Fiche technique lugol
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1. Date ENR RSP 29 ProM E FICHE TECHNIQUE 21 03 2011 R vision 00 Page 1 sur 2 LUGOL PRESENTATION R actif pr t l emploi e Flacon compte goutte 100ml R f CLF01096 DEFINITION Le lugol est une solution iodo iodur e utilis e lors de la coloration de GRAM pour la mise en vidence des bact ries GRAM positif et de bact ries GRAM n gatif Le lugol forme un complexe avec le violet de gentiane qui colore les bact ries GRAM positif en violet CONSERVATION Les flacons se conservent pendant 2 ans la temp rature du laboratoire MODE D EMPLOI 1 Pr paration de l chantillon e Etaler l chantillon ou la culture bact rienne analyser sur une lame de verre avec une anse ayant t pr alablement st rilis e avec la flamme du bec Bunsen e Laisser la lame s cher l air pendant 5 minutes e Faire passer lentement l talement c t tal sur le dessus trois fois sur la partie sup rieure de la flamme d un bec Bunsen pour fixer l chantillon e Laisser refroidir pendant 5 minutes 2 Coloration de Gram e Tremper la lame dans le violet de Gentiane pendant 1 minute e Laver l eau distill e l aide d une pissette pour enlever l exc s de colorant e Tremper la lame dans le Lugol pendant 1 minute e Egoutter et recommencer avec le Lugol pendant 1 minute e Rincer avec de l eau distill e moyennant une pissette e Laver avec l alcool Ac tone jusqu disparition2. du violet de Gentiane e Laver l eau distill e e Tremper la lame dans la Fushine de Gram pendant 30 60 secondes e Laver l eau distill e e Essuyer la lame avec du papier imbib d alcool pour enlever l exc dent de colorant e Laisser s cher la lame sur du papier filtre e Observer au microscope 3 Lecture Pour les microorganismes Gram positifs le complexe color iod ne peut plus tre dissous hors de la cellule par un produit de d coloration comme l alcool ou l ac tone La cellule reste color e en bleu violet Pour les microorganismes Gram n gatifs le complexe color iod est dissous et la cellule est color e en rose ou rouge par une contre coloration ProMEE Date ENR RSP 29 21 04 2011 FICHE TECHNIQUE R vision 00 Page 2 sur 2 CONTROLE QUALITE Micro organismes Escherichia coli ATCC 25922 Staphylococcus aureus ATCC 25923 Observation microscopique des bact ries Bact ries color es en rose Bacilles Gram n gatif Bact ries color es en violet Cocci Gram positif
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