REF 30 237 VIDAS® EBV VCA IgM (VCAM)
Contents
1. 4 Homog n iser l aide d un agitateur de type vortex le standard les contr les et les chantillons pour s rum s par du culot 5 La prise d essai du standard des contr les et des chantillons est de 100 ul pour ce test 6 Placer dans l instrument les c nes VCAM et les cartouches VCAM V rifier la concordance des codes couleurs et lettres entre le c ne et la cartouche 7 D marrer l analyse voir Manuel d Utilisation Toutes les tapes sont alors g r es automatiquement par l instrument 8 Reboucher les flacons et les remettre 2 8 C apr s pipetage 9 Les r sultats sont obtenus en 40 minutes environ A la fin de l analyse retirer les c nes et les cartouches de l instrument 10 Eliminer les c nes et cartouches utilis s dans un r cipient appropri bioM rieux SA 14125 F fr 2011 03 RESULTATS ET INTERPRETATION D s le test termin les r sultats sont analys s automatiquement par le syst me informatique L instrument effectue deux mesures de fluorescence dans la cuvette de lecture pour chacun des tests La premi re lecture prend en compte le bruit de fond d la cuvette substrat avant mise en contact du substrat avec le c ne La seconde lecture est effectu e apr s incubation du substrat avec l enzyme pr sente dans le c ne Le calcul de la RFV Relative Fluorescence Value est le r sultat de la diff rence des deux mesures Il appara t sur la feuille de r sultats L2. VCAM La cartouche La cartouche est compos e de 10 puits recouverts d une feuille d aluminium scell e et tiquet e L tiquette comporte un code barres reprenant principalement le code du test le num ro de lot et la date de p remption du coffret Le premier puits comporte une partie pr d coup e pour faciliter l introduction de l chantillon Le dernier puits est une cuvette permettant la lecture en fluorim trie Les diff rents r actifs n cessaires l analyse sont contenus dans les puits interm diaires 2 Diluant chantillon Tampon phosphate NaCI Tween 20 0 05 pH 7 2 BSA 5 g l conservateurs 300 ul Tampon de lavage Tampon Tris NaCI Tween 20 0 25 pH 7 8 conservateurs 600 yl Conjugu Antig ne VCA P18 marqu la phosphatase alcaline en tampon phosphate NaCl pH 6 1 stabilisants prot iques conservateurs 400 pl Cuvette de lecture avec substrat 4 M thyl ombelliferyl phosphate 0 6 mmol l di thanolamine DEA 0 62 mol l soit 6 6 pH 9 2 azoture de sodium 1 g l 300 pl R actif IRRITANT R 36 irritant pour les yeux S 26 en cas de contact avec les yeux laver imm diatement et abondamment avec de l eau et consulter un sp cialiste Pour plus d informations consulter la fiche de donn es s curit disponible sur demande MATERIELS ET CONSOMMABLES NECESSAIRES MAIS NON FOURNIS Pipette embout jetable permettant la distribution de 10
3. autres pr l vements effectu s 2 4 jours apr s le premier chantillon restent n gatifs Etude de concordance Comparaison avec une autre m thode EIA Une tude a t r alis e sur 526 chantillons par un site externe pour tablir la concordance entre le coffret VIDAS EBV VCA IgM et une autre m thode EIA automatis e Les discordances entre les 2 m thodes sont analys es partir du statut clinique EBV des chantillons d fini par le site expert en tenant compte du contexte clinique et de l volution s rologique des patients EIA VCA IgM IgM N gatif 13 owe SR concordance Les r sultats quivoques de chacun des tests VIDAS et EIA ne sont pas pris en compte dans les calculs Sur les 14 chantillons 1 correspond un chantillon s ron gatif 8 correspondent des chantillons de primo infection et 5 correspondent des chantillons d infection ancienne Sur les 13 chantillons 2 correspondent des chantillons s ron gatifs 9 correspondent des chantillons de primo infection et 2 correspondent des chantillons d infection ancienne Sur les 2 chantillons 1 correspond un chantillon s ron gatif et 1 correspond un chantillon de primo infection bioM rieux SA Fran ais 6 VIDAS EBV VCA IgM 14125 F fr 2011 03 Comparaison avec le statut clinique de l chantillon Une tude a t r alis e pour tablir la concordance entre le s
