protocole arn
Contents
1. l ARN peut entra ner une surestimation ou une sous estimation du nombre de g nes transcrits in vivo Le tube PAXgene Blood RNA contient un additif qui stabilise le profil de transcription de g nes in vivo en r duisant la d gradation d ARN in vitro et en minimisant l induction de g nes Lorsqu ilestutilis en conjonction avec un kit de purification d ARN valid pour ce type d chantillon le PAXgene Blood RNA Tube permet la d tection et la quantification exactes du niveau de transcription de g nes Ill Avertissements 1 Le contenu de ce tube est irritant pour la peau e En cas d inhalation respirer de l air frais si le malaise persiste consulter un m decin e En cas de contact avec la peau laver imm diatement avec de l eau et du savon et rincer soigneusement e En cas d ingestion appeler imm diatement un m decin 2 Un dispositif de pr l vement sanguin doit tre utilis avec le tube PAXgene Blood RNA Voir les instructions pour la commande IV Pr l vement d chantillon et pr paration pour l analyse A Accessoires de pr l vement sanguin n cessaires Non fournis avec le tube PAXgene Blood RNA 1 Un dispositif de pr l vement sanguin tel que le syst me de BD Vacutainer Safety LokT Blood Collection Set Voir les instructions pour la commande 2 Le corps de pr l vement BD Vacutainer doit tre utilis pour assurer un fonctionnement correct Voirles instructions pour la2. PreAnalytiX EE PAXgene Blood RNA Tube L Usage pr vu Le PAXgene Blood RNA Tube est constitu d un tube de pr l vement sanguin PAXgene Blood RNA Tube Il est con u pour le pr l vement la conservation et le transport du sang et la stabilisation de l ARN intracellulaire dans un tube bouch L isolation et la purification ult rieures de ARN intracellulaire du sang total seront r alis es pour une utilisation en RT PCR en vue d essais diagnostiques mol culaires Les caract ristiques de performance du syst me PAXgene Blood RNA ont uniquement t tablies avec les transcrits des g nes FOS et IL1B Il incombe l utilisateur la responsabilit d tablir les caract ristiques de performance du syst me PAXgene Blood RNA appropri es pour d autres transcrits cibles Caract ristiques du produit PAXgene Blood RNA Tube 762165 2 5mL 16x100mm Plus BD HemogardT 6 9 mL d additif Il R sum et explication 100 tubes par bo te Le pr l vement de sang total est la premi re tape de nombreuses analyses mol culaires pour l tude de l ARN intracellulaire L un des plus grands probl mes de ce type d analyse est l instabilit de PARN intracellulaire qui se d grade facilement dans les quelques heures suivant le pr l vement sanguin En outre certaines esp ces d ARN se d veloppent in vitro par induction des g nes apr s le pr l vement sanguin La d gradation et l induction in vitro de
3. Teplotn omezen EN Recyclable USA ES Reciclable EE UU PT EUA Recicl vel FR Recyclable aux tats Unis DE Wiederverwendbar USA IT Materiale riciclabile Stati Uniti NL Recycleerbaar VS SE teranv ndningsbar i USA DK Genanvendelig USA GR Amajtk Oriley GPA PL Nadaje si do recyklingu USA CZ Recyklovateln v USA aa PreAnalytiX GmbH 8634 Hombrechtikon CH 2006 PreAnalytiX GmbH 8081413
4. commande 3 Utiliser un tube de purge si le tube PAXgene Blood RNA Test le seul tube tre pr lev Voir les instructions pour la commande tiquettes pour l identification positive des chantillons du donneur Des tampons d alcool pour le nettoyage du site De la gaze st rile s che Un tourniquet Un collecteur pour la mise au rebut des aiguilles ou ensembles aiguilles corps de pr l vement I O O1 BR B Proc dure de pr l vement sanguin Ordre de pr l vement Tube A Tube de purge Tube B Tube PAXgene Blood RNA 1 S assurer que le tube PAXgene Blood RNA est une temp rature de 18 25 C et qu il est correctement tiquet avec l identification du patient avant de l utiliser e En cas de contact avec les yeux rincer l il ouvert pendant quinze minutes sous l eau courante puis consulter un m decin 2 Sile tube PAXgene Blood RNA estle seul tube tre pr lev collecter au pr alable du sang dans un tube de purge avant de collecter du sang dans le tube PAXgene Blood RNA afin de pouvoir amorcer le volume int rieur du dispositif de pr l vement sanguin utilis pour la phl botomie Autrement utiliser le tube de pr l vement PAXgeneT Blood RNA en dernier pour la phl botomie 3 l aide d un dispositif de pr l vement sanguin et d un corps de pr l vement pr lever le sang dans le tube PAXgene Blood RNA en utilisant les proc dures de pr l v
