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1. 8 Valeur nutritive Le Tableau 01 pr sente les valeurs nutritives pour le basilic dans ces deux cas frais et s ch selon la source Sant Canada Fichier canadien sur les l ments nutritifs 2005 Vitamine K Le basilic s ch est une excellente source de vitamine K Fer Une portion de basilic s ch est une source de fer pour l homme mais pas pour la femme car leur besoin respectif en fer est diff rent 34 Le basilic est riche en calcium et phosphore Vitamines A C etc 36 9 Classification taxonomique 9 1 Classification classique Voire Tableau 02 9 2 Classification phylog n tique Voire Tableau 03 14 Chapitre G n ralit s sur le basilic Tableau 01 Pr sentation de valeur nutritive de basilic frais et s ch 34 Que vaut une portion de basilic Poids volume Frais 15 mI 2 5 g S ch feuilles 15 ml 2 g Calories 0 5 5 0 Prot ines 0 7 g 0 3 g Glucides 0 1 g 1 3 g Lipides 0 0 g 0 1 g Fibres alimentaires 0 1 g 0 9 g Tableau 02 Classification classique d Ocimum basilicum L 20 R gne Plantae Division Magnoliophyta Classe Magnoliopsida Ordre Lamiales Famille Lamiaceae Genre Ocimum Esp ce Ocimum basilicumL 1753 Tableau 03 Classification phylog n tique d Ocimum basilicum L 20 Ordre Lamiales Famille Lamiaceae 15 Chapitre
2. 4 3 Discussion Les r sultats sont diff rents pour chaque huile essentielle au niveau des quantit s des compos es identifi es et au niveau des types des mol cules identifi es et ces teneurs pour chaque huile essentielle a indique la grande diff rence entre les huiles essentielles et relativement entre les sous esp ces de basilic cultiv es Les r sultats de la CPG indiquent que les chemotypes pour chaque sous esp ce sont comme suit selon la r gion de culture 4 3 1 Dans la r gion d Ouargla Sous esp ce g ant ou grand vert le chemotype est Eugenol en teneur de 34 92 de somme de l huile essentielle Sous esp ce nain compact ou fin vert le chemotype est Linalool en teneur de 33 84 de somme de l huile essentielle 4 3 2 Dans la r gion de Biskra Sous esp ce purple opal le chemotype est Methyl eugenol en teneur de 22 7396 de somme de l huile essentielle 4 3 3 Dans la r gion de Ghardaia Sous esp ce citron le chemotype est Methyl cinnamate en teneur de 20 1896 de somme de l huile essentielle G n ralement les principes actifs identifi s sont utilis es en parfumeries et dans la fabrication des m dicaments et quelque produit sp cial pesticides ils appartiennent aux diff rents groupements chimiques Les propri t s des huiles essentielles sont li es leur composition chimique et sont donc variables 80 Chapitre V Analyses r sultats et discussion L eug n
3. eR V 8l Conclusion g n rale e reb Ro HX RR TR RE 6 0484 TELE 84 R f rences bibliographiques 86 R sum Dans la famille des labiac es le genre Ocimum repr sente un groupe de plantes caract ris es en particulier par la production des huiles essentielles Ces huiles essentielles ont une valeur commerciale et th rapeutique tr s importante Cinque sous esp ces de basilic Ocimum basilicum L ont t cultiv es dans trois r gions de sud de l Alg rie Ouargla Biskra et Gharda a la r colte s est faite apr s trois mois Les huiles essentielles de basilic Ocimum basilicum L objet de notre tude sont obtenues par l entrainement la vapeur d eau Apr s les calcules de rendements une analyse par chromatographie en phase gazeuse a t fait sur une colonne Apolaire HP 1 50m Apr s l analyse des huiles essentielles par la CPG et la comparaison de nos r sultats avec la litt rature nous avons pu d terminer l existence des chemotypes suivants e Chemotypes I Eugenol e Chemotypes II Linalool e Chemotypes III Methyl eugenol e Chemotypes IV Methyl cinnamate Mots cl s Ocimum basilicum L sous esp ce huile essentielle entrainement la vapeur chromatographie en phase gazeuse CPG chemotype Summery The family of labiaceae includes the genus Ocimum it
4. galement dans les graines semences les racines les fruits et les corces les tiges le bois etc Et sont galement concentr es dans certains cellules ou groupes sp ciaux de cellules glandes Les huiles essentielles sont des produits naturels des plantes qui s accumulent en structures sp cialis es telles que des cellules d huile des trichomes glandulaires et des conduits d huile ou de r sine 15 19 37 4 Synth se et formation des huiles essentielles au niveau des plantes Les essences v g tales sont d une part des produits aromatiques de la plante d autre part des substances labor es par des cellules s cr trices localis es dans les diff rentes parties de la plante 15 Sous l influence du rayonnement solaire les plantes synth tisent au sein de cellules tr s sp cifiques des compos s aromatiques v ritables concentr s d nergie les huiles essentielles 31 19 Chapitre G n ralit s sur les huiles essentielles Ces substances se forment de trois fa ons Nous avons une formation dite surface glandulaire pidermique Les essences sont la p riph rie de la plante par des glandes sp cialis es ce sont les poils s cr teurs fabriquant les essences et les poils tacteurs servant au tact de la plante ils la mettent en relation avec son environnement ont un r le de protection vis vis des insectes et du climat Les essences sont stock es dans des poches
5. Les AECOODS snsd us eo rne PF ERE EBEN ERU MR BEERU COR I RANK EE SRE 34 13 3 Les CETONES qM Eme 34 13 6 Les COUMARINES et les LACTONES ss 34 15 5 EeSBSDIBRS REA utr DEKA pU QUEM NOU EM EE 35 13 8 Les MONOTERPENES ns ee cn en ns 35 13 9 Les OX YDES tn TRUE 35 13 104 Les PHENOLS 124212820 int tt EEE ne celte den 35 14 Importance de chemotype et am liorations g n tiques 36 15 Conservation des huiles essentielles Cet e OU ex e ges 36 16 s eee so ene tuos Mete lues cheat eT ce ML I Ui xL 36 T IntEOt etlOfl eser etse E ME ADMI Fra UEM ied 38 2 L obtention des huiles essentielles otv rer Rh atento ub s ues tau tut eR Es 38 3 Origines de la distillation Abr g historique 38 4 M thodes de distill tion sees Loto e n be patte e RE E SERERE TERIS 39 4T E hydrodistlldtiotizs cores ER DR EE PUE ERR EU ERAS ERE 39 4 2 Entrainement la vapeur d eau a basse pression 41 5 Dans quel cas on peut utiliser la distillation par la vapeur 43 6 Autres types de distillation KO VR ns 43 6 1 Distillation haute pression et haute temp rature 43 6 2 Distillation la vapeu
6. essence ainsi chez la Lavande vraie la Sauge officinale la Verveine citronn e La deuxi me formation est dite schizog ne C est dire qu elle se fait dans l paisseur de la plante au niveau de la feuille On la retrouve notamment dans le Millepertuis le G ranium L eucalyptus le M laleuque La troisi me formation est dite par canaux ou schizolysig ne Elle se produit en profondeur de la plante Elle est l essence dominante que l on trouve dans le bois des arbres comme par exemple dans le Bois de Rose le Pin le Santal 15 4 1 Description de d veloppement d un poil glanduleux d origan Les cellules s cr trices laborent des huiles essentielles compos s terp niques odorif rants Les huiles sont stock es dans une poche extracellulaire juste en dessous de la cuticule Figure 11 17 20 Chapitre G n ralit s sur les huiles essentielles 5 R le biologique naturel pour les plantes et pour l utilisation humaine Les essences fabriqu es par les plantes servent attirer les insectes et en repousser d autres Elles jouent un r le relationnel Les plantes mettent des mol cules volatiles pour attirer les pollinisateurs ventuels et par contrecoup non voulu l origine les parfumeurs Ce langage parfum est le moyen de communication usit entre les v g taux Ces essences qui sont des mol cules chimiques naturelles sont produites pour inhiber la croissance des
7. r sultats et discussion Tableau 11 Compos s identifi s dans l huile essentielle extraite partir de la sous esp ce basilic purple opal cultiv e dans la r gion de Biskra Meta xylene LI6 8 10205 858 Xyen 0 9 882 975 1003 1024 1056 1072 1086 1126 1150 1166 1176 1211 1234 1273 1324 1331 Decahydro a a 4a p trimethyl TEN cyclopropa d naphthal ene 7 p methanol 0 22 37 37 311 1644 Ethyl hex yl phtalate 57 336 2510 76 Chapitre V Analyses r sultats et discussion Tableau 12 Compos s majoritaires de l huile essentielle extraite partir de la sous esp ce basilic purple opal cultiv e dans la r gion de Biskra Nom de mol cule solut Methyl eugenol 22 73 29 016 1372 Eugen 4 26 25 27 644 1331 7 Eugenol 77 Chapitre V Analyses r sultats et discussion Abundance 4500000 4000000 3500000 3000000 2500000 2000000 1500000 1000000 500000 16 379 21 719 10 175 14 003 20 2822 4 004 sprees Dos 17 639 24 148 57 337 28 932 34 5396 39812 _ 542405 411 4 r r rr 200 400 6 00 8 00 10 00 12 00 14 100 16 00 18 00 20 00 22 00 24 00 26 00 28 00 30 00 32 00 34 00 36 00 38 00 40 00 42 00 44 00 46 00 48 00 50 00 52 00 54 00 56 00 58 00 60 00 Figure 20 Chromatogramme de l analyse par CPG de l huile essentielle d
8. 29 716 a cubebene 1006 29 907 72 Chapitre V Analyses r sultats et discussion 1520 Epi cubebol 10061 60 33 911 1528 Aromadendrene 2 naphthalenemethanol 1 2 3 4 4a 5 6 8a octahydro a 0 4a 8 tetramethyl 2 0 4a f 8a f 0 15 65 36 029 1599 Epi cubinol 10771 66 3637 1611 Valencene 10081 68 36 722 1623 reudesmo 10981 69 36 805 1626 73 Chapitre V Analyses r sultats et discussion Tableau 10 Compos s majoritaires de l huile essentielle extraite partir de la sous esp ce basilic nain compact ou fin vert cultiv e dans la r gion d Ouargla Linaloo 384 18 18 976 1090 Linalool 74 Chapitre V Analyses r sultats et discussion Abundance 7000000 6500000 6000000 5500000 5000000 4500000 4000000 3500000 3000000 2500000 2000000 1500000 1000000 500000 10 204 22 160 14 027 i 20301 23447 009 93 ogib 144859517659 273299 24277 223485 284833903 36 38310 porpora pp eme pee he DANDIT AAA TTG RH T TTT 2 00 400 6 00 8 00 1000 1200 14 00 16 00 18 00 20 00 22 00 24 00 26 00 28 00 30 00 32 00 34 00 36 00 38 00 40 00 42 00 44 00 46 00 48 00 50 00 52 00 54 00 56 00 58 00 36 967 Figure 19 Chromatogramme de l analyse par CPG de l huile essentielle de la sous esp ce basilic purple opal cultiv e dans la r gion de Biskra 75 Chapitre V Analyses
9. G n ralit s sur le basilic 10 Conclusion La culture de basilic demande des conditions sp ciales pour certaines vari t s surtout le basilic pourpre citron et cannelle Le basilic est une plante g n ralement tropicale donc elle demande une grande humidit qui est malheureusement faible dans les r gions d tude En plus d autres facteurs peuvent agir directement sur les plantes et leurs croissances et aussi surement sur leurs compos s aromatiques et leurs huiles essentielles tels que la nature de sol le climat la m thode d extraction etc 16 Chapitre I G n ralit s sur les huiles essentielles Chapitre G n ralit s sur les huiles essentielles 1 Introduction et historique Il y a 7 000 ans les huiles aromatiques taient utilis es en Inde Leurs principes th rapeutiques taient connus et les essences taient employ es dans la m decine Chaque peuple a apport son g nie l art des ar mes et des parfums Car dans toutes les civilisations antiques les essences sont l pour purifier l esprit prot ger le corps lever l me et r g n rer l tre 16 2 D finition En fait les huiles essentielles appel es aussi essences sont des m langes de substances aromatiques produites par de nombreuses plantes sous la forme de minuscules gouttelettes dans les feuilles la peau des fruits la r sine les branches et le bois 21 31 Une huile essentielle est
10. Ouargla Tableau 11 Compos s identifi s dans l huile essentielle extraite partir de la sous 76 esp ce basilic purple opal cultiv e dans la r gion de Biskra Tableau 12 Compos s majoritaires de l huile essentielle extraite partir de la sous 77 esp ce basilic purple opal cultiv e dans la r gion de Biskra Tableau 13 Compos s identifi s dans l huile essentielle extraite partir de la sous 79 esp ce basilic citron cultiv e dans la r gion de Gharda a Tableau 14 Compos s majoritaires de l huile essentielle extraite partir de la sous 79 esp ce citron cultiv e dans la r gion de Gharda a IV LIST DES FIGURES Figure 01 Pr sentation de quelques variet s de basilic 6 Figure 02 Pr sentation morphologique des feuilles de basilic 6 Figures 03 Et 04 Pr sentation du basilic Ocimum basilicum L 7 Figure 05 Les graines du basilic Ocimum basilicum L 7 Agrandissement de photo x15 Figure 06 Basilic cannelle 9 Figure 07 Basilic citronn 9 Figure 08 Basilic nain compact 9 Figure 09 Basilic grand vert 9 Figure 10 Basilic pourpre 9 Figure 11 D veloppement d un poil glanduleux d origan 22 Figure 12 Sch ma illustrative de montage exp rimental de l hydrodistillation au 40 laboratoire Figure 13 Sch ma illustrative de montage industriel de l hydrodistillation 40 Figure 14 Sch ma illustrative de montage de distillation par l entrainement