4. cas et des anticorps anti VCA IgG dans pr s de 100 des cas Pendant la phase de convalescence les anticorps anti VCA IgG persistent et environ 95 des individus pr sentent des anticorps anti EBNA IgG 1 2 3 4 5 Les tests VIDAS permettent la d tection des anticorps anti EA IgG et anti VCA IgG VIDAS EBV VCA EA IgG anti VCA IgM VIDAS EBV VCA IgM et anti EBNA IgG VIDAS EBV EBNA IgG bioM rieux SA L interpr tation globale de ces dosages est une aide au diagnostic de la MNI et permet d tablir le stade de l infection voir tableau ci apr s VIDAS VIDAS VIDAS Interpr tation VIDAS EBV VCA EBV EBV EBV r sultats IgM VCA EA EBNA IgG combin s IgG Sujet s ron gatif non infect MNI primo infection d butante 2 MNI primo infection aigu E 1 Sujet s ropositif infection ancienne EBNA IgG isol es 2 5 VCA EA IgG isol es 2 Profil ind termin 2 Absence d anticorps Pr sence d anticorps 1 dans de rares cas on ne d tecte pas d Ac anti EBNA chez le sujet s ropositif ayant eu une infection ancienne 2 contr ler sur pr l vement ult rieur r alis 1 2 semaines plus tard PRINCIPE Le principe du dosage associe la m thode immunoenzymatique par immunocapture une d tection finale en fluorescence ELFA Le c ne SPR usage unique sert la fois de phase solide et de sy
5. in vitro Fabricant Limites de temp rature Utiliser jusque Code du lot Consulter les instructions d utilisation Contenu suffisant pour n tests lt Ek e SE Elf BIOMERIEUX le logo bleu VIDAS et SPR sont des marques utilis es d pos es et ou enregistr es appartenant bioM rieux SA ou Pune de ses filiales Les autres marques et noms de produits mentionn s dans ce document sont des marques commerciales de leurs d tenteurs respectifs D M RIEUX Ml bioM rieux SA RCS LYON 673 620 399 69280 Marcy l Etoile France T l 33 0 4 78 87 20 00 Fax 33 0 4 78 87 20 90 www biomerieux com CE
6. mis en uvre conform ment la l gislation locale en vigueur Fran ais 4 VIDAS EBV VCA IgM LIMITES DU TEST e L interpr tation biologique pour le diagnostic de la MNI doit se faire au minimum sur la base des r sultats des 3 tests VIDAS EBV VIDAS EBV EBNA IgG r f 30 235 VIDAS EBV VCA EA IgG r f 30 236 et VIDAS EBV VCA IgM r f 30 237 e En pr sence de r sultats n gatifs pour les 3 marqueurs VIDAS et d une suspicion de MNI pr lever un deuxi me chantillon une deux semaines plus tard et tester les 2 pr l vements en parall le eLa r ponse positive VCA EA I1gG r ponse non diff renci e ne permet pas d exclure une infection r cente EBV dans le cas d un r sultat n gatif des marqueurs VCA IgM et EBNA IgG e Dans certains cas de fin de MNI aigu p riode transitoire il est possible de rencontrer des anticorps IgG anti VCA EA isol s perte des anticorps IgM anti VCA et apparition tardive des anticorps IgG anti EBNA e Dans de rares cas on ne d tecte pas d anticorps anti EBNA chez le sujet s ropositif ayant une infection ancienne PERFORMANCES 14125 F fr 2011 03 e Dans de rares cas anticorps anti EBNA chez le sujet s ropositif ayant une infection ancienne chez l enfant de moins de 6 mois transmission passive des anticorps maternels anti EBNA IgG chez le sujet transfus e Les caract ristiques de performance de ce test n ont pas t tablies pour une utili
