PASTOREXTM CRYPTO PLUS 61747 60 TESTS - Bio-Rad
Contents
1. fr n din lokala Bio Rad representant De vrige sprog som kr ves i henhold til EU direktiv kan fas ved henvendelse til den lokale Bio Rad leverander Oi UTTOAOITTES YAWOOES Trou OTTO rrjv Eupurraikr Odny a TOTTIK AVTITP CWTTO Bio Rad 81 ul ab CE 3 boulevard Raymond Poincar 92430 Marnes la Coquette France Tel 33 0 1 47 95 60 00 12 2004 Fax 33 0 1 47 41 91 33 code 8800732. tube et les conserver 20 C 2 CHANTILLONS Conservation Les chantillons devront tre trait s le plus rapidement possible apr s pr l vement En cas d impossibilit on peut stocker le pr l vement quelques heures entre 2 et 8 C ATTENTION n utiliser que des pr l vements de s rum sur tube sec Les interf rences li es une surcharge en albumine lipides h moglobine et bilirubine n ont pas t test es Traitement a S rum L B A Mettre 120 pl d chantillon tester dans un tube bouchon herm tique et ajouter 20 yl de pronase Homog n iser vigoureusement et chauffer 56 C pendant 30 minutes Enlever le tube du bain marie et ajouter 1 goutte de solution d arr t inhibiteur enzymatique e Homog n iser ATTENTION Lors du chauffage au bain marie viter que l eau ne p n tre dans les tubes car ceci risquerait de fausser le r sultat b L C R Dans le cas d un L C R tr s trouble ou pr sentant une contamination par des h maties le centrifuger pendant 5 minutes 350 g 2000 t mn et recueillir le surnageant Mettre 120 yl d chantillon tester dans un tube bouchon herm tique et ajouter 20 pl de pronase Homog n iser vigoureusement et chauffer 56 C pendant 30 minutes Enlever le tube du bain marie 56 C Arr ter l activit enzymatique de la pronase par chauffage au bain marie 100 C pendant 5 minutes Homog n iser laisser r
3. 00 La limite de d tection de en s rum est estim e 50 ng ml 12 LIMITES DE LA METHODE L agglutination peut tre inhib e par de tr s fortes concentrations en GXM ph nom ne de zone En cas de doute sur l interpr tation d une r action il est conseill de refaire le test sur une dilution au 1 100 de l chantillon trait Les r sultats devront donc tre interpr t s en fonction de l historique du patient Une concentration en antig ne de l chantillon inf rieure au seuil de d tection de Pastorex Crypto Plus conduit un r sultat n gatif dans ce cas il est utile de r p ter le pr l vement ult rieurement Les techniques de d tection d antig nes solubles par agglutination de particules de latex permettent une aide au diagnostic plus rapide que les techniques classiques de mise en culture Les donn es cliniques et bibliographiques sur la d tection de l antig ne GXM dans les L B A et les urines avec les r actifs latex sont pour l instant limit es t d crit quelques similarit s antig niques entre la capsule de Cryptococcus et la paroi et de Trichosporon beigelii qui ont conduit des r actions faussement positives chez les patients atteints de Trichosporose 4 Comme pour toute technique immunologique on ne doit pas carter la possibilit de r actions crois es Le diagnostic de la cryptococcose est fond sur la d tection microscopique de la levure capsul e coloration l e
4. A MM DD Storage temperature limitation Limites de temp ratures de stockage Temperatura limite Lagerungstemperatur Limiti di temperatura di conservazione Limites de temperatura de armazenamento Temperaturbegr nsning Temperaturbegr nsning Consult Instruction for use Consulter le mode d emploi Consulte la instrucci n para el uso Siehe Gebrauchsanweisung Consultare le istruzioni per uso Consulte o folheto informativo Se instruktionsanvisning vid anv ndning Se instruktion fer brug y 80 The other languages which are required in conformity to the European Directive can be obtained from your local Bio Rad agent Les autres langues requises par la Directive Europ enne sont disponibles aupr s de votre repr sentant Bio Rad local Los otros idiomas que se requiren para la conformidad de la Directiva Europea puede ser obtenida en su oficina local Bio Rad Die anderen Sprachen die in bereinstimmung mit der europ ischen IVD Direktive ben tigt werden erhalten Sie ber Ihre lokale Bio Rad Niederlassung Le altre lingue che sono richieste in conformit con le Direttive Europee possono essere ottenute dal locale agente Bio Rad As restantes l nguas obrigat rias em conformidade com a Directiva Europeia podem ser obtidas atrav s da subsidi ria Bio Rad mais pr xima de si vriga spr k som kr vs i enlighet med EG direktivet kan erh llas
