TPHA TESTS - Bio-Rad
Contents
1. 8 C pendant 7 jours avant d tre test s Les chantillons devant tre conserv s plus longtemps devront tre congel s 20 C minimum Les chantillons congel s devront tre d congel s et bien m lang s avant le test Protocole de l essai manuel Avant utilisation laisser tous les r actifs et chantillons atteindre la temp rature ambiante Remarque les contr les positifs et n gatifs du kit doivent tre utilis s avec chaque lot de tests Essai qualitatif Trois puits sont n cessaires pour chaque chantillon NB Le kit TPHA Screening 500 code produit 72502 est destin au d pistage sur de grands nombres d chantillons mais ne contient qu un faible volume de cellules de contr le Il est con u de mani re ce qu en premier lieu les chantillons ne soient test s qu avec des cellules de test les cellules de contr le n tant utilis es que pour les tests r p t s avec les chantillons positifs au premier test 1 Dilution de l chantillon au 20 Distribuer 190 ul de diluant dans un puits Ajouter 10 ul d chantillon dans le m me puits Bien m langer Remarque les contr les positifs et n gatifs fournis doivent tre trait s comme les chantillons c a d dilu s au 20 2 Test Ajouter 25 ul d chantillon dilu de l tape 1 dans le puits de test Ajouter 25 ul d chantillon dilu de l tape 1 dans le puits de contr le Remettre en suspension les cellules de test et de cont2. tudes ind pendantes sur les s rums de 2900 donneurs ont chacune montr une concordance 100 avec les m thodes de test existantes Le taux de r action initial tait de 0 1 et le taux de r action r p t tait de 0 Une tude ind pendante portant sur 200 s rums de patientes enceintes a indiqu une sp cificit de 100 95 avec des limites de confiance de 98 04 100 Sensibilit Des tudes en interne sur 110 chantillons de sujets positifs connus ont donn 100 de r sultats positifs 95 avec des intervalles de confiance de 98 04 a 100 Ce nombre comprenait 2 chantillons n gatifs selon d autres tests TPHA disponibles dans le commerce mais qui se sont r v l s positifs des tests FPA et EIA IgM sp cifiques Echantillons cliniques 467 chantillons de patients chez lesquels on soup onnait une syphilis ont t test s dans un laboratoire d analyses m dicales R actifs au TPHA R actifs d autres Cat gorie clinique Screening 500 et au TPHA 200 tests TPHA Positifs pour la 017 216 syphilis N gatifs pour la Comprenant des cas trait s non trait s et de neurosyphilis Sensibilit 99 5 95 avec des limites de confiance de 97 54 100 Sp cificit 100 95 avec des limites de confiance de 98 04 100 Sp cificit avec des chantillons pr sentant des r actions crois es potentielles R actifs au TPHA Non r actifs au Cat gorie clinique i Screeni
3. MEN 200 tests 72501 500 tests 72502 LES BIO RAD LABORATORIES TPHA TESTS Kits for the qualitative and semi quantitative detection of antibody to Treponema pallidum in human serum or plasma by passive haemagglutination ul Newmarket Laboratories Ltd Lanwades Business Park Kentford Newmarket CB8 7PN UK Distributed by Bio Rad 3 Boulevard Raymond Poincar 92430 Marnes la coquette France CE TPHA 200 Code 72501 200 tests TPHA Screening 500 Code 72502 500 tests Kits de d tection qualitative et semi quantitative d anticorps a Treponema pallidum dans le serum ou le plasma humains par hemagglutination passive Contr le de qualit du fabriquant Tous les produits fabriqu s et commercialis s par la IVD soci t sont plac s sous un syst me d assurance qualit de la r ception des mati res premi res jusqu la commercialisation des produits finis Chaque lot du produit fini fait l objet d un contr le de qualit et n est commercialis que s il est conforme aux crit res d acceptation La documentation relative la production et au contr le de chaque lot est conserv e par notre soci t Consid rations cliniques g n rales La syphilis est une infection chronique comprenant quatre phases distinctes primaire secondaire tertiaire et quaternaire Celles ci s accompagnent de divers sympt mes cliniques dont des l sions ulc rations initiales appel es chancres suivies d ruptions cutan es
