BD Mac Conkey II Agar / Columbia CNA Agar with 5% Sheep Blood
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1. partielle a compl te Pseudomonas Colonies irr guli res incolores Inhibition partielle compl te roses Staphylocoques Inhibition partielle compl te Croissance colonies de taille petite moyenne de couleur blanche jaune avec ou sans b ta h molyse Streptocoques Inhibition compl te Croissance colonies de taille minuscule moyenne avec ou sans alpha b ta h molyse Ent rocoques Inhibition partielle a compl te Croissance colonies de taille minuscule a moyenne parfois cern es de gris g n ralement non h molytiques PA 254447 01 33 D autres bact ries Gram n gatives et Gram positives non num r es dans la liste ci dessus peuvent galement se d velopper sur ces milieux Pour plus d informations sur les croissances et pour en interpr ter les donn es consulter les documents cit s en r f rence Pour obtenir une identification compl te il convient d employer des tests biochimiques et si n cessaire des tests immunologiques faisant appel des cultures pures CARACTERISTIQUES DE PERFORMANCES ET LIMITES DE LA PROCEDURE La MacConkey Il Agar figure parmi les milieux standards utilis s pour l ensemencement primaire d chantillons cliniques et pour de nombreuses mati res non cliniques Ce milieu favorise le d veloppement de tous les microorganismes de la famille des Enterobacteriaceae ainsi que de nombreux autres b tonnets Gram n gatifs p ex les Pseudomonas et les genres associ s2. AW MODE D EMPLOI RJ B D MILIEUX EN BOITES DE C PETRI PRETS A L EMPLOI PA 254447 01 Rev Juin 2003 BD Mac Conkey Il Agar Columbia CNA Agar with 5 Sheep Blood Biplate APPLICATION La BD Mac Conkey II Agar Columbia CNA Agar with 5 Sheep Blood Biplate g lose Mac Conkey II g lose CNA de Columbia avec 5 de sang de mouton en bo te de P tri deux compartiments est utilis e pour l isolement s lectif des bact ries Gram n gatives et Gram positives partir d chantillons cliniques PRINCIPES ET EXPLICATION DE LA METHODE M thode microbiologique La MacConkey Agar est l une des premi res formulations mises au point publi e en 1900 par MacConkey pour l isolement la culture et l identification des Enterobacteriaceae et de certains non fermentants Par la suite ce milieu a t modifi diverses reprises La MacConkey Agar n est que l g rement s lective car la concentration de sels biliaires inhibiteurs de microorganismes Gram positifs est faible par rapport d autres milieux de mise en culture ent riques Ce milieu est recommand pour les chantillons cliniques susceptibles de contenir un m lange de flores microbiennes tels que les chantillons d urine respiratoires ceux pr lev s sur des plaies etc car il autorise un groupement pr liminaire des bact ries ent riques et d autres bact ries Gram n gatives dans les fermentants et non fermentants du lactose La MacConkey Agar est ga
3. Les non fermentants ou les autres b tonnets Gram n gatifs sensibles ces composants s lectifs ne se d veloppent pas dans ce milieu Avant d utiliser ce milieu pour des microorganismes sp cifiques consulter les chapitres correspondants des documents cit s en r f rence gt Il a t rapport que des Enterobacteriaceae et des Pseudomonas aeruginosa sont inhib es sur la MacConkey Agar lorsque celle ci est incub e dans une atmosph re enrichie en CO La Columbia CNA Agar with 5 Sheep Blood est un milieu standard servant l isolement et a la culture de nombreux microorganismes Gram positifs qui se d veloppent en conditions a robie p ex les streptocoques staphylocoques coryneformes Listeria spp et d autres Les bact ries Gram n gatives qui r sistent aux ingr dients s lectifs peuvent se