7. 0 pl Gants non talqu s usage unique Pour d autres mat riels et consommables sp cifiques se r f rer au Manuel Utilisateur de l instrument Instrument de la famille VIDAS bioM rieux SA PRECAUTIONS D UTILISATION e Pour diagnostic in vitro uniquement e Pour usage professionnel uniquement Fran ais 2 VIDAS EBV VCA IgM e Ce coffret contient des composants d origine humaine Aucune des m thodes d analyse actuellement connues ne peut garantir de fa on absolue que ces produits ne contiennent aucun agent pathog ne transmissible Il est recommand de les manipuler avec les pr cautions d usage relatives aux produits potentiellement infectieux se reporter au Manuel de S curit Biologique en Laboratoire OMS Gen ve derni re dition Ce coffret contient des composants d origine animale La ma trise de l origine et ou de l tat sanitaire des animaux ne pouvant garantir de fa on absolue que ces produits ne contiennent aucun agent pathog ne transmissible il est recommand de les manipuler avec les pr cautions d usage relatives au produits potentiellement infectieux ne pas ing rer ne pas inhaler Ne pas utiliser les c nes dont le sachet est perc Ne pas utiliser de cartouches visiblement alt r es feuille aluminium ou plastique endommag Ne pas utiliser les r actifs apr s la date de p remption indiqu e sur l tiquette tui Ne pas m langer les r actifs ou consommables de lots di
8. 30 237 VIDAS EBV VCA IgM vca 14125F fr 2011103 Q VIDAS EBV VCA IgM est un test automatis sur les instruments de la famille VIDAS permettant la d tection qualitative des IgM anti VCA dans le s rum humain par technique ELFA Enzyme Linked Fluorescent Assay La d tection de ces anticorps sp cifiques est une aide au diagnostic de la mononucl ose infectieuse MNI INTRODUCTION ET OBJET DU TEST Le virus d Epstein Barr EBV appel galement Human Herpes Virus 4 HHV4 est ubiquitaire Il a t identifi comme l agent causal de la mononucl ose infectieuse MNI Chez les adolescents et les jeunes adultes l EBV peut causer une mononucl ose infectieuse encore appel e la maladie de Pfeiffer fi vre glandulaire ou maladie du baiser Chez les jeunes enfants l infection EBV est le plus souvent asymptomatique La transmission se fait principalement par l interm diaire de la salive En effet la r plication EBV a lieu au niveau de l pith lium oropharyng o les virions sont lib r s dans la salive partir des lymphocytes B infect s Plus de 95 de la population adulte est porteuse du virus Celui ci persistant g n ralement dans l organisme une r activation peut se produire en particulier chez les patients immunod prim s Si dans la population immunocomp tente une r activation de l EBV est asymptomatique elle est par contre associ e des d sordres cliniques avec une morbidit et une mortalit
9. Tous les composants sont stables jusqu la date de p remption indiqu e sur l tiquette tui lorsqu ils sont conserv s dans les conditions pr conis es bioM rieux SA 14125 F fr 2011 03 ECHANTILLONS Nature et pr l vement des chantillons S rum humain tube sec verre ou plastique avec activateur de coagulation et tube avec gel s parateur Il est pr conis chaque laboratoire de valider le type de tube de pr l vement utilis Interf rences li es l chantillon Il n a pas t observ pour ce dosage d influence significative de l h molyse apr s surcharge d chantillons en h moglobine de 0 300 pmol l de monom re de la lip mie apr s surcharge d chantillons en lipides de 0 30 mg ml d quivalent triglyc rides de la bilirubin mie apr s surcharge d chantillons en bilirubine de O 607 mol l Il est n anmoins conseill de ne pas utiliser d chantillons visiblement h molys s lip miques ou ict riques et d effectuer si possible un nouveau pr l vement Pr paration des chantillons Tubes secs attendre la coagulation des chantillons et centrifuger selon les recommandations du fabricant de tubes pour liminer toute pr sence de fibrine Autres tubes se reporter aux recommandations d utilisation du fabricant de tubes Echantillons conserv s congel s apr s d cong lation tous les chantillons doivent tre homog n is s avant analyse Sta
