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Chromatographie

1. s uuin Chromatographie Ref 591 001 Ensemble pour chromatographie verticale Fran ais p 1 Version 0104 Chromatographie Ensemble pour chromatographie verticale J e U L Il n Ref 591 001 1 Description L ensemble se compose de un auget semi cylindrique en verre de 205 x 24 mm une cuve rectangulaire en verre 229 x 229 x 76 mm avec couvercle en verre rod une cuve cylindrique en verre avec couvercle en verre rod hauteur 305 89 mm un cadre en fil m tallique recouvert de nylon fa onn pour recevoir l auget et se placer dans la cuve rectangulaire un cadre de m me mati re pour la cuve cylindrique une bo te de 100 feuilles de papier chromatographique 200 x 400 mm un rouleau de 100 m du m me papier en 50 mm de largeur 2 Mode d emploi 2 1 Analyse par chromatographie ascendante Tracer un trait en travers d une feuille 15 mm d un grand c t Deux largeurs de papier peuvent tre utilis es 50 mm ou 180 mm suivant la complexit de l analyse Le papier 180 mm sera taill dans une des feuilles de 400 mm fournies avec l ensemble Verser le solvant dans la cuve sur une hauteur de 10 mm Couvrir la cuve avec le couvercle et laisser le solvant reposer jusqu ce que l quilibre liquide vapeur soit atteint Marquer le niveau du liquide sur la cuve Etirer la flamme un tube de verre et briser la partie amincie pour constituer une fine pipette Plonger cet
2. 5 563 563 0 15 TTC min partir d un poste fixe FRAN AIS 5 7 Assistance technique en direct 11 LR te Une quipe d experts gt votre dicn Acitir y P Iir Ali a VOtre GISPOSITION QU LUNGI au Vendredi 8h30 17h30 Vous recherchez une information technique Vous souhaitez un conseil d utilisation Vous avez besoin d un diagnostic urgent Nous prenons en charge imm diatement votre appel pour vous apporter une r ponse adapt e votre domaine d exp rimentation Sciences de la Vie et de la Terre Physique Chimie Technologie Service gratuit ne p E ee 0825 563 563 oxn Ho co t d appel 0 15 ttc min partir d un poste fixe Num ro valable uniquement pour la France m tropolitaine et la Corse Pour les Dom Tom et les EFE utilisez le 33 0 2 32 29 40 50 Aide en ligne www jeulin fr Rubrique FAQ seu Rue Jacques Monod Z I n 1 Netreville BP 1900 27019 Evreux cedex France T l ga 33 0 2 32 29 40 00 Fax 33 0 2 32 29 43 99 Internet www jeulin fr support jeulin fr Phone 33 0 2 32 29 40 49 Fax BI 33 0 2 32 29 43 05 Internet www jeulin com export jeulin fr SA capital 3 233 762 Siren R C S B 387 901 044 Siret 387 901 04400017 Direct connection for technical support A fi i AA OT OYXMOFrTS A VOLIr M LE dill OI Xpel L gt ar VUUI E YP i iS jm For i r di POS JC Trom IVIOon IU qay a NA Sn Erat IA
3. 7 Chromatographie Ensemble pour chromatographie verticale J e U L Il n Ref 591 001 3 Exp riences de chromatographie 3 1 Comparaison du pouvoir de s paration de diff rents solvants Avant de proc der une s paration il est n cessaire de trouver le ou les solvant s le s plus appropri s Constituer un chantillon en m langeant en parties gales les solutions 0 01 d indoph nol jaune d alizarine et rouge soudan dans le tolu ne En faire plusieurs taches sur une bande de papier pour chromatographie enduit de gel de silice et ajouter au centre de la tache une goutte de chaque solvant ou m lange de solvants La s paration se produit comme dans la chromatographie radiale et l talement des taches permet de d terminer le meilleur solvant Voici class s par ordre croissant de pouvoir dispersif les principaux solvants utilis s hexane t trachlorure de carbone benz ne tolu ne chlorure de m thyl ne chloroforw ther thylique ac tate d thyle ac tone isopropanol thanol m thanol eau 3 2 S paration des pigments foliaires Les vitesses de d placement des taches de chacun des pigments sont tr s diff rentes et la s paration s op re parfaitement en chromatographie ascendante ou radiale 3 2 1 Pr paration de la solution Mettre dans un mortier quelques grammes de feuilles fra ches ajouter quelques pinc es de sable siliceux sable de Fontainebleau et 20 ml
