Vivaflow 50
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1. Entree Injectez le liquide dans le syst me pour liminer les poches d air Le d bit de recirculation doit tre compris entre 200 et 400 ml min et le flux doit sortir par la ligne de filtrat L indicateur de pression doit afficher environ 2 5 bar Laissez 400 ml traverser la cuve de filtrat V rifiez que les points de raccordement des tubes sont tanches Vidangez le syst me et videz ou rempla cez la cuve de filtrat voir la section r cup ration Le syst me est maintenant pr t l emploi Retour Echantillon Filtrat Pompe Deux modules Assemblage et rin age de deux modules 1 Montez le syst me comme illustr ci dessus Danger v rifiez que les raccords de Luer sont bien ferm s avant utilisation 2 Effectuez le raccordement aux entr es des deux modules l aide du connecteur Y VFA005 de deux tubes taille 16 sections de 12 cm et de deux raccords de Luer femelles 3 Notez la position de la soupape d tranglement sur la ligne de retour sur chaque module Les membranes Vivaflow contiennent des traces de glyc rine et d acide de sodium Pour retirer ces sub stances chimiques et v rifier la s curit des raccordements de tubes il est conseill de rincer le module et de tester le syst me a pleine pression avant d introduire l chantillon 4 Introduisez 1 litre d eau d ionis e dans un tube ad quat Entr es Deux sorties U2. SH Sartorius Mode d emploi Vivaflow 50 200 TATIANA LU 85032 539 15 Table des mati res Vivaflow 50 Module unique Modules associ s Diafiltration Dessalage Concentration R cup ration Composants du syst me Caract ristiques techniques Informations de commande Compatibilit chimique Vivaflow 200 Fonctionnement Module unique Deux modules Diafiltration Dessalage Concentration R cup ration Caract ristiques techniques Nettoyage Stockage Informations de commande Compatibilit chimique 2 ON NN A UT BR L Lo 12 13 14 14 14 15 16 16 18 19 Vivaflow 50 Con u pour un usage unique uniquement Toute autre utilisation constitue une utilisation inappropri e R servoir chantillon diafiltration VFA006 Module unique A Montez le systeme comme dans le schema ci contre Notez la position de la soupape d tranglement sur la ligne de retour Les membranes Vivaflow contiennent des traces de glyc rine et d acide de sodium Pour retirer ces substances chimiques et v rifier la s curit des raccordements des tubes il est conseill de rincer le module et de tester le syst me pleine pression avant d introduire l chantillon Introduisez 500 ml d eau d ionis e dans un tube ad quat Le r servoir de diafiltra tion d chantillons Vivaflow r f VFA006 est conseill Cuve de filtrat Soupape d tranglement rose 4 Pompez le liqui
3. 0 1 M NaOH Ill Membranes Hydrosart 250 ml de 0 5 M NaOH 4 Recirculation 50 100 ml min pendant 30 40 minutes 5 Videz le syst me et r injectez 250 ml d eau d ionis e dans le syst me pendant 5 10 minutes 6 Videz et jetez la solution de rin age puis r injectez 500 ml d eau d ionis e pour liminer le filtrat Le syst me est mainte nant pr t l emploi 16 Tableau 5 Performances Temps min pour concentrer jusqu 20x 3 bar de pression d entr e 20 C 1 litre Flux moyen R cup ration Rin age de volume initial en ml min directe en de 25 ml BSA 1 mg ml 66 000 MW 5 000 coupures de membrane PES 29 33 98 gt 99 5 000 coupures de membrane Hydrosart 70 14 98 gt 99 10 000 coupures de membrane PES 23 41 96 gt 99 10 000 coupures de membrane Hydrosart 35 27 98 gt 99 30 000 coupures de membrane PES 25 38 96 99 30 000 coupures de membrane Hydrosart 20 48 96 gt 99 50 000 coupures de membrane PES 22 43 96 98 y Globulines 1 mg ml 160 000 coupures de membrane en moyenne 100 000 coupures de membrane PES 54 18 96 99 100 000 coupures de membrane RC 45 21 96 99 Levure 1 mg ml S Cerevisiae 0 2 pm PES 11 86 92 98 Diluez la concentration de solut s volume initial de 1 litre 3 bars 10 000 coupures de membrane PES BSA 0 001 mg ml 18 52 90 98 BSA 0 01 mg ml 20 4