10. a RFV du patient est interpr t e par le syst me VIDAS de la mani re suivante Valeur du test RFV patient RFV standard Cette valeur du test ainsi que l interpr tation figurent galement sur la feuille de r sultat L interpr tation en fonction de la valeur du test est la suivante Valeur Test VT Interpr tation 0 12 lt VT lt 0 18 Equivoque Le diagnostic de la MNI repose sur l interpr tation biologique des r sultats du test en tenant compte du contexte clinique et des r sultats des autres tests VIDAS EBV VIDAS EBV EBNA IgG r f 30 235 et VIDAS EBV VCA EA 1gG r f 30 236 Se r f rer au tableau d interpr tation VIDAS en page 1 de cette notice Il est conseill de contr ler les r sultats quivoques sur un deuxi me pr l vement r alis une deux semaines plus tard CONTROLE DE QUALITE Un contr le positif et un contr le n gatif sont inclus dans chaque coffret VIDAS EBV VCA IgM Ces contr les doivent tre utilis s l ouverture de chaque nouveau coffret afin de v rifier l absence d alt ration des r actifs Chaque calibration doit tre galement v rifi e l aide de ces contr les Pour que l instrument puisse v rifier la valeur des contr les il faut les identifier par C1 et C2 Si la valeur des contr les s carte des valeurs attendues les r sultats ne peuvent tre valid s Remarque Il est de la responsabilit de l utilisateur de s assurer que le contr le de qualit est
11. ations du document NCCLS CLSI EP5 A2 volume 24 number 25 la pr cision intra s rie r p tabilit et la pr cision totale intra lot reproductibilit intra s rie inter s ries inter jours inter calibration inter instruments ont t calcul es Lot 1 R p tabilit Pr cision inter s ries Pr cision inter Pr cision globale instruments Echantillon Indice Ecart CV Ecart CV Ecart CV Ecart CV type type type type Echantillon 1 0 19 0 01 4 5 0 00 0 5 0 02 8 2 0 02 9 6 Echantillon 2 0 94 0 02 2 6 0 01 1 0 0 00 0 0 0 04 3 8 Lot 2 R p tabilit Pr cision inter s ries Pr cision inter Pr cision globale instruments Echantillon Indice Ecart CV Ecart CV Ecart CV Ecart CV type type type type Echantillon 1 0 24 0 01 5 0 0 01 3 7 0 02 9 4 0 03 11 5 Echantillon 2 1 23 0 03 2 7 0 03 2 5 0 00 0 0 0 06 5 2 bioM rieux SA Fran ais 5 VIDAS EBV VCA IgM 14125 F fr 2011 03 Sensibilit Sp cificit Les performances de sp cificit et de sensibilit ont t tablies avec 2 lots de r actif VIDAS EBV VCA IgM partir de 621 chantillons caract ris s pour leur statut EBV des infections anciennes des primo infections d butantes et aigu s des s ron gatifs et comprenant 93 s rums frais Le statut des chantillons a t d termin sur la base des donn es d mographique ge du patient et clinique disponi