11. basilicum citriodora entre autres 27 33 34 3 Morphologie du basilic Le basilic commun est une plante annuelle aromatique menthol e de 20 60 cm de haut et peut atteindre une hauteur de 60 90 cm et a un port dress et branchu La hauteur et le port de la plante ainsi que la couleur des feuilles et des fleurs varient norm ment d une vari t l autre feuilles ovales lanc ol es atteignant 2 3 cm elles sont lisses et vert clair vert p le vert fonc et parfois pourpre violet chez certaines vari t s Elles sont entieres ou dent s oppos s sur la tige ov dans la forme Voir Figure 02 Les tiges dress es ramifi es ont une section carr e comme beaucoup de labi es elles ont tendance devenir ligneuses et touffues Les fleurs bilabi es petites et blanches ont la l vre sup rieure d coup e en quatre lobes Elles sont de petite taille et group es en longs pis tubulaires en forme de grappes allong es Voir Figures 03 Et 04 Les graines fines oblongues sont noires Voir Figure 05 9 20 33 36 Chapitre G n ralit s sur le basilic Figure 01 Pr sentation de quelques variet s de basilic 34 TT 001614 Figure 02 Pr sentation morphologique des feuilles de basilic 49 Chapitre G n ralit s sur le basilic Figures 03 Et 04 Pr sentation du basilic Ocimum basilicum L 42 et 39 Figure 05 Les graines du basili
12. causes 2 Pr sentation et historique du basilic Ocimum basilicum L Le terme basilic qui est apparu dans la langue frangaise en 1120 d signait l origine un serpent mythique dont le regard pouvait tuer moins qu on ne l ait aper u le premier Le mot vient du bas latin basilicum qui l a emprunt au grec basilikos petit roi Cette plante probablement originaire d Iran ou d Inde est arriv e en Europe via le Moyen Orient en Italie et dans le sud de la France au XV si cle en Angleterre au XVII si cle puis en Am rique avec les premiers migrants Le genre Ocimum compte environ 150 esp ces allant de plantes annuelles des buissons vivaces Le plus cultiv de ceux ci est basilicum une esp ce tr s variable Plus de 50 esp ces et formes d Ocimum ssp Voir Figure 01 20 22 33 34 La variance morphologique du basilic sa composition chimique et ses caract ristiques organoleptiques rendent son identification botanique difficile L hybridation complique encore l identification S lectionn es en divers endroits du globe les sous esp ces de basilic pr sentent des caract ristiques sp cifiques notamment leur teneur en huiles essentielles qui peut varier consid rablement d une vari t l autre et influencer fortement la saveur Parmi les types communs on trouve le basilic cannelle basilicum Chapitre G n ralit s sur le basilic cinnamon et le basilic citronn O
13. combien de composants mais combien de composant peuvent tres pr sent dans des m langes t moins Les tudes de calibrage de d tecteur et l invention du d tecteur d ionisation flamme provoquent des grandes am liorations Tout a avec des syst mes plus rapides et plus pr cis de traitement des donn es ont r par une grande partie des probl mes primitifs Mais quelques probl mes existent encore en chromatographie en phase gazeuse quantitative 1 3 2 M thodes d analyse qualitative 3 2 1 M thode par exaltation des pics La chromatographie en phase gazeuse peut permettre l identification d un produit dans un m lange complexe A cette fin on utilise le temps de r tention tr Dans un m lange complexe on injecte un produit pur cela permet de d terminer le temps de r tention de ce produit en comparant le chromatogramme obtenu avec celui du m lange seul Cette m thode est utilis e en r pression des fraudes produits alimentaires on contr le la pr sence du produit par une autre injection sur une autre colonne avec une phase stationnaire diff rente 3 2 2 M thode des indices de r tention Les indices de r tention ont t d finis par Kovats en 1958 chaque produit 1 est associ un indice de r tention I 1 cet indice d duit des 51 Chapitre IV Analyses de l huile essentielle formules 3 et 4 est bas sur un syst me d talonnage par des hydrocarbures lin aires Le
14. del des moyens financiers de la plupart des processeurs Le r tablissement des huiles essentielles non volatiles est galement obtenu par l extraction par solvants bien que le processus soit plus difficile et complexe que le r tablissement des volatiles Ce processus rapporte un produit r sineux aromatique connu sous le nom d ol or sine qui est plus concentr e qu une huile essentielle et qui a une large application dans l industrie alimentaire 13 10 Diff rence entre la plante et sa huile essentielle Des huiles essentielles qui sont extraites de diverses parties de la plante par distillation se composent de beaucoup de diff rents composants Les ingr dients chimiques donnent chaque huile essentielle le parfum de l essence Certains de ces composants ont plus d odeur que d autres mais la totalit des composants est le parfum ou l odeur ponyme de la plante Par la nature de la chaleur ou de la vapeur la chaleur et de soumettre la plante la distillation par la vapeur l odeur d huile essentielle r sultante n est pas exactement l odeur de la plante vivante Et la distillation produit quelques ingr dients dans l huile essentielle qui ne sont pas pr sents la plante vivante 6 11 Propri t s biologiques de l huile essentielle de basilic Huile revigorante et vitalisante Le Basilic est le meilleur des toniques pour le syst me nerveux en plus il remet les id es en place Il combat le stress la fatig
15. la vapeur 42 au laboratoire Figure 15 Exemple de chromatogramme 52 Figure 16 Organigramme qui exprimant le protocole exp rimental suivi pour 62 l obtention d huile essentielle du basilic Ocimum Basilicum L Figure 17 Chromatogramme de l analyse par CPG de l huile essentielle de la sous 68 esp ce basilic g ant ou grand vert cultiv e dans la r gion d Ouargla Figure 18 Chromatogramme de l analyse par CPG de l huile essentielle de la sous 71 esp ce basilic nain compact ou fin vert cultiv e dans la r gion d Ouargla Figure 19 Chromatogramme de l analyse par CPG de l huile essentielle de la sous 75 esp ce basilic purple opal cultiv e dans la r gion de Biskra Figure 20 Chromatogramme de l analyse par CPG de l huile essentielle de la sous esp ce basilic citron cultiv e dans la r gion de Ghardaia 78 VI LIST DES ABR VIATIONS CPG Chromatographie en phase gazeuse GC Gas Chromatography GCMS Coupling Gas Chromatography to Mass Spectrometry Chromatographie en phase gazeuse coupl la spectrom trie de masse EDEMIAO Entreprise de Distribution des Eaux M nag res et Industrielles de Ouargla TAC Titre Alcalim trique Complet CNRS Centre Nationale de la Recherche Scientifique CLHP Chromatographie Liquide Haute Performance HPLC High Performance Liquid Chromatography VII Introduction g n rale Introduction g n rale Introduction g n rale Les plantes et herbes
16. lange solvant organique huile essentielle est tr s importante pour avoir de l huile essentielle pure et pour calculer le rendement de la distillation La vaporisation du solvant organique est un processus facile qui ne modifie pas les caract ristiques de l huile essentielle Ce processus se d roule g n ralement la temp rature ambiante puisque les temp ratures d bullition des solvants organiques est basse le temps du processus d pend du solvant choisi de la quantit du solvant organique utilis e pour la s paration Apr s l vaporation les huiles essentielles pures sont r cup r es dans des petites ampoules en verre recouvertes bien ferm es et tiquet es 61 Chapitre V Analyses r sultats et discussion gt Extraction liquide liquide avec CH CL lt gt D cantation y Evaporation du solvant Figure 16 Organigramme qui exprime le protocole exp rimental suivi pour l obtention de l huile essentielle du basilic Ocimum Basilicum L 62 Chapitre V Analyses r sultats et discussion Les rendements sont calcul s selon la relation 2 suivante Masse de l huile essentielle pure Rendement R x 100 2 Masse de basilic frais utilis e Les rendements sont comme suit pour chaque r gion 3 1 1 Les rendements pour la r gion d Ouargla Le rendement pour la sous esp ce basilic g ant ou grand vert est de 0 15 et pour la sous esp ce basilic nain compact ou fi
17. plantes voisines ayant une implication anti germinative Elles sont tout aussi bien labor es lorsqu il y a danger par exemple quand la plante est attaqu e par des pr dateurs herbivores Par ailleurs elles ont une r serve nerg tique pour elles quand il y a n cessit elles vont y puiser Elles vont couvrir les besoins de la plante en cas de situation ainsi elle les utilise ses propres fins notamment apr s la cueillette 15 La vaporisation de ces compos s volatils permet la plante de se refroidir sans perdre d eau 17 En g n ral les huiles essentielles donnent aux plantes leurs odeurs caract ristiques saveurs ou d autres propri t s 38 21 Chapitre G n ralit s sur les huiles essentielles 8 ir Figure 11 D veloppement d un poil glanduleux d origan 17 22 Chapitre II G n ralit s sur les huiles essentielles 6 Importance et utilisation des huiles essentielles Beaucoup des huiles essentielles sont commercialement importantes en assaisonnement Elles sont utilis es comme mati res premi res de base dans la fabrication des parfums L industrie alimentaire utilise beaucoup des huiles essentielles pour rehausser le go t des aliments pour parfumer et colorer Et pour assaisonner des boissons En raison de leurs propri t s elles sont employ es couramment dans les m dicaments Elles constituent la mati re premi re de l aromath rapie 38 7 11 9 31 L
18. rement stimulante Il s agit de mol cules jouissant de propri t s anti inflammatoires tr s puissantes et qui secondairement pr sentent des aspects hypothermisants et hypotenseurs 21 30 33 Chapitre G n ralit s sur les huiles essentielles 13 2 Les SESQUITERPENES Action r quilibrante Sont des immunostimulants et des tonifiants qui ne pr sentent jamais de toxicit 21 30 13 3 Les ALDEHYDES ALIPHATIQUES ET AROMATIQUES Action relaxante et action l g rement stimulante par ordre Sont de grands anti inflammatoires anti infectieux anxiolytiques et litholytiques calculs On les utilise parfois lors de probl mes d allergies 21 30 13 4 Les ALCOOLS Action stimulante Ces mol cules jouent un r le important en mati re d immunostimulation et anti infections Ce sont dans une moindre mesure des tonifiants bact ricides et fongicides 21 30 13 5 Les CETONES Action relaxante Ont trois fonctions principales ils sont mucolytiques lipolytiques et cicatrisants Ces mol cules sont dangereuses car neurotoxiques et abortives 21 30 13 6 Les COUMARINES et les LACTONES Action r quilibrante Jouissent de nombreuses propri t s Elles ont des effets anti coagulants anti convulsivants sont hypotensives augmentent le temps de latence au niveau de l arc r flexe action s dative et sont hypothermisante 21 30 34 Chapitre G n ralit s sur les huiles esse
19. represents a group of plants particularly characterized in essential oils production These essential oils got very important commercial and medical values Five basil Ocimum basilicum L subspecies were cultivated in three areas of south Algeria Ouargla Biskra and Ghardaia harvesting done three months later Basil Ocimum basilicum L essential oils the objective of our study were obtained by steam distillation After we had calculated the yield a gas chromatography analyzes GC on a polar HP 1 column was done After analyzing essential oils by GC and comparing our results with literatures ones we could determine the following chemotypes presence e Chemotypes I Eugenol e Chemotypes II Linalool e Chemotypes III Methyl eugenol e Chemotypes IV Methyl cinnamate Key words Ocimum basilicum L subspecies essential oils steam distillation gas chromatography GC chemotype II ua fa ASI r Sl Aulas cub Alle Ocimum os dia Gil p g l Les Ac jj as y lai eli 5 555 AB jl casis Ge Sh E Ocimum basilicum L o des poil EDG ssl ai leale Usb gs Ocimum basilicum L Ia uM cs ga 5l cele j Gil je ils 9 SI Aul g Lulu cS 9 Ua doa pall ai ax HP 1 5 j Cut gs leale ii Jia des g c Gl je 9 SIE Aul g