4. crohemagglutination assay for Treponema pallidum antibodies and the hemagglutination treponemal test for syphilis J Clin Microbiol 1981 14 441 445 7 Paris Hamelin A Dreux P et coll Tr pon matoses aspects cliniques et biologiques Feuill Biol 1991a 23 88 89 8 Houng H Syphilis new diagnostic directions Intern J STD and AIDS 1992 3 391 413 9 Sluis J J Van Der Laboratory Techniques in the diagnosis of syphilis a review Genitourin Med 1992 68 413 9 10 Daguet G L Diagnostic Biologique de la Syphilis Technique et Biologie 1995 120 5 30 11 North MLet Guntz Ph S rodiagnostic de la syphilis La Revue Francaise des Laboratoires 1997 294 51 58 Use By Verwendbar bis Fecha de caducidad Utilizzare entro Utiliser jusque 5 Houdbaar tot Holdbar til Fecha de caducidad Manufacturer Hersteller Fabricante Fabbricante Fabricant Fabrikant Producent Fabricante In Vitro Diagnostic Medical Device In Vitro Diagnostikum Producto sanitario para diagn stico in vitro Dispositivo medico diagnostico in vitro LOT Dispositif m dical de diagnostic in vitro Medisch hulpmiddel voor in vitro diagnostiek Medicinsk udstyr til in vitro diagnostik Producto sanitario para diagn stico in vitro 72501 72502 CE MOD2 2007 01 53 UK Temperature limitation DE Zul ssiger Temperaturbereich Limite de temperatura Limiti di temperatura Limites de temp rature NL Temperatuu
5. ie de puits et les cellules de test dans une autre TPHA 200 interpr tation des r sultats Cellules de test Cellules contr les Positif fort Couche r guli re de cellules couvrant le fond du Bouton n gatif puits Positif faible Couche r guli re de cellules couvrant environ 1 3 Bouton n gatif du fond du puits Couche de cellules nettement manquante au Bouton n gatif centre N gatif Cellules formant un d p t en forme de bouton Bouton n gatif compact souvent avec un petit centre transparent R action NON R action positive Bouton positif sp cifique Absorption des r actions non sp cifiques proc dure utiliser si l on d tecte une agglutination avec la fois les cellules de test et de contr le 1 Ajouter 10 ul d chantillon 190 ul de cellules de contr le remises en suspension bien m langer et incuber pendant 30 minutes temp rature ambiante Centrifuger 1500 g pendant 3 mn minimum pour d poser les cellules Ajouter 25 ul du liquide surnageant provenant de l tape 2 dans les 2 puits M langer doucement les cellules de test et de contr le afin d assurer une remise en suspension compl te Ajouter 75 ul de cellules de test dans le 1 puits Ajouter 75 ul de cellules de contr le dans le 2 puits Bien m langer et incuber a temp rature ambiante pendant 45 mn minimum Lire et interpr ter les r sultats comme ci dessus 13 Caract ristiques de performances Sp cificit Deux
6. ng 500 et au D pistage TPHA 500 TPHA 200 et au TPHA 200 Facteur rhumato de Infection PEBV ECS Post Vaccination h patite B SLE lupus ryth mateux aigu diss min Herp s g nital Maladie de Lyme 14 Sensibilit analytique On a pu montrer que ce kit est capable de d tecter 0 05 UI ml d anticorps anti tr pon miques en testant des dilutions de s rum du Premier Etalon International NIBSC Londres G B Pr cision et exactitude Pour N 10 essais d un chantillon positif le CV 8 1 Exactitude 2 5 15 Bibliographie 1 Rathlev T Haemagglutination tests utilizing antigens from pathogenic and apathogenic Treponema pallidum WHO VDT RES 1965 77 65 2 Tomizawa T Kasamatsu S Haemagglutination tests for diagnosis of syphilis A preliminary report Japan J Med Sci Biol 19 305 308 1966 3 Rathlev T Haemagglutination test utilizing pathogenic Treponema pallidum for the serodiagnosis of syphilis Br J Vener Dis 1967 43 181 5 4 Tomizawa T Kasamatsu S Yamaya S Usefulness of the haemagglutination test using Treponema pallidum antigen TPHA for the serodiagnosis of syphilis Jap J Med Sci Biol 1969 22 341 50 5 Sequeira P J L Eldridge A E Treponemal Haemagglutination test Br J Vener Dis 1973 49 242 8 6 Larsen S A Hambie E A et coll Specificity sensitivity and reproducibility among the fluorescent treponemal antibody absorption test the mi