12. bilit des chantillons Les chantillons peuvent tre stock s 2 8 C dans des tubes bouch s pendant 2 jours au maximum au del congeler les s rums 25 6 C Ne pas effectuer plus cong lation d cong lation Une tude r alis e sur des chantillons congel s pendant 6 mois na montr aucune influence sur la qualit des r sultats MODE OPERATOIRE Pour des instructions compl tes se r f rer au Manuel d Utilisation de l instrument Saisie des donn es du protocole VIDAS PTC Lors de la premi re utilisation du test et avant de lire les donn es MLE lire le s code s barre situ s en fin de notice l aide du lecteur code barre externe de l instrument Cette lecture permet de transf rer les donn es du protocole VIDAS PTC dans le logiciel de l instrument pour sa mise jour Ces donn es ne doivent tre lues que lors de la premi re utilisation du test Saisie des donn es MLE Note Lors de la premi re utilisation du test saisir le protocole VIDAS PTC codes barres en fin de notice avant de lire les donn es MLE Si les donn es MLE ont t lues avant le protocole VIDAS PTC relire les donn es MLE A l ouverture d un nouveau lot les sp cifications ou donn es usine doivent tre entr es dans l instrument l aide des donn es MLE Si cette op ration n tait pas effectu e avant de commencer les tests l instrument ne pourrait pas diter de r sultats Ces sp cificati
13. bleau ci dessous Nombre Pathologie s rums test s ww o vem o Nombre s rums test s Nombre de r sultats quivoques Nombre r actions crois es Nombre de r sultats quivoques Nombre r actions crois es CV om e Des r actions crois es peuvent tre rencontr es avec certains s rums contenant des anticorps dirig s contre des composants du r actif ou des anticorps dirig es contre d autres pathologies potentiellement interf rentes c est pourquoi les r sultats de ce test doivent tre interpr t s en tenant compte du contexte clinique et des r sultats des 2 autres tests VIDAS EBV VCA EA IgG et VIDAS EBV EBNA IgG bioM rieux SA Fran ais 7 VIDAS EBV VCA IgM Interf rences La notion d interf rence correspond l tude d chantillons positifs dans le test valuer et positifs dans la pathologie potentiellement interf rente La pr sence de ces pathologies potentiellement interf rentes ne doit pas modifier l interpr tation du test valuer 115 chantillons de pathologies potentiellement interf rentes Toxo IgM Ag HBs Rub IgM HBc IgM ANA HCV HIV CMV IgM VZV IgM HAV IgM HSV IgM FR Parvo B19 IgM anti Pal et HHV6 IgM pr sentant des anticorps anti VCA IgM ont t test s Il n y a pas de changement d interpr tation des r sultats du test VIDAS EBV VCA IgM Aucune interf rence avec le test VIDAS EBV VCA IgM n a t obs
14. bles et des r sultats obtenus par le biais des techniques de routine du laboratoire du site expert Population de r f rence pour le calcul de la Populations de r f rence pour le calcul sensibilit de la sp cificit VIDAS EBV VCA IgM Primo infections d butantes et aigu s Infections anciennes et s ron gatifs Les r sultats consolid s sont les suivants Les 17 chantillons trouv s quivoques en VIDAS EBV VCA IgM n ont pas t pris en compte dans le calcul de la sensibilit et de la sp cificit Sensibilit Sp cificit Sensibilit use ui Sp cificit Infections Fe de Population totale infections infections Anciennes S ron gatifs d butantes aigu s totale Positif 160 38 122 9 6 3 N gatif 21 13 8 414 252 162 Total 181 51 130 423 258 165 Vo 88 40 74 51 93 85 97 87 97 67 98 18 Intervalle de 82 79 92 35 60 84 84 61 88 18 96 80 95 96 98 89 94 95 98 95 94 69 99 39 confiance 95 Les r sultats quivoques ne sont pas pris en compte dans les calculs Les primo infections d butantes sont caract ris es par la pr sence d IgM anti VCA et l absence d IgG anti VCA par les tests EIA utilis s en routine par le site expert Sur les 21 chantillons 6 patients ont fait l objet de pr l vements compl mentaires pour 4 d entre eux le second pr l vement a abouti la d tection d anticorps IgM anti VCA Les 2
