Test SpermMar IgA
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1. 12 Dans de rares cas une r action positive au test SpermMar IgA est observ e en l absence de toute r action au test SpermMar IgG ce qui indique la pr sence d anticorps s cr toires de la classe des IgA en l absence d anticorps de la classe des IgG Une r action d agglutination mixte de 40 ou plus dans le sperme indique une r action positive au test SpermMar IgA LIMITES DE LA M THODE Le test SpermMar IgA direct ne peut tre r alis que si des spermatozo des motiles sont pr sents dans l chantillon de sperme Les chantillons pr sentant une concentration ou une motilit tr s faible des spermatozo des peuvent donner des r sultats faux n gatifs CARACT RISTIQUES DE PERFORMANCE Plusieurs centaines d chantillons de sperme ont t analys es au moyen de la r action l antiglobuline mixte directe et du test SpermMar direct pour IgG Les r sultats ont t similaires dans 97 des cas Dans 3 des cas le test SpermMar a d tect des anticorps alors que le test de r action l antiglobuline mixte utilisant des globules rouges rev tus tait n gatif Dans ces circonstances la proportion de spermatozo des r agissant au test SpermMar tait habituellement faible 14 L exactitude des r sultats du test SpermMar IgA a t av r e apr s comparaison avec l immunofluorescence et la n ph lom trie CONSERVATION DU R ACTIF Conserv dans des conditions appropri es le r actif SpermMar IgA est2. N V Industriepark Noord 32 8730 Beernem Belgique T l 32 0 50 79 18 05 Fax 32 0 50 79 17 99 URL www fertipro com E mail info fertipro com
3. minutes si des tubes essai en verre sont employ s pendant 45 minutes si les tubes essai sont en plastique 3 Amener le pH du milieu EBSS 7 4 7 5 en ajoutant du NaOH ou de l HCI 0 1 N 4 Laver les spermatozo des motiles du donneur par migration ascendante dans le milieu dont le pH a t ajust pH 7 4 7 5 La migration ascendante doit tre r alis e dans des tubes essai fond rond en plastique st rile ou en verre de 5 ml 37 C pendant 45 minutes Amener la concentration du sperme 20 x 10 sp mi au moyen du milieu EBSS pH 7 4 7 5 5 Diluer en s rie l chantillon de s rum inactiv jusqu obtenir une proportion 1 16 avec le milieu EBSS pH 7 4 7 5 sur une plaque de titrage 6 M langer 50 microlitres de l chantillon de s rum inactiv dilu 1 16 de l tape 5 avec 50 microlitres des spermatozo des motiles lav s du donneur de l tape 4 dans un puits libre de la plaque de titrage Incuber pendant 60 minutes 37 C 7 Placer sur une microlame 10 microlitres du m lange sperme s rum 10 microlitres de particules de latex SpermMar IgG 10 microlitres d antis rum SpermMar IgG 8 M langer l chantillon et le r actif au latex 5 fois avec le bord d une lamelle couvre objet 9 Ajouter l antis rum au m lange form par le r actif au latex et l chantillon 10 La lamelle couvre objet est plac e sur le m lange et celui ci est observ au microscope optique au grossisse
4. standardized investigation of the infertile couple mod rateur P Rowe coordinateur M Darling Fertil Steril diteurs R F HARRISON J BONNAR et W THOMPSON Publ M T P Press Ltd Lancaster Boston La Haye Dordrecht 1984 p 427 431 O M S Laboratory manual for semen analysis and sperm cervical mucus interaction Publ Cambridge University Press 2010 ORGANISATION MONDIALE DE LA SANT Towards more objectivity in diagnosis and management of male infertility nt J Androl 1987 Suppl 7 KREMER J et JAGER S The significance of antisperm antibodies for spermcervical mucus interaction Hum Reprod 1992 vol 7 p 781 784 15 KAY D J et BOETTCHER B Comparison of the SpermMar test with currently accepted procedures for detecting human sperm antibodies Reprod Fer Dev 1992 vol 4 p 175 181 ACKERMAN S Mc GUIRE G FULGHAM D L et ALEXANDER N An evaluation of a commercially available assay for the detection of antisperm antibodies Fertil Steril 1988 vol 49 p 732 734 BRONSON R COOPER G et ROSENFELD D Sperm antibodies their role in infertility Fertil Steril 1984 vol 42 p 171 183 CLARKE GN STOJANOFF A CAUCHI MN et JOHNSTON WIH The immunoglobulin class of antispermatozoal antibodies in serum Am J Reprod Immunol Microbiol 1985 vol 7 p 143 147 HINTING A VERMEULEN L et COMHAIRE F The indirect mixed antiglobulin reaction test using a commercially a
