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Manuel d`entretien et de maintenance des appareils de laboratoire

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1. Conducti C ti turell C tion forc MAS AR RMR RM NE NN AN SA NSA NK ON xs SS AS NN ESN AK N SS NN NN NA ANC KK ae NA NNN NX NX SEN NN NX NN SN US NAN O SA WN NNO AN A LAS NN KV NY NN YN SR NN NS NN NN NS SP NN NANA NN SK XX NN NX GK SUR NN NN NV NN NX NY SN NS NN AS ed x 4 NX Ne Re AA AN NR O ANON RON NN i ANAS ONSEN N S TEEN S4 SONS WY WAL SN KA VN NS OSS NN KA S N N SK REX NSU VX IK NUN ANA NN NA x NS_NN N yA NN XV NOX NNONN ON NON SS Q Q ONE ORS a a a ITR T i N NA HS Sa SNS ay LT NN ya LUN NS SK k 7 NX IS NN KA NN N N N KA VOX SN x KA Vs I SN AR I we NX No amp S N SR N SST SRN SA x gt NA N ALSS gs R NNI x SAN NA oo SxS A gt N NA N NS NX CS DA T g NN a a S I KR N eel Pa e GR CS YQ lt gt Q Q N Sk Ne 0 Dre G N A a SP SAS LAN A N NN Na N N N x N A Ve SD OX xa S N N NX N N NAS NN N N SA LYS NN a RE D X ND amp N L NN SK N X S x x N a Sug TAN DA NN S ie NUS NL NS ON i SS de NAS LRU S N XX XX ANA NNO AN XX x NX N NN WK AAA Magy LA VX NN NS Se NN NX SN YN AY ne m X NSN lt LA UN RS VE SN N NY NS NX SE Ra
2. N SUNK SS RQ NN SK ON RUN NS AS KA Ke NN X N x x SN S PNR SA NS NINE NDS Ve SA AN NX NE SS x S S N NE EN NSIS NSS AR LA ONAL WN NN NX OX NX N N Ns N NS SaS S Ni NAN NN FA KR NAN KR NNO AE ER S Ww NX AN MA ON NS AA NN NN NNN Se NX Wee NR OR PART ARN KX lt S x ee a 4 N x N N N X N N 100 COMMANDES DE UINCUBATEUR Le sch ma de la figure 40 illustre le type de commandes que l on trouve normalement sur les mod les r cents d incubateurs 1 Un interrupteur principal pour mettre l appareil sur Marche ou sur Arr t Certains fabricants ajoutent un coupe circuit de protection L interrupteur a deux positions en position Marche ON ou I l incubateur est sous tension En position Arr t OFF ou O l incubateur est teint 2 Un cran sur lequel s affichent les param tres s lectionn s Par exemple temp rature s lectionn e consignes d alarme temp rature maximale et minimale 3 Deux touches de commande sont normalement identifi es par Menu et S lection ou Set Elles servent programmer l incubateur et r gler les consignes d alarme 4 Deux touches de r glage de la temp rature Elles s utilisent conjointement avec les touches de commande 5 Une s rie de lampes t moins DEL qui indiquent l tat de fonctionnement Si le syst me de chauffage est en fonction la DEL Chauffage est allum e Si l incubateu
3. coefficient d absorbance de la mol cule litres moles cm longueur du trajet parcouru par la lumi re dans l chantillon trajet optique c concentration de l chantillon moles litre L absorbance A est li e a la transmittance T par la formule PT excx 1 A logo Oi Og t Le diagramme ci dessous explique le ph nom ne d absorbance Figure 28 Ph nom ne d absorbance Lumi re Lumi re transmise incidente lo It lo x 10 207 NN Solution absorbante we de concentration c a moles litre pe Trajet optique espace parcouru par la lumi re dans la solution MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE Les graphes ci dessous montrent comment l absorbance A et la transmittance T varient en fonction de la concentration c selon la loi de Beer Lambert Repr sentation graphique de la transmittance Transmittance Concentration 7 A Log Repr sentation graphique de l absorbance w 2 gt un 2 lt Concentration A e xIxc On peut conclure que si la concentration d une substance augmente la transmittance diminue et si la concentration d une substance augmente l absorbance augmente La lin arit de la relation de Beer Lambert est affect e par les conditions suivantes 1 D placement d
4. d L OIML accepte les valeurs suivantes par convention pour les balances de laboratoire Ultramicroanalyse d 0 Microanalyse Semi microanalyse d 0 01 mg Macroanalyse d 0 Pr cision d gt 1 ee SS 25 CHAPITRE 4 BALANCES 26 Commandes des balances lectroniques La figure 15 montre les commandes couramment rencontr es sur une balance lectronique moderne II faut souligner les points suivants 1 De nombreuses fonctions sont int gr es dans l appareil 2 Diverses unit s de mesure peuvent tre s lectionn es 3 Il est possible de conna tre la date et l heure de la mesure 4 Les proc dures peuvent tre document es et imprim es 5 Il est possible de choisir la langue CONDITIONS REQUISES POUR L INSTALLATION Pour une installation et une utilisation correctes de la balance les conditions suivantes doivent tre remplies 1 Un environnement sans courants d air ni changements brusques de temp rature et sans poussi re 2 Une table ou une paillasse parfaitement horizontale Une plate forme poss dant une grande inertie et isol e des structures avoisinantes est id ale pour r duire l effet des vibrations produites par certains appareils tels que centrifugeuses et r frig rateurs Lemplacement doit tre de taille suffisante pour recevoir la balance et tous les accessoires n cessaires pendant les pes es De m me la place n cessaire pour les cables tels que raccords cables d alimentation
5. CONDITIONS REQUISES POUR L INSTALLATION Pour une utilisation correcte de l tuve les conditions suivantes doivent tre remplies 1 Un plan de travail vaste robuste et de niveau 2 Un espace libre d au moins 5 cm autour de l tuve et suffisamment de place pour disposer les objets st riliser ou s cher 3 Une prise de courant reli e la terre et suffisante pour alimenter l tuve Elle doit tre en bon tat et r pondre aux normes lectriques nationales ou internationales en vigueur dans le laboratoire et ne doit pas tre situ e plus d un m tre de l appareil Les tuves sont classiquement aliment es en 110 V ou 220 V 60 Hz 4 V rifier que le circuit lectrique poss de les dispositifs de protection n cessaires pour garantir une alimentation correcte UTILISATION DE VETUVE Pour un fonctionnement correct de l tuve il faut observer un certain nombre de pr cautions dont les plus importantes sont 1 Ne pas utiliser de mati res inflammables ou explosives dans l tuve 2 Eviterles projections de solutions acides ou la p n tration de vapeurs corrosives dans l tuve afin d emp cher la corrosion des surfaces int rieures et des tag res 3 Utiliser des quipements de protection individuelle gants isolants lunettes de s curit et se servir de pinces pour introduire des substances ou objets dans l tuve ou les en retirer Utilisation en routine En g n ral les proc dures d utilis
6. END pour achever le d placement du piston et red marrer le cycle Appeler le service technique du fabricant si le d faut persiste Le diluteur n aspire pas et ne d livre pas de liquide Les tuyaux du syst me hydraulique sont d fectueux V rifier que les tuyaux seringues et raccords ne sont ou bouch s pas bouch s Les nettoyer ou les remplacer Le raccordement des tuyaux et des seringues est V rifier que les tuyaux joints raccords et seringues incorrect sont bien ajust s Le syst me de propulsion est d fectueux Appeler le service technique du fabricant Les valves sont d fectueuses Enlever les valves V rifier que leurs joints sont propres et les remettre en place Si n cessaire remplacer par une valve quivalente ll y a de l air dans le circuit de liquide V rifier que les tuyaux d alimentation sont compl tement immerg s dans les r cipients qui contiennent les r actifs Le diluteur ne donne pas de r sultats pr cis V rifier que les diff rents raccords sont bien ajust s V rifier que les seringues sont correctement install es et qu il n y a pas de fuites Tester le circuit pour v rifier qu il n y a pas de fuites au niveau des tuyaux et des valves R duire la vitesse de fonctionnement de la seringue pour liminer les probl mes de cavitation Le tuyau de distribution n est pas correctement choisi V rifier le calibre recommand pour le tuyau et ses par rapport au volume
7. b Nettoyer le joint et la rainure avec de l alcool de fa on ce qu aucune mati re trang re ne puisse nuire l tanch it La surface du joint doit tre lisse et propre c Appliquer le lubrifiant recommand par le fabricant sur l ensemble du joint jusqu ce qu il soit enti rement prot g De nombreux fabricants d autoclaves utilisent un lubrifiant au graphite r sistant aux hautes temp ratures d Remettre le joint en place Dans les autoclaves cuve rectangulaire on commence par glisser le joint dans sa rainure au milieu d un des c t s puis on proc de de proche en proche jusqu ce que le joint soit enti rement ins r dans sa rainure sur ce c t On recommence de m me pour les trois autres c t s Dans les autoclaves cuve ronde on introduit le joint dans la rainure en commengant par le haut puis on proc de de proche en proche sans tirer sur le joint jusqu ce qu il soit enti rement ins r dans sa rainure On remet alors en place les l ments qui le maintiennent en place 4 V rifier que les joints des soupapes de s curit sont en bon tat 5 Nettoyer les pointes de l enregistreur avec de l eau ou de l alcool et compl ter les niveaux d encre En g n ral la pression est enregistr e l encre rouge et la temp rature l encre verte 6 Nettoyer l int rieur du g n rateur de vapeur pour les autoclaves qui en poss dent un Proc der comme suit a D brancher l appareil
8. 7 D faire les vis qui fixent le panneau sup rieur au socle de l appareil V rifier qu elles sont sans rapport avec les connexions aux r sistances chauffantes 8 Mettre la nouvelle surface en c ramique en place 9 Observer comment sont dispos s les l ments de s curit de la plaque cass e Les enlever et disposer les l ments chauffants et isolants sous la nouvelle plaque en conservant l alignement et le positionnement d origine Remettre les l ments de s curit 10 Reconnecter les l ments en proc dant dans l ordre inverse MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE Remplacement des fusibles 1 Mettre l interrupteur principal sur OFF et d brancher le Fr quence effectuer si n cessaire cable d alimentation Si l agitateur chauffant est branch et que l interrupteur 2 Enlever le couvercle de la bo te fusibles avec un principal est sur ON mais que la plaque ne chauffe pas il se tournevis bout plat peut qu un fusible doive tre chang La proc dure est la 3 Remplacer le fusible par un nouveau ayant les m mes suivante caract ristiques que le fusible d origine 4 Remettre le couvercle de la bo te fusibles GUIDE DE D PANNAGE PROBL ME O OO CAUSE PROBABLE SOLUTION Il n y a pas de courant lectrique Ily a un d faut au niveau du fusible de protection Remplacer le fusible Ily a un d faut dans le raccordement lectrique V rifier l tat du raccordeme
9. Touche de s lection de l chelle de temp rature RESET i Touche d annulation de la s lection Mode agitation Marche Arr t Affichage de la vitesse s lectionn e vitesse r elle Touches de r glage de la vitesse d agitation 1 Ces moteurs ont une puissance d environ 1 20 ch ils se caract risent par un faible couple et sont peu co teux 127 CHA 128 PITRE 17 AGITATEUR CHAUFFANT Le panneau de contr le poss de des touches de r glage de la temp rature et de la vitesse d agitation Ces fonctions peuvent tre utilis es de fa on ind pendante ou combin e Pour s lectionner les param tres on appuie sur la touche correspondante et on effectue le r glage de la temp rature ou de la vitesse selon le cas CONDITIONS REQUISES POUR L INSTALLATION L agitateur chauffant doit tre branch sur une prise de courant en bon tat et reli e la terre L alimentation lectrique doit tre compatible avec l appareil et conforme aux normes lectriques nationales et internationales Les agitateurs chauffants fonctionnent en g n ral sous 230 V 50 60 Hz ou 120 V 60 Hz Pour fonctionner normalement l agitateur chauffant doit tre pos sur une surface horizontale suffisamment robuste pour supporter le poids de l agitateur plus celui des r cipients et de leur contenu UTILISATION DE VAGITATEUR CHAUFFANT Pr cautions 1 Toujours brancher l agitateur chauffant sur une prise de courant en
10. l air chaud de circuler librement autour des objets s cher ou a st riliser Elle est isol e du caisson ext rieur par un mat riau isolant qui maintient une temp rature lev e l int rieur et retarde le transfert de chaleur vers l ext rieur Le caisson ext rieur est r alis en acier lamin recouvert d un film protecteur de peinture lectrostatique La chaleur est produite par une s rie de r sistances lectriques qui transf rent de l nergie thermique la cuve Ces r sistances sont situ es dans le bas de l tuve et la chaleur est transf r e et distribu e par convection naturelle ou par convection forc e dans les tuves avec ventilateur int rieur CHAPITRE 13 TUVE 94 La puissance nergie par unit de temps dissip e par une r sistance lectrique peut se calculer par la formule P I R dans laquelle intensit du courant lectrique en amperes A R r sistance lectrique en ohms Q Sachant que l nergie ne se cr e nine se perd mais se transforme il est possible de calculer l nergie thermique quivalente aux l ments r sistifs Dans le cas d un fil r sistif la quantit de chaleur q dissip e peut se calculer par la formule Rank dans laquelle R r sistance du fil r sistif intensit du courant lectrique r rayon ext rieur du fil r sistif L longueur du fil r sistif q chaleur g n r e par unit de volume La r sistance peut se calcu
11. Lema O Practical Laboratory Manual for Health Centres in Eastern Africa AMREF 1994 Cheesborough Monica District Laboratory Practice in Tropical Countries Part 1 Tropical Health Technology UK 2005 Class I Laminar Flow Biohazard Cabinetry NSF International Standard NSF 49 1992 Gordon J Sonntag R Fundamentals of Classical Thermodynamics New York John Wiley and Sons 2 Editions 1976 Guidelines for calibration in laboratories Drinking water Inspectorate by LGC Teddington TLTD December 2000 Fitzgerald A Kingsley C Kusko A Electric Machinery Mc Graw Hill Co 1971 HealthCare Product Comparison System ECRI 2002 Holman J Heat Transfer New York Mc Graw Hill Co 1972 Johns Warren L Selection of basic laboratory equipment for laboratories with limited resources World Health Organization 2000 Lobkowicz F Melissinos A Physics for Scientist and Engineers vol 2 Philadelphia W B Saunders Company 1975 Maintenance and repair of laboratory equipment hospital and diagnostic by image Geneva WHO 1996 Manual for Basic Techniques for a Health Laboratory WHO Geneva 2 Edition 2003 Manual on the management maintenance and use of blood cold chain equipment WHO Geneva 2005 Primary Containment for Biohazards Selection Installation and Use of Biological Safety Cabinets Washington DC U S Department of Health and Human Services Center for Disease Control and Prevention and National Institute
12. attirer les particules de peinture L objet recouvert de particules de peinture est ensuite plac dans un four lectrique dont la chaleur fait fondre les particules qui adh rent alors fortement l objet Plateau diffuseur Aussi appel grille de diffusion thermique Dispositif plac au fond du bain marie comme support des r cipients d pos s dans la cuve Il permet galement aux courants de convection thermique produits dans le liquide de la cuve de circuler de haut en bas et de bas en haut ce qui maintient une temp rature homog ne la valeur s lectionn e par l op rateur En g n ral le plateau diffuseur est en acier inoxydable R sistance Opposition qu exerce un mat riau ou un circuit lectrique au passage du courant lectrique Cest la propri t d un circuit qui transforme l nergie lectrique en chaleur en s opposant au passage du courant La r sistance R d un corps de section uniforme par exemple un fil m tallique est directement proportionnelle sa longueur I et inversement proportionnelle sa section a La r sistance se calcule au moyen de la formule TE a dans laquelle k constante qui d pend des unit s employ es longueur du conducteur a aire de la section du conducteur ohm 0 est l unit classique de r sistance lectrique 1 ohm est gal 1 volt par amp re R sistance immersion Aussi appel e thermoplongeur R sistance lectrique voir d finition ci dessus pla
13. lectrique et connexions l imprimante doit tre pr vue l avance 3 Eviter d installer des appareils qui produisent des champs magn tiques intenses ou des vibrations comme les centrifugeuses moteurs lectriques compresseurs et g n rateurs proximit de l emplacement de la balance 4 Eviter de placer la balance proximit du syst me de climatisation courants d air ou dans un endroit expos la lumi re solaire directe 5 Une prise de courant satisfaisant aux normes lectriques en vigueur dans le pays ou le laboratoire Elle doit tre en bon tat reli e la terre et munie d un interrupteur Figure 15 Panneau de contr le d une balance d analyse Utilisation de la balance lectronique Le mode d emploi d une balance lectronique moderne est expliqu en d tail dans le manuel d utilisation fourni par le fabricant En g n ral il faut respecter la proc dure suivante 1 Laisser la balance s quilibrer avec l environnement dans lequel elle est install e 2 Laisser la balance chauffer avant de commencer les pes es Normalement il suffit de la laisser raccord e au syst me d alimentation lectrique Certains fabricants conseillent d attendre au moins 20 minutes apr s le raccordement de la balance au secteur Pour les balances d analyse de classe 1 il faut attendre au moins 2 heures avant de commencer les pes es V rifier que la balance est talonn e Les balances lectroniques ont en
14. nergie lectrique en chaleur en s opposant au passage du courant La r sistance R d un corps de section uniforme par exemple un fil m tallique est directement proportionnelle sa longueur I et inversement proportionnelle sa section a La r sistance se calcule au moyen de la formule R kx a dans laquelle k constante qui d pend des unit s employ es longueur du conducteur a aire de la section du conducteur ohm 0 est l unit classique de r sistance lectrique 1 ohm est gal 1 volt par amp re Thermistor Aussi appel thermistance Composant lectronique dont la r sistance varie avec la temp rature Ce sont des dispositifs peu co teux utilis s dans diverses applications dont la plus courante est le contr le de la temp rature Thermocouple Dispositif utilis pour la mesure pr cise de la temp rature Il se compose d un assemblage de deux fils m talliques de nature diff rente reli s une de leurs extr mit s qui produit une petite diff rence de potentiel proportionnelle la diff rence de temp rature entre ses deux extr mit s Ce ph nom ne est connu sous le nom d effet Seebeck du nom du physicien allemand Thomas Seebeck qui l a d couvert Thermostat Dispositif qui r gule la temp rature d un syst me Il agit habituellement par dilatation de l un de ses l ments qui active m caniquement un autre l ment par exemple un interrupteur qui contr le une fonction d termin
15. recevoir les l ments que l on vient de d crire t te binoculaire platine porte objet condenseur revolver porte objectifs autres l ments comme le transformateur et l ments lectriques et lectroniques du systeme d clairage L entretien du corps du microscope consiste essentiellement a le d barrasser des poussi res et impuret s qui peuvent affecter son aspect ext rieur et son fonctionnement II faut tre prudent avec les produits chimiques qui peuvent tre corrosifs par exemple les r actifs utilis s au laboratoire pour la coloration des lames Figure 49 Corps du microscope 19 18 17 17 Transformateur interne 18 Rh ostat 19 C ble d alimentation 20 Boutons de r glage macrom trique et microm trique 22 Bras du microscope ENTRETIEN G N RAL DU MICROSCOPE Avant tout il faut insister sur le fait que le microscope est un instrument de haute pr cision L int grit de ses l ments optiques m caniques et lectriques doit tre pr serv e afin de le maintenir dans son tat de fonctionnement optimal Chaque l ment du microscope a t d velopp selon les techniques de fabrication les plus avanc es l assemblage a t r alis en usine l aide d un quipement sp cialis Pendant tout ce processus les tol rances entre les diff rents l ments composant l appareil sont strictement contr l es au moyen de techniques de mesure tr s pouss es La propret de l e
16. ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE lectrode de r f rence lectrode au calomel et d une lectrode interne int gr es dans un m me corps ou sonde Il en existe divers mod les selon le fabricant la temp rature Ce mode est utilis lorsqu on mesure le pH de solutions dont la temp rature varie Cette fonction n cessite l emploi d une sonde sp ciale Tous les pH m tres n en sont pas quip s 2 CIRCUIT LECTRIQUE TYPE La figure 6 pr sente un circuit lectrique type adapt au syst me de commande du pH metre Chaque fabricant poss de ses propres circuits et variantes Une lectrode combin e Ce dispositif doit tre maintenu dans de l eau distill e et rester connect l appareil de mesure Une lectrode combin e se compose d une Figure 5 Types d lectrodes Electrode combin e Fil d argent Ag Electrode de r f rence Membrane semi perm able Solution tampon Electrode de r f rence au calomel Fil de platine Pt Mercure Hg Chlorure mercureux HgCl ou calomel Chlorure de potassium KCI Membrane poreuse Figure 6 Circuit lectrique type pour le pH metre 1N 4002 110 VAC 10K Transformateur 110V 12V DC variable R sistance gt 560K pH 15 CHAPITRE 3 PH METRE 16 Description des l ments du circuit lectrique type ES I ET NS Alimentation et redressement Trans
17. Grille de diffraction El ment du monochromateur Elle diffracte la lumi re et se compose d une s rie de rainures parall les grav es sur une surface r fl chissante au moyen de machines prot g es contre les vibrations et les variations de temp rature Les grilles utilis es dans les spectrophotom tres sont des copies d une grille talon qui poss de habituellement plus de 1200 rainures par millim tre La figure 31 illustre le ph nom ne de diffraction Si l angle de r flexion 6 est connu ainsi que la largeur d des rainures la longueur d onde peut tre d termin e l aide de la formule sind me Intensit Quantit de lumi re mise par une source dans une direction donn e par unit de temps Plus g n ralement mesure du flux moyen d nergie par unit de temps Pour obtenir l intensit on multiplie l nergie par unit de volume par la vitesse laquelle l nergie se d place Le vecteur r sultant est l nergie par unit de surface et par unit de temps Largeur de bande ou bande passante Intervalle de longueurs d onde qu un monochromateur est capable de transmettre Longueur d onde Distance entre les cr tes d une onde Elle d termine la nature des diff rentes formes d nergie de rayonnement dans le spectre lectromagn tique Pour les ondes lectromagn tiques la longueur d onde en metres se calcule en divisant la vitesse de la lumi re par la fr quence nombre de pics passant en un point d te
18. Laisser l incubateur refroidir jusqu ce que la temp rature atteigne la temp rature s lectionn e et se stabilise SOLUTION Mettre l interrupteur sur ON Il n y pas d alimentation lectrique V rifier le circuit d alimentation lectrique Ily a une accumulation de givre autour de l vaporateur Il y a une accumulation de givre autour de l vaporateur La circulation de l air dans l enceinte est entrav e par les chantillons D givrer selon la proc dure indiqu e par le fabricant R duire la temp rature de refroidissement D givrer selon la proc dure indiqu e par le fabricant R organiser le contenu de l enceinte de fa on permettre l air de circuler La temp rature est plus haute ou plus basse que la Le syst me de contr le de la temp rature devrait Etalonner selon la proc dure indiqu e par le valeur s lectionn e tre talonn fabricant L appareil s teint en cours de fonctionnement Le compresseur ne fonctionne pas alors que le t moin de refroidissement est allum La temp rature affich e est plus lev e que la valeur s lectionn e et l alarme se d clenche plus de 40 C La tension d alimentation est incorrecte activ e Le compresseur est d fectueux La protection thermique du compresseur s est V rifier la tension d alimentation elle ne doit pas diff rer de plus de 5 de la tension sp cifi e sur la plaque de l appareil Le branchement lect
19. PRINCIPES DE FONCTIONNEMENT En g n ral l agitateur chauffant poss de une surface plane sur laquelle on place les r cipients contenant les liquides chauffer et agiter Cette surface est faite d un mat riau bon conducteur de la chaleur comme l aluminium Al ou la c ramique Certaines plaques chauffantes utilisent exclusivement une source de rayonnement infrarouge lumi re infrarouge pour chauffer Les agitateurs chauffants poss dent un l ment chauffant une r sistance lectrique et un syst me de contr le interrupteur marche arr t commande de l agitateur moteur de l agitateur Les moteurs utilis s dans ce type d appareils sont en g n ral des moteurs asynchrones monophas s appel s moteurs bagues de d phasage La plage de vitesse d pend du nombre de p les et de la fr quence du courant d alimentation Temp rature De la temp rature ambiante environ 500 C Vitesse de rotation De 60 tours minute t min ou RPM environ 1200 t min COMMANDES DE VAGITATEUR CHAUFFANT Le sch ma de la figure 54 montre un panneau de contr le tel qu on en trouve classiquement sur un agitateur chauffant Le sch ma correspond une plaque chauffante contr l e par microprocesseur dispositif qui quipe la plupart des appareils modernes Affichage de la temp rature s lectionn e temp rature r elle Mode temp rature Marche Arr t Touches de r glage de la temp rature
20. b Faire tomber la pression de vapeur et attendre que l appareil soit revenu la temp rature ambiante c Enlever le panneau avant du g n rateur Figure 36 G n rateur de vapeur MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE d D connecter les bornes des r sistances chauffantes thermoplongeurs e Enlever les vis qui maintiennent le panneau avant o sont install es les r sistances et d monter le panneau avant f Contr ler le joint d tanch it et le remplacer si n cessaire g Enlever les d p ts accumul s la surface des r sistances chauffantes Utiliser les produits recommand s h Remonter l appareil en proc dant dans l ordre inverse La figure 36 repr sente le g n rateur de vapeur et ses l ments Entretien annuel Responsable technicien de maintenance 1 Nettoyer tous les filtres 2 Contr ler et ajuster le niveau d eau du r servoir jusqu ce qu il se trouve environ 20 mm du niveau maximum 3 Contr ler et ajuster la tension des ressorts des soupapes diaphragme 4 D monter nettoyer et ajuster les soupapes de s curit Changer le filtre air 6 Effectuer un test g n ral du processus de st rilisation avec contr le d taill de la pression de la temp rature du temps n cessaire pour chaque tape du cycle de l tat des lampes t moins du d roulement du processus et du fonctionnement de l enregistreur V rifier que tous les param
21. biologique quoi sert une enceinte de s curit biologique Principes de fonctionnement S curit biologique Conditions requises pour l installation Utilisation de l enceinte de s curit biologique Entretien de routine Evaluation fonctionnelle autre option Tableau d valuation fonctionnelle des enceintes de s curit biologique Guide de d pannage D finitions CHAPITRE 7 CENTRIFUGEUSES Photographies de centrifugeuses quoi sert une centrifugeuse Principes de fonctionnement El ments de la centrifugeuse Conditions requises pour l installation Entretien de routine Recommandations pour une utilisation et un stockage appropri s Guide de d pannage D finitions CHAPITRE 8 DISTILLATEUR Sch ma d un distillateur A quoi sert un distillateur Principes de fonctionnement Conditions requises pour l installation Entretien de routine Guide de d pannage D finitions CHAPITRE 9 e DILUTEUR Sch ma d un diluteur quoi sert un diluteur Principes de fonctionnement 21 21 22 22 26 27 28 29 31 31 31 32 32 34 34 35 35 35 35 39 39 39 40 41 42 43 44 45 45 45 45 46 48 48 48 50 52 53 53 53 54 54 55 56 57 59 59 59 60 MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE Conditions requises pour l installation 61 Entretien de routine 61 Guide de d pannage 63 D finitions 64 CHAPITRE 10 DISTRIBUTEUR 65 Sch ma et photographie d un distribute
22. dans un litre de solution Un symbole ionique mis entre crochets signifie qu il s agit d une concentration molaire Mole abr viation de mol cule Quantit de toute substance dont la masse exprim e en grammes est num riquement gale sa masse atomique Mole unit Quantit d une substance qui contient autant d atomes de mol cules d ions ou d autres entit s l mentaires qu il y a d atomes dans 0 012 kilogramme de carbone 12 Ce nombre est le nombre d Avogadro gal 6 0225 x 10 Correspond l ancienne appellation mol cule gramme Symbole mol La masse en grammes de cette quantit de substance num riquement gale la masse mol culaire de la substance est appel e masse molaire pH Mesure de la concentration d ions hydrog ne H en moles par litre M dans une solution La notion de pH a t propos e par S rensen et Lindstr m Lang en 1909 pour faciliter l expression des tr s faibles concentrations ioniques Le pH est d fini par la formule pH log H or H 10 Il mesure l acidit d une solution Exemple dans l eau la concentration de lion H est de 1 0 x 10 M ce qui donne un pH de 7 Cela permet d exprimer la gamme de concentrations allant de 1 10 M par des valeurs du pH allant de z ro 0 14 Il existe divers syst mes de mesure de l acidit d une solution Une substance acide dissoute dans l eau est capable de produire des ions H Une substance basique dissoute dans l eau est
23. e 3 V rifier l tat des robinets de service 4 Effectuer les t ches hebdomadaires selon le calendrier Fr quence une fois par an 1 Effectuer la proc dure de certification conform ment aux indications de la norme NSF 49 2 V rifier l intensit de la lampe UV avec un radiom tre La remplacer si n cessaire 3 V rifier l tat du tube fluorescent Le remplacer si n cessaire 4 Effectuer les t ches mensuelles selon le calendrier D montage du plan de travail Pour le d montage du plan de travail proc der comme suit 1 D contaminer le plan de travail avant de le d monter 2 D visser et enlever les vis de fixation situ es sur la partie avant 3 D visser mais ne pas enlever les vis de fixation situ es sur la partie arri re 4 Soulever la partie avant du plan de travail et enlever celui ci en le tirant vers l avant de l enceinte 5 D contaminer la partie int rieure du plan de travail 6 Pour le remettre suivre dans l ordre inverse les tapes 2 3 et 4 1 Les lampes UV ont une capacit de rayonnement d environ 7500 heures Certains fabricants conseillent de les remplacer une fois par an Remplacement de la lampe ultraviolets Pour remplacer la lampe UV suivre les instructions du fabricant En g n ral la proc dure est la suivante 1 Allumer l enceinte et la laisser fonctionner pendant 5 minutes Relever la vitre avant en position maximum D contaminer les surfaces int rieu
24. le que les ampoules et fusibles install s par le fabricant ou avoir des caract ristiques quivalentes Note Tout le mat riel n cessaire pour le nettoyage du microscope doit tre tenu propre et stock dans des r cipients qui le prot gent de l environnement externe Nettoyage des l ments optiques Dans un microscope il existe deux types d l ments optiques les l ments externes en contact direct avec l environnement et les l ments internes qui se trouvent dans le corps du microscope et qui sont davantage prot g s objectifs oculaires miroirs prismes condenseur clairage etc Les proc dures de nettoyage bien que tr s voisines diff rent cependant par le niveau de soin et de pr cautions 1 Les l ments optiques externes des oculaires des objectifs du condenseur et de l clairage se nettoient l aide du pinceau doux pour enlever la poussi re On utilise ensuite la poire en caoutchouc pour souffler les derni res particules de poussi re qui se trouveraient la surface des lentilles Si de la poussi re adh re la surface optique on nettoie celle ci en la frottant doucement par des mouvements circulaires avec un chiffon propre et tr s doux sans appuyer On chasse ensuite les particules restantes avec la poire en caoutchouc On peut aussi utiliser une peau de chamois tr s fine Dans ce cas disposer la peau de chamois sur l extr mit d un objet cylindrique de diam tre l g rement inf ri
25. lures si on les touche par inadvertance m me longtemps apr s que l appareil a t teint 5 Lors du travail avec des substances qui d gagent des vapeurs placer le bain marie sous une hotte de chimie ou dans un endroit bien a r 6 Ne pas oublier que les liquides mis incuber au bain marie peuvent provoquer des br lures en cas de contact accidentel avec les mains 7 Bien noter que le bain marie est destin tre utilis avec du liquide dans la cuve Si la cuve est vide sa temp rature peut devenir tr s lev e Utiliser le plateau diffuseur pour d poser les r cipients incuber dans la cuve pleine du bain marie Ce plateau est con u de fa on uniformiser la temp rature du liquide 8 Eviter d utiliser le bain marie si l une ou l autre de ses commandes ne fonctionne pas par exemple les r glages de temp rature de fonctionnement ou de temp rature maximale Utilisation du bain marie Avant d utiliser le bain marie v rifier qu il est propre et que les accessoires n cessaires sont install s Le bain marie s utilise normalement comme suit 1 Remplir le bain marie avec du liquide afin de maintenir une temp rature constante eau ou huile V rifier qu une fois que les r cipients chauffer sont en place le niveau du liquide se situe entre 4 et 5 cm du haut de la cuve 2 Installer les instruments de contr le n cessaires par exemple thermom tre et circulateur Utiliser les accessoires pr vus V
26. me de r sistances pour le d givrage ou pour assurer en permanence l absence de glace sur les l ments d givrage automatique Le thermostat Figure 57 Circuit de contr le du r frig rateur UTILISATION DU R FRIG RATEUR R frig rateurs conservateurs Le fonctionnement des r frig rateurs conservateurs est en g n ral tr s simple Chaque fabricant donne des recommandations de base Certaines sont indiqu es ci dessous 1 Brancher le c ble d alimentation lectrique sur une prise de courant reli e la terre et ayant une capacit suffisante pour fournir la puissance requise Mettre l interrupteur sur ON Sur certains mod les l interrupteur est une touche sur laquelle on appuie Attendre que le r frig rateur atteigne sa temp rature de fonctionnement avant d y entreposer des produits Les fabricants r glent la temp rature des r frig rateurs sur 4 C environ S lectionner la temp rature laquelle l alarme doit tre activ e Suivre les instructions du fabricant Charger le r frig rateur selon la capacit fix e par le fabricant 2 Interrupteur de porte ao a Lumi re du r frig rateur aml Interrupteur du ventilateur 5 Interrupteur de d givrage 2 Q __ 4 Ventilateurs de l vaporateur de l vaporateur 2 SS 115 V 60 Hz P Q 5 Commande du li
27. rifier la position de l ampoule du thermom tre ou de la sonde de temp rature pour assurer une lecture correcte 3 Si on utilise de l eau comme liquide chauffant v rifier qu elle est propre Certains fabricants recommandent d ajouter des produits emp chant le d veloppement de moisissures et d algues 4 Placer l interrupteur principal N 1 sur ON les num ros indiqu s ici correspondent ceux qui figurent sur le sch ma de la figure 18 Certains fabricants utilisent des commandes avec microprocesseurs qui lancent une proc dure de v rification automatique d s que l interrupteur est plac en position ON 5 S lectionner la temp rature de fonctionnement au moyen de la touche Menu N 2 et des touches de r glage des param tres 6 S lectionner la temp rature maximale pour les bains marie quip s de cette option Il s agit d une s curit qui coupe l alimentation lectrique si la temp rature d passe la limite s lectionn e Utiliser la touche Menu et les touches de r glage des param tres 7 Eviter d utiliser le bain marie avec les substances suivantes a Eau de Javel b Liquides teneur lev e en chlore c Solutions salines faibles comme le chlorure de sodium le chlorure de calcium ou les compos s contenant du chrome d Fortes concentrations d acide quel qu il soit e Fortes concentrations de sel quel qu il soit f Faibles concentrations des acides chlorhydrique bromhydrique iodhydriqu
28. riliser Cycles de st rilisation Le processus de st rilisation se d roule selon des cycles pr d finis correspondant au type d articles st riliser Il existe des cycles diff rents pour les mat riaux poreux les instruments chirurgicaux les liquides et les mat riels sensibles la chaleur Les principaux qui sont des cycles de st rilisation des fins cliniques s effectuent dans les conditions suivantes 121 C 1 1 kg cm ou 134 C 2 2 kg cm Le tableau de la page suivante indique leurs principales caract ristiques Note La dur e des cycles de st rilisation est ajust e en fonction de l altitude du lieu o l autoclave est install Les fabricants fournissent des tableaux de la compensation effectuer En r gle g n rale plus l altitude du lieu est lev e plus la dur e de st rilisation doit tre longue Contr le de qualit Pour qu un produit soit consid r comme st rilis il faut v rifier que toutes les tapes du processus de st rilisation ont t effectu es correctement Pour ce faire des tests ont t d velopp s pour valuer les caract ristiques du processus et son influence sur l activit des micro organismes Des valuations de la temp rature de la pression du temps de l humidit et du comportement g n ral de l appareil sont r alis es pour certifier qu il fonctionne conform ment aux proc dures qui ont d montr sa validit et sa fiabilit Il existe aussi des tests
29. sultat ne s affiche l cran que lorsque la mesure s est stabilis e Processeur de signal lectronique permet le traitement et l affichage des r sultats de la pes e Il permet aussi d autres fonctions comme la num ration d objets le calcul du poids en pourcentage la pes e dynamique de poids instables par exemple des animaux et la pes e de m langes entre autres Le microprocesseur effectue les calculs selon les instructions saisies par l op rateur sur le clavier de la balance Classification des balances L Organisation internationale de m trologie l gale OIML classe les balances en quatre groupes O O O Groupe exactitude sp ciale Groupe II haute exactitude Groupe Ill exactitude moyenne Groupe IV exactitude ordinaire La figure 14 pr sente cette classification sous forme graphique Dans la classification m trologique des balances lectroniques seuls deux param tres ont une importance L 2 La charge maximale Max La valeur de la division num rique d 1 Kupper W Balances and Weighing Mettler Instrument Corp Princeton Hightstown NJ MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE Figure 14 Classification des balances selon l exactitude r i 10 10 10 gt 10 0 11 10 100 10100 10100 10100 4 1 1 1 4 Le nombre de divisions de l chelle se calcule par la formule Max n
30. tram thylbenzidine peroxyde d hydrog ne R actif utilis pour v rifier la qualit du lavage des puits dans les tests ELISA Chapitre 3 pH metre Code GMDN 15164 Code ECRI 15 164 Le pH m tre est un appareil qui d termine la concentration d ions hydrog ne H dans une solution S il est soigneusement utilis et talonn il permet de mesurer l acidit d une solution aqueuse Certains pH metres sont aussi appel s testeurs de pH A QUOI SERT UN PH METRE Le pH metre s utilise couramment dans tous les domaines de la science ou interviennent des solutions aqueuses On l utilise ainsi en agriculture dans le traitement et la purification des eaux dans des processus industriels comme la p trochimie la fabrication du papier l industrie alimentaire l industrie pharmaceutique dans la recherche et le d veloppement la m tallurgie etc Au laboratoire de sant on l utilise pour le contr le des milieux de culture et la mesure de l acidit ou de l alcalinit des bouillons nutritifs et des tampons Dans les laboratoires sp cialis s on utilise des appareils de diagnostic quip s de micro lectrodes pour mesurer le pH des constituants liquides du sang La mesure du pH plasmatique permet d valuer l tat de sant du patient Sa valeur est normalement comprise entre 7 35 et 7 45 Elle refl te le m tabolisme qui comporte une multitude de r actions dans lesquelles acides et bases se trouvent normalement l q
31. vacuation de la vapeur pour N les cycles de st rilisation de liquides A 4 Porte de l autoclave Se 13 Tuyau d vacuation de la vapeur pour o 4 les cycles de st rilisation rapide 5 Poign e de la porte ie IE 14 Conduite d alimentation de la cuve en vapeur 6 Cuve de st rilisation k 15 Robinet d admission d air avec filtre Double enveloppe Vanne de r gulation de l admission de vapeur Conduite d alimentation en vapeur Pi ge vapeur Tuyau de vidange 83 CHAPITRE 12 AUTOCLAVES 84 12 Tuyau d vacuation de la vapeur pour les cycles de st rilisation de liquides Trajet suivi par la vapeur lors d un cycle de st rilisation de produits liquides en passant par le r ducteur d crit ci dessus 13 Tuyau d vacuation de la vapeur pour les cycles de st rilisation rapide Trajet suivi par la vapeur lors d un cycle de st rilisation rapide 14 Conduite d alimentation de la cuve en vapeur Conduite qui alimente l autoclave en vapeur Cette conduite poss de des commandes et des accessoires qui permettent la vapeur d atteindre l autoclave dans les conditions stipul es pour le cycle de st rilisation 15 Robinet d admission d air avec filtre Dispositif permettant l entr e d air filtr la fin du cycle de st rilisation Il sert quilibrer la pression de la cuve de st rilisation avec celle de l atmosph re 16 Double enveloppe Espace entourant la cuve de st rilis
32. 0 mg l e Duret calcium Quantit de calcium pr sente dans l eau e Duret magn sium Quantit de magn sium pr sente dans l eau Durete totale ou titre hydrotim trique TH Quantit de cations calcium Ca et magn sium Mg en solution quelle que soit la nature des anions pr sents dans l eau Elle est exprim e en ppm parties par million de carbonate de calcium CaCO Solution M lange liquide homog ne de deux ou plusieurs substances caract ris par l absence de r actions chimiques entre ses constituants On appelle solvant le constituant pr sent dans la proportion la plus grande et solut celui qui est pr sent en plus petite quantit Tartre Nom donn aux solides en suspension qui se d posent en couches la surface des r cipients de stockage de l eau Aussi appel d p t de calcaire 57 Chapitre 9 Diluteur Code GMDN 15133 Code ECRI 15 133 Le diluteur est utilis pour diluer des substances Le mot diluteur vient du latin diluere qui signifie ajouter du liquide une solution Les solutions sont d finies comme des m langes homog nes de deux ou plusieurs constituants qui peuvent tre gazeux liquides ou solides Diluer correspond r duire la concentration d un liquide dans un solvant en g n ral dans l eau Le diluteur facilite la pr paration des m langes liquides jusqu ce qu ils atteignent une proportion concentration adapt e l utilisation dans diff rentes techn
33. 1 Le traitement de l eau vise liminer les substances normalement pr sentes dans l eau du fait de son pouvoir de dissolution lev En g n ral il s agit d ions inorganiques anions et cations tels que bicarbonates sulfites chlorures calcium magn sium sodium potassium fer nitrates et de traces de nombreux autres ions 2 Certrains fabricants refroidissent le condenseur au moyen de ventilateurs qui font circuler l air sur les ailettes du condenseur ce qui produit un transfert de chaleur par convection forc e entre la surface diffusante et l environnement 5 Un raccordement lectrique quip des dispositifs de contr le et de s curit requis r pondant aux normes lectriques nationales et internationales en vigueur dans le laboratoire et adapt la capacit des l ments r sistifs du distillateur En g n ral le circuit est aliment en 220 240 V 50 60 Hz Note Toujours v rifier les recommandations du fabricant concernant l installation du distillateur afin d assurer que celui ci fonctionne conform ment aux sp cifications ENTRETIEN DE ROUTINE L entretien de l appareil d pend du mod le et de sa capacit Les proc dures d entretien et de maintenance d crites ci dessous s appliquent un distillateur quip d un g n rateur de vapeur en acier inoxydable avec r sistances immersion et d un condenseur r frig r par un ventilateur soufflant de l air sur les ailettes ou dans l espace entre le
34. 107 cm Certification Proc dure tablissant que le fonctionnement de l enceinte de s curit biologique satisfait aux normes et crit res minimaux assurant une utilisation sans danger La norme NSF 49 s applique aux enceintes de classe Il types A B1 B2 et B3 D contamination Elimination ou destruction des agents infectieux limination ou neutralisation des agents toxiques Enceinte de s curit biologique Dispositif assurant des conditions de ventilation qui prot gent l utilisateur l environnement et l chantillon contre les a rosols et microparticules associ s la manipulation de mat riels biologiques potentiellement infectieux dans le laboratoire et lib r s lors d op rations telles qu agitation centrifugation utilisation de pipettes et ouverture de r cipients sous pression Aussi appel e poste de s curit microbiologique Entr e d air Air qui p n tre dans l enceinte par l ouverture frontale et qui remplace l air vacu Filtre HEPA filtre particules de haute efficacit Filtre capable d liminer des particules de diam tre moyen 0 3 um avec une efficacit de 99 97 Ces filtres sont r alis s en fibres de borosilicate agglom r es au moyen d un adh sif r sistant l eau Le mat riau filtrant est repli sur lui m me l int rieur d un cadre afin d augmenter l aire de filtration Flux laminaire Ecoulement non turbulent d un fluide visqueux par exemple l air en couches parall les Le flux lamin
35. Ce point est fondamental pour assurer la s curit de l op rateur car ce m canisme maintient le couvercle ferm pendant le fonctionnement du rotor 4 V rifier l tat de lubrification des l ments tels que les joints toriques selon les recommandations du fabricant fr quence et type de lubrifiant Les centrifugeuses de fabrication r cente sont quip es de roulements bille qui n ont pas besoin d tre lubrifi s 5 V rifier l tat des joints d tanch it Fr quence une fois par an 1 V rifier que les cartes lectroniques sont propres et bien connect es 2 Tester les commandes servant s lectionner les diff rents param tres de la centrifugeuse vitesse dur e temp rature les alarmes et les instruments analogiques et num riques 3 V rifier la conformit aux normes lectriques Utiliser un testeur de s curit lectrique r sistance de terre courant de fuite 4 Sila centrifugeuse est r frig r e tester la temp rature avec un thermometre lectronique La temp rature ne doit pas varier de plus de 3 C 5 Contr ler l exactitude des commandes de temps de centrifugation Utiliser un minuteur Le temps mesur ne doit pas varier de plus de 10 par rapport au temps programme MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE 49 CHAPITRE 7 CENTRIFUGEUSES 50 6 V rifier la vitesse r elle de rotation par rapport la vitesse s lectionn e en utilisant u
36. El ments des analyseurs Conditions requises pour l installation 105 105 106 106 108 109 111 113 115 116 119 119 120 120 120 121 122 125 126 127 127 127 127 128 128 128 129 129 131 131 131 132 132 133 134 134 135 137 138 138 140 141 143 143 144 144 144 145 MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE Utilisation de l analyseur en chimie s che 145 Utilisation de l analyseur en chimie liquide 146 Entretien courant des analyseurs de chimie 146 Interventions hors routine et conduite tenir en cas de panne 147 Guide de d pannage 148 D finitions 148 CHAPITRE 20 COLORIMETRES 149 Photographies de colorim tres 149 A quoi sert un colorimetre 149 Principes de fonctionnement 149 El ments du colorim tre 150 Conditions requises pour l installation 150 Utilisation du colorimetre 150 Utilisation de l h moglobinom tre 151 Entretien de routine 151 Guide de d pannage 154 D finitions 155 BIBLIOGRAPHIE 157 vii 00o TABLE DES FIGURES viii eee Table des figures Figure 1 Figure 2 Figure 3 Figure 4 Figure 5 Figure 6 Figure 7 Figure 8 Figure 9 Figure 10 Figure 11 Figure 12 Figure 13 Figure 14 Figure 15 Figure 16 Figure 17 Figure 18 Figure 19 Figure 20 Figure 21 Figure 22 Figure 23 Figure 24 Figure 25 Figure 26 Figure 27 Figure 28 Figure 29 Figure 30 Figure 31 Figure 32 Figure 33 Figure 34 Figure 35 Figure 36 Figure 37 Figur
37. Piston Embout conique Joint torique Support du ressort _ Ressort du oad _ Filtre 3 Lubrifier la tige et le piston avec de la graisse silicone sp cialement con ue pour les pipettes Toujours utiliser le lubrifiant recommand par le fabricant Enlever tout exc s de lubrifiant avec un papier absorbant Remonter la pipette en proc dant dans l ordre inverse 5 Etalonner la pipette avant emploi Notions d talonnage des pipettes L talonnage des pipettes est r alis selon des proc dures standardis es La m thode d talonnage d pend principalement du volume manipul par la pipette Plus la plage de volume est faible plus l talonnage est compliqu et co teux On trouvera ci dessous une description succincte de la m thode gravim trique utilis e avec les pipettes d livrant des volumes compris entre 20 ul microlitres et 1 ml millilitre Mat riel et appareillage n cessaires 1 Balance d analyse 2 Thermom tre lectronique ayant une r solution d au moins 0 1 C un intervalle de temp rature appropri et une sonde submersible 3 Hygrometre ayant une incertitude type de 10 ou moins 4 Barometre ayant une incertitude type de 0 5 kPa ou moins 5 Minuteur 6 Micropipettes de divers volumes 7 Pointes jetables de divers volumes 8 Flacons fond plat 9 Eau bi ou tri distill e d gaz e 10 Un op rateur qualifi Fr quence recommand e
38. Temp rature N cessite un thermom tre environ 20 22 C Humidit N cessite un hygrom tre environ 45 55 Propret Doit tre satisfaisante Courants d air Il ne doit pas y avoir de courants d air susceptibles de nuire au fonctionnement de l enceinte 42 MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE GUIDE DE D PANNAGE CAUSE PROBABLE SOLUTION Ni l clairage ni le syst me de ventilation de L enceinte est d branch e V rifier que l enceinte est raccord e une prise de l enceinte ne fonctionnent courant et que le c ble est correctement reli au boitier lectrique de l enceinte La prise de courant n est pas aliment e V rifier que la prise de courant est aliment e et que le coupe circuit n est pas d sactiv protection thermomagn tique Remettre les interrupteurs en marche Le ventilateur fonctionne mais pas La lampe est d fectueuse Remplacer la lampe Utiliser une lampe ayant les l clairage m mes caract ristiques que la lampe d origine La lampe est mal connect e V rifier la connexion de la lampe Remettre la lampe en position correcte LUS Le moteur du ventilateur est d fectueux Remplacer le bloc moteur du ventilateur Le moteur du ventilateur est d connect Contr ler les connexions du moteur Le manom tre indique une augmentation La r tention de particules dans le filtre HEPA a augment Processus normal pendant la vie active du filtre de la d pression a
39. analyse _ Bras ou fl au g Couteau central Etriers LAS AT ee Colonne centrale Chambre el LS piret Plateau Echelle de lecture SE Levier de blocage Il est n cessaire de disposer d une s rie de masses certifi es La s rie se compose g n ralement comme suit 1 2 5 10 20 and50q Masses unitaires 100 200 and 500 g 2 5 10 20 and 50 mg 100 200 and 500 mg Lamelles Balance plateau sup rieur balance guides parall les Ce type de balance poss de un plateau de chargement situ sa partie sup rieure support par une colonne maintenue en position verticale par deux paires de guides avec raccords souples L effet de la force produite par la masse se transmet partir d un point de la colonne verticale la cellule de charge directement ou au moyen d un syst me m canique Avec ce type de conception le parall lisme des guides doit tre maintenu avec une exactitude de 1 um Les carts de parall lisme provoquent une erreur connue sous le nom d erreur de charge excentr e lorsque la masse peser donne une lecture diff rente selon qu elle est plac e au centre du plateau ou sur un de ses bords Le sch ma ci dessous explique ce principe de fonctionnement que certains fabricants ont introduit dans les balance
40. avec du m thanol facilite le s chage Enlever les tuyaux et les seringues Stocker les seringues dans leur tui de protection d origine Couvrir le corps du diluteur pour le prot ger de la poussi re Ranger l appareil Contr le de qualit Le contr le de qualit applicable aux diluteurs est le m me que pour les pipettes En cas de doute se reporter aux explications concernant l talonnage dans le chapitre 16 sur les pipettes MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE GUIDE DE D PANNAGE Rost cause PROBABLE SOLUTION Le diluteur ne s allume pas ll ya un d faut dans l alimentation lectrique V rifier le raccordement lectrique L alimentation est d connect e Brancher le c ble d alimentation lectrique Le fusible a saut V rifier le fusible S il a saut le remplacer par un fusible quivalent V rifier que le panneau de contr le est bien connect au syst me de propulsion Le diluteur fonctionne bien mais aucun message ni L cran LCD est peut tre endommag ou les diodes indication ne s affiche sur l cran de l clairage DEL sont d fectueuses Appeler le service technique du fabricant Les touches de commande ne fonctionnent pas Le diluteur est en mode Pause Appuyer sur la touche d marrage fin START END pour achever le d placement du piston Le diluteur est obstru ll y a une erreur interne Appuyer sur la touche d marrage fin START