20. sous esp ce qui est r ussi en germination et pass e jusqu au stade de fleurisation est le basilic purple opal les autres sous esp ces ont d pass s le stade de germination et pour des raisons non connues ils n ont pas r ussi poursuivre jusqu aux stades avanc s 57 Chapitre V Analyses r sultats et discussion Au mois de juin les pots sont transport es jusqu au laboratoire donc la r colte a t faite directement et surplace pour les parties a riennes 2 1 3 Dans la r gion de Ghardaia L ensemencement a t fait la r gion de Hassi El Fhal wilaya de Ghardaia au d but de mois de mars au niveau des pots remplies de sol de la r gion Comme la r gion de Biskra l irrigation a t faite r guli rement une fois chaque deux jour par l arrosage l eau utilis e a t de la r gion consid r comme eau potable La sous esp ce qui est r ussi en germination et pass jusqu au stade de fleurisation est le basilic citron les autres sous esp ces ont d pass s le stade de germination et pour des raisons non connues ils n ont pas r ussi poursuivre jusqu aux stades avanc s Et au mois de juin les pots sont transport es jusqu au laboratoire donc la r colte a t faite directement et surplace pour les parties a riennes 2 2 Analyse des eaux utilis es en irrigation On a fait les analyses pour les eaux des trois r gions de cultures au laboratoire des analyses d eau de l
21. 1e 07 9000000 8000000 7000000 6000000 5000000 4000000 3000000 2000000 1000000 31 126 36 980 32 583 16993 20 331 807 25 661 29 708 pad 9 474 144847 Ki 26b 7 gu 36 ads 5 3677 au 12 2224414862 26 dno 84 22387 325 56 0574 CES E TH 2 00 400 600 8 00 10 00 12 00 14 00 16 00 18 00 20 00 22 00 24 00 26 00 28 00 30 00 32 00 34 00 36 00 38 00 40 00 42 00 44 00 46 00 48100 50 00 52 00 54 00 56 00 58 00 60 00 62 00 rem Figure 17 Chromatogramme de l analyse par CPG de l huile essentielle de la sous esp ce basilic g ant ou grand vert cultiv e dans la r gion d Ouargla 68 Chapitre V Analyses r sultats et discussion Tableau 07 Compos s identifi s dans l huile essentielle extraite partir de la sous esp ce basilic g ant ou grand vert cultiv e dans la r gion d Ouargla T icydene 008 6 1129641935 Octanone 3 004 8 14 186 Sabinne 04 9 14295 975 984 987 1012 1026 1028 1039 1052 1054 1061 1075 1082 1091 3 cyano 5 hydroxy 2 5 dimethyl 4 oxy 4H 5H pyrrole 0 06 34 26 107 1286 69 Chapitre V Analyses r sultats et discussion 2 acetoxymethyl 3 methoxycarbonyl biphenylene 0 03 59 57 198 2503 Ethyl hex yl phtalate 0 04 60 57 333 2510 Tableau 08 Compos s majoritaires de l huile essentielle extraite partir de la sous esp ce basilic g ant o
22. 26 7 1 8 Action antispasmodique 27 7 1 9 Action analg sique antalgique anesth sique 27 7 1 10 Action d toxicante Ie PS NES 27 RRA Actiontelaxante PM E 27 8 Obtention des huiles essentielles ih Met ss en t rex 28 9 Choix de m thode d extraction des huiles essentielles 28 10 Diff rence entre la plante et sa huile essent elle eoe 29 11 Propri t s biologiques d huile essentielle de basilic 20 LEA Indications ti oro Ode Slot cot Us S DER ot E ee UAE UE ER TOL beds 30 12 Caract ristiques des huiles essentielles te ee Ee obere eese eg 30 12 1 Caract ristique qui concerne la plante et la m thode d extraction utilis es 31 12 2 Caract ristiques qui peuvent tre d tect es par les sens humaines 31 12 3 Caract ristiques physico chimiques qui sont d finis par des appareilles au TaDDESEOITO Z oo com ure ens satt eue e T M CLE LL CAD Rs ee 31 12 4 Caract ristiques biologiques qui indiquent le r le et l utilisation des huiles essentielles 31 I3 Chimie des huiles essentielles UE osea deit Rm S Rr bs din 33 LS TES ACIDES s 33 13 2 Les SESQUITERPENES dsl 34 13 3 Les ALDEHYDES ALIPHATIQUES ET AROMATIQUES 34 13 4
23. 6 4 Culture La culture du basilic n cessite un climat chaud et ensoleill m diterran en ou tropical Il peut aussi se cultiver en pays temp r s soit en pots ou jardini res ou en pleine terre moyennant quelques pr cautions La culture du basilic n cessite cinq heures d ensoleillement quotidien ou 12 heures de lumi re artificielle Juillet ao t est la p riode propice pour la r colte de ses feuilles des fins de cong lation Attention le basilic craint le froid et ne r siste pas si la temp rature descend en dessous de 10 C 20 36 4 1 L ensemencement Le Basilic peut tre directement semis ou transplanter au champ dans un m lange de terre enrichi de compost la fin du printemps vers mars avril En climat temp r il faut le faire en serre ou dans des pots maintenus une temp rature de l ordre de 20 C Le taux de germination de la graine devrait tre 80 9696 et la graine ne devrait pas tre sem e si le pourcentage de germination est moins de 70 Si le sol est lourd la graine devrait tre couvr e par un anticrustant Le sol devrait tre conserv e humide pour acc l rer la germination et assurer un levage plus uniforme de la plante La graine est relativement petite 10 Chapitre G n ralit s sur le basilic Un uniforme semis est demand pour un tablissement optimum de la plante Les graines doivent tres semis seulement pour 0 31 0 63 cm de profondeur L apparit
24. EDEMIAO d Ouargla Entreprise de distribution des eaux m nag res et industrielles d Ouargla Le but de ces analyses est de connaitre quelques informations sur les qualit s des eaux utilis es pour l rrigation et seulement pour indiquer le maximum d informations sur les conditions de notre travail Les analyses faites sont les analyses disponibles au laboratoire en p riode des analyses ces r sultats sont repr sent s dans Tableau 05 58 Chapitre V Analyses r sultats et discussion Tableau 05 Pr sentation des analyses des eaux utilis es pour l irrigation pour chaque r gion tous les l ments sont mesur s en mg l Source d eau Ca Mg TAC Ouargla 440 88 221 17 70 37 85 85 1500 54 Gharda a 76 15 43 74 96 29 117 48 56 62 Biskra 272 54 116 66 240 74 293 70 877 67 59 Chapitre V Analyses r sultats et discussion L eau de Gharda a prend la premi re place cause de sa teneur diminu s A 2 2 en ions de Ca Mg et CI par rapport l eau de Biskra qui des valeurs moyennes pour les ions pr c dentes Par contre l eau d Ouargla des valeurs lev es pour les ions de Ca Mg et CI Les r sultats montrent que l eau de Ghardaia a de meilleure qualit Elle est une eau moyennement dure poursuivie par l eau de Biskra qui a une qualit moyenne mais c est une eau sal e cause de ca teneur en ions lev e et surtout en puis l eau
25. MIque sura NE serre AR N A 14 9 1 Classification classique Le nr Ne M MR 14 9 2 Classification phylGs n tique ss errant son nes ee 14 Meunier 16 Chapitre II G n ralit s sur les huiles essentielles 1 dnirod ction et histori que NOH ER STEM NN PERSEO UM ava 18 PARDI EN anO I AEA E e EcL a 18 3 Localisation des huiles essentielles dans les plantes 19 4 Synth se et formation des huiles essentielles au niveau des plantes 19 4 1 Description de d veloppement d un poil glanduleux d origan 20 5 R le biologique naturel pour les plantes et pour l utilisation humaine 21 6 Importance et utilisation des huiles essentielles 23 7 Les actions sp cifiques pour l utilisation humaine des huiles essentielles 24 7 1 Les grandes lignes d action des huiles essentielles 24 AL Action en ne aqua sn nets 24 7 1 2 Action anti bact rienne 82 de ite EC IRE R Cas AGE dat 25 AS Action ant Vitale soos nn a 25 7 1 4 Action antifongique CURRO vase 26 7 1 5 Action antiparasitaire de etre a SE PEERS ns pense 26 7 1 6 Action antiseptique meto ned ne er en en 26 7 1 7 Action anti inflammatoire
26. UNIVERSITE KASDI MERBAHOUARGLA DEPARTEMENT DE BIOLOGIE M motir En vue de l obtention du dipl me d Etudes Sup rieures en Biologie Option Biochimie D tection et comparaison de composition chimique de plusieurs vari t s de basilic Ocimum basilicum L cultiv es en trois r gions diff rentes de sud de l Alg rie Pr sent par KHAMOULI Ofba GRAZZA Bouziane Membres de jury Pr sident M BENSACI M B M A C C Universit KASDI MERBAH Promoteur SLOUGUI N M A C C Universit KASDI MERBAH Examinateur BOUZIANE M M A C C Universit KASDI MERBAH Ann e Universitaire 2006 2007 Remerciements Nous tenons exprimer notre gratitude avec l aide de dieu A ceux qui s int ressent notre m moire tout d abord A nos parents pour leurs aides et patience A notre encadreur M SLOUGUI N A notre d partement de biologie A HAMID OUDJANA S Mr DOUADI Abd Elkader Toufik et Ahmed pour leurs aides et conseils Au laboratoire d analyses physico chimiques Universit de KASDI MERBAH Ouargla Au laboratoire de EDEMIAO Au laboratoire de CNRS Lyon France Au service El Andalouse A tous ceux qui nous ont aid s de loin ou de pr s Tout nous compliments voeux aux membres du u r iS ACI M B et M BOUZIAN M qui nous ont honor s ceeptant de juger ce travail VS TABLE DES MATI RES R SUM 1 c
27. V et leur r glementation dans les produits cosm tiques Soci t COLETICA Rapport de recherche bibliographique Mars 2003 DESS Ing nierie documentaire 11 Peter B Kaufman Leland J Cseke Sara Warber Harry L Brielmann James A Duke Natural Products From Plants 1998 87 R f rences bibliographiques 12 Sandra Koster Ph D Lecturer Department of Chemistry University of Wisconsin La Crosse 13 Simon J E Essential Oils and Culinary Herbs In J Janick and J E Simon eds Advances in new crops Timber Press Portland OR 1990 14 Simon J E J Quinn and R G Murray Basil A Source of Essential Oils In J Janick and J E Simon eds Advances in new crops Timber Press Portland OR 1990 15 Sylvie Verbois Huiles Essentielles et Parfums qui Gu rissent et qui Relaxent La Voie De l Ayurveda Ed Trajectoire 2001 16 Sylvie Verbois Associer Plantes et Huiles Essentielles Selon la Tradition Indienne Ed Trajectoire 2004 R f rences lectroniques 17 Site 1 http bib18 ulb ac be 18 Site 2 http biogassendi ifrance com 19 Site 3 http essentialoils org 20 Site 4 http fr wikipedia org 21 Site 5 http tecfa unige ch 22 Site 6 http www alchemy works com 23 Site 7 http www answers com 24 Site 8 http www armenza com 25 Site 9 http www aromalves com 26 Site 10 http www artemisia college org 27 Site 11 http www ces purdu
28. a t inject e dans les m mes conditions des quatre analyses dans l appareil de chromatographie selon la relation 5 suivante quation de Van Den Dool tr i NE t n FI GC 100 5 D o I Indice de r tention de solut i tudi t i Temps de r tention de solut i tudi t n Temps de r tention de l alcane a n atomes de carbones qui pr c de le solut i n 1 Temps de r tention de l alcane a n 1 atomes de carbones qui suite le solut i i Solut tudi n Nombre des atomes de carbone de l alcane qui pr c de le solut i 64 Chapitre V Analyses r sultats et discussion Tableau 06 Les conditions op ratoires des analyses chromatographiques CPG Nom de chromatographe SHIMADZU GC17 A D tecteur FID d tecteur d ionisation de flamme Colonne 50 m de longueur 200 um Phase stationnaire Apolaire HP 1 0 33 um pour l paisseur du film Gaz vecteur H lium He D bit de 1 3ml min Programmation de temp rature 60 2 min rampe 4 C min temp rature finale 300 C 10 min Volume inject 1 ul Mode d injection En split 1 100 Temp rature de l injecteur 250 C 65 Chapitre V Analyses r sultats et discussion Les indices de r tention nous permettent d identifier presque toutes les mol cules pr sentent dans nos h