5. 400 x 600 x fond clair fond sombre ou contraste de phase Milieu EBSS p ex Sigma Aldrich E2888 Plaque de microtitrage p ex Kima 650 101 MODE D EMPLOI PR PARATION DES R ACTIFS Les t moins SpermMar IgG positif et n gatif sont pr ts l emploi Amener temp rature ambiante avant utilisation PR L VEMENT ET PR PARATION DE L CHANTILLON Le sperme du donneur doit tre obtenu par masturbation ou par d autres m thodes recommand es par le m decin Le sperme doit id alement tre examin dans l heure qui suit l jaculation PROC DURE 1 Amener tous les r actifs et chantillons temp rature ambiante 2 Laver les spermatozo des motiles du donneur par migration ascendante dans le milieu EBSS dont le pH a t ajust pH 7 4 7 5 La migration ascendante doit tre r alis e dans des tubes essai fond rond en plastique st rile ou en verre de 5 ml 37 C pendant 45 minutes Amener la concentration du sperme 20 x 10 sp mi au moyen du milieu pH 7 4 7 5 3 M langer 50 microlitres de s rum t moin avec 50 microlitres des spermatozo des motiles lav s du donneur dans un puits libre de la plaque de microtitrage Incuber pendant 60 minutes 37 C 4 Placer sur une microlame 10 microlitres du m lange sperme s rum 10 microlitres de particules de latex SpermMar IgG 10 microlitres d antis rum SpermMar IgG 5 M langer l chantillon et le r a
6. ION DES R ACTIFS Les particules SpermMar IgA sont pr tes l emploi mais doivent tre soigneusement m lang es avant utilisation afin d obtenir une suspension homog ne TEST SPERMMAR IGA DIRECT DE D TECTION D ANTICORPS ANTI SPERMATOZO DES DE LA CLASSE DES IGA SUR LES SPERMATOZO DES HUMAINS 1 Amener les r actifs et les chantillons temp rature ambiante 2 Placer sur une microlame 10 microlitres de sperme frais 10 microlitres de particules SpermMar IgA Pour ce faire utiliser les pipettes capillaires de 10 microlitres si elles sont fournies dans le kit Remarque pour utiliser les micropipettes capillaires ins rer l extr mit de la pipette marqu e d une ligne noire paisse dans la poire en caoutchouc sur environ 5 mm Laisser la pipette se remplir par capillarit jusqu au premier rep re 10 microlitres Ne pas aspirer de liquide dans la poire Placer le bout du doigt au sommet de la poire En maintenant la poire entre le pouce et le majeur comprimer d licatement la poire pour expulser le liquide de la pipette 3 M langer l chantillon et le r actif 5 fois avec le bord d une lamelle couvre objet 4 La lamelle couvre objet est plac e sur le m lange et celui ci est examin au microscope optique un grossissement de 400 x 600 x L utilisation de l clairage par contraste de phase ou fond sombre peut faciliter la lecture de la lame Lire les r sultats apr s 3 minutes Recherch
7. PR PARATION DE L CHANTILLON ll est pr f rable d obtenir le sperme par masturbation Lorsque des circonstances particuli res s opposent la r colte par masturbation les pr servatifs en plastique sp cifiques de FertiPro pour la r colte de sperme peuvent tre utilis s p ex Male Factor Pak Les pr servatifs ordinaires ne peuvent pas tre employ s pour la r colte de sperme parce qu ils peuvent interf rer avec la motilit et la viabilit des spermatozo des Le sperme doit id alement tre examin dans l heure qui suit l jaculation Le mucus cervical peut tre aspir l aide d un dispositif sp cialement con u dans ce but p ex In Out Gynetics Belgique Spirette M Laboratoire CCD France Aspiglaire CBS France PR PARATION DES R ACTIFS Les particules de latex SpermMar IgG sont pr tes l emploi mais doivent tre soigneusement m lang es avant utilisation afin d obtenir une suspension homog ne L antis rum SpermMar IgG est pr t l emploi TEST SPERMMAR IGG DIRECT 1 Amener les r actifs et les chantillons temp rature ambiante 2 Placer sur une microlame 10 microlitres de sperme frais non trait 10 microlitres de particules de latex SpermMar IgG 10 microlitres d antis rum SpermMar IgG Pour ce faire utiliser les pipettes capillaires de 10 microlitres fournies test complet Remarque Pour utiliser les micropipettes capillaires Ins rer l extr