41. caniques pour contr ler la position de l chantillon dans l espace selon des coordonn es tridimensionnelles X Y Z lectriques transformateur et source lumineuse et lectroniques appareil photo enregistreur vid o etc qui interagissent pour agrandir et contr ler l image d objets non d celables l il nu Pour observer des chantillons il est indispensable de les pr parer selon des techniques qui permettent de mettre en vidence les d tails que l on souhaite observer Le microscope constitue un outil de diagnostic de premier ordre dans le domaine des soins de sant notamment dans des sp cialit s comme l h matologie la bact riologie et la parasitologie et pour la formation des professionnels de sant certains microscopes sont quip s d accessoires qui permettent aux tudiants de faire des observations sous la direction d un professeur Les perfectionnements techniques apport s aux microscopes ont permis aux fabricants comme aux chercheurs de mettre au point de nombreux mod les sp cialis s Ces appareils jouent un r le fondamental dans les progr s de la connaissance en g n ral et dans la compr hension des m canismes naturels Figure 41 Lentille convexe convergente PRINCIPES DE FONCTIONNEMENT Le microscope utilise les propri t s physiques de l interaction des lentilles avec la lumi re Une lentille est un l ment optique habituellement fabriqu en verre et qui r fracte la lumi re Ses
42. capable de produire des ions hydroxyle OH Une substance acide contient une plus grande quantit d ions H que l eau pure une substance basique contient une plus grande quantit d ions OH que l eau pure Les concentrations de substances sont exprim es en moles par litre M Dans l eau pure les concentrations ioniques H et OH sont gales 1 0 x 1077 M L eau pure est donc consid r e comme une substance neutre En r alit c est un lectrolyte faible qui se dissocie selon la formule suivante H 0 5 H 0H Dans toute solution aqueuse il existe un quilibre exprim par la relation H OH7 _ K H0O Si la solution est dilu e la concentration de l eau non dissoci e peut tre consid r e comme constante tant H 0H7 H 0 K K La nouvelle constante K est appel e constante de dissociation ou produit ionique de l eau et est gale 1 0 x 10 25 C H OH 1 0 x 107 XxX 1 0x 10 X7 1 0 x 107 X 1 0 x 10 Dans l eau pure la concentration de H et la concentration de OH sont de 1 0 x 107 M ce qui est une concentration tr s faible tant donn que la concentration molaire de l eau est de 55 4 mol litre Solution M lange liquide homog ne de propri t s uniformes de deux ou plusieurs substances Ce m lange est caract ris par l absence de r actions chimiques entre ses constituants Le constituant pr sent dans la proportion la plus grande g n ralement l tat liquide
43. cause de la contamination et de l liminer L entretien n a pas t fait selon le plan V rifier les dates pr vues pour effectuer l entretien Informer les responsables 11 CHAPITRE 2 LAVEUR DE MICROPLAQUES 12 DAANEN PBS L une des solutions utilis es pour effectuer les op rations de lavage dans les tests ELISA PBS est l abr viation de Phosphate Buffer Solution solution tamponn e au phosphate Elle se compose de NaCl KCI NaHP0 2H 0 et KH S0 Les fabricants fournissent des fiches techniques qui donnent les proportions et les instructions pour pr parer le PBS En g n ral on m lange une partie de PBS concentr et 19 parties d eau d sionis e Plate ELISA Consommable de dimensions standard destin contenir les chantillons et les r actifs utilis s dans la technique ELISA Les plaques ont en g n ral 96 384 ou 1536 puits et sont r alis es en mati re plastique comme le polystyr ne et le polypropyl ne Il existe des plaques sp cialement trait es pour faciliter l ex cution des tests Pompe d placement positif Pompe r gul e par un piston se d pla ant dans un cylindre Son m canisme est similaire celui d une seringue Elle est quip e d une s rie de valves pour contr ler le d bit entrant et sortant Tampon Solution contenant soit un acide faible et son sel soit une base faible et son sel ce qui la rend r sistante aux variations du pH une temp rature donn e TMB H 0 T
44. cm e Charges 135 22 poreuses e Textiles e Instruments emball s 135 C 7 min e Tubes Pression atmosph rique lt 50 mb 5 min Pression temp rature Instruments non 135 2 2 emball s Ustensiles Verrerie R cipients ouverts 135 C 4 min i F Pression temp rature Pression atmosph rique Produits 121 1 1 thermosensibles e Caoutchouc e Plastique 121 C 20min Pression atmosph rique D lt 50 mb 5 min Pression temp rature e Liquides dans 121 1 1 des r cipients ouverts ou semi ferm s 121 C 20 minTemps Pression atmosph rique Convention A Pr traitement Alternance de cycles de vide et d injection de vapeur Processus 1 2 3 Process 4 St rilisation C Post traitement Processus 5 vide et s chage D Pressions interne et externe totalement quilibr es Note Le processus pour les produits liquides ne comporte pas de phase de vide apr s la st rilisation Le refroidissement est naturel 1 Les courbes pr sent es ici correspondent un autoclave avec pompe de vidange de marque Getinge GE 660 Le temps de st rilisation d pend du volume de la charge Il n y a pas de vide pendant le refroidissement 86 Pression temp rature processus de st rilisation elles sont incub es et analys es et on d termine si le cycle a satisfait aux sp cifications En g n ral on observe un chan
45. couches ext rieures du mat riau d emballage en perdant une partie importante de son volume On peut alors faire entrer davantage de vapeur dans la cuve de st rilisation ou elle p netrera encore plus dans les emballages des articles A la fin la vapeur environne compl tement les articles st riliser et la pression et la temp rature de fonctionnement s tablissent c Une fois ces conditions obtenues le temps effectif de st rilisation en fonction du type d objets ou de 1 Avant de charger l autoclave on met la double enveloppe sous pression pour que l int rieur de la cuve soit chaud afin de r duire la formation de liquide de condensation au d but du cycle de st rilisation 2 Voir plus loin les informations sur les cycles de st rilisation 3 La proc dure d crite concerne un cycle typique de st rilisation dans un autoclave quip d un syst me d vacuation actionn par une pompe lectro hydraulique mat riel st riliser commence Plus la temp rature et la pression sont lev es plus le temps n cessaire la st rilisation est court d Une fois que la dur e de st rilisation programm e est atteinte un processus de post traitement se met en route Il comporte d abord une d pressurisation de la cuve normalement r alis e avec l aide du syst me d vacuation et de s chage qui utilise la chaleur transf r e de la double enveloppe la cuve de st rilisation En faisant baisser la pression on att
46. d finis par le fabricant Faisceau lumineux mal align Le lecteur a t d plac sans que les pr cautions Appeler le service technique n cessaires aient t prises La source lumineuse lampe a t chang e et l installation V rifier l installation et l alignement de la lampe ou l alignement de la nouvelle lampe n ont pas t faits correctement Identification incorrecte de l chantillon La plaque n a pas t charg e correctement V rifier la proc dure d identification des chantillons Refaire la lecture en tenant compte des corrections Identification incorrecte de l chantillon enregistr dans V rifier la proc dure d identification des chantillons le lecteur Refaire la lecture en tenant compte des corrections L ordinateur n indique pas les codes d erreur Le programme qui contr le l activation des alarmes et Appeler le service technique des avertissements a un d faut ou n est pas valid par le fabricant Le lecteur ne d tecte pas les erreurs Divers composants du syst me ne fonctionnent pas par Appeler le service technique exemple le syst me de d tection du niveau de liquide DAANEN Chemiluminescence Emission de lumi re ou d une luminescence r sultant directement d une r action chimique temp rature ambiante ELISA Enzyme Linked Immunosorbent Assay Technique biochimique principalement utilis e en immunologie pour d tecter la pr sence d un anticorps ou d un antig ne dans u
47. d tecteur Lampe Monochromateur Cuve D tecteur Multiplicateur Enregistreur cran d affichage 145 CHAPITRE 19 ANALYSEURS DE CHIMIE CLINIQUE 146 3 Lorsque l indication READ appara t sur l cran ou que le temps sp cifi est coul commencer le test 4 Sortir une bandelette r active du flacon 5 A l aide d une pipette pr lever la quantit appropri e d chantillon par exemple 32 ul en vitant la formation de bulles d air dans la pointe 6 Enlever la feuille d aluminium de la zone d application zone r active de la bandelette sans la plier 7 D poser l chantillon au centre de la zone d application rouge en vitant de toucher la bandelette avec la pointe de la pipette 8 Souleverle couvercle mettre la bandelette sur le guide et l ins rer horizontalement dans l appareil jusqu ce qu un d clic se fasse entendre 9 Fermer le couvercle L affichage sur l cran confirme que le code magn tique sp cifique du test a t lu par l appareil par exemple GLU pour le glucose 10 Le d lai restant avant que les r sultats apparaissent est affich en secondes 11 La concentration de la substance analyser est habituellement exprim e en mg dl 12 Apr s utilisation ouvrir le couvercle et retirer la bandelette 13 Selon le type d alimentation lectrique teindre l appareil en mettant l interrupteur sur OFF et le d brancher ou d connecter les bornes de la pile interrupteur s
48. de tests d agglutination et d inactivation de tests r sistances sont install es l int rieur d un tube scell et s rologiques biom dicaux et pharmaceutiques et m me plac es la partie inf rieure de la cuve en contact direct pour des proc dures d incubation en milieu industriel Ils avec le milieu a chauffer utilisent en g n ral de l eau mais certains fonctionnent avec o Externes Ces r sistances sont situ es la partie inf rieure de l huile La gamme de temp ratures de fonctionnement se de l appareil mais l ext rieur de la cuve Elles sont situe en g n ral entre la temp rature ambiante et 60 C On prot g es par un mat riau isolant qui vite la d perdition peut s lectionner une temp rature de 100 C en utilisant un de chaleur Ce type de r sistance transmet la chaleur au couvercle sp cial La capacit d une cuve de bain marie va de fond de la cuve par conduction thermique 2 30 litres SCHEMA D UN BAIN MARIE Haute To gan mane Le sch ma ci dessous montre les l ments constitutifs du bain marie On peut voir le panneau de contr le lectronique l cran bn d affichage le couvercle facultatif et la cuve Couvercle D autres l ments peuvent tre install s par Panneau de contr le fn exemple un thermom tre et un agitateur permettant d obtenir une temp rature uniforme non indiqu s sur la figure Touche de s lection Grille diffusante Interrupteur PRINCIPES DE FONCTIONNEME
49. des produits de nettoyage non abrasifs par exemple un chiffon imbib d un d tergent doux pour nettoyer les parties int rieures et ext rieures facilement accessibles 3 Eviter tout contact entre les produits de nettoyage et les parties lectriques 4 Attendre que l incubateur soit sec qu il n y ait plus d humidit r siduelle avant de le rebrancher Entretien de routine Un incubateur bien install et correctement utilis n exige que peu d entretien et il peut s couler des ann es avant qu une intervention technique soit n cessaire Pour toute op ration d entretien on se conformera aux recommandations du fabricant Avertissement Avant d effectuer toute r paration v rifier que l incubateur a t d contamin est propre et d branch de la prise de courant L entretien de routine d crit ci dessous doit tre effectu exclusivement par un personnel approuv ayant re u une formation technique sur les incubateurs et connaissant les risques associ s a la manipulation de ce type d appareil On v rifiera l tat et le fonctionnement correct des l ments suivants 1 Le joint d tanch it de la porte est en g n ral en silicone et est garanti pour plusieurs ann es d utilisation Pour remplacer le joint d tanch it il est n cessaire de d monter la porte et de d faire les pi ces qui servent maintenir le joint en place En g n ral le joint est ins r dans une rainure Le nouveau join
50. dimensions sont calcul es et elle poss de en g n ral des surfaces paraboliques ou sph riques Si les rayons lumineux qui frappent l une des faces de la lentille convergent en un point unique F lorsqu ils en sortent la lentille est convexe et est dite convergente Si la lentille disperse les rayons lumineux qui la traversent elle est concave et est dite divergente Les lentilles convexes repr sent es sur la figure 41 constituent les l ments de base du microscope Sur la figure 41 on peut identifier le foyer F point o les rayons lumineux se concentrent et la fa on dont les rayons lumineux sont r fract s lors de leur passage au travers de la lentille La distance entre la lentille et le foyer est connue sous le nom de distance focale D La figure 42 r sume le principe du fonctionnement des lentilles appliqu au microscope Lentille convexe Distance focale Rayons lumineux D a OON Foyer Axe optique f aM de la lentille i FER FE Front d ondes planes Front d ondes sph riques Figure 42 Optique de la lentille convergente L objet h situ a une distance a de la a Obi Lentille convergente jet BS h amp lentille produit une image h une distance b de la lentille avec h gt hi Le foyer F o les ondes lumineuses se rejoignent se trouve la distance focale f de la lenti
51. en priorit de ce qui suit 1 Toujours se reporter au manuel d utilisation fourni par le fabricant 2 Si un appareil ne s allume pas contr ler la prise de courant pour les appareils fonctionnant sur secteur Brancher l appareil et contr ler le fusible ou les bornes des piles 3 En cas de panne grave consulter un ing nieur qualifi dans le domaine biomedical GUIDE DE D PANNAGE Colorim tre automatique CAUSE PROBABLE SOLUTION Mettre l interrupteur sur ON V rifier l alimentation lectrique g n rale V rifier qu un dispositif de s curit n est pas activ Le c ble d alimentation lectrique n est pas branch Brancher correctement le cable d alimentation correctement Les touches du panneau de contr le ne r pondent initialisation de l appareil lors du d marrage a t Eteindre l appareil puis le rallumer pas incompl te Le colorim tre ne d marre pas L interrupteur marche arr t est sur OFF La prise de courant n est pas aliment e Une commande incorrecte a t activ e pendant le d marrage Le port en s rie RS 232 ne r pond pas initialisation de l appareil lors du d marrage a t Eteindre l appareil puis le rallumer incompl te Le c ble de raccordement est mal connect Le contraste est mal r gl Le syst me d clairage de fond a grill l imprimante est bloqu e ll y a un bourrage de papier dans l imprimante Eteindre l imprimante
52. est appel solvant et celui ou ceux qui sont pr sents en plus petites quantit s sont appel s solut s Tampon Solution contenant soit un acide faible et son sel soit une base faible et son sel ce qui la rend r sistante aux variations du pH une temp rature donn e 19 CHAPITRE 3 PH METRE 20 Annexe Th orie du pH Les lectrodes pH se conduisent en th orie comme une cellule lectrochimique et r agissent la concentration d ions H Une force lectromotrice FEM est produite que l on peut calculer d apr s l quation de Nernst E pe P nF n sachant que pH na a tant la concentration ionique effective activit Sin 1 l quation devient ESE pH E est une constante qui d pend de la temp rature Si on remplace E par E T l talonnage sera plus sensible Dans la r alit les lectrodes ne se comportent pas toujours selon l quation de Nernst Si on introduit la notion de sensibilit s l quation devient E E T s7 ph Les valeurs de F et de s s obtiennent par la mesure de la FEM dans deux solutions de pH connu s est la pente de E en fonction du pH et E se trouve l intersection avec l axe des ordonn es y Quand E et s sont connus on peut reprendre l quation et calculer le pH comme suit E T E PH RT T Chapitre 4 Balances Code GMDN 10261 10263 Code ECRI 10 261 10 263 WTEC Me Balances Balances lectroniques La balance est un instrum
53. et les indicateurs ne sont pas poussi reux encrass s ou corrod s 8 V rifier l alignement de la lampe si le fabricant le recommande Fr quence une fois par an Ces tests doivent tre effectu s par un lectricien un ing nieur ou autre personnel qualifi Les r sultats doivent tre enregistr s et conserv s pour permettre un suivi ult rieur 1 Contr ler la s curit de l installation lectrique et de l environnement physique de l appareil 2 Pourles appareils aliment s par le secteur a V rifier que le voltage est appropri et ne s carte pas de plus de 5 du voltage figurant dans les sp cifications de l appareil b V rifier que la polarit de la prise est correcte 3 V rifier qu il y a suffisamment d espace autour de l appareil pour les c bles de raccordement et pour la ventilation 4 V rifier que la paillasse est en bon tat et propre 5 V rifier que l analyseur n est pas situ proximit d appareils produisant des vibrations et n est pas expos la lumi re solaire directe 6 V rifier que l appareil n est pas expos a des conditions d humidit de temp rature ou de poussi re excessives 7 Assurer qu il n y a aucune source de fum es de gaz ou de vapeurs corrosives proximit Entretien g n ral Se reporter la section sur l entretien g n ral des spectrophotom tres au chapitre 11 pour le nettoyage des claboussures et le remplacement des piles Utilisation e
54. et peut donc diff rer de la traduction officielle Cette derni re sera disponible sur le site www who int diagnostics_laboratory d s qu elle sera achev e MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE Introduction Le pr sent manuel a t labor pour aider le personnel des laboratoires de sant Il vise faire mieux conna tre les exigences techniques concernant l installation l utilisation et l entretien des divers quipements qui jouent un r le majeur dans l ex cution des tests de diagnostic II s adresse galement au personnel responsable de la direction technique de l organisation de la gestion de la qualit et de la maintenance technique Etant donn la diversit des appareils en ce qui concerne l origine la marque et le mod le ce manuel pr sente des recommandations d ordre g n ral Les caract ristiques sp cifiques des divers appareils sont expliqu es en d tail dans les manuels d entretien et d installation fournis par les fabricants Ces manuels seront r clam s ou command s par les organismes et personnes charg s des achats de mat riel technique suivant les proc dures habituelles d acquisition ou en s adressant directement aux fabricants Le pr sent manuel a t l origine labor par l Organisation Panam ricaine de la Sant OPS afin d appuyer les programmes d assurance de la qualit que l OPS soutient dans les laboratoires r gionaux Les versions anglaise et fran aise sont d
55. formulaires d inspection pr par s cette 3 Evaluation de performance V rifier la capacit de fin l enceinte offrir un espace de travail suffisant dans les conditions de travail normales et critiques 1 Chaque tablissement a ses propres formulaires pour les registres de maintenance administratifs et techniques Tableau d valuation fonctionnelle des enceintes de s curit biologique L4 e Identification de l enceinte par l tablissement Marque mod le type s rie emplacement code inventaire date Alarmes V rifier l tat et l talonnage PHYSIQUES Finition interne externe V rification visuelle Etat des filtres et pr filtres V rification visuelle II ne doit pas y avoir de fuites ni dans le mat riau filtrant ni au niveau des joints Joints raccords V rification visuelle II ne doit pas y avoir de fuites Fen tre coulissante V rification visuelle Doit coulisser librement et conserver la position voulue 2 OPERATIONNELS Vitesse du flux d air Contr le de la vitesse selon la classe et le type d enceinte N cessite un an mom tre Niveau sonore N cessite un audiom tre Diff rentiel de pression dans le filtre HEPA Mesurer la pression dans l enceinte avec un manom tre PERFORMANCE Num ration des particules M thode d finie dans la norme Federal Standard 209D N cessite un g n rateur de tension un photom tre et un compteur de particules CONDITIONS DANS LE SECTEUR D INSTALLATION
56. frig rateurs sont en g n ral peu exigeants en termes de maintenance mais sont exigeants en ce qui concerne la qualit des syst mes d alimentation lectrique S ils sont connect s des circuits lectriques de bonne qualit et que l air peut circuler librement autour ils peuvent fonctionner pendant des ann es sans intervention technique Le circuit de r frig ration est scell lors de la fabrication et ne poss de aucun l ment qui n cessite un entretien de routine On trouvera ci dessous les principales op rations effectuer en routine Voir la publication MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE OMS Manual on management maintenance and use of cold chain equipment 2005 version fran aise sous presse pour les op rations et les calendriers de maintenance pr ventive pour les r frig rateurs pour banque de sang les cong lateurs de plasma et les chambres froides et cong lateurs utilis s dans la cha ne du froid pour le sang Nettoyage de l int rieur Fr quence une fois par trimestre 1 V rifier que les tag res int rieures du r frig rateur sont propres Elles sont en g n ral en fil m tallique inoxydable Avant de les nettoyer enlever du r frig rateur tout ce qui pourrait g ner Faire glisser les tag res vides vers l avant Humecter un chiffon avec un d tergent doux et frotter doucement les surfaces nettoyer Essuyer et remettre en place 2 Si le r frig rateur a
57. g n ral un talonnage d usine stock en m moire que l on peut utiliser si on ne dispose pas de masses d talonnage Si un talonnage est n cessaire utiliser des masses d talonnage selon les instructions du fabricant Les masses d talonnage doivent au minimum r pondre aux tol rances fix es par American Society for Testing and Materials ASTM Pour information le tableau ci dessous indique les tol rances accept es pour les masses ASTM de classe 1 Limite inf rieure g 999 9975 1999 9950 2999 9925 4999 9875 3 Suivre les instructions figurant dans le manuel d utilisation fourni par le fabricant Etalonnage des balances L talonnage des balances doit tre r alis par un personnel sp cialement form cette activit Il faut souligner le fait que l talonnage doit tre bas sur Marche arr t ON OFF les normes de l OIML ou d un organisme ee _ quivalent tel que l ASTM qui ont tabli Touche Menu EG Date peure 7 gt S lecteurs des m thodologies de classification des N a poids standard On trouvera ci apr s la Touche Impression Menu ppa ae a A classification des poids de r f rence Touche S lection _ utilis e par l OIML Mode ee LL _ Tare De ial 1 Field Services Handbook for High Precision Scales IES Corporation Portland Oregon 2004 MAN
58. h moglobine dans le sang La plupart des mod les fonctionnent manuellement et sont aliment s par le secteur ou par piles Les nouveaux mod les ont des batteries rechargeables et ou utilisent l nergie solaire comme source d lectricit Avec la plupart des h moglobinom tres il faut diluer le sang avant de proc der la mesure Certains mod les utilisent un dispositif sp cial pour recueillir le sang sans dilution ces dispositifs sont usage unique jetables ce qui augmente le co t de l analyse 149 CHAPITRE 20 COLORIM TRES 150 L MENTS DU COLORIM TRE Les l ments de base du colorim tre sont les m mes que ceux du photom tre illustr s la figure 56 du chapitre 19 Comme on l a d j vu au d but de ce chapitre ces appareils sont plus simples et en raison de la qualit de leurs filtres moins sensibles La source lumineuse peut tre une lampe diode mettant une lumi re monochromatique On peut aussi utiliser la lumi re d une lampe au tungst ne ou d une lampe halog ne filtr e de fa on obtenir la longueur d onde voulue Selon le mod le le panneau de contr le de l appareil peut comporter les l ments suivants 1 Fen tre d affichage Touche marche arr t ON OFF Compartiment chantillon Touche Test Touche R f rence Touche de s lection du mode de fonctionnement par exemple Absorbance Transmittance Cin tique pas sur tous les mod les DRE CONDITIONS REQUISES POUR
59. joint ll y aun d faut dans l alimentation lectrique V rifier que la connexion lectrique fonctionne correctement Une charge chaude liquide ou solide a t Attendre que le r frig rateur ait refroidi la charge introduite dans le r frig rateur V rifier le fonctionnement du compresseur Le compresseur ne fonctionne pas Rechercher si une des alarmes s est d clench e Le compresseur fonctionne mais il n y a pas de glace V rifier si les ventilateurs de l vaporateur dans l vaporateur fonctionnent Le compresseur fonctionne mais il n y a pas de Une v rification compl te du syst me de glace dans l vaporateur et les ventilateurs de r frig ration est n cessaire Appeler le service l vaporateur fonctionnent technique Le niveau de gaz r frig rant est bas Appeler le service technique Lorsqu on met l appareil en marche on entend un La protection thermique du compresseur s est V rifier que la tension d alimentation est correcte bruit de cliquetis activ e Fonctionnement bruyant Le plancher n est pas stable ou l appareil n est pas de D placer l appareil vers un endroit plus adapt ou niveau ajuster le niveau l aide des vis de calage Le plateau du syst me de d givrage vibre Ajuster le plateau ou le caler Les pales du ventilateur touchent le couvercle ou le Appeler le service technique compresseur est mal ajust La circulation d air autour de l appareil est insuf
60. l lectrode du pH metre agit comme l ment de mesure et est recouverte d un gel hydrat sur ses deux faces interne et externe Des cations sodium Na sont diffus s dans la couche externe de gel hydrat et dans la solution tandis que les ions hydrog ne H sont diffus s dans le gel Ce dernier assure la s lectivit ionique de l lectrode de mesure les ions hydrog ne H ne peuvent pas traverser la membrane en verre de l lectrode les ions sodium Na la traversent et provoquent une modification du niveau d nergie diff rence de potentiel que mesure le pH m tre On trouvera une explication succincte de la th orie du fonctionnement des lectrodes dans l appendice situ en fin de chapitre Fiaure 4 Sch ma d un pH metre L MENTS DU pH M TRE Un pH metre se compose en g n ral des l ments suivants 1 L l ment principal corps de l appareil contenant les circuits les commandes les raccords les crans d affichage et les chelles de lecture cadrans Parmi les l ments les plus importants figurent a Interrupteur marche arr t ON OFF Tous les pH metres ne sont pas quip s d un interrupteur marche arr t Certains ont simplement un cordon avec une fiche qui permet de les brancher sur une prise de courant appropri e b Commande de r glage de la temp rature Cette commande permet d effectuer un r glage selon la temp rature de la solution dont on mesure le pH c Commandes d talo
61. l lectrode interne avec une solution satur e de chlorure de potassium KCI Utiliser une seringue ou le compte gouttes fourni avec la solution de KCI V rifier que la pointe de la seringue ne touche pas l int rieur de l lectrode 5 Remettre le capuchon de l lectrode Rincer l lectrode a l eau distill e 6 Lorsque l lectrode n est pas utilis e la conserver dans la solution tampon de stockage Nettoyage de l lectrode Le type de nettoyage n cessit par l lectrode d pend de la nature de la contamination laquelle elle est soumise Les proc dures les plus courantes sont r sum es ci dessous 1 Nettoyage g n ral Faire tremper l lectrode pH dans une solution 0 1 M de HCI ou une solution 0 1 M de HNO pendant 20 minutes Rincer avec de l eau 2 Elimination des d p ts et des bact ries Faire tremper l lectrode pH dans une solution dilu e d eau de Javel par exemple 1 pendant 10 minutes Rincer abondamment avec de l eau 3 Elimination des traces d huile et de graisse Rincer l lectrode pH avec un d tergent doux ou de l alcool m thylique Rincer avec de l eau 4 Elimination des d p ts de prot ines Faire tremper l lectrode pH dans une solution de pepsine a 1 et de HCI 0 1 M pendant 5 minutes Rincer avec de l eau Apr s chaque op ration de nettoyage rincer avec de l eau d sionis e et remplir l lectrode de r f rence avant emploi Autres pr cautions 1 Ne pas faire s
62. l ments m caniques d assemblage boulons vis crous etc sont bien ajust s et en bon tat 5 V rifier que les cables lectriques ne sont pas fissur s ni rompus et qu ils sont correctement reli s au secteur 6 Pour les analyseurs aliment s par le secteur a V rifier que les c bles de raccordement et leurs bornes sont exempts de poussi re et de corrosion et ne sont pas encrass s b V rifier que les c bles lectriques ne montrent pas de signes de r parations de fortune et ne sont pas us s c V rifier que le syst me de mise la terre interne et externe r pond aux normes de s curit lectrique 7 Assurer que les interrupteurs et coupe circuits la bo te fusibles et les indicateurs ne sont pas poussi reux encrass s ou corrod s 8 V rifier l alignement de la lampe si le fabricant le recommande Fr quence une fois par an Ces tests doivent tre effectu s par un lectricien pour les appareils aliment s par le secteur un ing nieur ou autre personnel qualifi Les r sultats doivent tre enregistr s et conserv s pour permettre un suivi ult rieur 1 Contr ler la s curit de l installation lectrique uniquement pour les appareils aliment s par le secteur et de l environnement physique de l appareil Pour les appareils aliment s par le secteur a V rifier que le voltage est appropri et ne s carte pas de plus de 5 du voltage figurant dans les sp cifications d
63. la chaleur comme l aluminium Al et le cuivre Cu Pour am liorer le transfert de chaleur il existe des syst mes de ventilation qui produisent une convection forc e Pour atteindre les diff rentes temp ratures exig es au laboratoire ou dans l industrie les fabricants ont d velopp divers mod les et syst mes r frig rants adapt s au but recherch CONDITIONS REQUISES POUR L INSTALLATION Pour que les r frig rateurs et cong lateurs fonctionnent correctement les conditions suivantes doivent tre remplies 1 Unraccordement lectrique avec prise de terre appropri pour le voltage et la fr quence de l appareil Selon leur capacit les r frig rateurs et cong lateurs fonctionnent en g n ral sous 115 V 60 Hz ou 220 240 V 50 Hz Il faut pr voir des raccordements lectriques conformes aux normes lectriques nationales et internationales en vigueur dans le laboratoire 2 Si plus d un appareil est install sur le m me circuit lectrique il faut v rifier que la puissance d livr e et les dispositifs de s curit suffiront pour alimenter ces appareils 3 Brancher directement l appareil sur la prise Ne jamais utiliser de prises multiples ni de prises pr sentant des d fauts de voltage Eviter l emploi de prolongateurs La prise de courant ne doit pas se situer plus de 2 m tres de l appareil 4 Installer l appareil sur une surface plane et horizontale en laissant un espace libre autour Les r frig r
64. la partie de la bandelette o la r action a lieu et o elle est lue par un analyseur en chimie s che ou directement par un op rateur R flectance R Rapport entre l intensit de la lumi re r fl chie sur une surface 10 et celle de la lumi re incidente I 10 1 Note Voir aussi d autres d finitions au chapitre 11 Chapitre 20 Colorim tres Code GMDN 36910 38837 Code ECRI 18 257 18 258 Photometre filtre automatique D nomination manuel PHOTOGRAPHIE D UN COLORIMETRE H moglobinom tre portable QUOI SERT UN COLORIM TRE Un colorim tre est un appareil lectrique qui mesure la concentration de substances analyser dans des solutions color es C est une version simplifi e du photometre En raison de la diff rence de qualit de ses filtres il est moins sensible qu un photometre Le colorim tre est utilis en chimie clinique principalement pour d terminer les taux d h moglobine Plusieurs fabricants proposent divers mod les comportant des filtres individuels amovibles ou des filtres jusqu dix longueurs d onde diff rentes mont s sur un support pivotant Certains mod les sont adapt s une utilisation en climat chaud et humide les filtres en g latine sont prot g s par des plaques de verre pour emp cher le d veloppement de moisissures et MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE Photometre filtre Photo avec l aimable autorisation de H
65. la pipette 2 Pipeter de l eau distill e et la vider dans un bac d chets R p ter au moins 5 fois pour stabiliser l humidit l int rieur de la pipette 3 Mettre de l eau dans le r cipient de pes e jusqu ce que le niveau de liquide atteigne au moins 3 mm 4 Noter la temp rature de l eau la pression atmosph rique et l humidit relative 5 Le cas ch ant couvrir le r cipient de pes e 6 Noter le poids indiqu par la balance ou appuyer sur la touche de tarage pour mettre la balance sur z ro 0 7 Remplir la pipette avec de l eau prise dans le r cipient de stockage et la vider dans le r cipient de pes e en expulsant bien toute l eau Proc der de la m me fa on que pour l usage quotidien des pipettes voir point 7 de la section Technique de pipetage correcte 8 Noter le nouveau poids indiqu par la balance 9 R p ter les tapes 7 et 8 encore neuf 9 fois en notant le poids enregistr par la balance la fin de chaque cycle 10 Noter la temp rature du liquide dans le r cipient de pes e la fin du dixi me cycle et mesurer le temps coul depuis le d but des mesures 11 V rifier si l vaporation a t importante ce point est fondamental lorsqu on travaille avec des pipettes de tr s petit volume Si c est le cas il faut laisser s couler un laps de temps Ta gal au temps coul pendant les dix mesures et au bout de ce temps refaire une mesure 12 La masse de l eau perdue
66. la poussi re ou des impuret s apparaissent Il y a de la poussi re sur la lentille du collecteur de la Enlever les poussi res avec un pinceau en poil de dans le champ de vision source lumineuse chameau ll y a de la poussi re sur la lentille sup rieure du Enlever les poussi res avec un pinceau en poil de condenseur chameau Il y a de la poussi re sur l oculaire Enlever les poussi res avec un pinceau en poil de chameau 115 CHAPITRE 15 MICROSCOPE DIAAN 116 Ac tone Liquide incolore inflammable extr mement miscible l eau c est un solvant utilis pour de nombreuses substances organiques Point d bullition 56 C Formule chimique CH CO CH Champ de vision Aire de la surface qui est vue lorsqu on regarde dans le microscope Cette aire diminue mesure que le grossissement augmente Le diam tre du champ de vision est mesur en millim tres sur le plan m dian de l image Le champ de vision d un microscope optique pour un grossissement donn est exprim par son diam tre en mm ou simplement en valeur absolue nombre de champ Diaphragme Dispositif qui contr le le flux de lumi re dans le microscope Il existe deux types de diaphragmes le diaphragme d ouverture qui r gle l angle d ouverture du faisceau lumineux dans le microscope et le diaphragme de champ qui r gle la taille de l image Dans les microscopes optiques les diaphragmes servent viter que les rayons lumineux pr sentant de f
67. lateurs Selon l intervalle de temp rature on distingue o R frig rateurs conservateurs de 2 8 C o Cong lateurs basse temp rature de 15 35 C o Cong lateurs ultra basse temp rature de 60 86 C On choisira un appareil dot de fonctions appropri es selon les activit s du laboratoire Par exemple s il est n cessaire de conserver du sang total il faudra utiliser un r frig rateur pour banque de sang qui assure des temp ratures comprises entre 2 et 8 C Si en revanche on doit conserver des souches virales ou microbiennes il faudra un cong lateur ultra basse temp rature Les r frig rateurs et cong lateurs sont indispensables pour conserver les substances biologiques et les r actifs Le pr sent chapitre traite du fonctionnement et de l entretien des r frig rateurs conservateurs et des cong lateurs ultra basse temp rature Photo avec l aimable autorisation de Cole Parmer Instrument Co 131 CHAPITRE 18 R FRIG RATEURS ET CONG LATEURS QUOI SERT UNE ENCEINTE R FRIG R E Les r frig rateurs et cong lateurs servent conserver le sang et ses d riv s les liquides et tissus biologiques les r actifs les produits chimiques et les souches de micro organismes En g n ral plus la temp rature est lev e plus l activit chimique et biologique est intense En abaissant la temp rature on peut contr ler les effets de celle ci sur la composition et la structure des su
68. lecture en fonction de la concentration ce qui permettra de relier le r sultat obtenu pour un chantillon de concentration inconnue aux concentrations port es sur le graphe MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE GUIDE DE D PANNAGE Spectrophotom tre automatique Prost ME caus PROBABLE SOLUTION Le spectrophotometre n est pas aliment en courant Linterrupteur marche arr t est sur OFF lectrique Mettre l interrupteur sur ON V rifier l alimentation g n rale en lectricit V rifier La prise de courant n est pas aliment e en courant lectrique qu un dispositif de s curit lectrique n a pas saut Le c ble d alimentation lectrique n est pas branch Brancher correctement le cable d alimentation correctement lectrique Les touches du panneau de contr le ne r pondent initialisation de l appareil lors du d marrage a t Eteindre l appareil puis le rallumer pas incompl te Une commande incorrecte a t activ e pendant le d marrage Le port en s rie RS 232 ne r pond pas initialisation de l appareil lors du d marrage a t Eteindre l appareil puis le rallumer incompl te Le c ble de raccordement est mal connect V rifier la connexion L cran LCD est difficile lire Le contraste est mal r gl R gler le contraste Le syst me d clairage de fond a grill Appeler le repr sentant L imprimante est bloqu e ll y a un bourr
69. lev e au syst me ayant la temp rature la plus basse La quantit de chaleur AQ est proportionnelle au changement de temp rature AT La constante C ou capacit calorifique du syst me permet d tablir la relation AQ CAT d o l on peut d duire que l une des cons quences du changement de temp rature dans un syst me est un transfert de chaleur Coupe circuit Dispositif de contr le lectrique qui permet un appareil ou dispositif lectrique d tre en marche ON ou l arr t OFF Aussi appel interrupteur R sistance Opposition qu un mat riau ou un circuit lectrique exerce au passage du courant lectrique Cest la propri t d un circuit qui transforme l nergie lectrique en chaleur en s opposant au passage du courant La r sistance R d un corps de section uniforme comme un fil m tallique est directement proportionnelle la longueur I et inversement proportionnelle l aire de la section a La r sistance se calcule par la formule R kx a dans laquelle k constante qui d pend des unit s employ es longueur du conducteur a aire de la section du conducteur ohm 0 est l unit courante de r sistance lectrique un ohm est gal un volt par amp re Thermocouple lectrique Dispositif utilis pour la mesure pr cise de la temp rature Il se compose d un assemblage de deux fils m talliques de nature diff rente reli s Une de leurs extr mit s qui produit une petite diff renc
70. mais sur du papier optique puis frotter doucement la surface avec le papier imbib de solution Retirer le m canisme porte lames clips ou plaques le nettoyer soigneusement et le remettre en place Fr quence tous les six mois En compl ment des proc dures d entretien mensuel les contr les suivants sont recommand s 1 Proc der une inspection visuelle g n rale du microscope V rifier que tous les l ments sont en bon tat propres et bien ajust s V rifier que de bonnes conditions de ventilation de temp rature et d humidit sont maintenues l endroit o le microscope est install Contr ler la qualit de l installation lectrique qui alimente le microscope V rifier l int grit des c bles des fusibles et de l ampoule lectrique MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE GUIDE DE D PANNAGE 2 Syst me d clairage PROBL ME CAUSE PROBABLE SOLUTION Le syst me d clairage ne fonctionne pas Le c ble d alimentation lectrique est d branch Brancher le c ble d alimentation Le fusible a saut Remplacer le fusible l ampoule a grill Remplacer l ampoule V rifier qu elle est bien align e l interrupteur du syst me d clairage est d fectueux Remplacer l interrupteur Le syst me d clairage ne donne pas une Le syst me lectrique pr sente des erreurs de voltage Contr ler et r parer le syst me lectrique Installer lumi re uniforme un s
71. minute f fr quence de la tension appliqu e p nombre de p les du stator Bobine principale Le sch ma ci dessous montre les l ments internes du circuit lectrique Bobine secondaire Stator Point d clair Temp rature laquelle les mol cules d une substance r agissent avec l oxyg ne de l air en d clenchant une combustion 129 MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE Chapitre 18 R frig rateurs et cong lateurs 13315 13315 17157 35486 40513 15145 Code ECRI 13 315 15 170 17 157 15 171 22065 15 145 VTE R frig rateurs R frig rateurs R frig rateurs R frig rateurs Cong lateur Cong lateur de biologie de laboratoire pour banque de laboratoire M de laboratoire de sang ultra basse temp rature R FRIG RATEURS ET CONG LATEURS PHOTOGRAPHIE D UNE ENCEINTE REFRIGEREE Les r frig rateurs et cong lateurs sont parmi les appareils les plus importants utilis s au laboratoire Ils assurent un environnement de temp rature contr l e enceinte r frig r e pour divers produits et substances basse temp rature l activit chimique et biologique est r duite ce qui entra ne une meilleure conservation des produits Pour cela la temp rature l int rieur de l enceinte r frig r e doit tre inf rieure la temp rature ambiante Au laboratoire on utilise diff rents types de r frig rateurs et de cong
72. nergie transf r e d un syst me se trouvant une temp rature donn e un autre syst me se trouvant une temp rature plus basse du fait de la diff rence de temp rature entre les deux syst mes Lorsqu un syst me de masse lev e M est plac au contact d un autre syst me de masse plus petite m une temp rature diff rente la temp rature r sultante finale est proche de la temp rature initiale du syst me ayant la masse la plus lev e On dit alors qu une quantit de chaleur AQ a t transf r e du syst me dont la temp rature tait plus lev e au syst me dont la temp rature tait moins lev e La constante proportionnelle C appel e capacit calorifique du syst me permet d tablir la relation AQ CAT d o l on d duit que l une des cons quences du changement de temp rature d un syst me est le transfert de chaleur Chaleur latente Quantit d nergie thermique n cessaire pour qu un changement de phase se produise dans une substance par exemple de la phase liquide la phase vapeur Chaleur sensible Quantit d nergie n cessaire pour augmenter la temp rature du gaz r frig rant par absorption de chaleur Par exemple quantit de chaleur n cessaire pour faire passer la temp rature de 15 20 C ou de 30 40 C Chaleur sp cifique Quantit de chaleur n cessaire pour augmenter d un degr la temp rature d une unit de masse Entropie Mesure de l nergie d un syst me qui n est pa
73. of Health 2 Edition 2000 Ram S Lamba De La Cu tara R Locally Produced Low Cost Equipment Project UNESCO IUPAC 157 BIBLIOGRAPHIE The blood cold chain guide to the selection and procurement of equipment and accessories WHO Geneva 2002 The Laboratory Safety Guidelines Public Health Agency of Canada The microscope A Practical Guide New Delhi India WHO Regional Office for South East Asia 1999 Universal Medical Devices Nomenclature System UMDNS Product category Thesaurus ECRI 5200 Bulter Pike Plymouth Meeting PA USA 2000 158
74. ou des indicateurs qui permettent de certifier que tous les micro organismes sont d truits afin de garantir la qualit du processus de st rilisation Diff rentes cat gories de tests ont t labor es dont les suivantes 1 Indicateurs de processus de st rilisation s servent surveiller le fonctionnement des autoclaves Des instruments contr lent des param tres comme la temp rature le temps et la pression thermom tres manom tres chronom tres et enregistrent le d roulement du processus Les syst mes d enregistrement des autoclaves modernes microprocesseurs enregistrent tous les param tres du cycle de st rilisation et stoppent le cycle si une anomalie est d tect e Le test de Bowie Dick entre galement dans cette cat gorie il value l efficacit de la pompe d extraction au moyen d une feuille de test qui change de couleur uniform ment si le processus a t effectu de fa on satisfaisante Si ce n est pas le cas la couleur est irr guli re 2 Indicateurs chimiques Ce sont des tests chimiques classiques avec changement de couleur ou d tat lorsque les r actifs sont expos s aux diff rentes tapes du processus de st rilisation Les indicateurs chimiques permettent de distinguer des articles soumis ou expos s un processus de st rilisation r ussi des articles pour lesquels la st rilisation n a pas abouti Parmi les plus connus figurent les rubans adh sifs ou les bandelettes que l on d pose da
75. ou les bornes de la pile En cas de panne grave consulter un ing nieur qualifi dans le domaine biom dical MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE 147 CHAPITRE 19 ANALYSEURS DE CHIMIE CLINIQUE 148 GUIDE DE D PANNAGE CAUSE PROBABLE iO RUN ETO L interrupteur marche arr t est sur OFF Mettre l interrupteur sur ON La prise de courant n est pas aliment e V rifier l alimentation lectrique g n rale V rifier qu un dispositif de s curit n a pas t activ Le c ble d alimentation lectrique n est pas branch Brancher correctement le cable d alimentation correctement Les piles sont us es ou mal install es V rifier l tat et l installation des piles Les remplacer ou les recharger si n cessaire Eteindre l appareil puis le rallumer L analyseur ne d marre pas Les touches du panneau de contr le ne r pondent pas initialisation de l appareil lors du d marrage a t incompl te Une commande incorrecte a t activ e pendant le d marrage Le port en s rie RS 232 ne r pond pas initialisation de l appareil lors du d marrage a t Eteindre l appareil puis le rallumer incompl te Le c ble de raccordement est mal connect V rifier la connexion L cran LCD est difficile lire Le contraste est mal r gl R gler le contraste Le syst me d clairage de fond a grill Appeler le repr sentant l imprimante est bloq
76. par vaporation au cours de la p riode suppl mentaire Ta est divis e par le nombre total d chantillons analys s dix Cela donne une indication de la perte moyenne de liquide par vaporation pour chaque cycle Cette valeur doit tre ajout e chaque lecture de la masse Calculs Proc der comme suit 1 Calculer la masse d eau d livr e par la pipette a chaque cycle Soustraire la valeur enregistr e la fin du cycle pr c dent de la valeur enregistr e pour le cycle en cours Proc der de m me pour toutes les mesures Le cas ch ant ajouter la masse moyenne correspondant au calcul de la quantit vapor e par cycle 2 Convertir chaque masse en un volume 20 C en divisant la masse par la masse volumique de l eau ajust e sur la temp rature mentionn e 3 Calculer la moyenne des volumes calcul s au point 2 Somme des volumes divis e par le nombre d chantillons Faire les corrections pour les ph nom nes tels que la pression de l air sur la masse flottabilit Pour cela multiplier chaque valeur de la masse par un facteur de correction Z X V nxZ 4 Calculer l cart type de l chantillon so DH n 3 5 Calculer le coefficient de variation Cv CV x 100 AV Le tableau ci dessous r capitule les formules math matiques mentionn es Tableau des formules math matiques CV coefficient de variation D erreur X volume moyen SD cart type Z fac
77. permanence La circulation d air autour de l appareil est D placer l g rement l appareil pour qu il y ait assez insuffisante d espace libre Le changer de place si n cessaire Le thermostat est d fectueux Appeler le service technique La fermeture de la porte n est pas tanche V rifier le joint et ajuster la fermeture de la porte La pi ce est trop chaude Assurer une ventilation ad quate de la pi ce La porte est ouverte trop souvent ou nest pas Limiter les ouvertures de la porte ou refermer la referm e porte L interrupteur de l clairage est d fectueux V rifier que la lumi re s teint lorsque la porte est ferm e Les autres proc dures de maintenance n cessitent des outils et un appareillage sp cialis s 140 MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE DIAAN BTU Unit utilis e pour d finir le transfert de chaleur dans le syst me anglais BTU signifie British Thermal Unit Une unit BTU est la quantit de chaleur qui doit tre transf r e pour augmenter la temp rature d une livre pound d eau de 63 F 64 F Calorie Quantit de chaleur qui doit tre transf r e un gramme d eau pour augmenter sa temp rature de 1 C Cette d finition s applique dans les conditions normales pression atmosph rique gale 760 mm Hg acc l ration de la pesanteur gale 9 81 m s la temp rature d un gramme d eau passe de 14 5 C 15 5 C Chaleur Forme d
78. place c t du laveur de microplaques pour le mat riel compl mentaire lecteur incubateur distributeur et ordinateur avec ses p riph riques 3 Une prise de courant en bon tat avec raccordement la terre et une alimentation lectrique r pondant aux normes nationales ou celles du laboratoire Par exemple dans les pays d Am rique le r seau est en g n ral aliment en 110 V 60 Hz alors qu ailleurs dans le monde il est aliment en 220 240 V 50 60 Hz ENTRETIEN DE ROUTINE Les proc dures d entretien d crites ci apr s concernent uniquement le laveur de microplaques L entretien du lecteur de microplaques est d crit au chapitre 1 Entretien courant Fr quence une fois par jour V rifier le volume d livr Tester l uniformit du remplissage V rifier l efficacit du sous syst me d aspiration V rifier la propret des aiguilles de distribution et d extraction 5 Nettoyer le laveur l eau distill e apr s emploi pour liminer les restes de sels dans les canaux des sous syst mes de distribution et d extraction Les aiguilles doivent tre enti rement immerg es dans l eau distill e 6 V rifier que le corps du laveur a t nettoy Si n cessaire nettoyer les parties externes avec un chiffon imbib de d tergent doux nn 1 Proc dure labor e par PANBIO ELISA Check Plus Cat N E ECP01T CHAPITRE 2 LAVEUR DE MICROPLAQUES 10 Entretien pr ventif Fr quence une fois
79. pour faire le vide et un syst me de stockage des liquides et des d chets extraits des puits Le vide peut tre r alis au moyen de pompes externes et internes l extraction se fait l aide d une s rie d aiguilles mont es sur la t te du laveur Le nombre d aiguilles varie de un trois selon le mod le utilis Si le laveur n a qu une aiguille le lavage et l extraction sont r alis s avec cette m me aiguille S il y a deux aiguilles l une est utilis e pour d livrer la solution de lavage et l autre pour l extraire Les mod les trois aiguilles utilisent la premi re pour d livrer la solution de lavage la deuxi me pour l extraire et la troisi me pour contr ler et enlever tout exc s de liquide restant dans le puits En g n ral l aiguille d extraction est plus longue que l aiguille de distribution ce qui lui permet d avancer verticalement jusqu une distance de 0 3 0 5 mm du fond du puits o Sous syst me de d placement se compose d un m canisme qui d place horizontalement la t te de distribution et d extraction de fa on qu elle atteigne tous les puits de la microplaque ELISA Apr s chaque d placement horizontal jusqu la rang e de puits suivante la t te effectue un d placement vertical pour distribuer ou extraire la solution de lavage Il existe des laveurs qui ex cutent ces op rations simultan ment Figure 2 Laveur ELISA Les sous syst mes d crits ci dessus sont repr sent s s
80. pour l talonnage des pipettes Une fois par trimestre Principe La proc dure est bas e sur la mesure du volume d un chantillon d eau partir de la masse d eau d livr e par la pipette en divisant cette masse par la masse volumique de l eau En pratique on effectue un groupe de mesures auxquelles on apporte des corrections pour compenser toutes variations par rapport aux conditions standard de temp rature et de pression atmosph rique et toute vaporation importante survenue pendant la dur e des tests 1 Il existe diff rentes sp cifications pour la graisse silicone il faut donc utiliser celle qui est recommand e par le fabricant 2 l appareillage utilis pour talonner les pipettes doit tre certifi par un laboratoire d talonnage accr dit MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE 123 CHA 124 PITRE 16 PIPETTES Ce type de test permet de proc der aux v rifications suivantes 1 Comparer diff rents types de pipettes entre elles pour rechercher d ventuelles diff rences V rifier la pr cision et l exactitude d une pipette V rifier l exactitude et la pr cision d un lot de pipettes 4 V rifier les facteurs imputables l utilisation d une m me pipette par plusieurs op rateurs a Proc dure La proc dure d crite ci dessous est valable pour les pipettes d placement d air Elle comporte les tapes suivantes 1 Mettre une nouvelle pointe sur