5. acons d enzyme lyophilis e pronase reconstituer par 1 ml d eau distill e ou d min ralis e Stopping solution 1 flacon compte gouttes de 2 ml de solution d arr t inhibiteur enzymatique 15 cartes d agglutination jetables sachet de 100 b tonnets jetables Tous ces r actifs contiennent 0 02 de merthiolate et une quantit 0 1 d azoture de sodium CONSERVATION Les r actifs conserv s 2 8 C et en l absence de contamination sont stables jusqu la date de p remption indiqu e sur l tiquette y compris apr s ouverture Une fois reconstitu e la pronase peut tre conserv e 4 semaines 2 8 C ou plusieurs mois 20 C Conserver les r actifs latex verticalement NE JAMAIS CONGELER LES R ACTIFS LATEX MATERIEL NECESSAIRE NON FOURNI Pipettes de pr cision Microtubes bouchons herm tiques Agitateur rotatif horizontal 160 tours minutes Mixeur type Vortex Bain marie 56 C Bain marie 100 C Bac d sinfectant 6 PRECAUTIONS D UTILISATION La qualit des r sultats d pend du respect des bonnes pratiques de laboratoire Tous les r actifs ainsi que l chantillon doivent tre utilis s une temp rature comprise entre 18 et 30 C Ne pas passer les doigts sur les surfaces r actionnelles d agglutination Changer de pipette ou de c ne de pr l vement pour chaque chantillon test Agiter les flacons de latex avant utilisation Essuyer l em
6. bout compte gouttes du r actif afin d obtenir des gouttes bien calibr es Tenir le flacon de latex verticalement lors du d p t de la goutte Changer de b tonnet pour chaque r action Apr s usage liminer les pipettes de pr l vement des produits pathologiques ainsi que les cartes d agglutination et les b tonnets dans une poubelle autoclavable ou un bac d sinfectant CONSIGNES D HYGI NE ET DE S CURIT Observer tout moment les techniques et pr cautions en vigueur en mati re de protection contre les dangers microbiologiques Tous les pr l vements doivent tre consid r s comme potentiellement contagieux Tous les r actifs latex contiennent de l azoture de sodium Eviter tout contact avec les yeux la peau et les muqueuses L azoture de sodium peut r agir avec le plomb ou le cuivre pr sents dans les tuyaux d vacuation et produire ainsi des azotures m talliques explosifs Lors de leur limination rincer abondamment grande eau pour viter la formation de d p ts d azoture MODE OPERATOIRE 1 PR PARATION DE L ENZYME PRONASE Reconstituer le flacon de pronase avec 1 ml d eau fraichement distill e ou d min ralis e Eviter que la mousse ne se forme pendant la reconstitution et veiller ce que tout le lyophilisat soit dissout Si 30 40 tests sont effectu s chaque mois conserver la pronase 2 8 C 4 semaines de stabilit Pour des s ries inf rieures pr parer des aliquots de 20 pl par
7. co w PASTOREX CRYPTO PLUS 61747 60 TESTS DETECTION DES ANTIGENES SOLUBLES DE CRYPTOCOCCUS NEOFORMANS DANS LES LIQUIDES BIOLOGIQUES SERUM L C R L B A URINE 1 INTERET CLINIQUE La cryptococcose est une infection opportuniste survenant chez les immuno d prim s et plus particuli rement au cours du SIDA o elle est aujourd hui la principale cause d infection fatale avec une fr quence variant de 2 10 en Europe occidentale et aux U S A jusqu plus de 15 dans certaines r gions d Afrique 3 Chez ces patients immunod prim s la diss mination au syst me nerveux central m ningite et aux autres organes est tr s rapide la suite d une phase primaire pulmonaire 1 Les antig nes solubles sont rapidement d celables dans le s rum dans le liquide c phalorachidien L C R le liquide de lavage bronchio alv olaire L B A et les urines Le diagnostic de la cryptococcose est fond sur la d tection microscopique de la levure capsul e sur l isolement de Cryptococcus neoformans en culture et sur la d tection des antig nes capsulaires dans les liquides biologiques 2 PRINCIPE Pastorex Crypto Plus est un test qualitatif et semi quantitatif qui permet par une simple technique d agglutination de d tecter le polysaccharide capsulaire de Cryptococcus neoformans le glycuronoxylomannane GXM dans les liquides biologiques s rums L C R L B A urines Ce test met en oeuvre des particules de la
