des compos s de faible polarit dot s d une certaine volatilit En g n ral le mode APCI sert analyser les mol cules de petite taille dont les masses mol culaires ne d passent pas 1 000 u environ Le processus APCI est une technique d ionisation en phase gazeuse Par cons quent les acides et bases en phase gazeuse de l analyte et du solvant jouent un r le important dans le processus APCI Le d bit du solvant entre la LC et le spectrom tre de masse en mode APCI est compris entre 200 et 2 000 ul min Voir le Tableau 5 Vous pouvez utiliser le mode APCI en polarit ions positifs ou ions n gatifs Les mol cules avec des sites basiques produisent un fort courant d ions en polarit ions positifs Les mol cules avec des sites acides tels que les acides carboxyliques et les alcools acides
146. pes ci apr s a Cliquez sur Undo pour restaurer les r glages pr c dents de r glage et d talonnage b Cliquez sur Accept pour recharger les r glages pr c dents de r glage et d talonnage du spectrom tre de masse 36 Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ Thermo Scientific Figure 28 Illustration d EZ Tune pendant le r glage et l talonnage Thermo TSQ EZ Tune EZ Workspace HESI TSQ Factory Calibration TSQCalib File View Control ScanParameters Display Setup Help Be 16677 FULL QIMS ST 0 81 Relative Abundance Thermo Scientific 100 95 90 85 5317821 17849 PS 17919 3 R glage et talonnage du spectrom tre de masse R glage et talonnage automatiques en polarit ions positifs en mode ESI MS ou H ESI MS c Analysez et corrigez les probl mes l origine de l chec de la proc dure d Allez l tape 3 et recommencez le r glage et l talonnage 181 02 181 30 Peak Width FWHM gt o gt b l KIII XSS Mass 180 07 m z OK 0 8 _ Mass 506 19 m z OK Mass 995 38 m z OK ACB FPGA Signature SRC FPGA Signature EIS FPGA Signature 33 V Power Supply 24 Volt aux Supply 24 Volt Protected 15 Y Power Supply 5 V Power Supply Peak Width vs Resolution for 16 14 Resolution Settings 4 14750e 4 4 17290e 4 6 55350e 4 32 7761 24 1042 23 8868 14 9915 4 9242 3 5 Pour accepter les r sultats du r glage et de l talonnage automatiq
147. pons non volatiles suivez les directives ci apr s afin d obtenir des performances optimales e Optimisez la position de la sonde e Installez le c ne de balayage ionique facultatif e R duisez au maximum la concentration des tampons Remarque Si vous utilisez des tampons non volatiles il vous faudra peut tre augmenter la fr quence des interventions de maintenance sur la source d ions Thermo Scientific Guide de d marrage rapide de la gamme TSO 5 1 Introduction Comment configurer le spectrom tre de masse pour plusieurs d bits LC Comment configurer le spectrometre de masse pour plusieurs debits LC Les sondes ESI H ESI et HESI II peuvent g n rer des ions a partir de d bits de liquide compris entre 1 pl min et 1 0 ml min Cette gamme de d bits permet d utiliser diff rentes techniques de s paration LC capillaire LC microbore et LC analytique Une source d ions nanospray facultative est disponible pour les analyses inf rieures au microlitre La sonde APCI peut g n rer des ions partir de d bits de liquide de 50 ul min mais les d bits habituels sont compris entre 0 2 et 2 0 ml min Cette gamme de d bits permet d utiliser les techniques de s paration suivantes LC microbore LC analytique et LC semi pr parative A mesure que vous modifiez le d bit des solvants entrant dans le spectrom tre de masse vous devez adapter plusieurs r glages de ce dernier e En mode ESI r glez les temp ratures du tub
148. proc dure r ussie cliquez sur Accept pour appliquer les r glages au spectrom tre de masse 7 Cliquez sur Save Calib As pour enregistrer le fichier d talonnage Donnez un nom unique au fichier afin de pouvoir rouvrir les fichiers d talonnage ant rieurs et post rieurs ce r glage et analyser les modifications apport es par l talonnage Hi Res aux r glages de instrument Voir la Figure 81 Figure 81 talonnage complet de la haute r solution dans la vue High Resolution Calibration de l espace de travail System Tune and Calibration Workspace Auto Tune amp Calib Mass Calib HiRes AM Caib Gain Both ai 03 Compound Polytyrosine 1 3 6 m Status 15 20 Fine Tuning Mass 508 208 at Width 182 082 11 16 40 Tuning Q3MS at mass 997 398 m z 508 208 11 16 45 Fine Tuning Mass 997 398 at width 0 40 997 398 11 17 46 Fine Tuning Mass 997 398 at width 0 30 30 000 11 18 57 Fine Tuning Mass 997 398 at width 0 20 11 20 13 Fine Tuning Mass 997 398 at Width 0 10 11 21 30 Finished High Resolution Tuning 03 a hs af Open optimization graph of v Save Calib A Print Etalonnage en masse pr cise Avant de commencer les exp riences de masse pr cise talonnez l axe de masse Vous avez d j effectu P talonnage et le r glage automatiques d crits au Chapitre 3 R glage et talonnage du spectrom tre de masse ainsi que l talonnage en haute r solutio
149. ptimiser les param tres d pendant du compos en mode APCI MS MS Passez a la section Optimisation automatique l aide d un compos en mode APCI MS MS 82 Guide de d marrage rapide de la gamme TSO Thermo Scientific 7 Optimisation du spectrom tre de masse en mode APCI MS MS Optimisation automatique l aide d un compos en mode APCI MS MS Optimisation automatique l aide d un compos en mode APCI MS MS Pour maximiser la transmission d ions du compos optimisez le spectrom tre de masse Loptimisation affine les r glages d pendant du compos tels que le courant de d charge la temp rature du capillaire et le d calage de la lentille tubulaire Thermo Fisher Scientific vous recommande d optimiser le spectrom tre de masse uniquement apr s avoir correctement r gl et talonn ce dernier Thermo Scientific Pour optimiser automatiquement le spectrom tre de masse en mode APCI MS MS pour une transition de r serpine de m z 609 281 m z 195 066 1 Dans EZ Tune choisissez Setup gt bouton Compound Optimization pour afficher la boite de dialogue Compound Optimization Voir la Figure 62 Figure 62 Boite de dialogue Compound Optimization Compound Optimization Product Mass Standard Optimization Modes MS Only MS MS MS SEM Optimization Options Custom a ee P Adjust Parent Mass E 609 2810 195 0661 Sample Introduction Manual Loop Injection Syringe Pump Infusio