81. pr sente les distributeurs manuels aussi appel s distributeurs r p titifs car ce sont les plus couramment employ s 4 dans un r cipient en fractions pr d finies distribution r p titive avec un volume final constant M langer une solution par aspirations et distributions successives au moyen d un dispositif d aspiration et de distribution Titrer une solution ou une suspension stock de virus en distribuant le mat riel titrer par dilution en s rie dans un diluant donn jusqu atteindre le point final SCHEMA ET PHOTOGRAPHIE D UN DISTRIBUTEUR Distributeur Figure 25 Distributeur 1 S lecteur de volume 2 Ecran digital 3 Levier de dosage 4 Levier de remplissage T te de distribution 5 Bouton d jection 6 Raccord du distributeur 7 Echelle de dosage 8 R servoir Adaptateur avec 9 Embout de distribution D piston int gr A Photo avec l aimable autorisation de Gilson S A S 65 CHAPITRE 10 DISTRIBUTEUR 66 5 Diluer une solution en m langeant des volumes d finis de cette solution avec un diluant 6 Utiliser de la m me fa on qu une pipette aspiration d un volume puis distribution de ce m me volume 7 Distribuer des milieux de culture dans des bo tes de P tri On utilise souvent des distributeurs automatiques quip s d accessoires pour d placer les bo tes de P tri et les stocker une fois que le milieu de culture y a t introduit Pour
82. que le cycle La cuve de st rilisation est charg e de fa on Contr ler la r partition et le volume de la charge de st rilisation a correctement abouti incorrecte ou est surcharg e Suivre les recommandations du fabricant Le pi ge vapeur est d fectueux Contr ler le pi ge vapeur Le r parer ou le remplacer Le temps de st rilisation est insuffisant V rifier le temps de st rilisation Corriger en fonction du type de cycle autoclave n atteint pas la temp rature et la pression V rifier la temp rature s lectionn e V rifier que la de st rilisation s lectionn es pression de vapeur correspond au cycle s lectionn Rechercher une ventuelle fuite de vapeur au niveau du joint de la porte ou des dispositifs de contr le du passage de la vapeur La p n tration de la vapeur est insuffisante R duire la quantit de paquets st riliser pour que la vapeur circule mieux Le pr traitement est inad quat Il reste trop d air Appeler le service technique pour faire contr ler le dans la cuve syst me d vacuation L indicateur biologique ne convient pas pour le cycle Contr ler les sp cifications de l indicateur biologique effectu R p ter le cycle de st rilisation Le cycle de st rilisation est interrompu sans raison Pression de vapeur d eau ou d air insuffisante De ce apparente fait les r gulateurs et dispositifs de contr le asservis ne sont pas activ s Les objets st ri
83. rilisation 8 V rifier le fonctionnement ad quat de l autoclave au moyen d un indicateur biologique ou chimique Pour v rifier la temp rature utiliser des bandelettes temps temp rature vendues dans le commerce qui permettent de contr ler la dur e et la temp rature d exposition Entretien trimestriel Responsable technicien de maintenance 1 V rifier que les manom tres fonctionnent comme pr vu 2 Actionner les soupapes de s curit la main pour v rifier leur bon fonctionnement Utiliser un gros tournevis pour actionner le levier d activation de la soupape normalement situ dans la partie sup rieure de celle ci Faire attention de tenir le visage et le corps en dehors du trajet de la vapeur Lorsque la soupape est en action v rifier qu il n y a pas de fuites de vapeur S il y a des fuites la soupape doit tre actionn e nouveau jusqu ce qu elle soit bien herm tique Avertissement Si les fuites de vapeur ne sont pas limin es la vapeur endommagera rapidement le joint et l ensemble du syst me constituant la soupape de s curit devra tre remplac 3 Lubrifier le joint d tanch it de la porte Utiliser le lubrifiant et la proc dure recommand s par le fabricant Certains fabricants recommandent la proc dure suivante a Enlever le joint d tanch it Pour cela il est n cessaire de le sortir de sa rainure en desserrant les l ments qui le maintiennent en place vis et plaques
84. simple Adaptateur multicanaux avec embouts de dosage c i a 1 R servoir auxiliaire Volume distribu Les distributeurs sont con us pour travailler sur des intervalles de volumes pr d finis Avant l emploi il faudra examiner le type de solution qui sera utilis et les volumes distribuer Les fabricants proposent divers mod les d adaptateurs Le tableau ci dessous montre les intervalles de travail les plus courants Volumes distribu s 1 20 ul 2 40 ul Capacit de l adaptateur 0 1ml 0 2 ml 1 ml 10 100 ul 5 ml 50 500 ul 10 ml 100 ul to 2 ml 25 ml 250 ul to 5 ml CONDITIONS REQUIS POUR LE FONCTIONNEMENT DE L APPAREIL Selon le type de distributeur des conditions minimales sont requises pour le fonctionnement entre autres 1 V rifier que le distributeur est con u pour les solutions qui seront utilis es V rifier la compatibilit des mat riaux dans le manuel d utilisation fourni par le fabricant 2 Un environnement propre quip de postes de travail de taille suffisante bien ventil et clair 3 V rifier que la temp rature de la pi ce est stable avec un intervalle de variation de 0 5 C entre 0 et 40 C et une temp rature optimale de 20 C 4 Utiliser un quipement de protection individuelle appropri lors du travail avec des substances toxiques ou comportant un risque microbiologique 5 Utiliser les embouts sp cialement con us par le fabrica
85. ultraviolet Les lampes sont livr es pr assembl es sur une base qui leur assure un positionnement fixe afin de maintenir l ajustement optique et la focalisation pendant le fonctionnement de l appareil et lors du remplacement de l ampoule L nergie du rayonnement mis par une lampe au tungst ne se situe classiquement entre 2600 et 3000 K degr s Kelvin Monochromateur Le monochromateur est un ensemble d l ments qui sert disperser la lumi re blanche en radiations de diff rentes longueurs d onde dont l une est utilis e pour lire le r sultat de l analyse En g n ral il a une fente d entr e qui limite le rayonnement lumineux produit par la source et le confine dans une zone d termin e un jeu de miroirs pour transmettre la lumi re au travers du syst me optique un l ment qui permet de s parer les radiations en diff rentes longueurs Figure 29 El ments du spectrophotom tre d onde ce peut tre un prisme ou une grille de diffraction et une fente de sortie pour s lectionner la longueur d onde qui illuminera l chantillon Les grilles de diffraction ont l avantage d liminer la dispersion non lin aire et d tre insensibles aux changements de temp rature Porte chantillons Ce dispositif sert de support aux chantillons analyser Il en existe divers types adapt s aux diff rents mod les de spectrophotom tres et au volume des chantillons cuves microcellules microplaques tubes essais
86. un entrefer dans le circuit magn tique lorsqu un encrassement emp che la cage protectrice de prendre sa position d finitive lorsque le sol noide est sous tension Nettoyer soigneusement le logement de la bobine et son noyau de fa on ce que la course du piston ne soit pas entrav e par des impuret s 2 Remplacer les joints toriques entre le sol no de et le corps de la vanne apr s les avoir d mont s 3 Avant tout d montage v rifier comment l lectrovanne est mont e Certaines vannes poss dent des instructions de montage claires mais d autres en sont d pourvues 4 Lors du d montage d une lectrovanne asservie contr ler la position des orifices de connexion l environnement de travail de fa on pouvoir la remonter Nettoyage du filtre vapeur Avertissement Avant de d monter le filtre vapeur faire tomber la pression de vapeur dans le syst me Soulever le couvercle Enlever le filtre Le nettoyer soigneusement Remettre le filtre Remettre le couvercle oe Se oS On trouvera ci apr s une liste des problemes les plus fr quents Etant donn la diversit des marques des mod les et de la technologie utilis e il est conseill de suivre les instructions qui figurent dans le manuel d utilisation de l autoclave MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE GUIDE DE D PANNAGE Prost cause PROBABLE SOLUTION l indicateur de st rilisation n indique pas
87. une chaudi re ou d un g n rateur de vapeur ou l nergie thermique de r sistances immersion qui se transmet l eau par conduction directe Ces processus font monter la temp rature de l eau jusqu ce que dans les conditions normales pression atmosph rique gale une atmosph re et acc l ration de la pesanteur gale 9 80665 m s elle se transforme en vapeur 100 C 2 Jauge de niveau d eau Dispositif qui permet de r guler la quantit d eau dans le g n rateur de vapeur Il est directement reli l arriv e d eau qui alimente le distillateur Lorsque la quantit d eau en phase liquide contenue dans le bouilleur baisse le dispositif permet de remplacer la quantit de liquide vapor e 3 Vanne de r gulation Dispositif m canique ou lectrom canique qui permet de r guler le d bit de l eau entrant dans le g n rateur de vapeur 4 Raccordement au r seau de distribution Apporte l eau en phase liquide au r servoir du g n rateur de vapeur 5 Eau en phase liquide Eau qui se trouve l int rieur du r servoir du g n rateur de vapeur Elle re oit l nergie thermique des r sistances immersion et se transforme en vapeur lorsque les conditions de temp rature et de pression requises sont remplies 6 R sistances immersion Aussi appel es thermoplongeurs Dispositifs produisant de la chaleur lorsqu ils sont parcourus par un courant lectrique Les r sistances sont isol es par une ga
88. une nouvelle ayant les m mes sp cifications que la pile d origine L appareil ne fonctionne pas L appareil est d branch Brancher l appareil sur la prise de courant Le fusible a saut Remplacer le fusible par un autre ayant les m mes caract ristiques que le fusible d origine L appareil fonctionne en permanence La temp rature de fonctionnement s lectionn e est Augmenter la temp rature s lectionn e tr s basse L appareil fonctionne en permanence mais ne Le condenseur est sale Nettoyer le condenseur refroidit pas P La ventilation est insuffisante V rifier et corriger la ventilation Une accumulation de glace nuit l isolation D givrer l appareil Si le probl me persiste appeler le service technique Accumulation rapide de givre dans l vaporateur Le joint de porte fuit Ajuster les charni res de la porte Si le probl me persiste appeler le service technique La porte du compartiment de cong lation est Le chauffage du joint de porte est d fectueux Appeler le service technique bloqu e par le gel Fonctionnement bruyant Le plancher n est pas stable ou l appareil n est pas de D placer l appareil vers un endroit plus adapt ou niveau ajuster le niveau l aide des vis de calage Le plateau du syst me de d givrage vibre Ajuster le plateau ou le caler Les pales du ventilateur touchent le couvercle ou le Appeler le service technique compresseur est mal ajust Le compresseur fonctionne en
89. une prise de courant reli e la terre 2 La prise est en bon tat et ne se trouve pas plus de 1 5 m du spectrophotom tre 3 Le voltage est appropri et ne s carte pas de plus de 5 du voltage sp cifi sur la plaque de l appareil 4 La polarit de la prise est correcte Ces tests doivent tre effectu s par un lectricien qualifi technicien ou ing nieur et les r sultats doivent tre enregistr s pour permettre un suivi ult rieur Secteur d installation 1 V rifier qu il y a un espace libre autour du spectrophotometre pour deux raisons D abord pour que les c bles de raccordement puissent passer librement et pour pouvoir installer d autres l ments ou appareils annexes par exemple un stabilisateur de tension Ensuite pour que la ventilation puisse fonctionner efficacement lorsque l appareil est en marche 2 V rifier que la paillasse est en bon tat et propre 3 V rifier qu aucun appareil capable de transmettre des vibrations par exemple une centrifugeuse n est install proximit 4 V rifier que le secteur n est pas expos a des conditions d humidit de temp rature ou de poussi re excessives La temp rature ambiante appropri e pour le fonctionnement du spectrophotom tre se situe entre 10 et 40 C 5 Eviter d installer l appareil dans un endroit expos la lumi re solaire directe 6 Ne pas installer l appareil dans un secteur o il existe des champs magn tiques ou des rayo
90. utiliser de nouveaux Syst mes divers PROBL ME CAUSE PROBABLE SOLUTION l interrupteur principal est sur ON mais la L appareil n est pas aliment V rifier l alimentation lectrique centrifugeuse ne fonctionne pas Le couvercle de la centrifugeuse ne s ouvre pas La centrifugeuse est sur OFF Mettre la centrifugeuse sur ON Appuyer sur la poign e et ouvrir le couvercle Le t moin de d s quilibre est activ ll y a des vibrations faible vitesse La vitesse choisie est proche de la fr quence de r sonance Choisir une vitesse plus lev e ou utiliser un autre du rotor type de rotor La vitesse de rotation est variable Les courroies de transmission sont en mauvais tat Eteindre la centrifugeuse V rifier la tension et l tat des courroies Les courroies doivent tre bien tendues La vitesse de rotation n atteint pas la valeur Les charbons sont d fectueux Eteindre la centrifugeuse V rifier l tat des charbons s lectionn e Si c est la cause du probl me remplacer les charbons par de nouveaux ayant les m mes caract ristiques que les charbons d origine Le r glage de la vitesse est mal talonn Etalonner le r glage de la vitesse La cuve est froide mais le rotor est chaud La temp rature n est pas correctement s lectionn e V rifier la s lection de la temp rature L indicateur d tat des charbons est allum Les charbons sont en mauvais tat Eteindre la centrifugeuse V rifier l ta
91. 51 Figure 52 Figure 53 Figure 54 Figure 55 Figure 56 Figure 57 Figure 58 Figure 59 Figure 60 Figure 61 Figure 62 Figure 63 Commandes de l incubateur Lentille convexe convergente Optique de la lentille convergente Sch ma d un microscope Coupe transversale d un microscope T te binoculaire Syst me d clairage Platine porte objet platine m canique Revolver porte objectifs Corps du microscope Sch ma d une pipette Types de pipettes Etapes de l utilisation d une pipette D montage d une pipette Panneau de contr le d un agitateur chauffant Moteur bagues de d phasage Circuit de r frig ration Circuit de contr le du r frig rateur Panneau de contr le d un r frig rateur pour banque de sang Panneau de contr le d un cong lateur ultra basse temp rature Diagramme simplifi de la photom trie par r flectance sur bandelette r active Photographie d une sph re d Ulbricht et diagramme en coupe transversale El ments de base d un photom tre Commandes d un colorim tre portable MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE 101 106 106 107 108 109 109 110 110 111 119 120 121 123 127 129 132 134 135 138 144 145 145 150 REMERCIEMENTS Remerciements Le pr sent manuel est une traduction fran aise de la version r vis e du Manual de mantenimiento para equipo de laboratorio Organisation panam ricaine de la Sant 2005 traduit
92. 600 Manuel d entretien et de MAINTENANCE les appareils de laboratoire 2 dition ZATION a ages Organisation ganization WSS mondiale de la Sant a Catalogage la source Biblioth que de POMS Manuel d entretien et de maintenance des appareils de laboratoire 2e d 1 Laboratoire 2 Maintenance 3 Manuel Organisation mondiale de la Sant Il Organisation Panamericaine de la Sant ISBN 978 92 4 259635 9 Classification NLM WX 147 Organisation mondiale de la Sant 2008 Tous droits r serv s Il est possible de se procurer les publications de l Organisation mondiale de la Sant aupr s des Editions de l OMS Organisation mondiale de la Sant 20 avenue Appia 1211 Gen ve 27 Suisse t l phone 41 22 791 3264 t l copie 41 22 791 4857 adresse lectronique bookorders who int Les demandes relatives la permission de reproduire ou de traduire des publications de l OMS que ce soit pour la vente ou une diffusion non commerciale doivent tre envoy es aux Editions de l OMS l adresse ci dessus t l copie 41 22 791 4806 adresse lectronique permissions who int Les appellations employ es dans la pr sente publication et la pr sentation des donn es qui y figurent n impliquent de la part de l Organisation mondiale de la Sant aucune prise de position quant au statut juridique des pays territoires villes ou zones ou de leurs autorit s ni quant au trac d
93. ABLE DES FIGURES viii REMERCIEMENTS x INTRODUCTION xi CHAPITRE 1 e LECTEUR DE MICROPLAQUES 1 Photographie d un lecteur de microplaques 1 quoi sert un lecteur de microplaques 1 Principes de fonctionnement 1 Conditions requises pour l installation 3 Entretien de routine 3 Guide de d pannage 4 D finitions 5 CHAPITRE 2 LAVEUR DE MICROPLAQUES 7 Photographie d un laveur de microplaques 7 quoi sert un laveur de microplaques 7 Principes de fonctionnement 7 Conditions requises pour l installation 9 Entretien de routine 9 Guide de d pannage 11 D finitions 12 CHAPITRE 3 pH M TRE 13 A quoi sert un pH metre 13 Photographie et l ments d un pH metre 13 Principes de fonctionnement 13 El ments du pH m tre 14 Circuit lectrique type 15 Conditions requises pour l installation 16 Proc dure g n rale d talonnage 16 Entretien g n ral du pH m tre 17 Entretien courant de l lectrode 18 Guide de d pannage 18 D finitions 19 Annexe Th orie du pH 20 TABLE DES MATI RES CHAPITRE 4 e BALANCES Photographies de balances quoi sert une balance Principes de fonctionnement Conditions requises pour l installation Entretien de routine Guide de d pannage D finitions CHAPITRE 5 BAINS MARIE Sch ma d un bain marie Principes de fonctionnement Commandes du bain marie Fonctionnement du bain marie Guide de d pannage D finitions CHAPITRE 6 ENCEINTE DE S CURIT BIOLOGIQUE Illustration d une enceinte de s curit
94. APITRE 8 DISTILLATEUR 54 PRINCIPES DE FONCTIONNEMENT Le fonctionnement du distillateur est bas sur un ph nom ne observ dans la nature et qui est le cycle de l eau L nergie provenant du soleil chauffe l eau des mers et oc ans et en transforme une partie en vapeur d eau Cette vapeur se rassemble sous forme de nuages Dans des conditions atmosph riques appropri es les nuages se refroidissent et l eau se condense et retourne la surface de la Terre sous forme de pluie Fonctionnement du distillateur Le distillateur reproduit le ph nom ne naturel d crit ci dessus La configuration et le mod le de l appareil varient selon le volume d eau distill e que l on d sire obtenir On trouvera ci dessous une pr sentation g n rale des l ments d un distillateur et une explication de leur fonctionnement 1 G n rateur de vapeur Aussi appel bouilleur cet l ment est le r cipient qui contient l eau a distiller En g n ral il est branch sur une arriv e d eau qui permet de remplacer l eau vapor e et distill e Il est en g n ral en verre dans les petits distillateurs et en acier inoxydable avec rev tement de cuivre d tain ou de titane pour les unit s de grande capacit Il peut tre quip de t moins de niveau de d bit et de qualit de l eau d alimentation qui prot gent le distillateur en cas d irr gularit s de l approvisionnement Comme source d nergie il utilise la vapeur d eau provenant d
95. AQUES A QUOI SERT UN LAVEUR DE MICROPLAQUES Le laveur de microplaques est con u pour distribuer de fa on contr l e les tampons de lavage n cessaires l ex cution des tests ELISA De m me l appareil enl ve dans chaque puits les substances restant en exc s apr s la r action Selon le test r alis le laveur peut intervenir de une quatre fois avec distribution du tampon de lavage agitation et aspiration des r actifs non li s apr s la dur e programm e jusqu l ach vement des cycles de lavage L appareil poss de deux r servoirs l un pour le tampon de lavage et l autre pour les d chets g n r s pendant le processus de lavage Photo avec l aimable autorisation de BioRad Laboratories PRINCIPES DE FONCTIONNEMENT Le laveur de microplaques est con u pour effectuer les op rations de lavage lors des tests ELISA Il poss de au minimum les sous systemes suivants qui peuvent diff rer selon les fabricants o Sous syst me de contr le En g n ral le laveur ELISA est contr l par des microprocesseurs qui permettent de programmer et de contr ler les op rations par exemple le nombre de cycles de lavage 1 5 les dur es pr vues la pression de distribution et d aspiration le format des plaques 96 384 puits le r glage de la fonction d aspiration selon le type de puits fond plat fond en V ou a fond en U ou encore des bandelettes les volumes distribu s et aspir s les cycles de trempa
96. Distribution d un liquide en volume constant ou sous forme d une progression Equivalent en poids EP d une substance R sultat de la division du poids mol culaire PM par la valence EP PM g valence Equivalent gramme Eq Masse en grammes du solut divis e par son quivalent en poids EP Eq masse g EP g Molalit m Nombre de moles d une substance donn e pour 1000 g de solvant Une solution de molalit m s obtient en ajoutant m moles de la substance 1000 g d eau Molarit M d un composant d une solution Nombre de moles de solut par litre de solution finie Une solution de molarit n d un sel s obtient en ajoutant n moles de ce sel a de l eau jusqu obtenir un 1 litre de solution Normalement la formule employ e est la suivante _ moles Vol L Mole Poids mol culaire PM du solut exprim en grammes Moles masse g EP Normalit N d un solut Nombre de moles de solut par litre de solution finie __ fq Vol L Poids volume Relation utilis e en chimie clinique exprimant la masse de la solution en grammes ou ses sous multiples par unit de volume en litres ou ses sous multiples Par exemple g l mg ml Solution M lange liquide homog ne de deux ou plusieurs substances Le ou les produits chimiques appel s solut s d terminent en g n ral le nom de la solution La substance dans laquelle le solut est dissous est appel e le solvant Il y a en g n ral une plus grande qua
97. ENT Le diluteur se compose de divers l ments qui interagissent de mani re coordonn e pour manipuler des liquides et m langer des volumes avec une grande pr cision ce qui permet de pr parer des solutions connues en quantit s allant de 1 ul 25 ml Le diluteur se compose en g n ral des l ments suivants 1 Un syst me de propulsion 2 Un syst me de contr le 3 Un syst me de distribution Syst me de propulsion Il est g n ralement constitu d un syst me d placement positif comme on en trouve dans les seringues Le diluteur utilise une ou plusieurs seringues interchangeables de capacit variable pour contr ler le volume m langer ou diluer Le piston des seringues est d plac par un m canisme qui contr le sa position Les volumes aspir s ou d livr s se calculent par la formule V Adl dans laquelle V fraction du volume d livr par la seringue lorsque le d placement du piston est gal l A aire du piston Le volume total aspir ou d livr est donn par l int grale correspondante v Alo dans laquelle et correspondent aux positions qui d finissent le d placement du piston Figure 23 Commandes du diluteur Le contr le du d placement des pistons facilite le contr le des volumes manipul s Le syst me de d placement est activ par un moteur lectrique qui met en mouvement un syst me m canique tr s pr cis pour modifier la position du pisto
98. Efficiency Particulate Air 35 CHAPITRE 6 ENCEINTE DE S CURIT BIOLOGIQUE Types d enceintes de s curit biologique Type d enceinte avec illustration Caract ristiques CLASSE I TYPE A Protection de l op rateur et de l environnement Vitesse de l air l entr e dans l enceinte 38 cm s Convient pour le travail avec des agents correspondant D Vers la conduite d vacuation aux niveaux de s curit biologique 1 2 ou 3 Filtre HEPA Syst me de filtration filtre HEPA situ dans le syst me n d vacuation qui peut ou non tre reli l ext rieur Air contamin Zone de travail oa Air entrant Inconv nient Ne prot ge pas l chantillon qui y est manipul COUPE LAT RALE CLASSE Il TYPE A Protection de l op rateur du produit et de l environnement Vitesse de l air l entr e dans l enceinte 38 cm s Air filtr par filtre HEPA Filtre HEPA d vacuation Convient pour le travail avec des agents correspondant aux niveaux de s curit biologique 1 2 ou 3 Vitre frontale 1 Filtre HEPA d vacuation Syst me de filtration deux filtres HEPA l un situ sur la surface de travail et l autre sur le syst me d vacuation qui peut tre ou non reli l ext rieur Si le syst me d vacuation est reli l ext rieur la Pl num post rieur connexion se fait par un manchon
99. IEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE 4 Le plancher de la pi ce doit tre plan et horizontal 5 L espace libre autour de l enceinte recommand par le fabricant doit tre respect De m me la hauteur de la pi ce doit tre v rifi e la hauteur sous plafond doit tre suffisante pour que le fonctionnement de l enceinte ne soit pas entrav 6 Les enceintes de type B doivent poss der une conduite d vacuation quip e de vannes de r gulation qui permettent d isoler et de r guler le flux d air 7 Les raccords pour l arriv e de gaz doivent tre situ s proximit imm diate de l enceinte afin de faciliter le branchement sur les robinets de service 8 l enceinte doit faire l objet d une certification annuelle pour v rifier qu elle satisfait la norme NSF 49 UTILISATION DE L ENCEINTE DE S CURIT BIOLOGIQUE L utilisation correcte de l enceinte de s curit biologique implique le respect des instructions suivantes 1 Planifier l avance le travail qui sera effectu dans l enceinte de s curit biologique D terminer quelles proc dures et quel mat riel seront utilis s Coordonner l horaire d utilisation de l enceinte avec les autres membres du personnel de laboratoire afin d viter les interruptions ou les all es et venues pendant que l enceinte est en service 2 Allumer l enceinte Si la lampe UV est allum e l teindre Allumer le tube fluorescent et le ventilateur de l enceinte V
100. L INSTALLATION 1 Il faut un environnement propre sans poussi re vapeurs ni fum es et non expos la lumi re solaire directe 2 D baller l appareil avec soin et le cas ch ant l assembler selon les instructions du fabricant 3 Placer l appareil sur une paillasse solide et si n cessaire proximit pas plus de 1 5 m d une prise de courant reli e la terre a La prise de courant doit tre reli e la terre pour garantir la protection et la s curit de l op rateur et de l appareil Les colorim tres fonctionnent en Figure 63 Commandes d un colorim tre portable g n ral sous 110 120 V 60 Hz ou 220 230 V 50 Hz b Sil appareil ne fonctionne pas sur piles le prot ger des sautes de courant par un stabilisateur de tension 4 Suivre les instructions du fabricant pour l installation des divers mod les 5 Pour plus de s curit l appareil peut tre rang dans une armoire fermant cl lorsqu il n est pas utilis Ce n est peut tre pas possible pour les grands mod les mais on peut les prot ger d une autre fa on si on le juge n cessaire UTILISATION DU COLORIM TRE Seul un personnel qualifi et autoris doit pouvoir utiliser le colorim tre La proc dure d crite ci dessous s applique un colorim tre portable avec filtres int gr s et affichage num rique Pour les autres mod les les proc dures peuvent tre diff rentes et il faudra se reporter au manuel d utilisation fourn
101. Manchon d jection de la pointe r f rence doivent tre d ment talonn s par des organismes nationaux ou A internationaux charg s de v rifier la conformit aux talons internationaux de mesure PHOTOGRAPHIES ET SCH MA DE PIPETTES Pipette simple Pipette multicanaux Photo avec l aimable autorisation de Eppendorf AG Photo avec l aimable autorisation de Gilson S A S 119 CHAPITRE 16 PIPETTES A QUOI SERT UNE PIPETTE Les pipettes sont des dispositifs largement utilis s dans les laboratoires d analyses m dicales et dans les laboratoires de recherche pour distribuer des quantit s exactes de liquides PRINCIPES DE FONCTIONNEMENT La pipette m canique ou pipette a piston fonctionne en g n ral par transmission de la force exerc e manuellement sur le bouton poussoir du piston La tige du piston est raccord e au corps du piston qui se d place dans un cylindre de longueur fixe en for ant un volume pr d termin de liquide vers l ext rieur ou l int rieur de la pipette Il existe deux types de pipettes a piston la pipette a volume fixe avec un volume de liquide pr d termin appel volume nominal VN et la pipette a volume variable qui permet d ajuster le volume d livr dans un intervalle d termin qui d pend des sp cifications de la pipette Le r glage du volume se fait en modifiant la course du piston dans le cylindre Dans les pipettes volume variable le volume nomi
102. NT Les bains marie sont r alis s en acier et sont en g n ral recouverts d une peinture lectrostatique offrant une bonne adh rence et une forte r sistance aux conditions environnementales du laboratoire Les bains marie ont un panneau de contr le ext rieur sur lequel se trouvent les commandes Ils poss dent Figure 17 R sistances immersion et externes galement une cuve en mat riau inoxydable et dont le fond est garni de r sistances lectriques Ces r sistances servent transmettre la chaleur au milieu liquide eau ou huile jusqu ce qu il ait atteint la temp rature s lectionn e au moyen d un dispositif de contr le thermostat ou dispositif similaire Les r sistances peuvent tre de deux types a Re Robinet de vidange externe 31 CHAPITRE 5 BAINS MARIE 32 Certains types de bain marie poss dent une s rie d accessoires tels que syst mes d agitation ou circulateurs produisant un mouvement soigneusement contr l au sein du milieu de chauffage pour maintenir l uniformit de la temp rature Le tableau ci dessous d crit les principaux types de bain marie Gage Gamme de temp rature Basse De la temp rature ambiante 60 C eee De la temp rature ambiante a 100 C De la temp rature ambiante a 275 C Lorsque des temp ratures sup rieures a 100 C sont n cessaires il faut utiliser un liquide autre que de l eau car l eau bout 100 C dans les conditions norm
103. Newton ainsi que l explication du syst me de coordonn es inertielles peuvent tre consult es dans les manuels de physique chapitres sur le mouvement circulaire uniforme 2 FCR Force Centrifuge Relative 3 Les num ros identifiant chaque l ment correspondent ceux qui figurent sur la coupe transversale de la centrifugeuse MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE Types de rotors Les centrifugeuses utilisent de nombreux types de rotors Les plus couramment utilis s sont d crits ci dessous Type de rotor Caract ristiques Coupe transversale Rotors angle fixe Aussi appel s rotors angulaires Ce sont les rotors d usage courant Les tubes sont maintenus un angle a fixe sp cifi selon le mod le entre 20 et 45 degr s On les utilise pour s dimenter des particules infracellulaires L angle raccourcit la trajectoire des particules et le temps de s dimentation par rapport aux rotors godets oscillants Rotors godets oscillants Aussi appel s rotors libres On les utilise pour effectuer des tudes isopycniques s paration par densit et des tudes de s paration zonale s paration par taille lorsqu une r solution maximale des zones est requise pour un chantillon Position en rotation Position au repos Rotors tubes verticaux Aussi appel s rotors verticaux Avec ce type de rotors les tubes restent parall les l axe de rotation Il se forme donc des band
104. QUE QUOI SERVENT LES ANALYSEURS DE CHIMIE Au laboratoire d analyses m dicales l analyseur de chimie est utilis pour mesurer une ou plusieurs substances analytes comme le glucose l ur e la cr atinine l h moglobine le cholest rol etc dans le sang l urine le s rum ou le plasma Il sert galement effectuer des tests de fonction h patique PRINCIPES DE FONCTIONNEMENT Analyseur en chimie s che L analyseur en chimie s che est un photom tre r flectance La figure 27 du chapitre 11 montre l interaction de la lumi re avec la mati re et notamment la r flexion dont la mesure est appel e r flectance Le photom tre r flectance donne une mesure quantitative de l intensit d une r action chimique ou biochimique produisant une couleur sur une surface par exemple lame de microscope bandelette r active b tonnet r actif ou patch La lumi re est mise une longueur d onde sp cifique sur la bandelette par la source lumineuse de l appareil par exemple une diode lectroluminescente ou DEL Le produit color absorbe cette longueur d onde lumineuse Plus la concentration de la substance analyser dans l chantillon est lev e plus la coloration est intense et moins la lumi re est r fl chie Le d tecteur de l appareil mesure la r flectance de cette r action color e enzymatique ou chimique sur le b tonnet r actif ou la bandelette r active et la convertit en un signal lectronique Ce sig
105. TINE Les proc dures d entretien d crites ci apr s concernent uniquement le lecteur de microplaques L entretien du laveur de microplaques est d crit au chapitre 2 Entretien courant Fr quence une fois par jour 1 V rifier que les capteurs optiques de tous les canaux sont propres S ils sont sales nettoyer la fen tre des metteurs de lumi re et des capteurs avec une petite brosse 2 S assurer encore une fois que le syst me metteur de lumi re est propre 3 V rifier que l talonnage du lecteur est correct Au d but de la journ e de travail laisser le lecteur chauffer pendant 30 minutes Ensuite faire une lecture blanc puis lire une plaque enti re de substrat Les valeurs obtenues doivent tre identiques Si non faire pivoter la plaque et r p ter la lecture pour d terminer si la diff rence vient de la plaque ou du lecteur 4 Examiner le syst me de d placement automatique du tiroir porte plaque Le d placement doit tre constant et sans COUPS Entretien pr ventif Fr quence une fois par trimestre 1 V rifier la stabilit de la lampe Utiliser la plaque d talonnage et faire des lectures avec la m me plaque intervalles de 30 minutes Comparer les r sultats Ils ne doivent pas pr senter de diff rences 2 Nettoyer le syst me optique du d tecteur et le syst me metteur de lumi re 3 Nettoyerle tiroir porte plaque 4 V rifier l alignement de chaque puits avec les syst mes m
106. UEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE Tableau de classification des poids de r f rence selon l OIML ae Fr quence de Poids en acier inoxydable sans marques ni cavit de 0 5 ppm sur 1 kg 1 3 de la tol rance r glage Poids en acier inoxydable sans marques ni cavit de 1 5 ppm sur 1 kg 1 3 de la tol rance r glage F1 Poids en acier inoxydable avec bouton viss pour prot ger 5 ppm sur 1 kg 1 5 de la tol rance 1 an la cavit de r glage Poids plaqu s bronze 15 ppm sur 1 kg 1 5 de la tol rance dan M1 Poids en bronze ne rouillent pas ne se corrodent pas o poids en fonte avec finition peinture de haute wate 50 ppm sur 1 kg 1 5 de la tol rance Poids en bronze ou en fonte poids commerciaux 200 ppm sur 1 kg 1 5 de la tol rance dan Tableau d utilisation des poids standard en fonction de la capacit de la balance R solution Capacit Lusqu 200g M EN ARE CS D D CC 1 30kg Cwm e m pe fe e Le soars w mm p mn e _ wewa m mm nv e Toute proc dure d talonnage doit tre r alis e avec des poids standard Les r sultats obtenus doivent tre analys s afin de d terminer s ils se situent dans les tol rances admises Les poids standard doivent tre choisis en fonction de la capacit de la balance Le tableau ci dessus compl te le pr c dent Il aide d terminer quels sont le
107. a centrifugeuse sur pied a poser sur le sol PRINCIPES DE FONCTIONNEMENT Les centrifugeuses repr sentent une application pratique de la loi de Newton Lorsqu un corps de masse m tourne autour d un point central O il est soumis une force centrip te N dirig e vers l axe de rotation avec une intensit r pondant a la formule N mw R dans laquelle m est la masse du corps R le rayon et w la vitesse angulaire Les centrifugeuses poss dent un axe de rotation sur lequel est mont un rotor muni de compartiments destin s recevoir les chantillons La vitesse tangentielle est d finie par la relation VT WR 45 CHAPITRE 7 CENTRIFUGEUSES Lorsque le syst me tourne une vitesse de w radians par seconde les chantillons sont soumis la force centrifuge Fp de m me intensit que N mais de direction oppos e La figure ci dessous pr sente sous une forme sch matique cette notion ses applications et le r sultat obtenu La force Fp s exerce sur les particules pr sentes dans la substance centrifug e et les s pare en fonction de leur diff rence de densit Les particules les plus denses se d poseront au fond du tube dans un temps assez bref tandis que les particules plus l g res n cessitent un temps plus long et se d posent au dessus des particules denses La relation entre l acc l ration de la force centrifuge w r pour un rayon donn r et l acc l ration de la pesanteur g est connue sous le nom de force cen
108. a pipette est en position verticale Cette tape correspond la position 1B la premi re en partant de la gauche sur la figure 52 4 Tirer doucement sur le piston pour que la pipette aspire le liquide position 2A V rifier que le piston est enti rement remont Attendre au moins deux secondes avant de sortir la pointe du liquide 5 Placer la pointe de la pipette contre la paroi du tube receveur V rifier que l angle form par la pointe avec la paroi du tube se situe entre 30 et 45 Si le tube receveur contient d j du liquide viter d y plonger la pointe de la pipette position 3A 6 Distribuerle contenu de la pipette en appuyant doucement mais fermement sur le piston jusqu au premier cran position 4B Laisser la pointe de la pipette au contact de la paroi du tube Faire doucement glisser la pointe le long de la paroi du tube jusqu a une distance de 8 a 10 mm du bord du tube pour assurer qu il ne reste aucune goutte de liquide sur la pointe de la pipette 7 Appuyer doucement sur le piston jusqu au deuxi me cran position 5C Cela permet d expulser toute fraction de liquide restant dans la pointe de la pipette en chassant l air r siduel par l orifice de la pointe Maintenir le piston au deuxi me cran tout en retirant la pipette du tube receveur Une fois la pipette sortie du tube lib rer doucement le piston jusqu au cran sup rieur 8 Jeter la pointe de la pipette Pour cela appuyer sur le bouton d
109. a longueur et du nombre de divisions de l chelle plus il y a de divisions plus la lecture est exacte Leur principal inconv nient est que la lecture peut tre incorrecte du fait de la fatigue de l op rateur ou de la confusion entre plusieurs cadrans Les indicateurs num riques aussi appel s affichage digital affichent les r sultats sous forme de chiffres lumineux sur un cran De ce fait les erreurs de lecture sont plus rares CONDITIONS REQUISES POUR L INSTALLATION Pour que le spectrophotom tre fonctionne correctement les conditions suivantes doivent tre remplies 1 Une alimentation lectrique r pondant aux normes nationales Par exemple dans les pays d Am rique le r seau est en g n ral aliment en 110 V 60 Hz alors qu ailleurs dans le monde il est aliment en 220 230 V 50 60 Hz 2 Unenvironnement propre sans poussi re 3 Une table de travail stable l cart des appareils qui produisent des vibrations centrifugeuses agitateurs ENTRETIEN DU SPECTROPHOTOMETRE Les spectrophotom tres sont des appareils tr s sp cialis s et tr s co teux Leur int grit d pend en grande partie de la fa on dont ils sont install s et utilis s Leur environnement direct et la qualit de l alimentation lectrique sont des facteurs de premi re importance pour que ces appareils fonctionnent conform ment aux sp cifications L entretien de routine se compose de t ches de complexit variable allant du n
110. a technique ELISA Les tapes de la technique ELISA du point de vue biochimique sont les suivantes 1 Les puits de la microplaque sont recouverts d une couche d anticorps ou d antig nes 2 Les chantillons les t moins ou contr les et les talons sont ajout s dans les puits et incub s des temp ratures allant de la temp rature ambiante 37 C pendant une dur e d termin e selon les caract ristiques du test Pendant l incubation l antig ne pr sent dans l chantillon se lie l anticorps d pos sur la plaque ou l anticorps pr sent dans l chantillon se lie l antig ne d pos sur la plaque selon ce qui se trouve dans l chantillon et en quelle quantit 3 Apr s l incubation les antig nes ou les anticorps non li s sont lav s et limin s de la plaque au moyen du laveur de microplaques et d un tampon de lavage appropri 4 On ajoute ensuite un anticorps secondaire appel le conjugu Cet anticorps porte une enzyme qui r agira avec un substrat pour donner un changement de coloration lors d une tape ult rieure 5 Alors commence une deuxi me tape d incubation pendant laquelle le conjugu se lie au complexe antig ne anticorps dans les puits 6 Apr s l incubation on effectue un nouveau cycle de lavage pour liminer le conjugu non li 7 Onajoute alors un substrat L enzyme r agit avec le substrat et provoque un changement de coloration de la solution Ce changement indiquera q
111. a temp rature qui se trouve en g n ral au fond de la cuve 7 Rincer l ext rieur et l int rieur du bain marie l eau claire Lubrification Fr quence une fois par jour Pour les bains marie quip s d un agitateur ou d un circulateur Lubrifier l axe du moteur lectrique du circulateur D poser une goutte d huile min rale sur l axe pour maintenir une bonne lubrification entre les paliers du moteur et son axe Inspection p riodique Fr quence une fois par trimestre Contr ler le thermom tre ou les dispositifs de contr le de la temp rature tous les trois mois au moyen d talons connus Si on ne dispose pas d talons de r f rence utiliser un m lange glace eau et ou de l eau bouillante Noter que le thermom tre ou le dispositif de contr le de la temp rature du bain marie doivent galement tre contr l s lors de la premi re installation de l appareil apr s son achat MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE 33 CHAPITRE 5 BAINS MARIE GUIDE DE DEPANNAGE RO T SOLUTION L appareil ne s allume pas Le bain marie est d branch L interrupteur est d fectueux Le fusible est d fectueux Le bain marie ne chauffe pas La temp rature n est pas s lectionn e Les r sistances sont d fectueuses La temp rature limite n est pas fix e La temp rature est plus lev e que la valeur Le dispositif de contr le de la temp rature est Remplacer le dispositif de contr le de la t
112. abricant La tension d alimentation du microscope doit tre celle sp cifi e par le fabricant Sinon on s expose des risques inutiles qui pourraient affecter la qualit de l clairage Il faut noter que certains microscopes ont des transformateurs internes ou externes et des syst mes de r gulation de la tension Figure 47 Platine porte objet platine m canique 23 6 Condenseur 7 Diaphragme d ouverture 8 Porte filtre 9 Lentille grand champ 21 R glage du condenseur en hauteur 23 Platine porte objet Condenseur Le condenseur r gle la fa on dont la lumi re est concentr e ou contrast e sur l chantillon examiner Il se compose d l ments optiques et m caniques Les l ments optiques sont des lentilles et les l ments m caniques sont ceux qui contr lent la position des lentilles et au moyen d un diaphragme la quantit de lumi re qui atteint l chantillon Normalement les l ments optiques sont affect s par la pr sence de poussi re Il faut l enlever comme pour les autres lentilles en utilisant un pinceau fin en poil de chameau Les l ments m caniques n cessitent des r glages au moyen d outils sp ciaux chaque fabricant ayant ses propres mod les L entretien courant porte sur le nettoyage le r glage et la lubrification Platine porte objet La platine du microscope se compose d une s rie d l ments qui interagissent pour contr ler la position de l chantillo
113. age de papier dans l imprimante Enlever l exc dent de papier avec des pinces fines Eteindre l imprimante enlever le papier et rallumer l imprimante Le papier n est pas install correctement Eteindre l imprimante remettre le rouleau de papier en place L avant du papier n est pas align ou est froiss Eteindre l imprimante Remettre le rouleau de papier L alimentation en papier de l imprimante ne fonctionne pas ou le papier n avance pas automatiquement en place Couper l avant du papier et r aligner le papier dans le syst me d alimentation La commande d alimentation en papier ne r pond Appeler le repr sentant pas La cuve n est pas de la bonne taille Utiliser la taille de cuve sp cifi e par le fabricant La cuve ne rentre pas dans le compartiment porte chantillon Le m canisme d ajustement de la cuve est mal Corriger la position du m canisme d ajustement positionn La lecture est fluctuante ll y a des interf rences sur le trajet de la lumi re V rifier que la cuve n est pas ray e V rifier qu il n y a pas de particules flottant dans la cuve Frotter les parois optiques de la cuve avec un chiffon propre V rifier que l intervalle de travail s lectionn convient pour l chantillon analyser La lecture indique des valeurs n gatives II n y a pas i ion de lecture de l absorbance eae i a ee La cuve est mal positionn e V rifier l orientation de la fen tre de la cuve Il
114. aire est r alis lorsque le nombre de Reynolds Re est inf rieur 3000 Lumi re ultraviolette UV Rayonnement lectromagn tique dont la longueur d onde se situe entre 200 et 390 nm Elle est utilis e dans les enceintes de s curit biologique pour ses propri t s germicides NSF Sigle correspondant National Sanitation Foundation organisation but non lucratif d di e la recherche l ducation et aux services qui uvre la r solution de probl mes concernant l tre humain la promotion de la sant et l enrichissement de la qualit de vie par la conservation et l am lioration de l environnement Les normes NSF tablissent les crit res de base pour la promotion de la salubrit de l environnement et la protection de la sant publique Plan de travail Surface utilis e pour ex cuter des travaux manipulations ou autres activit s l int rieur de l enceinte de s curit biologique Toxique Substance ayant des effets physiologiques ind sirables sur les syst mes biologiques Chapitre 7 Centrifugeuses banque de sang Le terme centrifugeuse vient des mots latins centrum qui signifie centre et fugere qui signifie fuir La centrifugeuse utilise la force centrifuge produite par un mouvement rotatif pour s parer les constituants d un m lange Il existe une vaste gamme de centrifugeuses adapt es aux besoins de l industrie et de la recherche Le pr sent chapitre traite des centrifugeuses norm
115. alement utilis es dans les laboratoires de sant publique et d analyses m dicales PHOTOGRAPHIE D UNE CENTRIFUGEUSE MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE Photo avec l aimable autorisation de Beckman Coulter Code GMDN 15115 10778 10778 Code ECRI 15 115 15 117 15 116 MTEL Centrifugeuses sur pied basse Centrifugeuse sur Centrifugeuse sur vitesse non r frig r es pour pied r frig r e pied A QUOI SERT UNE CENTRIFUGEUSE La centrifugeuse utilise la force centrifuge force g n r e lors de la rotation d un objet autour d un point fixe pour s parer des solides en suspension dans un liquide par s dimentation ou pour s parer des liquides de diff rentes densit s Les mouvements de rotation permettent de g n rer des forces beaucoup plus importantes que la pesanteur pendant des dur es contr l es Au laboratoire les centrifugeuses sont en g n ral utilis es pour des processus tels que la s paration par s dimentation d l ments solides pr sents dans des liquides biologiques et en particulier des l ments figur s du sang globules rouges globules blancs et plaquettes entre autres et pour r aliser de nombreux tests et traitements Il existe plusieurs sortes de centrifugeuses Les plus utilis es en sant publique pour la surveillance et dans les laboratoires d analyses m dicales sont la centrifugeuse de paillasse l ultracentrifugeuse la centrifugeuse a h matocrite et l
116. ales Haute temp rature Ce type de bain marie utilise en g n ral des huiles dont le point d bullition est beaucoup plus lev Isol De la temp rature ambiante 100 C avec accessoires et ou agitation bains marie eau COMMANDES DU BAIN MARIE Les bains marie ont en g n ral des commandes tr s simples Certains fabricants utilisent des commandes avec microprocesseurs variables selon le type d appareil La figure ci dessous montre le panneau de contr le d un bain marie standard Figure 18 Commandes du bain marie 5 T moin 1 Interrupteur 4 Ecran de marche ON marche arr t ON OFF 2 Touche Menu Y 3 Touches de r glage des param tres 6 T moins d chelle de temp rature C F Le panneau de contr le comporte les l ments suivants 1 L interrupteur marche arr t ON OFF 2 Une touche Menu pour s lectionner les param tres de fonctionnement temp rature de fonctionnement temp rature d alarme chelle de temp rature C F 3 Deux touches pour le r glage des param tres 4 Un cran 5 Une lampe t moin de fonctionnement 6 Deux lampes t moins pour identifier l chelle de temp rature C F FONCTIONNEMENT DU BAIN MARIE Installation 1 Installer le bain marie proximit d une prise de courant Celle ci doit tre reli e a la terre pour garantir la protection et la s curit de l op rateur et de l appareil Les bains marie fonctionnen
117. am nagement compl mentaire pour assurer son bon fonctionnement Le sch ma de la figure 33 montre l espace n cessaire autour de l autoclave proximit imm diate de l appareil en fonctionnement la temp rature peut d passer 70 C Le plancher doit tre bien horizontal et r alis en mat riaux r sistants la chaleur et l humidit 2 Uneprise de courant capable de supporter la consommation lectrique de l appareil Si l autoclave est autonome c est dire s il poss de son propre g n rateur de vapeur le branchement lectrique doit tre tudi en d tail car la puissance n cessaire pourrait tre nettement augment e La puissance n cessaire pour que le g n rateur de vapeur fonctionne est en g n ral de 21 38 ou 48 KW et m me plus La prise doit tre quip e des l ments de s curit et de protection requis Les autoclaves n cessitent en g n ral une alimentation en 220 V 60 Hz ou en courant triphas 380 V 60 Hz 3 Une prise d eau capable de supporter la consommation de l appareil en volume et en pression plus la capacit de l autoclave est grande plus la consommation d eau sera importante L eau alimentant l autoclave devra tre trait e pour liminer les solides en suspension qui pourraient nuire au fonctionnement des lectrovannes et des dispositifs lectro hydrauliques 4 Certains st rilisateurs n cessitent une alimentation en air comprim car leurs commandes sont r gie
118. ans le fond de l incubateur sur la plaque qui prot ge les r sistances chauffantes 4 Utiliser des l ments de protection personnelle lors de l utilisation de l incubateur lunettes de protection gants et utiliser des pinces pour d poser et enlever les r cipients 5 Eviter de se tenir devant un incubateur ouvert Certaines substances mettent des vapeurs qui ne doivent pas tre inhal es 6 Etalonner l incubateur l endroit o il est install pour v rifier son uniformit et sa stabilit 7 V rifier la temp rature de fonctionnement le matin et le soir avec des instruments talonn s et certifi s thermom tre thermocouple etc 8 Enregistrer sur le document ou le formulaire appropri toute anomalie d tect e temp rature humidit teneur en CO et les mesures correctrices n cessaires 9 A faire chaque jour V rifier que la temp rature dans l incubateur ne varie pas de plus de 1 C 1 C Noter la temp rature 10 S il faut mettre de l eau dans l enceinte d incubation pour maintenir un degr d humidit d termin lui ajouter un inhibiteur microbien non volatil Recommandations pour le nettoyage Nettoyer r guli rement les incubateurs pour cultures bact riennes ou cellulaires au moins tous les 14 jours et apr s toute projection accidentelle de mat riel infectieux en utilisant un d sinfectant appropri 1 D brancher l incubateur avant de commencer le nettoyage 2 Utiliser
