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Mode d`emploi F Nume.Coliforme (Page 1)
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1. Official Methods 986 33 D nombrement des coliformes dans le lait m thode sur film sec r hydratable et 989 10 D nombrement des coliformes et des bact ries a robies dans les produits laitiers m thode sur film sec r hydratable Incuber les tests Petrifilm CC 24 h 2 h 32 C 1 C AOAC Official Methods 991 14 D nombrement des coliformes et des Escherichia coli dans tout type d aliments m thode sur film sec r hydratable Incuber les tests Petrifilm CC 24 h 2 h 35 C 1 C M thode valid e par l AFNOR Coliformes totaux par comparaison la norme ISO 4832 3M 01 2 09 89 A et par comparaison la norme ISO 4831 3M 01 2 09 89 B Pour tout produit sauf les coquillages crus Incuber les tests Petrifilm CC 24 h 2 h 30 C CSCE FCU FOE EC Comme il est mentionn dans les normes ISO 4831 et ISO 4832 ces temp ratures doivent faire l objet d un accord entre les parties et tre mentionn es dans le certificat d analyse Coliformes thermotol rants par comparaison la norme NF V08 060 VRBL incubation 44 C 1 C 3M 01 2 09 89 C Tout produit Incuber les tests Petrifilm CC 24 h 2 h 44 C 1 C Interpr tation 1 Le d nombrement l aide des tests Petrifilm CC peut se faire sur un compteur de colonies standard ou au moyen d une autre source de lumi re intense Ne pas compter les colonies sur le pourtour en mousse la s lectivit du milieu y est modif
2. ce produit contacter un repr sentant officiel des produits de microbiologie 3M Conforme la notice contenue dans les emballages r f 38 9017 7298 8 Dossier Qualit 3M Petrifilm RESPONSABILITE DE L UTILISATEUR Il incombe l utilisateur quand il s lectionne une m thode d analyse d valuer un nombre suffisant d chantillons d aliments vari s pr sentant des contaminations microbiennes diverses pour s assurer que la m thode correspond ses crit res Il incombe galement l utilisateur de d terminer si une m thode d analyse et ses r sultats r pondent aux exigences de ses clients ou fournisseurs L utilisateur doit former son personnel de mani re appropri e aux techniques d analyse par exemple le Guide des Bonnes Pratiques de Laboratoires U S Food and Drug Administration Title 21 Part 58 of the Code of Federal Regulations ou la norme ISO 17025 GARANTIE LIMIT E SAUF INTERDICTION CONTRAIRE PAR LA LOI 3M RENONCE TOUTE AUTRE GARANTIE EXPLICITE O IMPLICITE Y COMPRIS MAIS SANS S Y LIMITER TOUTE GARANTIE DE QUALIT COMMERCIALE OU D ADAPTATION UNE UTILISATION PARTICULI RE Si un test 3M Petrifilm s av re d fectueux 3M ou son distributeur agr s engage remplacer ou selon son choix rembourser le prix d achat du produit Il s agit de vos recours exclusifs Vous devez notifier 3M dans les plus brefs d lais de toute non conformit susp
3. 832 d termination du nombre de coliformes par comptage des colonies d finit les coliformes par la taille de la colonie et la production d acide sur milieu VRBL Violet Red Bile Lactose Sur les tests Petrifilm CC ces coliformes forment des colonies caract ristiques rouges avec ou sans bulles de gaz autour de la colonie La m thode ISO 4831 d crit une num ration des coliformes par la technique du Nombre le Plus Probable NPP et d finit les coliformes par leur capacit se d velopper et produire du gaz par fermentation du lactose dans un bouillon s lectif Sur test Petrifilm CC ces coliformes forment des colonies caract ristiques rouges avec une ou plusieurs bulles de gaz autour de la colonie L AFNOR a valid l emploi des tests Petrifilm CC par comparaison aux m thodes ISO 4831 et ISO 4832 pour le d nombrement des coliformes totaux L AFNOR a galement valid l emploi des tests Petrifilm CC pour le d nombrement des coliformes Date Version thermotol rants par comparaison la norme NF VO8 060 MISES EN GARDE 3M n a pas document l utilisation des tests Petrifiim CC dans les secteurs autres que l industrie alimentaire et les produits laitiers 3M n a par exemple pas document son utilisation pour l analyse de l eau des produits pharmaceutiques ou des cosm tiques Les tests Petrifilm CC n ont pas t valu s sur tous les aliments tous les proc d s agro alimentaires et to
