Gélose au vert brillant et au rouge de phénol (EDEL et
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1. G lose au vert brillant et au rouge de ph nol EDEL et KAMPELMACHER DOMAINE D UTILISATION La g lose au vert brillant et au rouge de ph nol selon Edel et Kampelmacher est un milieu s lectif employ pour l isolement des salmonelles dans les produits alimentaires sp cialement lorsque ces microorganismes sont pr sents en petit nombre HISTORIQUE C est en 1925 que Kristensen Lester et Jurgens ont d crit ce milieu dont la formule a t modifi e par Kauffmann puis au Rijksinstituut voor Volksgezondheid en Milieu R I V M sous la conduite de Edel et de Kampelmacher pr s d Utrecht PRINCIPES _ L inhibition de la flore Gram positif et de la plupart des germes Gram n gatif est due la pr sence de vert brillant Par rapport au milieu de Kristensen le milieu a t enrichi en facteurs nutritifs et le pouvoir inhibiteur a t amoindri Le milieu contient deux glucides le lactose et le saccharose pour lesquels la fermentation de l un ou l autre ou des deux se traduit par un abaissement de pH qui provoque l apparition de colonies color es en jaune vert en pr sence de l indicateur de pH le rouge de ph nol Les salmonelles lactose n gatifs produisent des colonies incolores ros tres Il est particuli rement recommand de r aliser au pr alable un enrichissement sur un milieu au t trathionate sur un bouillon s l nite cystine ou bien sur un bouillon de Rappaport Vassiliadis et d ensemencer simul2. LMACHER E H 1969 Salmonella isolation in nine European Laboratories using a standardized technique Bulletin of World Health Organization 41 2 297 306 NF V 59 104 Octobre 1982 G latine alimentaire Recherche des Salmonella ISO 6785 IDF 93 Mai 2001 Lait et produits laitiers Recherche de Salmonella spp XP CEN ISO TS 11133 2 V 08 104 2 Janvier 2004 Microbiologie des aliments Guide pour la pr paration et la production des milieux de culture Partie 2 Guide g n ral pour les essais de performance des milieux de culture FD CEN TR 15215 3 X 33 038 3 Avril 2006 Caract risation des boues D tection et d nombrement de Salmonella spp dans les boues les sols les amendements du sol les supports de culture et les biod chets Partie 3 Pr sence absence par enrichissement en milieu liquide peptone novobiocine puis sur milieu Rapport Vassiliadis NF EN ISO 6579 V 08 013 Mars 2007 Microbiologie des aliments M thode horizontale pour la recherche des Salmonella spp NF EN ISO 6785 V 04 031 Avril 2008 Lait et produits laitiers Recherche de Salmonella spp COMPASS est une marque de SOLABIA S A S Les mentions port es sur la notice d utilisation et l tiquette sont pr dominantes sur les informations d crites dans ce document Les informations et les sp cifications contenues dans cette fiche technique ont t tablies la date du 2010 10 12 Elles sont susceptibles d tre modifi es tout moment s
3. ans pr avis Code document BK091 F 2003 06 7 4 4 Biokar Diagnostics Rue des Quarante Mines ZAC de Ther Allonne B P 10245 F60002 Beauvais Cedex France T l 33 0 3 44 14 33 33 Fax 33 0 3 44 14 33 34 www biokar diagnostics fr