150. r glage et l talonnage du spectrom tre de masse Installation de la sonde ESI H ESI ou HESI II Installation de la sonde ESI H ESI ou HESI II Pour installer la sonde ESI H ESI ou HESI II 1 Sortez la sonde ESI H ESI ou HESI II de son emballage d origine Inspectez la et nettoyez la si n cessaire Remarque Si la sonde ESI ou H ESI ne dispose pas d un tube d chantillonnage capillaire en silice fondue et du manchon de s curit vous devez suivre la proc dure d installation d un tube d chantillonnage et du manchon de s curit PEEK d crite la section Installation d un nouveau tube d chantillonnage en silice fondue et d un manchon de s curit PEEK du Manuel du mat riel de la source API Ion MAX et Ion MAX S 2 Veillez ce que l anneau de serrage de la sonde soit r gl sur sa position la plus ouverte Voir la Figure 9 Figure 9 Bo tier de la source d ions lon Max S sans sonde API Cable du vaporisateur 8 kV Prise de verrouillage ESI Bloc de verrouillage ESI Ligne du gaz auxiliaire raccord vert Barre de mise a la terre Bouton de u verrouillage Orifice de la sonde de la sonde Anneau de serrage Ligne du gaz de la sonde gaine raccord bleu 3 Ins rez la sonde ESI H ESI ou HESI II dans orifice du bo tier de la source d ions en alignant la tige de guidage voir la Figure 10 et la Figure 12 sur le corps de la sonde moins 45 degr s du bloc de verrouillage ESI
151. r Save Calibration Enregistrer l talonnage Lorsque vous cliquez sur Save Calibration Enregistrer l talonnage le pr c dent talonnage courant devient le nouvel talonnage pr c dent Le TSQ affiche la bo te de dialogue Save As Enregistrer sous 10 Enregistrez le fichier de m thode de r glage a Dans la zone File Name entrez le nom du fichier de m thode de r glage par exemple R glage ESI ions n gatifs polytyrosine TSQTune b Cliquez sur Save pour enregistrer le fichier de m thode de r glage Le spectrom tre de masse est d sormais r gl et talonn en polarit ions n gatifs Vous devez nettoyer le syst me avant d optimiser le spectrom tre de masse avec votre compos Pour nettoyer le syst me consultez la section suivante Nettoyage du syst me apr s le r glage et l talonnage Nettoyage du syst me apres le r glage et l talonnage 40 Cette section d crit le nettoyage du spectrom tre de masse une fois la proc dure de r glage et d talonnage effectu e Pour des r sultats optimaux nettoyez le spectrom tre de masse avant l acquisition de donn es sur Panalyte utilis Pour nettoyer le spectrom tre de masse 1 Arr tez le flux de liquide de la pompe seringue a Dans EZ Tune choisissez Setup gt Syringe Pump amp Sample Loop pour afficher la vue Syringe Pump and Sample Loop dans la partie sup rieure droite de l espace de travail Voir la Figure 29 b Da
152. r ad quate la jonction LC de l adaptateur de seringue b Branchez l autre extr mit du tube dot e d un crou et d une ferrule al orifice 5 de la vanne de derivation d injection Voir la Figure 57 Figure 57 Vanne de d rivation d injection avec raccordement pour injection automatique par boucle Depuis la seringue Vers la source d ions Vers le conteneur de r cup ration mas Depuis la LC des liquides Remarque Pour minimiser les risques de contamination crois e utilisez pour la solution de r glage et d talonnage une autre seringue et une autre ligne de transfert des chantillons que celles employ es pour les chantillons et la solution d optimisation 4 Chargez une seringue Unimetrics propre de 500 ul avec 420 ul de solution chantillon de r serpine 2 pg ul TSQ Quantum Access ou TSQ Quantum Access MAX 200 fg ul TSQ Quantum Ultra TSQ Quantum Ultra AM ou TSQ Quantum Ultra EMR ou de 100 fg ul TSQ Vantage Thermo Scientific Guide de d marrage rapide de la gamme TSO 71 7 Optimisation du spectrometre de masse en mode APCI MS MS Configuration en vue de l introduction d chantillons par boucle d injection automatique en mode APC TSQ Vantage AM ou TSQ Vantage EMR ou de votre analyte Pour la proc dure de pr paration de la solution de r serpine voir Annexe C Pr paration de solutions Remarque Pour minimiser les risques de contamination crois e de adaptateur veillez essuyer l e
153. r l nergie de collision sur 38 eV Pour appliquer les r glages cliquez sur Apply 80 Guide de d marrage rapide de la gamme TSO Thermo Scientific 7 Optimisation du spectrom tre de masse en mode APCI MS MS Configuration de l optimisation en mode APCI MS MS V rifiez que les valeurs actuelles du tableau Device Display correspondent approximativement aux valeurs definies Il vous faudra peut tre attendre quelques minutes que les temp ratures du capillaire et du vaporisateur se stabilisent aux valeurs d finies 7 Configurez la pompe seringue de sorte qu elle injecte automatiquement la solution de r serpine dans la boucle d chantillonnage a Choisissez Setup gt Syringe Pump amp Sample Loop pour afficher la bo te de dialogue Syringe Pump and Sample Loop dans la partie sup rieure droite de l espace de travail Voir la Figure 60 Figure 60 Configuration de l injection automatique par boucle dans la bo te de dialogue Syringe Pump and Sample Loop Syringe Pump amp Sample Loop Syringe Flow Control Off Flow Rate uL min Syringe Type Syringe Size C Hamilton Volume pL 500 Unimetrics C Other Syringe ID mm Sample Loop Sample Loop Size pL 15 Apply Cancel Help b S lectionnez l option Off dans la zone Syringe Flow Control pour d sactiver la pompe seringue e Si vous utilisez une seringue Unimetrics ou Hamilton allez l tape 7c e Si vous nutilisez pas de se
154. re 40 Pour PH ESI la jonction de mise la terre est situ dans le support de jonction de mise la terre sur la sonde H ESI ou HESI I1 Thermo Scientific Guide de d marrage rapide de la gamme TSO 57 5 Acquisition de donn es ESI SRM ou H ESI SRM Configuration en vue de l introduction d chantillons par injection boucle manuelle en mode ESI ou H ESI Figure 40 Raccordements ESI MS pour l introduction des chantillons par boucle d injection manuelle dans le flux de solvant partir d une LC fe s Depuis la LC EEE o es Vers le z conteneur de m r cup ration E a E des liquides OU Jonction de mise a r ap Er ra o j AA m Il U TS N V y ji Y L Pour r aliser les raccordements de tubes en vue d une injection par boucle manuelle 1 Si ce nest pas d j fait ouvrez Tune Master a Cliquez sur D marrer avec le bouton droit de la souris et choisissez Explorer b Naviguez jusqu au dossier C Thermo Instruments TSQ System Programs c Cliquez deux fois sur TSQTune 2 Arr tez le flux de solvant vers la source ESI H ESI ou HESI II