8. Test SpermMar IgA Test qualitatif de d tection des anticorps anti spermatozo des de la classe des IgA R f rence doc FPO9 101 R01 E 1 dition 25 11 2014 Conservateur Azoture de sodium 0 09 Conserver une temp rature comprise entre 2 et 8 C Ne pas congeler R actif r serv l usage professionnel USAGE PR VU Le test SpermMar IgA est un kit de diagnostic pour la d tection des anticorps anti spermatozo des de la classe des IgA dans le sperme La pr sence d anticorps anti spermatozo des peut interf rer avec la fonction des spermatozo des et la fixation sur la zone pellucide et la r action acrosomique INFORMATIONS G N RALES La pr sence d anticorps anti spermatozo des r agissant avec un ou plusieurs antig nes la surface des spermatozo des est consid r e comme typique et sp cifique de l infertilit immunitaire 1 3 22 24 Ces anticorps sont retrouv s chez environ 8 des hommes infertiles 13 Les anticorps anti spermatozo des appartiennent diff rentes classes immunologiques mais seuls ceux des classes IgG et IgA ont une importance clinique 18 Les IgG montrent des effets cytotoxiques et sont correctement d tect s sur les spermatozo des ou dans le s rum par le test SpermMar IgG Lorsqu ils sont li s la fraction C3 du compl ment les anticorps anti spermatozo des de la classe des IgA qui poss dent principalement des propri t s d agglutination 14 apparaissen
9. ctif au latex 5 fois avec le bord d une lamelle couvre objet 6 Ajouter galement l antis rum au m lange form par le r actif au latex et l chantillon 7 La lamelle couvre objet est plac e sur le m lange et celui ci est observ au microscope optique au grossissement 400 x ou 600 x un clairage par contraste de phase ou fond sombre peut galement tre utilis pour faciliter la lecture 8 Lire les r sultats apr s 2 3 minutes Rechercher la pr sence de particules de latex fix es sur les spermatozo des motiles Compter 100 spermatozo des pour d terminer le pourcentage de spermatozo des r actifs Si aucune particule n est observ e sur les spermatozo des r p ter la lecture apr s 10 minutes Remarque Conserver la pr paration dans une chambre humide p ex bo te de Petri contenant un morceau de papier filtre humidifi Toujours couvrir de Parafilm pour viter toute vaporation durant l incubation R SULTATS Lorsque le test est r alis correctement l absence d anticorps anti spermatozo des est mise en vidence par des spermatozo des non couverts de particules de latex se mouvant librement Les particules de latex elles m mes formeront des agglutinats de plus en plus volumineux d montrant la r activit des r actifs Toutefois en pr sence d anticorps anti spermatozo des les spermatozo des seront partiellement couverts de particules de latex Dans certains cas les spermatozo des peuven
10. e la classe des IgG dans le sperme le mucus cervical ou le s rum humain Le test SpermMar IgG direct peut tre effectu sur du sperme humain non trait pour autant qu il contienne des spermatozo des motiles le test SpermMar IgG indirect peut tre utilis sur le s rum et le mucus cervical La pr sence d anticorps anti spermatozo des peut interf rer avec la fonction des spermatozo des et la fixation sur la zone pellucide et la r action acrosomique INFORMATIONS G N RALES La pr sence d anticorps anti spermatozo des r agissant avec des antig nes la surface des spermatozo des est consid r e comme typique et sp cifique de l infertilit immunitaire 2 4 11 Ces anticorps sont retrouv s chez environ 8 des hommes infertiles 13 Les anticorps anti spermatozo des appartiennent deux