4. Notice d utilisation 3M Petrifilm Test pour la num ration des coliformes nh DESCRIPTION Les tests 3M Petrifilm pour la num ration des Coliformes CC contiennent un milieu s lectif d riv du VRB compos de sels biliaires de cristal violet et de rouge neutre un agent g lifiant soluble dans l eau froide et un indicateur au tetrazolium facilitant la lecture Le test Petrifilm CC est utilis pour le d nombrement de bact ries coliformes dans les aliments et les produits laitiers Les tests Petrifilm CC sont fabriqu s dans un site certifi ISO International Standards Organization 9001 Le test Petrifilm CC convient la fois pour le d nombrement des coliformes totaux pouvant se d velopper entre 30 C et 37 C et des coliformes thermotol rants pouvant se d velopper entre 41 C et 45 C L AOAC INTERNATIONAL et la FDA Food and Drug Administration BAM Bacteriological Analytical Manual d finissent les coliformes comme des b tonnets Gram n gatif produisant de l acide et du gaz par fermentation m tabolique du lactose Les colonies de coliformes se d veloppant sur test Petrifilm CC produisent de l acide qui assombrit la couleur du gel La pr sence d une ou plusieurs bulles de gaz autour d une colonie indique la pr sence de coliformes confirm s LISO d finit les coliformes par leur aptitude se multiplier dans des milieux s lectifs selon des m thodes sp cifiques La m thode ISO 4
5. ect e d un produit avant de le renvoyer 3M Veuillez appeler le Service client le 1 800 328 1671 aux tats Unis ou votre repr sentant 3M en produits de microbiologie pour obtenir une autorisation de renvoi LIMITATION DE RESPONSABILITE DE 3M SAUF INTERDICTION CONTRAIRE PAR LA LOI 3M NE POURRA TRE TENU RESPONSABLE DE TOUTE PERTE O DOMMAGE DIRECT INDIRECT PARTICULIER OU ACCIDENTEL Y COMPRIS ET SANS S Y LIMITER DE LA PERTE DE B N FICES Sauf interdiction par la loi la responsabilit de 3M quel que soit le principe juridique invoqu ne pourra en aucun cas tre sup rieure au prix des tests 3M Petrifilm cens s tre d fectueux Le client peut jouir de droits suppl mentaires et doit se renseigner dans le pays d achat STOCKAGE ET DESTRUCTION Stocker r frig r es ou congel es les poches non ouvertes de tests Petrifilm CC au dessous de 8 C 46 F Dans les zones de forte humidit o la condensation peut poser probl me mettre les poches temp rature ambiante avant leur ouverture Apr s ouverture replacer les tests Petrifilm non utilis s dans leur poche Ne pas r frig rer les poches ouvertes pour viter une exposition l humidit Resceller les poches et les stocker dans un endroit frais et sec un mois au maximum L exposition du test Petrifilm une temp rature et ou une humidit relative sup rieures 25 C 77 F et 50 RH peut alt rer ses performances Ne pas utiliser les test
6. er l chantillon 3 Pour obtenir des conditions de croissance optimales ajuster le pH de l chantillon dilu entre 6 6 et 7 2 l aide de NaOH IN pour les produits acides Ajuster le pH des produits alcalins l aide de HCI IN Utilisation des tests 3M Petrifilm CC 1 Placer le test Petrifilm CC sur une surface de travail plane voir figure 2 Soulever le film sup rieur et d poser 1 ml d chantillon ou d chantillon dilu au centre du film inf rieur voir figure b 3 Recouvrir d licatement l chantillon avec le film sup rieur pour viter de pi ger des bulles d air voir figure c 4 Placer le diffuseur c t lisse vers le bas au centre du test Petrifilm voir figure d 5 R partir l chantillon uniform ment en exer ant une l g re pression au centre du diffuseur en plastique R partir l inoculum sur la totalit de la zone de croissance avant que le gel ne se forme Ne pas faire glisser le diffuseur sur le film 6 Retirer le diffuseur et laisser reposer pendant au moins une minute pour permettre la solidification du gel Incubation 1 Incuber les tests 3M Petrifilm l horizontale le film transparent vers le haut sans empiler plus de 20 unit s L incubateur doit ventuellement tre humidifi 2 Les conditions d incubation ainsi que l interpr tation des tests Petrifilm CC varient selon les m thodes suivies Par exemple AOAC
7. i e Ne pas compter les bulles artefacts ventuellement pr sentes 2 L interpr tation de colonies de coliformes sur le test Petrifilm CC varie selon la m thode Par exemple AOAC Official Methods les colonies de coliformes sont rouges et troitement associ es une distance de l ordre du diam tre d une colonie des bulles de gaz voir figure e OU Par comparaison la norme ISO 4831 m thode NPP m thode valid e par l AFNOR les colonies de coliformes sont rouges et troitement associ es une distance de l ordre du diam tre d une colonie des bulles de gaz voir figure e Note une forte proportion de bacilles Gram n gatif ne produisant pas de gaz peut n cessiter une dilution D partement Microbiologie Laboratoires 3M Sant Boulevard de l Oise 95029 Cergy Pontoise T l 01 30 31 85 77 Fax 01 30 31 85 78 Internet www 3m com fr sante plus pouss e pour mettre en vidence les colonies de coliformes qui produisent du gaz dans la plage de d nombrement recommand e Par comparaison aux normes ISO 4832 et NF VO8 060 m thode VRBL m thode valid e par l AFNOR d nombrer toutes les colonies rouges avec OU Sans gaz 3 La zone de croissance du test Petrifilm CC est de 20 cm environ Des estimations sont possibles sur les tests Petrifiim CC contenant plus de 150 colonies ces estimations sont hors validation AFNOR en comptant le nombre de colonies dans un o