d velopper dans ce milieu Les Candida spp et les autres champignons ne sont pas inhib s dans ce milieu Bien que ce soient des bact ries Gram positives les a robies sporul s tels que Bacillus spp peuvent tre inhib s sur la Columbia CNA Agar with 5 Sheep Blood Il faut noter que ce milieu poss de une teneur en glucide relativement lev e Par cons quent il est possible que les streptocoques b ta h molytiques produisent une r action h molytique de couleur tirant sur le vert susceptible d tre confondue avec une alpha h molyse M me si de nombreuses bact ries Gram n gatives et Gram positives se d velopp
4. TIONNEMENT BD Mac Conkey II Agar BD Columbia CNA Agar with 5 Sheep Blood Biplate N r f 254447 Milieux en bo tes de P tri pr ts a l emploi 20 unit s par carton INFORMATIONS COMPLEMENTAIRES Pour plus d informations contacter le repr sentant local de BD eal BD Diagnostic Systems Tullastrasse 8 12 D 69126 Heidelberg Germany Phone 49 62 21 30 50 Fax 49 62 21 30 52 16 Reception_Germany europe bd com BD Diagnostic Systems Europe Becton Dickinson France SA 11 rue Aristide Berg s 38800 Le Pont de Claix France Tel 33 476 68 3636 Fax 33 476 68 3292 http www bd com BD BD logo and Stacker are trademarks of Becton Dickinson and Company ATCC is a trademark of the American Type Culture Collection 2003 Becton Dickinson and Company PA 254447 01 5
5. de essaimage inhib couleur beige tirant sur le marron essaimage inhib Salmonella Typhimurium Croissance bonne a Non test e ATCC 14028 excellente colonies beiges excellente colonies beiges ATCC 29212 petites colonies grises ATCC 25923 jaune avec b ta h molyse ATCC 19615 gris b ta h molyse ATCC 6305 alpha h molyse opalescente PA 254447 01 iD M THODE Mat riaux fournis BD Mac Conkey II Agar Columbia CNA Agar with 5 Sheep Blood bo tes de P tri Stacker de 90 mm deux compartiments Produits contr l s microbiologiquement Mat riaux non fournis Milieux de culture auxiliaires r actifs et mat riel de laboratoire requis Types d chantillons Les milieux contenus dans cette bo te de P tri deux compartiments sont utilis s pour l isolement s lectif de nombreuses bact ries Gram n gatives et Gram positives issues de tous les types d chantillons cliniques voir aussi CARACTERISTIQUES DES PERFORMANCES ET LIMITES DE LA PROCEDURE Mode op ratoire du test Strier les chantillons sans attendre d s leur arriv e au laboratoire La m thode de la striation des milieux en bo te de P tri sert essentiellement isoler des cultures pures partir d chantillons contenant une flore mixte Pour ensemencer la bo te de P tri deux compartiments avec des couvillonnages rouler l couvillon sur une petite portion de la Columbia CNA Agar with 5 Sheep Blood puis le rouler sur une petite por
6. ent sur l un des milieux contenus dans la BD Mac Conkey II Agar Columbia CNA Agar with 5 Sheep Blood Biplate il convient d inclure un milieu non s lectif pour l isolement primaire de la totalit des pathog nes susceptibles d tre pr sents dans l chantillon La BD Columbia Agar with 5 Sheep Blood est un milieu de mise en culture non s lectif fr quemment utilis qui peut tre employ cette fin Pour l isolement des microorganismes exigeants tels que Neisseria ou Haemophilus il convient d ensemencer galement une bo te de g lose au chocolat p ex une BD Chocolate Agar GC II Agar with IsoVitaleX avec l chantillon si la pr sence de ces microorganismes est pr sum e Il est certes possible de proc der divers tests diagnostiques directement dans ces milieux mais pour obtenir une identification compl te des isolats il convient d employer des tests biochimiques et si n cessaire des tests immunologiques faisant appel des cultures pures REFERENCES 1 MacConkey A T 1900 Note on a new medium for the growth and differentiation of the Bacillus coli communis and the Bacillus typhi abdominalis The Lancet Part 11 20 2 MacConkey A 1905 Lactose fermenting bacteria in faeces J Hyg 5 333 379 3 Levine M and H W Schoenlein 1930 A compilation of culture media for the cultivation of microorganisms The Williams amp Wilkins Company Baltimore 4 MacFaddin J F 1985 Media for isolation cultivation iden