155. rent Plot 1005 Se Mass 195 m z 952 903 851 804 753 704 653 2 J Lu g 604 o 2 662 c 3 E 504 FRE z i 457 S Ss 4 404 353 304 23 203 153 103 E 195 059 3145 90 0 801 50 4618 75 194 0 194 5 195 0 195 5 196 0 196 5 3104 points miz FROM 067 07 01 51 PM Thermo Scientific Remarque Pour plus d informations sur l analyse des donn es acquises l aide du syst me TSQ et de Xcalibur se reporter au guide Thermo Xcalibur Qualitative Analysis User Guide Guide d utilisation de l analyse qualitative Thermo Xcalibur Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ 65 5 Acquisition de donn es ESI SRM ou H ESI SRM Acquisition de donn es ESI MS MS ou H ESI MS MS en mode de balayage SRM 17 Pour int grer le chromatogramme dans le fichier brut que vous venez d acqu rir l aide de la fen tre Xcalibur Qual Browser cliquez sur View Voir la Figure 48 Si vous souhaitez acqu rir des donn es l aide d une source APCI vous devez d abord changer la source API comme indiqu au Chapitre 6 Configuration de la source d ions pour l acquisition de donn es en mode APCI MS MS Figure 48 Injections boucle de r serpine dans la vue Chromatogram haut et donn es en centroide a m z 195 066 dans la vue du spectre bas dans la fen tre Qual Browser FA Qual Browser reserpine_03 Raw Data Mi ile Edit View Display Grid Actions Tools Window Help X SES S e g
156. ringue Unimetrics ou Hamilton allez l tape 7e c Dans la zone Syringe Type s lectionnez l option qui convient Unimetrics ou Hamilton d Dans la zone Syringe Size s lectionnez 500 ou le volume de la seringue dans la liste Volume pour indiquer que le volume de la seringue est de 500 pl Lorsque vous indiquez le type et le volume de la seringue EZ Tune fixe automatiquement lID conrrespondant de la seringue Allez l tape 7f e Si vous n utilisez pas de seringue Unimetrics ou Hamilton indiquez manuellement le diam tre int rieur de la seringue comme suit i Dans la zone Syringe Type s lectionnez l option Other Cette option indique que vous utilisez une seringue autre qu une seringue Unimetrics ou Hamilton elle active la zone Syringe ID ii Dans la zone Syringe Size s lectionnez le volume correspondant la seringue dans la liste Volume iii Dans la zone Syringe ID entrez le diam tre int rieur de la seringue f Dans la zone Sample Loop entrez 5 dans la zone Sample Loop Size pour d finir une capacit de boucle de 5 ul g Pour appliquer ces r glages cliquez sur Apply La pompe seringue est d sormais configur e de sorte introduire dans la boucle d chantillonnage la quantit d chantillon appropri e Thermo Scientific Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ 81 7 Optimisation du spectrometre de masse en mode APCI MS MS Configuration de l optimisation en mode APCI MS MS 8
157. s chantillons voir la Figure 34 b Branchez un tube de longueur ad quate dot d un crou et d une ferrule l orifice 3 de la vanne de derivation d injection voir la Figure 33 Guide de d marrage rapide de la gamme TSO 47 4 Optimisation du spectrom tre de masse l aide d un compos en mode ESI MS MS ou H ESI MS MS Configuration en vue de l introduction d chantillons par boucle d injection automatique en mode ESI ou H ESI c Branchez l autre extr mit du tube dot e d un raccord Fingertight et d une ferrule la jonction de mise la terre de la source d ions voir la Figure 30 Figure 31 et la Figure 34 Figure 34 Ligne de transfert des chantillons entre la vanne de d rivation d injection et la jonction de mise la terre crou en acier inoxydable Raccord Fingertight Jonction de mise la terre r f rence 2522 0066 r f rence 00101 18081 r f rence 00101 18182 Vers la vanne D de d rivation UT o CHI d injection NE Ferrule en acier inoxydable Tube PEEK Ferrule reference 2522 3830 r f rence 00301 22912 P N 00101 18196 9 Installez une boucle d chantillonnage de 5 pl avec des crous et des ferrules entre les orifices 1 et 4 de la vanne de d rivation d injection 10 Installez une ligne de solvant entre le systeme LC et la vanne de d rivation d injection a Branchez un tube de longueur ad quate dot d un raccord et d une ferrule l orifice
158. s cliquez sur Optimize Une fois la proc dure d optimisation termin e cliquez sur Accept Cliquez sur le bouton Instrument Method Development Workspace pour afficher l espace de travail Instrument Method Development Workspace Dans la vue Define Scan voir la Figure 75 s lectionnez 1821 950 dans la zone Center Mass situ e dans la zone Scan Range Cliquez sur Apply Recommencez les op rations de l tape 5 l tape 12 pour le pic Ultramark m z 1821 950 Lintensit du signal doit tre sup rieure 1 5 x 10 unit s Cliquez sur l onglet Q1 de la vue Device S lectionnez P option Q1 DC Offset Ajoutez 0 2 la valeur de la masse 997 389 et entrez le r sultat 2 8 0 2 3 0 la Figure 77 dans la zone Value de la masse 1821 950 Cliquez sur Apply Figure 77 Optimisation du d calage CC Q1 dans la vue Tune Table 91 DC Offset Table Mode Non Flat v SE Tune Mass 1821 950 Value 10 he 1821 950 30 01 DC Offset 0 2 3 4 0 500 1000 1500 2000 2500 3000 Mass m z Cliquez sur Ponglet Q3 de la vue Device S lectionnez P option Q3 DC Offset Ajoutez 0 2 la valeur de la masse 997 389 et entrez le r sultat dans la zone Value de la masse 1821 950 Cliquez sur Apply Cliquez sur le bouton System Tune and Calibration Workspace pour ouvrir l espace de travail System Tune and Calibration Workspace S lectionnez Ultramark Pos Ions dans la liste Compound Voir la Figure 78
159. sactiver la pompe seringue e Si vous utilisez une seringue Unimetrics ou Hamilton allez l tape 7c e Si vous n utilisez pas de seringue Unimetrics ou Hamilton allez l tape 7e c Dans la zone Syringe Type s lectionnez l option qui convient Unimetrics ou Hamilton d Dans la zone Syringe Size s lectionnez 500 ou le volume de la seringue dans la liste Volume pour indiquer que le volume de la seringue est de 500 pl Lorsque vous indiquez le type et le volume de la seringue Tune Master d finit automatiquement l ID de seringue ad quate Allez l tape 7f 50 Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ Thermo Scientific 4 Optimisation du spectrom tre de masse l aide d un compos en mode ESI MS MS ou H ESI MS MS Configuration de l optimisation l aide d un compos en mode ESI MS MS ou H ESI MS MS Figure 35 Configuration de l injection automatique par boucle dans la bo te de dialogue Syringe Pump and Sample Loop Syringe Pump amp Sample Loop Syringe Flow Control Flow Rate uL min Syringe Type Syringe Size C Hamilton Volume pL 500 Unimetrics C Other Syringe ID mm Sample Loop Sample Loop Size uL 5 Apply Cancel Help e Si vous n utilisez pas de seringue Unimetrics ou Hamilton vous devez indiquer manuellement le diam tre int rieur de la seringue comme suit i Dans la zone Syringe Type s lectionnez l option Other Cette option indiq