5. ans les tubes PAXgene Blood RNA 1 Placer les tubes PAXgene Blood RNA la verticale dans un portoir m tallique Ne pas congeler les tubes la verticale dans un support en polystyr ne car cela pourrait les briser 2 Les tubes PAXgene Blood RNA peuvent tre conserv s une temp rature de 20 C ou moins Pour des temp ratures inf rieures 20 C les tubes doivent tre d abord congel s 20 C pendant 24 heures puis plac s au cong lateur 70 ou 80 C 3 D congeler les tubes PAXgene Blood RNA dans un portoir m tallique temp rature ambiante 18 25 C pendant environ deux heures Ne pas d congeler les tubes PAXgene Blood RNA une temp rature de plus de 25 C 4 Retourner pr cautionneusement les tubes PAXgene Blood RNA 10 fois Remarque Si l incubation de deux heures temp rature ambiante n a pas t effectu e avant la cong lation faire incuber les tubes pendant au moins deux heures temp rature ambiante avant de continuer Remarque Les tubes PAXgene Blood RNA congel s peuvent se briser s ils sont soumis un choc Pour r duire les risques de brisure pendant l exp dition les tubes congel s doivent tre trait s comme s il s agissait de tubes en verre Les utilisateurs doivent valider leurs propres m thodes de cong lation et d exp dition des tubes PAXgene Blood RNA D Proc dure de pr paration des chantillons pour l analyse sanguine Les
6. catalogue dans les instructions pour la commande La quantit de sang pr lev doit tre de 2 5 mL par tube PAXgene Blood RNA mais ce volume peut varier en fonction de l altitude de la temp rature ambiante de la pression barom trique de l ge du tube de la tension veineuse et de la technique de pr l vement VII Pr cautions prendre 8 Prendre les pr cautions universelles Porter des gants une blouse une protection oculaire et tout autre quipement de protection individuelle Utiliser les syst mes techniques pour se prot ger des claboussures ou fuites de sang ou de l exposition ventuelle aux pathog nes sanguins Manipuler tous les chantillons biologiques et dispositifs de pr l vement sanguin conform ment aux r glementations en vigueur dans votre tablissement En cas d exposition aux chantillons biologiques par exemple la suite d une piq re d aiguille consulter un m decin car ces chantillons peuvent transmettre l h patite virale le VIH SIDA et autres maladies infectieuses Utiliser la protection d aiguille si le dispositif de pr l vement sanguin en est quip PreAnalytiX d conseille de remettre la protection en place sur les aiguilles usag es Toutefois les politiques et proc dures de votre tablissement peuvent tre diff rentes et doivent toujours tre suivies Jeter tous les tubes de pr l vement sanguin dans des collecteurs agr s pour
7. chantillons sanguins doivent tre trait s avec un kit de purification d ARN du sang valid pour ce type d chnatillon Voir les num ros de catalogue dans les instructions pour la commande V Caract ristiques fonctionnelles Avec un remplissage correct le ratio additif sang dans le tube PAXgene Blood RNA est de 2 76 mL d additif par mL de sang Une fois le sang introduit dans le tube le profil d ARN intracel lulaire reste stable pendant 3 jours entre 18 25 figures 1A et 1B 5 jours entre 2 et 8 C figures 2A et 2B ou 6 mois 20 C ou 70 C 80 C Stabilit de PARN dans les chantillons sanguins entre 18 et 25 C A FOS 0 1 2 3 Conservation jours 0 1 2 3 Conservation jours Figure 1 Du sang de 10 donneurs a t pr lev avec des chantillons en double et conserv une temp rature comprise entre 18 et 25 pendant le nombre de jours indiqu suivi par une purification d ARN total Le sang a t pr lev et conserv dans des tubes PAXgene Blood RNA et PARN total a t purifi en utilisant la trousse PAXgene Blood RNA Les niveaux de transcription relatifs de FOS et de IL1B ont t d termin s en temps r el par duplex RT PCR en utilisant ARNr de 18S comme standard interne Les valeurs de tous les chantillons sont indiqu es sur la figure lignes bleues 20 groupes de donn es pour chaque g ne avec les moyennes lignes rouges et les carts types barre