8. ration de la suspension m re et des dilutions d cimales 3 ISO 8261 FIL122 2001 Lait et produits laitiers Lignes directrices g n rales pour la pr paration des chantillons pour essai de la suspension m re et des dilutions d cimales en vue de l examen microbiologique
9. s Petrifilm CC pr sentant une d coloration brune La date limite d utiisation et le num ro de lot figurent sur chaque poche de test Petrifilm CC ainsi que sur chaque test Petrifilm CC Apr s usage chaque test Petrifilm CC peut contenir des bact ries viables Le d truire selon les normes en vigueur EXPLICATION DES SYMBOLES 2000 10 AZ e Le mot LOT dans une case et le sablier sont les symboles qui repr sentent le num ro du lot et la date d expiration Le sablier est suivi de l ann e et du mois qui repr sentent la date d expiration ann e et mois 10 La ligne compl te repr sente le num ro du lot 2000 10 AZ e Attention consulter la notice d utilisation e Stocker en dessous de la temp rature indiqu e MODE D EMPLOI Pr paration de l chantillon 1 Utiliser les diluants st riles appropri s tampon phosphate Butterfield eau pepton e 0 1 peptone sel eau pepton e tamponn e solution sal e 0 85 0 90 poids volume bouillon de Letheen sans bisulfite ou eau distill e Ne pas utiliser de tampons contenant du citrate du bisulfite ou du thiosulfate avec les tests Petrifilm ils peuvent inhiber la croissance des bact ries Si un tampon au citrate est employ le remplacer par un tampon phosphate Butterfield chauff entre 40 et 45 C M thode valid e AFNOR Seuls des diluants cit s dans les normes ISO sont autoris s 2 M langer ou homog n is
10. u plusieurs carr s repr sentatifs et en d terminant le nombre moyen par carr Multiplier ce nombre moyen par 20 pour d terminer le nombre estim par test Petrifilm CC voir figure f 4 Les tests Petrifilm CC incomptables ont au moins l une des caract ristiques suivantes grand nombre de petites colonies grand nombre de bulles de gaz et assombrissement de la couleur du gel Si l une ou plusieurs de ces caract ristiques est pr sente 1l convient de proc der d autres dilutions pour obtenir un d nombrement plus pr cis 5 Les colonies peuvent tre isol es pour effectuer une identification Soulever le film sup rieur et pr lever la colonie du gel voir figure g 6 Apr s incubation les tests Petrifilm CC peuvent tre stock s congel s une temp rature inf rieure ou gale 15 C S F durant au plus une semaine pour permettre une lecture diff r e Pour toute information compl mentaire se reporter au Guide d interpr tation Pour toute question sur des applications ou proc dures sp cifiques veuillez prendre contact avec le repr sentant officiel des produits 3M microbiologie le plus proche R f rences 1 FDA 1998 Bacteriological Analytical Manual Sth ed Appendix 3 64 2 ISO 6887 1 1999 Microbiologie des aliments Pr paration des chantillons de la suspension m re et des dilutions d cimales en vue de l examen microbiologique Partie 1 R gles g n rales pour la pr pa
11. us les protocoles d analyse possibles ni sur toutes les souches de bact ries coliformes et d autres bact ries non coliformes La validation de la m thode par des organisations priv es ou publiques AOAC INTERNATIONAL ou AFNOR par exemple ne garantit pas la performance des tests Petrifilm CC sur un aliment un produit laitier ou un proc d particulier Deux milieux de culture ne recouvreront jamais les m mes souches et ne d nombreront jamais une souche particuli re de mani re strictement identique En outre des facteurs ext rieurs tels que les m thodes de pr l vement les protocoles d analyse le temps de pr paration et la manipulation par exemple la variabilit de la temp rature par rapport la consigne la tol rance par rapport cette consigne ainsi que les performances du mat riel peuvent avoir une incidence sur le recouvrement et le d nombrement L chantillon d aliment lui m me peut avoir une influence sur les r sultats par exemple les aliments forte teneur en sucre risquent d augmenter le potentiel de croissance d Enterobacteriaceae non coliformes productrices de gaz Ne pas utiliser les tests Petrifilm CC pour faire des diagnostics sur l homme ou l animal Comme pour tout milieu de culture les r sultats des tests Petrifilm CC ne garantissent pas la qualit des produits ou proc d s valu s Pour obtenir des informations sur l valuation de la performance de
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