Gélose MSRV (ISO 6579)
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1. G lose MSRV ISO 6579 DOMAINE D UTILISATION La g lose de Rappaport Vassiliadis semi solide modifi e MSRV est un milieu s lectif historiquement utilis pour l isolement des Salmonella dans les produits de chocolaterie et les autres produits alimentaires Elle est galement tr s utilis e dans le domaine de la sant animale chez les mammif res les oiseaux et dans l environnement des productions animales HISTORIQUE D velopp e par De Smedt et al la composition du milieu d rive de celle du bouillon de Rappaport Vassiliadis rendu semi solide par adjonction d une faible quantit d agar Sa s lectivit est r ajust e par abaissement du taux de chlorure de magn sium pr sent dans ce bouillon et ajout de novobiocine hauteur de 10 mg L La g lose MSRV ISO 6579 entre dans le protocole de recherche des salmonelles dans le cadre des pr l vements r alis s dans l environnement mati res f cales animales et chantillons environnementaux des fili res de production animale levages couvoirs ainsi que dans celui de la mise en vidence des salmonelles chez les oiseaux ufs couver pr l vements d organes et chez les mammif res PRINCIPES L efficacit bact riologique est fond e sur la capacit des salmonelles migrer de fa on s lective dans le milieu Les bact ries contaminantes sont inhib es par la forte concentration en chlorure de magn sium ainsi que par la pr sence de vert malachite2. La Novobiocine permet d inhiber la plupart des microorganismes Gram positif et d viter le d veloppement des Proteus Les Salmonella produisent un halo opaque t moin de la culture Le milieu est ensemenc directement partir d un milieu de pr enrichissement Eau pepton e tamponn e en simple ou double concentration pr alablement incub 37 2 C pendant 18 2 heures Si l chantillon tester est suspect de contenir un l ment inhibiteur de la croissance bact rienne ou lorsqu on op re un contr le de d sinfection nettoyage il pourra tre utile d ajouter au milieu de pr enrichissement des neutralisants de d sinfectants Le milieu ne convient pas pour les salmonelles immobiles Sa monella Gallinarum et Pullorum Si la pr sence de telles salmonelles est suspect e les cultures obtenues sur le milieu de pr enrichissement doivent tre repiqu es sur les milieux appropri s en suivant les proc dures adapt es 1 5 Biokar Diagnostics Rue des Quarante Mines ZAC de Ther Allonne B P 10245 F60002 Beauvais Cedex France T l 33 0 3 44 14 33 33 Fax 33 0 3 44 14 33 34 www biokar diagnostics fr PREPARATION Mettre en suspension 31 7 g de milieu d shydrat BK191 dans 1 litre d eau distill e ou d min ralis e Porter lentement le milieu bullition sous agitation constante et l y maintenir durant le temps n cessaire sa dissolution Une liqu faction p
3. OAC International 79 441 450 VOOGT N RAES M WANNET W J B HENKEN A M and van de GIESSEN A W 2001 Comparison of selective enrichment media for the detection of Sa monella in poultry faeces Letters in Applied Microbiology 32 89 92 XP CEN ISO TS 11133 2 V 08 104 2 Janvier 2004 Microbiologie des aliments Guide pour la pr paration et la production des milieux de culture Partie 2 Guide g n ral pour les essais de performance des milieux de culture NF EN ISO CEI 17025 X 50 061 Septembre 2005 4 tirage de D cembre 2006 Exigences g n rales concernant la comp tence des laboratoires d talonnages et d essais NF U 47 100 Juillet 2007 M thodes d analyse en sant animale Recherche par l isolement et identification de tout s rovar ou de s rovar s sp cifi s de salmonelles dans l environnement des productions animales NF U 47 101 Novembre 2007 M thodes d analyse en sant animale Isolement et identification de tout s rovar ou de s rovar s sp cifi s de salmonelles chez les oiseaux NF U 47 102 Janvier 2008 M thodes d analyse en sant animale Isolement et identification de tout s rovar ou de s rovar s sp cifi s de salmonelles chez les mammif res NF EN ISO 6579 A1 V 08 013 A1 Janvier 2008 Microbiologie des aliments M thode horizontale pour la recherche des Salmonella spp Amendement 1 Annexe D recherche de Salmonella spp dans les mati res f cales des animaux et d