classes immunologiques les IgA et les IgG Selon certaines donn es les IgA rev tiraient une importance clinique sup rieure aux anticorps IgG Les anticorps IgA sont toutefois rarement retrouv s en l absence d anticorps IgG La recherche d anticorps IgG est donc suffisante pour le d pistage de routine 6 7 14 Le test SpermMar IgG direct est r alis en m langeant du sperme frais non trait avec des particules de latex pr alablement rev tues d IgG humaines Un antis rum anti IgG humaines monosp cifique est ajout ce m lange La formation d agglutinats compos s de particules et de spermatozo des motiles indiqu
11. e la pr sence d anticorps IgG sur les spermatozo des 1 5 9 10 Dans le test SpermMar IgG indirect des spermatozo des motiles lav s du donneur sont incub s avec du s rum de patient dilu et d compl ment d origine masculine ou f minine Si le s rum contient des anticorps anti spermatozo des ceux ci couvriront les spermatozo des du donneur qui montreront une r action positive lors d un test SpermMar IgG ult rieur CODES DE COMMANDE DES PRODUITS SPMG_S SpermMar IgG single 50 tests SPMG_C SpermMar IgG complete 50 tests MAT RIEL FOURNI AVEC LE TEST 1 flacon contenant 0 7 mi de particules de latex SpermMar IgG 1 flacon contenant 0 7 mI d antis rum SpermMar IgG Microlames 76 x 26 mm Lamelles couvre objet 24 x 40 mm Micropipettes capillaires talonn es pour pr lever 10 microlitres Poire en caoutchouc kit complet uniquement MAT RIEL NON FOURNI AVEC LE TEST Microscope optique avec grossissement 400 x 600 x fond clair fond sombre ou contraste de phase Milieu EBSS sans prot ines ajout es pour le test SpermMar IgG indirect p ex Sigma Aldrich E2888 Dispositif d aspiration du mucus cervical p ex In Out Gynetics Belgique Spirette CCD France Aspiglaire CBS France Pr servatif non spermicide p ex Male Factor Pak FertiPro NV Plaque de micro titrage p ex Kima 650 101 MODE D EMPLOI PR L VEMENT ET
12. er la pr sence de particules fix es sur les spermatozo des motiles Compter 100 spermatozo des pour d terminer le pourcentage de spermatozo des r actifs R p ter la lecture apr s 10 minutes Remarque Conserver la pr paration dans une chambre humide p ex bo te de Petri contenant un morceau de papier filtre humidifi Le diagnostic d infertilit immunitaire est suspect lorsque 10 39 des spermatozo des motiles sont li s des particules si 40 des spermatozo des ou plus sont li s des particules l infertilit immunitaire est hautement probable o D INTERPR TATION DES R SULTATS Lorsque le test est r alis correctement l absence d anticorps anti spermatozo des est mise en vidence par des spermatozo des non couverts de particules se mouvant librement Il est possible que les particules s agglutinent entre elles mais ce n est habituellement pas le cas En pr sence d anticorps anti spermatozo des les spermatozo des r agiront avec les particules une puis plusieurs particules se fixent alors sur l ensemble ou une partie des spermatozo des motiles Le pourcentage de spermatozo des motiles montrant cette agglutination mixte est directement li l importance de la r action immunitaire En r gle g n rale la proportion de spermatozo des motiles r agissant lors du test SpermMar IgA est inf rieure celle r agissant lors du test SpermMar IgG mais le contraire est parfois vrai
13. ermatozo des motiles et les particules de latex rev tues comme seuil inf rieur d une activit significative le test SpermMar IgG indirect s est av r positif dans certains cas o le test d agglutination sur plateau ou d autres proc dures actuellement accept es taient n gatifs Le test SpermMar IgG s est montr plus facile d emploi et plus sensible 15 Un r sultat faux n gatif au test SpermMar IgG indirect par comparaison avec le test d agglutination sur plateau est survenu dans des cas o des IgM taient pr sentes dans le s rum l importance clinique de ce ph nom ne est douteuse Il est recommand de confirmer un r sultat positif au test SpermMar