8. efroidir 3 4 minutes avant de r aliser l agglutination ATTENTION Lors du chauffage au bain marie viter que l eau ne p n tre dans les tubes car ceci risquerait de fausser le r sultat c Urine Diluer au 1 2 dans le tampon de dilution 3 R ACTIONS D AGGLUTINATION D poser 40 pl d chantillon trait sur un cercle de la carte d agglutination D poser c t une goutte de latex Cryptococcus M langer l aide d un b tonnet R aliser un contr le t moin n gatif en m langeant 40 yl de tampon de dilution avec une goutte de latex Placer la carte d agglutination sur l agitateur pendant 5 minutes 160 tours minute temp rature ambiante 18 30 C INTERPRETATION DES RESULTATS Lecture Une r action positive se traduit par une agglutination des particules de latex avec l chantillon test et par une absence d agglutination avec le t moin n gatif latex tampon de dilution Titrage Le sch ma des dilutions dans le tampon glycine peut tre le suivant Dilution 1 10 1 100 1 1000 1 10000 Echantillon trait 50 pl 50 yl 50 yl 50 yl Tampon 450 yl 450 pl 450 pl 450 pl Un titrage pr cis sera ensuite r alis par des dilutions successives de raison 2 partir du dernier tube positif 50 pl 50 pl de tampon ATTENTION l interpr tation des agglutinations aux fortes dilutions peut varier en fonction des utilisateurs il est conseill lors d
9. g nes solubles observ e avec Pastorex Crypto Plus pourrait refl ter l efficacit th rapeutique Le passage des particules de couleur rouge permet de mieux visualiser les agglutinats Au cours d une valuation clinique r alis e en laboratoire hospitalier les r sultats suivants ont t obtenus SENSIBILIT Pr l vements issus de 38 patients atteints de Cryptococcose Pr l vement Nombre de patients Pastorex Crypto Plus Type Nbre total S RUMS 28 21 26 2 LR 13 11 11 2 L B A 1 1 1 0 URINE 9 5 9 0 TOTAL 51 38 47 4 Sur ces 51 chantillons la sensibilit globale de Pastorex est estim e 92 Crypto Plus Les 4 chantillons non d tect s par le Pastorex Crypto Plus taient galement consid r s n gatifs par un autre test d agglutination utilisant un anticorps polyclonal SP CIFICIT Pr l vements issus de 92 patients t moins ne pr sentant pas de cryptococcose Pr l vement Nombre de patients Pastorex Crypto Plus Type Nbre total S RUMS 62 62 2 60 LCR Z Z 0 7 L B A 21 19 0 21 URINE 6 4 0 6 TOTAL 96 92 2 94 Sur ces 96 chantillons la sp cificit globale de Pastorex Crypto Plus est estim e 98 Des tudes internes compl mentaires portant sur 59 s rums dont 18 provenant de patients pr sentant une aspergillose ou une candidose prouv e ou suspect e ont conduit une sp cificit de 1
10. ncre de chine sur l isolement de Cryptococcos neoformans en culture et sur la d tection des antig nes capsulaires dans les liquides biologiques 2 Les techniques de d tection d antig nes solubles par agglutination de particules de latex permettent une aide au diagnostic Le diagnostic de cryptococcose ne peut tre pris qu apr s confrontation des arguments cliniques radiologiques et biologiques microbiologique histologique s rologique chaque l ment pris isolement devant tre interpr t avec circonspection 13 REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES 1 CAMERON M L BARTLETT J A GALLIS H A WASKIN Manifestations of Pulmonary Cryptococcocis in Patients with Acquired Immunodeficiency Syndrome R I D 1991 13 p 64 67 2 STAIB F Cryptococcocis in Aids Mycological diagnostic and epidemiological observations Aids Forshung AIFO 1987 p 363 382 3 DROMER F MATHOULIN S DUPONT B LAPORTE A and the French Cryptococcosis Study Group Epidemiology of Cryptococcosis in France A 9 Year Survey 1985 1993 Clin Inf Dis 1996 23 p 82 90 4 DROMER F SALAMERO J CONTREPOIS A CARBON C YENI P Production Characterization and Antibody Specificity of a Mouse Monoclonal Antibody Reactive with Cryptococcus neoformans Capsular Polysaccharide Infect and Immun 1987 55 p 742 748 5 GRAY L D ROBERTS G D Experience with the Use of Pronase to eliminate Interference Factors in the Latex Agglutination Test for Crypt
11. ococcal Antigen J Clin Microbiol 1988 26 p 2450 2451 6 HEELAN J S CORPUS L KESSIMIAN N False positive reaction in the Latex Agglutination Test for Cryptococcus neoformans Antigen J Clin Microbiol 1991 29 p 1260 1261 20 7 HAMILTON J R NOBLE A DENNING D W STEVENS Performance of Cryptococcus Antigen Latex Agglutination Kits on Serum and Cerebrospinal Fluid Specimens of Aids patients before and after Pronase treatment J Clin Microbiol 1991 29 p 333 339 8 TEMSTET A ROUX P POIROT J L RONIN O DROMER Evaluation of monoclonal antibody based latex test for the diagnosis of Cryptococcosis Comparison with two tests Using Polyclonal Antibodies J Clin Microbiol 1992 30 p 2544 2550 9 SWINNE D MEULEMANS L DE VROEY Ch Detection of Cryptococcus antigen with a mononucleal antibody based latex test abstract Trends in the management of systemic fungal infections Nijmegen The Netherlands 5 7 Sept 1991 Ce CE marking European directive 98 79 CE on in vitro diagnostic medical devices Marquage CE Directive europ enne 98 79 CE relative aux dispositifs m dicaux de diagnostic in vitro Marcado CE Directiva europea 98 79 CE sobre productos sanitarios para diagn stico in vitro EG Markierung Europ ische Richtlinie 98 79 EG ber In vitro Diagnostika Marchiatura CE Direttiva europea 98 79 CE relativa ai dispositivi medico diagnostici in vitro Marca o CE Di
