wdrld health organ izatiün organisation mondiale de la sante
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1. I O 10 poids vol dans une solution de Hanks additionn d antibiotiques pour l inoculer des souris selon la m thode classique c Pr l vement d un petit fragment de mati re c r brale pour l r alisation d un test immuno enzymatique Rapid Rabies Enzyme Immuno Diagnostic 2 Kaplan M M amp Koprowski H ed L rage technique de laboratoire 3e ed Publication No 23 OMS Gen ve 1973 Perrin P Rollin P E et Sureau P A rapid rabies enzyme immuno diagnosis RREID a useful and simple technique for the routine diagnosis of rabies In J biol stand 1986 14 217 222 WHO Rab Res 88 27 page 10 ANNEXE II DUREE DE CONSERVATION DU PRELEVEMENT DANS LE NECESSAIRE La conservation d la mati re c r brale dans la paille est bien meilleure que celle observ e lors de l envoi de la corne d Ammon plac e dans de la glyc rine 50 p 100 Sur 130 analyses immunoflunrescence o culture de neuroblastomes r alis es apr s conservation du pr l vement de mati re c r brale contenu dans le fragment de paille pendant huit jours soit 20 C soit 37 C les r sultats d diagnostic ont t concordants dans 100 des cas avec celui r alis sur la corne d Ammon fraiche pr lev apr s ouverture compl te de la bo te cr nienne du m me animal En revanche lors de onservation d ur fragment de corne d Ammon dans la glyc rine 50 sans autre protection et en particulier sans la2. obtenus sur demande crite adress e au Chef du Service de Sant publique v t rinaire Division des Maladies transmissibles Organisation mondiale de la Sant 1211 Gen ve 27 Suisse ira Far Barrat J t Blancou J Centre collaborateur OMS pour la recherche t gestion en mati re de lutte contre les zoonoses Centre National d Etudes sur la Rage et la Pathologie des animaux sauvages B P No 9 F 54220 Malz viile France This document is not issued to the general publi and all rights are reserved by the World Health Organization WHO The document may not be reviewed abstracted quoted reproduced or translated in part or in whole without the prior written permission of WHO No part of this document may b stored in a retrieval system or transmitted in any form or by any means electronic mechanical or other without the prior written permission of WHO The views expressed in documents by named authors are solely the responsibility of those authors Ce document n est pas destin tre distribu au grand public et tous les droits y aff rents sont r serv s par l Organisation mondiale de la Sant OMS ne peut tre comment r sum cit reproduit ou traduit partiellement ou en totalit sans une autorisation pr alable crite de l OMS Aucune partie ne doit tre charg e dans un syst me de recherche documen taire o diffus e sous quelque forme ou par quelque moyer que e soit lectroniqu
3. protection conf r e par la paille 18 des examens positifs sur un pr l vement frais se sont av r s n gatifs apr s 8 jours de conservation 37 C WHO Rab kes 88 27 page 11 ANNEXE III PRIX DE REVIENT DE 100 NECESSAIRES COMPLETS D EXPEDITION 100 bo tes 4 100 pochettes enveloppes 200 sachets plastiques 200 tubes plastiques 200 paiiles a so 4 roro Le liquide Nancy 871 100 Total pour 100 n cessaires Soit au total 703 FF pour 100 n cessair s h cessaires ou 7 FF par approximativement US 1 30 den 245 FF 97 FF 97 FF 98 FF 36 FF 100 FF 203 FF n cessaire WHO Rab Res 88 27 page 12 ANNEXE TV FORMULAIRE D ENVOI PRELEVEMENTS DE TISSUE NERVEUX POUR LE DIAGNOSTIC DE LA RAGE Nom de la personne ayant r alis le pr l vement s s s soa a so 4 4 4 institut ou service ee CE de cie de ge ee D UE 4 ei 0 0 ete D Cac me ane DE Pt de QE eee Let Localit aaa poa raan re Ge de dinar er Mn r PPOVINCEE HR es Le de en 7 4 Num ro de formulaire RC a a eee Dabe aaaea A bon PA Ver e E a A md N n re 2 Tube No 1 Tube No 7 Information Reference Reference bte T t 1 F p ce animale ane RE a a Date laquelle l animal est mort ou Date laquelle il a t tu _ die Ve m Aii e ui Principaux sympt mes observ s avant la mort CORTE Endroit d o provient l animal Nom du pr