15. emploi C nes sensibilis s par de l anticorps monoclonal anti IgM humaine souris pH 7 4 BSA 50 g l conservateurs l intervalle de confiance est indiqu sur la carte MLE avec la mention Control C1 Test Value Range C Tampon phosphate pH 7 4 BSA 50 g l conservateurs Indice l intervalle de confiance est indiqu sur la carte MLE avec la mention Control C2 Test Value Range Contr le positif EBV VCA Pool de plasma humain contenant des IgM anti VCA dans un tampon phosphate Pool de plasma humain contenant des IgM anti VCA dans un tampon phosphate Sp cifications des donn es usine n cessaires la calibration du test se r f rer au Manuel Utilisateur pour la lecture pH 7 4 BSA 50 g l conservateurs 1 Notice fournie dans le kit ou t l chargeable sur www biomerieux com techlib L absence d antig ne HBs d anticorps anti VIH1 anti VIH2 et d anticorps anti VHC a t v rifi e Cependant aucun test ne pouvant apporter une garantie absolue ce produit doit tre manipul avec les pr cautions d usage relatives aux produits potentiellement infectieux Le c ne Le c ne est sensibilis au moment de la fabrication par de l anticorps anti IgM humaine souris Chaque c ne est identifi par le code VCAM Utiliser uniquement le nombre de c nes n cessaire et laisser les c nes inutilis s dans leur sachet Refermer compl tement le sachet apr s ouverture Description de la cartouche
16. erv e ELIMINATION DES DECHETS Eliminer les r actifs utilis s ou non utilis s ainsi que les mat riels usage unique contamin s en suivant les proc dures relatives aux produits infectieux ou potentiellement infectieux Il incombe chaque laboratoire de g rer les d chets et les effluents qu il produit selon leur nature et leur dangerosit et d en assurer ou faire assurer le traitement et l limination selon les r glementations applicables REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES 1 Seigneurin JM Infections virus Epstein Barr Encycl M d Chir Editions Scientifiques et M dicales Elsevier SAS Paris tous droits r serv s Maladies infectieuses 8 070 K 10 2001 12 p 2 Fafi Kremer S Seigneurin J M Morand P La mononucl ose infectieuse MNI revisit e Virologie 2007 11 13 26 p 14125 F fr 2011 03 3 H B Jenson Virologic Diagnosis Viral Monitoring and treatment of Epstein Barr Virus Infectious Mononucleosis Current Infectious Disease Reports 2004 vol 6 p 200 207 4 R D Hess Routine Epstein Barr Virus Diagnostics from the Laboratory Perspective still challenging after 35 years Journal of Clinical Microbiology 2004 vol 2 n 8 p 3381 3387 5 K F Macsween and D H Crawford Epstein Barr virus recent advances The lancet Infectious Diseases 2003 vol 3 p 131 140 TABLE DES SYMBOLES Symbole Signification R f rence du catalogue Dispositif m dical de diagnostic
17. ff rents Ne pas utiliser de gants talqu s le talc pouvant entra ner de faux r sultats pour certains tests immunoenzymatiques Les r actifs du coffret contiennent un conservateur azoture de sodium susceptible de r agir avec les tuyauteries en plomb ou en cuivre et de former des azotures m talliques explosifs Il est recommand de rincer l eau tout rejet Le substrat puits 10 de la cartouche contient un agent irritant di thanolamine 6 6 Prendre connaissance de la phrase de risque R et des conseils de prudence S cit s ci dessus Les projections doivent tre trait es avec un liquide d tergent ou une solution d eau de Javel contenant au moins 0 5 d hypochlorite de sodium Se r f rer au Manuel d Utilisation pour liminer les projections sur ou l int rieur de l instrument Ne pas autoclaver de produit javellis e L instrument doit tre r guli rement nettoy et d contamin se reporter au Manuel d Utilisation CONDITIONS DE STOCKAGE e Conserver le coffret VIDAS EBV VCA IgM 2 8 C e Ne pas congeler les r actifs e Laisser 2 8 C les r actifs non utilis s e A l ouverture du coffret v rifier l int grit et la bonne fermeture du des sachet s de c nes Dans le cas contraire ne pas utiliser les c nes e Apr s chaque utilisation refermer compl tement le sachet avec son d shydratant pour maintenir la stabilit des c nes et replacer la totalit du coffret 2 8 C e