160. se la terre orifices internes 10 32 0 0253 cm Orifice d bouchant P N 00101 18182 Support de jonction la terre sur la sonde H ESI Ferrule P N 00101 18196 Raccord Fingertight P N 00101 18081 B E mn Ligne de transfert des chantillons tube PEEK 6 Placez la seringue dans le porte seringue de la pompe seringue 7 Appuyez sur le bouton noir du manche de la pompe seringue tout en appuyant sur le manche jusqu ce qu il entre en contact avec le piston Allez la section suivante Configuration pour le r glage et talonnage automatiques 26 Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ Thermo Scientific 3 Reglage et talonnage du spectrometre de masse Configuration pour le r glage et l talonnage automatiques Configuration pour le r glage et l talonnage automatiques Marche Arr t Veille Al o A Thermo Scientific Pour garantir des performances optimales du r glage et de l talonnage automatiques v rifiez que l instrument est correctement configur MISE EN GARDE S il manque d azote le spectrom tre de masse TSQ se met automatiquement hors tension pour viter que l oxyg ne de l atmosph re ne p n tre dans la source d ions La pr sence d oxyg ne dans la source d ions peut tre dangereuse lorsque le d tecteur MS est sous tension De plus si le spectrom tre de masse TSQ se met automatiquement hors tension pen
161. se dome dis etoile ea xi Documentation connexe xi Mises en garde de s curit et autres notices sp ciales xi Nous Contact r ss ss sus sais dee nen xiii Chapitre1 Introduction u een a 1 Parmi ces trois modes ESI H ESI et APCI lequel convient le mieux l analyse des chantillons 2 Utilisation des modes ESI et HEN nn ananas 2 Utilisation du mode APCI MS aan 82 3 Comment introduire les chantillons dans le spectrom tre de masse 4 Quels types de tampon utiliser ss si een 5 Comment configurer le spectrom tre de masse pour plusieurs d bits LC 6 Chapitre2 Configuration de la source d ions pour le r glage et l talonnage du spectrometre de MASSE nn eneinndemnaaign 9 Mise du systeme LC MS en veille 9 Retrait dela Sonde APC sen nenn 11 Retrait du bo tier de source d ions Ion Max ou Ion Max S 14 Installation du c ne de balayage ionique nr ea ce 14 Installation du bo tier de la source Ion Max ou Ion Max S 16 Installation de la sonde ESI H ESI ou HESI IT 18 Chapitre3 R glage et talonnage du spectrom tre de masse 23 Configuration en vue de l introduction d chantillons par perfusion directe 24 Configuration pour le r glage et l
162. selon la m thode ad quate Les fiches techniques sant s curit fournissent un r capitulatif des dangers et de la toxicit de compos s chimiques sp cifiques Elles d crivent galement la manipulation correcte des compos s les premiers secours 4 apporter en cas d exposition accidentelle et les solutions aux d bordements et aux fuites Les fabricants et fournisseurs de compos s chimiques ont l obligation l gale de fournir leurs clients les informations les plus r centes concernant la sant et la s curit sous forme de fiches techniques sant s curit Lire les fiches techniques sant s curit se rapportant chaque produit chimique utilis Des produits chimiques potentiellement dangereux sont utilis s dans les exemples de ce manuel tels que l acide ac tique le m thanol et la r serpine Thermo Scientific Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ 109 C Pr paration de solutions Solution de r glage et d talonnage de polytyrosine 1 3 6 Solution de r glage et d talonnage de polytyrosine 1 3 6 Il existe deux proc dures de pr paration d une solution de polytyrosine 1 3 6 en vue du r glage et de P talonnage du spectrom tre de masse La premi re proc dure d crit la reconstitution d une solution l aide d un flacon de 20 ml r f rence 00301 22925 contenant les quantit s pr pes es des composants de la polytyrosine sous forme de poudre l aspect est celui d un r
163. sont elles dans une chelle de 1 10 e Les hauteurs de pics de polytyrosine sont elles aux alentours de 10 pour le TSQ Quantum Access TSQ Quantum Access MAX et TSQ Quantum Ultra ou de 107 en mode profil pour le TSQ Vantage e Le signal est il stable avec une variation inf rieure 15 pour cent environ entre chaque balayage e Les pics de la solution de r glage et d talonnage sont ils sym triques r solus et non d doubl s Si la r ponse est Oui toutes ces questions le spectrom tre de masse fonctionne correctement en mode QIMS Remarque Vous pouvez modifier les r glages pour cr er un signal correct de la solution de r glage et d talonnage de polytyrosine Vous pouvez r gler la pression du gaz gaine entre 0 et 15 psi le d bit du gaz auxiliaire entre 0 et 5 unit s arbitraires et le d bit de la solution de r glage et d talonnage entre 1 et 15 pl min Si la r ponse est Non l une des questions ci avant effectuez les proc dures de d pannage suivantes puis testez de nouveau le fonctionnement de l instrument e Modifiez la pression du gaz gaine ou le d bit du gaz auxiliaire ou changez le d bit de la solution de r glage et d talonnage e V rifiez que le tube d chantillonnage en silice fondue ne d passe pas de l extr mit de l aiguille ESI 34 Guide de d marrage rapide de la gamme TSO Thermo Scientific 3 Reglage et talonnage du spectrometre de masse R glage et
164. t Rl elo efe BE eier S B KIT RE p o a C eal burdatstresenpine_01 0907101 04 56 24 PM 2 el n Ms ee _ EVID tlt ru 100 27 101 191 396 El RawFile 010807165624 1 07E7 j me ws no file 90 aad KK no file PR pt FRI no file KI no file a 7 l K no file 60 X no file S K no file 29 2 40 30 20 10 0 00 05 10 15 20 25 3 0 35 40 45 50 Time min reserpne_01 1 RT 0 00 AV 1 NL 1083 E T SRM ms2 609 28 42 00 193 57 196 57 1951 100 90 80 e 70 S 60 3 5 2 50 3 2 40 3 30 20 10 0 1936 1938 1940 1942 1944 1946 1948 1950 1952 1954 1956 1958 1960 1952 1964 miz NUM 66 Guide de d marrage rapide de la gamme TSO Thermo Scientific ee 1 Configuration de la source d ions pour l acquisition de donn es en mode APCI MS MS Pour configurer la source d ions en vue de l acquisition de donn es en mode APCI MS MS suivez les proc dures ci apr s Contenu e Depose de la sonde ESI H ESI ou HESI II e Depose du bo tier de la source d ions Ion Max ou Ion Max S e Retrait du c ne de balayage ionique e Installation de l aiguille de d charge de Corona e Installation du bo tier de la source Ion Max ou Ion Max S e Installation de la sonde APCI Depose de la sonde ESI H ESI ou HESI II Pour d poser la sonde ESI H ESI ou HESI II 1 Au besoin arr tez le d bit de solvant vers la source API comme suit a Sila fen tre de r glag