IgG indirect l aide de tests suppl mentaires de d tection de l activit agglutinante test d agglutination sur plateau et de l activit cytotoxique comme le test de cytotoxicit par lib ration d ATP Ces derniers tests permettront galement d identifier le type d effet immunologique exerc par les anticorps anti spermatozo des CONSERVATION DES R ACTIFS Les r actifs du test SpermMar IgG sont stables pendant 18 mois compter de la date de fabrication Les r actifs du test SpermMar IgG doivent tre conserv s une temp rature comprise entre 2 C et 8 C lorsqu ils ne sont pas utilis s NE PAS CONGELER MISES EN GARDE ET PR CAUTIONS L ensemble du mat riel organique humain doit tre consid r comme potentiellement infectieux Manipuler tous l
14. es chantillons dans les conditions pr vues pour les agents susceptibles de transmettre le VIH ou l h patite Toujours porter des v tements de protection lors de la manipulation des chantillons Les particules de latex SpermMar IgG contiennent 0 1 de s rum albumine bovine provenant des tats Unis Les particules de latex SpermMar IgG sont rev tues d IgG humaines Tout le mat riel utilis a fait l objet d un d pistage de l h patite B de l h patite C et du VIH par le fabricant d origine T moins positif et n gatif pour le test SpermMar IgG T moins utiliser avec le test indirect de dosage des anticorps anti spermatozo des SpermMar IgG R f rence doc FPO9 101 R01 E 1 dition 25 11 2014 Conservateur Azoture de sodium 0 09 Conserver une temp rature comprise entre 2 C et 8 C Ne pas congeler R actif r serv l usage professionnel USAGE PR VU Le t moin SpermMar IgG positif et le t moin SpermMar IgG n gatif sont con us pour tre employ s en tant que contr le de qualit avec le test SpermMar IgG INFORMATIONS G N RALES La pr sence d anticorps anti spermatozo des r agissant avec des antig nes la surface des spermatozo des est consid r e comme typique et sp cifique de l infertilit immunitaire 2 4 11 Les anticorps anti spermatozo des appartiennent deux classes immunologiques les IgA et les IgG Selon certaines donn es les IgA rev tiraient une impor
15. ment 400 x ou 600 x l clairage par contraste de phase ou fond sombre peut galement tre utilis pour faciliter la lecture 11 Lire les r sultats apr s 2 3 minutes Rechercher la pr sence de particules de latex fix es sur les spermatozo des motiles Compter 100 spermatozo des pour d terminer le pourcentage de spermatozo des r actifs Si aucune particule n est observ e sur les spermatozo des r p ter la lecture apr s 10 minutes Remarque Conserver la pr paration dans une chambre humide p ex bo te de Petri contenant un morceau de papier filtre humidifi Toujours couvrir de Parafilm pour viter toute vaporation durant l incubation R SULTATS Lorsque le test est r alis correctement l absence d anticorps anti spermatozo des est mise en vidence par des spermatozo des non couverts de particules de latex se mouvant librement Les particules de latex elles m mes formeront des agglutinats de plus en plus volumineux d montrant la r activit des r actifs Toutefois en pr sence d anticorps anti spermatozo des les spermatozo des seront partiellement couverts de particules de latex Dans certains cas les spermatozo des peuvent m me tre immobilis s par l norme quantit de particules de latex adh rentes Dans le test SpermMar IgG direct le diagnostic d infertilit immunitaire est suspect lorsque 10 39 des spermatozo des motiles sont couverts de particules de latex si 40 des spe