119. aptateur ne peut tre retir de la t te du ll y aun d faut dans le syst me lectronique R initialiser l appareil Eteindre et rallumer distributeur l interrupteur S lectionner l option d extraction manuelle Il y a un d faut dans le m canisme d ajustement V rifier si le piston se d place d avant en arri re et inversement Retirer le cylindre au dessus d un bac d chets L embout du syst me de dosage adaptateur goutte L embout est d fectueux Remplacer le dispositif de dosage Le syst me de dosage de type pipette goutte L embout doseur n est pas bien ajust Enlever l embout doseur du raccord conique Le remettre en place correctement L embout doseur a t incorrectement s lectionn V rifier le type d embout recommand par le fabricant Le piston ou le joint du piston sont endommag s Remplacer le piston et les joints Utiliser les pi ces de rechange fournies par le fabricant L cran indique une erreur de remplissage La quantit de liquide est insuffisante pour le V rifier que le volume disponible pour la distribution distributeur est suffisant Si non charger ou aspirer un volume suffisant pour la quantit distribuer L cran affiche une erreur de volume total L appareil a aspir plus de liquide que l adaptateur ou Ejecter tout le liquide V rifier le fonctionnement lors l embout doseur ne peut recevoir d un nouvel essai L cran affiche une erreur de s lection de l embout L embout
120. asse solide pr s d une prise de courant pour les appareils ne fonctionnant pas sur piles a La prise de courant doit tre reli e la terre pour assurer la protection et la s curit de l op rateur et de l appareil Les analyseurs de chimie fonctionnent en g n ral sous 110 120 V 60 Hz ou 220 230 V 50 Hz b Les analyseurs ne fonctionnant pas sur piles doivent tre prot g s des sautes de tension par un stabilisateur de tension 4 Suivre les sp cifications du fabricant pour l installation des diff rents mod les 5 Conserver l emballage d origine de l appareil pour une utilisation future ou pour renvoyer l appareil en r paration 6 Pour plus de s curit certains mod les d analyseurs peuvent tre rang s dans un placard fermant cl lorsqu ils ne sont pas utilis s UTILISATION DE L ANALYSEUR EN CHIMIE S CHE Seul un personnel qualifi et autoris doit pouvoir utiliser l analyseur en chimie s che La proc dure d crite ci dessous s applique a un type d appareil d termin Pour les autres mod les se reporter au manuel d utilisation fourni par le fabricant 1 Brancher l appareil sur la prise de courant et l allumer 2 Le temps de chauffage s affiche en secondes Pour les autres appareils attendre 15 minutes avant de commencer les mesures ou suivre les indications du fabricant Figure 62 El ments de base d un photom tre Noter que sur certains appareils le filtre est plac entre la cuve et le
121. ateurs et cong lateurs ont leur base un syst me de calage qui permet de compenser les petites irr gularit s du plancher Il est d usage de laisser un espace de 15 cm sur les c t s et l arri re de l appareil pour faciliter la ventilation du condenseur 5 Eviter d installer l appareil dans un endroit expos la lumi re solaire directe ou pr s d une source de chaleur comme un radiateur ou autre appareil de chauffage Se souvenir que plus la diff rence de temp rature entre l environnement et le condenseur est grande plus le processus de transfert de la chaleur sera efficace MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE 133 CHAPITRE 18 R FRIG RATEURS ET CONG LATEURS CIRCUIT DE CONTR LE DU R FRIG RATEUR Le sch ma de la figure 57 repr sente un circuit de contr le type que l on trouve dans les r frig rateurs et cong lateurs Il donnera une id e de la fa on dont les divers sous syst mes sont reli s entre eux Le circuit de contr le de chaque mod le varie selon les caract ristiques adopt es par le fabricant Les l ments principaux sont 1 oe L interrupteur principal Il alimente le r frig rateur en courant lectrique L interrupteur de porte II allume la lumi re lorsque la porte est ouverte Le compresseur Les ventilateurs de l vaporateur Le sous syst me de d givrage Linterrupteur les r sistances le temporisateur 5 5 5 5 57 Le sous syst
122. ation et dans lequel circule de la vapeur Ce syst me sert transf rer la chaleur la cuve et r duire la condensation La double enveloppe est reli e la cuve et au tuyau de vidange par des conduites contr l es par des lectrovannes Tous les autoclaves ne poss dent pas une double enveloppe Certains fabricants la remplacent par des r sistances dispos es autour de la cuve de st rilisation 17 Vanne de r gulation de l admission de vapeur Dispositif m canique qui contr le la pression laquelle la vapeur p n tre dans l autoclave Selon le cycle choisi la pression et la temp rature seront diff rentes Plus la pression sera forte plus la temp rature sera lev e Moins la pression sera forte moins la temp rature sera lev e 18 Conduite d alimentation en vapeur Conduite qui transporte la vapeur de la chaudi re ou du g n rateur de vapeur l autoclave 19 Pi ge a vapeur Dispositif destin a exploiter au maximum l nergie thermique de la vapeur Il a pour fonction d emp cher la vapeur de s chapper du syst me Le pi ge permet uniquement la sortie du liquide de condensation form dans la cuve la double enveloppe et les tuyaux de l autoclave 20 Tuyau de vidange Tuyau de collecte et d vacuation du liquide de condensation produit dans l autoclave Actuellement les autoclaves utilisent des syst mes contr l s par microprocesseurs et tous les accessoires vannes et soupapes sont act
123. ation sont les suivantes 1 Actionner l interrupteur principal en appuyant sur le bouton habituellement identifi par le symbole I 2 Appuyer sur la touche Programme 3 S lectionner la temp rature de fonctionnement en appuyant sur la touche jusqu a ce que la temp rature choisie s affiche sur l cran Le processus de chauffage 1 Cet exemple d quation de transfert de la chaleur s applique une r sistance en fil m tallique de section circulaire Pour d autres formes il faut utiliser des quations diff rentes 2 Le temps est compt partir du moment o la temp rature correspondante est atteinte commencera et se poursuivra jusqu ce que la temp rature s lectionn e soit atteinte 4 Avecles tuves programmables il faut suivre les instructions du fabricant pour le r glage des autres param tres tels que le temps les types de chauffage et les alarmes COMMANDES DE L TUVE La figure 37 montre un panneau de contr le tel qu on en trouve sur les tuves modernes On peut reconna tre les l ments suivants 1 L interrupteur principal 2 Des crans indiquant la temp rature actuelle et la temp rature s lectionn e 3 La touche de s lection des param tres Menu 4 La touche de programmation des cycles de fonctionnement 5 Des touches permettant d augmenter et de diminuer la temp rature s lectionn e MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE Chaque fabri
124. atteindre la tension de vapeur du liquide Cela entra ne divers ph nom nes comme la vaporisation de gaz dissous dans le liquide ou dans le cas de l eau la formation de bulles de vapeur qui clatent en un temps infinit simal causant des perforations dans leur voisinage imm diat la surface des tuyaux Ce ph nom ne se produit dans les diluteurs lorsqu on utilise des seringues de grand volume avec une vitesse de propulsion lev e Concentration Mesure de la quantit d une substance chimique pr sente dans une solution Cette notion est exprim e par la quantit d une substance dissoute dans un solvant La concentration s exprime de diverses fa ons les plus courantes tant la molarit M la molalit m la normalit N et le taux de solut en pourcentage Dilution R duction de la concentration d une solution par l addition d autres liquides Le liquide ajout est appel le diluant Addition de mol cules d une substance liquide aux mol cules d une autre substance liquide Pour d terminer le volume V1 de liquide n cessaire pour obtenir le volume V2 la concentration C2 partir d une solution de concentration C1 on applique la formule V VC Tan Processus par lequel un produit chimique sous forme solide est dissous dans un solvant par exemple de l eau ou un autre liquide Le produit chimique mis en solution est appel le solute Distributeur Dispositif utilis pour distribuer des liquides Dosage
125. au distill e Fr quence de temps autre Avant d utiliser un nouveau distillateur d eau il est recommand de s assurer que le r cipient de stockage de l eau distill e est st rile et propre Pour effectuer la st rilisation utiliser une m thode chimique par exemple avec de l eau de Javel ou autre solution chlor e Proc der comme suit 1 2 Il y a de l eau autour du distillateur Il y a de la vapeur autour du distillateur L eau distill e a une odeur V rifier que l interrupteur principal est sur OFF Ouvrir le panneau avant pour acc der au r cipient de stockage de l eau distill e Retirer le filtre au charbon actif de son logement Pr parer une solution d eau de Javel la concentration de 200 ppm et l ajouter dans le r cipient de stockage Laisser la solution agir pendant au moins trois heures Vider le r cipient de stockage par le tuyau de vidange Allumer le distillateur et le faire fonctionner jusqu ce que le r cipient de stockage d eau distill e soit plein Vider de nouveau le r cipient de stockage Remettre le filtre au charbon actif sa place Faire fonctionner le distillateur pour remplir le r cipient d eau distill e Le filtre au charbon actif liminera tous les r sidus de chlore qui pourraient se trouver dans l eau distill e GUIDE DE D PANNAGE Le distillateur ne produit pas d eau distill e La r sistance immersion est hors service La ventilation du syst me
126. au voltage sp cifi sur la plaque de l appareil Certains cong lateurs ultra basse temp rature n cessitent une puissance d environ 12 kW Il est donc indispensable de disposer d un branchement lectrique capable de supporter une telle puissance 2 Choisir un emplacement ayant un plancher solide et de niveau horizontal dans toutes les directions Il doit tre bien ventil et l cart de la lumi re solaire directe et de toutes sources de chaleur Certains fabricants stipulent que la temp rature ambiante doit se situer entre 10 et 32 C Il doit y avoir un espace libre d au moins 15 cm autour de l appareil c t s et arri re La porte doit pouvoir s ouvrir un angle de 90 Normalement les fabricants installent un dispositif de calage la base de l appareil sur les roulettes MISE EN MARCHE Pour comprendre le mode de fonctionnement des cong lateurs ultra basse temp rature un sch ma repr sentant un panneau de contr le similaire ceux qui se trouvent sur ces appareils est donn la figure 59 Il s agit d un sch ma g n rique c est dire qu il y aura certainement des diff rences selon la marque et le mod le Les recommandations qui suivent sont communes tous les cong lateurs Figure 59 Panneau de contr le d un cong lateur ultra basse temp rature Proc dures 1 Brancher le c ble d alimentation lectrique sur la prise de courant 2 Allumer l appareil interrupteur sur ON L cran doit
127. autoclave sur ON 3 Ouvrir la porte de l autoclave Dans les autoclaves de grand volume cette op ration se fait par un processus lectrom canique Elle est souvent manuelle dans les autoclaves de moyen et faible volume 4 Mettre dans la cuve les paniers ou les r cipients de st rilisation contenant le mat riel pr par au pr alable nettoy lav s ch class et emball selon les recommandations du fabricant concernant la r partition des objets st riliser 5 Fermer la porte de l autoclave 6 S lectionner le cycle de st rilisation requis en fonction du type d objets ou de mat riels st riliser En g n ral on appuie sur un bouton correspondant au cycle voulu et celui ci d marre automatiquement A partir de ce moment le processus se d roule comme suit a La phase de pr traitement commence Au cours de cette phase des cycles courts d vacuation et d injection de vapeur dans la cuve de st rilisation se succ dent de fa on extraire l air et st riliser l emballage protecteur des objets b Lorsque l air a t limin le remplissage et la pressurisation de la cuve commencent ce moment la vapeur entre en contact avec les objets st riliser et un processus de transfert de la chaleur se met en place entre la vapeur haute temp rature et les articles st riliser Lors du transfert d nergie thermique une partie de la vapeur se condense et se transforme en eau liquide dans les
128. avec les syst mes d information et des programmes de contr le des processus et de contr le de la qualit qui avec l aide d un ordinateur permettent une automatisation compl te des tests CHAPITRE 1 LECTEUR DE MICROPLAQUES Mat riel n cessaire pour les tests ELISA Pour l ex cution de la technique ELISA il faut 1 Un lecteur de microplaques 2 Un laveur de microplaques chapitre 2 3 Unsyst me de distribution de liquides on peut utiliser des pipettes multicanaux 4 Un incubateur pour incuber les plaques La figure 1 montre comment ces l ments sont reli s entre eux Etapes m caniques de la technique ELISA Utilisation du mat riel Lorsqu on r alise un test ELISA on proc de en g n ral comme suit 1 Un premier lavage de la plaque peut tre r alis au moyen du laveur de microplaques 2 Al aide d un distributeur ou de pipettes multicanaux on remplit les puits avec la solution pr par e pour le test 3 On d pose la plaque dans l incubateur o temp rature contr l e une s rie de r actions se produit Les tapes 1 2 et 3 peuvent tre r p t es plusieurs fois selon le test jusqu ce que les r actifs ajout s aient fini d agir Enfin quand toutes les tapes d incubation sont achev es on transf re la plaque dans le lecteur de microplaques La plaque est lue et on peut en d duire un diagnostic Figure 1 Mat riel utilis pour les tests ELISA Etapes biochimiques de l
129. avec un spectrophotometre Le mot ELISA est l acronyme de Enzyme Linked Immunosorbent Assay et d signe un test bas sur une r action immunoenzymatique Le pr sent chapitre porte sur l utilisation des lecteurs de microplaques pour les tests ELISA Pour des renseignements compl mentaires sur les principes de fonctionnement et d entretien de ces appareils voir le chapitre 11 sur le spectrophotom tre PHOTOGRAPHIE D UN LECTEUR DE MICROPLAQUES A QUOI SERT UN LECTEUR DE MICROPLAQUES Le lecteur de microplaques est utilis pour lire les r sultats des tests ELISA Cette technique a des applications directes en immunologie et en s rologie Parmi ses autres applications figurent la confirmation de la pr sence d anticorps ou d antig nes sp cifiques d un agent infectieux d anticorps pr sents la suite d une vaccination ou d auto anticorps par exemple dans la polyarthrite rhumato de Photo avec l aimable autorisation de BioRad Laboratories PRINCIPES DE FONCTIONNEMENT Le lecteur de microplaques est un spectrophotometre sp cialis Contrairement au spectrophotometre classique qui permet la lecture sur un large ventail de longueurs d onde le lecteur de microplaques poss de des filtres ou des grilles de diffraction qui limitent la gamme de longueurs d onde a celles utilis es dans les tests ELISA en g n ral entre 400 et 750 nm nanom tres Certains lecteurs travaillent dans l ultraviolet et effectuent des analys
130. avers d un chantillon dans une cellule d analyse cuve ou puits Figure 31 Grille de diffraction A diff rence de longueur d onde entre deux rainures adjacentes 80 Chapitre 12 Autoclaves Code GMDN 35366 35366 Code ECRI 13 746 16 141 Unit de st rilisation vapeur D nomination sur pied L autoclave est un appareil utilis pour st riliser Le mot st riliser d signe la destruction ou l limination de toute forme de vie microbiologique y compris sous forme de spores pr sente dans des objets inanim s par des proc d s physiques chimiques ou gazeux Le mot st riliser vient du latin sterilis qui ne porte pas de fruits Ce chapitre traite exclusivement des autoclaves car ceux ci sont largement utilis s dans les tablissements de sant publique les laboratoires d analyses m dicales et les laboratoires de recherche Les autoclaves sont galement appel s st rilisateurs la vapeur d eau La st rilisation doit tre consid r e comme un ensemble coh rent de processus d importance majeure pour que les services de sant publique puissent s effectuer dans des conditions d asepsie rigoureuses st rilisation de mat riels de milieux de culture d instruments Les processus permettant d assurer la st rilit d un objet inanim sont les suivants PHOTOGRAPHIE D UN AUTOCLAVE MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE Unit de st rilisatio
131. bles ou non S ils sont usage unique ne les utiliser qu une seule fois 5 Pour la st rilisation il est n cessaire de v rifier dans quel mat riau sont faits les tubes car tous ne supportent pas la st rilisation par la chaleur Les tubes de verre sont normalement st rilis s la vapeur 121 C pendant 30 minutes 6 Stocker les tubes et flacons dans un endroit frais sec l abri de la lumi re et l cart de toutes vapeurs chimiques et sources de rayonnement ultraviolet 7 V rifier le niveau maximum de remplissage et la fermeture des tubes en verre mince pour viter qu ils ne se brisent dans le rotor sous l effet de la force centrifuge Se conformer aux recommandations du fabricant Maintenance pr ventive Avertissement Ne jamais proc der une intervention technique sur une centrifugeuse qui n aurait pas t d contamin e au pr alable Les proc dures de maintenance de routine les plus importantes effectuer sur une centrifugeuse sont les suivantes Fr quence une fois par mois 1 V rifier que les l ments externes de la centrifugeuse sont exempts de poussi re et de taches Eviter d clabousser le rotor Nettoyer le compartiment du rotor avec un d tergent doux 2 V rifier que les m canismes de connexion et d ajustement du rotor sont en bon tat Lubrifier les points recommand s par le fabricant 3 V rifier le m canisme de verrouillage et de s curit du couvercle de la centrifugeuse
132. bon tat et reli e la terre 2 D brancher l appareil avant toute intervention d entretien 3 Eviter d utiliser l appareil en pr sence de mat riaux combustibles ou inflammables Eviter d utiliser l appareil en pr sence de vapeurs corrosives 4 V rifier soigneusement si les substances ont un point d clair bas Si leurs vapeurs entrent en contact avec la surface de la plaque chauffante cette temp rature cela pourrait provoquer un incendie ou une explosion 5 Lors du travail avec des liquides inflammables utiliser un quipement protecteur gants et lunettes de protection 6 Tenir compte du fait que la surface de l agitateur peut rester chaude longtemps apr s que l appareil a t teint ou d branch 7 Eviter de d poser sur la plaque chauffante a Des lamin s m talliques b Des mat riaux isolants c Dela verrerie bas point de fusion 8 Laisser un espace libre autour de l appareil pour faciliter le raccordement lectrique et pour pouvoir d poser le mat riel et les produits n cessaires Certains fabricants recommandent un espace libre d environ 15 cm 9 Eviter de placer des mat riaux combustibles proximit de l appareil 10 Eviter d utiliser des r cipients dont le poids d passe la capacit indiqu e par le fabricant ENTRETIEN DE ROUTINE L agitateur chauffant est con u pour fonctionner dans des conditions de travail normales et n exige qu un entretien mimimal S il est correctemen
133. bstances conserver Au laboratoire on utilise des syst mes de r frig ration pour conserver des substances comme des r actifs et des mat riels biologiques qui sans cela se d composeraient ou perdraient leurs propri t s En tant que technique la r frig ration assure des conditions qui rendent possible la conservation d l ments tels que le sang et ses d riv s n cessaires pour le diagnostic la surveillance et les services de sant Il est possible d atteindre des temp ratures extr mement basses comme celles qui sont utilis es pour conserver les souches de r f rence 86 C ou d assurer le maintien de temp ratures comprises entre 2 et 8 C qui suffisent pour conserver les r actifs et divers produits biologiques PRINCIPES DE FONCTIONNEMENT Les r frig rateurs et cong lateurs fonctionnent selon les lois de la physique qui r gissent le transfert d nergie en pr sence de diff rences de temp rature En vertu du deuxi me principe de la thermodynamique on sait que si de l nergie thermique doit tre transf r e d un point de basse temp rature un autre point de temp rature lev e une action m canique doit tre produite Les r frig rateurs et cong lateurs modernes sont des syst mes thermiques qui fonctionnent principalement selon un cycle dit de compression qui utilise un gaz r frig rant dot de propri t s sp ciales gr ce auxquelles il effectue le transfert de chaleur Ce chapitre expliq
134. bstances contaminantes et les produits ou proc dures employ s pour la traiter ou la nettoyer 1 Les pipettes st rilisables la vapeur ont une marque qui indiquent cette propri t le fabricant fournit le mode d emploi pour le d montage Maintenance Fr quence deux fois par an Une pipette utilis e quotidiennement doit tre soumise aux proc dures suivantes afin de garantir son bon fonctionnement 1 D monterla pipette Suivre le mode op ratoire d crit dans le manuel d utilisation ce mode op ratoire varie selon la marque et le mod le Normalement on s pare le corps de la pipette du syst me d jection de la pointe en d vissant le corps de la pipette du cylindre 2 Nettoyer les joints toriques la tige du piston et l int rieur du cylindre avant de les lubrifier En cas de contamination accidentelle des l ments internes de la pipette les nettoyer avec un d tergent doux puis l eau distill e Si les joints toriques ou les joints d tanch it doivent tre chang s les joints de rechange doivent avoir les m mes caract ristiques que ceux d origine Le type de joint varie selon la marque le type et le mod le de pipette Figure 53 D montage d une pipette Couvercle de Bouton poussoir la poign e am J l Ejecteur de pointe Poign e Ressort de I jecteur de pointe T Fen tre indicatrice de volume Assemblage Manchon de l jecteur de pointe du piston l Ressort secondaire
135. c e l int rieur d un tube scell On les utilise en g n ral pour chauffer des liquides tels que l eau ou l huile 34 Chapitre 6 MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE Enceinte de s curit biologique Code GMDN 15698 20652 Code ECRI 15 698 20 652 WTEC Mee Enceintes de s curit biologique Ce dispositif est con u pour contr ler les a rosols et microparticules associ s la manipulation de mat riels biologiques potentiellement toxiques ou infectieux lors d activit s telles qu agitation centrifugation utilisation de pipettes et ouverture de r cipients sous pression Les enceintes de s curit biologique aussi appel es postes de s curit microbiologique ou enceintes flux laminaire sont destin es prot ger l utilisateur l environnement et l chantillon gr ce des conditions de ventilation appropri es ILLUSTRATION D UNE ENCEINTE DE S CURIT BIOLOGIQUE Figure 19 Enceinte de s curit biologique LS RR RE aS XXX x5 LI XXE BLASS xX 4 ERRIA Enceintes de s curit biologique classe 20653 20654 20 653 20 654 Enceintes de s curit biologique classe Il Enceintes de s curit biologique classe III A QUOI SERT UNE ENCEINTE DE SECURITE BIOLOGIQUE Lenceinte de s curit biologique est utilis e pour 1 Prot ger l op rateur contre les risques associ
136. cant fournit des instructions d taill es sur le fonctionnement de ces commandes En g n ral elles sont situ es la partie inf rieure de l tuve et sont refroidies par un ventilateur qui fait circuler l air ambiant dans l espace o sont install s les autres l ments lectroniques de l appareil Circuit lectrique La figure 38 montre le circuit lectrique de base pour une tuve qui comprend les l ments suivants 1 Interrupteur principal sert allumer ou teindre l tuve 2 Panneau de contr le Iit controls the oven s functions temperature time type of heating and cooling selected operation modes such as preheating sterilization dehydration preparation drying and even baking 3 R sistances El ments chauffants qui transforment l nergie lectrique en nergie thermique 4 Syst mes indicateurs Dispositifs compl tant le tableau g n ral de commande Ils indiquent si l tuve est allum e ON et en cours de fonctionnement Temp rature actuelle Figure 37 Panneau de contr le lectronique de l tuve OH Temp rature s lectionn e J j Figure 38 Circuit lectrique de l etuve Position Marche ON Interrupteur principal Position Arr t OFF Interrupteur principal Indicateur d tuve Commande g n rale ee de l tuve sous tension ae Prise ee Prise de terre _ ULULI X Indicateur de r sis
137. cellules flux continu etc Dans les spectrophotom tres classiques le porte chantillons est une cellule ou une cuve de forme rectangulaire Les cuves sont r alis es en verre pour les lectures entre 340 et 1000 nm et en silice pour les lectures dans le visible entre 220 et 340 nm Il existe aussi des cuves et autres types de porte chantillons par exemple des microplaques usage unique en plastique comme le styr ne ou le polystyr ne Syst me d tecteur Le syst me de d tection peut se composer de cellules photo lectriques tubes photo lectriques photodiodes ou photomultiplicateurs selon la gamme de longueurs d onde et la sensibilit et la vitesse de r ponse requises Le syst me de d tection re oit la lumi re de l chantillon et la convertit en un signal lectrique d intensit proportionnelle l nergie re ue Ce signal lectrique peut tre trait et amplifi pour tre interpr t par le syst me de lecture Le tableau ci dessous pr sente les avantages et les inconv nients des divers dispositifs normalement utilis s dans les syst mes de d tection Syst me de lecture Le signal qui quitte le d tecteur subit diverses transformations Il est amplifi et transform pour que son intensit devienne un pourcentage proportionnel de la transmittance ou de l absorbance Il existe des syst mes de lecture analogiques qui pr sentent les r sultats sur une chelle de lecture ou num riques qui affich
138. ctifs Xylene Isom re de l thylbenz ne d riv du charbon Utilis comme solvant et dans la pr paration des colorants et des laques Point d bullition 138 144 C formule chimique At H CH wh 117 MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE Chapitre 16 Pipettes Code GMDN 15166 Code ECRI 15 166 Les pipettes sont des dispositifs utilis s pour mesurer ou transf rer de petits volumes de liquides d un r cipient un autre avec une grande pr cision Il existe de nombreux mod les de pipettes Au d but elles taient en verre mais actuellement Figure 50 Sch ma d une pipette Bouton poussoir il en existe une grande vari t On s int ressera surtout ici aux OP ati pipettes volume fixe et aux pipettes volume variable avec r N contr le m canique Des pipettes contr l es par un syst me lectronique ont t r cemment introduites sur le march Le MTOMELE Polghice Gea ipette pr sent chapitre traite de l entretien et de l talonnage des US Piston a Raccord pipettes m caniques Resort tle Joint torique 1 L talonnage doit tre r alis exclusivement par un personnel qualifi et en me se conformant aux normes internationales en vigueur telles que la norme oN BS EN ISO 8655 6 2002 ou ses mises a jour Les instruments de travail de
139. ctivement aux dimensions de l image et de l objet et a et b aux distances entre la lentille et le point o se forme l image et entre la lentille et le point o se situe l objet T te binoculaire 3 Bras du microscope 22 R glage du condenseur en hauteur 21 Bouton de r glage macrom trique et microm trique 20 Bouton de r glage du diaphragme de champ 3 Eclairage 107 CHA PITRE 15 MICROSCOPE El ments du microscope Les principaux l ments des sous syst mes du microscope sont rassembl s dans le tableau ci dessous CONDITIONS REQUISES POUR L INSTALLATION Normalement les microscopes sont aliment s en courant 110 V 60 Hz ou 220 V 60 Hz Certains ont une source lumineuse lieu d une lampe un miroir qui dirige la lumi re vers la lame d pos e sur la platine porte objet Ces microscopes sont surtout utiles dans les zones loign es des centres urbains o il n y a pas d lectricit et o ils sont utilis s par des quipes de sant mobiles Certains types de microscopes n cessitent des installations sp ciales par exemple il faut une chambre noire pour faire des observations avec un microscope fluorescence r gul e qui permet d en ajuster l intensit D autres ont au Figure 44 Coupe transversale d un microscope L gende w me e me T te binoculaire Oculaire Ham eo Tube binoculaire T te binoculaire Revolver porte Revolver porte objectifs objectifs er Objecti
140. culaire appliquer un solvant appropri sur le filetage nettoyer le m canisme de mise au point et remonter l oculaire Si les lentilles de l oculaire sont cass es en raison de circonstances particuli res chutes utilisation inappropri e il faut remplacer l oculaire T te binoculaire L tat de la t te binoculaire a un effet direct sur la qualit de l image fournie par le microscope Ses l ments les plus importants sont les prismes et les miroirs L encrassement des l ments optiques de la t te affecte la qualit de l image La t te binoculaire peut d ailleurs se salir lors du travail normal de laboratoire par exemple lorsqu on change les oculaires qu on installe des accessoires par exemple un appareil photo ou simplement lorsqu on oublie de remettre les protections quand le microscope n est pas en service o Prismes Ils ont des surfaces r fl chissantes argent es qui peuvent se corroder avec le temps et perdre leur pouvoir r fl chissant Certains prismes n ont qu une seule couche de peinture r fl chissante que la lumi re peut traverser Si la surface r fl chissante est endommag e on peut enlever le prisme le nettoyer le polir ou le repeindre le r installer et l aligner dans la t te binoculaire Il s agit d une intervention tr s complexe qui ne peut tre confi e qu un laboratoire sp cialis ou une soci t de maintenance assurant ce type de service Si on enl ve un prisme sans une formation e
141. cuve Ses c t s transparents doivent tre face au rayon lumineux La longueur d onde s lectionn e est incorrecte R gler la longueur d onde sur un intervalle compatible avec l analyse L appareil a t talonn par erreur avec un Etalonner avec une solution blanc ou de l eau chantillon la place d une solution talon distill e MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE Colorim tre non automatique PROBL ME CAUSE PROBABLE SOLUTION La lampe source ne s allume pas Le filament est cass Remplacer la lampe Le fusible a saut Remplacer le fusible Il y a une r sistance dans le filament de la lampe Remplacer la lampe Le voltage est incorrect Contr ler le voltage Contr ler la source d alimentation La lecture du cadran ou du galvanom tre est trop Ajuster le voltage DIASINIAELO NTS Comme ces appareils sont bas s sur le principe du photom tre voir les d finitions la fin du chapitre 11 155 MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE Bibliographie American Society for Testing and Materials Annual book of Standards 1994 Water Hardness Determination Method ASTM D1126 92 Aston R Principles of Biomedical Instrumentation and Measurement Merrill Publishing Company 1990 Blues J Bayliss D Buckley M The calibration and use of piston pipettes National Physical Laboratory Teddigton Middlesex UK 2004 www npl co uk Carter J
142. d placement positif R servoir d chets d alimentation de lavage Pompe d extraction T te de distribution i gi et d extraction D placement l l l horizontal et vertical y l l l Pui Figure 3 Profils de puits UC Fond plat Fond en U Fond enV Lavage facile o Distribution et aspiration simultan es Dans certains types de laveurs les syst mes de lavage et d aspiration fonctionnent simultan ment il se produit une turbulence contr l e l int rieur du puits qui limine les substances qui ne se sont pas li es pendant les phases d incubation o Aspiration depuis le fond des puits Dans ce syst me le cycle d aspiration du liquide contenu dans les puits en g n ral de dur e contr l e commence apr s positionnement de l aiguille pr s du fond des puits Ce syst me peut aspirer de l air en cas de diff rence de niveau de remplissage des r servoirs Etalonnage du laveur Le laveur de microplaques joue un r le d terminant dans la bonne ex cution des tests ELISA On trouvera ci dessous une description des r glages n cessaires pour un fonctionnement efficace de l appareil o Positionnement des aiguilles t te de distribution et d aspiration Le positionnement horizontal et vertical des aiguilles par rapport aux puits doit tre v rifi avec soin Si la plaque a des puits fond plat il faut v rifie
143. de courant Acc s aux l ments lectroniques Fr quence effectuer si n cessaire Les l ments lectroniques de l tuve sont souvent situ s dans la partie inf rieure de celle ci Pour pouvoir les contr ler proc der comme suit 1 D brancher l tuve 2 Avancerl tuve jusqu ce que l avant de sa base soit align avec le bord du plan de travail 3 Placer deux cales d environ 3 cm d paisseur sous chaque support avant Cela soul vera l avant de l tuve et facilitera l inspection des l ments lectroniques lorsque le capot de la partie inf rieure de l appareil sera enlev 4 D faireles vis de fixation du capot de la partie inf rieure et soulever celui ci Contr ler les l ments lectroniques de commande En g n ral les l ments suivants se trouvent dans ce compartiment a Panneau de contr le programmable b Dispositif de s curit c Interrupteur principal et coupe circuit ensemble 5 Remettre le capot en place apr s avoir termin la v rification Remplacement des r sistances chauffantes Fr quence effectuer si n cessaire La proc dure d crite ci dessous doit tre effectu e par un personnel ayant de bonnes connaissances en lectricit 1 D brancher l tuve 2 Enleverle thermom tre qui se trouve la partie sup rieure de la cuve Ouvrir la porte et enlever les tag res D connecter la sonde du thermom tre Enlever les vis de fixation du panneau inf ri
144. de fuite la polarit le fonctionnement du disjoncteur courant de d faut et la r sistance du circuit de mise la terre EVALUATION FONCTIONNELLE AUTRE OPTION S il existe des enceintes de s curit biologique dans le laboratoire mais qu aucun service autoris de certification n est disponible le personnel charg de la maintenance a la possibilit d effectuer les proc dures de r vision annuelle en se basant sur la norme NSF 49 Cette r vision d ment document e doit attester avec un faible niveau d incertitude le bon tat et le fonctionnement normal de l enceinte On trouvera ci dessous les grandes lignes des contr les effectuer 1 Evaluation de l installation V rifier que les conditions d installation de l enceinte sont conformes aux recommandations du fabricant 1 Ces op rations n cessitent une d contamination sp cialis e pr alable 2 L valuation fonctionnelle repose essentiellement sur la pr sence dans l tablissement ou au niveau local de techniciens et d ing nieurs qualifi s et exp riment s MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE 41 CHAPITRE 6 ENCEINTE DE S CURIT BIOLOGIQUE 2 Evaluation op rationnelle V rifier si l enceinte fonctionne On trouvera dans le tableau ci dessous les param tres prendre conform ment ses caract ristiques de conception et de en compte lors de l valuation fonctionnelle Ils figurent en fabrication g n ral dans les
145. de l espagnol en anglais Lors de la r vision de nouveaux chapitres portant sur des appareils couramment utilis s dans certains laboratoires ont t ajout s et des mises jour ont t effectu es pour permettre une utilisation de ce manuel l chelle mondiale La traduction fran aise a t r alis e par Mme Annie Bertouille et r vis e par Mme Mercedes P rez Gonzalez sous la direction du Dr Gaby Vercauteren Organisation mondiale de la Sant Gen ve Suisse L OMS exprime sa gratitude aux personnes qui ont particip tous les niveaux l laboration du pr sent manuel Elle souhaite en particulier remercier de leur contribution le Dr Jorge Enrique Villamil qui a r dig la premi re dition du Manuel en 2005 Manual de mantenimiento para equipo de laboratorio ISBN 92 75 32590 1 ainsi que le Dr Jean Marc Gabastou et M Antonio Hernandez r viseurs au d partement M dicaments essentiels vaccins et technologies sanitaires de l OPS L OMS souhaite galement remercier les fabricants qui ont autoris l utilisation de leurs images pour la pr sente publication NOTE Au moment de la publication du pr sent manuel la traduction officielle de la terminologie li e au syst me de nomenclature GMDN Global Medical Device Nomenclature n tait pas disponible Le projet de traduction men par la Commission Europ enne est n anmoins en cours La terminologie utilis e dans ce manuel est bas e sur une traduction technique
146. de la seringue raccords Pour les petits volumes se conformer aux dimensions recommand es par le fabricant Une bulle d air appara t sur la pointe de la sonde Remplacer ou nettoyer le tuyau d aspiration apr s la derni re aspiration Le tuyau d aspiration est sale Le mode d aspiration est incorrect R duire la vitesse d aspiration ll y a des cavitations dans le syst me La vitesse R duire la vitesse du syst me de propulsion Se d aspiration est tr s lev e souvenir que plus les liquides sont visqueux plus la vitesse de propulsion doit tre faible ll y a de l air en permanence ou des fuites en permanence sur le circuit de liquide Les raccords sont mal ajust s us s ou d fectueux Ajuster les raccords la main Remplacer les tuyaux par de nouveaux ayant des dimensions correspondant aux liquides manipul s Le piston est d fectueux ou la seringue est endommag e Remplacer le piston ou la seringue Une des valves est d fectueuse Remplacer la valve Le diluteur chauffe La ventilation est insuffisante Contr ler la ventilation La temp rature de la pi ce est trop lev e V rifier la climatisation de la pi ce Le cycle de travail est tr s intense Utiliser le diluteur de fa on moins intensive 63 CHAPITRE 9 DILUTEUR 64 DAANEN Cavitations Ph nom ne qui se produit dans un liquide lorsqu il se forme un vide pendant l vacuation d un r cipient La pression diminue jusqu
147. de r frig ration ne fonctionne pas CAUSE PROBABLE Il n y a pas d alimentation lectrique Le montage du distillateur ou de certains de ses l ments est d fectueux La ventilation du distillateur est insuffisante SOLUTION V rifier que le cable d alimentation lectrique est correctement branch V rifier qu il y a du courant dans le circuit lectrique qui alimente le distillateur V rifier que l interrupteur principal est sur ON Contr ler qu il y a de l eau dans le g n rateur de vapeur ou le bouilleur V rifier l int grit de la r sistance immersion Mesurer le passage du courant lectrique ou la r sistance en ohms Remplacer la r sistance par une autre ayant les m mes caract ristiques Contr ler le filtre pour v rifier qu il est bien install et que l eau passe au travers V rifier que le r cipient de stockage du distillat est bien positionn V rifier que le dispositif de vidange ne fuit pas V rifier qu il y a un espace libre autour du distillateur et derri re V rifier qu aucun objet ne g ne la circulation de l air autour du distillateur Enlever tout objet g nant la circulation de l air V rifier l tat du ventilateur S il est sur ON et ne fonctionne pas le remplacer par un autre ayant les m mes caract ristiques Le filtre charbon est us Remplacer le filtre charbon actif MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE DAANEN D
148. de raccordement Flux laminaire vertical Recycle environ 70 du volume d air et en renouvelle i 3 Ve i Zone de travail 30 Entr e d air y __ Grille arri re Grille avant x Moteur du ventilateur Air potentiellement ___ Bouche d aspiration contamin du ventilateur Ouverture frontale 1 Voir la classification des agents en niveaux de s curit biologique dans la section S curit biologique 36 MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE CLASSE II TYPE B1 Conduite d vacuation Filtres HEPA Flux laminaire Surface de travail V 100 an 50 8cm s Syst me de pl nums Protection de l op rateur du produit et de l environnement Vitesse de l air l entr e dans l enceinte 50 8 cm s Convient pour le travail avec les agents correspondant aux niveaux de s curit biologique 1 2 ou 3 Syst me de filtration deux filtres HEPA Lair potentiellement contamin est vacu 70 et recycl l int rieur de l enceinte apr s filtration en passant par la grille avant 30 Toutes les conduites biologiquement contamin es sont sous pressio
149. des applications ponctuelles petite chelle la distribution des milieux de culture se fait au moyen de seringues en plastique usage unique avec aiguilles N 16 Le distributeur peut normalement tre programm pour toutes ces activit s selon les instructions fournies par le fabricant PRINCIPES DE FONCTIONNEMENT En g n ral les distributeurs modernes sont contr l s par des microprocesseurs et se composent des l ments suivants la num rotation ci dessous correspond celle de la figure 25 1 S lecteur de volume Ce bouton molet est utilis pour r gler le volume d livrer le volume s lectionn s affiche sur l cran du distributeur 2 Ecran digital Il affiche les donn es correspondant la fonction s lectionn e comme le volume d livrer le type d embout fix sur la t te de distribution et des informations comme les alarmes et les messages d erreur qui peuvent tre d clench s pendant le fonctionnement de l appareil par exemple une alarme de batterie faible ou de s lection incorrecte de l embout pour le volume choisi 3 Levier de dosage Ce levier actionne le piston mont sur un adaptateur d placement positif de type seringue dans lequel il se d place le long d un cylindre pour d livrer le volume de liquide s lectionn 1 Product Information Sheet 3cc Syringes For dispensing and plating Methocult http www stemcell com technical 28230_28240 PIS pdf Figure 26 Distribute
150. des tiroirs proc der de la m me fa on pour les nettoyer Vider les tiroirs et les sortir de leurs glissi res Les sortir du r frig rateur 3 Unefoisles tag res et les tiroirs sortis du r frig rateur nettoyer les parois internes de celui ci avec un d tergent doux Les s cher avant de remettre les l ments internes en place 4 Nettoyer les tiroirs avec un chiffon imbib de d tergent doux Bien frotter Essuyer les tiroirs et les remettre sur leurs glissi res dans le r frig rateur Avertissement Eviter d utiliser de la laine d acier ou autre mat riau abrasif pour nettoyer les tag res et les tiroirs Eviter d utiliser de l essence du white spirit ou des diluants car ils endommagent le plastique les garnitures ou la peinture des surfaces nettoyer Figure 58 Panneau de contr le d un r frig rateur pour banque de sang T moin de service technique Thermom tre Interrupteur principal T moin de porte ouverte T moin de batterie faible Ecran d affichage Touche d augmentation de la temp rature S lecteur pour les param tres de temp rature et d alarme Alarme sonore Touche de diminution de la temp rature 135 CHAPITRE 18 R FRIG RATEURS ET CONG LATEURS 136 Nettoyage du condenseur Fr quence tous les six mois 1 D brancher le cable d alimentation lectrique 2 V rifier la position du condenseur Les fabricants le mettent en g n ral l arri re et
151. e Photo avec l aimable autorisation de Olympus MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE Chapitre 15 Microscope Code GMDN 36351 Code ECRI 12 536 MITE Microscopes Le mot microscope vient du grec micros qui signifie petit et Microscope binoculaire skopien qui signifie voir ou examiner Ce chapitre pr sente les pr cautions prendre lors de l utilisation des microscopes employ s dans la pratique clinique et leur entretien courant Selon le syst me de contraste il existe diverses sortes de microscopes Les plus courants sont Microscope optique fond clair Microscope optique fond noir Microscope optique fluorescence Microscope optique contraste de phase Microscope optique interf rentiel Microscope optique polarisant Microscope optique invers St r omicroscope O O O O 0 0 0 0 PHOTOGRAPHIES DE MICROSCOPES Photo avec l aimable autorisation de Nikon Instruments 4 Ce type de microscope utilise divers syst mes de lentilles et un clairage contr l pour obtenir une image agrandie de l objet St r omicroscope binoculaire 4 Ce type de microscope permet d obtenir des images tridimensionnelles en volume en superposant deux images une pour chaque ceil 105 CHAPITRE 15 MICROSCOPE 106 QUOI SERT UN MICROSCOPE Le microscope est un instrument de pr cision qui poss de divers sous syst mes optiques lentilles filtres prismes condenseurs m
152. e l absorption par le gaz r frig rant Le gaz r frig rant p n tre sous forme liquide dans l vaporateur au point 4 id al ou 4 r el et pendant qu il traverse le r seau de l vaporateur il absorbe de la chaleur QI et se transforme progressivement en vapeur Lorsqu il atteint le point 1 il est enti rement sous forme de vapeur Il est alors aspir par le compresseur au moyen d une tubulure d aspiration 1 Le cycle r el diff re du cycle id al par certains processus irr versibles non indiqu s sur le graphe pour des raisons de clart et de simplicit Zone de haute Ext rieur pression 2 3 QhQh Qh Qh Qh A Qh 2 Condenseur DA D tendeur 3 q QI QI Ti al Qi QI Filtre AN An Ne Compresseur Zone de we Isolation basse Evaporateur thermique pression 4 1 Enceinte r frig r e Ta Fluide r frig rant cycle de compression id al 132 Compresseur Habituellement actionn par un moteur lectrique le compresseur aspire basse pression le gaz r frig rant sortant de l vaporateur l tat de vapeur satur e et au moyen d un piston ou d un jeu de pistons exerce sur ce gaz une compression adiabatique sans transfert de chaleur entre les points 1 et 2 A la sortie du compresseur la vapeur est chaude du fait de la compression et arrive au condenseur au point 2 Condenseur Syst me analogue celui de l vaporateur avec un r seau de tuyaux dans lesquels circule le ga
153. e sulfurique ou chromique g Eau d sionis e car elle provoque une corrosion et une perforation de l acier inoxydable Entretien Avertissement Avant tout entretien de l appareil le d connecter de la prise de courant Les bains marie sont des appareils d entretien simple Les proc dures recommand es en routine concernent essentiellement le nettoyage des parties ext rieures Les op rations les plus courantes sont Nettoyage Fr quence une fois par mois 1 Eteindre et d brancher l appareil Attendre qu il refroidisse afin d viter le risque de br lures et d accidents 2 Viderleliquide utilis pour le chauffage Si c est de l eau elle peut tre vid e dans l vier Si c est de l huile la recueillir dans un r cipient de contenance adapt e 3 Enlever la grille de diffusion thermique qui se trouve au fond de la cuve 4 D monter le circulateur et le nettoyer pour liminer les d p ts calcaires et les algues qui pourraient s y trouver 5 Nettoyer l int rieur de la cuve avec un d tergent doux S il y a des traces de corrosion utiliser des produits de nettoyage pour acier inoxydable Frotter doucement avec une ponge en mati re synth tique ou quivalent Eviter d utiliser des tampons en laine d acier pour enlever les taches de rouille car ils pourraient laisser des particules d acier susceptibles d acc l rer la corrosion 6 Eviter d incliner ou de heurter le capillaire du dispositif de contr le de l
154. e 38 Figure 39 Mat riel utilis pour les tests ELISA Laveur ELISA Profils de puits Sch ma d un pH metre Types d lectrodes Circuit lectrique type pour le pH m tre Balance ressort Balance curseur Balance d analyse Balance plateau sup rieur Balance substitution El ments des balances lectroniques Principe de la force de compensation Classification des balances selon l exactitude Panneau de contr le d une balance d analyse Bain marie R sistances immersion et externes Commandes du bain marie Enceinte de s curit biologique Le concept de force centrifuge Distillateur Sch ma d un diluteur Commandes du diluteur Seringue et doseur Distributeur Distributeur et accessoires Interaction de la lumi re avec la mati re Ph nom ne d absorbance El ments du spectrophotom tre R fraction de la lumi re Grille de diffraction Circuit de vapeur d un autoclave Espace n cessaire autour de l autoclave Alimentation en air comprim Alimentation en vapeur G n rateur de vapeur Tableau de commande lectronique de l tuve Circuit lectrique de l tuve Syst mes de transfert de la chaleur utilis s dans les incubateurs 14 15 15 22 22 22 23 23 24 24 25 26 31 31 32 35 46 53 59 60 61 65 66 70 71 72 79 80 83 87 87 88 89 95 95 100 Figure 40 Figure 41 Figure 42 Figure 43 Figure 44 Figure 45 Figure 46 Figure 47 Figure 48 Figure 49 Figure 50 Figure
155. e compose d agents pathog nes qui provoquent habituellement une maladie tr s grave chez l homme ou l animal contre laquelle il n existe souvent aucun traitement Ces agents se transmettent facilement d un individu l autre de l animal l homme ou inversement directement ou indirectement ou par simple contact Risque lev pour les individus risque lev pour la communaut CONDITIONS REQUISES POUR L INSTALLATION Les conditions suivantes doivent tre remplies pour qu une enceinte de s curit biologique fonctionne correctement 1 Une zone de travail prot g e des courants d air provenant des fen tres ou du syst me de climatisation l enceinte doit galement tre situ e l cart des zones de passage pour viter les courants d air qui pourraient nuire l int grit du rideau d air l int rieur du dispositif II faut aussi v rifier que l enceinte n est pas install e c t d autres types de dispositifs tels que des hottes de chimie Une alimentation lectrique munie des quipements de contr le et de s curit la prise de courant doit tre reli e la terre Une table solide et de niveau con ue pour supporter le poids de l enceinte et permettant l op rateur de travailler confortablement Il doit y avoir un espace libre pour les pieds et la hauteur du plan de travail doit tre suffisante 1 The Laboratory Biosafety Guidelines 3rd Edition Draft Health Canada 2001 MANUEL D ENTRET
156. e d une distribution par sa moyenne Ecart type Mesure de la dispersion d un ensemble de donn es par rapport sa moyenne Plus les donn es dont dispers es plus l cart type est grand On l utilise comme param tre statistique pour d terminer l erreur globale sur la mesure d un chantillon Souvent abr g en SD Standard Deviation Erreur d une mesure Diff rence entre la valeur mesur e et la valeur correcte Exactitude Concept en relation avec les erreurs de mesure On dit qu un instrument est exact lorsque la valeur d un groupe de mesures est suffisamment proche de la valeur r elle Intervalle de mesure Diff rence entre la valeur maximale et la valeur minimale qu un instrument lit ou mesure Masse Propri t physique des corps li e la quantit de mati re qu ils contiennent exprim e en kilogrammes kg En physique on donne le nom de masse deux quantit s la masse gravitationnelle qui est une mesure de la fa on dont un corps interagit avec l acc l ration de la pesanteur si la masse du corps est petite il subit une force plus faible que si sa masse tait plus grande et la masse inertielle qui est une mesure quantitative ou num rique de l inertie d un corps c est dire de sa r sistance l acc l ration Masse volumique Relation entre la masse d un corps et le volume qu il occupe La masse volumique moyenne d un objet est gale au quotient de sa masse totale par son volume total Elle est iden
157. e de courant compatible avec le syst me d clairage du microscope Elle doit tre en bon tat et aliment e en courant de voltage d intensit et de fr quence conformes aux normes en vigueur Si le microscope est clair par un miroir il doit tre plac pr s d une fen tre donnant un bon clairage mais ne doit pas tre expos la lumi re solaire directe 5 Installer le microscope sur une surface horizontale qui doit reposer sur une structure rigide laissant suffisamment de place pour les jambes de l op rateur Celui ci doit pouvoir s approcher du microscope avec la t te hauteur des oculaires sans occasionner de tensions au niveau de la colonne vert brale du dos et du cou 6 Pour favoriser une bonne position de travail pr voir une chaise de hauteur r glable avec un bon soutien dorsal Le cas ch ant pr voir un repose pieds devant le poste de travail et non fix la chaise afin que la colonne vert brale reste aussi droite que possible et que l op rateur ne soit pas oblig de pencher la t te et les paules 7 Eviter de placer le microscope proximit d appareils produisant des vibrations comme des centrifugeuses ou des r frig rateurs 8 Essayer de ne pas d placer le microscope surtout s il est utilis quotidiennement de fa on intensive 9 Couvrir le microscope avec une housse de protection contre la poussi re si on ne l utilise pas pendant longtemps en veillant ce qu il ne soit pas e
158. e de lavage recommand pour s lectionn chaque type de plaque Les plaques utilis es sont diff rentes de celles qui V rifier que les plaques utilis es sont enti rement sont recommand es par le fabricant compatibles avec le laveur Le niveau de liquide dans les puits est insuffisant Le tuyau d alimentation en solution de lavage n a pas V rifier les sp cifications du fabricant Faire les le diam tre ou l paisseur sp cifi s par le fabricant modifications n cessaires La pression est insuffisante pour d livrer la quantit V rifier que le syst me de distribution et les canaux correcte de solution de lavage d alimentation ne sont pas obstru s Des moisissures et des bact ries se d veloppent dans Le syst me n est pas souvent utilis V rifier les proc dures appliquer pour pr venir le le r servoir de solution de lavage d veloppement de moisissures et de bact ries La proc dure ad quate d sinfection n est pas V rifier les proc dures appliquer pour pr venir le appliqu e d veloppement de moisissures et de bact ries Les tuyaux et raccords ne sont pas chang s la V rifier la fr quence de remplacement indiqu e par fr quence requise le fabricant et ou le service technique La solution de lavage a t contamin e V rifier les proc dures appliqu es pour pr parer et Le cycle de lavage ne s effectue pas correctement utiliser la solution de lavage afin de d terminer la