4. olonies jaune verd tre entour es d une Escherichia Citrobacter Klebsiella zone jaune dans le milieu Enterobacter lactose saccharose positif Cultures totalement ou presque totalement inhib es ACISTIES a SAM BOSNIE FORMULE TYPE pouvant tre ajust e de fa on obtenir des performances optimales Pour 1 litre de milieu ST MONS es 10 0 g Extrait de VIANQE sim srenennenennenetanmesaenteinemeerneemomentueciamennes 5 0 g Extrait autolytique de levure 3 0 g E Oei etes nssamensesessrsmeneneees E qe 10 0 g Saccharose dunes anse Rennes ci one 10 0 g Phosphate disodique 2 tune 1 09 Phosphate monosodique 5 88 enerddenateteet s 0 6 g Rouge de PR nOl xs n R Sn in 90 0 mg VOTES a E aaNEea Ss 5 0 mg Agar agar bact riologique ss ssesseneesseerrrseerrrrrererreserrrnnernnenrnenee 14 0 g pH du milieu pr t l emploi 25 C 6 9 0 2 2 4 Biokar Diagnostics Rue des Quarante Mines ZAC de Ther Allonne B P 10245 F60002 Beauvais Cedex France T l 33 0 3 44 14 33 33 Fax 33 0 3 44 14 33 34 www biokar diagnostics fr CONTR LE QUALITE Milieu d shydrat poudre ros e fluide et homog ne Milieu pr par g lose brun orang R ponse culturale typique apr s 48 heures d incubation 37 C Microorganismes Croissance Caract ristiques Salmonella Enteritidis CIP 82 97 bonne score 2 colonies ros es Salmonella Typhimurium ATCC 14028 b
5. onne score 2 colonies ros es Enterococcus faecalis ATCC 29212 inhib e score 0 Staphylococcus aureus ATCC 25923 inhib e score 0 STOCKAGE CONSERVATION Milieu d shydrat 2 30 C La date de p remption est mentionn e sur l tiquette Milieu pr par en bo tes 1 mois 2 8 C l abri de la lumi re titre indicatif PRESENTATION Code Milieu d shydrat Flacon de 500 g BKO91HA SUPPORT PHOTO R f rence produit BKO91HA Utilisation Isolement des salmonelles dans les produits alimentaires Salmonella Typhimurium G lose au vert brillant et au rouge de ph nol Edel et Kampelmacher R f BKO91HA Incubation 48 heures 37 C Caract ristiques Colonies incolores roses entour es d une zone rouge dans le milieu 3 4 Biokar Diagnostics Rue des Quarante Mines ZAC de Ther Allonne B P 10245 F60002 Beauvais Cedex France T l 33 0 3 44 14 33 33 Fax 33 0 3 44 14 33 34 www biokar diagnostics fr REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES KRISTENSEN M LESTER V and JURGENS A 1925 Use of trypsinized casein brom thymol blue brom cresol purple phenol red and brilliant green for bacteriological nutrient media British Journal of Experimental Pathology 6 291 299 EDEL W and KAMPELMACHER E H 1968 Comparative studies on Sa monella isolation in eight European Laboratories Bulletin of World Health Organization 39 3 487 491 EDEL W and KAMPE
6. tan ment d autres milieux plus s lectifs g lose de Wilson Blair modifi e g lose XLT4 ou COMPASS Salmonella Agar PREPARATION Mettre en suspension 53 7 g de milieu d shydrat BK091 dans 1 litre d eau distill e ou d min ralis e Porter lentement le milieu bullition sous agitation constante et ly maintenir durant le temps n cessaire sa dissolution R partir en tubes ou en flacons Ne pas autoclaver 1 4 Biokar Diagnostics Rue des Quarante Mines ZAC de Ther Allonne B P 10245 F60002 Beauvais Cedex France T l 33 0 3 44 14 33 33 Fax 33 0 3 44 14 33 34 www biokar diagnostics fr MODE D EMPLOI Refroidir et maintenir le milieu 44 47 C Couler en bo tes de Petri st riles Laisser solidifier sur une surface froide Faire s cher les bo tes l tuve couvercle entrouvert _ Ensemencer en stries l inoculum dans les bo tes partir des milieux d enrichissement utilis s pour la recherche des Sa monella Transf rer parall lement l inoculum sur un autre milieu s lectif __Incuber 37 C pendant 24 48 heures si n cessaire LECTURE L aspect des colonies est le suivant Caract ristiques Microorganismes lonies incolores roses entour es d une PENES Colonies inc ni Salmonella lactose saccharose n gatif zone rouge dans le milieu Colonies roses sans prolif ration Proteus Petites colonies roses Pseudomonas C
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