16. mit de la pipette marqu e d une ligne noire paisse dans la poire en caoutchouc sur environ 5 mm Laisser la pipette se remplir par capillarit jusqu au premier rep re 10 microlitres Ne pas aspirer de liquide dans la poire en caoutchouc En maintenant la poire entre le pouce et le majeur comprimer d licatement la poire pour expulser le liquide de la pipette M langer l chantillon et le r actif au latex 5 fois avec le bord d une lamelle couvre objet Ajouter l antis rum au m lange form par le r actif au latex et l chantillon La lamelle couvre objet est plac e sur le m lange et celui ci est observ au microscope optique au grossissement 400 x ou 600 x l utilisation de l clairage par contraste de phase ou fond sombre peut faciliter la lecture des lames Lire les r sultats apr s 2 3 minutes Rechercher la pr sence de particules de latex fix es sur les spermatozo des motiles Compter 100 w A o oo spermatozo des pour d terminer le pourcentage de spermatozo des r actifs Si aucune particule n est observ e sur les spermatozo des r p ter la lecture apr s 10 minutes Remarque Conserver la pr paration dans une chambre humide p ex bo te de Petri contenant un morceau de papier filtre humidifi TEST SPERMMAR IGG INDIRECT 1 Amener tous les r actifs et chantillons temp rature ambiante 2 Inactiver les chantillons de s rum en les chauffant 56 C pendant 30
17. ntibodies in varicocele related infertility with an enzymlinked Immunosorbent assay ELISA Fertil Steril 1986 vol 45 p 397 402 5 JAGER S KREMER J et VAN SLOCHTEREN DRAAISMA T A simple method of screening for antisperm antibodies in the human male 20 21 22 23 Detection of spermatozoal surface IgG with the direct mixed antiglobulin reaction carried out on untreated fresh human semen Int J Fertil 1978 vol 23 p 12 21 JAGER S KREMER J KUIKEN J et VAN SLOCHTEREN DRAAISMA T Immunoglobulin class of antispermatozoal antibodies from infertile men and inhibition of in vitro sperm penetration into cervical mucus IntJ Androl 1980 vol 3 p 1 14 RUMKE P The origin of immunoglobulins in semen Clin Exp Immunol 1976 vol 17 p 287 297 SHULMAN J F et SHULMAN S Methylprednisolone treatment of immunologic infertility in the male Fertil Steril 1982 vol 38 p 591 599 STEDRONSKA J et HENDRY W F The value of the mixed antiglobulin reaction MAR Test as an addition to routine seminal analysis in the evaluation of the subfertile couple Am J Reprod Immunol 1983 vol 3 p 89 91 VERMEULEN L et COMHAIRE F H Le test lt MAR gt aux particules de Latex et le test spermatoxique selon Suominen simplification et nouveaut dans l arsenal du diagnostique immunologique Contraception Fertilit Sexualit 1983 vol 11 suppl p 381 384 O M S 1984 Workshop on the
18. rmatozo des ou plus sont couverts l infertilit immunitaire est hautement probable Le diagnostic doit tre confirm par des tests suppl mentaires Il est recommand de r aliser le test SpermMar IgA chaque fois qu un r sultat positif est obtenu Dans le test SpermMar IgG indirect l observation d une r action d au moins 40 entre les particules de latex rev tues et les spermatozo des motiles est g n ralement accept e comme seuil inf rieur d une activit significative Le test SpermMar IgG direct ne peut tre r alis que si des spermatozo des motiles sont pr sents dans le sperme Les chantillons dont la motilit est faible peuvent g n rer des r sultats faux n gatifs dans ce cas il est sugg r de r aliser le test SpermMar IgG indirect CARACT RISTIQUES DE PERFORMANCE TEST SPERMMAR IGG DIRECT Plusieurs centaines d chantillons de sperme ont t analys s avec le test MAR direct r action l antiglobuline mixte bas e sur les globules rouges et avec le test SpermMar IgG Les r sultats ont t similaires dans 97 des cas Dans 3 des cas le test MAR bas sur les globules rouges tait n gatif alors que le test SpermMar IgG d tectait des spermatozo des couverts d anticorps bien qu en nombres relativement faibles lt 40 ce qui d montre la sensibilit sup rieure du test SpermMar IgG 10 16 TEST SPERMMAR IGG INDIRECT En utilisant la valeur de 40 de r action entre les sp