165. t Direct Control pour ouvrir la boite de dialogue Inlet Direct Control c Affichez la page LC et cliquez sur B Arr t pour arr ter la pompe LC N A Vous pouvez conna tre l tat du spectrom tre de masse gr ce au bouton On Standby de la barre nr d outils Control Scan Mode Les trois diff rents tats du bouton On Standby sont illustr s ci contre Arr t 2 Si le spectrom tre de masse est sous tension cliquez sur le bouton On Standby pour le mettre en Veille lll mode veille Lorsque le spectrom tre de masse est en mode veille le TSQ d sactive le gaz gaine le gaz auxiliaire et la haute tension de la source d ions Figure 1 Fen tre EZ Tune affichant le spectrom tre de masse en veille Thermo TSQ EZ Tune EZ Workspace HESI TSQ Factory Calibration TSQCalib File View Control Scan Parameters Display Setup Help ACB FPGA Signature 6 55350e 4 SRC FPGA Signature 6 55350e 4 EIS FPGA Signature 6 55350e 4 33 Y Power Supply 0 0015 24 Volt aux Supply 8 46000e 4 24 Volt Protected 8 46000e 4 15V Power Supply 6 11000e 4 5 V Power Supply 3 05000e 4 XXXXXXXX SAU jee A No spectral data available NUM 16 9 2008 3 00PM _ Le systeme LC MS est d sormais en mode veille vous pouvez retirer la source d ions en toute s curit Passez la section suivante Retrait de la sonde APCI 10 Guide de d marrage rapide de la gamme TSO Thermo Scientific 2 Configuration de la source d ions
166. t charg e de 420 ul de solution de r serpine 2 pg ul TSQ Quantum Access ou TSQ Quantum Access MAX 200 fg ul TSQ Quantum Ultra TSQ Quantum Ultra AM ou TSQ Quantum Ultra EMR ou de 100 fg ul TSQ Vantage TSQ Vantage AM ou TSQ Vantage EMR ou de votre analyte Pour la proc dure de pr paration de la solution de r serpine voir l Annexe C Pr paration de solutions Remarque Pour minimiser les risques de contamination crois e de l adaptateur veillez essuyer l extr mit de l aiguille avec un tissu propre et non pelucheux avant de la r ins rer dans l adaptateur de seringue b Ins rez avec pr caution lextr mit de l aiguille dans le tube d admission Teflon c Remplissez la boucle d chantillonnage avec la solution de r serpine de la seringue Pour injecter la solution de r serpine dans le flux de solvant LC appuyez sur le bouton bleu Divert Inject Valve sur le panneau avant du spectrom tre de masse TSQ Dans la vue du spectre observez le pic des ions produits de la r serpine 4 m z 195 066 ou celui de l analyte utilis 94 Guide de d marrage rapide de la gamme TSO Thermo Scientific 8 Acquisition de donn es APCI MS MS Acquisition de donn es APCI MS MS en mode de balayage SRM 14 Recommencez la s quence suivante plusieurs fois pour obtenir des injections par boucle cons cutives de r serpine en mode de balayage SRM Patientez environ 1 minute entre chaque injection a Appuyez sur le
167. talonnage automatiques en polarit ions positifs en mode ESI MS ou H ESI MS e V rifiez que l entr e du capillaire de transfert des ions est propre e V rifiez que la solution entrant dans la sonde ne contient pas de bulles d air et que les tubes et connecteurs ne pr sentent pas de fuite 6 Modifiez les param tres de balayage afin de v rifier le fonctionnement du spectrom tre de masse en mode Q3 a Dans la boite de dialogue Define Scan Figure 24 s lectionnez Q3MS dans la zone Scan Mode pour activer le mode de balayage Q3 b V rifiez que les param tres de balayage sont identiques ceux d finis pour le mode Q1 c Pour appliquer ces param tres de balayage cliquez sur Apply 7 Observez de nouveau les valeurs du signal de courant d ions normalis dans la vue du spectre Si le spectre r pond aux conditions d finies l tape 5 ci avant le spectrom tre de masse fonctionne correctement en mode Q3MS Vous tes d sormais pr t r gler et talonner le spectrom tre de masse Ne modifiez pas l tat du TSQ et allez la section suivante R glage et talonnage automatiques en polarit ions positifs en mode ESI MS ou H ESI MS R glage et talonnage automatiques en polarit ions positifs en mode ESI MS ou H ESI MS Thermo Scientific Vous tes d sormais pr t r gler et talonner le spectrom tre de masse en mode ESI ou H ESI La proc dure commence par r gler instrument l
168. tique de r glage et d talonnage d crite dans le Chapitre 3 R glage et talonnage du spectrom tre de masse 2 Enregistrez le fichier de r glage sous le nom R glage ESI polytyrosine TSQTune et le fichier d talonnage sous le nom Etalonnage ESI polytyrosine TSQCalib 3 Cliquez sur le bouton Compound Optimization Workspace de la barre d outils Control Scan Mode pour afficher l espace de travail Compound Optimization Workspace 4 A l aide de la liste Device et de la zone Device situ es dans la partie sup rieure droite d finissez les r glages de la source d ions sur les valeurs suivantes e Tension du spray 4000 V e Pression du gaz gaine 0 3 unit s e Pression du gaz auxiliaire 0 unit e Temp rature du capillaire 270 C e Temp rature du vaporisateur HESI IT 0 C e Tension de la lentille tubulaire 70 V e D calage du skimmer 0 V Thermo Scientific Guide de d marrage rapide de la gamme TSO 97 A Etalonnage en masse lev e Polarite ions positifs Polarit ions n gatifs 98 El Pour effectuer un talonnage en masse lev e en polarit ions positifs D finissez le spectrom tre de masse sur la polarit ions positifs V rifiez que le bouton Polarity se trouve en polarit ions n gatifs Perfusez le calibrant Ultramark 1621 un d bit de 1 3 ul min a Chargez une seringue propre de solution d talonnage Ultramark 1621 et ins rez la seringue
169. tirer le bo tier de la source d ions 1 Retirez le tuyau d vacuation du bo tier de la source d ions voir la Figure 50 2 Faites pivoter les leviers de verrouillage du bo tier de la source d ions de 90 degr s pour dissocier le bo tier de la source de son ensemble de montage 3 Retirez le bo tier de la source d ions en le tirant hors de l ensemble de montage 4 Passez la section Retrait du c ne de balayage ionique Figure 50 Bo tier lon Max S d tail des composants similaire au lon Max Bloc de verrouillage ESI Prise de verrouillage ESI Barre de mise la terre Leviers de verrouillage du bo tier de la source d ions 2 Bouton de verrouillage de la sonde Evacuation Thermo Scientific Guide de d marrage rapide de la gamme TSO 69 6 Configuration de la source d ions pour l acquisition de donn es en mode APCI MS MS Retrait du c ne de balayage ionique Retrait du cone de balayage ionique Retirez le c ne de balayage ionique car il n est pas employ lors de l utilisation de la sonde APCI Pour retirer le c ne de balayage ionique 1 Munissez vous d une paire de gants sans talc MISE EN GARDE VEILLEZ NE PAS VOUS BR LER Aux temp ratures de fonctionnement le tube de transfert des ions peut provoquer des br lures graves Ce composant fonctionne g n ralement une temp rature comprise entre 200 et 400 C Laissez toujours refroidir le c ne de balayage ionique