7. lement employ e dans l examen microbiologique des denr es alimentaires La MacConkey II Agar a t formul e en 1987 afin de mieux inhiber l essaimage des Proteus spp afin d obtenir une diff renciation plus nette des fermentants et non fermentants du lactose et pour stimuler la croissance des bact ries ent riques Dans la MacConkey II Agar des peptones apportent les l ments nutritifs Du cristal violet est incorpor pour inhiber les bact ries Gram positives en particulier les ent rocoques et les staphylocoques Les microorganismes ent riques sont diff renci s par l association du lactose et de l indicateur de pH au rouge neutre Les colonies sont incolores ou de couleur rose rouge suivant la capacit de l isolat fermenter le glucide En 1966 Ellner et al ont signal le d veloppement d une pr paration de g lose au sang d sign e sous l appellation Columbia Agar Ce milieu qui favorise l apparition de colonies de plus grande taille permet une croissance plus luxuriante que les bases de g lose au sang comparables Il est utilis dans les environnements qui n cessitent des milieux contenant du sang et des pr parations s lectives Ellner et al ont d couvert qu un milieu contenant 10 mg de colistine et 15 mg d acide nalidixique par litre dans une base de g lose Columbia enrichie avec 5 de sang de mouton favorise la croissance de staphylocoques de streptocoques h molytiques et d ent rocoques tout e
8. ment Ne pas utiliser de bo te de P tri pr sentant des signes de contamination microbienne d coloration dessiccation ou fissure ou d autres signes de d t rioration Consulter le document MODE D EMPLOI GENERAL pour plus d informations concernant les proc dures de manipulation aseptique les risques biologiques et l limination des produits usag s STOCKAGE ET DUREE DE CONSERVATION D s r ception conserver les bo tes de P tri dans l obscurit entre 2 et 8 C dans leur emballage d origine jusqu au moment de leur utilisation Ne pas les congeler ni les surchauffer Les bo tes peuvent tre ensemenc es jusqu la date de p remption indiqu e voir l tiquette de l emballage et incub es pendant les dur es recommand es Des bo tes provenant d une pile ouverte de 10 bo tes sont utilisables pour une semaine lorsqu elles sont conserv es entre 2 et 8 C dans un endroit propre CONTROLE DE QUALITE PAR L UTILISATEUR Ensemencer des chantillons repr sentatifs avec les souches suivantes pour plus de d tails voir le document MODE D EMPLOI GENERAL Incuber en conditions a robie pendant 24 h entre 35 et 37 C MacConkey II Agar Columbia CNA Agar with 5 Sheep Blood Escherichia coli ATCC 25922 Croissance bonne a Inhibition compl te importante colonies de couleur rose a rouge avec des pr cipit s biliaires Proteus mirabilis Croissance bonne a Inhibition partielle a complete ATCC 12453 excellente colonies