4. 8 27 page B ANNEXE I METHODES DE DIAGNOSTIC UTILISABLES SUR LE PRELEVEMENT CONTENU DANS LE NECESSAIRE Dans un premier temps le cylindre de mati re c r brale est retir du morceau de paille l aide de pinces et d une tige de verre utilis e comme piston voir figure 8 Figure 8 Le pr l vement est ensuite lav pendant 10 mn dans une solution tamponn e ex PBS pour liminer la gly rine Trois techniques sont ensuite applicables sur le fragment de mati re c r brale aingi recueilli et lav a R alisation des calques pour le test d immunofluorescence directe L chantillon est pos sur un abaisse langue et essuy avec un second abaisse langue de boig N 1 Les empreintes sont alors r alis es La coloration suit le sch ma classique b Broyat pour inoculation des cellules neuroblastome murine N24 ou des souris Apr s r alisation des calques l chantillon est broy 50 vol vol dans du s rum de veau nouveau n pour l inoculation de Neuroblastomesg N24 Kaplan M M amp Koprowski H ed La rage technique de laboratoire 3e ed Publication No 23 OMS Gen ve 1973 2 Portnoi D Favre 3 amp Bureau P Use of neuroblastoma cells MNE for the isolation of street rabies virus from field specimens in Rabies Information Exchange Memorandum Centres for Disease Control Atlanta USA 1982 35 36 WHO Rab Res 88 27 page 9 Annexe
5. WORLD HEALTH ORGANIZATION ORGANISATION MONDIALE DE LA SANTE CT a DISTR LIMITED DISTR LIMITEE WHO Rab kRes 88 27 ORIGINAL ANGLAIS T CHNIQU SIMPLIFIEE DE PRELEVEMENT DE CONDITIONNEMENT ET D EXPEDITION DE MATIERE CEREBRALE POUR LE DIAGNOSTIC DE RAGE Ce document d crit le mode d emploi d un n cessaire destin au recueil la conservation t l exp dition dans des conditions simples et pratiques de pr l vements c r braux destin s au diagnostic de la rage Les pr l vements recueillis au moyen de ce n cessaire permettront aux laboratoires d effectuer les preuves de diagnostic de la rage par les techniques usuelles Jusqu pr sent ce n cessaire a t produit en petites quantit s et titre exp rimental par le Centre collaborateur OMS pour la recherche et gestion en m ti re de lutte contre les zoonoses Centre national d Etudes sur la Rage et la Pathologie des animaux Sauvages Malz ville France Le Centre collaborateur de l OMS voir adresse ci dessous appr cierait de recevoir une confirmation de votre int r t pour ce n cessaire avec une estimation de vos besoins Cette information aidera d finir la n cessit d une production grande chelle Ce document s adresse au personnel des laboratoires de diagnostic de la rage et des services sanitaires et v t rinaires charg s du recu il des chantillons sur le terrain Des exemplaires suppl ment ir s peuvent tre
6. contenant les pr l vements envelopp s ang la cellulose et tiquet s sont plac s dans le sachet plastique sur lequel sont port s le ou les num ros de r f rence c Le sachet plastique st alors plac dans la boite de plastique grise Cette derni re est referm e et le syst me de fermeture recouverte par d s morceaux de rubart WHO Rab Res 88 27 page 7 d La bo te grise est ensuite plac e dans une enveloppe sp ciale matelass e c est dire garnie int rieurement d une seconde enveloppe plastique contenant des bulles d air destin e prot ger le n cessaire d ventuels chocs en cours de transport voir figure 7 Figure 7 Cette envelop eut tre achemin e par les services postaux ordinaires moins la r glementation nationale ne s y oppose e Les comm moratifs complets correspondant au ou aux pr l vement s sont inscrits sur un formulaire d envoi voir Annexe IV plac dans l enveloppe Une copie des comm moratifs peut tre envoy e s par ment au laboratoire Le n cessaire est expadi au laboratoire de diagnostic par les voies les plus rapides ex poste a rienne En cas d attente le n cessaire dans s n enveloppe ferm e doit tre conserv 4 C f Tout le mat riel ayant servi au pr l vement ou ayant t en contact possible avec des mati res virulentes est d sinfect autoclave ou ammonium IV 5 p 100 ou d truit par incin ration WHO Rab Res 8
7. e m canique ou autre sans une auto risation pr slabie crite de l OMS Les opinions exprim es dans les documents par des auteurs cit s nomm ment n engagent que lesdits auteurs WHO Rab Res 88 27 page l LE N CESSAIRE TI contient voir figure 1 2 pailles pour la collecte des pr l vements tubes munis de bouchons de plastique contenant la solution de conservation des tampons de cellulose capable d absorber la totalit du liquide en cas de rupture accidentelle des tubes un sac de plastique pouvant tre ferm herm tiquement destin contenir les tubes et la cellulos _ une bo te de plastique munie d un syst me de fermeture tenons recouverts d papier adh sif afin d viter toute r ouverture accidentelle _ une enveloppe mat lass e c est dire garnie int rieurement d une couche plastifi s contenant des bulles d air __ un mod le de formulaire d envoi adapter aux conditions locales voir Annexe IV Le prix de revient du n cessaire est donn titre indicatif en Annexe IJI De mani re poser un diagnostic s r les tapes suivantes doivent tre sorupuleusement respect es lors de j utilisation de ce n c ssaire 2 REALISATION DU PRELEVEMENT Il a t d montr que les r sultats des m thodes de diagnostic de la r g r alis rs sur un cylindre de mati re c r brale pr lev par le trou occipital concordaient avec ceux obtenus partir de