170. ton Divert Inject Valve est Inject Injection comme illustr ci contre cliquez dessus pour le d finir sur l tat Load Charge Dans la vue Acquire Data cliquez sur Start pour lancer l acquisition des donn es dans le fichier reserpine _01 raw Tune Master ajoute la date et l heure num riques au nom du fichier si ce dernier existe d j dans le dossier sp cifi Par exemple C Xcalibur Data reserpine_010502092159 raw Remarque Pour minimiser les risques de contamination crois e utilisez pour la solution de r glage et d talonnage une autre seringue et une autre ligne de transfert des chantillons que celles employ es pour les chantillons et la solution d optimisation Remplissez la boucle d chantillonnage avec la solution de r serpine ou d analyte a V rifiez que la seringue est charg e de 420 ul de solution de r serpine 2 pg ul TSQ Quantum Access ou TSQ Quantum Access MAX 200 fg ul TSQ Quantum Ultra TSQ Quantum Ultra AM ou TSQ Quantum Ultra EMR ou de 100 fg pl TSQ Vantage TSQ Vantage AM ou TSQ Vantage EMR Pour la proc dure de pr paration de la solution de r serpine voir l Annexe C Pr paration de solutions Remarque Pour minimiser les risques de contamination crois e de l adaptateur veillez essuyer l extr mit de l aiguille avec un tissu propre et non pelucheux avant de la r ins rer dans l adaptateur de seringue b Ins rez avec pr caution l extr mit de l ai
171. u Device Display b Dans la vue Optimize Compound Dependent Devices entrez 4 000 dans la zone Spray Voltage afin de r gler la tension du spray sur 4 000 V c De finissez la pression du gaz gaine i Dans le tableau Device Display s lectionnez l option Sheath Gas Pressure pour la mettre en surbrillance ii Dans la zone Sheath Gas Pressure entrez 30 pour r gler la pression du gaz gaine sur 30 unit s d D finissez le d bit du gaz auxiliaire i Dans le tableau Device Display s lectionnez l option Aux Valve Flow pour la mettre en surbrillance ii Dans la zone Aux Valve Flow entrez 10 pour r gler le d bit du gaz auxiliaire sur 10 unit s e Definissez la temp rature du capillaire tube de transfert des ions i Dans le tableau Device Display s lectionnez l option Capillary Temperature pour la mettre en surbrillance ii Dans la zone Capillary Temperature entrez 350 pour r gler la temp rature du capillaire sur 350 C Thermo Scientific Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ 49 4 Optimisation du spectrom tre de masse l aide d un compos en mode ESI MS MS ou H ESI MS MS Configuration de l optimisation l aide d un compos en mode ESI MS MS ou H ESI MS MS f D finissez l nergie de collision CID i Pour le TSQ Quantum Access TSQ Quantum Access MAX et le TSQ Quantum Ultra s lectionnez l option Skimmer Offset dans le tableau Device Display pour la mettre en surbrillance ii Dans
172. u r glage et de l talonnage automatiques en mode ESI ou H ESI la pompe seringue sert souvent a introduire la solution de r glage et d talonnage Vous pouvez utiliser cette technique pour introduire une solution d analyte pur un d bit r gulier en mode ESI H ESI ou APCI 4 Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ Thermo Scientific 1 Introduction Quels types de tampon utiliser Utilisez un raccord en T pour diriger les amp chantillons de la pompe seringue vers le flux LC avec ou sans colonne ils entreront ensuite dans le spectrom tre de masse Cette technique permet d introduire des chantillons un d bit r gulier et des d bits de solvant lev s Il permet tout particuli rement d optimiser les r glages utilisant un analyte sp cifique en mode ESI H ESI ou APCI Cette technique d introduction d une solution d analyte pur un d bit r gulier fonctionne galement en mode ESI H ESI ou APCI Vous pouvez introduire un chantillon contenu dans une seringue dans la boucle de la vanne de d rivation d injection Utilisez la vanne de d rivation d injection pour introduire l chantillon dans le flux LC Pechantillon entrera ensuite dans le spectrom tre de masse Cette technique fonctionne bien pour introduire en direct des analytes purs dans le spectrom tre de masse en mode ESI H ESI ou APCI Elle s av re utile lorsque vous ne disposez que d une quantit restreinte d analyte pur Il est g
173. ue l extr mit du tube d vacuation se trouve au dessus du niveau de liquide du conteneur de r cup ration des liquides Remarque Avant d analyser des chantillons avec la source APCI vous devez passer un mode source APCI dans EZ Tune en choisissant Setup Configuration gt Change Ion Source Changer la source d ions gt APCI Laissez le syst me LC MS en veille et allez au Chapitre 7 Optimisation du spectrom tre de masse en mode APCI MS MS 14 Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ Thermo Scientific ee _ I Optimisation du spectrometre de masse en mode APCI MS MS Ce chapitre d crit le r glage du spectrom tre de masse en mode APCI MS MS L exp rience ci apr s utilise la r serpine mais vous pouvez suivre la m me proc dure quel que soit l analyte Loptimisation de la sensibilit du spectrom tre de masse l aide de l analyte s effectue selon une proc dure de r glage automatique Les r glages suivants ont une incidence sur les performances APCI et la qualit du signal e Courant de d charge e Temp rature du vaporisateur APCI e Pression du gaz gaine e D bit du gaz auxiliaire e Temp rature du capillaire e Amplitude RF de la lentille S TSQ Vantage Tension de d calage de la lentille tubulaire TSQ Quantum Access TSQ Quantum Access MAX et TSQ Quantum Ultra Remarque Le TSQ peut effectuer une optimisation standard ou personnalis e Pendant l optimisation standard le TSQ optimise l