4. 1 Montez le syst me comme illustr pour les modules reli s Si un seul module est n cessaire connectez le la place des modules reli s Rincez le syst me comme d crit pr c demment Introduisez la solution purifier dans le r servoir chantillon diafiltration de 500 ml r f VFA006 ou concentrez un volume plus important jusqu a 500 ml maximum afin qu il remplisse totalement le r servoir de 500 ml V rifiez que le couvercle du r servoir est bien ferm Remplissez un grand r servoir d alimenta tion avec du solvant et pompez l chan tillon dans le syst me comme pour la concentration 5 Comme le volume diminue dans le reser voir de 500 ml le vide cr g n re un transfert de solvant entre la conduite d alimentation et le grand reservoir L echange de plus de 99 du solvant est possible avec un volume de transfert quivalent environ 5 fois le volume de l chantillon Concentration 1 Remplissez le r servoir d alimentation avec l chantillon Lorsque des volumes initiaux sup rieurs 500 ml sont n cessaires introduisez 500 ml dans le r servoir d chantillon de diafiltration le volume restant dans un autre conteneur puis reliez les r servoirs comme indiqu dans la section d di e la diafiltration Utilisez un large conteneur pour la totalit de l chantillon puis immergez directement les lignes d alimentation et de r
5. OK OK Alcool d isopropyle NO NO NO Tolu ne NO NO NO Acide lactique 5 96 OK OK OK Acide trifluoroac tique 10 NO OK Mercapto thanol 10 mM OK OK OK Acide trifluoroac tique 10 OK NO OK M thanol 60 OK OK OK Ur e 8 M OK OK OK n Butanol 70 OK OK OK OK Acceptable A tester NO Non recommand 19 Sartorius Stedim Biotech GmbH August Spindler Strasse 11 37079 Goettingen Allemagne T l phone 49 551 308 0 Fax 49 551 308 3289 www sartorius stedim com Copyright de Sartorius Stedim Biotech GmbH Goettingen Allemagne Tous droits r serv s La r impression ou la transmission totale ou partielle de cette documentation sous quelque forme et par quelque moyen que ce soit est interdite sans l accord crit pr alable de Sartorius Stedim Biotech GmbH Les informations caract ristiques techniques et illustrations contenues dans ce manuel sont fournies telles qu elles taient connues la date indiqu e ci dessous Sartorius Stedim Biotech GmbH se r serve le droit de modifier sans pr avis les technologies fonctions caract ristiques techniques et l aspect du mat riel Date d cembre 201 1 Sartorius Stedim Biotech GmbH Goettingen Allemagne Imprim en Allemagne sur du papier blanchi sans chlore W N de publication SLU6097 f11122 Ver 12 2011