9. n inhibant la croissance de Proteus Klebsiella et des Pseudomonas spp La Columbia Agar constitue un milieu de base tr s nutritif L ajout d agents antimicrobiens de colistine et d acide nalidixique rend le milieu s lectif pour les microorganismes Gram positifs en particulier les streptocoques et les staphylocoques Le sang de mouton permet de d tecter les r actions h molytiques L association de ces deux milieux sur une m me bo te de P tri divis e en deux compartiments est utilis e pour l isolement s lectif des bact ries Gram n gatives et Gram positives partir d chantillons cliniques REACTIFS BD Mac Conkey II Agar Columbia CNA Agar with 5 Sheep Blood Biplate Formules par litre d eau purifi e PA 254447 01 zia MacConkey Il Agar Columbia CNA Agar with 5 Sheep Blood Digestion pancr atique de g latine 17 0 g Peptones 20 0 g Digestion pancr atique de cas ine 1 5 Extrait de levure 3 5 Digestion peptique de tissu animal 1 5 Digestion trypsique de c ur de 3 0 b uf Lactose 10 0 F cule de ma s 1 0 Sels biliaires 1 5 Chlorure de sodium 5 0 Chlorure de sodium 5 0 Colistine 0 01 Rouge neutre 0 03 Acide nalidixique 0 015 Cristal violet 0 001 G lose 15 0 G lose 13 5 Sang de mouton d fibrin 5 pH7 1 0 2 pH 7 3 0 2 Ajust es et ou compl ment es en fonction des crit res de performances impos s PRECAUTIONS usage professionnel unique
10. tification maintenance of medical bacteria vol Williams amp Wilkins Baltimore 5 Baron E J L R Peterson and S M Finegold 1994 Bailey amp Scott s diagnostic microbiology 9th ed Mosby Year Book Inc St Louis 6 Farmer J J Ill 2003 Enterobacteriaceae introduction and identification In Murray P R E J Baron J H Jorgensen M A Pfaller and R H Yolken ed Manual of clinical microbiology 8 ed American Society for Microbiology Washington D C PA 254447 01 de 7 Downes F P and K Ito 2001 Compendium of methods for the microbiological examination of foods 4 edition American Public Health Association APHA Washington D C USA 8 Ellner P D C J Stoessel E Drakeford and F Vasi 1966 A new culture medium for medical bacteriology Am J Clin Pathol 45 502 504 9 Murray P R E J Baron J H Jorgensen M A Pfaller and R H Yolken ed 2003 Manual of clinical microbiology 8th ed American Society for Microbiology Washington D C 10 Thomson R B and J M Miller 2003 Specimen collection transport and processing bacteriology In Murray P R E J Baron J H Jorgensen M A Pfaller and R H Yolken ed Manual of clinical microbiology 8th ed American Society for Microbiology Washington D C Mazura Reetz G T Neblett and J M Galperin 1979 MacConkey Agar CO vs ambient incubation Abst Ann Mtg American Society for Microbiology C179 CONDI
11. tion de MacConkey II Agar Strier a partir des zones ensemenc es afin de cr er l isolement en prenant soin d utiliser une anse diff rente pour chacun des milieux Incuber l air ambiant pendant 24 48 h 35 2 C Il n est pas conseill d incuber la MacConkey Agar en atmosph re a robie enrichie en dioxyde de carbone Etant donn que des microorganismes Gram positifs et Gram n gatifs sont inhib s sur ces deux milieux il convient d inclure une bo te de P tri contenant une g lose au sang non s lective p ex une BD Columbia Agar with 5 Sheep Blood g e de 24 48 h et incub e 35 2 C dans une atmosph re a robie enrichie en dioxyde de carbone R sultats En g n ral la croissance obtenue sur BD Mac Conkey II Agar Columbia CNA Agar with 5 Sheep Blood Biplate est telle qu indiqu ci dessous Microorganismes Mac Conkey Il Agar Columbia CNA Agar with 5 Sheep Blood E coli Couleur rose a rose rouge Inhibition partielle a compl te colonies parfois cern es par une zone de pr cipitation biliaire Enterobacter Aspect muqueux colonies de Inhibition partielle a compl te couleur rose Klebsiella Aspect muqueux colonies de Inhibition partielle a compl te couleur rose Proteus Colonies incolores essaimage Inhibition partielle a compl te essaimage inhib inhib Salmonella Colonies incolores Inhibition partielle a compl te Shigella Colonies incolores Inhibition
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