174. ue que vous utilisez une seringue autre qu une seringue Unimetrics ou Hamilton elle active la zone Syringe ID ii Dans la zone Syringe Size s lectionnez le volume correspondant la seringue dans la liste Volume iii Dans la zone Syringe ID entrez le diam tre int rieur de la seringue f Dans la zone Sample Loop entrez 5 dans la zone Sample Loop Size pour d finir une capacit de boucle de 5 ul g Pour appliquer ces r glages cliquez sur Apply La pompe seringue est d sormais configur e de sorte introduire dans la boucle d chantillonnage la quantit d chantillon appropri e 8 D marrez le flux de solvant a Choisissez Setup gt bouton Inlet Direct Control pour afficher la bo te de dialogue Inlet Direct Control Voir la Figure 36 Remarque La proc dure suivante part du principe que les bouteilles tiquet es A et B contiennent respectivement de l alcool isopropylique et de l eau de qualit LCMS b Configurez la pompe MS Surveyor de sorte qu elle fournisse une solution compos e de 50 d alcool isopropylique et de 50 d eau 400 pl min i Dans la zone Solvents Proportions and Flow Rate de la vue Inlet Direct Control tapez 50 dans la zone A pour indiquer une proportion de 50 de solvant A ii Dans la zone B tapez 50 pour indiquer une proportion de 50 de solvant B iii Dans la zone Flow Rate tapez 400 pour d finir un d bit de 400 pl min c Pour d marrer la pompe Surveyor M
175. ues cliquez sur Accept Apr s avoir accept les r sultats du r glage et de l talonnage un message vous invite ou non copier les r glages de cette proc dure en polarit ions positifs dans le mode ions n gatifs e Si vous avez d j r gl et talonn l instrument en polarit ions n gatifs cliquez sur No Ne copiez pas les r glages du mode ions positifs dans le mode ions n gatifs e Si vous n avez pas r gl et talonn l instrument en polarit ions n gatifs cliquez sur Yes Remarque Si vous envisagez d effectuer une analyse de spectre de masse de haute sensibilit en polarit ions n gatifs effectuez un r glage et un talonnage complets de l instrument en polarit ions n gatifs pour obtenir des r sultats optimaux Cette proc dure est d crite la section suivante R glage et talonnage automatiques en polarit ions n gatifs en mode ESI MS et H ESI MS la page 38 e Pour enregistrer les nouveaux param tres d talonnage comme talonnage courant cliquez sur Save Calib Lorsque vous cliquez sur Save Calibration Enregistrer l talonnage le pr c dent talonnage courant devient le nouvel talonnage pr c dent Le TSQ affiche la bo te de dialogue Save As Enregistrer sous Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ 37 3 Reglage et talonnage du spectrometre de masse R glage et talonnage automatiques en polarit ions n gatifs en mode ESI MS et H ES
176. ve pour enregistrer le fichier de m thode de r glage Le spectrom tre de masse est d sormais optimis en mode ESI MS MS ou H ESI MS MS pour la r serpine ou le compos utilis Passez au Chapitre 5 Acquisition de donn es ESI SRM ou H ESI SRM Thermo Scientific Guide de d marrage rapide de la gamme TSO 55 ee _ I Acquisition de donn es ESI SRM ou H ESI SRM Pour acqu rir des donn es l aide de Tune Master vous devez d abord effectuer les op rations suivantes e Une source ESI H ESI ou HESI I install e e Configurer un syst me d introduction des chantillons e Un instrument talonn e Cr er une m thode de r glage pour l analyte utilis Ce chapitre d crit acquisition de donn es l aide de Tune Master en mode ESI SRM et H ESI SRM Lexp rience ci apr s utilise la reserpine mais vous pouvez suivre la m me proc dure quel que soit Panalyte Contenu e Configuration en vue de l introduction d chantillons par injection boucle manuelle en mode ESI ou H ESI e Acquisition de donn es ESI MS MS ou H ESI MS MS en mode de balayage SRM Configuration en vue de l introduction d chantillons par injection boucle manuelle en mode ESI ou H ESI Proc dez comme suit pour introduire l chantillon par injection en boucle manuelle dans le d bit de solvant depuis un LC Les raccords physiques pour l introduction d chantillon ESI par injection en boucle manuelle sont indiqu s dans la Figu
177. vos chantillons Par exemple si vous utilisez une solution tamponn e de haute concentration une solution acide convient Remplissez la seringue d une solution m thanol eau 50 50 ou d un autre solvant ad quat Ins rez avec pr caution l aiguille de la seringue dans le tube Teflon de l adaptateur de seringue Nettoyez la ligne de transfert des chantillons le tube d chantillonnage et la sonde ESI H ESI ou HESI II avec cette solution en appuyant lentement sur le piston de la seringue Retirez l aiguille de la seringue situ e dans l adaptateur de seringue Le nettoyage du syst me est d sormais termin Pour optimiser le r glage l aide d un compos allez au Chapitre 4 Optimisation du spectrom tre de masse l aide d un compos en mode ESI MS MS ou H ESI MS MS Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ 41 M Optimisation du spectrom tre de masse l aide d un compos en mode ESI MS MS ou H ESI MS MS Ce chapitre d crit le r glage du spectrom tre de masse en mode ESI MS MS ou H ESI MS MS l aide d un analyte utilis comme compos de r glage Loptimisation de la sensibilit du spectrom tre de masse l aide de lanalyte s effectue selon une proc dure de r glage automatique Les m thodes de r glage g n r es par le r glage automatique s av rent utiles pour un large ventail d applications Vous pouvez souvent les utiliser sans autre r glage additionnel du spectrom
178. xX Sheath Gas Pressure T x Aux Gas Pressure T X Capillary Temperature T Capillary Offset T AY Tube Lens Offset T lon Guide 7 QO 000 AF Amplitude C X Skimmer Offset X 000 Offset C X Lens 0 Offset C X 00 Offset C 91 Lens 1 1 Offset C AY Lens 1 2 Offset C Ay 01 DC Offset C 7 01 Resolution C Ay 01 Calibration C 2 A a2 AY Lens 2 1 Offset C Lens 2 2 Offset C Lens 2 3 Offset C 7 O2 AF Amplitude C X Collision Pressure X 02 Offset C A 03 Lens 3 1 Offset C Lens 3 2 Offset C Lens 3 3 Offset C 03 DC Bias C H Q3 RF Amplitude C 7 S lectionnez l option Tube Lens Offset puis cliquez sur Optimize Une fois la proc dure d optimisation termin e cliquez sur Accept 8 S lectionnez l option Lens 1 2 Offset puis cliquez sur Optimize Une fois la procedure d optimisation termin e cliquez sur Accept 9 S lectionnez l option Lens 2 1 Offset puis cliquez sur Optimize Une fois la proc dure d optimisation termin e cliquez sur Accept 10 Cliquez sur Ponglet Q3 de la vue Device 11 S lectionnez l option Tube Lens Offset puis cliquez sur Optimize Une fois la proc dure d optimisation termin e cliquez sur Accept 100 Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ Thermo Scientific 12 14 15 16 17 18 19 21 22 Thermo Scientific 13 20 A Etalonnage en masse lev e S lectionnez l option Tube Lens Offset pui