159. e de potentiel proportionnelle la diff rence de temp rature entre ses deux extr mit s Ce ph nom ne est connu sous le nom d effet Seebeck du nom du physicien allemand Thomas Seebeck qui l a d couvert Thermostat Dispositif qui r gule la temp rature d un syst me II agit habituellement par dilatation de l un de ses l ments qui active m caniquement un autre l ment par exemple un interrupteur qui contr le une fonction d termin e Chapitre 14 Incubateur Code GMDN 35482 35483 Code ECRI 15 151 15 152 Incubateur a robie Le mot incubateur vient du latin incubare qui signifie couver Lincubateur est une enceinte dont l atmosph re la temp rature et l humidit sont contr l es afin de maintenir des organismes vivants dans un environnement adapt leur d veloppement Parmi ses applications les plus courantes figurent l incubation de cultures bact riennes virales microbiologiques en g n ral et cellulaires la d termination de la demande biochimique en oxyg ne DBO et le stockage de produits biologiques Il existe divers mod les de complexit diff rente Certains ne contr lent que la temp rature tandis que d autres contr lent galement la composition de l atmosph re de l enceinte Il en existe aussi qui peuvent travailler des temp ratures plus basses que la temp rature ambiante gr ce des syst mes de r frig ration Selon les mod les et les sp cifications de ces appareils les temp rat
160. e et un entretien pr ventif permanents en raison des nombreux l ments et syst mes qui le composent L entretien comporte essentiellement des op rations de routine simples qui peuvent tre effectu es par les op rateurs Pour un entretien plus complexe on se conformera aux instructions figurant dans le manuel d utilisation fourni par le fabricant Contr les quotidiens Avant de d marrer les processus de st rilisation il faut proc der aux v rifications suivantes 1 Mettre un nouveau formulaire dans l enregistreur pour documenter le d roulement du cycle de st rilisation 2 V rifier que le stylo de l enregistreur ou le module d impression de l autoclave ont de l encre et qu il y a du papier 3 V rifier que les robinets d alimentation en eau froide en air comprim et en vapeur sont ouverts 4 Actionner l interrupteur de mise en route du chauffage de la double enveloppe La vapeur p n trera alors dans la double enveloppe de la cuve de st rilisation Lorsque la vapeur p n tre dans la cuve de st rilisation le processus de chauffage commence Pour viter les pertes de chaleur tenir la porte de l autoclave ferm e jusqu au moment d y introduire la charge st riliser 5 V rifier que la pression de la conduite d alimentation en vapeur est au moins gale 2 5 bars 6 V rifier l tat des manom tres et des thermom tres 7 V rifier l absence de fuites de vapeur dans chacun des syst mes en foncti
161. e frontale contr les de la vitesse de l air 6 R paration ou nettoyage des vannes de r gulation du flux d air et des manchons de raccordement Certification de l enceinte La proc dure de certification des enceintes de s curit biologique est r gie par la norme NSF 49 qui s applique toutes les enceintes de classe Il Cette norme d finit les mat riaux les crit res de conception la construction les param tres de fonctionnement et les tests qui permettent de garantir la s curit et la capacit de l enceinte pour l usage pr vu On trouvera ci dessous une liste de tests avec mention des normes requises Pour tous d tails il faudra se reporter aux normes La proc dure de certification comprend les tests suivants 1 Test d tanch it lair S effectue sur les surfaces ext rieures D termine si tous les raccords joints et soudures sont exempts de fuites 2 Test de fuites des filtres HEPA D termine l int grit des filtres HEPA d entr e et d vacuation leur logement et leur cadre de montage 3 Test d augmentation de la temp rature D termine l augmentation maximale de temp rature dans l enceinte lorsque le ventilateur et l clairage sont en marche 4 Test de niveau sonore D termine le niveau sonore de l enceinte pendant son fonctionnement 5 Test d intensit lumineuse D termine l intensit lumineuse au niveau du plan de travail de l enceinte 6 Test de vibration D termine le niveau de
162. e l quilibre chimique de l chantillon en fonction de la concentration 2 D viation des coefficients d absorbance concentrations sup rieures 0 01 M dues l interaction lectrostatique entre mol cules voisines 3 Modification de l indice de r fraction aux concentrations lev es de la substance analyser 4 Diffusion de la lumi re due la pr sence de particules dans l chantillon 5 Fluorescence ou phosphorescence de l chantillon 6 Radiation non monochromatique 71 CHAPITRE 11 SPECTROPHOTOMETRE 72 EL MENTS DU SPECTROPHOTOM TRE Le sch ma de la figure 29 d crit la relation entre les diff rents l ments d un spectrophotometre Les l ments les plus importants sont La source lumineuse Le monochromateur Le porte chantillons Le syst me d tecteur Le syst me de lecture oh ge YY a Ces l ments sont les l ments de base des spectrophotometres et ne comprennent pas les innovations techniques introduites par les fabricants dans les mod les r cents La figure 29 montre de fa on succincte la fonction de chacun de ces l ments Source lumineuse Selon le type de spectrophotom tre la source lumineuse peut tre une lampe au tungst ne mettant dans le visible ou une lampe arc au deut rium mettant dans l ultraviolet Certains fabricants quipent les spectrophotom tres avec des lampes au x non de longue dur e qui mettent une lumi re puls e dans le visible et l
163. e l appareil b V rifier que la polarit de la prise est correcte V rifier qu il y a suffisamment d espace autour de l appareil pour les c bles de raccordement et pour la ventilation V rifier que la paillasse est en bon tat et propre V rifier que l analyseur n est pas situ proximit d appareils produisant des vibrations et n est pas expos la lumi re solaire directe V rifier que l appareil n est pas expos des conditions d humidit de temp rature ou de poussi re excessives S assurer qu il n y a aucune source de fum es de gaz ou de vapeurs corrosives proximit INTERVENTIONS HORS ROUTINE ET CONDUITE TENIR EN CAS DE PANNE On trouvera ci dessous des directives g n rales pour la conduite tenir en cas de panne des analyseurs de chimie Comme il existe de nombreux mod les il faut toujours se r f rer au manuel d utilisation fourni par le fabricant et suivre la proc dure recommand e 1 S il n y a pas de lumi re dans le syst me ou si son intensit n est pas constante remplacer l ampoule S il y a de la lumi re dans le syst me mais qu aucune r ponse ne s affiche remplacer la photodiode Toujours remplacer les fusibles et ampoules usag s en suivant les instructions du fabricant Si l appareil est d fectueux consulter un ing nieur qualifi dans le domaine biom dical Si l analyseur ne s allume pas contr ler la prise de courant Brancher et v rifier le fusible
164. e la vapeur Elle a pour fonction de transf rer la chaleur vers la cuve de st rilisation lors des stades de pr traitement vacuation de l air et de post traitement s chage du mat riel st rilis Electrovannes Dispositifs lectromagn tiques de contr le utilis s dans de nombreuses applications Aussi appel es vannes lectromagn tiques La position d un piston est contr l e par une bobine sol no de dans laquelle circule un courant lectrique ou qui se trouve au repos Le piston permet ou emp che le passage d un fluide dans un circuit donn Ces vannes sont utilis es dans les syst mes hydrauliques et pneumatiques et dans les syst mes de vapeur et de vide Les fabricants ont d velopp de nombreux mod les pour des applications sp cialis es Electrovannes asservies Vannes lectromagn tiques dont l ouverture et la fermeture sont r gies par la pression du milieu En g n ral elles poss dent une membrane avec une petite ouverture par laquelle s coule le milieu Indicateur de st rilisation Indicateur chimique ou biologique qui permet de v rifier si un objet ou une substance a t st rilis avec succ s l issue du processus de st rilisation Les indicateurs les plus connus sont le ruban adh sif thermosensible qui change de couleur lorsque les conditions de temp rature d termin es sont atteintes et les spores de B stearothermophilus Inspection Evaluation visuelle des articles lav s dans le but de tro
165. e leurs fronti res ou limites Les lignes en pointill sur les cartes repr sentent des fronti res approximatives dont le trac peut ne pas avoir fait l objet d un accord d finitif La mention de firmes et de produits commerciaux ne signifie pas que ces firmes et ces produits commerciaux sont agr s ou recommand s par l Organisation mondiale de la Sant de pr f rence d autres de nature analogue Sauf erreur ou omission une majuscule initiale indique qu il s agit d un nom d pos L Organisation mondiale de la Sant a pris toutes les pr cautions raisonnables pour v rifier les informations contenues dans la pr sente publication Toutefois le mat riel publi est diffus sans aucune garantie expresse ou implicite La responsabilit de l interpr tation et de l utilisation dudit mat riel incombe au lecteur En aucun cas l Organisation mondiale de la Sant ne saurait tre tenue responsable des pr judices subis du fait de son utilisation Composition et mise en page LIV Com Sarl Morges Switzerland Imprim en Espagne Contact a l OMS Dr G Vercauteren Coordinateur Diagnostic et technologie de laboratoire D partement technologies essentielles de la Sant Organisation mondiale de la Sant 20 Avenue Appia 1211 Geneve 27 Suisse Ce document est disponible l adresse suivant www who int diagnostics_laboratory MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE Table des mati res T
166. e substrat ne se dissolvent pas V rifier que les comprim s se dissolvent correctement compl tement Le comprim de substrat a t contamin par de Contr ler l int grit et la manipulation des comprim s de l humidit des pinces m talliques ou n est pas entier substrat La position du puits de mesure blanc a pu changer et V rifier que la r partition des puits est correcte une quantit incorrecte a alors t soustraite de chaque lecture Le lecteur pr sente une variation impr vue des lectures de La lampe du lecteur est instable Remplacer la lampe par une autre ayant les m mes densit optique caract ristiques que la lampe d origine Le lecteur donne des valeurs augmentant ou diminuant Etalonnage incorrect du moteur d entra nement de la Etalonner l entra nement de la plaque de fa on qu progressivement d une colonne l autre plaque chaque arr t les puits restent exactement align s avec le syst me metteur de lumi re Dilution incorrecte de l chantillon V rifier la proc dure de dilution de l chantillon Les lectures de la densit optique sont tr s basses par La lecture a t faite une longueur d onde diff rente de V rifier la longueur d onde utilis e pour effectuer la rapport aux crit res d valuation optique de l op rateur celle qui est pr vue pour le test lecture Si c est l le probl me r gler la longueur d onde et refaire la lecture V rifier que le filtre de longueur d o
167. eint la temp rature laquelle s vaporera tout r sidu du liquide qui aurait pu se former sur les objets pendant la d pressurisation On descend jusqu un vide gal 10 de la pression atmosph rique que l on maintient pendant un certain temps Lorsqu on st rilise des liquides on ne fait pas le vide mais on vacue la vapeur de fa on contr l e au moyen d un r ducteur pour viter qu une bullition se produise dans les r cipients autoclav s e Enfin on laisse entrer l air par des robinets munis de filtres a haute efficacit jusqu ce que la pression dans la cuve de st rilisation s galise avec la pression atmosph rique Le cycle de st rilisation est alors achev 7 Ouvrir la porte de l autoclave Sortir le mat riel st rilis 9 Refermer la porte de l autoclave une fois le mat riel enlev pour conserver la chaleur l int rieur de la cuve et faciliter le cycle de st rilisation suivant 10 Ranger de fa on appropri e le mat riel st rilis p Note Les cycles de st rilisation doivent tre surveill s et soumis des tests de contr le de la qualit au moyen d indicateurs physiques chimiques et biologiques afin d assurer qu ils sont efficaces Avertissement Tous les objets ne peuvent pas tre st rilis s par la chaleur humide Certains n cessitent des proc dures de st rilisation basse temp rature V rifier quelle est la proc dure adopter selon le type de mat riel st
168. els Dans l annexe G de la norme NSF 49 est d crite la proc dure de d contamination par le paraformald hyde d polym ris Seuls des professionnels ayant re u la formation appropri e doivent r aliser de telles proc dures ENTRETIEN DE ROUTINE Avertissement L entretien des l ments internes ne doit tre effectu que par un personnel qualifi ayant re u la formation requise technicien de maintenance Pour effectuer cet entretien une d contamination pr alable est n cessaire et un quipement de protection personnelle doit tre port L entretien g n ral d une enceinte de s curit biologique est dans l ensemble simple r aliser Les proc dures de routine et leur fr quence sont d crites ci dessous Fr quence une fois par semaine 1 D contaminer la surface de travail et les surfaces internes de l enceinte avec de l thanol 70 2 Nettoyer la fen tre frontale en verre et la lampe UV l aide d une solution de nettoyage domestique 3 V rifier la pr cision de la lecture du manom tre qui indique toute baisse de pression du flux d air traversant le filtre HEPA Inscrire la date et le r sultat dans le livre de bord de l enceinte Fr quence une fois par mois 1 Nettoyer les surfaces ext rieures surtout le devant et le dessus avec un chiffon humide pour enlever la poussi re 2 D sinfecter la surface de la partie basse avec de l thanol 70 ou une solution d sinfectante appropri
169. emocue AB 15146 15 146 Analyseurs d h moglobine h moglobinom tres les l ments de l appareil sont prot g s par un rev tement sp cial qui emp che la corrosion Les colorimetres peuvent tre manuels ou semi automatiques Les lectures de l absorbance se font sur un cadran ou sur un cran affichage num rique L h moglobinom tre est un colorimetre portable con u pour donner une lecture directe et exacte de la concentration d h moglobine en g dl ou en g l Il est galement d crit dans le pr sent chapitre PRINCIPES DE FONCTIONNEMENT Un colorim tre utilise des filtres pour produire de la lumi re sur une seule longueur d onde s lectionn e en fonction de la couleur de la solution analyser La lumi re color e traverse l chantillon et la quantit de lumi re mergente est mesur e sur une chelle d absorbance L absorbance est directement proportionnelle la concentration du compos color dans la solution selon la loi de Beer Lambert voir chapitre 11 On peut habituellement mesurer avec une bonne fiabilit des absorbances comprises entre 0 et 0 7 unit s Les facteurs d talonnage sont plus lev s pour les colorim tres que pour les photom tres car ces appareils sont moins sensibles Les facteurs d talonnage correspondant diverses m thodes et divers r actifs sont en g n ral fournis par le fabricant ou trouv s dans la litt rature Les h moglobinometres mesurent la concentration d
170. emp rature s lectionn e d fectueux si n cessaire V rifier la s lection des param tres Les chantillons chauffent lentement La cuve est vide ou contient tr s peu de liquide Remplir la cuve jusqu au niveau recommand La temp rature augmente tr s lentement Les r sistances sont d fectueuses Remplacer la ou les r sistances Le dispositif de contr le de la temp rature est Remplacer le dispositif de contr le de la d fectueux temp rature DAANEN Circulateur Appareil qui agite ou m lange un liquide pour assurer l homog n it de ses propri t s temp rature couleur densit Egalement appel agitateur Fusible Dispositif de s curit qui prot ge les circuits lectriques d une intensit excessive Les fusibles sont r alis s en mat riaux dont les propri t s et les dimensions sont adapt es pour qu ils fonctionnent dans des conditions pr d finies Si pour une raison quelconque les param tres pr d finis sont d pass s le mat riau br le ou fond ce qui interrompt le passage du courant lectrique Peinture lectrostatique Proc d de peinture qui utilise le pouvoir d attraction exerc sur les particules par une charge lectrostatique Une diff rence de potentiel de 80 150 kV est appliqu e sur un grillage m tallique travers lequel on projette la peinture afin d en charger chaque particule Les objets m talliques peindre sont reli s au p le oppos du circuit haute tension de fa on
171. emplacer les l ments mentionn s ci dessous proc der de la m me mani re que pour les l ments ci dessus Il est tr s important d utiliser des pi ces de rechange ayant les m mes sp cifications que la pi ce d origine Ventilateur interne pour la circulation d air Syst me de contr le lectronique El ments lectroniques Thermocouples Porte en verre int rieure Poign e 10 Chassis de l incubateur int rieur et ext rieur SS AE S S MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE Les situations courantes pr sent es dans le tableau ci dessous n cessitent l intervention d un personnel autoris ayant re u une formation technique sur l utilisation et l entretien des incubateurs Les cas sp ciaux doivent tre trait s selon les recommandations du fabricant Incubateur standard L incubateur ne fonctionne pas L incubateur affiche des erreurs de chauffage l alarme reste allum e et la temp rature est plus lev e que la valeur s lectionn e L cran affiche en permanence un signal d erreur En g n ral la DEL indique EEE GUIDE DE DEPANNAGE CAUSE PROBABLE Le r seau lectrique n est pas aliment l interrupteur marche arr t est sur OFF Le c ble d alimentation lectrique est d fectueux Le syst me de contr le de la temp rature est d fectueux La r sistance chauffante est d fectueuse La connexion de la r sistance chauffante est d fectu
172. en bas de l appareil Sur certains r frig rateurs il se trouve en haut 3 Enlever la grille de protection du condenseur et le filtre qui ne se trouve pas sur tous les mod les 4 Enlever la poussi re et les impuret s d pos es la surface du condenseur Utiliser un aspirateur quip d une brosse aspirante Passer la brosse sur toute la surface du condenseur pour enlever la poussi re et les impuret s V rifier que la surface des tubes ainsi que celle des ailettes est propre Passer galement l aspirateur sur le filtre si l appareil en est quip 5 Remettre la grille de protection 6 Rebrancherle r frig rateur Avertissement Si le condenseur n est pas propre cela interf re avec le processus de transfert de chaleur et le r frig rateur peut chauffer ou fonctionner une temp rature diff rente de celle s lectionn e V rification du joint d tanch it de la porte Fr quence une fois par trimestre Le joint d tanch it de la porte est un l ment qui doit rester en bon tat pour que l appareil fonctionne correctement Pour v rifier son tat proc der comme suit 1 Ouvrir la porte 2 Glisser une bande de papier de 5 cm de large entre le joint de la porte et le bord du chassis du r frig rateur Fermer la porte 4 Tirer doucement le papier vers l ext rieur Le papier doit opposer une r sistance lorsqu on le tire vers l ext rieur Si on ne sent pas de r sistance il faut remplacer
173. enlever le papier et rallumer l imprimante Le papier n est pas install correctement Eteindre l imprimante remettre le rouleau de papier en place L cran LCD est difficile lire L alimentation en papier de l imprimante ne fonctionne pas ou le papier n avance pas automatiquement L avant du papier n est pas align ou est froiss Eteindre l imprimante Remettre le rouleau de papier en place Couper l avant du papier et r aligner le papier dans le syst me d alimentation La commande d alimentation en papier ne r pond Appeler le repr sentant pas La cuve n est pas de la bonne taille Utiliser la taille de cuve sp cifi e par le fabricant Le m canisme d ajustement de la cuve est mal Corriger la position du m canisme d ajustement positionn La lecture est fluctuante ll y a des interf rences sur le trajet de la lumi re V rifier que la cuve n est pas ray e V rifier qu il n y a pas de particules flottant dans la cuve Frotter les parois optiques de la cuve avec un chiffon propre V rifier que l intervalle de travail s lectionn La cuve ne rentre pas dans le compartiment chantillon longueur d onde et dilution convient pour l chantillon analyser La lecture indique des valeurs n gatives Il n y a pas II n y a pas d chantillon Mettre un chantillon dans la solution de lecture de l absorbance ae iy ae Re me La cuve est mal positionn e V rifier l orientation de la
174. ent les r sultats sur un cran Source lumineuse nn XK Fente d entr e Monochromateur Prisme Miroir Echantillons Syst me d tecteur Systeme de lecture Fente de sortie MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE Avantages et inconv nients des syst mes de d tection courants Cellules photo lectriques Ne n cessitent pas de sources d nergie ni d amplificateurs l environnement dans lequel ils sont install s S usent aux fortes intensit s lumineuses Tubes photo lectriques Fonctionnent entre 190 et 650 nm Egalement entre 600 et 1000 nm Photodiodes Plus sensibles que les cellules et tubes photo lectriques Peuvent br ler s ils re oivent la lumi re du jour pendant le fonctionnement Gamme de longueurs d onde plus tendue Prix tr s lev R pondent rapidement aux changements d intensit N cessitent une source de courant haute tension lumineuse Ne s usent pas comme les cellules photo lectriques Utilis s seulement sur les spectrophotom tres sp cialis s Photomultiplicateurs Peuvent tre r alis s avec une sensibilit dans l tendue compl te du visible et de l ultraviolet de 190 900 nm Les indicateurs analogiques affichent traditionnellement les r sultats sur une chelle de lecture ou un cadran Leur exactitude d pend entre autres de l
175. ent qui mesure la masse d un corps ou d une substance en utilisant la force d attraction qui s exerce sur ce corps ou cette substance Le terme balance vient des mots latins bis qui signifie deux et lanx qui signifie plateau Il existe de tres nombreux types de balances et autant de d nominations Il faut noter que le poids est la force qu exerce l attraction terrestre sur la masse d un corps cette force PHOTOGRAPHIES DE BALANCES Balance m canique MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE Photo avec l aimable autorisation de Ohaus Corporation 45513 46548 18 449 18 451 Balances Micro balances lectroniques lectroniques pour d analyse micro analyse est gale au produit de la masse par la valeur locale de l acc l ration de la pesanteur F m x g Il faut insister sur la notion de valeur locale car la pesanteur d pend de facteurs tels que la latitude et l altitude du lieu o la mesure est effectu e ainsi que la densit du globe terrestre cet endroit Cette force est mesur e en Newtons Balance lectronique Photo avec l aimable autorisation de Acculab Corporation 0000 21 CHAPITRE 4 BALANCES 22 A QUOI SERT UNE BALANCE On utilise une balance pour mesurer la masse d un corps ou d une substance ou son poids Au laboratoire la balance sert effectuer des pes es dans le cadre des activit s de contr le de la qualit sur des dispositifs tels que des pipette
176. es ditions r vis es qui comprennent 20 groupes d appareils choisis de fa on couvrir l ventail des mat riels les plus couramment utilis s a l chelle mondiale dans les laboratoires de niveau technique simple interm diaire Du fait des diff rences de niveau de complexit technique de marques et de mod les chaque chapitre a t labor en partant de l quipement de base et en y ajoutant des l ments technologiques nouveaux le cas ch ant On trouvera dans chaque chapitre les informations suivantes o Cat gories d appareils selon leur d nomination g n rique Les autres appellations sont galement indiqu es o Photographies ou sch mas explicatifs ou les deux pour identifier le type d appareil dont il s agit o Une br ve explication des principales utilisations ou applications de l appareil au laboratoire o Une description succincte des principes de fonctionnement de l appareil avec un d veloppement sur les principes ou les lois physico chimiques que le lecteur int ress pourra et devrait tudier en d tail o Les conditions requises pour l installation surtout en ce qui concerne les raccordements lectriques et la n cessit d une installation et d un fonctionnement sans danger avec mention des normes lectriques internationales o Les proc dures d entretien de routine class es selon leur fr quence entretien quotidien hebdomadaire mensuel trimestriel annuel ou occasionnel Les proc dures sont nu
177. es V rifier que a Les t moins ou voyants lumineux fonctionnent b Les indicateurs de lecture restent sur z ro 0 c La source lumineuse fonctionne 7 Effectuer un test de courant de fuite en position ON et OFF a V rifier le p le de mise la terre et v rifier que la polarit est correcte b V rifier que la polarit est correcte sans mise la terre c V rifier la polarit inverse sans mise la terre 8 Etalonner le panneau de contr le du spectrophotom tre selon les instructions du fabricant 9 Mesurer la sensibilit de l appareil 10 Faire un test suivant la loi de Beer 11 Remettre le spectrophotom tre dans sa configuration initiale si l talonnage a t r alis avec succ s BONNES PRATIQUES D UTILISATION DU SPECTROPHOTOM TRE 1 Etalonner le spectrophotom tre chaque fois qu une nouvelle s rie d chantillons doit tre analys e 2 Tenir ferm le couvercle du porte chantillons et de son logement pendant la mesure pour assurer une lecture correcte 3 Eviter de r utiliser les cuves usage unique 4 Utiliser uniquement des cuves en quartz pour effectuer les analyses au dessous de 310 nm 5 Eviter d utiliser des cuves en plastique si on travaille avec des solvants organiques 6 Utiliser de la verrerie en verre borosilicat de qualit sup rieure pour pr parer les talons Eviter si possible le verre au sodium oxyde de sodium car le contact prolong avec les talons po
178. es entre 340 et 700 nm Le syst me optique adopt par de nombreux fabricants utilise des fibres optiques qui conduisent la lumi re dans les puits des microplaques contenant les chantillons Le faisceau lumineux qui traverse l chantillon a un diam tre de 1 3 mm Un syst me de d tection capte la lumi re venant de l chantillon amplifie le signal et d termine l absorbance ou densit optique de l chantillon Un syst me de lecture convertit cette valeur en donn es permettant d interpr ter les r sultats du test Certains lecteurs de microplaques utilisent un syst me lumineux double faisceau Les chantillons tester sont d pos s dans des plaques sp cialement con ues qui poss dent un certain nombre de puits o la r action a lieu Les plaques couramment utilis es ont 8 colonnes et 12 rang es soit un total de 96 puits Il existe aussi des plaques ayant un plus grand nombre de puits Pour certaines applications la tendance consiste actuellement augmenter le nombre de puits plaques 384 puits pour r duire les quantit s de r actifs et d chantillons utilis es et augmenter la cadence de travail L emplacement des capteurs optiques du lecteur varie selon les fabricants ils peuvent se trouver au dessus de la plaque contenant les chantillons ou directement au dessous des puits Actuellement les lecteurs de microplaques poss dent des commandes r gul es par microprocesseurs des interfaces de connexion
179. es joints toriques selon les recommandations du fabricant 16 Respecter les recommandations relatives la p riode de garantie et la dur e de vie de chaque type de rotor 17 Eviter d utiliser des rotors dont la dur e de vie est d pass e 18 Utiliser un cran de protection lors de la manipulation de mat riaux radioactifs 19 Charger et d charger les rotors dans une enceinte de s curit biologique en cas de travail avec des mat riels correspondant au groupe de risque 2 ou plus 20 Ne jamais essayer d ouvrir le couvercle d une centrifugeuse en marche et ne jamais essayer de freiner le rotor a la main Tubes Les pr cautions a observer lors de la manipulation des tubes portent sur le remplissage le choix de la temp rature appropri e les limites de vitesse de centrifugation le lavage et la st rilisation Les principales recommandations sont les suivantes 1 Laverles tubes adaptateurs et autres accessoires la main avec une solution 1 10 de d tergent doux dans l eau et une brosse douce en plastique pas de brosse m tallique Eviter d utiliser un lave vaisselle automatique 2 Eviter d utiliser de l alcool et de l ac tone car ces produits alt rent la structure des tubes Le fabricants recommandent le solvant utiliser pour chaque type de tube de centrifugation 3 Eviter de s cher les tubes dans une tuve Toujours les s cher dans un courant d air chaud 4 V rifier si les tubes sont r utilisa
180. es parall les l axe des tubes et non sur leur longueur On utilise ces rotors pour les tudes isopycniques et dans certains cas pour des s parations zonales lorsqu il est important d avoir un temps de centrifugation court Ces rotors utilisent des tubes sp cialement con us Rotors tubes quasi verticaux Ce type de rotor est destin la centrifugation en gradient de densit lorsque certains l ments de l chantillon ne participent pas au gradient La faible inclinaison de ces rotors r duit le temps de centrifugation par rapport aux rotors angle fixe 47 CHAPITRE 7 CENTRIFUGEUSES 48 Normalement les fabricants sp cifient les rotors a utiliser dans les centrifugeuses en publiant des tableaux sp cialis s qui contiennent les informations suivantes 1 Type de rotor Sp cifie le type de rotor pour lequel l information technique est fournie 2 Capacit nominale du rotor D finit la capacit en litres ou sous multiples du litre Par exemple 6 litres 250 ml etc 3 Vitesse maximale Indique la vitesse maximale laquelle ce rotor doit fonctionner en tours par minute RPM 4 Force centrifuge relative maximale FCR obtenue par ce type de rotor 5 Facteur k le coefficient de s dimentation d fini par la formule 13 k IE Fri x 10 wo 3600 dans laquelle W vitesse angulaire en radians par seconde r rayon maximal en mm mesur dans le tube de centrifugation fn ray
181. es solutions le pH m tre doit tre fr quemment r talonn en suivant les tapes d crites plus haut 1 V rifier le type de solution d talonnage recommand par le fabricant de l lectrode MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE 5 Eteindre le pH m tre 5 1 Sortir l lectrode de la derni re solution analys e 5 2 Rincer l lectrode l eau distill e et la s cher avec un chiffon ou un papier d essuyage en faisant attention de ne pas le faire p n trer dans la sonde Placer l lectrode dans son r cipient de stockage V rifier que le s lecteur de fonctions est en position Stand by Eteindre le pH m tre interrupteur sur OFF ou d brancher le c ble d alimentation si l appareil ne poss de pas d interrupteur marche arr t Nettoyer le plan de travail 5 5 5 4 5 5 5 6 ENTRETIEN G N RAL DU PH M TRE L entretien des pH m tres comporte deux proc dures l une pour l l ment principal et l autre pour la sonde de d tection contenant les lectrodes Proc dure g n rale d entretien pour l l ment principal du pH metre Fr quence tous les six mois 1 Examiner l ext rieur de l appareil et valuer son tat g n ral V rifier la propret des bo tiers et leur ajustement Contr ler le c ble d alimentation et ses fiches V rifier qu ils sont propres et en bon tat Examiner les commandes de l appareil V rifier qu elles sont en bon tat et s action
182. etteurs et d tecteurs de lumi re CHAPITRE 1 LECTEUR DE MICROPLAQUES GUIDE DE D PANNAGE CAUSE PROBABLE NiO RUN ETO Le lecteur donne une valeur qui n a pas de sens La lampe du syst me metteur de lumi re est hors service Remplacer la lampe par une autre ayant les m mes caract ristiques que la lampe d origine Le lecteur donne des valeurs diff rentes d une rang e Les capteurs optiques sont sales Nettoyer les capteurs l autre od z Les lentilles ou d autres parties du syst me metteur de Nettoyer les lentilles du syst me metteur de lumi re lumi re sont sales Un ou plusieurs canaux ne sont pas talonn s V rifier l talonnage de chaque canal Le lecteur donne des valeurs de l absorbance trop lev es R actifs p rim s et ou pr par s de fa on incorrecte V rifier si la TMB est incolore et si la pr paration est correcte Contamination par d autres chantillons R p ter le test en v rifiant les tiquettes le laveur de plaque et la fa on dont la pipette a t utilis e Filtre de longueur d onde inadapt V rifier la longueur d onde recommand e pour le test Corriger si elle est incorrecte Lavage insuffisant ou inefficace V rifier la m thode de lavage Utiliser un test appropri de contr le de la qualit Un r actif a t omis V rifier que le test a t r alis suivant la proc dure tablie Le lecteur donne des valeurs de l absorbance trop faibles Incubation tr s cou
183. ettoyage soigneux des l ments aux op rations de maintenance sp cialis es effectu es par un technicien ou un ing nieur qualifi ayant re u une formation technique sur les diff rents mod les existants Une utilisation soigneuse en se conformant aux instructions du fabricant garantit un fonctionnement de longue dur e Sur les mod les r cents les fabricants ont introduit des proc dures automatis es d talonnage et de v rification On trouvera ici des recommandations g n rales sur l entretien et la maintenance applicables une vaste gamme de spectrophotometres Il faut noter que les op rations de routine sp cialis es ne peuvent tre effectu es qu en se conformant strictement aux recommandations du fabricant pour le mod le consid r On trouvera ci dessous les proc dures d entretien de routine d un spectrophotom tre en bon tat et la fr quence conseill e pour les contr les 73 CHAPITRE 11 SPECTROPHOTOMETRE 74 Inspection de l environnement de l appareil Fr quence une fois par an Le secteur dans lequel le spectrophotom tre est install doit faire l objet d une inspection visuelle et de tests lectriques pour garantir la s curit de l op rateur L inspection porte sur l installation lectrique et l ensemble de l environnement physique du spectrophotom tre Installation lectrique Elle doit tre v rifi e et test e pour assurer que les conditions suivantes sont remplies 1 Ilya
184. eur Enlever le panneau inf rieur Enlever les vis de fixation des c bles d alimentation lectrique des r sistances et d connecter les r sistances 8 Enlever les vis de fixation des r sistances et enlever les r sistances 9 Installer de nouvelles r sistances ayant les m mes caract ristiques que les r sistances d origine 10 Remettre les pi ces en place et reconnecter les parties lectriques LAS Remplacement du ventilateur de refroidissement Fr quence effectuer si n cessaire Pour changer le ventilateur de refroidissement qui se trouve g n ralement dans le bas de l tuve proc der comme suit 1 Proc der comme expliqu pour l ouverture du compartiment des l ments lectroniques 2 D connecter les c bles d alimentation lectrique du ventilateur 3 D faire les vis qui maintiennent le ventilateur 4 Installer un ventilateur ayant les m mes sp cifications que le ventilateur d origine Reconnecter les c bles d alimentation du ventilateur 5 Remettre le capot de protection en place Remplacement du joint d tanch it de la porte Fr quence effectuer si n cessaire Le joint d tanch it de la porte est g n ralement en silicone 1 Eteindre l tuve et ouvrir la porte 2 D faireles dispositifs de s curit qui maintiennent le joint en place 3 Enlever le joint l aide d un tournevis pour le d gager de sa rainure Eviter de forcer pour ne pas endommager la rai
185. eur celui de la lentille Sans appuyer passer doucement la peau de chamois la surface de la lentille Souffler ensuite les particules restantes l aide de la poire en caoutchouc Cela suffit pour nettoyer les surfaces externes Si n cessaire on peut humecter la peau de chamois avec de l eau distill e 2 Siles conditions d installation sont correctes les surfaces internes des l ments optiques ne doivent pas tre salies par de la poussi re ou autres particules Si pour une raison quelconque des particules sont d tect es il est n cessaire d acc der l int rieur des l ments du microscope pour effectuer le nettoyage Il ne faut jamais ouvrir un oculaire ou un objectif s il n y a pas un environnement propre pour effectuer le nettoyage Nettoyer avec un pinceau doux et une poire en caoutchouc comme indiqu plus haut Il est absolument d conseill de d monter les objectifs pour ne pas modifier les tol rances de montage observ es par le fabricant Si on d monte un objectif il faudra r aligner les l ments ce qui ne sera possible qu en se conformant strictement aux instructions du fabricant Le nettoyage des objectifs se limitera assurer la propret des deux lentilles post rieure et ant rieure 3 Si on d tecte des r sidus d huile pour immersion la surface des lentilles les liminer l aide de papier optique ou de coton hydrophile On peut ensuite nettoyer la surface de la lentille avec une soluti
186. eur humide M thode de st rilisation qui limine les micro organismes par d naturation des prot ines processus acc l r par la pr sence de vapeur d eau Cuve de st rilisation Aussi appel e chambre de st rilisation Emplacement dans lequel les objets st riliser sont plac s Lors du processus de st rilisation la cuve est remplie de vapeur d eau sous pression qui atteint des temp ratures directement li es la pression s lectionn e Pendant le cycle de st rilisation la cuve est ferm e herm tiquement par une porte munie d un syst me de s curit qui ne permet l ouverture que lorsque le processus de st rilisation est achev et que la pression interne est redescendue la pression atmosph rique D contamination Proc dure permettant de r duire la quantit de micro organismes sur un objet ou dans une substance de fa on ce que son utilisation ou sa manipulation ne pr sente pas de danger Par exemple les objets utilis s pour les soins aux patients et ayant pu tre en contact avec des liquides ou des substances biologiques ou avec des mati res organiques n cessitent une d contamination ou m me une st rilisation voir d finition ci dessous D sinfection Proc dure qui utilise des moyens physiques ou chimiques pour d truire toute forme de vie v g tative dans ou sur des objets inanim s l exclusion des spores Double enveloppe Espace clos entourant la cuve de st rilisation et dans lequel on fait circuler d
187. eurs tels que la pathog nicit la dose infectante le mode de transmission la gamme d h tes l existence de mesures pr ventives et l efficacit du traitement de la maladie qu ils provoquent 1 Le groupe de risque 1 se compose d agents biologiques dont il est tr s peu probable qu il provoquent une maladie chez l homme ou l animal en bonne sant Risque nul pour les individus ou la communaut Le groupe de risque 2 se compose d agents pathog nes qui provoquent une maladie chez l homme ou l animal mais dont il est peu probable qu ils pr sentent un danger pour le personnel de laboratoire la communaut les animaux domestiques ou l environnement dans des circonstances normales Les personnes expos es lors du travail au laboratoire sont rarement atteintes d une maladie grave Il existe des mesures pr ventives et un traitement efficace et le risque de diss mination est limit Risque mod r pour les individus risque limit pour la communaut Le groupe de risque 3 se compose d agents pathog nes qui provoquent habituellement une maladie grave chez l homme et l animal et ont un impact conomique important Cependant la transmission de l infection par simple contact d un individu l autre n est pas fr quente Les maladies que provoquent ces agents peuvent tre trait es par des anti infectieux ou des antiparasitaires Risque lev pour les individus risque faible pour la communaut Le groupe de risque 4 s
188. euse Le thermocouple lectrique est d fectueux La temp rature s lectionn e est plus basse que la temp rature ambiante Le relais est d fectueux Le ou les joints de la porte sont d fectueux La temp rature s lectionn e a t abaiss e une valeur plus basse que la consigne d alarme Le syst me de contr le de la temp rature est d fectueux Le relais est d fectueux La diode d alarme clignote Incubateur basse temp rature Les commandes de l incubateur ne fonctionnent pas La temp rature affich e est instable Plus haute ou plus basse que la valeur s lectionn e La temp rature de l enceinte d incubation est uniforme mais sup rieure la valeur s lectionn e CAUSE PROBABLE L interrupteur est sur OFF SOLUTION V rifier l tat du raccordement au secteur Mettre l interrupteur sur ON Contr ler l tat du c ble ou le remplacer V rifier et r gler ou remplacer le syst me de contr le de la temp rature Remplacer la r sistance par une autre ayant les m mes caract ristiques que la r sistance d origine Nettoyer les bornes de connexion Reconnecter correctement la r sistance Remplacer le thermocouple lectrique Contr ler les sp cifications de l incubateur Seuls les incubateurs r frig r s peuvent fonctionner dans ces conditions Normalement la temp rature ambiante est plus basse que celle de l incubateur jusqu la valeur s lectionn e Remplacer le relais
189. fabricant est le compartiment ou la fen tre qui re oit la bandelette r active Le compartiment est ferm par un couvercle abattant ou la bandelette est introduite manuellement ou au moyen d un dispositif de chargement La source lumineuse est habituellement une diode lectroluminescente DEL ou plusieurs DEL de longueurs d onde sp cifiques La m thode de mesure de la r flectance diff re selon le type d appareil La mesure peut tre effectu e directement comme le montre la figure 60 ou dans un compartiment de forme cubique ou sph rique La figure 61 montre une sph re d Ulbricht aussi appel e sph re d int gration ou sph re int gratrice et la fa on dont elle mesure la r flectance Dans les sph res d Ulbricht une ou plusieurs DEL de longueur d onde d termin e par exemple 567 642 et ou 951 nm servent de source lumineuse pour divers tests Les r cepteurs sont deux photodiodes sym triques la photodiode de r f rence D et Figure 60 Diagramme simplifi de la photom trie par r flectance sur bandelette r active Les fl ches repr sentent le trajet de la lumi re Les pointill s repr sentent le changement d intensit du l effet de la couleur pr sente sur la zone de r action de la bandelette Zone de r action DEL D tecteur Y aandete r active Figure 61 Sph re d Ulbricht une photodiode de mesure D La lumi re mise par la DEL est uniform ment r fl chie
190. filtres HEPA d alimentation Toutes les conduites biologiquement contamin es iH HH sont sous pression n gative Conduite post rieure sous A pression n gative Enceinte combin e Elle peut tre connect e au moyen HHHH d une conduite C est une enceinte de type B3 S il n y a pas de conduite de raccordement l enceinte est de Grille arri re type Elle recycle 70 du volume d air l int rieur A de l enceinte V vert 55 PLm 28cm s V 100 PLm 50 8cm s Grille avant VUE LAT RALE CLASSE III Protection de l op rateur du produit et de l environnement COMMITS 0m SION alt ase Syst me de filtration deux filtres HEPA mont s en a Conduite d vacuation s rie dans le syst me d vacuation un filtre HEPA Double filtre HEPA dans le syst me d admission d vacuation Fen Convient pour le travail avec des agents correspondant eneyoavallt J au niveau de s curit biologique 4 Gants Enceinte totalement tanche Les l ments d admission et d vacuation de l air sont command s par un sas double porte La manipulation se fait l aide de gants fix s de fa on tanche sur le devant de l enceinte VUE LAT RALE 38 S CURIT BIOLOGIQUE Les micro organismes se r partissent en quatre groupes en fonction de fact
191. fisante Le compresseur fonctionne en permanence D placer l g rement l appareil pour qu il y ait assez d espace libre Le changer de place si n cessaire Le thermostat est d fectueux Appeler le service technique La fermeture de la porte n est pas tanche V rifier le joint et ajuster la fermeture de la porte La pi ce est trop chaude Assurer une ventilation ad quate de la pi ce La porte est ouverte trop souvent ou n est pas Limiter les ouvertures de la porte ou refermer la referm e porte L interrupteur de l clairage est d fectueux V rifier que la lumi re s teint lorsque la porte est ferm e 137 CHAPITRE 18 R FRIG RATEURS ET CONG LATEURS 138 UTILISATION DES CONG LATEURS ULTRA BASSE TEMP RATURE Cong lateurs ultra basse temp rature L utilisation des cong lateurs ultra basse temp rature implique de suivre la proc dure recommand e par le fabricant pour atteindre les performances stipul es pour l appareil Les recommandations communes tous les cong lateurs ultra basse temp rature sont les suivantes 1 Brancher l appareil sur une prise de courant reli e la terre sp cialement r serv e cet appareil La prise de courant doit tre en bon tat et pouvoir fournir la puissance n cessaire pour le fonctionnement de l appareil Elle doit aussi satisfaire aux normes lectriques nationales et internationales La tension ne doit pas varier de plus de 10 ou 5 par rapport
192. formateur 110V 12V AC Dispositif qui transforme le courant 110 V du secteur en courant alternatif 12 V Diode de redressement 1N4002 Diode qui sert obtenir une onde de sens positif Condensateurs lectrolytiques 3300 microfarads ufd 2 Condensateurs qui lissent la tension la sortie des diodes R gulateurs de tension 7812 7912 Dispositifs qui r gulent la tension apr s l interaction entre les diodes et les condensateurs Condensateurs lectrolytiques 0 1 microfarad ufd 2 Dispositifs utilis s pour assurer la stabilit haute fr quence Lampe t moin 12 V DC Lampe indiquant que l appareil est en marche ON Mesure en pH et en mV Amplificateur op rationnel TL081 R1 r sistance 9 09 KO ohm R2 r sistance 1 KO ohm R3 r sistance 560 KQ ohm R4 r sistance variable 10 KQ ohm R5 r sistance 30 KO ohm Sortie Voltm tre DC bon march R sistance de mise a la terre Le gain du circuit est r gi par l quation Gain 1 R3 PxR4 R5 1 P xR4 Effectue les lectures en millivolts La tension lue est 10 fois celle donn e par la cellule ce qui permet une r solution de 0 1 millivolt La lecture se fait au moyen d lectrodes carbone quinhydrone Des sp cifications de voltage diff rentes peuvent s appliquer dans certaines parties du monde AC courant alternatif DC courant continu CONDITIONS REQUISES POUR L INSTALLATION Le pH m tre travaille sous une alimentat
193. fs l Paineet 6 Condenseur O condenseur 21 Diaphragme d ouverture 20 Lie o o Teta gen dan Bouton de r glage macrom trique et microm trique Bras du microscope Socle MNN Il Eclairage Corps du microscope 108 PROBL MES POTENTIELS AVEC LES MICROSCOPES Figure 45 T te binoculaire Oculaire T te binoculaire Tube binoculaire prismes lentilles et miroirs Oculaires Les probl mes les plus fr quents avec les oculaires sont dus la poussi re et l encrassement aussi bien sur les surfaces internes que sur les surfaces externes Ces impuret s produisent des ombres qui interf rent avec l objet analys surtout fort grossissement 40X 100X Si elles se trouvent l ext rieur il suffit de nettoyer les lentilles Si elles sont l int rieur il faut d monter l oculaire nettoyer les surfaces internes remonter l oculaire et v rifier son bon tat Des rayures peuvent s observer la surface des lentilles de l oculaire surtout si celui ci est utilis depuis longtemps Elles sont dues la n gligence lors du nettoyage du fait de l utilisation de mat riaux inadapt s Les rayures produisent des ombres ressemblant a des toiles d araign e dans le champ visuel de l oculaire Avec ce type de dommage il faut malheureusement remplacer l oculaire Parfois le m canisme de r glage de la mise au point de l oculaire se bloque Pour le r parer il faut d monter l o
194. ge et d agitation etc o Sous syst me de distribution En g n ral il comporte un r servoir pour la solution de lavage une ou plusieurs pompes habituellement une seringue a d placement positif et une t te de distribution qui r partit la solution de lavage dans les diff rents puits au moyen d aiguilles La t te de distribution est en g n ral livr e avec huit paires d aiguilles pour r aliser les op rations de lavage et d extraction dans tous les puits d une m me rang e simultan ment les sous syst mes de distribution et d extraction se rejoignent au niveau de la t te du laveur Il existe des mod les douze paires d aiguilles et d autres qui effectuent le lavage dans tous les puits simultan ment Certains laveurs offrent la possibilit de travailler avec diff rents types de solutions de lavage en changeant de solution selon le programme enregistr par l op rateur 1 Voir une explication succincte de la technique ELISA dans le chapitre 1 Lecteur de microplaques 2 Le nombre exact de lavages n cessaires d pend du test utilis Ce nombre est sp cifi sur le mode d emploi fourni par le fabricant du test 3 Si le puits est fond plat l aiguille d aspiration est plac e tr s pr s d un des bords du puits s il s agit d un puits fond en U ou en V l aiguille est centr e CHAPITRE 2 LAVEUR DE MICROPLAQUES o Sous syst me d extraction ou d aspiration Ce sous syst me n cessite un dispositif
195. gement de couleur Ces tests sont standardis s et les fabricants indiquent comment les utiliser et en interpr ter les r sultats Les indicateurs biologiques par eux m mes ne garantissent pas que le processus de st rilisation r pond toutes les sp cifications Pour s en assurer il faut contr ler tous les param tres du cycle de st rilisation Fr quence des proc dures de contr le de la qualit Le tableau ci dessous r capitule les fr quences recommand es en ce qui concerne l utilisation des indicateurs de contr le de la qualit des processus de st rilisation Type d indicateur Fr quence d utilisation Lors de chaque cycle de st rilisation Dans chaque emballage De processus Une fois par semaine sur tout le mat riel de st rilisation dans les emballages qui contiennent des implants Biologique CONDITIONS REQUISES POUR L INSTALLATION Pour que l autoclave fonctionne correctement les conditions suivantes doivent tre remplies 1 Un espace bien ventil permettant d vacuer la chaleur et l humidit g n r es pendant le fonctionnement de l appareil II faut galement un espace libre l arri re et sur les c t s de l appareil pour la maintenance technique Cet espace doit tre d au minimum 0 80 m Selon le Figure 33 Espace n cessaire autour de l autoclave 7 PRE Al LL TE LA PF ke EBD d A LT SI CT FF L Mat riau isolant mod le d autoclave il faudra pr voir un
196. glage de la vitesse de l injecteur droit nr gt LWT Touches de r glage des param tres _ R glage du calibre de la seringue droite _ R glage du volume augmenter diminuer S lecteur de mode de fonctionnement Interrupteur principal Syst me de distribution Le syst me de distribution se compose d une s rie de seringues de haute pr cision et de dispositifs appel s doseurs au moyen desquels les liquides sont d livr s selon le volume et la vitesse choisis Les seringues sont choisies et mont es sur le diluteur en fonction de la densit de la viscosit et du volume des liquides manipuler Les liquides circulent dans des tuyaux flexibles dont le diam tre la longueur et la compatibilit chimique sont d finis au cours du processus de fabrication pour tre adapt s l activit pr vue Ces tuyaux sont connect s au moyen de raccords ajustables manuellement Normalement les seringues sont class es en fonction de leur utilisation par exemple seringues pour r actifs pour diluants pour chantillons et des volumes manipuler Le tableau ci dessous montre un exemple de la fa on dont elles sont class es en fonction de leur calibre et des volumes manipul s Le sch ma montre les l ments du syst me de distribution seringue et doseur CONDITIONS REQUISES POUR L INSTALLATION Le diluteur doit tre install sur une paillasse ou
197. gue p riode fermer herm tiquement la cuve pour viter l vaporation qui donnerait des r sultats faussement lev s 8 Lorsqu on effectue des mesures sur une s rie d chantillons refaire le z ro toutes les 5 10 mesures en faisant une mesure blanc pour viter une d rive du z ro 9 Ne pas laisser la cuve dans l appareil 10 Si on utilise des micro cuves ou des semi micro cuves assurer un positionnement correct sur le trajet lumineux pour viter de fausser les r sultats du fait de la r flexion partielle de la lumi re 11 Conserver les cuves dans une bo te l abri de la poussi re pour viter de les endommager car des cuves ray es ou endommag es peuvent conduire des r sultats incorrects Utilisation et entretien des filtres optiques 1 3 Manipuler les filtres amovibles en les tenant par leurs bords pour viter toute contamination Conserver les filtres de rechange dans une bo te l abri de la poussi re afin d viter qu ils ne se cassent ou se rayent V rifier qu un filtre se trouve dans son logement lorsqu on allume la lampe pour viter d endommager la cellule photo lectrique Ranger les filtres dans leur bo te quand l appareil n est pas utilis Lorsque l appareil est froid et teint interrupteur sur OFF nettoyer les filtres et la fen tre optique avec du papier optique selon les instructions du fabricant Utilisation et entretien de la source lumineuse 1 Eteindre la