18. lev es chez un sujet immunod prim Le diagnostic de la MNI est bas principalement sur les sympt mes cliniques angine fi vre et lympho ad nopathie La s rologie est utilis e pour confirmer le diagnostic de MNI et exclure des pathologies telles que le lymphome et la leuc mie qui peuvent pr senter des sympt mes comparables ceux de la MNI Le syndrome mononucl osique peut galement tre caus par d autres agents pathog nes le cytom galovirus l HHV6 l ad novirus le virus de la rub ole le virus des oreillons le HIV le virus de l h patite A les virus influenza A amp B et toxoplasma gondii Le diagnostic s rologique de la MNI comprend des tests non sp cifiques tels que la d tection des anticorps h t rophiles ainsi que des tests sp cifiques de l EBV Ces derniers reposent sur la d tection des anticorps produits par l h te en r ponse aux diff rents antig nes produits au cours du cycle viral Pendant la phase lytique les antig nes pr coces EA Early Antigen de l EBV sont produits puis les antig nes viraux de la capside VCA Viral Capsid Antigen sont exprim s en m me temps que le g nome viral Durant le cycle latent les antig nes nucl aires d Epstein Barr EBNA Epstein Barr Nuclear Antigen sont synth tis s Lors de la MNI des anticorps h t rophiles apparaissent dans 60 80 des cas des anticorps anti EA dans 70 80 des cas des anticorps anti VCA IgM dans 100 des
19. ons ne sont entr es qu une seule fois pour chaque lot Il est possible de saisir les donn es MLE manuellement ou de fa on automatique en fonction de l instrument se r f rer au Manuel d Utilisation d un cycle de Fran ais 3 VIDAS EBV VCA IgM Calibration La calibration l aide du standard fourni dans le coffret doit tre effectu e louverture de chaque nouveau lot apr s entr e des sp cifications du lot puis tous les 28 jours Cette op ration permet d ajuster la calibration chaque instrument et l volution ventuelle du r actif dans le temps Le standard identifi par S1 sera analys en triple voir Manuel d Utilisation La valeur du standard doit tre comprise dans les limites de RFV Relative Fluorescence Value fix es Si ce n est pas le cas refaire une calibration R alisation du test 1 Sortir uniquement les r actifs n cessaires les laisser 30 minutes temp rature ambiante avant utilisation 2 Utiliser une cartouche VCAM et un c ne VCAM pour chaque chantillon contr le ou standard tester V rifier que le sachet de c nes a t referm compl tement apr s chaque utilisation 3 Le test est identifi par le code VCAM sur l instrument Le standard identifi obligatoirement par S1 doit tre utilis en triple Si le contr le positif doit tre test il sera identifi par C1 Si le contr le n gatif doit tre test il sera identifi par C2