179. xtr mit de l aiguille avec un tissu propre et non pelucheux avant de la r ins rer dans l adaptateur de seringue Tout en maintenant le piston de la seringue en place r ins rez avec pr caution l extr mit de l aiguille dans le tube Teflon de l adaptateur de seringue voir la Figure 56 6 Placez la seringue dans le porte seringue de la pompe seringue 10 11 Appuyez sur le bouton noir du manche de la pompe seringue tout en appuyant sur le manche jusqu ce qu il entre en contact avec le piston Installez une ligne de transfert des chantillons entre la sonde APCI et la vanne de derivation d injection a Rassemblez les raccords n cessaires l installation de la ligne de transfert des chantillons voir la Figure 58 b Branchez un tube de longueur ad quate dot d un crou et d une ferrule l orifice 3 de la vanne de d rivation d injection voir la Figure 57 c Branchez l autre extr mit du tube dot e d un raccord Fingertight et d une ferrule au raccordement d arriv e des chantillons arriv e LC voir la Figure 55 Figure 58 Ligne de transfert des chantillons entre la vanne de d rivation d injection et la sonde APCI crou en acier inoxydable Raccord Fingertight r f rence 2522 0066 r f rence 00101 18195 Vers la vanne de Ann nm gt Vers l entr e LC de d rivation d injection C la sonde APCI Ferrule en acier inoxydable Tube PEEK Ferrule r f r
180. yor MS Pump Surveyor AS Direct Control Panel EF Solvents Proportions and Flow Rate Ai 50 50 C 0 0 B 50 50 OD 00 Flow Rate l min 1000 1000 Pressure Status Pressure bar 155 0 SD 0 1 en A 3 Cliquez sur le bouton On Standby de la barre d outils Control Scan Mode pour mettre le me spectrom tre de masse en mode veille Veille ll 88 Guide de d marrage rapide de la gamme TSO Thermo Scientific 8 Acquisition de donn es APCI MS MS Configuration en vue de l introduction d chantillons par injection boucle manuelle en mode APC 4 Retirez la seringue du porte seringue a Soulevez le manche de la seringue tout en appuyant sur le bouton noir du manche de la pompe seringue b Retirez la seringue c Retirez l extr mit de l aiguille du tube Teflon de l adaptateur de seringue Voir la Figure 67 Figure 67 Seringue et adaptateur de seringue Jonction LC Raccord Fingertight PTIT CH De 1e Ferrule Tube Teflon 5 Retirez la ligne de transfert des chantillons entre l adaptateur de seringue et l orifice 5 de la vanne de derivation d injection Lorifice 5 constitue d sormais l orifice d injection Voir la Figure 68 Figure 68 Raccordement pour injection par boucle manuelle dans la vanne de d rivation d injection i S Or Orifice Boucle Vergle conteneur Vers la source d ions de r cup ration des liquides Depu
181. yte utilis pour pr ciser la nature de l chantillon c Dans la zone Comment tapez un commentaire sur l experience Par exemple tapez SRM APCI 10 pg boucle pour indiquer le mode de balayage le mode d ionisation la quantit d chantillons et la m thode introduction des chantillons Xcalibur inclut le commentaire sur les copies imprim es des donn es d Dans la zone Acquire Time s lectionnez l option Continuously pour indiquer que Pacquisition des donn es est continue jusqu son arr t V rifiez que l tat du bouton Divert Inject Valve de la barre d outils Control Scan Mode est Load Charge Si l tat du bouton Divert Inject Valve est Inject Injection comme illustr ci contre cliquez dessus pour le d finir sur l tat Load Charge Dans la vue Acquire Data cliquez sur Start pour lancer l acquisition des donn es dans le fichier reserpine _01 raw Tune Master ajoute la date et l heure num riques au nom du fichier si ce dernier existe d j dans le dossier sp cifi Par exemple C Xcalibur Data reserpine_010502092159 raw Remarque Pour minimiser les risques de contamination crois e utilisez pour la solution de r glage et d talonnage une autre seringue et une autre ligne de transfert des chantillons que celles employ es pour les chantillons et la solution d optimisation Remplissez la boucle d chantillonnage de solution de r serpine a V rifiez que la seringue es
182. z l aiguille de Corona dans son emballage d origine Si vous souhaitez installer le c ne de balayage ionique en option consultez Installation du c ne de balayage ionique la page 14 Si vous ne souhaitez pas installer le c ne de balayage ionique passez la section Installation du c ne de balayage ionique la page 14 Thermo Scientific Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ 13 2 Configuration de la source d ions pour le r glage et l talonnage du spectrom tre de masse Retrait du bo tier de source d ions lon Max ou lon Max S Retrait du bo tier de source d ions lon Max ou lon Max S Vous devez retirer le boitier de source d ions Ion Max ou Ion Max S pour pouvoir acc der au c ne de balayage ionique et retirer l aiguille de d charge de Corona APCI Remarque Si une source d ions est encore en place dans le boitier d branchez d abord les conduites de liquide externes avant d enlever le boitier de la source d ions amp Pour retirer le bo tier de la source d ions 1 Retirez le tuyau d vacuation du bo tier de la source ions Voir la Figure 3 2 Faites pivoter les leviers de verrouillage du bo tier de la source dions de 90 degr s pour dissocier le bo tier de la source de son ensemble de montage 3 Retirez le bo tier de la source d ions en le tirant hors de l ensemble de montage Rangez le temporairement dans un endroit s r Passez la section suivante Installation du c
183. zone Status Voir la Figure 38 Thermo Scientific Guide de d marrage rapide de la gamme TSQ 53 4 Optimisation du spectrometre de masse l aide d un compos en mode ESI MS MS ou H ESI MS MS Optimisation automatique l aide d un compos en mode ESI MS MS ou H ESI MS MS e Sila proc dure d optimisation s est r alis e sans erreur et que la courbe de dissociation du fragment m z 609 281 est une courbe de Gauss comme la Figure 39 ou une courbe lisse pente positive allez l tape 6 e Si des erreurs sont survenues pendant la proc dure d optimisation ou si la courbe de dissociation de lion m z 609 281 oscille pr sente plusieurs pics ou est excessivement bruiteuse allez l tape 5 Figure 38 Optimisation r ussie comme l indique la zone Status dans la vue Compound Optimization Status 17 Improvement 08 11 41 Optimizing collision energy at 1 0 mTorr 08 11 41 Waiting for the collision gas to stabilize 08 11 41 Constructing the breakdown curve of ion 609 281 08 15 17 Collision Energy Optimization Results 08 15 17 Product lons m z Coll Energy v 08 15 17 195 07 38 08 15 17 Finish compound optimization Figure 39 Courbe de dissociation de la r serpine indiquant l intensit relative des ions produits m z 195 066 par rapport l nergie de collision Breakdown Curve of lon 609 3 m z Intensity 0 00e 00 Product lons Coll Energy Pressure 1 5 mTorr 195 1 miz 38 v 7 c Q

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