6. pi ces VFA031 Raccords de Luer femelles 10 pi ces VFA032 Kit de tubes VF40 2x1 m de tubes PVC taille 16 avec raccords d admission VFA034 2x50 cm de tubes PVC taille 16 avec soupapes d tranglement de 0 6 mm 1x raccords d entr e Soupape d tranglement de 0 6 mm 6 pi ces VFA035 Accessoires Vivaflow 50 Pompe p ristaltique vitesse variable conomie Masterflex 230 V VFPOO1 Pompe p ristaltique vitesse variable conomie Masterflex 115 V VFP002 R servoir chantillon et ou diafiltration de 500 ml VFAOO06 T te de pompe facile charger Masterflex taille 15 VFAO13 T te de pompe facile charger Masterflex taille 16 VFAO12 Support Vivaflow 50 VFAO16 Indicateur de pression 1 a 3 bars VFA020 9 Tableau 3 Compatibilit chimique pour le Vivaflow 50 Solution PES RC Solution PES RC Acide ac tique 25 96 OK OK Acide perac tique 0 2 96 OK OK Ac tone NO NO Ph nol 1 96 OK Hydroxyde d ammonium Tampon de phosphates 1 M OK OK 5 OK OK Pyridine NO NO Hydroxyde d ammonium RPMI 1640 OK OK ROUTE oK oK Acide de sodium OK OK DMEM DR DR D soxycholate de sodium Ethanol 70 9 OK OK 5 96 OK OK Ac tate d thyle NO NO Hydroxyde de sodium 1 M NO NO Formald hyde 30 90 OK OK Hydroxyde de sodium 0 1 M NO NO Acide formique 5 96 OK OK Hypochlorite de sodium Guanidine HCI 6 M OK OK 0 02 96 Hydrocarbure
7. 7 92 98 BSA 0 1 mg ml 21 45 94 99 Volume initial de 5 litres deux VF200 en parall le 3 bars 10 000 coupures de membrane PES BSA 1 mg ml 66 000 MW 67 70 97 gt 99 17 Informations de commande Les modules Vivaflow 200 comprennent un indicateur Condi R f de pression une soupape d tranglement tionne et des tubes et raccords p ristaltiques taille 16 ment 5 000 coupures de membrane PES 1 VF20P1 10 000 coupures de membrane PES 1 VF20PO 30 000 coupures de membrane PES 1 VF20P2 50 000 coupures de membrane PES 1 VF20P3 100 000 coupures de membrane PES 1 VF20P4 0 2 pm PES 1 VF20P7 100 000 coupures de membrane RC 1 VF20C4 5 000 coupures de membrane Hydrosart 1 VF20H1 10 000 coupures de membrane Hydrosart 1 VF20HO 30 000 coupures de membrane Hydrosart 1 VF20H2 Le systeme Vivaflow 200 complet comprend Pompe 240 V t te facile charger taille 16 tubes 1 VFS202 r servoir chantillon diafiltration de 500 ml Pompe 115 V t te facile a charger taille 16 tubes 1 VFS204 r servoir chantillon diafiltration de 500 ml Accessoires Vivaflow 200 Pompe p ristaltique vitesse variable conomie Masterflex 230V VFPOO1 Pompe p ristaltique a vitesse variable conomie Masterflex 115V VFP002 R servoir chantillon et ou diafiltration de 500 ml VFA006 T te de pompe facile charger Masterflex taille 16 VFAO12 T te de
8. FAO3 1 Indicateur de pression r f VFAO20 Support r f VFAO16 Connecteurs en T pour 2 piles r f VFA030 T te de pompe facile charger Masterflex r f VFAO12 Pompe Masterflex CE 230V US 115V r f VFPOO1 VFP002 Tableau 1 Caract ristiques techniques Dimensions G n rales L H 1 107 84 25 mm Canal L H 15 mm 0 3 mm Zone active de la membrane 50 cm2 Volume mort module 1 5 ml Volume de recirculation min 10 ml Volume mort non r cup rable 0 5 ml Conditions de fonctionnement Flux de la pompe 200 400 ml min Pression maximale 3 bar 45 psi Temp rature maximale 60 C Mat riaux de construction Capot principal Polycarbonate Canal de flux TPX PMP Support de la membrane TPX PMP Joints et joints toriques Silicone Indicateur de pression Polypropylene ressort SS Soupape d tranglement Polypropylene Raccords Nylon Tubes PVC qualit m dicale Tableau 2 Performances Temps min pour concentrer jusqu 20x 3 bar de pression d entr e 20 C Dispositif Trois Concentr r cup r en unique dispositifs 250 ml Volume 11Volume Direct Rin age de 10 ml initial min initial min BSA 1 mg ml 66 000000 MW 5 000 coupures de membrane PES 34 49 96 gt 99 10 000 coupures de membrane PES 22 32 94 gt 99 30 000 coupures de membrane PES 22 32 92 99 50 000