4. environ d ac tone Triturer avec le pilon La pr sence de sable provoquant le d chirement des parois cellulaires permet d obtenir rapidement une solution vert fonc contenant l ensemble des pigments 3 2 2 Solvant M langer loin de toute flamme dans une prouvette gradu e 80 ml de benz ne 20 ml d ther de p trole 18 ml d ac tone Op rer ensuite comme il est dit au 2 1 FRAN AIS 3 7 Chromatographie Ensemble pour chromatographie verticale seuuin Ref 591 001 Nota L importance respective des taches d pend de la nature des chantillons foliaires tudi s Les proportions des diff rents pigments variant notablement d une esp ce l autre D autre part en plus des pigments fondamentaux chlorophylle b chlorophylle a xantophylle et carot ne qui se succ dent dans cet ordre de bas en haut on peut voir appara tre des taches suppl mentaires qui trahissent par exemple l existence de plusieurs xantophylles 3 3 S paration des cations par chromatographie descendante Les chantillons seront des solutions de nitrate 1 Solvant Ac tone 85 HC1 concentr 8 eau 5 M langes pulv riser M lange n 1 acide kojique 0 5 g 8 quinolinol 2 5 g thanol 60 500 ml pour observation en lumi re U V M lange n 2 solution de sulfure d ammonium pour observation en lumi re blanche S cher
5. le papier entre les 2 pulv risations Tableau des couleurs donn es par les diff rents cations CATION COULEUR CATION COULEUR en lumi re en lumi re en lumi re en lumi re UV blanche UV blanche A Blanc Incolore Mn Noir Brun clair jaune Sb Incolore Orange Hg Noir Noir AS Jaune Hg Brun noir Brun Ba Blanc Incolore Mo Brun Incolore bleut Be Blanc Ni Noir Noir Bi Brun fonc Noir K Violet Incolore Cd Jaune vif Jaune Ag Brun Ca Blanc Incolore Na Violet Incolore bleut Ce Violet Brun clair Sr Blanc fonc bleut Cr Violet Vert clair Th Jaune vert Jaune Co Noir Noir Sn Jaune sale Jaune Cu Noir Brun Sn Bleu Incolore Fe Noir Noir Ti Noir Jaune Pb Gris fonc Brun U Noir Orange sombre Li Violet Incolore V Brun Mg Blanc Zn Jaune vif Incolore Nota les soulignages indiquent les intensit s relatives des couleurs obtenues FRAN AIS D Chromatographie Ensemble pour chromatographie verticale J e U L Il n Ref 591 001 Limite de sensibilit en microgrammes Co Fe Ni Th U Zn 1 en U V 0 1 0 2 0 5 1 0 5 1 2 en lumi re blanche 0 1 0 3 0 5 2 5 De cette fa on des s parations qui autrement seraient tr s lentes peuvent se produire dans des temps raisonnables Par contre la constante R n a plus de signification Mode op ratoire Verser dans la cuve la quantit de solvant que
6. mme ci dessus puis tracer une 2 me ligne 90 en partant du coin droit Op rer comme ci dessus pour la 1 re s paration avec le premier solvant Retirer le papier le s cher le suspendre au cadre suivant la 2 me direction et l introduire nouveau dans la cuve contenant le 2 me solvant La s paration reprend mais dans une direction perpendiculaire la 1 re Cette m thode est couramment utilis e pour la s paration des amino acides Dans beaucoup de cas les composants de l chantillon sont color s ex la chlorophylle et sont facilement rep r s sur le papier Dans d autres cas ils doivent tre transform s en composants visibles en lumi re ultraviolette La m thode la plus courante consiste pulv riser sur le papier du solvant contenant le r v lateur appropri Par exemple pour les amino acides le r v lateur sera de la ninhydrine dissoute dans du butanol ou de l ac tone 2 2 Analyse par chromatographie descendante Lorsque la s paration se fait trop lentement par la m thode pr c dente une technique inverse peut tre efficace Dans le cas de la chromatographie ascendante le mouvement du solvant peut tre arr t par la force de gravitation qui agit sur lui Dans la chromatographie descendante les effets de la gravit renforcent ceux de la capillarit Il s ensuit 2 cons quences la vitesse de d placement du solvant augmente et ce courant peut tre rendu continu FRAN AIS 2