198. i l appareil est d fectueux consulter un ing nieur qualifi dans le domaine biom dical Fr quence une fois par mois Inspecter la fen tre et ou la surface frontale du photod tecteur et les nettoyer avec du papier optique MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE 151 CHAPITRE 20 COLORIM TRES 152 Fr quence tous les six mois 1 Inspecter visuellement l appareil pour v rifier l int grit de tous ses l ments conform ment aux sp cifications du fabricant 2 V rifier que les boutons et interrupteurs ainsi que les fermetures m caniques sont mont s correctement et qu ils sont clairement identifi s 3 V rifier que tous les accessoires sont propres et intacts 4 V rifier que les l ments m caniques d assemblage boulons vis crous etc sont bien ajust s et en bon tat 5 V rifier que les cables lectriques ne sont pas fissur s ni rompus et qu ils sont correctement reli s au secteur 6 Pourles analyseurs aliment s par le secteur a V rifier que les c bles de raccordement et leurs bornes sont exempts de poussi re et de corrosion et ne sont pas encrass s b V rifier que les cables lectriques ne montrent pas de signes de r parations de fortune et ne sont pas us s c V rifier que le syst me de mise la terre interne et externe r pond aux normes de s curit lectrique 7 Assurer que les interrupteurs et coupe circuits la bo te fusibles
199. i par le fabricant 1 Brancher l appareil sur la prise de courant et l allumer interrupteur sur ON 2 Attendre 15 minutes pour laisser chauffer les syst mes optique et lectronique de l appareil 3 S lectionner la longueur d onde requise pour la substance analyser par exemple 540 nm pour la cyanm th moglobine 4 S lectionner le mode Absorbance avec la touche de s lection du mode de fonctionnement 5 Pr parer sur un portoir toutes les solutions n cessaires blanc r actif seul sans chantillon talon de concentration connue et solutions analyser chantillons Fen tre d affichage Touche de mode Absorbance Transmittance Touche ON OFF Compartiment chantillon avec cuve 8 aa VU Touche Test g Touche R f rence g v O Touche de mode Cin tique gt z a 6 Nettoyer soigneusement la cuve avec un chiffon doux non pelucheux ou du papier optique pour viter de la rayer Toujours tenir la cuve par son c t d poli opaque 7 Verser la solution de blanc dans la cuve et placer celle ci dans le compartiment chantillon avec les c t s transparents face au rayon lumineux 8 Fermerle compartiment chantillon et mettre l affichage z ro avec la touche SET BLANK r gler blanc 9 Enlever la cuve du compartiment chantillon et remettre la solution de blanc dans son tube essais d origine 10 Verser la solution talon dans la cuve et faire une lecture de l ab
200. ide En climat humide et surtout en climat chaud et humide les microscopes peuvent tre affect s par le d veloppement de moisissures principalement la surface des lentilles dans les pas de vis et sous la couche de peinture protectrice Si l instrument n est pas correctement prot g il risque d tre rapidement mis hors d usage Les pr cautions ci dessous aideront emp cher le d veloppement de moisissures 1 La nuit ranger le microscope dans une bo te quip e d une ampoule lectrique de 40 W maximum Lampoule doit tre install e dans le haut de la bo te pr s de la t te binoculaire et doit rester allum e toute la nuit La bo te doit avoir quelques ouvertures pour que l air puisse circuler La temp rature l int rieur de la bo te ne doit pas d passer 50 C pour ne pas nuire aux propri t s des lubrifiants 2 S il nest pas possible d utiliser une bo te quip e d une ampoule lectrique on peut utiliser un dessiccateur comme le gel de silice ou simplement du riz Si on utilise un dessiccateur v rifier que le microscope est rang dans une bo te ou prot g par une housse en tissu fin comme du tissu mouchoirs V rifier que le produit utilis comme dessiccateur est en bon tat Si ce n est pas le cas le remplacer 3 Nettoyer le microscope intervalles r guliers Utiliser des gants de latex si les lentilles doivent tre manipul es Cela emp chera de laisser des traces de doigts et r duira le r
201. ie sont principalement l absorption et la transmission Pour comprendre de quelle mani re il est n cessaire de mentionner la loi de Beer Lambert Loi de Beer Lambert Aussi appel e loi de Beer ou loi de Beer Lambert Bouguer elle d crit la relation entre la concentration d un chantillon et l intensit de la lumi re transmise par cet chantillon La loi de Beer Lambert utilise deux concepts la transmittance T et l absorbance A La transmittance T est la fraction du rayonnement incident de longueur d onde d termin e qui traverse l chantillon avec intensit du rayonnement transmis intensit du rayonnement incident Rayonnement absorb ON Rayonnement NOAN WAN NA A e ON incident lo WSS AR AA AA AR AE ANNE AY Ve SN NN NU KA AN AA RAL AN AK VY VAN AN AN AN AN ANON YONA AN MN AN NANA AN VN VY AN NN VX NN AN ANA VN AT VY AN AN VAY NN WE RA RQ AN A A AN AN SSAA A CGR ARS A AS AR SR Rayonnement r fl chi Ir Rayonnement transmis It Rayonnement diffuse Id Fluorescence If Le pourcentage de transmittance T peut s exprimer par la formule rT 2 x100 O La concentration de mol cules absorbant la lumi re dans un chantillon est proportionnelle l absorbance A de cet chantillon Elle s exprime math matiquement par la formule A ex x lt c dans laquelle A absorbance mesur e
202. ifugation cuve pour casser le vide Les joints sont encrass s par de la poussi re des restes de lubrifiant s ch ou des particules m talliques Effectuer le nettoyage de routine des joints et les lubrifier Utiliser les produits recommand s par le fabricant 1 Rotors and Tubes for Beckman Coulter J2 J6 and Avanti J series centrifuges User s Manual Palo Alto California The Spinco Business Center of Beckman Coulter 2001 MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE CAUSE PROBABLE SOLUTION Les tubes fuient Les couvercles sont mal fix s Ajuster les couvercles Les tubes sont trop pleins Le m nisque doit se situer plus bas pour viter les fuites Le niveau maximal recommand est d pass dans les V rifier le volume et la vitesse recommand s pour la tubes ouverts centrifugation Un scellement est peut tre d fectueux dans les tubes Appuyer l g rement apr s scellement chaud scellement rapide seulement si le contenu n est pas affect Si des fuites sont visibles sceller nouveau Les tubes sont fissur s ou cass s Les tubes peuvent se casser ou tre fragilis s s ils sont Si l chantillon est congel le r chauffer 2 C avant utilis s au dessous des temp ratures recommand es de centrifuger Tester le comportement des tubes basse temp rature avant de centrifuger Les tubes deviennent fragiles avec l ge et l utilisation Jeter les tubes p rim s et en
203. ine en c ramique et prot g es de l environnement externe par un cran m tallique 7 Arriv e d eau froide Tuyau d amen e de l eau utilis e pour condenser la vapeur d eau en lui retirant de l nergie thermique refroidissement 8 Condenseur Dispositif dans lequel la vapeur perd de l nergie thermique se refroidit et retourne l tat liquide Pour acc l rer ce processus on produit une convection forc e par une circulation de fluide basse temp rature air ou eau autour de la tubulure serpentin o passe la vapeur d eau 9 Filtre Les distillateurs poss dent des filtres au charbon actif situ s la sortie du condenseur ou du collecteur Ces filtres liminent les odeurs ou les particules qui pourraient se trouver dans le condensat 10 R cipient eau distill e Dispositif dans lequel le liquide ayant achev le processus de distillation distillat est recueilli L eau distill e doit tre stock e dans des r cipients sp ciaux en mati re plastique pour viter une contamination par des ions On utilise g n ralement des r cipients en poly thyl ne polypropyl ne ou polyt trafluor thyl ne CONDITIONS REQUISES POUR L INSTALLATION Selon le mod le la capacit et le type de distillateur les conditions d installation peuvent varier Le plus souvent il faut 1 Un environnement bien ventil dans lequel l appareil puisse tre install En effet le distillateur transf re de la chaleur dans
204. install ne convient pas pour l op ration V rifier quel type d embout convient pour l op ration pr vue pr vue Remplacer l embout L embout est d fectueux Mettre un nouvel embout ayant les m mes sp cifications que l embout d origine DAANEN Bo te de P tri Bo te peu profonde en verre ou en mati re plastique utilis e pour les cultures de micro organismes au laboratoire El ment doseur adaptateur Dispositif aussi appel Combitip reli la t te de distribution pour distribuer une solution Il existe diff rentes tailles et formes d adaptateurs en fonction des volumes distribuer et des caract ristiques de la solution utilis e M lange Addition de substances qui ne produisent pas de r action chimique Dans un m lange homog ne la composition et l aspect doivent tre uniformes Milieu de culture Solide ou liquide d velopp des fins m dicales pour cultiver et identifier des micro organismes capables de provoquer des maladies agents pathog nes et pour diverses autres applications 68 Chapitre 11 MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE Spectrophotom tre MTT Spectrophotom tre ultraviolet ultraviolet visible Le mot spectrophotom tre est d riv du latin spectrum qui signifie image et du grec phos ou photos qui signifie lumi re Le spectrophotom tre est l un des principaux appareils con us des fins de diagnostic et de recherche II utilise les
205. intenance Accord RE HS 02 OPS OMS 78 MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE BIATNIRONT Absorption Ph nom ne physique qui se produit lorsque les atomes ou les mol cules d une substance absorbent de la lumi re photons L nergie du photon est absorb e par une autre entit par exemple un atome dont les lectrons de valence passent d un niveau d nergie un autre en d truisant le photon L nergie absorb e est restitu e sous forme de chaleur ou de rayonnement L absorbance est une mesure math matique de l absorption exprim e en unit s de densit optique DO Angstr m Unit de longueur gale 10 m Son symbole est II est utilis pour mesurer les longueurs d onde des rayons X ou des rayons gamma Diffraction Ph nom ne provoqu par un changement de direction et d intensit subi par un groupe d ondes rencontrant un obstacle ou passant par une ouverture troite dont la taille est proche de leur longueur d onde Extinction molaire ou coefficient d absorptivite Mesure de l intensit de l absorption de la lumi re par une entit chimique une longueur d onde d termin e Sila solution contient plus d une entit chimique l absorbance est la somme des absorbances de chaque entit L absorbance une longueur d onde d termin e d un m lange d entit s X Y est donn e par la formule A C xe C xe dans laquelle est l absorbance du m lange
206. ion 8 V rifier que le syst me de mise la terre interne et externe est standardis d un type approuv fonctionnel et correctement install 9 Assurer que les interrupteurs et coupe circuits la bo te fusibles et les indicateurs ne sont pas poussi reux encrass s ou corrod s 10 V rifier que les l ments lectriques externes ne pr sentent pas de signes de surchauffe Entretien g n ral Nettoyage des claboussures En cas de fuite du porte chantillons les claboussures doivent tre nettoy es comme suit 1 Eteindre le spectrophotom tre et d brancher la prise secteur 2 Utiliser une seringue pour nettoyer le porte chantillon Aspirer le plus possible de liquide 3 Essuyer le porte chantillons avec un tampon de coton hydrophile 4 Utiliser du papier optique ou un chiffon doux et propre pour nettoyer la fen tre de la cellule photo lectrique 5 Nettoyer l ext rieur de l appareil y compris l cran le panneau de contr le et le clavier avec un chiffon humect avec de l eau distill e Nettoyage des cuves en quartz Il est recommand de proc der comme suit pour maintenir les cuves en quartz en bon tat 1 Laver les cuves avec une solution alcaline dilu e comme NaOH 0 1 M et un acide dilu comme HCI 0 1 M 2 Rincer les cuves plusieurs fois l eau distill e Toujours utiliser des cuves propres pour effectuer les mesures d absorbance 3 Nettoyer avec un soin particulier
207. ion lectrique pr sentant les caract ristiques suivantes 1 Description de la proc dure d talonnage Fr quence une fois par jour Ftalonner le pH m tre avec une solution de pH connu talonnage en un point Courant monophas 110 V ou 220 230 V fr quence 50 60 Hz 1 1 selon la r gion g ographique 1 2 Il existe aussi des pH metres portables aliment s par piles 1 3 1 4 PROCEDURE G N RALE D ETALONNAGE Les pH m tres doivent tre talonn s avant emploi pour garantir la qualit et la justesse des mesures La proc dure est la suivante 1 Etalonnage en un point Ce type d talonnage est r alis pour des conditions de travail normales et un usage normal ll utilise une solution de r f rence de pH connu 2 Etalonnage en deux points Cet talonnage est r alis to avant d effectuer des mesures tr s pr cises Il utilise deux solutions de r f rence de pH connu Il est galement 1 6 r alis si l instrument n est utilis que de temps autre et si son entretien est peu fr quent Brancher l appareil sur une prise de courant de voltage appropri R gler le s lecteur de temp rature sur la temp rature ambiante R gler l chelle de lecture Sortir les lectrodes de leur tui de rangement Les lectrodes doivent toujours tre stock es dans une solution appropri e Certaines peuvent tre maintenues dans de l eau distill e et d autres doivent tre maintenues dans une solution sp cifi e
208. ionn s selon un programme pr tabli enregistr en m moire Un syst me d enregistrement garde en m moire toutes les op rations ce qui permet de contr ler les diff rentes tapes de la st rilisation Tous les fabricants int grent dans leurs autoclaves un syst me d enregistrement l ment indispensable pour le contr le de la qualit Production de vapeur La vapeur utilis e par les autoclaves est produite dans des dispositifs qui transf rent de l nergie thermique l eau gr ce l nergie lectrique ou l nergie produite par les combustibles fossiles Ce sont les chaudi res ou g n rateurs de vapeur et ils constituent un l ment fondamental de l autoclave Selon leur capacit et leur fr quence d utilisation les autoclaves ont des syst mes d alimentation en vapeur reli s a une chaudi re centrale ou a leur propre g n rateur de vapeur Ces derniers fonctionnent en g n ral avec des r sistances lectriques et sont d j int gr s a l appareil ou fournis comme accessoires par le fabricant UTILISATION DE LAUTOCLAVE On trouvera ci dessous le mode d emploi g n ral des autoclaves Certaines proc dures pourront varier selon le degr d automatisation de l appareil 1 V rifier que le syst me d enregistrement est muni des formulaires et ou du papier n cessaires pour documenter le d roulement du cycle de st rilisation Renouveler tout l ment manquant encre formulaires etc 2 Mettre l
209. ique de capacit adapt e l appareil en courant monophas ou triphas stable selon le mod le et les sp cifications du fabricant En g n ral les centrifugeuses fonctionnent sous 110 V ou 220 V 60 Hz 2 Un environnement propre et sans poussi re avec un plancher ferme et horizontal 3 Si la centrifugeuse est r frig r e il faut laisser un espace libre sur le c t du condenseur pour que le transfert de chaleur puisse s effectuer correctement 4 Une armoire de rangement pour les accessoires de la centrifugeuse notamment les diff rents rotors ENTRETIEN DE ROUTINE L entretien de routine d une centrifugeuse d pend de nombreux facteurs comme la technologie int gr e la fr quence d utilisation la formation des utilisateurs la qualit de l alimentation lectrique et les conditions ambiantes Les recommandations g n rales qui suivent concernent l utilisation correcte et l entretien courant n cessaires pour garantir un fonctionnement optimal Les op rations effectuer en routine et les r parations sp cialis es d pendront des recommandations du fabricant pour chaque marque et mod le Il faut toujours d sinfecter la cuve du rotor la t te de la centrifugeuse les godets et les joints des tourillons avant toute intervention sur des centrifugeuses utilis es pour pr parer des chantillons biologiques ou infectieux Recommandation prioritaire S assurer que seul un personnel qualifi d ment form et con
210. iques de diagnostic Ce type d appareil est d sign sous le nom de diluteur un anglicisme pour dilueur dont l usage s est g n ralis au laboratoire SCHEMA D UN DILUTEUR Figure 22 Sch ma d un diluteur A QUOI SERT UN DILUTEUR Un diluteur sert a pr parer des m langes de substances de fa on a atteindre des concentrations d termin es de la m me fa on qu avec une pipette mais avec l avantage de b n ficier d un processus automatis ou programm Il existe des diluteurs de capacit et de complexit variable Leur capacit d pend du mod le et du fabricant Ils peuvent contr ler des volumes connus compris entre 25 ul microlitres et 25 ml millilitres CTO UUH Propulseur Ai oo Panneau de controle vA Distributeur SS N BS RS REEN Tp IS cat o T MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE 59 CHAPITRE 9 DILUTEUR 60 PRINCIPES DE FONCTIONNEM
211. ire pour s cher et st riliser des r cipients en verre et en m tal Les fabricants ont d velopp plusieurs types d tuves cette fin les unes convection naturelle ou convection forc e les autres convection par gravit En g n ral une tuve fonctionne entre la temp rature ambiante et 350 C Les tuves sont aussi appel es fours air chaud ou tuves four poupinel PHOTOGRAPHIE D UNE ETUVE MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE Code GMDN 21086 21087 Code ECRI 21 086 21 087 Wiel Etuve de laboratoire Etuve de laboratoire circulation d air Photo avec l aimable autorisation de Cole Parmer Instrument Co QUOI SERT UNE TUVE L tuve est utilis e pour st riliser ou s cher de la verrerie et des objets en m tal servant pour les examens ou les tests effectu s au laboratoire Sur du mat riel propre la st rilisation par l air chaud s effectue a 180 C pendant deux heures Lors du chauffage par de l air sec haute temp rature l humidit s vapore et la possibilit de toute activit biologique r siduelle est ainsi limin e PRINCIPES DE FONCTIONNEMENT En g n ral les tuves ont une cuve interne et un caisson ext rieur La cuve interne est r alis e en aluminium ou en acier inoxydable mat riaux ayant de tr s bonnes propri t s de transfert de la chaleur Elle est quip e d une s rie d tag res en fil d acier inoxydable dont la conception permet
212. isque de d veloppement de moisissures 4 Si aucune des alternatives mentionn es n est r alisable mettre le microscope dans un endroit bien ventil Quand le microscope n est pas utilis on peut l exposer la lumi re solaire directe pendant de courtes p riodes Cela r duit l humidit et le risque de d veloppement de moisissures sur l instrument 5 La climatisation contr le de la temp rature et de l humidit emp che de fa on notable le d veloppement de moisissures sur les microscopes Mais pour un grand nombre de laboratoires cette option n est pas envisageable Si la climatisation ne fonctionne pas en permanence dans le secteur o le microscope est install il faut prendre des pr cautions contre l humidit Elimination des moisissures 1 Contr ler et nettoyer fr quemment le microscope selon les proc dures d crites dans ce chapitre Contr ler les conditions d humidit dans l endroit o le microscope est rang Si une ventilation ad quate peut tre assur e cela diminuera le risque de d veloppement de moisissures sur le microscope 2 Si on constate la pr sence de moisissures prendre un tampon d ouate coton tremp dans une solution antifongique normalement de l ther ou du xylol xyl ne Frotter doucement en effectuant un mouvement circulaire sur toute la surface de la lentille On peut aussi frotter en faisant des va et vient de bas en haut ou de gauche droite en appuyant tr s l g remen
213. istillation Processus au cours duquel un fluide en phase liquide est chauff jusqu ce qu il soit transform en vapeur puis refroidi et condens pour retourner l tat liquide La distillation s utilise pour s parer des substances en m lange en exploitant leur diff rence de volatilit Pour obtenir des substances tr s pures des cycles cons cutifs de distillation sont effectu s afin d liminer progressivement les autres substances pr sentes dans le m lange Duret de l eau Caract ristique chimique de l eau d termin e par sa teneur en carbonate bicarbonate chlore sulfate et parfois nitrate de calcium et magn sium Une eau dure ne convient pas pour certains processus Il existe deux types de duret de l eau e Duret temporaire Elle est d termin e par la teneur en carbonate et en bicarbonate de calcium et de magn sium On peut l liminer en faisant bouillir l eau et en filtrant le pr cipit On l appelle aussi duret carbonat e e Duret permanente Elle est d termin e par l ensemble des sels de calcium et de magn sium l exception des carbonates et bicarbonates On ne peut pas l liminer en faisant bouillir l eau On l appelle aussi duret non carbonat e Interpr tation de la duret Teneur en CaC03 en mg l 0 75 eau douce 75 150 eau mi dure 150 300 eau dure gt 300 eau tr s dure Dans l eau potable la limite maximale autoris e est de 300 mg l Dans l eau destin e aux appareils de chauffage la limite est de
214. ix mois Outils et instruments n cessaires Pour proc der aux inspections techniques normalement requises pour une centrifugeuse les outils et instruments suivants sont n cessaires 1 Une cl pour serrer et desserrer les boulons du rotor 2 Un testeur de s curit lectrique ou un appareil de mesure du courant de fuite Un minuteur 4 Un thermom tre lectronique avec une exactitude de 0 5 C pour les centrifugeuses r frig r es 5 Un tachym tre ou un phototachym tre cd GUIDE DE D PANNAGE CAUSE PROBABLE Le rotor nest pas quilibr Fortes vibrations SOLUTION Equilibrer la charge du rotor Remplir tous les tubes oppos s avec le m me niveau de liquide de m me densit R partir sym triquement le poids des tubes oppos s Charger sym triquement les rotors angulaires ou verticaux La vitesse choisie est proche de la plage de r sonance Choisir une vitesse de rotation en dehors de la plage du rotor de r sonance Le montage du rotor est incorrect V rifier le montage du rotor V rifier qu il est bien ajust Les supports du rotor ne sont pas correctement lubrifi s Lubrifier l axe de rotation selon les recommandations du fabricant par exemple toutes les 250 centrifugations Les couvercles du rotor des cartouches ou de la cuve Il se produit un vide pendant la centrifugation Ouvrir la prise d air sur le dessus du rotor ou de la sont difficiles ouvrir apr s centr
215. jection position 6 Note Si on utilise une pipette a volume variable il faut d abord choisir le volume a distribuer Suivre pour cela les instructions du fabricant Normalement le dispositif de r glage du volume se trouve sur la partie sup rieure de la pipette Il est n cessaire que l op rateur sache distinguer les diff rentes chelles de volume ENTRETIEN DE ROUTINE On trouvera ci apr s les grandes lignes des proc dures d entretien courant des pipettes m caniques Les interventions sp cifiques devront tre r alis es sur les diff rents mod les en se conformant au manuel d utilisation fourni par le fabricant Inspection Fr quence une fois par jour Les pipettes doivent tre fr quemment inspect es afin de d tecter toute usure ou d t rioration anormales et ou de v rifier qu elles sont en bon tat de marche L inspection doit porter sur les aspects suivants 1 V rifier l int grit et l ajustement des m canismes Ils doivent jouer librement Le piston doit se d placer sans a COUDS 2 V rifier que l embout de fixation de la pointe ne pr sente pas de distorsions ni de signes d usure car il est indispensable pour l exactitude des mesures V rifier l ajustement des pointes 3 Mettre une pointe en place et la remplir d eau distill e La pipette ne doit pr senter aucune fuite Nettoyage et d contamination 1 V rifier tous les jours que la pipette est propre Si elle para t sale la netto
216. la balance et continuer ainsi jusqu ce que le z ro se positionne correctement sur l chelle de lecture MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE Figure 10 Balance plateau sup rieur nn Masse EE a Plateau a Raccords tp souples F _ _ Colonne Figure 11 Balance a substitution Echelle de lecture R glage ae de sensibilit xX TS Masse connue M canisme de r glage du z ro O D Couteau Masse inconnue 3 V rifier et r gler la sensibilit Il faut toujours le faire chaque fois qu un r glage interne est effectu Appliquer la proc dure standard comme suit a b AO oO Bloquer la balance Placer un poids standard quivalent l tendue de l chelle de lecture optique sur le plateau Positionner le r glage microm trique sur 1 un D bloquer la balance R gler sur z ro Positionner le r glage microm trique sur 0 z ro La balance doit indiquer 100 Si l chelle indique plus ou moins que 100 il faut r gler la sensibilit Pour cela il faut bloquer la balance ouvrir le capot sup rieur et tourner la vis de r glage de la sensibilit Si l chelle indique plus que 100 tourner la vis dans le sens des aiguilles d une montre
217. lairage ne sont pas scell s pour emp cher l infiltration de la poussi re et des impuret s La pr sence de poussi re dans le syst me provoque un ph nom ne de diffusion et diminue la quantit de lumi re projet e sur l chantillon Les impuret s de grande taille produisent des ombres qui rendent l observation difficile Pour rem dier ce probl me il faut d monter le syst me d clairage nettoyer ses l ments le remonter et le r aligner MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE 109 CHA 110 PITRE 15 MICROSCOPE Miroirs Les miroirs ont un rev tement r fl chissant directement appliqu sur leur surface Dans les microscopes r cents ils sont en g n ral recouverts d une couche protectrice Dans les appareils plus anciens la couche r fl chissante est expos e la corrosion Lampe a incandescence L ampoule est un consommable dont la dur e de vie op rationnelle est limit e Son acquisition doit tre pr vue a l avance de fa on assurer qu il y aura toujours une ampoule de rechange dans le laboratoire ou l tablissement o le microscope est install Lampoule doit tre mise en place selon les instructions du fabricant Certains appareils comme les microscopes fluorescence utilisent des ampoules sp ciales au mercure ou au x non qui n cessitent des proc dures de montage et d talonnage qui bien que simples doivent tre r alis es selon les recommandations du f
218. lampe apr s chaque utilisation pour prolonger sa dur e de vie Certains fabricants recommandent de tenir un registre de l utilisation de la lampe du colorim tre Contr ler la lampe intervalles r guliers La remplacer si elle est l origine de l instabilit du signal d absorption MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE Alignement de la lampe La proc dure ci dessous indique comment proc der l alignement d une nouvelle lampe Se reporter aux instructions du fabricant pour v rifier que la proc dure est conforme aux sp cifications du mod le utilis R aligner la nouvelle lampe comme suit 1 Mettre une cuve propre emplie d eau distill e en place dans l appareil Mettre l indicateur la moiti de l chelle de lecture par exemple 50 de transmission D placer l g rement chaque l ment optique et v rifier si la lecture est modifi e Si n cessaire ajuster l alignement de la lampe pour obtenir une transmission maximale On peut aussi placer un carton blanc en face de la cellule photo lectrique certains instruments le permettent Observer l image de la lampe sur le carton Elle doit tre verticale et nette Si non ajuster l alignement de la lampe jusqu ce qu on obtienne la meilleure image 153 CHA 154 PITRE 20 COLORIM TRES On trouvera ci dessous un guide de d pannage pour les colorim tres Comme il existe de nombreux mod les diff rents tenir compte
219. lanc talons solutions a analyser 6 Laisser les solutions s quilibrer la temp rature ambiante pendant 10 minutes 7 Pendant ce temps nettoyer soigneusement la cuve en utilisant un chiffon doux pour viter de la rayer 8 Eviter de toucher les c t s de la cuve qui font face au rayon lumineux tenir la cuve par ses c t s opaques qui ne sont pas sur le trajet de la lumi re 9 Verser la solution de blanc dans la cuve et placer celle ci dans le compartiment chantillon avec les c t s transparents face au rayon lumineux 10 Faire le blanc de l appareil fermer le couvercle et attendre environ 3 secondes puis r gler le bouton de l affichage sur z ro 0 00 11 Retirer le blanc du compartiment chantillon et le remettre dans son tube essais d origine 12 Verser la solution talon dans la cuve et placer celle ci dans le compartiment chantillon 13 Fermer le couvercle et attendre 3 secondes Noter la valeur lue sur l cran digital 14 Retirer l talon du compartiment chantillon et le remettre dans son tube essais d origine 15 Verser la solution chantillon dilu e dans la cuve et placer celle ci dans le compartiment chantillon 16 Fermer le couvercle attendre 3 secondes et noter la valeur lue sur l affichage digital 17 Retirer l chantillon du compartiment et le remettre dans son tube essais d origine 18 R p ter les tapes 15 17 pour chaque chantillon analyser 19 Ri
220. lance n a pas t mise z ro avant la lecture La balance est incorrectement talonn e La balance n est pas horizontale Les unit s sont incorrectement s lectionn es L unit souhait e n est pas disponible ou n est pas activ e Le menu est peut tre verrouill La touche End n a pas t press e pour finaliser le processus La surface de la table ou de la paillasse vibre La porte avant de la balance est ouverte Le microprocesseur est bloqu SOLUTION V rifier le branchement Remettre correctement le cable de raccordement si n cessaire V rifier l alimentation lectrique Mettre la balance sur z ro refaire la mesure Etalonner selon la proc dure recommand e par le fabricant Mettre la balance de niveau V rifier la proc dure d finie par le fabricant pour s lectionner l unit de mesure souhait e Activer l unit de mesure selon la proc dure d finie par le fabricant V rifier si la touche de verrouillage du menu est activ e Si oui la d sactiver V rifier que les modifications et les s lections sont effectu es conform ment aux instructions du fabricant Refaire la s lection ou la modification Eteindre la balance attendre un moment et rallumer la balance Placer la balance sur une surface stable Fermer la porte avant pour effectuer la mesure L interface RS232 ne fonctionne pas Le c ble de raccordement est mal connect V rifier que le cable est bien c
221. le de supporter le poids de l incubateur Le poids d un incubateur avec trois tag res se situe entre 60 et 80 kg 5 Des r gulateurs de pression tuyaux et raccords pour les incubateurs travaillant sous atmosph re de dioxyde de carbone CO et des syst mes de fixation pour les bouteilles de CO sous pression ENTRETIEN DE ROUTINE ET UTILISATION DE L INCUBATEUR On trouvera ci dessous un mode d emploi g n ral et une description des op rations d entretien courantes pour les incubateurs Pour les proc dures exactes on se conformera aux recommandations du fabricant Ecran d affichage 2 Lampes t moins DEL 5 Position Marche ON Position Arr t OFF Panneau de control 6 N Interrupteur principal 1 Touches de commande 3 Touches de r glage 4 MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE 101 CHAPITRE 14 INCUBATEUR 102 Recommandations pour l utilisation de l appareil 1 Ne pas utiliser un incubateur en pr sence de mati res inflammables ou combustibles car les l ments internes de l appareil pourraient constituer des sources d ignition pendant le fonctionnement 2 Eviter les claboussures de solutions acides dans l incubateur Elles pourraient endommager le mat riau de l enceinte d incubation Si possible essayer d utiliser des substances de pH neutre Eviter d incuber des substances mettant des vapeurs corrosives 3 Eviter de d poser des r cipients d
222. le et convection forc e Quand une temp rature plus basse que la temp rature ambiante Ta est n cessaire dans l enceinte d incubation l incubateur doit tre muni d un syst me de r frig ration Ce syst me permet d extraire la chaleur de l enceinte afin de maintenir celle ci une temp rature plus basse Le syst me 1 Transfert de chaleur par l quation de convection tablie par Isaac Newton loi de refroidissement de r frig ration est command par le syst me de contr le de la temp rature de l incubateur L eau l tat liquide poss de un pouvoir lev d absorption et de r tention de la chaleur Certains fabricants ont d velopp des mod les d incubateurs dans lesquels l enceinte d incubation est entour e d une double paroi remplie d eau Ce dispositif est particuli rement utile pour assurer la stabilit de la temp rature l int rieur de l enceinte Il existe des incubateurs avec dispositif d injection de gaz comme le dioxyde de carbone CO dans l enceinte a des concentrations stables comprises entre 3 et 5 Le syst me de contr le de la temp rature de incubateur repose sur l utilisation de thermostats bilames ou a dilatation de liquide thermocouples thermistors et divers dispositifs semi conducteurs Ceux ci utilisent des circuits lectroniques qui contr lent la temp rature ainsi que les fonctions de l incubateur au moyen de microprocesseurs Chaque fabricant a son propre syst me La tem
223. le joint R p ter cette op ration en proc dant par 10 cm la fois sur la totalit du joint Avertissement Un joint de porte en mauvais tat provoque divers probl mes de fonctionnement 1 Il laisse entrer l humidit qui se condense et forme du givre dans l vaporateur 2 Il allonge le temps n cessaire pour que le compresseur puisse maintenir la temp rature s lectionn e 3 11 modifie la temp rature du compartiment de conservation 4 I augmente le co t de fonctionnement D givrage Fr quence tous les six mois De nombreux cong lateurs modernes ont des cycles de d givrage automatique de l vaporateur afin d viter l accumulation de glace Normalement ces cycles utilisent des r sistances qui liminent rapidement le givre Certains mod les ne poss dent pas de d givrage automatique et le processus s effectue manuellement selon un calendrier d fini l avance La proc dure recommand e pour le d givrage est la suivante 1 V rifier que l paisseur de givre est sup rieure 8 mm Enlever le contenu du compartiment de cong lation D brancher le cong lateur Laisser la porte ouverte Enlever l eau mesure qu elle s accumule dans les compartiments Utiliser une ponge ou un chiffon absorbant 6 Placer une serviette pour viter que la glace qui fond ne mouille le devant et l int rieur du r frig rateur LR ne Avertissement Ne jamais utiliser d instruments pointus po
224. lement repr sent par la lettre n ou n dans la litt rature technique ou les formules math matiques Oculaire Jeu de lentilles au travers desquelles le microscopiste observe l image image r elle ou virtuelle selon la relation qui existe avec les autres jeux de lentilles du microscope Ouverture num rique Mesure de la capacit d un objectif concentrer la lumi re et distinguer les d tails fins d un objet Normalement la valeur de l ouverture num rique est inscrite sur le c t de l objectif Une valeur plus lev e de l ouverture num rique permet un plus grand nombre de rayons lumineux obliques de traverser la lentille frontale de l objectif ce qui donnera une meilleure r solution de l image Elle s exprime par la formule math matique NA nsin dans laquelle Ouverture num rique Expression math matique NA ouverture num rique Numerical Aperture ee pe ha ol Eein NA nxSin n indice de r fraction n 1 pour l air n 1 52 pour 027 1x l huile immersion ae angle d ouverture Plus l angle est grand Sin 16 pe Grossissement plus l ouverture num rique est grande et meilleure est la r solution environ 10X NA n x Sin 0 0 42 1x Sin 25 Grossissement environ 20X NA nxSin 0 68 1x Sin 43 Grossissement environ 40X MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE Plage de grossisseme
225. ler par la formule L R 0 P A dans laquelle p r sistivit du mat riau de la r sistance A aire de la section du fil de la r sistance L tuve poss de une porte m tallique ayant sa propre isolation thermique et munie d une poign e galement isol e pour emp cher de se br ler les mains La porte est mont e sur la face avant de l tuve avec un syst me de charni res qui permettent une ouverture un angle de 180 Les tuves modernes sont contr l es par un module command par microprocesseur qui permet de s lectionner les param tres de fonctionnement de l appareil et de fixer les consignes d alarme et de programmer les cycles ou processus thermiques qui contr lent non seulement les temp ratures mais aussi leurs variations au cours des phases de chauffage et de refroidissement naturel et les p riodes pendant lesquelles elles doivent tre maintenues constantes Les tuves fonctionnent normalement entre la temp rature ambiante et 350 C Certains mod les travaillent dans un intervalle plus restreint Les mod les anciens ne poss dent qu une s rie de r sistances dont le fonctionnement est contr l par un thermostat Le tableau ci dessous indique la relation entre la temp rature et le temps de st rilisation par la chaleur s che dans une tuve Tableau de temp rature temps de st rilisation par la chaleur s che Temp rature C 180 30 170 160 150 140 121 Temps minutes
226. les cuves ayant contenu des chantillons qui risquent de d poser un film Certains fabricants recommandent d utiliser des d tergents sp ciaux pour le lavage des cuves de spectrophotom tres Remplacement des piles Divers mod les de spectrophotom tres utilisent des piles pour garder en m moire les donn es associ es l analyse comme la date et l heure La proc dure de remplacement des piles est la m me que pour les autres appareils La proc dure recommand e est la suivante 1 V rifier que l indicateur de batterie faible appara t sur l cran de l appareil 2 Eteindre le spectrophotom tre 3 D brancher le cable d alimentation lectrique 4 Ouvrir le logement des piles et enlever les piles us es 5 Nettoyerles contacts lectriques 6 Mettre en place de nouvelles piles ayant les m mes caract ristiques que les piles d origine 7 Refermer le logement des piles 8 Rebrancher l appareil 9 R gler la date et l heure Remplacement de l ampoule de la lampe L ampoule est un consommable dont la dur e de vie est limit e Il faut pr voir qu un certain moment il sera n cessaire de la remplacer Soit elle grillera soit elle pr sentera une vaporation et une m tallisation internes et la lumi re mise ne r pondra plus aux sp cifications de fonctionnement du spectrophotometre La proc dure de remplacement de la lampe varie d un mod le l autre et il faut toujours se conformer aux instructi
227. lis s sont humides Le pi ge vapeur est d fectueux Contr ler et nettoyer le pi ge vapeur Remplacer le pi ge vapeur Le tuyau de vidange de la cuve de st rilisation est Contr ler le syst me de vidange Le nettoyer bouch L autoclave est surcharg R duire la charge introduite dans la cuve R p ter le cycle de st rilisation autoclave n est pas de niveau Mettre l autoclave de niveau L indicateur biologique est positif L indicateur biologique a t incorrectement Utiliser un indicateur biologique d un autre lot ou s lectionn d un autre fabricant Enregistrer soigneusement les param tres La pression de vapeur est trop faible Le joint d tanch it de la porte est d fectueux Contr ler le joint Le remplacer La vapeur de l int rieur fuit vers un autre l ment de Contr ler les pi ges lectrovannes etc l autoclave La pression de vapeur est trop forte autoclave est surcharg avec des produits textiles R duire la charge de l autoclave ee autoclave n est pas talonn Etalonner l autoclave Contr ler la pression de la vapeur de l eau et de l air entrants Ajuster les syst mes de r gulation 91 CHAPITRE 12 AUTOCLAVES 92 DIAAN Asepsie Ensemble de proc dures n cessaires pour liminer les micro organismes Atmosph re Ancienne unit de pression quivalente 101 325 Pa Pascals Bar Unit de pression quivalente 10 Pa Pascals Chal
228. lle Voir le texte pour les d tails et quations Lorsqu un objet clair h est plac une distance a devant une lentille convergente les rayons lumineux traversent la lentille et sont r fract s Un rayon traversant la partie sup rieure de l objet croise l axe optique de la lentille au point focal F Il est r fract par les deux faces de la lentille et sort dans une direction parall le l axe optique Le rayon qui traverse la partie sup rieure de l objet parall lement l axe optique traverse la lentille et est r fract Il passe ensuite par le point focal F du c t image jusqu ce qu il croise le premier rayon une distance b de la lentille o se forme l image Dans le cas illustr par la figure 42 la distance a est sup rieure la distance focale f et il se forme une image r elle renvers e la distance b de la lentille La distance focale f est li e aux distances a et b par la relation 1 1 1 f a b Figure 43 Sch ma d un microscope Objectifs 5 Platine porte objet 23 Condenseur 6 Diaphragme 7 Verre protecteur avec porte filtre 1 0 i MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE Le grossissement M d une lentille d fini par la relation entre la taille de l objet et la taille de l image form e est repr sent par la formule _h b kWa M dans laquelle h et h correspondent respe
229. ltrant ayant les m mes caract ristiques que l l ment d origine 4 Remettre en place le dessus du filtre Avertissement Le filtre est ajust dans son logement au moyen de joints toriques ou de joints d tanch it qui doivent tre soigneusement remis en place dans leur rainure pour viter les fuites d eau distill e Nettoyage du condenseur Fr quence une fois par an 1 Pour nettoyer le condenseur il est n cessaire d enlever les panneaux de protection ou d ouvrir la porte de l appareil pour avoir acc s au condenseur 2 V rifier que le distillateur est d branch 3 Enlever le condenseur D connecter le syst me de raccordement l entr e de vapeur et le raccord entre le condenseur et le r cipient de stockage de l eau distill e 4 D faire les vis de fixation du ventilateur au condenseur D connecter le ventilateur 5 Retirer le ventilateur et enlever la poussi re accumul e sur les pales Lubrifier l axe de rotation avec de l huile min rale deux gouttes 6 Retirer le condenseur Aspirer la poussi re et les impuret s accumul es sur les ailettes On peut aussi utiliser de l air comprim ou une brosse tremp e dans de l eau savonneuse 7 Rincer les diff rentes parties 8 S cher 9 R assembler en suivant l ordre inverse des op rations MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE 55 CHAPITRE 8 DISTILLATEUR 56 St rilisation du r cipient de stockage de l e
230. m rot es et pr sent es selon leur s quence d ex cution on trouvera les proc dures sp cifiques pour les divers appareils dans les manuels d utilisation fournis par les fabricants o Un guide de d pannage avec les probl mes les plus fr quemment rencontr s selon le type d appareil leur cause probable et les moyens d y rem dier o Une liste de d finitions simples de certains termes sp cialis s utilis s dans le texte o Pour certains appareils des d veloppements suppl mentaires sur l talonnage le contr le de qualit et les diff rents mod les avec leurs fonctions Toutes ces informations jointes un usage correct et soigneux aideront maintenir l quipement de laboratoire dans son tat optimal XI 0600 Chapitre 1 MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE Lecteur de microplaques GMDN Code 37036 ECRI Code 16 979 MTN Lecteur photometrique pour microplaques Le lecteur de microplaques aussi appel lecteur photom trique pour microplaques ou lecteur ELISA est un spectrophotom tre sp cialis dans la lecture des r sultats des tests ELISA une technique utilis e pour d tecter la pr sence d anticorps ou d antig nes sp cifiques dans des chantillons La technique repose sur la d tection d un antig ne ou d un anticorps captur s sur une surface solide au moyen d anticorps directs ou secondaires marqu s ce qui donne une r action dont le produit peut tre lu
231. masse volumique de la solution u viscosit du milieu liquide g acc l ration de la pesanteur Vitesse angulaire Vitesse de rotation d un corps mesur e en radians par seconde Elle se calcule par la formule w 27 x rpm 60 rpm tours par minute n constante valant 3 1416 apitre 3 istillateur Code GMDN 40478 Code ECRI 15 136 Unit s de distillation D nomination Le mot distillateur vient du latin distillare qui signifie vaporiser des liquides sous l effet de la chaleur Le distillateur utilis au laboratoire aussi appel appareil de production d eau distill e purifie l eau courante par un processus de vaporisation et de refroidissement contr l s II transforme l eau liquide en vapeur en lui appliquant de l nergie thermique par chauffage Lors de la vaporisation les mol cules d eau se s parent des autres mol cules dilu es ou m lang es dans la phase liquide La vapeur d eau est recueillie et passe dans un condenseur o elle est refroidie et retourne l tat liquide L eau condens e est ensuite recueillie et stock e dans un r servoir s par L eau distill e pr sente des caract ristiques de puret sup rieures celles de l eau courante elle est pratiquement exempte de substances contaminantes SCHEMA D UN DISTILLATEUR Figure 21 Distillateur 1 G n rateur de vapeur 2 Jauge de niveau d eau 3 Vanne de r gulation 4 Raccordement au r seau de distribution N E 5 Eau e
232. me Pour effectuer le nettoyage on fait circuler un liquide qui compl te la solution de nettoyage suivre les recommandations du fabricant On utilise couramment de l eau d sionis e comme liquide de nettoyage Selon les substances trait es dans le diluteur d autres agents de nettoyage peuvent tre utilis s par exemple l thanol l ur e ou une solution d eau de Javel a 10 dans l eau d sionis e Nettoyage du syst me hydraulique Fr quence avant la premi re mise en service 1 Pr parer un r cipient de solution de nettoyage et y plonger le tuyau de remplissage les fabricants recommandent d utiliser des agents de nettoyage compatibles avec le diluteur Plonger le tuyau de vidange dans le r servoir de vidange Effectuer un cycle de remplissage ou d amorcage jusqu ce que les tuyaux soient propres Retirer le tuyau de remplissage de la solution de nettoyage et le plonger dans un r cipient contenant de l eau d sionis e Refaire un cycle de remplissage ou d amor age jusqu ce que le trajet du liquide ne contienne plus de solution de nettoyage Jeter le liquide et rincer le r servoir de vidange Arr ter le cycle de remplissage Mettre le syst me de propulsion en position de repos Utiliser le syst me maintenant propre et pr t l emploi Proc dure pour le stockage du diluteur Fr quence chaque fois que le diluteur doit tre stock pendant une dur e prolong e i Purger et amorcer le syst me
233. me suit 1 Mettre la plaque d talonnage dans l appareil 2 Effectuer une lecture compl te avec la plaque d talonnage V rifier s il y a des diff rences de lecture d un puits a l autre Si c est le cas faire pivoter la plaque de 180 et refaire la lecture pour voir si les diff rences sont dues la plaque elle m me En g n ral on admet que l appareil n a pas besoin d un talonnage plus pouss si les r sultats correspondent aux valeurs attendues pour deux longueurs d onde 3 V rifier si le lecteur n cessite un talonnage Si oui l effectuer en suivant la proc dure indiqu e par le fabricant en v rifiant que la lin arit des lectures se maintient aussi rigoureusement que possible 4 Si l appareil n est pas livr avec une plaque d talonnage le contr ler en d posant une solution color e dans les puits d une plaque et en effectuant imm diatement une lecture compl te Puis faire pivoter la plaque de 180 et refaire la lecture Si les deux s ries de lectures donnent des r sultats moyens identiques pour chaque rang e le lecteur est talonn MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE 5 V rifier que le lecteur est talonn en proc dant colonne par colonne Prendre une plaque propre et vide et faire une lecture S il n y a pas de diff rence entre les lectures moyennes de la premi re la derni re colonne on peut consid rer l appareil comme talonn ENTRETIEN DE ROU
234. mettant d vacuer le liquide de condensation qui se forme l int rieur de la double enveloppe par suite du transfert de chaleur entre la vapeur et les parois de la double enveloppe Soupape d vacuation de la vapeur en fin de cycle Lorsqu un cycle de st rilisation est achev la vapeur est vacu e de l autoclave selon des proc dures contr l es R ducteur du tuyau d vacuation de la vapeur pour les cycles de st rilisation de liquides Dispositif m canique qui limite le passage de la vapeur pendant un cycle de st rilisation de produits liquides pour permettre la temp rature de baisser de fa on contr l e et d emp cher les liquides st rilis s de bouillir 9 Tuyau d vacuation du liquide de condensation ES 7 Tuyau d vacuation du liquide pereen de condensation de la cuve 8 Thermom tre O de la double enveloppe G Electrovannes 1 Soupape de s curit ay SS 10 Soupape d vacuation de la vapeur en fin de cycle 1 pas 2 Manom tre de la cuve 7 11 R ducteur du tuyau d vacuation de la vapeur J pour les cycles de st rilisation de liquides 3 Manom tre de la double enveloppe H2 3H 12 Tuyau d
235. miteur de d givrage 6 R sistances frontales 6 R sistance du condenseur 5 R sistance de d givrage d givrage 1 Interrupteur 5 Temporisateur de d givrage 5 Interrupteur de J s 3 Compresseur Ventilateur du condenseur principal 7 Thermostat E S curit du compresseur 5 Moteur du temporisateur de d givrage 134 5 R partir la charge uniform ment dans le r frig rateur L uniformit de la temp rature d pend de la libre circulation de l air l int rieur de l appareil 6 Eviter de laisser la porte ouverte pendant longtemps afin d emp cher l nergie thermique et l humidit de l air de p n trer dans l enceinte du r frig rateur Cela entrainerait la formation de givre et l verait la temp rature du syst me N ouvrir la porte que pour d poser ou enlever des objets Commandes des r frig rateurs conservateurs La figure 58 pr sente le sch ma d un panneau de contr le de mod le r cent pour les r frig rateurs conservateurs par exemple un r frig rateur pour banque de sang Le sch ma montre les l ments suivants 1 Interrupteur principal actionn par une touche 2 T moins de porte ouverte de batterie faible et de probl mes techniques Touches de r glage des param tres 4 Ecran d affichage ENTRETIEN DE ROUTINE DES REFRIGERATEURS Les r
236. n Photo avec l aimable autorisation de Systec GmbH 35366 16 142 Unite de st rilisation de paillasse Nettoyage Decontamination Inspection Pr paration et emballage St rilisation Stockage Distribution oa ee SS A QUOI SERT UN AUTOCLAVE L autoclave est un appareil destin liminer de fa on fiable les micro organismes qui seraient sans cela pr sents sur des objets utilis s des fins de diagnostic de traitement ou de surveillance dans les tablissements de sant h pitaux laboratoires Il est de m me largement utilis dans l industrie alimentaire et dans l industrie pharmaceutique Au laboratoire le mat riel et autres objets sont st rilis s pour 1 Pr parer le mat riel n cessaire aux cultures bact riologiques tubes essais pipettes bo tes de P tri etc afin d viter qu il ne soit contamin 2 Pr parer les instruments utilis s pour pr lever les chantillons Tous doivent tre st riles aiguilles tubes r cipients 3 St riliser le mat riel contamin Il existe des autoclaves de diff rentes tailles Les plus petits sont de type pour paillasse et les plus grands sont des appareils complexes qui n cessitent une pr installation soigneuse Le volume de la cuve de st rilisation est pris comme r f rence et est mesur en d cim tres cubes dm ou en litres I C est ce volume qui d termine la taille de l autoclave Selon le mode de contr le du fonctionnement des a