9. coupures de membrane PES 20 29 92 98 y Globulines 1 mg ml 100 000 coupures de membrane PES 43 62 92 98 100 000 coupures de membrane RC 40 58 92 98 Levure 1 mg ml S Cerevisiae 0 2 um PES 33 47 92 98 8 Informations de commande Vivaflow 50 tube de filtrat inclus tubes p ristaltiques taille 16 Conditionne R f soupape d tranglement et raccords ment 3 000 coupures de membrane PES 2 VFO5P9 5 000 coupures de membrane PES 2 VFO5P1 10 000 coupures de membrane PES 2 VFO5PO 30 000 coupures de membrane PES 2 VFO5P2 50 000 coupures de membrane PES 2 VFO5P3 100 000 coupures de membrane PES 2 VFO5P4 0 2 pm PES 2 VFO5P7 100 000 coupures de membrane RC 2 VFO5C4 Le syst me Vivaflow 50 complet comprend Pompe 240 V t te facile charger taille 16 tubes 1 VFS502 r servoir chantillon diafiltration de 500 ml support pour module indicateur de pression connecteurs T interconnecteurs de s ries Pompe 115 V t te facile charger taille 16 tubes 1 VFS504 r servoir chantillon diafiltration de 500 ml support pour module indicateur de pression connecteurs T interconnecteurs de s ries Tubes et raccords en PVC Vivaflow 50 Tubes de pompe PVC taille 16 3 m tres 3 2 x 1 6 mm VFA004 Soupape d tranglement 2 x0 4 0 6 0 8 mm VFA009 Connecteurs T pour 2 piles 2 pi ces VFA030 Interconnecteurs de s ries 6
10. de dans le syst me pour liminer les poches d air Le d bit de recirculation doit tre compris entre 200 et 400 ml min et le flux doit sortir par la ligne de filtrat L indicateur de pression r f VFAO20 si utilis doit afficher environ 2 5 bar Laissez 400 ml traverser la cuve de filtrat V rifiez que les points de raccordement des tubes sont tanches Vidangez le systeme et videz ou remplacez la cuve de filtrat voir la section r cup ration Le syst me est maintenant pr t l emploi Connecteur en T Modules associ s 1 Montez le syst me comme illustr ci contre Reliez les modules n cessaires en faisant glisser ensemble la languette et les rainures Notez la position de la soupape d tranglement sur la ligne de retour Utilisez les interconnecteurs r f VFAO31 pour relier une seule rang e de modules De plus reliez deux rangez de modules en parall le l aide des connecteurs en T r f VFA030 4 Interconnecteur Indicateur de pression 4 La trajectoire du systeme peut tre configur e d apr s la combinaison membrane chantillon La plupart des solutions sont plus adapt es aux modules connect s en parall le Les solutions tr s faible viscosit pr ferent les modules connect s en s rie Rincez le syst me comme d crit sous la section consacr e au module unique Diafiltration Dessalage
11. de diafiltration et le grand r servoir via la ligne d alimenta tion L change de plus de 99 du solvant est possible avec un volume de transfert quivalent environ 5 fois le volume de l chantillon 14 Concentration Is Remplissez le r servoir d alimentation avec l chantillon Injectez le liquide dans le systeme Le d bit de recirculation doit tre compris entre 200 et 400 ml min 500 900 ml min pour deux modules et le flux doit sortir par la ligne de filtrat L indicateur de pression doit afficher environ 2 5 bar A Danger ne pas utiliser la m me section des tubes dans la t te de la pompe pen dant plus de six heures une utilisation intensive des tubes peut entra ner une chute importante de la pression et plus tard une panne Concentrez l chantillon D s que le volume souhait est presque atteint baissez le d bit de recirculation 20 40 ml min et r injectez l chantillon concentr pendant 1 2 minutes pour augmenter la r cup ration de l chan tillon R cup ration 1 Retirez la ligne d alimentation de l chantillon R injectez le volume restant dans le r servoir conteneur Pour une r cup ration plus compl te de l chantillon rincez le syst me avec 25 50 ml d eau ou de tampon puis r p tez la r cup ration Tableau 4 Caract ristiques techniques Vivaflow 200 Dimensions G n rales L H 1 126 138 38 mm Cana