7. nAnNn nA AANE tO FFrIaay opening hours L Li x You re looking for technical information You wish advice for use You need an urgent diagnosis We take in charge your request immediatly to provide you with the right answers regarding your activity field Biology Physics Chemistry Technology Free service aaa geo 33 0 2 32 29 4 A ENY X x PA ds G gt v gt JE 24 FU DU Call cost not included Only for call from foreign countries
8. pr c demment Placer la goutti re la partie sup rieure du cadre y verser le m me solvant Le bord sup rieur du papier doit plonger dans la goutti re o il sera maintenu l aide d une tige de verre plac e au fond La ligne de d part sur laquelle on fera les touches doit donc tre trac e une distance du bord telle qu elle se trouve hors du solvant Le bord oppos de la feuille sera d coup en dents de scie dont les pointes affleureront au niveau du solvant sans le toucher pour viter un mouvement ascensionnel de celui ci qui s opposerait au mouvement descendant recherch A partir de l l exp rience sera men e comme en chromatographie ascendante 4 Chromatographie en phase inverse Ily a de nombreux cas o la solubilit de l chantillon dans l eau est telle que la s paration se fait tr s lentement On peut y rem dier en impr gnant le papier d un produit non miscible dans l eau peu volatile ou peu mobile par lui m me comme l huile de castor ou l huile silicon e etc Dissoudre ce produit dans un solvant volatile comme l ther et plonger compl tement le papier dans ce m lange Evaporer fond le papier qui reste impr gn d une phase immobile hydrophobe On peut alors utiliser l eau comme phase mobile donnant des s parations rapides 5 Service apr s vente Pour renseignements veuillez contacter JEULIN SUPPORT TECHNIQUE Rue Jacques Monod BP 1900 27 019 EVREUX CEDEX FRANCE 0 82
9. te pipette dans l chantillon analyser dissout dans le solvant Toucher le papier au niveau du trait avec l extr mit de la pipette assez l g rement pour n y faire qu une petite tache On peut pr alablement s assurer d un coulement correct en touchant du doigt le bout de la pipette qui doit y d poser une petite goutte Evaporer le solvant en employant au besoin pour gagner du temps un s choir lectrique de m nage Si la concentration des composants de l chantillon est faible on peut recommencer l op ration plusieurs fois en ayant soin de s cher les taches chaque fois et de les superposer correctement FRAN AIS 1 7 Chromatographie Ensemble pour chromatographie verticale J e U L Il n Ref 591 001 Fixer le papier sur le cadre et l introduire rapidement dans la cuve pour ne pas modifier l atmosph re qui y r gne Remettre le couvercle et laisser la s paration s op rer La s paration est caract ris e par le rapport Distance parcourue par les composants de l chantillon Distance parcourue par le solvant Ce rapport est une constante caract ristique de l chantillon consid r On le d signe par le symbole Rg Lorsqu on a besoin d en conna tre la valeur il est commode de laisser le solvant monter sur 10 cm Il arrive qu un solvant unique n assure pas une s paration suffisante Dans ce cas on peut utiliser la m thode dite chromatographie deux dimensions Marquer le papier co

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