237. n observer La platine peut se d placer selon les axes X et Y au moyen de boutons macrom trique et microm trique ind pendants Elle poss de aussi des dispositifs qui permettent des d placements sans a coups gr ce des glissieres en queue d aronde qui sont normalement lubrifi es Le dessus de la platine porte des plaques ou des clips servant maintenir les lames d chantillons L entretien consiste assurer que ces l ments sont propres lubrifi s et bien ajust s L entretien du revolver porte objectifs est simple Il poss de un m canisme interne qui assure l alignement de l objectif utilis avec le syst me optique du microscope On le fait simplement tourner jusqu ce qu un m canisme d encliquetage mette correctement en place l objectif suivant Chaque fabricant d finit le nombre d objectifs qui peuvent tre mont s sur le revolver Dans la plupart des cas le revolver porte de trois cinq objectifs L entretien consiste assurer que le m canisme de rotation est propre lubrifi et bien ajust Figure 48 Revolver porte objectifs NT 4 Revolver porte objectifs 5 Objectifs Les surfaces optiques externes des objectifs doivent tre r guli rement nettoy es Avec les objectifs immersion il faut essuyer l huile apr s chaque utilisation de fa on viter qu elle ne contamine les l ments optiques internes par capillarit Le corps du microscope aussi appel statif est destin
238. n Une s rie de valves contr lant le processus d aspiration et de distribution compl te les seringues et leur syst me de d placement La configuration du diluteur d pend du mod le et du fabricant Syst me de contr le Les diluteurs modernes ont un syst me de contr le automatique ou command par microprocesseur Le microprocesseur permet de s lectionner et de contr ler les param tres suivants 1 Processus de m lange et ou de dissolution de substances programmable Distribution de volumes pr d finis Vitesse de distribution ou d aspiration Nombre de cycles requis Calibre ou capacit volume des seringues Temps Cycles d amor age et de nettoyage Proc dures de contr le de la qualit oo ENT o Pour donner une id e plus claire de la complexit technique de ce dispositif la figure ci dessous montre un sch ma du syst me de contr le command par microprocesseur avec l affichage de certaines des fonctions du diluteur Les commandes de ce type de dispositif sont en g n ral sym triques s il y a deux syst mes d injection Ecran de l injecteur gauche Ecran de l injecteur droit Calibre de la seringue droite dns R
239. n chantillon Enzyme Prot ine qui acc l re catalyse les r actions chimiques Fluorophore Mol cule qui absorbe la lumi re une longueur d onde d termin e et qui la r met une longueur d onde plus lev e Laveur de microplaques Appareil utilis pour laver les plaques divers stades des tests ELISA afin d liminer les r sidus de composants non li s apr s une r action Les laveurs de microplaques utilisent des tampons de lavage sp ciaux Lecteur de microplaques Nom donn aux spectrophotom tres capables de lire des microplaques Microplaque ELISA Consommable standardis pour l ex cution des tests ELISA Les plaques comportent en g n ral 96 puits classiquement dispos s en 8 rang es et 12 colonnes Il existe aussi des microplaques ELISA 384 puits et jusqu 1536 puits pour les tests sp cialis s r aliser cadence lev e dans les centres ayant une forte demande TMB T tram thylbenzidine substrat pour la peroxydase de raifort enzyme Chapitre 2 MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE Laveur de microplaques GMDN Code 17489 ECRI Code 17 489 Laveur de microplaques Le laveur de microplaques aussi appel laveur de microplaques ELISA ou laveur ELISA est con u pour effectuer les op rations de lavage requises par la technique ELISA Il effectue le lavage des puits des microplaques ELISA divers stades du test PHOTOGRAPHIE D UN LAVEUR DE MICROPL
240. n chiffon propre imbib d un d tergent doux m lang de l eau 2 Frotter doucement les surfaces du diluteur et de ses accessoires 3 S cher les surfaces trait es Avertissement Eviter que l humidit ne p n tre dans le compartiment des composants lectriques et lectroniques N d article Modele Intervalle selon le selon le utile volume fabricant fabricant manipul Volume de la seringue Solution aqueuse Liquides visqueux selon fabr selon fabr selon fabr selon fabr selon fabr selon fabr selon fabr selon fabr 1 Table 2 4 Microlab 501A 503A 504A User s Manual Hamilton Company selon fabr selon fabr 61 CHAPITRE 9 DILUTEUR 62 Nettoyage des seringues et tuyaux Avertissement Si le diluteur a t en contact avec des substances dangereuses respecter les proc dures de s curit et de pr vention en vigueur dans le laboratoire Fr quence une fois par jour 1 Alimenter le syst me avec une solution de nettoyage S adresser au fabricant pour savoir quelle solution utiliser V rifier que tous les l ments du syst me sont en contact avec la solution et que les bulles d air ont t limin es Ce processus est appel amor age Pour alimenter le syst me on relie le diluteur un r cipient contenant la solution de nettoyage Une fois l amor age termin on vide la solution dans un autre r cipient en attendant de l liminer Nettoyer le syst
241. n n gative Permet de travailller sur de petites quantit s de produits chimiques toxiques ou radioactifs Pr filtre Filtre HEPA d alimentation V vert 55 PLm 28cm s Le F As PN n Psa eR V 100PLm 50 8cm s Grille avant Vue lat rale CLASSE II TYPE B2 Conduite d vacuation Filtre HEPA d vacuation Conduite post rieure sous pression n gative Grille arri re Protection de l op rateur du produit et de l environnement Vitesse de l air l entr e dans l enceinte 50 8 cm s Convient pour le travail avec des agents correspondant aux niveaux de s curit biologique 1 2 ou 3 Syst me de filtration deux filtres HEPA Ce type d enceinte est une enceinte vacuation totale Elle ne poss de pas de syst me de recyclage Toutes les conduites biologiquement contamin es sont sous pression n gative l enceinte poss de un syst me d vacuation qui permet de travailler sur de produits chimiques toxiques ou radioactifs 37 CHAPITRE 6 ENCEINTE DE S CURIT BIOLOGIQUE CLASSE II TYPE B3 OU A B3 Protection de l op rateur du produit et de l environnement Vitesse de l air l entr e dans l enceinte 50 8 cm s Filtre HEPA d vacuation Convient pour le travail avec des agents correspondant aux niveaux de s curit biologique 1 2 ou 3 Filtre HEPA Syst me de filtration deux
242. n phase liquide 6 R sistance immersion MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE A QUOI SERT UN DISTILLATEUR Le distillateur facilite l obtention d eau tr s pure partir de l eau potable normalement fournie par les services de distribution d eau des centres urbains L eau distill e se caract rise par l absence de solides en suspension Elle a de nombreuses applications dans les centres de sant en particulier dans les laboratoires les unit s de lavage et de st rilisation et dans les services de di t tique Plus les techniques de laboratoire utilis es sont sp cialis es plus le degr de puret exig est grand Par exemple la pr paration de r actifs ou de produits biologiques exige une eau de la plus haute qualit La distillation est l un des proc d s de base pour y parvenir bien que d autres proc d s puissent tre galement exig s L eau utilis e dans les laboratoires doit tre exempte de pyrog nes avoir une teneur en solides totaux ne d passant pas 1 ppm un pH compris entre 5 4 et 7 2 et une r sistivit au moins gale 3 x 105 ohm cm 25 C 1 Warming cabinets sterilizers and associated equipment Division 11 Equipment USACE NAVFAC AFCESA UFGS 11710 July 2003 ee 7 Sortie de l eau de refroidissement 8 Condenseur colonne de distillation 9 Filtre au charbon actif 10 Eau distill e 11 Arriv e d eau froide CH
243. n y a pas d chantillon Mettre un chantillon dans la solution La longueur d onde s lectionn e est incorrecte R gler la longueur d onde sur un intervalle compatible avec l analyse L appareil a t talonn par erreur avec un Etalonner avec une solution blanc ou de l eau chantillon la place du blanc distill e 1 Instruction Manual Spectrophotometer SmartSpecTM 3000 BIO RAD Laboratories 77 CHAPITRE 11 SPECTROPHOTOM TRE Spectrophotom tre non automatique PROBL ME CAUSE PROBABLE SOLUTION La source lumineuse ne s allume pas Le filament est cass Remplacer la lampe Le fusible a saut Remplacer la lampe Le filament de la lampe pr sente une r sistance Remplacer la lampe La tension est erron e V rifier le voltage Contr ler la source d alimentation lectrique Le cadran ou le galvanometre indiquent une valeur La source lumineuse est d fectueuse Remplacer la lampe trop basse 2 P La cellule photo lectrique est sale ou d fectueuse Nettoyer ou remplacer la cellule photo lectrique Le circuit d amplification est d fectueux Remplacer ou r parer le circuit d amplification La tension aux bornes de la source lumineuse est R gler le voltage trop faible Le cadran donne des valeurs instables Le stabilisateur de la diode Zener est d fectueux Remplacer la diode Zener 1 S minaire atelier sur le fonctionnement et la maintenance des spectrophotom tres Projet sous r gional sur la ma
244. naissant bien le mode d emploi et les utilisations des centrifugeuses ainsi que les pr cautions observer et les risques est affect a leur emploi II incombe au directeur du laboratoire de superviser les op rations et de prendre les pr cautions requises pour que le personnel manipulant les centrifugeuses soit parfaitement au courant de tout ce qu implique l utilisation de ces appareils RECOMMANDATIONS POUR UNE UTILISATION ET UN STOCKAGE APPROPRIES Rotors 1 Enregistrer la date d achat de chacun des rotors avec les informations sur le mod le et le num ro de s rie 2 Lire et assimiler le manuel d utilisation du rotor de l appareillage et des tubes avant d utiliser la centrifugeuse Se conformer aux indications du fabricant en ce qui concerne l utilisation et l entretien de l appareil 3 N utiliser les rotors qu avec les centrifugeuses pour lesquelles ils sont con us Ne pas changer de rotors sans avoir v rifi leur compatibilit avec la centrifugeuse 4 Enregistrer les param tres de fonctionnement de chaque rotor dans un cahier de bord de fa on d terminer sa dur e de vie restante et pouvoir se procurer un rotor de rechange lorsque cela sera n cessaire 5 Suivre les recommandations du fabricant concernant la vitesse maximale et la densit des chantillons Chaque rotor est con u pour supporter un effort maximum et les sp cifications du fabricant doivent tre rigoureusement respect es 1 http www sun
245. nal est le volume maximum utile de la pipette selon les sp cifications du fabricant Les pipettes volume fixe et volume variable peuvent se subdiviser en deux types le type A et le type B Les pipettes de type A sont appel es pipettes d placement d air car il y a un volume d air coussin d air entre le corps du piston et le liquide qui se trouve dans le cylindre voir pipette N 1 de la figure 44 Les pipettes de type B sont appel es pipettes d placement positif car le piston est en contact direct avec le liquide voir pipette N 2 La figure 44 montre les diff rences entre ces deux types de pipettes Les pipettes d placement d air ont l avantage de pr senter moins de risques de contamination en cas d utilisation intensive Mais elles ne sont pas aussi pr cises que les pipettes d placement positif lorsqu on travaille avec de tr s petits volumes de liquide du fait de la compressibilit de l air Toutes les pipettes piston ont des pointes jetables pour limiter les risques de contamination II est recommand d utiliser Figure 51 Types de pipettes exclusivement les pointes fournies par le fabricant ou des pointes compatibles pour garantir un ajustement correct sur le corps de la pipette et l exactitude du volume d livr Pour faciliter l identification de ces volumes certains fabricants ont adopt un code de couleur qui simplifie l identification des volumes d livrer Le tableau ci dessous donne le
246. nal est traduit en concentration correspondante de la substance analyser dans le liquide biologique test et le r sultat est imprim ou affich sur un cran digital cristaux liquides LCD Analyseur en chimie liquide L analyseur en chimie liquide est un photometre Contrairement au spectrophotometre il ne poss de pas de prisme ni de grille de diffraction On utilise un filtre color un parmi plusieurs filtres ou un filtre unique pour mesurer l absorption de la lumi re dans les chantillons liquides d apr s la loi de Beer Lambert voir chapitre 11 L analyseur en chimie liquide utilise en g n ral comme source lumineuse une lampe halog ne munie de filtres Les mod les les plus r cents utilisent une ou plusieurs lampes DEL mettant des longueurs d onde sp cifiques Les tests sur chantillons liquides sont bas s sur la production d un d riv color de la substance analyser en pr sence de r actifs sp cifiques La couleur est directement proportionnelle la concentration de la ou des substances dans la solution Les mesures sont classiquement effectu es entre 304 et 670 nm ou avec des filtres suppl mentaires Certains appareils peuvent effectuer des mesures cin tiques de la concentration en fonction du temps L MENTS DES ANALYSEURS Analyseur en chimie s che Il existe divers types d analyseurs en chimie s che Lun des l ments de base de ces analyseurs dont la conception varie selon le
247. ncer la cuve l eau distill e La laisser s goutter l emballer dans un tissu doux et la ranger dans une petite bo te pour la prot ger des rayures 20 Selon le type d alimentation lectrique teindre l appareil en mettant l interrupteur sur OFF et le d brancher ou d connecter les bornes de la pile interrupteur sur OFF 21 Ranger l appareil dans un tiroir fermant cl ou tout autre endroit appropri ENTRETIEN DE ROUTINE L entretien des colorim tres doit tre effectu par un personnel qualifi On trouvera ci apr s les proc dures g n rales d entretien de routine des colorim tres et h moglobinom tres Certains mod les peuvent n cessiter des proc dures diff rentes Toujours suivre soigneusement les instructions du fabricant pour les contr les p riodiques et la maintenance des colorim tres et h moglobinom tres Fr quence une fois par jour 1 Toute claboussure sur l appareil ou proximit doit tre imm diatement nettoy e 2 A la fin de la journ e de travail selon le type d alimentation lectrique teindre l appareil et le d brancher ou d connecter les bornes de la pile 3 Vider et maintenir ferm le compartiment chantillon lorsque l appareil n est pas utilis 4 Couvrir l appareil apr s usage Le ranger correctement l abri de la poussi re Fr quence effectuer si n cessaire 1 Remplacer les fusibles et lampes usag s selon les instructions du fabricant 2 S
248. nde choisi est bien celui qui est recommand MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE Faible reproductibilit Homog n it de l chantillon M langer les r actifs avant emploi Laisser leur temp rature s quilibrer avec la temp rature ambiante Pipetage incorrect V rifier que les embouts des pipettes sont chang s entre les chantillons et que tout liquide restant est limin Lecteur non talonn Contr ler l talonnage Utiliser une s rie appropri e pour le contr le de qualit Lecture effectu e sans attendre un pr chauffage suffisant Attendre que le lecteur ait atteint sa temp rature de de l appareil fonctionnement Substrat contamin V rifier que la TMB est incolore et que sa pr paration est correcte Valeur lev de l absorbance obtenue avec le blanc Lavage insuffisant ou inefficace Bien vider le tampon de lavage V rifier que le remplissage des puits et l aspiration sont uniformes pendant le lavage Les donn es ne sont pas transmises du lecteur au microprocesseur Le lecteur et le microprocesseur ont des codes diff rents V rifier les codes s lectionn s Taux de transfert de l information en bauds diff rents Confirmer les taux de transfert s lectionn s Configuration incorrecte de l interface de communication V rifier la configuration de l interface La configuration r ception transmission doit respecter les param tres
249. ne charge normale Le test s effectue l aide d un tachymetre ou d un phototachym tre Si le hublot n est pas transparent suivre la proc dure indiqu e par le fabricant 7 V rifier le fonctionnement du syst me de freinage 8 V rifier le fonctionnement du syst me de r frig ration sur les centrifugeuses r frig r es Les contr les les plus importants sont a Contr le des temp ratures s lectionn es Elles ne doivent pas varier de plus de 3 C par rapport aux temp ratures mesur es avec un thermom tre lectronique b V rifier l tat du filtre d entr e d air S il est obstru le nettoyer ou le remplacer par un filtre quivalent c Nettoyer soigneusement les ailettes du condenseur pour liminer la poussi re et les impuret s qui s y sont d pos es Cela permet de maintenir le taux de transfert de la chaleur conform ment aux sp cifications de l appareil Si une anomalie est d tect e appeler un technicien sp cialis Note Eviter les projections de liquides sur les touches de commande Presser les touches avec le bout des doigts Eviter de presser les touches avec les ongles ce qui risquerait de perforer la membrane de protection Tous les six mois V rifier l tat des charbons du moteur si la centrifugeuse est quip e d un moteur avec charbons Remplacer les charbons si n cessaire par de nouveaux ayant les m mes caract ristiques que les charbons d origine R p ter ce contr le tous les s
250. nent sans difficult V rifier que le dispositif de lecture de l appareil est en bon tat Pour cela il faut d brancher l appareil R gler l aiguille de l indicateur sur z ro 0 au moyen de la vis de r glage qui se trouve en g n ral sous l axe de l aiguille Si l appareil poss de un cran d affichage v rifier que celui ci fonctionne normalement V rifier que le t moin de marche ON ampoule ou diode fonctionne normalement V rifier l tat du bras porte lectrode V rifier la fixation et le m canisme d assemblage de l lectrode pour viter que celle ci ne bouge V rifier que le dispositif de r glage en hauteur fonctionne correctement Contr ler l tat des piles pour les appareils qui fonctionnent sur piles les remplacer si n cessaire Tester le fonctionnement de l appareil en mesurant le pH d une solution connue Contr ler la connexion la terre et tester le courant de fuite 17 CHAPITRE 3 PH METRE ENTRETIEN COURANT DE L LECTRODE Fr quence tous les quatre mois L lectrode de mesure du pH lectrode pH n cessite un remplacement p riodique de la solution conductrice afin d obtenir une lecture pr cise Les tapes suivantes sont recommand es pour le remplacement de la solution d lectrolyte 1 Sortir l lectrode pH de la solution tampon de stockage 2 Rincer abondamment l lectrode l eau distill e 3 Enlever le capuchon de l lectrode 4 Remplir le conduit entourant
251. nnage Selon le mod le le pH m tre poss de un ou deux boutons ou touches d talonnage normalement identifi s par Cal 1 et Cal 2 Si le pH metre est talonn avec une seule solution on utilise le bouton Cal 1 le bouton Cal 2 tant r gl sur 100 Si l appareil permet un talonnage en deux points on utilise deux solutions de pH connu couvrant l intervalle des valeurs mesurer Dans ce cas on utilise les deux boutons Cal 1 et Cal 2 Dans certains cas sp ciaux il faut proc der un talonnage en trois points avec trois solutions de pH connu d S lecteur de mode de fonctionnement Cette commande donne en g n ral acc s aux fonctions suivantes Mode veille Stand by 0 Dans cette position les lectrodes sont prot g es contre les courants lectriques On utilise cette position lorsque l appareil est rang ll Mode pH Dans cette position l appareil peut effectuer des mesures de pH lorsque les proc dures d talonnage requises ont t effectu es Voltm tre haute imp dance R gulateur de temp rature P le de l lectrode de r f rence Pont salin membrane poreuse Solution analyser ON SORRELL IRN NEEKIN Electrode Ag AgCl Pole de l lectrode de mesure Verre sp cial perm able aux ions Il Mode millivolt mV Dans cette position l appareil peut afficher les lectures en millivolts IV Mode ATC compensation automatique de MANUEL D
252. nnements lectromagn tiques intenses 7 Assurer que le secteur d installation n est pas expos des gaz ou des substances corrosives Inspection visuelle de l appareil Fr quence tous les six mois Le spectrophotom tre doit faire l objet d une inspection visuelle destin e v rifier que l tat et l int grit de ses l ments restent conformes aux sp cifications du fabricant Les points les plus importants sont 1 V rifier que le pi tement de la table qui supporte le spectrophotom tre est en bon tat 2 V rifier l tat ext rieur g n ral du spectrophotom tre V rifier que les boutons et interrupteurs ainsi que les fermetures m caniques sont mont s correctement et qu ils sont clairement identifi s 3 V rifier que les accessoires sont propres non fissur s et que leur tat de fonctionnement est optimal 4 V rifier que les l ments m caniques d assemblage boulons vis crous etc sont bien ajust s et en bon tat 5 V rifier que les c bles lectriques ne sont pas fissur s ni rompus et qu ils sont correctement reli s au secteur 6 V rifier que les c bles lectriques ne pr sentent pas de r parations de fortune ne sont pas us s et que leur gaine isolante est intacte 7 V rifier que les cables de raccordement et leurs bornes sont exempts de poussi re et de corrosion et ne sont pas encrass s Ils ne doivent pas non plus tre us s ou pr senter des signes de d t riorat
253. ns un produit ou sur un emballage La norme ISO N 11140 1 d crit les cat gories d indicateurs chimiques Il ne faut pas oublier que les indicateurs chimiques par eux m mes ne garantissent pas que le processus de st rilisation r pond toutes les sp cifications le personnel qui les utilise doit recevoir une formation d taill e pour tre capable de d terminer si le r sultat obtenu est coh rent avec le d roulement de l ensemble du processus de st rilisation 3 Indicateurs biologiques On consid re qu il s agit de la meilleure m thode pour contr ler la qualit du processus de st rilisation Ces indicateurs se composent de micro organismes vivants qui ont une r sistance lev e un processus de st rilisation d termin ou de r actifs chimiques qui r agissent en pr sence de prot ines sp cifiques de ce type de micro organisme Pour contr ler le processus de st rilisation par la vapeur satur e le peroxyde d hydrog ne ou le formald hyde on utilise g n ralement des spores de Bacillus stearothermophilus Pour contr ler la st rilisation par la chaleur s che processus qui s effectue dans une tuve et par l oxyde d thyl ne on utilise des spores de la vari t Niger de Bacillus subtilis Les spores indicatrices sont plac es sur l objet st riliser Apr s le MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE 85 CHAPITRE 12 AUTOCLAVES 3 Materiel a Temperature Pression kg iit co
254. nt lectrique alimentant l appareil L appareil est d branch Brancher l appareil sur la prise de courant Le c ble d alimentation lectrique est d fectueux Remplacer le c ble d alimentation lectrique La plaque ne chauffe pas La fonction de chauffage n a pas t s lectionn e Activer la fonction de chauffage sur le panneau de contr le La r sistance chauffante est hors service Remplacer la r sistance chauffante Les pi ces de rechange doivent avoir les m mes caract ristiques que les pi ces d origine L agitateur ne tourne pas La fonction de rotation n a pas t s lectionn e Activer la fonction de rotation sur le panneau de contr le DAANEN Fiole Erlenmeyer R cipient en verre utilis au laboratoire pour mettre ou mesurer des substances Moteur bagues de d phasage Moteur asynchrone utilis dans les petits appareils Il se caract rise par une bobine rotor en cage d cureuil n cessitant un champ magn tique tournant pour se mettre en marche Une partie de chaque p le est encercl e par une bague de d phasage anneau de cuivre dont les courants induits provoquent un d s quilibre au sein du flux magn tique par rapport l autre portion du p le ce qui cr e un couple sur le rotor Ces moteurs sont peu co teux et ont un faible rendement On peut calculer leur vitesse par la formule Te 120 f p Figure 55 Moteur a bagues de d phasage dans laquelle n vitesse synchrone en tours par
255. nt pour chaque application particuli re ENTRETIEN DE ROUTINE L entretien du distributeur est simple Les activit s de routine les plus importantes sont d crites ci dessous Fr quence une fois par jour 1 Nettoyer le distributeur avec un chiffon humide et un d tergent doux 2 D sinfecter le distributeur avec de l isopropanol 60 3 Eviter que l humidit ne p n tre l int rieur des commandes lectroniques et ou m caniques Remplacement de la pile si n cessaire 1 Ouvrir le compartiment des piles En g n ral il suffit pour cela de faire glisser le couvercle de la position Ferm la position Ouvert 2 Enlever la pile us e L liminer conform ment aux recommandations 3 Installer une pile ayant les m mes caract ristiques que la pile d origine V rifier la polarit lectrique pour que la pile soit correctement install e Avant de mettre la pile en place nettoyer les contacts avec un chiffon propre 4 Fermer et ajuster le couvercle MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE 67 CHAPITRE 10 DISTRIBUTEUR GUIDE DE D PANNAGE PROBL ME O O CAUSE PROBABLE SOLUTION Il n est pas possible de monter l adaptateur sur la L l ment est d fectueux Appeler le service technique t te du distributeur a wee L l ment doseur est sale Examiner l l ment pour rechercher une obstruction Le nettoyer si n cessaire Appeler le service technique l ad
256. nt utile La plage de grossissement utile du syst me objectif oculaire est d finie par l ouverture num rique du syst me Pour percevoir les d tails d une image il faut un grossissement classiquement compris entre 500 et 1000 fois l ouverture num rique de l objectif Le grossissement utile est acceptable entre 500 x et 1000 x NA Profondeur de champ Epaisseur sur laquelle l chantillon ou l objet est d une nettet satisfaisante pour une mise au point donn e Profondeur de foyer Intervalle sur lequel le plan de l image peut tre d plac tout en conservant sa nettet Propanol Aussi appel alcool isopropylique pr par par hydratation du propylene Utilis comme solvant et galement dans la pr paration de l ac tone Point d bullition 83 C formule chimique CH CHOH CH R solution Aptitude distinguer les d tails les plus fins d une pr paration ou d un chantillon particulier Parmi les facteurs qui permettent d obtenir une r solution lev e figurent l ouverture num rique le type d chantillon l clairage la correction des aberrations et le type de contraste utilis Cest l une des caract ristiques principales du microscope Revolver porte objectifs Dispositif m canique qui supporte les objectifs et qui permet de changer rapidement d objectif par simple rotation Le nombre d objectifs qu il peut recevoir varie selon le type de microscope En g n ral il peut porter entre trois et cinq obje
257. ntit de chaleur transf r e par conduction k conductivit thermique du mat riau a aire de la surface de transfert de chaleur OT gradient de temp rature dans la direction du flux de chaleur Le signe moins est ajout en vertu du deuxi me principe de la thermodynamique CHAPITRE 14 INCUBATEUR Convection thermique Dans les incubateurs fonctionnant par convection thermique la chaleur produite par le syst me de r sistances est d abord transf r l air circulant dans l enceinte puis de l air aux chantillons L efficacit de ce processus d pend du sch ma d coulement de l air En g n ral l air entre par le bas de l incubateur et est chauff dans un compartiment d o il passe dans l enceinte d incubation o il circule selon un sch ma uniforme Il sort de l enceinte par un tuyau d vacuation situ la partie sup rieure de l appareil l quation de base qui explique la convection est la suivante q hA T nr dans laquelle q quantit de chaleur transf r e par convection h coefficient de convection pour le transfert de chaleur aire de la surface de transfert de chaleur T temp rature la surface de la r sistance T temp rature du fluide air Certains incubateurs ont aussi des ventilateurs qui font circuler l air par convection forc e Le sch ma de la figure 39 montre trois principes diff rents utilis s dans les incubateurs conduction thermique convection naturel
258. ntit de solvant que de solut s dans une solution Note Un autre type de notation en parties par unit est utilis pour la mesure des concentrations extr mement faibles Par exemple une partie par million ppm signifie qu il y a une particule d une substance donn e pour 999 999 particules d autres substances Chapitre 10 Distributeur Code GMDN 41663 35734 Code ECRI 16 274 MTN Distributeur de liquides pour laboratoire Le distributeur est un dispositif de la famille des pipettes et diluteurs Son nom anglais dispenser vient du pr fixe dis qui d note une privation et du mot latin pensum qui signifie A QUOI SERT UN DISTRIBUTEUR Le distributeur est un appareil multi usages qui peut tre utilis au laboratoire pour les activit s suivantes MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE t che Il existe diff rents types de distributeurs par exemple 1 Aspirer et distribuer des volumes de liquides ou de solutions des mod les r pondant aux normes applicables aux travaux lorsqu une grande exactitude n est pas indispensable de chimie et d autres utilis s en microbiologie bact riologie 2 Distribuer un volume d un liquide ou d une solution stock e immunologie et pharmacologie Des distributeurs automatiques contr l s par un programme informatique sont utilis s dans les tablissements o il existe une forte demande de tests et 3 qui ont besoin de processus automatis s Ce chapitre
259. nure 4 Mettre le joint de remplacement en place en commen ant par le haut de la porte Puis le mettre en place de proche en proche en avan ant vers les c t s et en le fixant mesure avec les dispositifs qui le maintiennent en place Proc der de m me pour le bas de la porte Remplacement du thermocouple Fr quence effectuer si n cessaire 1 Ouvrir le compartiment des l ments lectroniques 2 Enlever les c bles du thermocouple de leurs connexions sur la carte de contr le 3 Lib rer le support du thermocouple qui se trouve dans le haut de l tuve Le tirer vers l avant jusqu ce que le cable de connexion soit d gag sur une longueur d au moins 15 cm 4 Couper le c ble du thermocouple et le d nuder 5 Raccorder les extr mit s libres des fils du thermocouple d fectueux avec les fils du thermocouple de rechange Utiliser du ruban adh sif pour maintenir le raccord 6 Tirer doucement le thermocouple d fectueux hors du MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE compartiment des l ments lectroniques en laissant les Remplacement des charni res de la porte fils attach s pour servir de guide lors du remplacement Fr quence effectuer si n cessaire 7 Connecter les fils du nouveau thermocouple aux p les Pour remplacer les charni res de la porte proc der comme correspondants en veillant ce que la polarit d origine suit soit respect e 1 Ouvrir la porte et la soule
260. nvironnement du microscope et le soin apport son installation et son utilisation sont primordiaux pour assurer sa long vit L humidit la poussi re une alimentation lectrique en mauvais tat un usage inadapt ou une installation d fectueuse sont des facteurs qui nuisent au contraire sa conservation L entretien d un microscope exige du soin de la patience et de l attention Il ne doit tre r alis que par un personnel qualifi disposant d outils sp cialis s On trouvera ci apr s des recommandations g n rales qui devront tre appliqu es pour installer correctement le microscope et le maintenir en bon tat de fonctionnement Installation et rangement 1 S assurer que l emplacement o sera install le microscope est prot g de la poussi re et de l humidit Dans l id al il devrait y avoir un syst me de climatisation garantissant un air exempt de poussi re ou de particules et dont le degr d humidit et la temp rature sont contr l s en permanence 2 V rifier que le local est s r et poss de une porte ferm e cl pour pr venir tout enl vement non autoris du microscope 3 V rifier que l emplacement du microscope se trouve loin des points d eau ou des secteurs o l on manipule des produits chimiques de fa on viter toutes projections ou claboussures Il faut galement viter les endroits expos s la lumi re solaire directe 4 V rifier que l emplacement choisi a une pris
261. oir les lignes 2 La courbe de sublimation montre que dans des conditions d termin es P1 P2 P3 avec P3 gt P2 gt P1 si de la chaleur est transf r e la phase solide celle ci peut se transformer directement en phase vapeur segment E E sans passer par la phase liquide 3 A gauche de la courbe de liquide satur l eau se trouve l tat liquide 3 La courbe de fusion montre que dans des conditions d termin es lorsqu il y a segment A B Lorsqu il y a transfert de chaleur la temp rature du liquide transfert de chaleur vers l eau la phase solide se transforme en phase liquide et augmente passant de la temp rature A la temp rature B si le transfert de chaleur se poursuit en phase vapeur segment H H 4 Entre la courbe de liquide satur et la courbe de vapeur satur e segment B C 4 La courbe de vaporisation montre dans quelles conditions de temp rature il y a un m lange de phase liquide et de phase vapeur et la temp rature reste l eau passe de la phase liquide la phase vapeur constante Plus on se rapproche du point C plus le titre en vapeur est lev 5 droite de la courbe de vapeur satur e toute l eau se trouve en phase vapeur 5 Le point d intersection des trois courbes est appel point triple Dans ces segment C D conditions les trois phases coexistent en quilibre 1 Titre en vapeur X Relation entre la masse de vapeur et la masse totale masse de liquide plus masse de vapeu
262. oit atteint On obtient alors le poids en additionnant les deux quantit s indiqu es par la position des curseurs Balance d analyse Cette balance fonctionne par comparaison de masses de poids connu avec la masse d une substance de poids inconnu Son l ment de base est constitu par un fl au bras sym triques reposant sur une ar te centrale appel e couteau Aux extr mit s des bras du fl au se trouvent des triers reposant eux aussi sur des couteaux ce qui leur permet d osciller librement et auxquels sont suspendus deux plateaux Des masses certifi es sont d pos es sur l un des plateaux et le corps de masse inconnue sur l autre La balance poss de un syst me de blocage qui permet d immobiliser le fl au lorsque la balance n est pas utilis e ou lorsqu il faut modifier les contrepoids La balance se trouve l int rieur d une bo te ou chambre qui la prot ge des interf rences telles que celles provoqu es par les courants d air Les balances d analyse peuvent mesurer des poids d un dix milli me de gramme 0 0001 g ou d un cent milli me de gramme 0 00001 g Ce type de balance a en g n ral une capacit maximale ou port e de 200 grammes Figure 7 Balance ressort Ressort avec charge Ressort sans charge D placement Echelle de mesure Masse Plateau Macro chelle Curseur de micro chelle Le Curseur de macro chelle NN the Figure 9 Balance d
263. ompte des recommandations sp cifiques du fabricant Cette r gle vaut galement pour les pipettes lectroniques Le sch ma de la figure 52 d crit les tapes de la proc dure Position MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE 121 CHAPITRE 16 PIPETTES 122 1 Mettre une nouvelle pointe sur l embout selon les sp cifications de la pipette Eviter de contaminer la pointe avec d autres substances V rifier qu elle est bien ajust e 2 Appuyer doucement sur le piston jusqu ce qu il atteigne le premier cran Jusqu ce moment la pointe de la pipette ne doit pas toucher le liquide 3 Plonger l extr mit de la pointe dans le liquide V rifier la profondeur indiqu e dans le tableau de la page 121 ou suivre les recommandations du fabricant V rifier que l
264. on compos e de 80 d ther de p trole et 20 de propane 2 ol Nettoyage du corps du microscope 1 Le corps du microscope peut tre nettoy avec une solution d tergente pour enlever les impuret s externes et dissoudre la plus grande partie de la graisse et de l huile Appliquer cette solution avec un pinceau Apr s avoir enlev la graisse et les impuret s on nettoiera le corps du microscope avec une solution 50 50 d eau distill e et d thanol 95 Note Cette solution ne convient pas pour nettoyer les surfaces optiques 2 Les parties int gr es dans le m canisme de r glage grossier et fin boutons de r glage macrom trique et microm trique de r glage du condenseur et de d placement de la platine porte objet doivent tre lubrifi es intervalles r guliers avec de l huile fine pour assurer des d placements sans a coups Maintenance Les op rations les plus importantes pour maintenir un microscope en bon tat de fonctionnement sont entre autres 1 V rifier l ajustement de la platine m canique platine porte objet Elle doit se d placer selon les deux axes X et Y et garder la position choisie par l op rateur 2 Tester le m canisme de mise au point Le foyer choisi par l op rateur doit rester stable La hauteur doit rester celle choisie par l op rateur 3 V rifier le fonctionnement du diaphragme Nettoyer tous les l ments m caniques 5 Lubrifier le microscope selon les recommandation
265. on minimal en mm mesur dans le tube de centrifugation Le temps n cessaire pour la s dimentation peut tre calcul en heures l aide de ce facteur 6 Informations sur la compatibilit du rotor avec d autres mod les de centrifugeuses du m me fabricant Les centrifugeuses de fabrication r cente ont re u des am liorations au niveau de la s curit et de la dur e de vie op rationnelle Il s agit entre autres de fonctions contr l es par des microprocesseurs Grace a des logiciels pilot s depuis un clavier ces centrifugeuses poss dent plusieurs programmes en m moire Selon le type de rotor utilis et la proc dure choisie ces programmes contr lent la dur e de centrifugation la temp rature requise la vitesse de rotation l acc l ration et la d c l ration et les alarmes destin es avertir l utilisateur de toute anomalie de fonctionnement Les fabricants ont galement int gr des moteurs induction sans charbons dans les centrifugeuses Ceux ci ont l avantage d assurer un contr le lectronique des courants et champs magn tiques r gulant la vitesse de rotation ce qui r duit la fr quence d entretien Pour le fonctionnement et l entretien de ces appareils il est n cessaire de se conformer aux recommandations du fabricant CONDITIONS REQUISES POUR L INSTALLATION Pour un fonctionnement normal des centrifugeuses les conditions suivantes doivent tre remplies 1 Une source d alimentation lectr
266. onnect Eteindre la balance attendre un moment et la rallumer Si le probl me persiste appeler le service technique Diverses causes V rifier les codes d erreur dans le manuel d utilisation de la balance CAUSE PROBABLE La cellule de mesure est sale Le montage de la cellule de mesure est d fectueux Syst me lectronique d fectueux Syst me m canique en mauvais tat Syst me lectronique d fectueux Changement de temp rature dans la pi ce La cellule de mesure est sale Syst me lectronique d fectueux Probl mes li s l environnement tels que courants d air lectricit statique ou vibrations Syst me lectronique d fectueux La cellule de mesure a t endommag e par une surcharge Le montage de la cellule de mesure est d fectueux Pile d talonnage d fectueuse Syst me lectronique d fectueux Le montage de la cellule de mesure est d fectueux MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE DAANEN ASTM American Society of Testing and Materials Charge excentr e Aptitude de la balance lire r guli rement la valeur des masses quelle que soit leur place sur le plateau de l instrument Ecart de lin arit Diff rence de lecture observ e lorsque la balance est charg e successivement avec des poids r guli rement croissants jusqu sa capacit maximale puis selon le m me processus avec des poids r guli rement d croissants La diff rence entre le
267. onnement dans l autoclave 8 Nettoyer le devant de l autoclave les commandes les indicateurs et les poign es avec un chiffon humide Entretien hebdomadaire Responsable op rateur de l appareil 1 Nettoyer le filtre de vidange de la cuve de st rilisation Enlever tous r sidus pouvant s y trouver 2 Nettoyer l int rieur de la cuve de st rilisation avec des produits de nettoyage ne contenant pas de chlore Nettoyer galement les glissi res servant mettre les paniers 3 Nettoyer avec une solution d acide ac tique si on doit st riliser des solutions chlor es Le chlore est corrosif m me pour les implants en acier inoxydable Rincer ensuite grande eau 4 Nettoyer les surfaces ext rieures inoxydables avec un d tergent doux On peut utiliser un solvant comme le chlorure d thyl ne en vitant de toucher les surfaces peintes les marquages et les rev tements en mati re plastique 5 Dans les autoclaves ayant des portes a ouverture manuelle v rifier que les m canismes d ouverture et de fermeture sont bien ajust s et fonctionnent sans coups 6 Vidanger le g n rateur de vapeur si l appareil en poss de un Pour cela ouvrir un robinet situ au bas du g n rateur et qui permet d en vidanger le contenu En g n ral cette vidange s effectue la fin de la semaine de travail Suivre les recommandations du fabricant 7 Ne jamais utiliser de laine d acier pour nettoyer l int rieur de la cuve de st
268. ons du fabricant Les tapes classiques sont les suivantes 1 V rifier que l ampoule ne fonctionne pas ou qu il existe des signes de dysfonctionnement Sur les appareils r cents un signal ou un code d erreur s affiche sur l cran Avec les appareils plus anciens la lampe ne fonctionne simplement plus 2 Eteindre le spectrophotom tre D brancher le cable d alimentation lectrique 4 D faire les vis de fixation du couvercle du compartiment de la lampe 5 D faire les vis de fixation du support de la lampe D faire les vis de fixation des fils de raccordement lectrique de la lampe sur certains mod les cette tape n est pas n cessaire car la lampe est mont e sur une base qui poss de un m canisme de raccordement direct aux bornes de la lampe 7 Installer une nouvelle lampe ayant les m mes caract ristiques que la lampe d origine Porter des gants pour viter de laisser des traces de doigts sur la lampe 8 Remettre les vis de fixation des fils de raccordement lectrique de la lampe 9 Remettre les vis de fixation du support de la lampe 10 Remettre les vis de fixation du couvercle du compartiment de la lampe 11 Rebrancher le spectrophotom tre 12 Rallumer le spectrophotom tre interrupteur sur ON et proc der au r talonnage selon les instructions du fabricant Entretien pr ventif L entretien pr ventif maintenance du spectrophotom tre doit correspondre aux op rations de routine et aux fr q
269. ormalement s en procurer chez un opticien Si ce n est pas possible on peut le remplacer par un papier absorbant doux ou par du coton hydrophile On peut aussi utiliser un morceau de tissu de soie 4 Une peau de chamois tr s fine On peut s en procurer dans les commerces de chaussures 5 Une poire en caoutchouc de type mouche b b pour souffler de l air On peut fabriquer un dispositif au laboratoire en montant une pipette Pasteur sur la poire en caoutchouc 6 Une housse en plastique pour prot ger le microscope de l environnement externe lorsqu il n est pas utilis On peut aussi utiliser un sac en tissu tr s fin comme du tissu mouchoirs 7 Un pinceau doux en poil de chameau ou un pinceau peinture fin Il est tr s important que les poils du pinceau soient en mati re naturelle de longueur uniforme tr s souples secs et exempts de graisse On peut s en procurer dans les magasins de photographie On peut aussi trouver l quivalent au rayon cosm tiques des magasins 8 Un paquet de 250 g de dessiccateur gel de silice On l utilise pour absorber l humidit dans la bo te de stockage du microscope si elle est tanche Le gel de silice change de couleur lorsqu il est satur d humidit ce qui indique qu il faut le remplacer ou le r g n rer Lorsqu il est sec le gel de silice est en g n ral bleu lorsqu il est satur d humidit il est rose 9 Ampoules et fusibles de rechange Ils doivent tre du m me mod
270. orriger les erreurs observ es ll y a des corps trangers sous le bouton poussoir Nettoyer l assemblage du bouton poussoir V rifier si la pointe est adapt e la pipette Monter une pointe diff rente adapt e aux sp cifications de la pipette La pipette pr sente des fuites Le montage de la pointe sur la pipette est incorrect R talonner la pipette en utilisant une proc dure standardis e V rifier la proc dure d utilisation La pointe est sale Mettre une nouvelle pointe La pointe pr sente des inexactitudes avec certains L talonnage est inad quat R talonner la pipette en utilisant une proc dure liquides standardis e ll y a des interf rences dans l talonnage R gler l talonnage en cas d utilisation de liquides de forte viscosit Le piston est sale Nettoyer et lubrifier l g rement Le joint est sale D monter la pipette nettoyer tous les joints ou les remplacer si n cessaire Lubrifier l g rement Le piston est endommag Remplacer le piston et les joints du piston Lubrifier l g rement Des vapeurs de solvant ont p n tr dans la pipette D visser le raccord central de la pipette Ventiler nettoyer le piston et lubrifier l g rement Le bouton poussoir pr sente des coups ou rencontre une forte r sistance 125 CHAPITRE 16 PIPETTES 126 BIATNIRONT Coefficient de variation Param tre statistique repr sentant le quotient de l cart typ
271. ortes aberrations n atteignent le plan de formation de l image et assurer une distribution correcte de la lumi re dans l chantillon et dans le champ de l image Ethanol Liquide incolore aussi appel alcool thylique Largement utilis comme solvant industriel par exemple dans l industrie pharmaceutique Masse volumique 0 806 g cm3 point d bullition 78 3 C formule chimique CH CH 0H Ether Substance liquide d riv e de l thanol par limination d une mol cule d eau entre deux mol cules d alcool C est un excellent solvant pas tr s miscible l eau tr s volatil et inflammable Point d bullition 35 C formule chimique CH CH 0 CH CH Foyer Point o du fait de la r fraction de la lumi re les rayons lumineux traversant une lentille se concentrent Si les rayons lumineux convergent en un seul point la lentille est dite convergente convexe et l image au foyer est r elle si les rayons lumineux divergent la lentille est dite divergente concave et l image au foyer est virtuelle Indice de r fraction Valeur calcul e par la comparaison entre la vitesse de la lumi re dans l espace et dans un second milieu plus dense II est normalement repr sent par la lettre n ou n dans la litt rature technique ou les formules math matiques Indice de r fraction Valeur calcul e par la comparaison entre la vitesse de la lumi re dans l espace et dans un second milieu plus dense Il est norma
272. otecteur Evacuer les v tements et accessoires de protection selon la proc dure en vigueur au laboratoire Se laver les mains l eau courante et au savon 9 Eteindre le ventilateur le tube fluorescent fermer l ouverture frontale et rallumer la lampe UV Note En cas de fuite ou de projections l int rieur de l enceinte pendant le travail il faut laisser celle ci en marche et proc der une d contamination de la surface de tout le mat riel souill On vitera ainsi que des contaminants ne soient rejet s par l enceinte D contamination de l enceinte La d contamination de l enceinte de s curit biologique est une op ration qui doit tre effectu e avant tout travail d entretien ou de maintenance n cessitant l ouverture de ses surfaces ou composants internes Chaque fois qu une des proc dures indiqu es ci dessous doit tre r alis e l enceinte doit tre pr alablement d contamin e 1 Changement des filtres 2 Ex cution de tests n cessitant un acc s aux surfaces internes ou une ouverture de l enceinte 3 Ex cution de tests de certification lorsque l enceinte a t utilis e avec des agents biologiques class s dans les groupes de risque 2 ou 3 4 D placement de l enceinte 5 Projections de mat riel biologique contenant des agents haut risque La proc dure de d contamination la plus appropri e doit tre d finie par le responsable de la s curit industrielle et des risques professionn
273. oy e 2 A la fin de la journ e de travail selon le type d alimentation lectrique teindre l appareil en mettant l interrupteur sur OFF et le d brancher ou d connecter les bornes de la pile interrupteur sur OFF 3 Pourles analyseurs en chimie s che Ne pas laisser de bandelettes dans l appareil Nettoyer r guli rement la fen tre ou le compartiment recevant les bandelettes et fermer le couvercle Utiliser un couvillon propre doux et humide 4 Pour les en chimie liquide Vider et maintenir ferm le compartiment chantillon lorsque l appareil n est pas utilis 5 Couvrir l appareil apr s usage 6 Ranger correctement l appareil l abri de la poussi re Fr quence effectuer si n cessaire 1 Remplacer les fusibles et lampes usag s selon les instructions du fabricant 2 Si l appareil est d fectueux consulter un ing nieur qualifi dans le domaine biom dical Fr quence une fois par mois Inspecter la fen tre et ou la surface frontale du photod tecteur et les nettoyer avec du papier optique Fr quence tous les six mois 1 Inspecter visuellement l appareil pour v rifier l int grit de tous ses l ments conform ment aux sp cifications du fabricant 2 V rifier que les boutons et interrupteurs ainsi que les fermetures m caniques sont mont s correctement et qu ils sont clairement identifi s 3 V rifier que tous les accessoires sont propres et intacts 4 V rifier que les
274. oy es avec un pinceau en poil de chameau puis avec une peau de chamois ou un papier optique Utiliser les deux mains pour soulever le microscope l une tenant le bras du microscope et l autre son socle Eviter de toucher l ampoule avec les doigts lors de son remplacement Les traces de doigts diminuent l intensit lumineuse V rifier que la tension d alimentation est correcte afin de prolonger la dur e de vie de l ampoule Si possible utiliser la plus faible intensit lumineuse n cessaire pour faire les observations Raccorder le microscope un stabilisateur de tension si le voltage n est pas stable Pr cautions sp ciales pour les climats chauds En climat chaud ou sec le principal probl me qui affecte le microscope est la poussi re car elle endommage les syst mes optiques et m caniques Pour viter ces inconv nients observer les pr cautions suivantes P Toujours prot ger le microscope avec une housse en plastique lorsqu il n est pas utilis Apr s utilisation nettoyer le microscope en soufflant de l air avec une poire en caoutchouc Nettoyer les lentilles avec un pinceau en poil de chameau ou en soufflant de l air Si la poussi re adh re la surface des lentilles essayer de l enlever avec du papier optique mais en frottant la surface tr s doucement pour viter les rayures MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE Pr cautions sp ciales contre les moisissures en climat hum
275. p rature actuelle la temp rature programm e et autres informations s affichent sur un cran a l aide de diodes lectroluminescentes DEL Pour que la temp rature d un incubateur soit correctement r gul e il doit y avoir une diff rence d au moins 5 C entre la temp rature de l enceinte Tc et la temp rature ambiante Ta S il faut que la temp rature de l enceinte Tc soit plus basse que la temp rature ambiante Ta un syst me de r frig ration est n cessaire Par cons quent le choix d un incubateur d pend du type de manipulations effectu es au laboratoire Les sp cifications doivent tre tudi es et d finies avec soin pour que l appareil que l on envisage d acqu rir r ponde aux besoins r els du laboratoire Figure 39 Syst mes de transfert de chaleur utilis s dans les incubateurs
276. par la paroi interne blanche de la sph re La photodiode D mesure l intensit de la lumi re diffus e I et la photodiode D mesure l intensit lumineuse r fl chie de fa on diffuse par la partie r active de la bandelette I Le rapport 1 est proportionnel la valeur de la r flectance R La r flectance mesur e est convertie en une valeur de la concentration ou de l activit de la substance analyser au moyen de courbes talons sp cifiques du test Analyseur en chime liquide Les analyseurs en chimie liquide sont eux aussi de conception tr s variable Les l ments de base communs tous les types d appareils sont les l ments photom triques sch matis s sur la figure 56 Les accessoires suppl mentaires peuvent tre tr s diff rents selon le degr d automatisation et de complexit de l appareil Les analyseurs en chimie liquide sont souvent quip s d un ordinateur et d une imprimante int gr s ou non Les appareils les plus volu s donnent les concentrations des substances analyser dans les unit s de mesure choisies MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE Photo avec l aimable autorisation de Gigahertz optik GmbH CONDITIONS REQUISES POUR L INSTALLATION 1 D baller avec soin l analyseur de chimie 2 S assurer que l appareil est plac l cart de la lumi re solaire directe de toute lumi re parasite et de toutes sources de chaleur 3 Placer l appareil sur une paill