19. s avec des particules rev tues d anti IgA humaines La formation d agglutinats mixtes de spermatozo des motiles et de particules indique la pr sence d anticorps anti spermatozo des IgA sur les spermatozo des 1 5 9 10 17 CODES DE COMMANDE DES PRODUITS SPMA_S SpermMar IgA single 50 tests SPMA_C SpermMar IgA complete 50 tests MAT RIEL FOURNI AVEC LE TEST 1 flacon contenant 0 7 mi de particules SpermMar IgA Lames de microscope 76 x 26 mm Lamelles couvre objet 24 x 40 mm Micropipettes capillaires talonn es pour pr lever 10 microlitres Poire en caoutchouc kit complet uniquement MAT RIEL NON FOURNI AVEC LE TEST Microscope optique avec grossissement 400 x 600 x fond clair fond sombre ou contraste de phase Pr servatif non spermicide p ex Male Factor Pak FertiPro NV MODE D EMPLOI PR L VEMENT ET PR PARATION DE L CHANTILLON ll est pr f rable d obtenir le sperme par masturbation Lorsque des circonstances particuli res s opposent la r colte par masturbation les pr servatifs en plastique sp cifiques de FertiPro pour la r colte de sperme peuvent tre utilis s p ex Male Factor Pak Les pr servatifs ordinaires ne doivent pas tre employ s pour la r colte de sperme parce qu ils peuvent interf rer avec la motilit et la viabilit des spermatozo des Le sperme doit id alement tre examin dans l heure qui suit l jaculation PR PARAT
20. stable pendant 12 mois compter de la date de fabrication Le r actif SpermMar IgA doit tre conserv une temp rature comprise entre 2 et 8 lorsqu il n est pas utilis NE PAS CONGELER LE R ACTIF MISES EN GARDE ET PR CAUTIONS Manipuler tous les chantillons dans les conditions pr vues pour les agents susceptibles de transmettre le VIH ou l h patite Toujours porter des v tements de protection lors de la manipulation des chantillons SpermMar IgA contient 0 1 de s rum albumine bovine provenant des tats Unis BIBLIOGRAPHIE 1 BOETTCHER B HJORT T RUMKE Ph SHULMAN S et VYAZOV O E diteurs Auto and iso antibodies to antigens of the human reproductive system 1 Results of an international comparative study of antibodies to spermatozoa and other antigens detected in sera from infertile patients deposited in the WHO Reference bank for reproductive immunology Acta Pathol Microbiol Scand 1977 vol 258 suppl p 1 69 2 COMHAIRE F H et KUNNEN M Factors affecting the probability of conception after treatment of subfertile men with varicocele by transcatheter embolisation with Bucrylate Fertil Steril 1985 vol 43 p 781 786 3 FRIBERG J Immunoglobulin concentration in serum and seminal fluid from men with and without sperm agglutinating antibodies Obstet Gynecol 1980 vol 136 p 671 675 4 GOLOMB J VARDINON H HOMONNAI Z T BRAF Z et YUST I Demonstration of antispermatozoal a
21. t m me tre immobilis s par l norme quantit de particules de latex adh rentes Letest r alis avec le t moin SpermMar IgG positif doit mettre en vidence au moins 80 de spermatozo des motiles couverts de particules de latex Le t moin SpermMar IgG n gatif doit mettre en vidence au plus 20 de spermatozo des couverts de particules de latex LIMITES DE LA PROC DURE Le test SpermMar IgG indirect ne peut tre r alis que si des spermatozo des motiles sont pr sents dans le sperme CONSERVATION DES R ACTIFS Conserv s dans des conditions appropri es les s rums t moins SpermMar IgG sont stables pendant 18 mois compter de la date de fabrication Les s rums t moins SpermMar IgG doivent tre conserv s une temp rature comprise entre 2 et 8 C lorsqu ils ne sont pas utilis s MISES EN GARDE ET PR CAUTIONS L ensemble du mat riel organique humain doit tre consid r comme potentiellement infectieux Manipuler tous les chantillons dans les conditions pr vues pour les agents susceptibles de transmettre le VIH ou l h patite Toujours porter des v tements de protection lors de la manipulation des chantillons Bien que les t moins SpermMar IgG positif et n gatif aient t soumis un d pistage du VIH et de l h patite l utilisateur doit toujours porter des v tements de protection lors de leur manipulation BIBLIOGRAPHIE Voir verso ASSISTANCE TECHNIQUE FertiPro