8. ement sanguin standard par ponction veineuse recommand es par votre tablissement Les techniques ci dessous doivent tre utilis es pour emp cher lerisque de reflux a Positionner le bras du donneur vers le bas b Maintenir le tube la verticale au dessous du bras du donneur pendant le pr l vement c Desserrer le tourniquet d s que le sang commence s couler dans le tube d S assurer que les additifs ne touchent pas le bouchon ou l extr mit de l aiguille pendant le pr l vement CE 4 Attendre au moins 10 secondes afin d obtenir un pr l vement complet S assurer que le sang a cess de s couler dans le tube avant de retirer ce dernier du corps de pr l vement Le tube PAXgene Blood RNA avec son syst me d aspiration est destin pr lever 2 5 mL de sang dans le tube 5 Une fois le pr l vement effectu inverser doucement le tube PAXgene Blood RNA 8 10 fois 6 Conserver les tubes PAXgene Blood RNA la verticale et temp rature ambiante 18 25 C pendant un minimum de 2 heures et un maximum de 72 heures avant traitement ou mise au r frig rateur 2 8 C ou au cong lateur 20 C Voir la proc dure de cong lation et de d cong lation des chantillons pr lev s dans les tubes PAXgene Blood RNA pour les d tails si l on d sire une temp rature de conservation de 70 C 80 C C Proc dure de cong lation et de d cong lation des chantillons pr lev s d
9. i n vod k pou it E EN Contains sufficient for lt n gt tests ES Contiene cantidad suficiente para lt n gt pruebas PT Cont m o Suficiente para lt n gt Testes FR Contenu suffisant pour lt n gt tests DE Inhalt ausreichend f r lt n gt Tests IT Contenuto sufficiente per n saggi NL Bevatvoldoendevoor lt n gt tests SE Inneh llet r ckertill lt n gt tester DK Indeholder tilstr kkeligt til lt n gt test GR Peqievl1lemo epaqj Oy cia m Cnesl Trei PL Zawiera ilo wystarczaj c do lt n gt test w CZ Obsah sta na lt n gt test EN In Vitro diagnostic medical device ES Dispositivo m dico para diagn stico in vitro PT Dispositivo m dico de diagn stico in vitro FR Dispositif m dical pour diagnostic in vitro DE In vitro Diagnostikum IT Dispositivo medico diagnostico in vitro NL Medisch hulpmiddel voorin vitroiagnostiek SE Diagnostisk medicinsk anordning f r in vitro bruk DK In vitro diagnostisk aea GR In Vitro Diacmxrsij 1 Iasqosevmokocij m PL Urz dzenie medyczne do GE in vitro CZ Diagnostick l ka sk vybaven in vitro EN Temperature limitation ES Limitaci n de temperatura PT Limita o de temperatura FR Limites de temp rature DE Temperaturbegrenzung IT Limiti di temperatura NL Temperatuurbegrenzing SE Temperaturbegr nsning DK Temperaturbegr sning GR Pegqioqirlo HeqlojqarLay PL Ograniczenie temperatury CZ
10. lateforme robotis e ou portoir magn tique en manuel compatible tubes ou plaques QIAGEN PAXgene Blood RNA Kit gt purification manuelle en tubes Pour toute commande des accessoires de pr l vement sanguin BD Acc der http www bd com support contact international asp e S lectionner le pays e D filer vers le bas jusqu BD Diagnostics Preanalytical Systems e Composer le num ro Nous contacter Service technique Service commercial Service commande client 01 34 60 24 24 01 30 85 05 42 01 34 60 15 16 tech ozyme fr commercial ozyme fr commande ozyme fr Symbol amp Mark Key Conformite European Q Do not reuse Catalog number Batch code Ve Use by STERILE R Method of sterilization using irradiation Irritant Dangerous for environment EN Manufacture ES Fabricante PT Fabricante FR Fabricant DE Hersteller IT Fabbricante NL Fabrikant SE Tillverkare DK Fabrikant r GR Jasarjetar_ly PL Producent CZ V robce EN Consult instructions for use ES Consulte las instrucciones de uso PT Consultar as Instru es de Utiliza o FR Consulter le mode d emploi DE Gebrauchsanweisung zu Rate ziehen IT Consultare le istruzioni per luso NL Gebruiksaanwijzing raadplegen SE Se anvisningar f r anv ndning DK Se brugsanvi GR Pqoeidopo mstpa sningen grg rtlbotketst se sa rtmod PL Zapozna si z Instrukcj u ycia CZ P e t te s