12. etour dans le liquide Injectez le liquide dans le syst me Le d bit de recirculation doit tre compris entre 200 et 400 ml min et le flux doit sortir par la ligne de filtrat L indicateur de pression r f VFAO20 si utilis doit afficher environ 2 5 bar Concentrez l chantillon jusqu au niveau souhait ADanger ne pas utiliser la m me section 6 des tubes dans la t te de la pompe pen dant plus de six heures une utilisation intensive des tubes peut entrainer une chute importante de la pression et plus tard une panne D s que le volume souhait est atteint baissez le d bit de recirculation 20 40 ml min et r injectez l chantillon concentr pendant 1 2 minutes pour optimiser la r cup ration R cup ration T D connectez la ligne d alimentation du couvercle du r servoir de 500 ml ou l aide d un autre conteneur retirez la ligne d alimentation de l chantillon R injectez le volume restant dans le r servoir conteneur Si des modules parall les sont utilis s avec des solutions visqueuses v rifiez qu ils sont vides en pincant successivement les tubes entre chacune des piles de modules Pour une r cup ration plus compl te de l chantillon rincez environ 5 10 ml par module d eau ou de tampon dans le syst me puis r p tez la r cup ration Composants du syst me Soupape d tranglement rose sur la ligne de retour Interconnecteurs ref V
13. l L H 10 mm 0 4 mm Zone active de la membrane 200 cm Volume mort module 5 3 ml Volume de recirculation min 20 ml Volume mort non r cup rable 2ml Mat riaux de construction Capot principal Acrylique Canal de flux Acrylique Support de la membrane Polypropyl ne Joints et joints toriques Silicone Indicateur de pression Polypropyl ne ressort SS Soupape d tranglement Polypropyl ne Raccords Nylon Tubes PVC qualit m dicale Conditions de fonctionnement Flux de la pompe 200 400 ml min Pression maximale 4 bar 60 psi Temp rature maximale 60 C 15 Consignes de nettoyage et de stockage pour Vivaflow 200 uniquement Nettoyage Stockage Les modules Vivaflow 200 sont r utilisables Pour ranger le Vivaflow 200 apr s le net plusieurs fois si les consignes de nettoyage toyage remplissez le module d eau d ionis e et de stockage sont respect es et d thanol 10 Fermez les ports d entr e de sortie et de filtrat puis stockez 1 Rincez le syst me avec 200 ml d eau environ 4 C d ionis e pour liminer le filtrat 2 Introduisez les lignes d alimentation de retour et de filtrat dans un conteneur adapt la solution de nettoyage 3 Pr parez les solutions de nettoyage adapt es la membrane 1 Membranes en poly thersulfone 250 ml de 0 5 mM NaOCI dans 0 5 M NaOH Il Membranes en cellulose r g n r e 250 ml de