22. t rarement en l absence d anticorps de la classe des IgG 6 mais ils pourraient jouer un r le plus important dans l infertilit masculine En effet les patients pr sentant une combinaison d anticorps anti spermatozo des de la classe des IgA et de la classe des IgG ou des anticorps IgA seuls ont tr s peu de chance de f conder leur partenaire par des m thodes naturelles 6 20 La d tection des anticorps de la classe des IgA est par cons quent cruciale tant pour le diagnostic que pour le pronostic 21 La plupart des anticorps anti spermatozo des de la classe des IgA sont s cr t s par les glandes sexuelles annexes 23 lls sont pr sents sur les spermatozo des et parfois dans le plasma s minal mais sont g n ralement absents du s rum Il n est donc pas recommand de proc der la recherche d anticorps anti spermatozo des de la classe des IgA dans le s rum 18 En cas de faible concentration ou motilit des spermatozo des une recherche d anticorps anti spermatozo des de la classe des IgA dans le plasma s minal peut tre envisag e bien que la signification clinique potentielle de ces anticorps soit discutable Le test SpermMar IgA direct est un test de d tection d anticorps recouvrant les spermatozo des r alis sur des spermatozo des frais ou isol s partir du plasma s minal apr s un cycle de suspension centrifugation et remise en suspension dans un milieu appropri Ces spermatozo des sont m lang
23. tance clinique sup rieure aux anticorps IgG Les anticorps IgA sont toutefois rarement retrouv s en l absence d anticorps IgG La recherche d anticorps IgG est donc suffisante en tant que m thode de d pistage de routine 6 7 14 Dans le test SpermMar IgG indirect des spermatozo des motiles lav s du donneur sont incub s avec du s rum de patient dilu et d compl ment d origine masculine ou f minine Si le s rum contient des anticorps anti spermatozo des ceux ci couvriront les spermatozo des du donneur qui montreront une r action positive lors d un test SpermMar IgG ult rieur Le t moin SpermMar IgG positif contient du s rum de patient pr t l emploi pr sentant des taux d anticorps anti spermatozo des sup rieurs 80 Le t moin SpermMar IgG n gatif contient du s rum de patient pr t l emploi pr sentant des taux d anticorps anti spermatozo des inf rieurs 20 CODES DES PRODUITS ET CONTENU DES KITS SPMG_P 1 flacon contenant 2 5 ml de s rum t moin positif pour le test SpermMar IgG 1 flacon contenant 2 5 ml de s rum t moin n gatif pour le test SpermMar IgG SPMG_N MAT RIEL FOURNI AVEC LE TEST 1 flacon contenant 2 5 ml de s rum de patient d compl ment dilu dans le milieu FertiCult Flushing sans s rum albumine humaine MAT RIEL NON FOURNI AVEC LE TEST Test SpermMar IgG Lames de microscope Lamelles couvre objet Microscope optique avec grossissement
24. vailable kit for the detection of antisperm antibodies in serum Fertil Steril 1988 vol 49 p 1039 1044 MEINERTZ H et HJORT T Detection of autoimmunity to sperm mixed antiglobulin reaction MAR test or sperm agglutination A study on 537 men from infertile couples Fertil Steril 1986 vol 46 p 86 91 PARSLOW JM POULTON TA BESSER GM et HENDRY WF The clinical relevance of classes of immunoglobulins on spermatozoa from infertile and vasectomized males Fertil Steril 1985 vol 43 621 RUMKE P et HELLINGA Autoantibodies against spermatozoa in sterile men Am J Clin Pathol 1959 vol 32 p 357 363 UELING DT Secretory IgA in seminal fluid Fertil Steril 1971 vol 22 p 769 773 WILSON L Sperm agglutinins in human semen and blood Proc Soc Exp Biol Med 1954 vol 85 p 652 655 ASSISTANCE TECHNIQUE FertiPro N V Industriepark Noord 32 8730 Beernem Belgique T l 32 0 50 79 18 05 Fax 32 0 50 79 17 99 URL www fertipro com E mail info fertipro com CE m Test SpermMar IgG Test qualitatif au latex de d tection des anticorps anti spermatozo des R f rence doc FP09 101 R01 E 1 dition 25 11 2014 Conservateur Azoture de sodium 0 09 Conserver une temp rature comprise entre 2 C et 8 Ne pas congeler R actif r serv l usage professionnel USAGE PR VU Le test SpermMar IgG est un kit de diagnostic pour la d tection des anticorps anti spermatozo des d
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