11. mati res biologiques Ne pas r utiliser les tubes PAXgene Blood RNA Ne pas utiliser les tubes PAXgene Blood RNA apr s la date de p remption indiqu e sur leur tiquette Le tube PAXgene Blood RNA contenant un additif chimique une tubulure de pr l vement sanguin doit tre utilis e pour viter un ventuel reflux du sang dans le tube Voir la section Pr l vementd chantillon et pr paration pour l analyse Une vitesse de centrifugation excessive plus de 10 000 FCR peut causer la rupture des tubes PAXgene Blood RNA entra nant une exposition au sang et des risques de blessures Ne pas transf rer un chantillon d une seringue un tube VIII Conservation 1 Conserver les tubes PAXgeneT Blood RNA non utilis s une temp rature de 18 25 C L exposition temporaire une temp rature de 40 C maximum est acceptable Le tube PAXgene Blood RNA est fabriqu au Royaume Uni par BD pour PreAnalytiX GmbH PAXgene et PreAnalytiX sont des marques commerciales de PreAnalytiX GmbH toutes les autres marques commerciales sont la propri t de Becton Dickinson and Company Brevets U S n 4 741 446 4 991 104 6 602 718 et 6 617 170 en PreAnalytiX GmbH 8634 Hombrechtikon CH 2005 PreAnalytiX GmbH www PreAnalytiX com Instructions pour la commande Produits PAXgene Contenu Tube PAXgene Blood RNA 100 tubes pour pr l vement sanguin BD762165 Produits BD Dispositif de
12. pr l vement sanguin 21G aiguille de 3 4 po BD Vacutainer Safety LokT tubulure de 12 po avec adaptateur Luer 367286 50 unit s par bo te 200 unit s par carton Corps de pr l vement Carton pour tubes BD Vacutainer usage unique de13 mm et 16 mm de diam tre seulement 364815 1000 par carton Tubes s rum BD Vacutainer Plus 13 X 75 mm pr l vement de 4 0 mL avec bouchon 368975 BD Hemogard rouge et tiquette papier 100 unit s par bo te 1000 unit s par carton Ces r f rences repr sentent les produits sp cifiques pouvant tre utilis s avec le PAXgene Blood RNA Tube Kit de purification d ARN du sang compatibles avec les chantillons de sang total stabilis s par les tubes PAXgene Blood RNA Quelques exemples de kits valid s sp cifiquement pour ce type d chantillon MOBIO PowerMag Blood DNA RNA Isolation Kit compatible PAXgene gt kit avec billes magn tiques utiliser sur plateforme robotis e KingFischer MagMAXT ou portoir magn tique en manuel format plaques BECKMAN COULTER Agencourt RNAdvance Blood Ki compatible PAXgene gt kit avec billes magn tiques utiliser sur plateforme robotis e ou portoir magn tique en manuel existe pour tubes ou plaques PROMEGA Maxwell 16 LEV simplyRNA Blood Kit gt pour robot Maxwell LIFE MagMAX for Stabilized Blood Tubes RNA Isolation Kit compatible with PAXgene Blood RNA Tubes gt kit avec billes magn tiques utiliser sur p
13. s noires Les lignes tiret es indiquent la pr cision totale 3x des analyses FOS 2 34 CT IL1B 1 93 CT Stabilit de PARN dans les chantillons sanguins entre 2 et 8 C A FOS Conservation jours Conservation jours Figure 2 Du sang a t pr lev et l ARN total purifi apr s conservation entre 2 et 8 C comme d crit sur la figure 1 Les niveaux de transcrits relatifs de Fos et de IL1B ont t d termin s en temps r el par duplex RT PCR en utilisant ARNr de 18S comme standard interne Les valeurs de tous les chantillons sont indiqu es sur la figure lignes bleues 20 groupes de donn es pour chaque g ne avec les moyennes lignes rouges et les carts types barres noires Les lignes tiret es indiquent la pr cision totale 3x des analyses FOS 2 34 CT IL1B 1 93 CT La dur e actuelle de la stabilisation de l ARN peut varier selon les esp ces d ARNintracellulaire VI Limitations 1 Un remplissage insuffisant des tubes PAXgene Blood RNA entra nerait un ratio sang additif incorrect susceptible de fausser les r sultats d analyse ou de nuire aux performances du produit 2 Les tubes PAXgeneT Blood RNA ne conviennent pas au pr l vement et la purification de l ARN viral Les chantillons sanguins obtenus avec le tube PAXgeneT Blood RNA ne doivent tre pr par s qu avec des kits de purifications d ARN sanguine valid s pour ce type d chantillon Voir les num ros de
Download Pdf Manuals
Related Search