8. la corne d Ammon obtenus apr s ouverture de la bofte cr nienne et dissection de l enc phale voir Ann xe Il Barrat J e et Halek H Simplified and adequate sampling and preservation techniques for rabies diagnosis in Mediterranean countries In Comp Immun Microb Inf Dis 1986 9 1 WHO Rab Res 88 27 page 3 Le pr l vement de ce cylindre doit tre r alis de la fa on suivante SENA 1 a Acc s la bo te cr nienne _ gi le cadavre de l animal suspect est entier recourber la t te vers le bas et inciser transv rsalement les muscles cervicaux jusqu aux vert bres en arri re de la protub rance occipitale externe voir figure 2 Figure Tout en laissant le t te du chien dans cette position ouvrir l articulation atlanto cecipitale en incisant la membrane atlanto occipitale dorsale puis les m ninges si la t te a d j t s par e du corps le pr l vement est ex cut dans les m mes conditions par le trou occipital d gag lors de la d capitation b Pr l vements Le pr l vement est r alis en introduisant avec une l g re rotation la pailie par l trou occipital en direction d un des yeux voir figure 3 Attention toute manipulation d un cadavre suspect de rage se fera avec des gants usage unique et si possible des lunettes et un masque Le personnel sera de pr f rence vaccin contre la rage n cas de contaminations accidentelles projection de ma
9. opri taire Parsonne s expnos e s oui ou non o Autre s animal aux expos s aui ou non Date de r alisation du pr l vement Endroit o le pr l vement a t fait Date d anvoi Conditions de stockage si lL envoir ne suit pas imm diatement le pr l vement on Y PEUT a A Autres information s a me em de mn cd AT A PAPE PT N
10. re Le liquide st constitu pour 1000 ml de 500 ml de glyc rine pure prolabo norm pur ND de 100 mg de M rthiolate Thiomersal ou Thimerosal o Ethyl mercurithichenzoate de sodium et d eau bidistill e pH7 qep 1000 ml Cette composition pourrait voluer en fonction des r sultats des tudes compl mentaires en cours Si la pr paration de ce liquide est envisag e localement le laboratoire producteur doit s assurer de la qualit des produits utilis s en particulier de la glyc rine pure WHO Rab Res 88 27 page 6 11 est tr s important que le cylindre de tissu c r bral soit laiss dans le paille pour s assurer de la sensibilit des m thodes de diagnostic utilisables ult rieurement nre Cani voir Annexe I a a e D Le tube dans lequel ge trouve le morceau d paille rempli de mati re c r brale net alors referm herm tiquement voir figure 6 Pour plus de s curit 1e bouchon est entour de ruban adh sif Figure 6 Le num ro de r f rence du pr l vement est r port sur le tube Le second tube peut tre utilis de la m me fa on pour r aliser soit un second pr l vement sur le m me animal soit un pr l vement partir d un autre animal 4 EXPEDITION a Les tubes sont envelopp s dans des tampons de e llulose plac s en quantit telle qu ils puissent absorber la totalit du liquide conservateur en casa de rupture accidentelle des deux tubes b Les tubes
11. ti re c r brale ou salive dans l oeil ou contact de ces mati res potentiellement virulentes avec les l sions cutan es m me superficielles consultez un centre de traitement antirabique WHO Rab Res 88 27 page Figure 3 Sous cette incidence le cylindre de mati re c r brale int ress le bulbe rachidien la base du cervelet la r gion de la corne d Ammon puis le cortex c r bral voir figure 4 Ammon s Horn TEE he MSA be s 1 Cortex Cerebellun x Medulln obl rngala Ea Atlas bone Wi Occipital foramen Figure 4 Le cylindre de mati re c r brale s engage tout seul dans la paille il est inutile d aspirer l aide d une appareil qui serait contamin ni bien entendu la bouche WHQ Rab Res 88 27 page 5 3 CONDITIONNEMENT a Une fois le pr l vement r alis la paille contenant le cylindre de tissue nerveux est retir e de la cavit c r brale Un tube renfermant la solution de a est ouvert l extr mit de la paille qui est coup e au dessus du tube La longueur du segment de paille doit tre telle que le bouchon puisse tre repouss fond voir figure 5 La composition du liquide de conservation est donn e au bas de la page Figure 5 solution Nancy 871 base de glyc rine et autres produits chimiques dont l efficacit contre les contaminations bact riennes et l innocuit vis vis du virus de la rage ont t pr alablement test s au laboratoi
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