29. alyses r sultats et discussion Le Tableau 10 r sume les indices de r tention des compos s majoritaires d tect s de cette analyse 4 2 2 Analyse de l huile essentielle de Biskra La Figure 19 repr sente le chromatogramme de l huile essentielle des feuilles et sommit s fleuries de la sous esp ce basilic purple opal Comme dans les premi res analyses les compos s qui ont pu tre identifi s leurs indices de r tention de r tention des talons et leurs pourcentages sont pr sent s dans le Tableau 11 Nous avons identifi s 32 compos s Les taux des 3 compos s majoritaires sont 22 7396 de Methyl eugenol 14 41 de Linalool et 12 92 de Cineol eucalyptol Le Tableau 12 r sume les indices de r tention des compos s majoritaires d tect s de cette analyse 4 2 3 Analyse de l huile essentielle de Gharda a La Figure 20 repr sente le chromatogramme de l huile essentielle des feuilles et sommit s fleuries de la sous esp ce basilic citron Le Tableau 13 r sume les indices de r tention des compos s d tect s et identifi s de cette analyse Nous avons identifi s 23 compos s Les taux des 3 compos s majoritaires sont 20 18 de Methyl cinnamate 16 6546 de Linalool et 10 7496 de Methyl chavicol Les autres compos s majoritaires sont repr snt s dans le Tableau 14 67 Chapitre V Analyses r sultats et discussion Abundance 1 4e 07 1 3e 07 1 2e 07 1 1e 07
30. aromatiques et m dicinales taient tr s connues et utilis es chez nos anc tres Ces plantes connues depuis longtemps comme une mati re primaire pour la fabrication des m dicaments des produits cosm tiques et en gastronomie Ces utilisations sont les m mes nos jours Le basilic Ocimum basilicum L a t le choix de notre tude qui est la suite de d autres travaux r alis s sur cette plante Elle est consid r e comme source tr s importante des huiles essentielles Le basilic est une plante qui est utilis e dans plusieurs domaines comme les domaines m dicales cosm tiques phytopharmaceutiques etc gr ce son huile essentielle riche en mono et sesqui terp nes L invention des diff rents techniques d analyse nous a permit de connaitre que la qualit du basilic est due son huile essentielle Les caract ristiques qualitatives et quantitatives des compos es de ces huiles essentielles ont une relation directe avec plusieurs facteurs tels que la nature du sol le climat la r gion de culture m thode d extraction etc Ces facteurs peuvent agir sur plusieurs niveaux aussi ce qui donne aux huiles essentielles une option de flexibilit selon les changements aux niveaux d applications de ces facteurs Cette option de flexibilit des huiles essentielles complique et largie ses r les et spectres d utilisation en plus de ca donne aux huiles essentielles une importance conomique non n gligeable Nous
31. avons choisis cinq sous esp ces de basilic cultiv s en trois r gions diff rentes de sud de l Alg rie qui sont Ouargla Biskra et Ghardaia Introduction g n rale Notre tude qui prend le titre de D tection et comparaison de composition chimique de plusieurs vari t s de basilic Ocimum basilicum L cultiv es en trois r gions diff rentes de l Alg rie propag en cinq chapitres r partis comme suit La premi re partie r sume des g n ralit s sur la plante et tudie la culture de basilic Vue l importance des huiles essentielles nous leur avons consacr s toute la deuxi me partie La troisi me partie comporte le protocole exp rimental adapt pour l obtention des huiles essentielles La quatri me partie est la partie analytique Analyses de nos chantillons des huiles essentielles par CPG chromatographie en phase gazeuse La cinqui me partie c est la partie exp rimentale qui comporte les r sultats et la discussion Chapitre I G n ralit s suo le basilic Chapitre G n ralit s sur le basilic 1 Introduction Les plantes et les herbes aromatiques ont une grande importance dans plusieurs domaines de vie et depuis tr s longtemps Parmi ces plantes et herbes aromatiques le basilic c est une plante bien connue et largement utilis e dans le monde et au plusieurs niveaux plante fraiche ou bien s che et ses huiles essentielles et pour plusieurs domaines et
32. c Ocimum basilicum L Agrandissement de photo 15 47 Chapitre G n ralit s sur le basilic 3 1 Description des sous esp ces de basilic qui ont fait l objet de notre tude G n ralement le basilic grand vert Voir Figure 09 peut atteindre une hauteur de 60 90 cm et a un port dress et branchu Les feuilles sont lisses et vert clair les fleurs sont petites et blanches Le basilic cannelle un port semblable mais est beaucoup plus petit et atteint 30 40 cm il a des feuilles violac es plus petites des pis floraux roses et une odeur rappelant l anis et la cannelle Voir Figure 06 Le basilic citronn un port semblable celui du basilic cannelle mais a des feuilles lisses vert clair et de petites fleurs blanches Voir Figure 07 Le basilic pourpre des feuilles violettes tr s odorantes caract ristiques Voir Figure 10 Le basilic nain compact des feuilles tr s petites et vert claires et compactes les fleurs sont blanches il peut atteindre une hauteur de plus de 60 cm Voir Figure 08 33 Chapitre G n ralit s sur le basilic Figure 10 Basilic pourpre 41 Chapitre G n ralit s sur le basilic 3 2 Go t Selon la vari t le basilic rappelle le citron l anis le thym le jasmin ou le gingembre Les feuilles fra ches du grand basilic et du basilic nain ont un petit go t de clou de girofle Le basilic thai poss de plus de caract re 3
33. ce contenant de l eucalyptol et de l eug nol 6 2 En pharmacie Partie utilis e feuilles et sommit s fleuries Propri t Stomachique carminatif lactagogue stup fiant l ger Mode d emploi Infusion poudre essence oenol cataplasme S dative antispasmodique des voies digestives diur tique antimicrobienne contre l indigestion et en tant que vermifuge Elle loignerait les moustiques et c est un rem de contre l h m ralopie 7 Conservation 7 1 S choir Le basilic perd beaucoup de son ar me au s chage Il est donc pr f rable de le consommer frais ou congel Toutefois pour certaines recettes traditionnelles on exige du basilic s ch Dans ce cas le ciseler finement et le mettre s cher l ombre sur un cadre recouvert de gaze ou de toile moustiquaire ou au d shydrateur Malheureusement il a tendance perdre beaucoup de sa saveur le s chage vient renforcer son accent menthol et d s quilibre son go t original 34 36 7 2 R frig rateur Hacher les feuilles et les mettre dans de l huile d olive avec du gros sel Fermer herm tiquement le pot et garder au r frig rateur 34 13 Chapitre G n ralit s sur le basilic 7 3 Cong lateur Passer des feuilles fraiches au m langeur pour obtenir une pur e Ajouter de l huile d olive si d sir Mettre dans un bac gla ons et congeler Placer ensuite les cubes dans un sac cong lateur 34
34. cn 0 als ass AU BUSY 33355 A LS 5 l Stil Diss l J AG SS Lad e Jand d n Slo ail diss d ve Lull e cola 4 gs c 93 JI lt gill QU ll a cau ha da a JL La EI LIST DES TABLEAUX Tableau 01 Pr sentation de valeur nutritive de basilic frais et s ch 15 Tableau 02 Classification classique d Ocimum basilicum L 15 Tableau 03 Classification phylog n tique d Ocimum basilicum L 15 Tableau 04 Caract ristiques de l huile essentielle de basilic 22 Tableau 05 Pr sentation des analyses des eaux utilis es pour l irrigation pour chaque 59 r gion tout les compos s sont mesur es en mg l Tableau 06 Les conditions op ratoires des analyses chromatographiques CPG 65 Tableau 07 Compos s identifi s dans l huile essentielle extraite partir de la sous 69 esp ce basilic g ant ou grand vert cultiv e dans la r gion d Ouargla Tableau 08 Compos s majoritaires de l huile essentielle extraite partir de la sous 70 esp ce basilic g ant ou grand vert cultiv e dans la r gion d Ouargla Tableau 09 Compos s identifi s dans l huile essentielle extraite partir de la sous 72 esp ce basilic nain compact ou fin vert cultiv e dans la r gion d Ouargla Tableau 10 Compos s majoritaires de l huile essentielle extraite partir de la sous 74 esp ce basilic nain compact ou fin vert cultiv e dans la r gion d
35. d Ouargla venue en derni re place de qualit c est une eau tr s sal e Les eaux de Biskra et Ouargla sont tr s dures La valeur de TAC Titre alcalim trique complet a t maximale pour l eau de Biskra poursuivie par la valeur pour l eau de Ghardaia et enfin l eau de Ouargla Et pour les valeurs de HCO bicarbonates ou hydrog no bicarbonates l eau de Biskra a la valeur maximale en 240 74 mg l l eau d Ouargla aussi a une valeur lev e par rapport a l eau de Ghardaia qui est la plus basse parmi les r sultats mais g n ralement le degr d alcalinit pour toutes les eaux est non tol r 60 Chapitre V Analyses r sultats et discussion 3 Partie exp rimentale pour l obtention des huiles essentielles 3 1 L obtention des huiles essentielles et calcul de rendement L obtention des huiles essentielles a t faite au laboratoire d analyses physico chimiques lhydraulique Universit de KASDI MERBAH Ouargla on utilisant la distillation par l entrainement la vapeur d eau selon le montage propos e par notre encadreur Voire protocole Figure 16 Les parties des plantes utilis es pour la distillation sont les parties a riennes feuilles tiges fleures Chaque op ration de distillation est d roul e pour deux heures suivie d une extraction par solvant organique le Dichlorom thane chlorure de m thyl ne CH CL suivie d une d cantation L vaporisation du solvant organique du m
36. de d autres compos es dans les huiles essentielles enrichie et largie le spectre d utilisation de ces huiles 82 Conclusion g n rale Conclusion g n rale Conclusion Malgr toutes les difficult s rencontr es pendant le d roulement de notre travail on pu obtenir des r sultats qui peuvent tre consid r s comme satisfaisants Notre travail a t de faire une tude comparative sur diff rentes vari t s de basilic cultiv es dans trois r gions de l Alg rie puis obtenir leurs huiles essentielles pour les analyser et d terminer leurs compositions chimiques Parmi les difficult s et les obstacles que nous avons trouv s dans notre chemin de l tude c est que les sous esp ces de basilic ne sont pas adaptables ce qui ne nous a permet pas d obtenir de bons r sultats de culture On a expliqu ces r sultats par le fait que le basilic est une plante tropicale qui demande une humidit tr s lev e dans l air et malheureusement les r gions d tude sont des r gions s ches sahariennes Pour l obtention des huiles essentielles la technique utilis e entrainement la vapeur d eau a t conseill e par la litt rature Elle nous a permi d obtenir nos huiles essentielles avec de bons rendements et de meilleures qualit s Ca tait confirm par les analyses de CPG Les quantit s des huiles essentielles ne sont pas suffisantes pour faire toutes les analyses physico chimiques u
37. diff rent l issue de la distillation En effet la distillation entra ne des modifications dans la composition mol culaire que l on trouve dans la plante Le mode d extraction influe sur sa potentialit m dicinale En voquant l huile essentielle on va ainsi parler d un produit extrait et non des propri t s de base de la plante 15 9 Choix de m thode d extraction des huiles essentielles Tant que l huile essentielle est une substance aromatique qui va tre d gag e lors de la distillation C est elle qui va donner ses caract ristiques significatives qui sont l odeur la couleur et ses principes actifs 15 La m thode sp cifique d extraction utilis e d pend de la mati re v g tale distiller et du produit final d sir Les huiles essentielles qui donnent les aromes distinctifs sont des m langes complexes des constituants organiques certains dont tant moins stable peut subir des changements chimiques une fois soumis aux hautes temp ratures Dans ce cas ci l extraction par solvants organique est exig e pour assurer qu aucune d composition ou des changements se sont produits qui changeraient l arome et le parfum du produit 28 Chapitre G n ralit s sur les huiles essentielles final De plus des nouvelles m thodes d extraction de l huile essentielle telles qu employer le supercritique qui rapportent des huiles de haute qualit sont commercialement employ es mais sont moins courant et au