4. ans des chantillons au stade de la production primaire 4 5 Biokar Diagnostics Rue des Quarante Mines ZAC de Ther Allonne B P 10245 F60002 Beauvais Cedex France T l 33 0 3 44 14 33 33 Fax 33 0 3 44 14 33 34 www biokar diagnostics fr SUPPORT PHOTO R f rences BK191HA BM12708 Utilisation D tection des Sa monelles mobiles A gauche Salmonella Typhimurium mobile R action positive A droite Enterobacteriaceae immobile R action n gative G lose MSRV R f BM12708 Incubation 24 heures 41 5 C Caract ristiques Salmonella culture blanch tre un halo opaque centr au point d inoculation Autres Enterobacteriaceae si croissance pas de halo opaque une croissance centr e uniquement sur le point d inoculation Les mentions port es sur les tiquettes sont pr dominantes sur les formules ou les instructions d crites dans ce document Les informations et les sp cifications contenues dans cette fiche technique ont t tablies la date du 2009 02 10 Elles sont susceptibles d tre modifi es tout moment sans pr avis Code document BK191 F 2007 03 6 5 5 Biokar Diagnostics Rue des Quarante Mines ZAC de Ther Allonne B P 10245 F60002 Beauvais Cedex France T l 33 0 3 44 14 33 33 Fax 33 0 3 44 14 33 34 i
5. artielle de lagar entra nera in vitablement une alt ration significative de la consistance du gel du milieu solidifi apr s bullition et refroidissement Ne pas autoclaver Si la pr sentation pr te liqu fier BM127 est utilis e faire fondre la g lose pendant le minimum de temps n cessaire sa reliqu faction totale Ne pas r p ter cette op ration plus d une fois MODE D EMPLOI Refroidir et maintenir le milieu 44 47 C Couler en bo tes de Petri st riles Laisser solidifier sur une surface froide Ne pas s cher les bo tes ainsi pr par es Ensemencer trois gouttes environ 0 1 mL de la culture provenant d un milieu de pr enrichissement au centre d une bo te de milieu Incuber 41 5 1 0 C pendant 24 3 heures sans retourner les bo tes Au constat de l absence de migration en 24 heures l incubation sera prolong e de 24 3 heures suppl mentaires La temp rature d incubation ne devra jamais tre sup rieure 43 C LECTURE Le d veloppement d un halo opaque blanch tre centr sur le point d ensemencement indique pr somptivement la pr sence de Salmonella Des subcultures peuvent tre r alis es en pr levant une fraction de culture sur le bord externe du halo pour en confirmer la puret et effectuer les tests biochimiques et s rologiques compl mentaires FORMULE TYPE du milieu complet pouvant tre ajust e de fa on obtenir des performances optimales Pour 1 lit
6. gration culturale inhib e Enterococcus faecalis ATCC 29212 Migration culturale inhib e STOCKAGE CONSERVATION Milieu d shydrat 2 25 C La date de p remption est mentionn e sur l tiquette Milieu pr par en bo tes 15 jours 2 8 C l abri de la lumi re titre indicatif Milieu pr t liqu fier en flacons __Stocker entre 2 et 8 C l abri de la lumi re La date de p remption est mentionn e sur l tiquette PRESENTATION Code Milieu d shydrat Flacon de 500 g BK191HA Milieu pr t liqu fier en flacons Pack de 10 flacons de 200 mL BM12708 3 5 Biokar Diagnostics Rue des Quarante Mines ZAC de Ther Allonne B P 10245 F60002 Beauvais Cedex France T l 33 0 3 44 14 33 33 Fax 33 0 3 44 14 33 34 www biokar diagnostics fr REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES De SMEDT J M BOLDERDUK R F RAPPOLD H and LAUTENSCHLAEGER D 1986 Rapid Salmonella detection in foods by motility enrichment on a Modified Semi Solid Rappaport Vassiliadis medium Journal of Food Protection 49 510 514 De SMEDT J M and BOLDERDIJK R F 1987 Dynamics of Salmonella isolation with Modified Semi Solid Rappaport Vassiliadis medium Journal of Food Protection 50 658 661 BOLDERDUK R F and MILAS J E 1996 Salmonella detection in dried milk products by motility enrichment on modified semi solid Rappaport Vassiliadis medium collaborative study Journal of A
7. re de milieu Digestat enzymatique de tissus animaux et v g taux 4 59 g Hydrolysat acide de cas ine 4 59 g Chlorure de sodium 7 34 g Phosphate monopotassique 1 479 Chlorure de magn sium anhydre ssssssssssreneeenneessrrrrsserrnrnsenee 10 93 g Vert malachite oxalate sin anti 37 0 mg NOVODIOCIN E mnanaa T a 10 0 mg Agar agar bact riblOgiQue uireseneenteneiemtnetes 2 709 pH du milieu pr t l emploi 25 C 5 2 5 1 5 4 CONTR LE QUALITE 2 5 Biokar Diagnostics Rue des Quarante Mines ZAC de Ther Allonne B P 10245 F60002 Beauvais Cedex France T l 33 0 3 44 14 33 33 Fax 33 0 3 44 14 33 34 www biokar diagnostics fr Milieu d shydrat poudre bleue fluide et homog ne Milieu pr par complet g lose bleue semi solide R ponse culturale typique apr s 24 heures d incubation 41 5 1 0 Microorganismes Caract ristiques culturales Culture blanch tre opaque de diam tre gt 30mm Salmonella Typhimurium ATCC 14028 a centr e au point d inoculation Salmonella Typhimurium ATCC 14028 Escherichia coli ATCC 8739 Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 Culture blanch tre opaque de diam tre gt 30mm centr e au point inoculation Escherichia coli ATCC 25922 Mi
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