7. ou muqueuses puis de longues p riodes de latence Non trait e l infection peut finir par entra ner des troubles cardio vasculaires et neurologiques L infection est caus e par un spirochete Trepanoma pallidum transmis g n ralement par contact sexuel bien que la syphilis puisse galement tre transmise par transfusion de sang infect il peut aussi y avoir une transmission intra ut rine Le tr pon me s est av r pratiquement impossible cultiver en milieu artificiel et le diagnostic de l infection repose g n ralement sur la d tection d anticorps dans le sang qui apparaissent peu apr s l infection initiale Les tests pour la syphilis peuvent tre class s en quatre cat gories examen microscopique direct tests aux anticorps tr pon miques tests aux anticorps non tr pon miques et tests antig niques directs Etant donn les longues p riodes de latence de la maladie et la nature non sp cifique des tests non tr pon miques les m thodes permettant de d tecter des anticorps anti tr pon miques sp cifiques dans les chantillons de sang sont de plus en plus utilis es pour le d pistage Le TPHA est l un de ces tests Usage pr vu Ces kits sont destin s tre utilis s par le personnel form et qualifi appropri pour d tecter les anticorps Treponema pallidum dans le s rum et le plasma humains Principe du test Les kits TPHA 200 et TPHA Screening 500 font appel des h maties aviaires s
8. p cialement conserv es sensibilis es d antigenes de T pallidum souche de Nichols qui se lieront aux anticorps sp cifiques pr sents dans le s rum ou plasma du patient Ces cellules sont en suspension dans un milieu contenant des substances destin es a liminer les r actions non sp cifiques Les r actions positives sont indiqu es par l agglutination de ces h maties et les r actions n gatives par la formation d un pr cipit de ces h maties en forme de bouton ou de petit anneau Bien que ce kit soit destin avant tout tre un test qualitatif il permet aussi de titrer les taux d anticorps par dilution successive au demi Les r sultats de l agglutination peuvent tre interpr t s l il nu ou l aide d un lecteur de plaque capable de discerner les diff rents types d agglutination Contenu du kit TPHA 200 TPHA 200 tests Screening 500 500 tests 72501 72502 H maties de poulet conserv es sensibilis es 2 x 20 ml d antigenes de T pallidum Cellules pour le test H maties de poulet conserv es non sensibilis es Cellules de contr le S rum humain Titre compris entre 640 et 2560 Contr le S rum humain n gatif Titre lt 80 Mode d emploi Contr le positif Solution saline contenant des agents absorbants Avertissements et pr cautions Produits destin s au diagnostic in vitro seulement Tous les r actifs contiennent de l azide de sodium moins de 0 1 p
9. r le en secouant le flacon Bien v rifier qu elles ont t compl tement remises en suspension Ajouter 75 ul de cellules de test dans le puits de test et 75 ul d h maties de contr le dans le puits de contr le la dilution finale de l chantillon apres l addition des cellules est donc au 80 Bien m langer Incuber la temp rature ambiante 15 30 C sur une surface sans vibrations pendant 45 minutes minimum 11 D terminer s il y a eu agglutination ou non celle ci est stable pendant au moins trois heures si on ne touche pas la plaque Essai quantitatif 9 puits sont n cessaires pour chaque chantillon Remarque les contr les positifs et n gatifs du kit doivent tre utilis s avec chaque lot