38. du chaque pic cible compar e avec temps de r tention d un compos authentique C tait assez simple et les tats d analyse taient gard es constantes Kovats a d velopp un syst me d indices de r tention bas sur les r tentions relatives d une gamme tendue des compos s organiques d autres compos s cl s qu il a assign es comme marqueurs La mesure relative de r tention est bas e sur comparer le temps corrig e de r tention de la pic d int r t au temps corrig e de r tention d une r f rence ajout e 1 La s paration est suivie d une d tection et ventuellement d une identification destin e faciliter l analyse qualitative Les d tecteurs plac s en sortie du chromatographe d c lent la pr sence des compos s au fur et mesure de leur arriv e Les variations enregistr es sont transform es par le d tecteur en signaux lectriques qui sont amplifi s et transcrits sous forme graphique par l enregistreur Il existe divers types de d tecteurs pouvant tre coupl s la chromatographie en phase gazeuse Le choix entre les diff rents d tecteurs est fait en fonction de leur sensibilit et de leur sp cificit 10 50 Chapitre IV Analyses de l huile essentielle 3 1 Analyses quantitatives Pas tr s longtemps apr s l invention des chromatographes en phase gazeuse commerciaux les manipulateurs des chromatographes ou d autres qui ont relation ont voulu savoir non seulement
39. e goutte superficielle est n cessaire Si l irrigation de filet est utilis e on doit observer le soin pendant la moisson pour ne pas endommager la ligne d irrigation 27 11 Chapitre G n ralit s sur le basilic 4 4 Sol Le basilic pr f re une exposition abrit e et un sol frai et bien drain l ger riche en compost Le basilic requiert un sol bien humidifi mais il devient maussade s il prend un bain de pieds 20 36 4 5 Saison de basilic De l ensemencement la moisson 4 5 mois 9 5 R colte Il faut r colter le basilic avant que les fleurs ne montent en pis sinon le basilic perd de son piquant Les jeunes pousses ont plus de saveur Lorsque vous coupez les feuilles avec la tige assurez vous que la plante conserve une hauteur minimum de 15 cm pour maintenir sa croissance et une double paire de feuilles Pour obtenir une r colte sur une longue p riode mieux vaut planter des semis successifs aux 15 jours 36 6 Utilisation de basilic 6 1 Pour l alimentation Comme herbe aromatique fraiche Les feuilles s ches sont utilis es pour assaisonner des rago ts des dressages et des potages Les feuilles et les jeunes tiges sont s ch es ou utilis es comme source d huile essentielle 9 12 Chapitre G n ralit s sur le basilic Comme huile essentielle pour les pr parations de parfums et de liqueurs la plante fraiche distill e donne une essen
40. e la sous esp ce basilic citron cultiv e dans la r gion de Gharda a 78 Chapitre V Analyses r sultats et discussion Tableau 13 Compos s majoritaires de l huile essentielle extraite partir de la sous esp ce basilic citron cultiv e dans la r gion de Ghardaia om r y 9 Nom de mol cule solut No i Ethyl benzene Xylene Xylene Xylene 2 propenoic acid 2 methyl butyl ester cas Cineole eucalyptol Cis sabinenehydrate 1 1 1 14 002 962 1 1 1 Linalool Ir 49 57 58 81 62 1 1 1 1 Terpinen 4 ol 1 1 13 36 963 37 311 1644 52 351 2262 Methyl cinnamate 52 707 2279 Ethyl hexyl phtalate 092 28 57 336 2510 Methyl chavicol Methyl cinnamate Eugenol Methyl cinnamate Methyl eugenol Trans nerolidol Cubenol T cadinol 7 8 1 hydroxy 1 methylethyl 4a f methyl 1a f decahydrocyclopropa d naphthalene uM E HC HEN CRE _ 10 cr ECT a terpineol 16 22148 1175 _ 17 s ET 20 _ 21 22 23 _ 24 _ 2 7 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 Tableau 14 Compos s majoritaires de l huile essentielle extraite du sous esp ce citron cultiv e dans la r gion de Gharda a Nom de mol cule solut Methyl cinnamate Methyl chavicol Cineole eucalyptol 3 15 79 Chapitre V Analyses r sultats et discussion
41. e edu 28 Site 12 http www cevenat fr 29 Site 13 http www chembook co uk 30 Site 14 http www er uqam ca 88 R f rences bibliographiques 31 Site 15 32 Site 16 33 Site 17 34 Site 18 35 Site 19 36 Site 20 http www florilab fr http www masterchimiel1 u psud fr http www omafra gov on ca http www passeportsante net http www pranarom co uk http www saveursdumonde net 37 McGraw Hill Encyclopedia of Science and Technology 10th Edition 2007 38 The Columbia Encyclopedia 2006 39 Site 21 40 Site 22 41 Site 23 42 Site 24 43 Site 25 44 Site 26 45 Site 27 46 Site 28 47 Site 29 48 Site 30 49 Site 31 http www biotox cz http blog information chefsconsulting com http www cuisiflor com http www dkimages com http www jardin aromatiques com http www mountainvalleygrowers com http perso orange fr http www routes lavande com http www semencesdupuy com http surlezinc blogs com http www uni graz at 89
42. en g n ral un m lange de substances naturelles volatiles obtenues par codistillation avec la vapeur d eau partir de la biomasse v g tale Les huiles essentielles se caract risent par leur odeur leur go t leurs propri t s physicochimiques et biologiques 7 37 19 Les huiles essentielles ont t obtenues partir de plus de 3000 plantes et sont indiqu es et d finies par les esp ces de plante et parfois l endroit g ographique 37 Les huiles essentielles sont synth tis es gr ce l nergie solaire par les cellules s cr trices des plantes aromatiques que celles ci conservent dans des poches au niveau des feuilles et des p tales en particulier Certaines huiles essentielles ont jusqu 250 mol cules aromatiques actives diff rentes et ce dans des proportions parfaitement adapt es 26 18 Chapitre G n ralit s sur les huiles essentielles Ces mol cules volatiles ont de faible poids mol culaire ce que donnent les plantes comme la menthe poivr e le citron le basilic et la sauge leurs odeurs caract ristiques 11 Les huiles essentielles sont de tr s puissants concentr s v g taux nerg tiques 15 3 Localisation des huiles essentielles dans les plantes Ces essences sont localis es dans diff rents organes de la plante Elles sont pr sentes soit dans les organes v g tatifs soit dans les organes reproducteurs Nous les trouvons dans les feuilles et les fleurs mais
43. es huiles essentielles du basilic extraites par l interm diaire de la distillation par la vapeur partir des feuilles et des extr mit s fleurissantes sont employ es pour assaisonner les nourritures les produits dentaires et oraux dans les parfums et dans des rituels et des m dicaments traditionnels Les huiles essentielles extraites contienent des constituants biologiquement actifs qui sont des insecticides nematicidal fungistatic ou qui ont les propri t s antimicrobiennes Ces propri t s peuvent fr quemment tre attribu es aux constituants pr dominants d huile essentielle tels que le chavicol m thylique le linalol l eug nol le camphre et le cinnamate m thylique Deux composants mineurs d huile essentielle de basilic doux le juvocimene I et ont t rapport s en tant qu analogues juv niles efficaces d hormone 14 Elles sont employ es au lieu des feuilles s ches pour l assaisonnement 27 23 Chapitre II G n ralit s sur les huiles essentielles 7 Les actions sp cifiques pour l utilisation humaine des huiles essentielles Le champ d action des huiles essentielles est vaste complexe et pr cis Par leur pouvoir acidifiant elles peuvent r duire la scl rose cellulaire Elles att nuent les mauvais effets g n r s par le stress r gulent l nergie vitale et celle de chaque organe Elles ont la capacit de ralentir le vieillissement pr matur des cellules 15 Par leur action qu
44. ielles reste une tape tr s importante qui peut agir directement sur la qualit et la quantit des huiles essentielles Le succ s de cette tape est interpr t par le calcule des rendements Afin de connaitre la vraie qualit d une huile essentielle et connaitre sa composition chimique une analyse chromatographique s av re n cessaire 46 Chapitre IV Analyses de l huile essentielle Chapitre IV Analyses de l huile essentielle 1 Introduction Apr s l obtention des huiles essentielles une tude chromatographique et spectrale est demand e afin de connaitre leurs compositions chimiques Cela peut tre fait par plusieurs techniques et appareils Mais d apr s la litt rature la chromatographie en phase gazeuse reste la technique la plus fiable afin d identifier les compos s volatiles La chromatographie en phase gazeuse est r alis e gr ce un appareillage compliqu appel e chromatographe qui permet d identifier les mol cules volatiles pr sentes dans une huile essentielle Le graphique fourni par le chromatographe comporte une s rie de pics Chaque pic repr sente une mol cule bien sp cifique qui est identifi e par plusieurs techniques Figure 16 35 Cette chromatographie CPG ou GC en anglais qui est la plus performante au point de vue de la s paration est r serv e aux produits volatils et thermostables Masse mol culaire 500 Daltons 32 2 His
45. iles essentielles G n ralement la technique la plus vielle et la plus efficace c est la distillation cette technique de nos jours a t d velopp e et il y a plusieurs m thodes et applications qui sont utilis es La purification par distillation consiste en transf rant la substance dans l tat gazeux un autre endroit o elle est de nouveau liqu fi e ou solidifi e L o cette m thode de purification est employ e il est essentiel que la substance soit stable son point d bullution 8 L huile essentielle de densit inf rieure celle de l eau lt 1 flotte sur l eau de distillation hydrolat et se recueille par d bordement 35 Mais il existe d autres techniques qui ne sont pas bas es sur la distillation 3 Origines de la distillation Abr g historique La distillation tait une invention des alchimistes grecs dans la premi re annonce de si cle et les derniers d veloppements de l appareillage de distillation grande chelle s est produit en r ponse aux demandes des spiritueux Hypathia d Alexandrie est cr dit d avoir invent l appareillage de 38 Chapitre III L obtention d huile essentielle distillation et la premi re description exacte de l appareil de distillation est donn e par Zosimus d Alexandrie au quatri me si cle La distillation t d velopp e plus loin par l alchimiste musulman Jabir ibn Hayyan autour 800 apr s j sus christ 23 4 M
46. ilibrante et apaisante elles augmentent la r sistance organique tout en stimulant les aptitudes d autogu rison du corps Elles jouent un r le essentiel pour le syst me hormonal Elles renforcent la force vitale les capacit s naturelles de d fense de l organisme 15 Vitalisantes elles aident et soutiennent les r actions de gu rison du corps face aux pathologies 15 M Chacune d elles a la capacit de modifier le terrain propre chaque personne 15 7 1 Les grandes lignes d action des huiles essentielles Par leur nergie naturelle les huiles essentielles ravivent notre nergie vitale Elles la nourrissent Elles aident le corps retrouver son quilibre original agissant sur le mental et l motionnel Elles r accordent l tre avec lui m me 15 7 1 1 Action antibiotique Les huiles essentielles ont la capacit premi re d inhiber les germes infectieux et d enrayer le retour ventuel de ceux ci En agissant directement sur le terrain p n trant imm diatement dans le sang peau tissu veineux 24 Chapitre G n ralit s sur les huiles essentielles vaisseaux sanguins elles vont d velopper pratiquement instantan ment leurs propri t s th rapeutiques 15 En effet nous sommes tous porteurs de flore pathog ne susceptibles de cr er des d sordres Nos bact ries signent notre identit C est notre flore intestinale qui commande l quilibre interne En effectuant un aro
47. ion de la plante devrait tre entre 8 14 jours Quand elles sont environs 15 cm de long il faut l emp cher de monter en fleurs pour encourager l branchement lat ral et la croissance donc pincer les extr mit s des tiges quand les fleurs se forment Le repiquage en pleine terre peut se faire lorsque le sol s est suffisamment r chauff et que les gel es ne sont plus craindre soit vers la fin mai 20 27 36 4 2 Distances recommand es pour l ensemencement La densit optimale de population de basilic d pend de l utilisation finale une densit plus lev e peut tre d velopp e si les quipements compatibles de la ferme sont disponibles pour la culture et l ensemencement par machinerie Il est recommand e que les rang es ont 60 90 cm d intervalle avec les plantes tant espac es tous les 15 cm pour chaque rang e Le basilic peut galement tre plant dans un parterre de 3 rang es 30 cm d intervalle avec 30 cm entre les rang es La distance entre les parterres d pendent de l quipement disponible s tend de 60 90 cm Des grandes variations en croissance et en rendement peuvent se produire en raison des conditions climatiques type de plante et les proc dures culturelles et de gestion 27 4 3 Irrigation Le basilic n est pas tol rant l effort de l eau water stress Un r gulier et m me un approvisionnement en humidit par l interm diaire de filet ou d irrigation irrigation goutt