12. rectiva europeia 98 79 CE relativa aos dispositivos m dicos de diagn stico in vitro CE m rkning Europa direktiv 98 79 EG om medicintekniska produkter l r in vitro diagnostik CEmaerkningen Europa direktiv 98 79 EF om medicinsk udstyr til in vitro diagnostik IVD For in vitro diagnostic use Pour diagnostic in vitro Para diagn stico in vitro In vitro Diagnostikum Per uso diagnostico in vitro Para uso em diagn stico in vitro In vitro diagnostik In vitro diagnose REF Catalogue number R f rence catalogue N mero de cat logo Bestellnummer Numero di catalogo N mero de cat logo Katalognummer Katalognummer Manvfacturer Fabricant Fabricante Hersteller Produttore Fabricante Tillverkad av Fremstillet af Authorised Representative Repr sentant agr Representante autorizado Bevollm chtigter Distributore autorizzato Representante Autorizado Auktoriserad representant Autoriseret repraesentant Batch code Code du lot C digo de lote Chargen Bezeichnung Codice del lotto C digo do lote Batch nr Batchkoden Expiry date YYYY MM DD Date de peremption AAAA MM JJ Estable hasta AAAA MM DD Verwendbar bis JJJJ MM TT Da utilizzare prima del AAAA MM GG Data de expira o AAAA MM DD Utg ngsdatum r M nad Dag Anvendes far AAA
13. tex recouvertes d un anticorps monoclonal anti glycuronoxylomannane composant majeur de la capsule de Cryptococcus neoformans 4 Une r action entre les particules et le GXM traduit par une agglutination visible l oeil nu La limite de sensibilit est de 50 ng ml pour le s rum Le test peut tre effectu sur des pr l vements inactiv s 30 minutes 56 C dans le but d liminer le risque de contamination par le virus HIV Un traitement enzymatique pr alable de tous les chantillons except les urines est n cessaire afin d liminer les interf rences et d augmenter la sensibilit de la d tection 5 6 7 Les chantillons positifs sont ensuite titr s par dilutions successives dans le tampon le titre antig nique donne une indication sur le stade et l tendue de l infection Au cours de l volution la d termination de la cin tique antig nique peut permettre d valuer l efficacit th rapeutique 2 3 PRESENTATION Coffret de 60 tests code 61747 contenant Latex Cryptococcus 1 flacon compte gouttes de 1 ml de latex Cryptococcus particules de latex rouge sensibilis es avec un anticorps monoclonal anti glycuronoxylomannane souris en tampon glycine Positive control antigen 1 flacon compte gouttes de 0 5 ml de t moin positif polyoside capsulaire purifi partir de Cryptococcus neoformans Diluent buffer 1 flacon de 10 ml de tampon glycine albumine Pronase 2 fl
14. u titrage d un nouveau pr l vement du m me malade de confirmer le titre du pr l vement pr c dent CONTROLE QUALITE DU TEST La sensibilit du latex peut tre contr l e p riodiquement avec le t moin positif fourni dans le coffret dont la concentration en GXM est de 200 ng ml 10 CONTROLE QUALITE DU FABRICANT Tous les produits fabriqu s et commercialis s par la soci t Bio Rad sont plac s sous un syst me d assurance qualit de la r ception des mati res premi res jusqu la commercialisation des produits finis Chaque lot de produit fini fait l objet d un contr le de qualit et n est commercialis que s il est conforme aux crit res d acceptation La documentation relative la production et au contr le de chaque lot est conserv e par le fabricant 11 PERFORMANCES L anticorps monoclonal El utilis dans ce test d agglutination a t caract ris par Dromer et al 4 Un test d agglutination utilisant des particules de couleur blanche a pr c demment t valu confirmant les performances de cet anticorps Une de ces tudes 8 r alis e sur 84 s rums de patients atteints de Cryptococcose et 47 s rums t moins a galement permis de montrer que le traitement par la pronase am liorait la sensibilit et la sp cificit de la d tection du GXM Une autre valuation 9 a montr que les titres antig niques obtenus avec diff rents r actifs n taient pas identiques et que la n gativation des anti
Download Pdf Manuals
Related Search