de tests en suivant la proc dure quantitative donn e ci dessous Dilution des chantillons au 20 Distribuer 190 ul de diluant dans un puits Ajouter 10 ul d chantillon dans le m me puits Bien m langer Remarque les contr les positifs et n gatifs fournis doivent tre dilu s comme les chantillons c a d au 20 Titrage En laissant le 1 puits vide distribuer 25 ul de diluant dans chacun des 7 puits restants d une rang e de 8 puits Ajouter 25 ul de l tape 1 dans le 1 puits Ajouter 25 ul de l tape 1 dans le 2 puits et m langer puis diluer en s rie le long de la rang e de puits en jetant les 25 ul exc dentaires du puits final Test M langer doucement les cell
10. rlimiet DK Temperaturbegreensning Limite de temperatura Consult Instructions for Use Gebrauchsanweisung beachten Consulte las instrucciones de uso Consultare le istruzioni per l uso Consulter les instructions d utilisation Raadpleeg de gebruiksaanwijzing Se brugsanvisning Consulte las instrucciones de uso Batch code Lagenbezeichnung Codigo de lote Codice del lotto Code du lot Lot nummer Lotnummer Codigo de lote
11. ules de test afin d assurer une remise en suspension compl te Distribuer 75 ul de cellules dans chaque puits a plage de dilution finale des chantillons apr s addition de la suspension de cellules est de 1 80 1 10 240 Bien m langer Incuber la temp rature ambiante 15 30 C sur une surface sans vibrations pendant 45 mn minimum D terminer s il y a eu agglutination Celle ci est stable pendant au moins trois heures si on ne touche pas la plaque Le titre de l chantillon est l inverse de la plus haute dilution ayant donn une agglutination terpr tation et validation de l essai Contr le de qualit interne Pour que les r sultats soient valides le contr le n gatif doit donner un r sultat n gatif voir illustration guide d interpr tation ci dessous et le contr le positif doit donner un titre de 640 2560 voir illustration pour d terminer le point de fin de titrage G 000000O 1 80 1 160 1 320 1 640 1 1280 1 2560 1 5120 12 Tout chantillon donnant une agglutination moins marqu e que celle indiqu e sous ci dessus est n gatif TPHA Screening 500 interpr tation des r sultats Tout chantillon donnant une agglutination plus marqu e que celle indiqu e sous ci dessus doit tre interpr t provisoirement comme positif et la proc dure de test r p t e comme ci dessus cette fois en double en ajoutant la suspension de cellules de contr le dans une s r
12. v Les d chets liquides provenant de l utilisation de ce test doivent tre dilu s dans de grandes quantit s d eau afin d viter l accumulation de substances pouvant pr senter un risque d explosion dans la plomberie d un laboratoire Les substances de contr le fournies proviennent de s rum humain Elles ont t contr l es au niveau du donneur et se sont r v l es n gatives pour l h patite B et C et le VIH 1 et 2 Cependant elles devront tre trait es comme potentiellement infectieuses Les chantillons de s rum et de plasma humains devront tre trait s comme pr sentant des risques au point de vue microbiologique et manipul s conform ment aux r glements consignes applicables Ne pas utiliser ce kit apr s la date de p remption Ne pas combiner ou permuter les r actifs de kits de lots diff rents Conservation Conserver le kit entre 2 et 8 C lorsqu il n est pas utilis Stocker les flacons verticalement Ne pas congeler Dur e de conservation voir date sur l tiquette du kit 10 Mat riel requis Des dispositifs de pipetage correctement talonn s et entretenus capables de distribuer des volumes de 10 25 75 et 190 ul Microplaques a 96 puits plaque fond en U code 83378 5 plaques 83357 100 plaques Echantillons Les chantillons de s rum ou de plasma ne doivent pas contenir de cellules sanguines ou d agents contaminants microbiens vidents Ils peuvent tre stock s entre 2 et
Download Pdf Manuals
Related Search