48. l 1 8 cin ole 1 linalol estragol Propri t s stomachique stimulante antispasmodique cicatrisante antiseptique antiasth nique Indications piqures d insectes inflammations bouche et gorge troubles spasmodiques digestifs spasmes vertiges Usages interne et externe Divers employ e en parfumerie et cuisine 32 Chapitre G n ralit s sur les huiles essentielles 13 Chimie des huiles essentielles Chimiquement les huiles essentielles sont des m langes extr mement complexes contenant des compos s de chaque classe principale des groupes fonctionnels 37 Les principaux constituants sont des terp nes et de leurs d riv s oxyg n s Des mono et des sesquiterp nes des compos s de carbone et hydrog ne et des polypropanoids aromatiques synth tis s par l interm diaire de la voie acide mevalonic pour des terp nes et de la voie acide shikimic pour les polypropanoids aromatiques Mais les compos s benz noidiques et aliphatiques peuvent galement tre pr sents En outre connu en tant qu huile th r e 18 37 D autres contiennent des ald hydes des c tones ou des ph nols L oxygene le soufre et l azote sont pr sents dans les compos s dans d autres 37 En somme les huiles essentielles sont des substances complexes qui contiennent plusieurs centaines de composants cependant on peut les regrouper en 11 familles de substances chimiques 21 13 1 Les ACIDES Action l g
49. les 56 Chapitre V Analyses r sultats et discussion autres sous esp ces ne passent pas au stade de germination et pour des raisons non connues Au stade de transplantation on a transplant les plantes au m me sol apr s tre pass par une tape de les piquer dans des pots remplies de tourbe pour deux semaines sa tait un conseil d un ing nieur en agronomie expert pour viter chaque risque de perte des plantes l irrigation a t faite par l arrosage Apr s la transplantation l irrigation a t faite en syst me de goute goute une fois chaque deux jours En mois de novembre on a construit une serre tunelle en plastique a r e r guli rement pour assurer et obtenir la temp rature id ale pour les plantes pendant l hiver le r sultat et l effet de la serre sont efficaces La d construction de la serre tunelle a t faite la fin du mois de mars La r colte a t faite pour les parties a riennes des plantes au d but de mois de juin 2 1 2 Dans la r gion de Biskra L ensemencement a t fait au d but de mois de mars au niveau des pots remplient de la tourbe qui a une grande teneure en carbone c est un sol de meilleur qualit utilis e pour assurer un grand pourcentage de germination des graines L irrigation a t faite r guli rement une fois chaque deux jour par l arrosage utilisation de l arrosoir l eau utilis e a t de la r gion consid r comme eau potable La
50. lus de temps c est la GC MS Chromatographie en phase gazeuse coupl e a spectrom trie de masse 85 R f rences biblio graph ques R f rences bibliographiques 1 A Fowlis Gas Chromatography Analytical Chemistry by Open Learning Second Edition John Wiley amp Suns Lid 1995 2 J Bruneton El ment de Phytochimie et Pharmacognosie Ed Tech Et Doc Ed Lavoisier Paris 1987 3 Jack Cazes et Raymond P W Scott Chromatography Theory Marcel Dekker 2002 4 James M Miller Chromatography Concepts And Contrast John Wiley amp Sons New York 1988 5 J TRANCHANT J Buzon N Guichard J Lebbe A PREVOT J SERPINET Pr face du Professeur P Chovin Manuel Pratique de Chromatographie en Phase Gazeuse Deuxi me dition enti rement refondue MASSON amp C DITEURS 1968 6 Jeanne Rose 375 Essential Oils and Hydrosols Frog Ltd Berkeley California 1999 7 Koumaglo Kossi Honor La Flore Aromatique et les Huiles Essentielles d Afrique de L ouest Universit de Lom laboratoire des Extraits V g taux et Ar mes Naturels Lom Togo 8 L Gattermann Laboratory Methods of Organic Chemistry New York the Macmillan Company 1937 9 Magness J R G M Markle C C Compton Food and feed crops of the United States Bul 828 New Jersey Agr Expt Sta 1971 10 Marie H l ne Paris Sous la direction de Jean Fran ois PHAM L analyse des compos s organiques volatils CO
51. matogramme nous pouvons d coder le terrain de la personne dans son d s quilibre cette analyse apportant un tr s int ressant compl ment d information en orientant et tayant le diagnostic de fa on pr cise Les huiles essentielles favorisent le d veloppement des souches saines c est l qu elles d montrent toute leur action antibiotique De plus elles respectent la flore saine tout en attaquant la flore pathog ne contrairement aux antibiotiques chimiques 15 7 1 2 Action anti bact rienne Les huiles essentielles neutralisent sans difficult aucune tous les germes bact riens stoppant ainsi leur activit microbienne 15 Elles sont ainsi tr s bien indiqu es dans tous les tats infectieux sans restriction aucune 15 Les mol cules aromatiques qui agissent dans ce sens sont les ph nols les monoterp nols stimulent les d fenses naturelles les ald hydes les c tones 15 7 1 3 Action antivirale Les huiles essentielles d truisent les agents pathog nes responsables de l infection microbes champignons virus toxines infectieuses Elles sont donc utiliser dans toutes les affections virales telles que la grippe l herp s le zona le sida la poliomy lite 15 25 Chapitre II G n ralit s sur les huiles essentielles Elles parviennent chasser les d chets accumul s dans le corps et qui n ont pu tre vacu s par les voies naturelles d limination tout en respectant la flo
52. n vert est de 0 196 3 1 2 Le rendement pour la r gion de Biskra Le rendement pour la sous esp ce basilic purple opal est de 0 33 3 1 3 Le rendement pour la r gion de Ghardaia Le rendement pour la sous esp ce basilic citron est de 0 48 3 2 Discussion La comparaison des rendements de notre travail avec ceux des d autres travaux et de la litt rature similaires en m thode d obtention des huiles essentielles montre que nos rendements sont satisfaisants Le rendement de l huile essentielle obtenue a partir de la sous esp ce basilic citron cultiv dans la r gion de Ghardaia est le meilleur 0 48 63 Chapitre V Analyses r sultats et discussion 4 Partie exp rimentale pour les analyses par la 4 1 Les analyses chimiques et la d tection des compos s chimiques totaux et des chemotypes Les analyses chromatographique qui d tectent les compos s chimiques de nos huiles essentielles ont t faites par un appareil de chromatographie en phase gazeuse CPG type SHIMADZU GC17A au CNRS centre nationale de la recherche scientifique Lyon France Les analyses sont faites selon les conditions op ratoires indiqu es dans le Tableau 06 Les r sultats des analyses chromatographiques sont illustr s en chromatogrammes puis on a calcul s les Indices de r tention d apr s les temps de r tention des huiles essentielles et des alcanes inject es une s rie d alcanes de C8 C30
53. ne seul analyse a t faite c tait l analyse par CPG chromatographie en phase gazeuse L identification des compos es des huiles essentielles a t faite par comparaison des indices de r tention calcul es avec les indices de r tention de la litt rature L interpr tation de nos r sultats nous a permi de constater que 84 Conclusion g n rale L identification de compos s des huiles essentielles faite pour des dizaines de mol cules qui taient pr sentes en diff rents pourcentages pour chaque huile essentielle et ca nous a permi aussi de d tecter ces grandes diff rences L existence de quatre chemotypes qui ont tous une grande importance en plusieurs utilisation et domaines ces mol cules sont Eugenol pour la sous esp ce basilic grand vert cultiv e Ouargla Linalool pour la sous esp ce basilic nain compacte cultiv e Ouargla Methyl eugenol pour la sous esp ce basilic purple opal cultiv e Biskra Methyl cinnamate pour la sous esp ce basilic citron cultiv e Ghardaia La sous esp ce basilic nain compacte est tr s riche en compos s terp niques La sous esp ce basilic grand vert cultiv Ouargla pr sente une grande teneur d eugenol c tait de 34 92 La CPG simple n est pas suffisante pour identifier tout les compos es d une huile essentielle facilement Il existe une m thode qui peut faciliter et assurer le processus et qui permet de gagner p
54. nsi les solut s s lueront par ordre de leurs coefficients de distribution croissants en ce qui concerne la phase stationnaire 3 Avant que la CPG ne soit devenu populaire vers la fin des ann es 50 la seule mani re de s parer les mat riaux volatils tait par la distillation qui s pare des mat riaux bas s sur des diff rences dans la pression de vapeur ou le point d bullition La CPG est semblable cet gard mais ses s parations d pendent galement de la nature de la phase stationnaire qui lui donne beaucoup plus de polyvalence que la distillation Imaginer le plaisir et la surprise des distillateurs qui pourraient maintenant s parer des mat riaux avec les points d bullition troits comme le benz ne et le cyclohexane Et elle tait facile rapide et pas trop ch re en outre ils n ont pas d s inqui ter des az otropes 4 49 Chapitre IV Analyses de l huile essentielle La chromatographie en phase gazeuse permet de s parer des m langes gazeux complexes par une suite continue d quilibres s tablissant entre une phase mobile gazeuse et une phase stationnaire appropri e 10 La chromatographie en phase gazeuse a commenc exactement comme technique qualitative plus pr cis ment plac e sur s parer et probablement identifier des composants dans un m lange plus que d terminer la quantit de chaque composant Au d but l identification a t bas e sur le temps de r tention
55. nt tr s bien dans tous les types de douleur Elles apaisent les irritations calment les spasmes et les d mangeaisons Elles diminuent la sensibilit d une zone ayant subi un choc ou un traumatisme tout en soulageant la souffrance 15 7 1 10 Action d toxicante Les huiles essentielles d sintoxiquent r gularisent stimulent les fonctions de l organisme en ayant des actions sp cifiques sur chaque organe Elles sont quilibrantes tonifiantes et poss dent un effet dynamisant sur l nergie vitale sans pour autant l puiser 15 7 1 11 Action relaxante Les huiles essentielles ont un effet relaxant de bien tre et de d tente Elles facilitent le sommeil en favorisant l endormissement en diffuseur par voie orale en massages Elles aident le corps rel cher les tensions et sont d une exceptionnelle efficacit dans le stress 15 27 Chapitre G n ralit s sur les huiles essentielles 8 Obtention des huiles essentielles Elles sont obtenues partir de la plante par diverses mani res d pendant de la nature de la partie dans laquelle ils se produisent Elles sont obtenues par la distillation la vapeur distillation par entrainement la vapeur d eau ou distillation l eau hydrodistillation des botaniques et par compression par pression et mac ration et par l extraction par solvants 15 37 19 27 31 L huile essentielle est donc un produit d extraction dont les propri t s
56. ntielles 13 7 Les ESTERS Action r laxante Agissent surtout sur le syst me nerveux On les utilisera pr f rentiellement comme antispasmodiques mais aussi comme calmants toniques et r quilibrants nerveux 21 30 13 8 Les MONOTERPENES Action stimulante Sont surtout utilis s comme cortison like c est dire anti douleurs 21 30 13 9 Les OXYDES Action l g rement stimulante Sont utilis s pour leurs pouvoirs expectorants et anti parasitaires Secondairement ils pr sentent des propri t s d congestionnantes et mucolytiques au niveau de l arbre broncho pulmonaire essentiellement 21 30 13 10 Les PHENOLS Action stimulante Sont de tr s puissants anti infectieux anti viraux anti bact riens fongicides et parasiticides Ils ne sont d habitude utilis s que pour ces propri t s et sont biologiquement dangereux dermocaustiques h patotoxiques L utilisation des ph nols ne peut se faire comme pour les c tones par voie d auto m dication leur utilisation par voie interne doit se faire avec la plus grande circonspection 21 30 35 Chapitre G n ralit s sur les huiles essentielles 14 Importance de chemotype et am liorations g n tiques Depuis 1984 nous avions caract ris la diversit chimique des esp ces d Ocimum pour identifier des chemotypes d int r t commercial potentiel Les tudes G n tique et les tudes d levage ont t lanc es pou