14. n indicateur de N Dou suffit Tubes N taille 16 pom en Y r f VFAOO5 Soupape d trangle Tubes taille 15 ment rose n cessaire sur chaque sortie 5 Injectez le liquide dans le syst me pour liminer les poches d air Le d bit de recirculation doit tre compris entre 500 et 900 ml min et le flux doit sortir par la ligne de filtrat L indicateur de pression doit afficher environ 2 5 bar 6 Laissez 800 ml traverser la cuve de filtrat V rifiez que les points de raccordement des tubes sont tanches 7 Vidangez le syst me et videz ou rempla cez la cuve de filtrat voir la section r cup ration Le syst me est maintenant pr t l emploi 13 R servoir Ligne Indicateur de T te de la pompe R servoir de diafiltration ferm Soupape d tran glement rose Diafiltration Dessalage ls 2 Montez le syst me comme illustr Rincez le systeme comme d crit pr c demment Introduisez la solution purifier dans un r servoir de diafiltration ad quat Si les volumes atteignent 500 ml il est conseill d utiliser le r servoir chantillon diafiltration Vivaflow VFA006 de 500 ml V rifiez que le couvercle est bien ferm Remplissez le grand r servoir d alimenta tion avec du solvant et pompez l chan tillon dans le systeme comme pour la concentration Comme le volume traverse la membrane le vide cr g n re un transfert de solvant entre le r servoir
15. pompe facile charger Masterflex taille 15 VFA013 Tubes et raccords Vivaflow 200 Tubes de pompe PVC taille 15 et raccords de Luer 3 m 4 8 x 2 6 mm VFA003 Tubes de pompe PVC taille 16 et raccords de Luer 3 m 3 2 x 1 6 mm VFA004 Connecteur en Y taille 15 2 x taille 16 VFA005 Soupape d tranglement 2 x 0 4 0 6 0 8 mm VFA009 Raccords de Luer femelles taille 16 10 pi ces VFA032 Soupapes d tranglement de 0 6 mm 6 pi ces VFA035 Raccords de Luer femelles taille 15 10 pieces VFA036 18 Tableau 6 Compatibilit chimique pour le Vivaflow 200 Solution PES RC HY Solution PES RC HY Acide ac tique 25 90 OK OK OK Acide perac tique 0 2 OK OK NO Ac tone NO NO NO Ph nol 1 90 OK NO Hydroxyde d ammonium Tampon de phosphates 1 M OK OK OK 5 OK OK OK Pyridine NO NO NO Hydroxyde d ammonium RPMI 1640 OK OK OK ZAIE OK OK Acide de sodium OK OK OK DMEM OK OK OK D soxycholate de sodium Ethanol 70 OK OK OK 5 OK OK Ac tate d thyle NO NO NO Hydroxyde de sodium 1 M OK NO OK Formald hyde 30 OK OK OK Hydroxyde de sodium 0 1 M OK OK OK Acide formique 5 OK OK OK Hypochlorite de sodium Guanidine HCI 6 M OK OK OK 0 0290 OK NO Hydrocarbures aromatiques NO NO Nitrate de sodium NO NO OK Hydrocarbures chlor s NO NO NO Acide sulfamique 5 96 OK NO Acide chlorhydrique 1 M OK NO OK Surfactants 0 1 96 OK
16. s aromatiques NO Nitrate de sodium NO NO Hydrocarbures chlor s NO NO Acide sulfamique 5 OK NO Acide chlorhydrique 1 M OK NO Surfactants 0 1 OK OK Alcool d isopropyle NO NO Toluene NO NO Acide lactique 5 OK OK Acide trifluoroac tique 10 NO Mercapto thanol 10 mM OK OK Acide trifluoroac tique 10 OK NO M thanol 60 OK OK Ur e 8 M OK OK n Butanol 70 OK OK OK Acceptable A tester NO Non recommand 10 Vivaflow 200 Retour Alimen tation Filtrat Fonctionnement avec un module unique Assemblage et rin age du module l Montez le syst me comme illustr ci dessus Notez la position de la soupape d tranglement sur la ligne de retour Des soupapes d tranglement quip es de diff rentes jauges r f VFA009 sont disponibles pour des solutions de viscosit variable Danger v rifiez que les raccords de Luer sont bien ferm s avant utilisation Les membranes Vivaflow contiennent des traces de glyc rine et d acide de sodium Pour retirer ces substances chimiques et v rifier la s curit des raccordements de tubes il est conseill de rincer le module et de tester le systeme pleine pression avant d introduire l chantillon Introduisez 500 ml d eau d ionis e dans un tube ad quat 12 5 6 E Sortie unique Soupape d tran glement rose n cessaire pour la contre pression Indicateur de pression
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