20. sation dans le cadre du don de sang e Les caract ristiques de performance de ce test n ont pas t tablies pour les populations immunod prim es ou immunosupprim es patients apr s transplantation e est possible d avoir une valeur test inf rieure z ro pour certains chantillons n gatifs e Des r actions crois es ou interf rences peuvent tre rencontr es avec certains s rums contenant des anticorps dirig s contre des composants du r actif ou des anticorps dirig s contre d autres pathologies potentiellement interf rentes notamment avec les IgM dirig es contre le CMV et le Parvovirus B19 c est pourquoi les r sultats de ce test doivent tre interpr t s en tenant compte du contexte clinique et des r sultats des 2 autres tests VIDAS EBV VCA EA IgG et VIDAS EBV EBNA IgG Valeurs usuelles Dans les pays occidentaux seulement 5 des adultes restent indemnes de toute infection au virus EBV ainsi les anticorps caract ristiques d une infection ancienne EBNA et VCA IgG atteignent une pr valence de 95 on d tecte uniquement des Les tudes de performances de VIDAS EBV VCA IgM ont donn les r sultats suivants Pr cision 3 chantillons ont t dos s pendant 10 jours raison de 2 s ries par jour et 2 r p titions par s rie avec 2 lots de r actifs sur 3 instruments N 240 L chantillon n gatif varie entre 0 00 et 0 01 A partir de ce protocole inspir des recommand
21. st me de pipetage Les autres r actifs de la r action immunologique sont pr ts l emploi et pr r partis dans la cartouche Toutes les tapes du test sont r alis es automatiquement par l instrument Elles sont constitu es d une succession de cycles d aspiration refoulement du milieu r actionnel Apr s une tape de dilution du s rum les IgM sont captur es par l Ac monoclonal pr sent sur la paroi du c ne Les IgM anti EBV sont d tect es sp cifiquement par de l antig ne VCA P18 conjugu la phosphatase alcaline Lors de l tape finale de r v lation le substrat 4 M thyl ombelliferyl phosphate est aspir puis refoul dans le c ne l enzyme du conjugu catalyse la r action d hydrolyse de ce substrat en un produit 4 M thyl ombelliferone dont la fluorescence mise est mesur e 450 nm La valeur du signal de fluorescence est proportionnelle la concentration d anticorps pr sents dans l chantillon A la fin du test un indice est calcul automatiquement par l instrument par rapport au standard S1 m moris puis imprim Fran ais 1 VIDAS EBV VCA IgM COMPOSITION DES REACTIFS DU COFFRET 30 TESTS 14125 F fr 2011 03 30 cartouches EBV VCA Pr tes l emploi 30 c nes EBV VCA IgM 1x30 IgM 1 x 0 6 ml liquide Indice 1 Contr le n gatif EBV 2 1 x 0 6 ml liquide Standard EBV VCA IgM S1 1 x 1 6 ml liquide 1 Carte MLE Master Lot Entry SPR Pr ts l
22. tatut EBV d fini par le site expert et le statut global obtenu partir des r sultats des 3 r actifs VIDAS EBV VCA EA lgG VIDAS VCA IgM et VIDAS EBNA IgG Les statuts cliniques EBV et les interpr tations globales des 3 param tres VIDAS ont t d finis par le site expert en tenant compte du contexte clinique et de l volution s rologique des patients Statut s rologique R f rence Primo infections totales Infections anciennes totales S ron gatifs Primo Primo Infections VCA IgG infections infections anciennes isol d butantes aigu s S ron gatifs 159 6 3 0 0 Primo infections d butantes et 4 37 120 0 5 aigu s Statut s rologique Infections anciennes 0 0 0 224 4 VIDAS VCA EA IgG isol 0 5 3 12 EBNA IgG isol 2 0 0 Ind termin 1 5 10 1 Total 165 48 126 236 21 concordance globale 92 62 Les statuts EBV ind termin s 4 03 ne sont pas pris en compte dans les calculs REACTIONS CROISEES ET INTERFERENCES R actions crois es La notion de r action crois e correspond l tude d chantillons n gatifs dans le test valuer et positifs dans la pathologie potentiellement interf rente La pr sence de ces pathologies potentiellement interf rentes ne doit pas modifier l interpr tation du test valuer Les r sultats quivoques ne sont pas pris en compte dans l analyse Les r sultats des 181 chantillons test s sont pr sent s dans le ta
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