57. ol et le m thyl eug nol sont des ph nols L eug nol et le m thyl eug nol sont des anti inflammatoires anti aggr gants plaquettaires anesth siques locaux et antibact riens mais l association avec les autres terp nes fait consid rer la feuille de basilic surtout comme un r gulateur des fonctions digestives eupeptique carminatif anti gastralgique et antispasmodique Le linalool est un terp ne alcool Le m thyle cinnamate est un m thyle ester de l acide cinnamique 5 Conclusion Parmi les sous esp ces cultiv es il y a des sous esp ces qui sont rarement cultiv es dans les r gions de notre tude donc on n tait pas sur pour les r sultats de culture pour eux L interpr tation des r sultats des 4 analyses chromatographiques nous a permit de conclure que La variance dans les conditions de culture climat nature de sol etc influent directement sur la composition d huile essentielle Quatre chemotypes ont t d termin s Eugenol Linalool Methyl eugenol et Methyl cinnamate Les compos es chimiques pr sentes dans nos huiles essentielles extraites sont nombreux et diff rentes qualitativement et quantitativement Le chemotype qui a la grande teneur a t l eug nol et qui a une grande importance dans plusieurs domaines surtout en 81 Chapitre V Analyses r sultats et discussion pharmacoth rapie Donc le basilic est une source importante d eug nol La pr sence
58. on 35 Elle est bas e sur le fait que beaucoup de substances qui ont les points d bullition consid rablement au dessus de celui de l eau sont volatilis es par la vapeur inject e jusqu un degr proportionnel leur pression de vapeur cette temp rature et puis le m lange substances vapeur d eau compagnon est condens es dans un r fr girant 8 La plante est plac e dans un ballon au dessus d un chauffe ballon sans tre en contact avec l eau On admet que la vapeur p n tre les tissus de la plante et vaporise toutes les substances volatiles Ces derni res n ayant qu une solubilit partielle dans l eau vont pouvoir tre s par es par d cantation du distillat refroidi 2 29 30 35 Des compos s volatils non miscibles avec l eau peuvent tre pur s par codistillation avec l eau un processus galement connu sous le nom de distillation par la vapeur La combinaison de deux liquides non miscibles a toujours comme cons quence un point d bullition inf rieur pour le m lange que pour les liquides s par s La distillation par la vapeur est employ e dans la purification des compos s avec les points bullition tr s lev es et dans l isolement des compos s volatils des plantes 12 41 Chapitre III L obtention d huile essentielle Sortie d eau Aspiration d air M lange a distill t Entr d eau Source de Source de chaleur chaleur Figure 14 Sch ma illust
59. oro Le de II Dd A E d III List des tableau dH IV PSC d s ETES E 222212 E E V List des abr viations o5 EU ISO s VII Introduction g n rale re ERE AS OU WA EE CER 01 L hores iT TTE 04 2 Pr sentation et historique du basilic Ocimum basilicum L 04 3 Morphologie du reprae ttt herr Rn eX Rp renier denses 05 3 1 Description des sous esp ces de basilic qui ont fait l objet de notre tude 08 I2 T 10 A C Ult te 10 MESI icis nis 1 10 4 2 Distances recommand es pour l ensemencement 11 d HS ALOI A 11 dd DL 12 45 Saison bastie rat nt 12 S ood M EHE 12 6 Utilisation de Ra te ti es 12 GI Pour L alimerntattoli ea en rU eee ts 12 62 En pharmacie oibus A 13 To 6611513 21221110 0 us ue eo otov En el oret aes RTE A SM Pen ne ss an 13 TA S CDON R oen 13 TD ROIHIBOIOUEUES cuc des nn e ops bee dE MIN dent Are A S 13 Toc 61115 AAA ee Anc E 14 8 Valeur a e ELI redde 14 9 Classification taxono
60. r gion de BISKEa paire aer enn idee png 57 2 1 3 Dans la r gion de Gharda a needs 58 2 2 Analyse des eaux utilis es en irrigation 58 3 Partie exp rimentale pour l obtention des huiles essentielles 61 3 1 L obtention des huiles essentielles et calcul de rendement 61 3 1 1 Dans la r gion d Ouargla dede tite 63 2 12 Dans lar gion de BISKEB E D 63 3 1 3 Dans la r gion de Gharda a vs 63 327 DISCUSSION ee le ek Deos EIE TERRE DURATA ERIT ERU RN RIS 63 4 Partie exp rimentale pour les analyses par la CPG 64 4 Les analyses chimiques et la d tection des compos s chimiques totaux et des CHEMOtYDES MTTTP 64 4 2 Pr sentation des r sultats de CPG des huiles essentielles 66 4 2 1 Analyse de l huile essentielle d Ouargla 66 4 2 2 Analyse de l huile essentielle de Biskra 67 4 2 3 Analyse de l huile essentielle de Gharda a 67 Z3 DISCUSSIOII d sa RAR es st EUR nus eut 80 4 3 1 Dans la r gion de Ours 80 4 3 2 Dans la r gion de Biskra LE vo SERERE vo ut 80 4 3 3 Dans la r gion de Gharda a cesses 80
61. r augmenter toute la teneur en huile essentielle concentration des chemotypes commerciaux de basilic et pour augmenter la teneur des constituants sp cifiques d huile en d autres chemotypes tels que qui ont une haute teneur en chavicol m thylique et cinnamate m thylique 14 15 Conservation des huiles essentielles Les huiles essentielles sont fragiles et volatiles Elles doivent tre conserv es dans des flacons soigneusement bouch s l abri de l air de la lumi re et des variations de temp rature Les huiles essentielles se conservent entre 2 et 5 ans l abri de la lumi re et de l air Il est donc indispensable qu elles soient conserv es dans un flacon brun herm tiquement ferm 24 16 Conclusion Une huile essentielle peut avoir des effets diff rents selon ces composantes Elle peut tre en m me temps s dative et stimulante Il faut donc connaitre la composition chimique des huiles essentielles et leurs actions biologiques afin d estimer au mieux leurs effets probables sur l organisme 21 36 Chapitre l obtention d huile essentielle Chapitre L obtention d huile essentielle 1 Introduction L obtention des huiles essentielles est un processus tr s important de l importance de la qualit des huiles essentielles eux m me Plusieurs m thodes peuvent tres utilis es mais comment choisir la bonne m thode C est une question tr s importante 2 L obtention des hu
62. r d eau avec entrainement par huiles essentielles 43 7 Autres types d obtention des huiles essentielles extractions 44 7 1 Entra nement avec des solvants 6 so corso a deo ers oe Reo pPRT SERIA TOR 44 T 2 Extraction par expEIesslQli Loses eva se orienta RS nie vo beste aes 44 7 3 Extraction par enfleurage iesus ye eur ebrei ner RO EE RENE PARU REED MEET RAS 45 7 4 Extraction par liquide oo eoe ee co ER RP EE E 45 8 Valeur indispensable la distillation cesses 45 Conclusion ossa to exei 46 Ses ois ooa ERUIT cs 48 2 Historique de la chromatographie tenant ane 48 3 Principe de la CPGE SR RS ANR ARE ae Ra NA D 49 3 1 Analyses quantitatives pe PED A ERR UR E ERA Ede Hu OBAS dues 51 3 2 M thodes d analyse qualitative e t ear oe rts gs 51 3 2 1 M thode par exaltation des pics 51 3 2 2 M thode des indices d r tention eee repense 51 dr Goles 22220 HEURE 54 1 Introductio e M RI NIE RNA Es 56 2 Partie exp rimentale pour la culture de basilic 56 2 1 Conditions de culture et r colte de basilic 56 2 1 1 Dans la r gion d OS Pe Ee du 56 2 1 2 Dans la
63. rative de montage de distillation par l entrainement la vapeur au laboratoire 23 42 Chapitre III L obtention d huile essentielle 5 Dans quel cas on peut utiliser la distillation par la vapeur Si le produit exig dans un m lange est volatil et les impuret s ne le sont pas la distillation par la vapeur peut tre employ e 29 6 Autres types de distillation 6 1 Distillation haute pression et haute temp rature Ce mode de distillation utilis industriellement pour la parfumerie permet une extraction plus compl te des produits volatils en un temps plus court et avec moins de vapeur L eau condens e ruisselant des plantes contient des mati res v g tales qui subissent une d composition Ces produits alt rent les huiles essentielles au d triment de leur qualit Les portions les plus volatiles des huiles sont elles m mes d compos s par la haute temp rature La haute pression elle m me provoque une r sinification de la formation de compos es insolubles ind sirables Des huiles essentielles ainsi obtenues ne sont donc pas recommandables 28 6 2 Distillation la vapeur d eau avec entrainement par huiles essentielles M Certaines plantes fournissent par entrainement la vapeur des pourcentages infimes d huile essentielle C est le cas entre autres du tilleul du sureau de la m lisse du mimosa du m lilot des fleurs d acacia du lentisque pistachier Le seul proc d compa
64. re 15 Elles renforcent galement les d fenses immunitaires du corps Les mol cules aromatiques qui agissent dans ce sens sont les ph nols les monoterp nols sans effet secondaire 15 7 1 4 Action antifongique Les huiles essentielles agissent tr s bien dans les probl mes pos s par les mycoses Il est important de savoir que celles ci ne se d veloppent pas sur un terrain acide Ainsi en alcanisant un terrain non acide mais pr dispos aux mycoses il est tout fait possible d viter les infections fongiques 15 7 1 5 Action antiparasitaire Les huiles essentielles ph nols ont une action puissante sur les parasites 15 7 1 6 Action antiseptique Par leur action d sinfectante les huiles essentielles r duisent le d veloppement des germes pathog nes 15 7 1 7 Action anti inflammatoire Les huiles essentielles anti inflammatoires stimulent les m canismes de d fense naturelle r agir tout en activant les propri t s immuno modulantes Elles aident ainsi le corps en le soutenant lors de tout processus inflammatoire m me sous jacent 15 26 Chapitre G n ralit s sur les huiles essentielles 7 1 8 Action antispasmodique Selon le dosage les huiles essentielles antispasmodiques auront soit une action s dative soit une action tonifiante Par ailleurs elles sont antid pressives 15 7 1 9 Action analg sique antalgique anesth sique Les huiles essentielles agisse
65. ression se fait au moyen de presses hydrauliques mais on utilise des proc d s plus primitifs comme l ponge ou l cuelle qui donnent un produit de qualit bien sup rieure 28 44 Chapitre L obtention d huile essentielle 7 3 Extraction par enfleurage Ce proc d utilis Grasse en particulier pour le jasmin la tub reuse avant le d veloppement de l extraction par solvants est maintenant abandonn Il consistait d s la r colte de fleurs fraiches les intercaler entre des couches de graisse animale qui retenait le parfum 28 7 4 Extraction par CO liquide Cette m thode utilis e d abord en brasserie pour obtenir des extraits de houblon semblait priori int ressante d une part pour augmenter le rendement dans le cas de plantes peu riches en huiles essentielles d autre part le s vaporant compl tement ne laissait aucune trace toxique dans l huile essentielle 28 8 Valeur indispensable la distillation La valeur indispensable la de distillation est le rendement ou bien le rendement de la distillation Le rendement exprim en pourcentage 96 Il est calcul par la relation 1 suivante rus t R Masse de l huile essentielle pure 100 1 REC E E qut Masse de basilic frais ou sec utilis e x 45 Chapitre L obtention d huile essentielle 9 Conclusion La m thode d obtention des huiles essent
66. rne la plante et la m thode d extraction utilis es Famille et classification botanique de la plante Origine g ographique de la plante M thode d extraction utilis e pour l obtention de l huile essentielle et le rendement de l extraction 12 2 Caract ristiques qui peuvent tre d tect es par les sens humaines Les huiles essentielles ont un parfum mais elles ont galement une couleur une viscosit et un go t 6 12 3 Caract ristiques physico chimiques qui sont d finis par des appareilles au laboratoire Densit Indice de r fraction Pouvoir rotatoire Chemotype 12 4 Caract ristiques biologiques qui indiquent le r le et l utilisation des huiles essentielles Par exemple les propri t s biologique et m dicinales les indications l usage interne ou externe et d autres informations peuvent tres ajout es par les fabriquant des huiles essentielles Voila un exemple de quelques caract ristiques de l huile essentielle de basilic au Tableau 04 31 Chapitre G n ralit s sur les huiles essentielles Tableau 04 Caract ristiques de l huile essentielle de basilic 18 Famille Labi es Origine Pays m diterran ens Obtention par distillation des feuilles Rendement 0 03 0 5 Densit 0 90 0 97 Indice de r fraction 1 51 1 52 Pouvoir rotatoire 1 a 2 Odeur chaude et camphr e Chemotypes m thyl chavico
67. s 3 et 4 que les alcanes lin aires on des indices multiples de 100 I pentane 500 I hexane 600 etc Ces indices de r tention se sont av r s remarquablement reproductibles pour une phase stationnaire donn e quelque soit le pourcentage d impr gnation pour les colonnes remplies ou l paisseur du film pour les colonnes capillaires ils sont relativement ind pendants de la temp rature Cette bonne reproductibilit a t valu e 0 5 ceci permet de comparer et d utiliser des r sultats venant de laboratoires diff rents Ils existent donc des tables r pertoriant les indices de r tention de nombreux produits chimiques La bonne pratique du laboratoire de chromatographie dit qu un produit inconnu peut tre identifi si l on obtient une bonne co ncidence pour deux phases stationnaires diff rentes entre les indices de r tention de la litt rature et les indices exp rimentaux du produit 32 53 Chapitre IV Analyses de l huile essentielle 4 Conclusion La chromatographie reste toujours la meilleure technique d analyse qui permet de d finir plusieurs caract ristiques des mati res par la connaissance de ces compos s chimique La CPG est une technique d analyse pr cise et fiable 54 Chapitre V Analyses r sultats et discussion Chapitre V Analyses r sultats et discussion 1 Introduction Cette partie contient tous qu on a pratiqu s et aux plusieur
68. s niveaux c est a partir de la culture des sous esp ces de basilic l obtention des huiles essentielles et ces calculs qui ont une relation avec eux jusqu aux analyses chromatographiques par la CPG et ces r sultats 2 Partie exp rimentale pour la culture de basilic On a sem les graines de cinq sous esp ces d Ocimum basilicum L le basilic nain compact le basilic grand vert le basilic citron le basilic purple opal et le basilic cannele dans trois r gions diff rentes du sud de l Alg rie Ouargla Biskra et Gharda a donc dans trois conditions climatiques diff rentes la p riode d ensemencement et d irrigation sont aussi diff rents Les plantes sont en contact direct avec les diff rents climats dans des zones a r es et ensoleill Apr s une p riode de trois mois on a collect nos plantes 2 1 Conditions de culture et de r colte de basilic 2 1 1 Dans la r gion d Ouargla On a sem exactement la r gion de Hassi Ben Abd Allah zone agriculturale L ensemencement a t fait directement au sol de la r gion en mois d octobre 2006 et autrement au printemps 2007 d but de mars 2007 L irrigation a t traditionnel par coulement de surface par immersion une fois chaque deux jours par l utilisation d eau locale de la r gion Les sous esp ces qui sont r ussis en germination et passent jusqu au stade de fleurisation sont le basilic grand vert et le basilic nain compact
69. temps n cessaire pour qu un solut parcoure toute la colonne s appelle le temps de r tention tp la vitesse lin aire moyenne du gaz porteur tant m avec un d bit Ds la sortie de la colonne il lui correspond un volume de r tention Vg Tel que Vp Ds 5 E paru B T hexme Produit i 005 ta t 6 Temps ran Figure 15 Exemple de chromatogramme 32 Les indices I i se calculent de deux mani res diff rentes suivant le fonctionnement en temp rature du chromatographe En mode isotherme on injecte sur la colonne une temp rature et une pression d entr e donn es les alcanes lin aires de formule 2 avec n gt 5 On rep re les temps de r tention r duits de ces alcanes t n et t n 1 et celui du produit consid r t i Si un solut est lu entre les deux alcanes n et 1 son indice de r tention I est donn par la formule suivante quation de KOVATS 52 Chapitre IV Analyses de l huile essentielle logt i logt n 1 9D t n 1 logt n 100 n 3 Dans la formule 3 on peut employer indiff remment des logarithmes n p riens ou des logarithmes d cimaux En mode programmation de temp rature la formule est diff rente et utilise des temps de r tention normaux t i quation de Van Den Dool t i t n Tu 100 4 I 100 Il r sulte des formule
70. thodes de distillation Deux techniques de distillation par l eau distill e sont applicables dans le cas des huiles essentielles dont une technique peut assurer une qualit des huiles essentielles obtenues mieux que l autre 4 1 L hydrodistillation Voir Figure 12 Et Figure 13 Cette m thode consiste immerger directement le mat riel v g tal traiter dans l eau distill e qui est port e bullution Les principes volatiles sont alors entrain s par la vapeur d eau et apr s condensation du distillat sont s par s par d cantation 2 39 Chapitre III L obtention d huile essentielle Figure 12 Sch ma illustrative de montage exp rimental de l hydrodistillation au laboratoire 45 CHEMINEE EAU FROIDE Essence Hydrolat x ESSENCIER Figure 13 Sch ma illustrative de montage industriel de l hydrodistillation 46 40 Chapitre L obtention d huile essentielle 4 2 Entra nement la vapeur d eau a basse pression Voir Figure 14 C est la m thode utilis e depuis plus d un mill naire qui est susceptible si elle est bien conduite de fournir des produits de qualit 28 Cette m thode importante de purification est tr s intensivement employ e dans le laboratoire et grande chelle dans l industrie chimique 8 La majorit des huiles essentielles est obtenue par distillation la vapeur d eau sans d tartrant chimique et sous basse pressi
71. tible avec un usage m dical est d entrainer ces huiles essentielles par distillation la vapeur avec une ou plusieurs autres 43 Chapitre III L obtention d huile essentielle huiles essentielles Ces derni res ne peuvent tre choisies au hasard Il faut que l on retrouve des propri t s voisines m me att nu es ou bien des propri t s compl mentaires les composants du m lange agissant en synergie Le produit obtenu aura alors des propri t s comparables celles de l huile essentielle pure 28 7 Autres types d obtention des huiles essentielles extractions 7 1 Entrainement avec des solvants Ce mode d obtention qui conduit aux concrets et absolus est proscrire pour les huiles essentielles destination th rapeutiques Cette technique est actuellement appliqu e dans le monde entier soit pour obtenir des produits que l on ne peut extraire par un autre proc d soit en vue de rendements bien sup rieurs Les solvants organiques utilis s sont tr s dangereux aussi bien pour l ouvrier qui les manipule que pour celui qui absorbe les produits ainsi obtenus Propane l hexane Benz ne tolu ne M thanol Alcool thylique Ac tone etc 28 7 2 Extraction par expression Ce proc d est le plus simple de tous mais il ne peut convenir que pour des corces fraiches tr s riches en essence Telles sont les corces des hesp rid s c drat bergamote limette citron orange L exp
72. torique de la chromatographie En 1906 un chimiste russe Tswett a s par des pigments v g taux color s sur une colonne remplie de carbonate de calcium pulv rulent les pigments taient entrain s avec de l ther de p trole m lange pentanes et d hexanes Il a observ sur la colonne la formation de bandes de couleur diff rente vert orange jaune a donn cette technique le nom de chromatographie criture des couleurs Il a d fini galement les termes chromatogramme lution r tention Cette technique fut quasi abandonn e jusqu en 1930 o Edgar Lederer a purifi par la m thode de Tswett la lut ine du jaune d ceuf 48 Chapitre IV Analyses de l huile essentielle Vers 1940 Martin et Synge d veloppent la pratique et la th orie de la chromatographie ils obtiennent le prix Nobel en 1952 En 1952 mise au point de la Chromatographie en Phase Gazeuse En 1968 mise au point de la Chromatographie Liquide Haute Performance CLHP ou HPLC en anglais En 1979 premi re s paration chirale par HPLC 32 3 Principe de la CPG La CPG est un processus de s paration qui est r alis par la distribution des substances pour tre s par es entre deux phases une phase stationnaire et une phase mobile Ces solut s distribu s pr f rentiellement dans la phase mobile se d placeront plus rapidement par le syst me que ceux distribu s pr f rentiellement dans la phase stationnaire Ai
73. u grand vert cultiv e dans la r gion d Ouargla Nom de mol cule solut 3492 36 2788 1338 29 55 22 18 984 1091 Cineole eucalyptol 13 25 16 476 1026 70 Chapitre V Analyses r sultats et discussion Abundance 7000000 6500000 6000000 5500000 5000000 4500000 4000000 3500000 3000000 2500000 2000000 1500000 1000000 500000 7 063 2 00 4 00 6 00 800 1 15 988 25 660 153 681 22 166 al Kii 53 28 dite d p 10201 pat 29 717 33 490 31 123 312523005 MI 371466 36 608 1 798 36 370 Ki iis sud Men recep 0 00 12 00 14 00 16 00 18 00 20 00 22 00 24 24 00 26 00 28 00 30 00 32 00 34 00 36 00 38 00 40 00 42 00 0 44 00 46 00 48 00 50 00 52 00 54 00 5 56 00 58 00 6000 Figure 18 Chromatogramme de l analyse par CPG de l huile essentielle de la sous esp ce basilic nain compact ou fin vert cultiv e dans la r gion d Ouargla 71 Chapitre V Analyses r sultats et discussion Tableau 09 Compos s identifi s dans l huile essentielle extraite partir de la sous esp ce basilic nain compact ou fin vert cultiv e dans la r gion d Ouargla Para xylene 005 6 102001 858 Myrcene _ 004 8 14 845 984 Cis 3 hexenyle acetate 0 04 9 114969 987 13 29716 1393 0 06 29 907 1399
74. ue et augmente la r sistance du corps A une action anti 29 Chapitre G n ralit s sur les huiles essentielles d pressive et stimule la m moire Effet euphorisant R gularise le syst me neurov g tatif antispasmodique antiviral f brifuge Conseill aussi dans l h patite virale maladies infectieuses tropicales et le mal des transports Stimulant digestif surr nal et circulatoire 25 11 1 Indications Digestive Antiseptique intestinal Flatulence indigestion naus e gastro ent rites D congestionnant biliaire T te mal d oreilles rhumes sinusites migraines Musculaire spasmes douleurs Crampes du bas ventre Nerveux insomnies anxi t d pression hyst rie ind cision insuffisance nerveuse tonique Epuisement intellectuel spasmophilie Vertiges Respiratoire asthme bronchite toux catarrhe emphys me hoquet coqueluche Peau molle ou congestionn e anti moustique calme les piq res de gu pe condition que l huile soit pure Divers facilite l accouchement et l allaitement Amincissement R gulateur des menstruations emm nagogue Paralysie 25 12 Caract ristiques des huiles essentielles La qualit des huiles essentielles et leurs utilisations dues ces caract ristiques Les huiles essentielles sont caract ris es par 30 Chapitre G n ralit s sur les huiles essentielles 12 1 Caract ristique qui conce
75. uiles essentielles par simple comparaison entre les indices de r tention de litt rature Van Den Dool index L identification n est pas d finitive pour cela nous avons besoin d une technique plus performante la GCMS 4 2 Pr sentation des r sultats de CPG des huiles essentielles 4 2 1 Analyse de l huile essentielle d Ouargla La Figure 17 repr sente le chromatogramme de l huile essentielle des feuilles et sommit s fleuries de la sous esp ce basilic g ant ou grand vert Les compos s qui ont pu tre identifi s et leurs param tres de r tention ainsi que leurs pourcentages pris directement des aires des pics du chromatogramme sont pr sent s dans le Tableau 07 56 compos s ont t d tect s et identifi s Les taux des 3 compos s majoritaires sont 34 9296 d Eugenol 29 5596 de Linalool et 13 2596 de Cineole eucalyptol Le Tableau 08 r sume les indices de r tention des compos s majoritaires d tect s de cette analyse D o la Figure 18 repr sente le chromatogramme de l huile essentielle des feuilles et sommit s fleuries de la sous esp ce basilic nain compact ou fin vert Les compos s qui ont pu tre identifi s et leurs param tres de r tention ainsi que leurs pourcentages sont pr sent s dans le Tableau 09 74 compos s ont t d tect s et identifi s Les taux des compos s majoritaires sont 33 84 de Linalool 17 37 d Eugenol et 4 82 de T cadinol 66 Chapitre V An

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