277. par le fabricant Si pour une raison quelconque l lectrode a s ch il est n cessaire de l immerger pendant au moins 24 heures avant emploi Rincer l lectrode l eau distill e dans un b cher vide Essuyer l ext rieur de l lectrode avec un mat riau absorbant en faisant attention de ne pas le faire p n trer dans la sonde Pour viter une ventuelle contamination il faut rincer les lectrodes chaque fois qu on change de solution 1 V rifier le type de solution tampon recommand par le fabricant de l lectrode 2 Plonger les lectrodes dans la solution d talonnage 2 1 Immerger l lectrode dans la solution d talonnage en veillant ce que son extr mit inf rieure ne touche pas le fond du b cher On limite ainsi le risque de casser l lectrode Si le test exige que la solution soit maintenue en agitation l aide d un agitateur magn tique il faut faire attention que le barreau de l agitateur ne touche pas l lectrode ce qui pourrait la casser On utilise une solution tampon comme solution d talonnage car son pH est connu et restera stable m me en pr sence d une contamination l g re En g n ral une solution de pH 7 est utilis e 3 Mettre le s lecteur sur la position pH 3 1 32 3 3 Lorsqu on fait passer le s lecteur de la position veille Stand by la position pH on connecte l lectrode l chelle de lecture du pH de l appareil A l aide du bouton Cal 1 r gle
278. par trimestre 1 D monter et nettoyer les canaux et les raccords V rifier qu ils sont en bon tat S ils pr sentent des fuites ou des traces de corrosion les r parer ou les remplacer V rifier l int grit des l ments m caniques Les lubrifier selon les instructions du fabricant Contr ler le r glage de chacun des sous syst mes Les talonner selon les recommandations du fabricant V rifier l int grit des c bles et raccords lectriques 5 Nettoyer le laveur l eau distill e apr s emploi pour liminer les restes de sels dans les canaux des sous syst mes de distribution et d extraction 6 V rifier que le fusible est en bon tat et que ses contacts sont propres Note L entretien du syst me de contr le doit tre effectu par un technicien qualifi Si n cessaire appeler le fabricant ou son repr sentant MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE GUIDE DE D PANNAGE PROBL ME O OO CAUSE PROBABLE SOLUTION A la fin du lavage il reste de la solution dans les Le syst me d extraction est d fectueux V rifier si le syst me de vide fonctionne la pression appropri e puits Les tuyaux du syst me de vide sont d un diam tre V rifier que le diam tre des canaux correspond aux diff rent de celui qui est recommand recommandations du fabricant Le tuyau d aspiration est obstru V rifier que les tuyaux d aspiration sont propres Le r servoir d chets e
279. propri t s de la lumi re et son interaction avec les substances En g n ral la lumi re mise par une lampe pr sentant certaines caract ristiques est guid e au travers d un dispositif qui s lectionne et s pare une longueur d onde d termin e et lui fait traverser un chantillon Lintensit lumineuse sortant de l chantillon est captur e et compar e avec celle qui a travers PHOTOGRAPHIE D UNE SPECTROPHOTOMETRE Spectrophotom tre classique Code GMDN 36411 36411 Code ECRI 15 082 15 083 Spectrophotometre Photo avec l aimable autorisation de Beckman Coulter 36411 15 084 Spectrophotometre visible l chantillon A partir du rapport entre ces deux intensit s on calcule la transmittance dont la valeur d pend de facteurs tels que la concentration de la substance A QUOI SERT UN SPECTROPHOTOMETRE Le spectrophotometre est utilis au laboratoire pour d terminer la pr sence ou la concentration d une substance dans une solution ce qui permet une analyse qualitative ou quantitative de l chantillon PRINCIPES DE FONCTIONNEMENT Comme principe de base on consid re que la lumi re est une forme d nergie lectromagn tique Dans l espace elle a une vitesse constante et universelle C d environ 3 x 108 m s Dans tout autre milieu transparent qu elle traverse la lumi re a une vitesse l g rement plus faible qui peut se calculer par la formule dans laquelle v vitesse laquelle la lumi
280. ps li e la quantit de mati re exprim e en kilogrammes kg qu il contient En physique il existe deux quantit s auxquelles le nom de masse est appliqu la masse gravitationnelle qui est une mesure de la fa on dont le corps interagit avec le champ de gravitation si sa masse est faible le corps subit une force de gravitation plus faible que si sa masse tait plus grande et la masse inertielle qui est une mesure quantitative ou num rique de l inertie d un corps c est dire de sa r sistance l acc l ration L unit qui exprime la masse est le kilogramme kg Masses certifi es Masses conformes la tol rance d finie par les organismes de certification Les talons correspondant aux classes 1 a 4 de l ASTM sont les plus largement utilis s et doivent l tre comme r f rence obligatoire pour r aliser les talonnages de routine OIML Organisation internationale de m trologie l gale Sensibilit La plus petite masse d tect e par la balance ou la plus petite masse que la balance peut mesurer correctement Tra abilit Capacit relier les mesures donn es par un instrument une norme d finie 29 MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE Chapitre 5 Bains marie Code GMDN 36754 16772 Code ECRI 15 108 16 772 Bain marie Bain marie agitateur Le bain marie est un appareil utilis au laboratoire lors de o immersion Aussi appel es thermoplongeurs Ces l ex cution
281. r Quand le titre en vapeur est gal 1 cela signifie que la vapeur est satur e et que toute augmentation de temp rature la surchauffera 82 Coupe transversale d un autoclave vapeur La figure 32 montre les principaux l ments du syst me de vapeur d un autoclave Pour une meilleure lisibilit les parties normalement situ es autour de l autoclave leur emplacement exact d pend du fabricant ont t repr sent es au dessus et au dessous du corps de l autoclave Description des l ments figurant sur le sch ma On trouvera ci dessous une description succincte des l ments les plus courants du circuit de vapeur d un autoclave Les num ros de la liste ci dessous correspondent ceux de la figure 32 Il est noter que la configuration de ces l ments varie selon le mod le et le fabricant 1 Soupape de s curit Dispositif qui emp che la pression de vapeur de d passer une valeur d termin e Les fabricants installent une soupape de s curit dans la cuve de st rilisation et dans la double enveloppe Manom tre de la cuve Dispositif m canique qui indique la pression de vapeur l int rieur de la cuve de st rilisation Manom tre de la double enveloppe jauge de pression Dispositif m canique qui indique la pression de vapeur l int rieur de la double enveloppe de l autoclave Porte de l autoclave Dispositif qui permet la cuve de st rilisation d tre isol e de l environnement ext rie
282. r certains mod les le vide est produit par une pompe externe livr e comme accessoire Son fonctionnement est contr l par le laveur ce qui fait qu elle ne fonctionne que lorsque c est n cessaire MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE V rification de la proc dure de lavage Pour v rifier que la proc dure de lavage est ex cut e conform ment aux sp cifications des techniques ELISA les fabricants de tests ELISA ont labor des contr les effectuer r guli rement Lun de ces contr les est bas sur l utilisation de la peroxydase r actif distribu a l aide d une pipette dans les puits d une microplaque pour lecture a 405 450 et 492 nm Les puits sont imm diatement lav s et on ajoute un substrat incolore TMB H O t tram thylbenzidine peroxyde d hydrog ne Tout conjugu restant hydrolysera l enzyme et le chromog ne virera au bleu Apr s l arr t de la r action par addition d un acide la TMB virera nouveau au jaune Lintensit de la coloration r sultante est directement li e l efficacit du processus de lavage CONDITIONS REQUISES POUR L INSTALLATION Pour que le laveur de microplaques fonctionne correctement il faut respecter les points suivants 1 Un environnement propre sans poussi re 2 Une table de travail stable l cart des appareils qui produisent des vibrations centrifugeuses agitateurs Elle doit tre de taille suffisante pour qu il reste de la
283. r en cas d incidents qui peuvent affecter le fonctionnement correct de l appareil Ce sont entre autres les suivants Un d faut d alimentation lectrique o Une baisse de tension o Une temp rature ambiante excessive o Un d passement de la limite inf rieure de temp rature Touche de r initialisation de l alarme Touche de test d alarme Interrupteur marche arr t trois positions Commande d alarme de temp rature maximale Commande d alarme de temp rature minimale Ecran d affichage Touches de r glage de la temp rature plus moins Unit de temp rature Commande de temp rature Alarme de temp rature ambiante extr me Alarme de filtre sale Alarme de batterie faible Alarme de tension faible ENTRETIEN DE ROUTINE DES CONG LATEURS ULTRA BASSE TEMP RATURE Les op rations de routine effectuer sur les cong lateurs ultra basse temp rature concernent principalement les l ments d crits ci dessous Pour l entretien courant et la maintenance pr ventive des cong lateurs pour plasma et des chambres froides utilis s dans la cha ne du froid pour le sang consulter la publication OMS Manual on management maintenance and use of cold chain equipment 2005 version fran aise sous presse Nettoyage du condenseur Fr quence tous les six mois 1 Enlever la grille de protection 2 Enlever et nettoyer le filtre S il est trop obstru le remplacer par un nouveau ayant les m mes carac
284. r est en cours de programmation la DEL Programme est allum e 6 Les touches de r glage et de commande sont situ es sur le panneau de contr le de l appareil Chaque fabricant utilise des commandes adapt es au mod le d incubateur en g n ral les incubateurs poss dent les commandes mentionn es ci dessus On trouvera des instructions dans le manuel d utilisation fourni par le fabricant En g n ral on s lectionne le param tre voulu au moyen de la touche Menu A l aide des touches de r glage on ajuste les param tres la valeur souhait e On confirme ensuite le r glage en appuyant sur la touche S lection ou Set Figure 40 Commandes de l incubateur CONDITIONS REQUISES POUR L INSTALLATION Pour que l incubateur fonctionne correctement les conditions suivantes doivent tre remplies 1 Une alimentation lectrique r pondant aux normes lectriques en vigueur dans le pays La prise de courant alimentant l incubateur doit se trouver au maximum 1 5 m de l appareil Elle doit tre aliment e en 120 V 60 Hz ou en 220 240 V 50 60 Hz et tre reli e la terre 2 Un espace libre sur les c t s et l arri re de l incubateur pour permettre le passage des c bles et la ventilation n cessaire son fonctionnement normal Cet espace doit tre de 5 10 cm 3 Un secteur de travail o les variations de temp rature sont r duites au minimum 4 Une table de travail ou une paillasse solide et de niveau capab
285. r l chelle de lecture de fa on lire le pH de la solution d talonnage Cela permet l appareil de lire exactement le pH de la solution d talonnage Exemple pour une solution dont le pH est gal 7 l aiguille peut osciller l g rement par unit s de 0 1 pH en moyenne la lecture doit tre de 7 La lecture du pH sur l chelle de lecture doit se faire perpendiculairement pour viter ou liminer les erreurs de parallaxe erreurs dues l ombre de l aiguille de l appareil visible sur le miroir de l chelle de lecture Le pH m tre est alors talonn c est dire pr t effectuer des lectures correctes du pH Remettre le s lecteur de fonctions en position Stand by 4 Mesurer le pH d une solution 4 1 4 2 4 3 4 4 4 5 4 6 Sortir l lectrode de la solution d talonnage Rincer l lectrode l eau distill e et la s cher Plonger l lectrode dans la solution de pH inconnu Faire passer le s lecteur de fonctions de la position Stand by la position pH Lire le pH de la solution sur l chelle de lecture cadran ou l cran du pH m tre Inscrire la valeur lue sur la feuille de contr le Remettre le s lecteur de fonctions en position Stand by S il est n cessaire de mesurer le pH de plus d une solution r p ter la proc dure en rin ant la sonde l eau distill e et en la s chant avec un papier propre et non pelucheux entre les lectures Lorsqu on doit mesurer le pH de nombreus
286. r que l aiguille de distribution se place tout pr s des bords du puits Avec des puits fond en U ou en V l aiguille doit tre plac e au centre du puits lors du d placement vertical il faut maintenir une distance habituellement comprise entre 0 3 et 0 5 mm entre la pointe de l aiguille et le fond Il ne faut jamais laisser les aiguilles toucher le fond des puits afin d viter des interf rences m caniques avec la pointe de l aiguille pendant l aspiration o Dur e de l aspiration faut r gler la dur e de l aspiration de fa on ce que le film de solution qui adh re aux parois du puits puisse s couler vers le fond Eviter des temps d attente trop longs afin que le rev tement des puits ne s che pas V rifier que les aiguilles du syst me d aspiration sont propres que rien ne les obstrue o Volume d livr V rifier que le volume d livr est le plus proche possible de la capacit maximale des puits v rifier que tous les puits sont remplis uniform ment au m me niveau V rifier que les aiguilles de distribution sont propres que rien ne les obstrue o Vide Le syst me d aspiration doit tre correctement r gl Un vide trop pouss peut fausser le test En effet les puits pourraient s cher ce qui affaiblirait consid rablement l activit enzymatique et fausserait compl tement le r sultat du test La plupart des laveurs fonctionnent avec un vide compris entre 60 et 70 de la pression atmosph rique Su
287. rce unique F qui peut tre mesur e F Paa L int grale de la valeur de la pression sur l aire du plateau permet de calculer la force 2 Un dispositif de mesure appel cellule de charge qui produit un signal de sortie correspondant la force de la charge sous forme de variations de la tension ou de la fr quence 3 Un circuit lectronique analogique digital qui donne le r sultat final de la pes e sous forme num rique Les balances de laboratoire fonctionnent sur le principe de la compensation de la force lectromagn tique applicable a des d placements ou des torsions La combinaison des l ments m caniques et des syst mes de lecture automatiques fournit une mesure du poids avec un degr de justesse qui d pend du mod le Principe Les parties mobiles plateau de pes e colonne a bobine indicateur de position et charge G l objet peser sont maintenus en quilibre par une force de compensation F gale au poids de l objet La force de compensation est produite par le passage d un courant lectrique dans une bobine situ e dans l entrefer d un lectroaimant cylindrique La force F se calcule par la formule F I x L x B dans laquelle intensit lectrique L longueur totale du fil de la bobine et B intensit du champ magn tique dans l entrefer de l lectroaimant Lors de toute modification de la charge poids masse le syst me m canique mobile r pond par un d placement vertical
288. rde pas sa position et la mise au Le r glage de tension de la platine a du jeu R gler le m canisme de tension de la platine point de l image se d r gle continuellement La platine ne peut tre mont e au maximum La platine est bloqu e un niveau tr s bas Desserrer le m canisme de blocage de la platine R gler la hauteur d sir e Resserrer le m canisme de blocage La qualit de l image est mauvaise avec Les lentilles pr sentent des moisissures Enlever les moisissures avec une solution de l objectif 40X nettoyage Suivre les instructions du fabricant Les lentilles sont endommag es Contr ler l objectif V rifier si les lentilles sont ray es piquet es ou br ch es Remplacer l objectif Les lentilles sont accidentellement salies par de l huile Enlever soigneusement l huile avec du papier immersion optique L objectif immersion ne donne pas des images L objectif est utilis sans huile immersion Mettre de l huile immersion sur la lame claires D ee rae 3 a L huile immersion a un faible indice de r fraction Utiliser de l huile de bonne qualit Il y ade l huile a immersion l int rieur de l objectif Nettoyer les lentilles avec du papier optique Si le nettoyage de l ext rieur de l objectif ne suffit pas envoyer l objectif un laboratoire sp cialis pour le faire r parer D monter les lentilles les nettoyer changer les joints recoller r aligner et r assembler De
289. re sans poussi re 2 Une table de travail stable l cart des appareils qui produisent des vibrations centrifugeuses agitateurs Elle doit tre de taille suffisante pour qu il reste de la place c t du lecteur de microplaques Le mat riel compl mentaire n cessaire pour ex cuter le test comme d crit ci dessus comprend laveur de microplaques incubateur distributeur et ordinateur avec ses p riph riques 3 Une alimentation lectrique r pondant aux normes nationales Par exemple dans les pays d Am rique le r seau est en g n ral aliment en 110 V 60 Hz alors qu ailleurs dans le monde il est aliment en 220 240 V 50 60 Hz Etalonnage du lecteur de microplaques L talonnage d un lecteur de microplaques est une op ration sp cialis e qui doit tre r alis e par un technicien ou un ing nieur qualifi s en suivant les instructions donn es par le fabricant Pour proc der l talonnage il est n cessaire de disposer d une s rie de filtres gris mont s sur une plaque de m mes dimensions que les plaques utilis es pour les analyses Les fabricants fournissent ces plaques d talonnage pour toutes les longueurs d onde utilis es par le lecteur Les plaques d talonnage sont livr es avec au moins trois valeurs pr tablies de la densit optique correspondant l intervalle de mesure courant une valeur faible une valeur moyenne et une valeur lev e Pour r aliser l talonnage proc der com
290. re mince contenant la pointe de l lectrode interne Le corps de la sonde contient une solution satur e de chlorure de potassium KCI et une solution 0 1 M d acide chlorhydrique HCI L extr mit correspondant a MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE Photo avec l aimable autorisation de Consort 13 CHAPITRE 3 PH METRE 14 la cathode de l lectrode de r f rence se trouve dans le corps de la sonde anode se trouve l ext rieur de la partie inf rieure du tube interne L lectrode de r f rence est en g n ral r alis e dans le m me type de mat riau que l lectrode interne Les deux tubes interne et externe contiennent une solution de r f rence Seul le tube externe est en contact avec la solution dont on mesure le pH par une membrane poreuse agissant comme pont salin Ce dispositif se comporte comme une cellule galvanis e L lectrode de r f rence est le tube interne de la sonde du pH m tre qui ne peut pas perdre d ions par interaction avec le milieu environnant Elle reste donc stable et invariable pendant la mesure Le tube externe de la sonde contient le milieu qui peut se m langer au liquide environnant Ce tube doit par cons quent tre rempli intervalles r guliers avec une solution de chlorure de potassium KCI afin de restaurer la capacit de l lectrode qui sans cela serait inhib e par la perte d ions et l vaporation L ampoule de verre la partie inf rieure de
291. re traverse le milieu n indice de r fraction du milieu cette valeur se situe en g n ral entre 1 0 et 2 5 CHAPITRE 11 SPECTROPHOTOMETRE 70 L nergie lectromagn tique poss de une gamme de longueurs d onde tr s tendue Le tableau ci dessous en montre quelques exemples SUBI Gamme de longueurs d onde poner eames Ondes radio radio De De quelques m tres quelques kilom tres _ m tres quelques kilom tres Lors de la travers e ou de l interaction avec divers milieux la lumi re subit une s rie de ph nom nes Parmi ceux ci figurent la r flexion la r fraction la diffraction l absorption la diffusion la polarisation et d autres ph nom nes mesur s par divers instruments et dispositifs Le tableau ci dessous montre les gammes de longueurs d onde utilis es pour effectuer des tests en spectrophotom trie Partie du spectre Gamme de longueurs d onde lumineux 10 200 nm nanom tres Proche ultraviolet 200 280 nm Figure 27 Interaction de la lumi re avec la mati re En ce qui concerne l interaction de la lumi re avec la mati re la figure 27 illustre la complexit des ph nom nes qui se produisent Le diagramme de la figure 27 montre que le rayonnement incident lo peut subir une s rie de transformations Il peut tre r fl chi Ir transmis It diffus Id absorb et directement r mis sous forme de fluorescence If Les ph nom nes sur lesquels se base la spectrophotom tr
292. res et la lampe UV D brancher l alimentation lectrique de l enceinte D connecter la lampe UV en la faisant pivoter de 90 degr s Installer une lampe de rechange ayant les m mes caract ristiques que la lampe d origine Sur certains mod les les lampes sont install es sur une plaque fix e sur la partie avant de l enceinte et il faut d visser et soulever cette plaque pour d gager le support de la lampe Une fois cela fait remplacer la lampe comme indiqu ci dessus De PS Maintenance sp cialis e Au bout d un certain temps l enceinte devra tre soumise une maintenance sp cialis e On trouvera ci dessous quelques unes des proc dures faire ex cuter selon le manuel technique du fabricant par une entreprise sp cialis e 1 Certification annuelle conform ment aux dispositions de la norme NSF 49 2 Remplacement du moteur En g n ral il comporte des roulements scell s sans entretien et fonctionne par induction sous contr le de fr quence moteur asynchrone Ce moteur n a pas de charbons 3 Remplacement des ventilateurs 4 Remplacement du filtre HEPA La fr quence de remplacement d pend de l utilisation de l enceinte et du syst me de contr le de l environnement install dans le laboratoire S il y a un bon contr le des poussi res le filtre peut durer de nombreuses ann es 5 R paration du syst me de contr le lectronique alarme de contr le du flux d air position de la vitr
293. respond au test comme pr vu effectu Si n cessaire refaire le test avec une bandelette correcte Effectuer les contr les selon les recommandations du fabricant Certains appareils fournissent des indications sur l cran et sont livr s avec des bandelettes de contr le de la qualit pour v rifier le syst me optique L appareil est d fectueux DIAAN Analyte C est la substance analyser Constituant d un liquide biologique sang urine etc qui ne peut lui m me tre mesur mais dont on peut mesurer certaines propri t s en utilisant un dispositif m dical con u cette fin Par exemple le lactate ne peut tre dos mais sa concentration peut tre mesur e Les analytes on les appelle souvent simplement param tres couramment tudi s en chimie clinique sont le cholest rol l ur e la cr atinine le glucose etc que l on mesure pour valuer l tat de sant des patients Bandelette r active Dispositif sous forme de bandelette contenant des r actifs et autres produits et destin un usage diagnostique Il existe des bandelettes r actives de divers degr s de complexit Elles peuvent consister simplement en bandes de papier filtre sur lesquelles est li un r actif ou en un syst me labor comprenant du papier r actif des fibres de transport des couches de r actifs et d indicateurs et jusqu des bandelettes magn tiques contenant des donn es cod es La zone de test ou de r action est
294. rifier que les grilles avant et arri re ne sont pas obstru es Pr parer la zone de travail Laisser l enceinte fonctionner pendant au moins 15 minutes 3 Selaverles mains et les avant bras avec un savon germicide Mettre l quipement protecteur blouse ou combinaison manches longues et poignets r glables lunettes de protection et masque si le travail effectuer l exige Pr parer les surfaces internes de l enceinte en appliquant de l thanol 70 ou un d sinfectant appropri puis faire circuler l air 4 N introduire et installer que les l ments mat riels biologiques et appareillage n cessaires pour le test ou la manipulation Faire une distinction entre zones propres et zones sales Disposer les l ments de fa on que les l ments propres ne se m langent pas ou ne se croisent pas avec les l ments utilis s ou sales et n entravent pas la circulation de l air entre la grille avant et la grille arri re de l enceinte Disposer un sac de s curit pour les d chets biologiques un r cipient contenant du d sinfectant pour les pipettes et un conteneur pour les objets piquants ou tranchants Eviter de placer des objets de grande taille c t les uns des autres Apr s avoir dispos tout le n cessaire il faut laisser le flux d air circuler dans l enceinte pendant environ 3 5 minutes pour liminer toutes les particules produites ou lib r es pendant l introduction du mat riel 5 Commencer le travail Int
295. rique est d fectueux V rifier la tension d alimentation elle ne doit pas diff rer de plus de 5 de la tension sp cifi e sur la plaque de l appareil Le relais du circuit de refroidissement est d fectueux Remplacer le relais du circuit de refroidissement Remplacer le compresseur Remettre du r frig rant et talonner il s agit d une proc dure sp cialis e qui n cessite des outils sp ciaux CHAPITRE 14 INCUBATEUR 104 BIATNIRONT Conduction thermique Forme de transfert de la chaleur dans une substance lorsque la chaleur passe du point dont la temp rature est la plus lev e au point dont la temp rature est la plus basse Convection thermique Forme de transfert de la chaleur par d placement d un fluide ou d air DEL Diode lectroluminescente Dispositif lectronique largement utilis pour afficher des donn es sur un cran Aussi appel e LED Light emitting diode Demande biochimique en oxyg ne DBO Quantit d oxyg ne dont des micro organismes a robies ont besoin pour d composer les mati res organiques dans un chantillon Elle est utilis e comme indicateur du niveau de pollution de l eau La DBO est mesur e par la masse en milligrammes d oxyg ne utilis e par litre d chantillon lorsque celui ci est incub 20 C pendant 6 jours R sistance Opposition qu exerce un mat riau ou un circuit lectrique au passage du courant lectrique C est la propri t d un circuit qui transforme l
296. rmin par unit de temps Nanom tre Unit de longueur correspondant 10 m un milli me de millionni me de m tre Il est repr sent par le symbole nm On l utilise pour mesurer les longueurs d onde de la lumi re dans le visible et l ultraviolet R fraction Changement de direction qui se produit quand un rayon lumineux atteint l interface entre deux milieux La lumi re frappe l interface sous un angle a et se r fracte sous un angle b lors du changement de milieu de propagation Figure 30 R fraction de la lumi re se N a A j sin a _ Indice sin b de r fraction Lumi re ili incidente Milieu N 1 0 Milieu N 2 a as Lumi re r fract e B 2 22 79 CHAPITRE 11 SPECTROPHOTOMETRE Spectrophotom trie M thode d analyse chimique bas e sur l absorption ou l att nuation par la mati re de la lumi re d une longueur d onde ou d une fr quence d termin e La lumi re interagit avec certaines caract ristiques de l esp ce mol culaire analys e la quantit de lumi re absorb e d pend de la longueur d onde de la concentration de la mol cule et du trajet du rayon lumineux On peut ainsi en d duire des propri t s telles que la concentration de substances ce qui dans le domaine de la sant sert r aliser une grande vari t d analyses qui permettront de d terminer l tat de sant d un patient Trajet optique Distance parcourue par la lumi re visible ou ultraviolette au tr
297. roduire lentement les mains dans la zone de travail Effectuer les manipulations en proc dant de fa on soigneuse et m thodique des zones propres vers les zones potentiellement contamin es Tenir 39 CHAPITRE 6 ENCEINTE DE S CURIT BIOLOGIQUE 40 les mat riels au moins 10 cm de la grille avant Essayer d effectuer les op rations les plus contaminantes et celles qui pr sentent le plus de risques vers le fond de la zone de travail Eviter d utiliser une flamme nue ou un briquet car cela perturberait la structure laminaire du flux d air et risquerait de br ler le filtre Eviter de retirer les mains de la zone de travail avant que toutes les op rations soient accomplies et que les mat riels potentiellement dangereux soient limin s dans le sac pour d chets biologiques ou dans les r cipients pour pipettes et pour objets piquants ou tranchants 6 Apr s avoir termin toutes les manipulations nettoyer l enceinte en laissant l air circuler librement pendant 3 5 minutes 7 D contaminer toutes les surfaces appareillage compris ayant t en contact avec le mat riel biologiquement contamin Appliquer de l thanol a 70 ou un d sinfectant appropri et laisser s cher Soulever les objets et d sinfecter dessous Couvrir les r cipients ouverts avant de les sortir de la zone de travail Remettre le mat riel et les appareils leur place incubateur autoclave etc 8 Jeter les gants et enlever l quipement pr
298. roscopes A quoi sert un microscope Principes de fonctionnement Sch ma d un microscope Conditions requises pour l installation Les probl mes qui peuvent se poser avec les microscopes Entretien g n ral du microscope Guide de d pannage D finitions CHAPITRE 16 PIPETTES Photographies et sch ma de pipettes A quoi sert une pipette Principes de fonctionnement Conditions requises pour l utilisation Utilisation de la pipette Entretien de routine Guide de d pannage D finitions CHAPITRE 17 AGITATEUR CHAUFFANT Photographie d un agitateur chauffant Principes de fonctionnement Commandes de l agitateur chauffant Conditions requises pour l installation Utilisation de l agitateur chauffant Entretien de routine Guide de d pannage D finitions CHAPITRE 18 REFRIGERATEURS ET CONGELATEURS R frig rateurs et cong lateurs Photographie d une enceinte r frig r e quoi sert une enceinte r frig r e Principes de fonctionnement Conditions requises pour l installation Circuit de contr le du r frig rateur Utilisation du r frig rateur Entretien de routine des r frig rateurs Guide de d pannage Utilisation des cong lateurs ultra basse temp rature Entretien de routine des cong lateurs ultra basse temp rature Guide de d pannage D finitions CHAPITRE 19 e ANALYSEURS DE CHIMIE CLINIQUE Photographies d analyseurs de chimie quoi servent les analyseurs de chimie Principes de fonctionnement
299. rte ou temp rature trop basse V rifier la dur e et la temp rature d incubation Les r actifs n taient pas temp rature ambiante Laisser la temp rature des r actifs s quilibrer avec la temp rature ambiante Lavage excessif de la plaque Ajuster la proc dure de lavage en se conformant aux instructions du fabricant Filtre de longueur d onde inadapt V rifier la longueur d onde s lectionn e Utiliser la longueur d onde recommand e pour le test R actifs p rim s ou pr par s de fa on incorrecte V rifier les r actifs utilis s Tester les dilutions V rifier que le test a t r alis suivant la proc dure tablie Un r actif a t omis Incubation tr s longue ou temp rature trop lev e V rifier la dur e et la temp rature d incubation La plaque pr sente des rayures au fond des puits Pr parer une nouvelle plaque et refaire le test Plaque mal choisie ou sale V rifier le type de plaque utilis Pr parer une nouvelle plaque et refaire le test Les puits de la plaque ont s ch Changer la fa on de laver la plaque La plaque est mal install e dans le lecteur V rifier le positionnement de la plaque Refaire la lecture Humidit ou traces de doigts sur le dessous de la plaque V rifier que le dessous de la plaque est propre sous les puits Il reste du tampon de lavage dans les puits avant d ajouter V rifier que le tampon de lavage est compl tement le substrat limin Les comprim s d
300. s signal sur l cran Les piles sont us es Remplacer les piles Le t moin de niveau de charge des piles clignote Les piles sont us es Remplacer les piles Uniquement pour les appareils fonctionnant sur piles 18 MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE DAANEN Dissociation Ph nom ne conduisant la rupture d une mol cule Cette rupture entra ne la lib ration de particules portant une charge lectrique ions Electrode au calomel Electrode de r f rence utilis e avec l lectrode de mesure pour d terminer le pH d une solution Elle comprend une base de mercure Hg un rev tement de chlorure mercureux Hg Cl et une solution 0 1 M de chlorure de potassium KCI Elle est repr sent e par la formule CI Hg CL KCI Hg Electrode sensible aux ions Dispositif qui produit une diff rence de potentiel proportionnelle la concentration de la substance analyser Electrolyte Solut donnant une solution conductrice par exemple NaCl chlorure de sodium et NH OH Gel Substance semi solide compos e d un collo de solide dispers dans un milieu liquide lon Atome qui a gagn ou perdu un lectron Lorsque l atome perd un lectron il devient un ion charg positivement appel cation Si l atome gagne ou capture un lectron il devient un ion charg n gativement ou anion Molarit Nombre de moles M d une substance dans un litre de solution Nombre de moles de solut
301. s allumer et indiquer la temp rature de la cuve Une diode lectroluminescente indique que l appareil est sous tension La mise sous tension entra ne le d marrage du compresseur et des ventilateurs de l vaporateur et du condenseur 3 S lectionner la temp rature de fonctionnement de l appareil En g n ral plusieurs touches sont activ es simultan ment la touche de commande de temp rature et les touches de r glage de la temp rature Une fois la temp rature s lectionn e les commandes sont activ es L cran indique la temp rature de fonctionnement s lectionn e Attendre un temps suffisant pour que l appareil atteigne la temp rature s lectionn e 4 S lectionner les limites de temp rature qui activeront les alarmes Ces temp ratures ne s cartent en g n ral pas de plus de 10 de la temp rature de fonctionnement Habituellement on r gle les alarmes lorsque l appareil a atteint une temp rature proche de sa temp rature de fonctionnement La proc dure consiste activer la commande d alarme et s lectionner les limites de temp rature maximale et minimale qui d clencheront l alarme en cas de d passement Suivre la proc dure recommand e par le fabricant En g n ral le panneau de contr le poss de une touche qui permet de d sactiver les alarmes et aussi de tester leur fonctionnement 5 Les cong lateurs ultra basse temp rature poss dent une autre s rie d alarmes qui avertissent l op rateu
302. s dans la pr paration de m langes en proportions pr d finies et pour d terminer des densit s ou des masses volumiques PRINCIPES DE FONCTIONNEMENT La conception de l instrument les principes et les crit res m trologiques diff rent selon le type de balance Actuellement les balances se divisent en deux grands groupes les balances m caniques et les balances lectroniques Balances m caniques Les mod les les plus courants sont 1 Balance ressort Son fonctionnement repose sur une propri t m canique des ressorts selon laquelle la force exerc e sur un ressort est proportionnelle la constante d lasticit du ressort k multipli e par son longation x F kx Plus la masse m pos e sur le plateau de la balance est grande plus le ressort s allonge puisque l longation est proportionnelle la masse et la constante du ressort L talonnage d une balance ressort d pend de la pesanteur qui s exerce sur l objet peser On utilise ce type de balance lorsqu on n a pas besoin d une grande pr cision Balance curseur Ce type de balance balance de type p se b b ou balance de m nage est quip de deux poids connus curseurs qui peuvent tre d plac s le long de deux chelles une macro chelle et une micro chelle Lorsqu on place une substance de masse inconnue sur le plateau on d termine son poids en d pla ant les curseurs le long des chelles jusqu ce que l quilibre s
303. s lectroniques Balance substitution balance fl au asym trique ou bras in gaux Cette balance ne poss de qu un seul plateau Une masse inconnue est d pos e sur le plateau de pes e La pes e se fait en enlevant des masses connues du contrepoids l aide d un syst me m canique de cames jusqu ce que l quilibre soit atteint Le couteau est en g n ral d centr par rapport au fl au et est situ vers l avant de la balance Lorsqu on d pose une masse sur le plateau de pes e et qu on lib re le m canisme de blocage le mouvement du fl au est projet par l interm diaire d un syst me optique sur un cran situ l avant de l instrument V rification du fonctionnement La proc dure utilis e pour v rifier le fonctionnement d une balance m canique est d crite ci dessous La proc dure d crite est celle qui s applique la balance substitution 1 2 V rifier que la balance est de niveau L horizontalit est r alis e au moyen d une vis de calage situ e sur le socle de la balance ou au moyen d un niveau bulle et d un bouton de r glage sur une chelle dispos e sur le devant du socle Tester le m canisme de z ro R gler la balance sur z ro et la d bloquer Si la valeur indiqu e ne reste pas sur z ro faire le r glage du z ro au moyen de la vis situ e en position horizontale pr s du couteau Pour cela il faut bloquer la balance tourner un peu la vis de r glage d bloquer
304. s a la manipulation de mat riels biologiques potentiellement infectieux 2 Prot ger l chantillon analyser contre la contamination 3 Prot ger l environnement Les enceintes sont utilis es pour les travaux de routine en relation avec des agents pathog nes parasites bact ries virus champignons pour les cultures cellulaires et dans des conditions tr s pr cises pour la manipulation d agents toxiques PRINCIPES DE FONCTIONNEMENT Lenceinte de s curit biologique est en g n ral construite en acier Elle est quip e d une vitre frontale de hauteur r glable d un syst me de ventilation avec moteur lectrique d un ventilateur et d une s rie de conduites qui lorsque l enceinte est en marche produisent une d pression pression n gative l int rieur Ce dispositif force l air entrant par l ouverture frontale circuler vers l int rieur de l enceinte en formant un rideau d air qui prot ge l op rateur A l int rieur de l enceinte l air est conduit travers une s rie de grilles et de conduites et passe finalement sur des filtres HEPA Selon le mod le d enceinte l air est recycl l int rieur du laboratoire ou vacu et renouvel en proportions variables Le flux d air qui dans les enceintes de classe II se d place du filtre vers la surface de travail est laminaire On trouvera ci dessous une r capitulation des types d enceintes existants et de leurs principales caract ristiques 1 HEPA High
305. s ailettes Avertissement Avant d effectuer une inspection ou un entretien de routine v rifier que le distillateur est teint interrupteur sur OFF et d branch Inspection et nettoyage du r servoir du g n rateur de vapeur Fr quence une fois par mois 1 Enlever le panneau de protection ou ouvrir la porte permettant l acc s au bouilleur g n rateur de vapeur 2 Enlever le couvercle du bouilleur 3 V rifier par examen visuel si les parois internes du r servoir ou les r sistances sont entartr es ou s il y a des d p ts de mati res solides La quantit de tartre d pend de la qualit de l eau d alimentation du distillateur S il y a une accumulation de tartre il faut l enlever pour viter d endommager les r sistances 4 Enlever les d p ts de tartre En g n ral il faut pour cela utiliser un produit chimique sp cialement con u pour le d tartrage Ce produit doit tre s lectionn en fonction des caract ristiques de l eau utilis e qui seront d termin es par une analyse chimique 5 Vidanger l eau du r servoir du g n rateur jusqu ce que son niveau se trouve environ 10 cm au dessus de la hauteur de la jauge de niveau d eau ou des r sistances v rifier que le niveau d eau se situe au dessus de la base du r servoir pour assurer que tous les l ments restent immerg s 6 Ajouter le produit chimique recommand pour la qualit d eau utilis e 7 Bien m langer 8 Laisser le produi
306. s conventions de couleurs Tableau des codes de couleur pour les pipettes Plage de ur microlitres Couleur H O o w es CONDITIONS REQUISES POUR L UTILISATION Pour une utilisation correcte des pipettes il faut que le laboratoire soit propre et bien clair Les conditions g n rales remplir sont les suivantes 1 V rifier que la temp rature du laboratoire est stable avec une temp rature optimale de 20 C et un intervalle de variation de 5 C entre 15 C et 30 C 2 V rifier que l humidit relative degr hygrom trique est sup rieure 50 Les pipettes et les chantillons ou substances liquides doivent s quilibrer avec les conditions du laboratoire Il est en g n ral recommand de les laisser s quilibrer au laboratoire pendant deux a trois heures avant de commencer le travail 3 Eviter de travailler avec des pipettes la lumi re solaire directe 4 Utiliser un quipement protecteur appropri pour travailler avec des substances toxiques ou comportant un risque biologique Coussin d air Tige du piston bai Piston Cylindre an Pointe L ie 1 Pipette d placement d air Piston 7 Pointe SSS Tige du piston 2 Pipette a d placement positif 120 UTILISATION DE LA PIPETTE Pour obtenir des r sultats pr cis e
307. s du fabricant 6 V rifier l ajustement des clips porte lames 7 V rifier l alignement optique Pr cautions i 10 11 12 13 Eviter de nettoyer les l ments optiques avec de l thanol car cela les endommagerait Ne pas non plus nettoyer la base de la platine avec du xyl ne ou de l ac tone Ne pas utiliser du papier ordinaire pour nettoyer les lentilles car cela pourrait les rayer Pour viter de laisser des traces de doigts ne pas toucher les lentilles avec les doigts nus Ne pas nettoyer les lentilles des oculaires ou des objectifs avec du tissu ou du papier car cela pourrait endommager le rev tement protecteur de ces l ments optiques Nettoyer ces surfaces avec un pinceau en poil de chameau ou en soufflant de l air avec une poire en caoutchouc ou un mouche b b Eviter de laisser le microscope sans les oculaires Mettre les capuchons de protection de ces derniers pour emp cher la poussi re et les particules de p n trer dans la t te binoculaire Ne pas laisser le microscope rang dans une bo te lorsque l environnement est humide Eviter d appuyer l objectif contre les lames car cela pourrait endommager la lamelle couvre objet ou la lentille frontale de l objectif Faire la mise au point lentement et soigneusement Faire en sorte que la platine reste propre Ne pas d monter les l ments optiques car cela pourrait fausser l alignement Les surfaces optiques doivent tre d abord nett
308. s lectures obtenues et les valeurs arithm tiques correspondant aux poids utilis s traduit une non lin arit Erreur de charge excentr e D viation des r sultats lorsque l objet peser est plac en diff rents endroits du plateau de pes e par exemple au centre du plateau ou sur un de ses bords Erreur de sensibilit Ecart constant sur toute l tendue de pes e ou la capacit d une balance Etalonnage D termination de la valeur correcte de la lecture donn e par un instrument par mesure ou comparaison par rapport un talon ou une norme Les balances sont talonn es au moyen de poids standard On dit aussi calibration ou calibrage Exactitude Somme de toutes les erreurs de la balance C est ce qu on appelle marge d erreur totale Hyst r sis Diff rence entre les r sultats lorsque la charge de la balance est augment e ou diminu e Lin arit D signe l aptitude d une balance effectuer des lectures justes du poids sur toute l tendue de pes e L expression graphique du poids par rapport son indication sur une balance parfaitement lin aire donnerait une ligne droite Pour d terminer l erreur lin aire d une balance il faut utiliser des masses certifi es Cette proc dure permet de calculer les diff rences lin aires en faisant une lecture avec les masses certifi es avec ou sans charge pr alable La diff rence entre les lectures permet de calculer l cart de lin arit Masse Propri t physique d un cor
309. s par la pression En g n ral la pression n cessaire varie entre 5 x 10 et 9 9 x 10 Pa Le sch ma ci dessous montre l installation minimum vanne d arr t filtre et manom tre 5 Un syst me de vidange con u pour recueillir l eau chaude Figure 34 Alimentation en air comprim Arriv e d air comprim an Vers l autoclave D lt Vanne dant Filtre Manometre MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE 87 CHAPITRE 12 AUTOCLAVES 88 6 Une alimentation en vapeur Si l autoclave ne poss de pas son propre g n rateur de vapeur il doit tre aliment parle syst me central de production de vapeur de l tablissement salle des machines chaudi re L installation doit r pondre aux sp cifications requises vanne d arr t filtre et manom tre ainsi qu une installation appropri e pour recueillir le condensat avec un filtre et un pi ge vapeur comme indiqu sur la figure 35 Figure 35 Alimentation en vapeur J gt Arriv e de vapeur Vanne d arr t a e e Manom tre Ny Vers l autoclave Filtre Condenseur ji Pi ge vapeur Alternative conduite de vapeur au sol 7 Lautoclave doit tre utilis exclusivement par un personnel qualifi sp cialement form ces types de proc dures ENTRETIEN DE ROUTINE L autoclave est un appareil qui n cessite une surveillanc
310. s poids standard utiliser pour l talonnage d une balance en fonction de sa capacit ENTRETIEN DE ROUTINE La balance est un instrument qui se caract rise par sa haute pr cision C est pourquoi l op rateur n est charg que de l entretien minimal qui comprend les activit s suivantes A faire chaque jour 1 Nettoyer le plateau de pes e pour enlever la poussi re Le nettoyage se fait avec un chiffon de tissu propre qui peut tre humidifi avec de l eau distill e S il y a des taches les enlever avec un d tergent doux On peut aussi utiliser un pinceau poils souples pour enlever les particules ou la poussi re d pos es sur le plateau de pes e 2 Nettoyer l int rieur et l ext rieur de la chambre de la balance V rifier l absence de poussi re sur les vitres 3 V rifier que le m canisme de r glage sur la porte avant de la chambre de la balance fonctionne correctement 4 Toujours utiliser un r cipient propre pr alablement tar pour la pes e r cipient en verre ou papier pour pes e si possible Noter que le plastique peut se charger d lectricit statique et est d conseill pour peser des substances en poudre ou en granul s 5 Toute projection doit tre imm diatement nettoy e pour viter une corrosion ou une contamination Utiliser de l thanol a 70 pour d sinfecter le plateau de la balance Tr s important Ne jamais lubrifier une balance sauf indication expresse du fabricant Toute
311. s utilis e pour le travail ou du degr de d sordre d un syst me Le diff rentiel r versible d entropie s exprime par la formule _ dQ F dS dans laquelle dQ chaleur absorb e depuis une r serve la temp rature T pendant un changement d tat infinit simal r versible T temp rature de la r serve La formule suivante s applique tout changement r versible au sein d un cycle d as f as 0 Si le cycle est irr versible la formule devient d AS lt 0 T Gaz r frig rant Substance utilis e comme milieu d absorption de la chaleur Processus adiabatique Processus dans lequel il n y a pas de transfert de chaleur Cela suppose AQ 0 Syst me thermique Syst me fonctionnant dans un cycle thermodynamique et qui effectue une certaine quantit positive de travail comme r sultat du transfert de chaleur entre un corps temp rature lev e et un corps basse temp rature 141 MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE Chapitre 19 Analyseurs de chimie clinique Code GMDN 35513 34549 Code ECRI 15 551 18 505 15 551 MTEC Analyseurs de chimie Analyseurs portables Analyseur en chimie clinique s che Sous cat gorie du code GMDN 35513 Les analyseurs de chimie mesurent la concentration de Analyseur de paillasse chimie s che avec accessoires substances dans le sang ou autres liquides biologiques en utilisant des r actions chimiques sp cifiques dont les r sultats
312. se du circuit qui transforme le signal lectrique mis par le transducteur en donn es num riques pouvant tre lues sur un cran Le traitement du signal comprend les l ments suivants 1 R glage de la tare Ce r glage est utilis pour ajuster la valeur de lecture z ro avec toute charge se situant dans la plage de mesure de la balance Le r glage se fait au moyen d un bouton g n ralement situ sur la partie avant de la balance On utilise couramment cette fonction pour le tarage du r cipient contenant l objet peser R glage du temps d int gration Pendant une lecture les valeurs sont moyenn es sur une p riode pr d finie Cette fonction est tr s utile lorsque les pes es doivent tre effectu es dans des conditions instables par exemple en pr sence de courants d air ou de vibrations Ce r glage d finit le temps qu on laisse un r sultat pour qu il se situe entre des valeurs limites fix es l avance et qui permettent de le consid rer comme stable Cet intervalle de temps peut tre modifi selon les applications recherch es Arrondissage En g n ral les balances lectroniques traitent les donn es avec une plus grande r solution que celle qui est affich e La valeur affich e sur l cran est la valeur interne nette arrondie D tecteur de stabilit Ce t moin lumineux s teint lorsque le r sultat de la pes e s est stabilis et est pr t tre lu Sur certains mod les de balances le r
313. sont lus par des m thodes photom triques Leurs applications vont du diagnostic clinique et de la surveillance de la consommation de drogues aux analyses de m decine l gale etc Les analyseurs de chimie comprennent essentiellement les analyseurs en chimie s che qui utilisent des bandelettes impr gn es d chantillon sur lesquelles des r actions chimiques sont d tect es et les analyseurs en chimie liquide qui d tectent les substances en solution Il existe de nombreux mod les dont certains ne mesurent qu un param tre par exemple les appareils de mesure de la glyc mie et les h moglobinom tres et d autres en mesurent plus de dix Les analyseurs de chimie existent sous forme d appareils de paillasse avec divers degr s d automatisation et d appareils portables Certains mod les con us pour les climats tropicaux ont des composants lectroniques prot g s contre l humidit Les analyseurs de chimie recouvrent toute une famille d instruments dont des photom tres et des colorim tres voir chapitre 20 Ils sont souvent appel s du nom de l analyse qu ils servent a effectuer Photo avec l aimable autorisation de F Hoffmann La Roche AG PHOTOGRAPHIES D ANALYSEURS DE CHIMIE Analyseur portable chimie s che Photo avec l aimable autorisation de F Hoffmann La Roche AG Photo avec l aimable autorisation de Siemens Healthcare Diagnostics Inc 2008 J WI CHA 144 PITRE 19 ANALYSEURS DE CHIMIE CLINI
314. sorbance 11 R p ter l tape 9 12 Faire de la m me fa on la lecture de l absorbance sur les solutions analyser 13 A l aide d un tableau des valeurs obtenues d apr s la courbe d talonnage de l appareil lire la concentration des chantillons d apr s la valeur de l absorbance 14 Apr s emploi d brancher l appareil et le couvrir pour le prot ger de la poussi re 15 Rincer la cuve l eau distill e la laisser s goutter et l emballer dans un tissu doux La ranger soigneusement dans une petite bo te pour viter les rayures et la poussi re UTILISATION DE L H MOGLOBINOM TRE Seul un personnel qualifi et autoris doit pouvoir utiliser l h moglobinom tre La proc dure d crite ci dessous s applique un h moglobinom tre portable avec source lumineuse DEL et affichage num rique Pour les autres mod les les proc dures peuvent tre diff rentes et il faudra se reporter au manuel d utilisation fourni par le fabricant 1 Brancher l appareil sur la prise de courant et mettre l interrupteur sur ON ou utiliser l alimentation lectrique interne de l appareil 2 Mettre l interrupteur marche arr t sur ON 3 Choisir l unit qui sera utilis e en routine par exemple g dl 4 Letemps de chauffage s affiche en secondes sur certains mod les Pour les autres mod les attendre 15 minutes ou le temps recommand par le fabricant 5 Pr parer sur un portoir toutes les solutions en tubes a essais b
315. st plein V rifier le niveau de remplissage du r servoir d chets Le filtre du syst me d aspiration est humide ou V rifier l tat du filtre du syst me d aspiration bouch Les pointes des aiguilles ne sont pas plac es Examiner le positionnement des pointes d aiguilles correctement et n atteignent pas le fond des puits Une microplaque d un type diff rent est utilis e pour V rifier le type de plaque utiliser pour le test le test Le laveur n a pas t suffisamment purg V rifier la proc dure de purge L op rateur n a pas suivi correctement les instructions Examiner la proc dure recommand e par le du fabricant fabricant Faire les ajustements n cessaires La plaque mise dans le laveur n est pas correctement V rifier le positionnement de la plaque dans le align e laveur Le r servoir de solution de lavage est vide Examiner le r servoir de solution de lavage Compl ter le niveau Le laveur n a pas t suffisamment purg au d but Le nettoyer correctement pour uniformiser du cycle de travail l humidit dans chaque partie et liminer les bulles d air Le volume de solution de lavage d livrer a t V rifier le volume requis pour chaque type de test et incorrectement programm chaque plaque La plaque a t mise de fa on incorrecte dans le V rifier l installation correcte de la plaque dans le laveur laveur Le programme de lavage a t incorrectement V rifier le programm
316. substance interf rant avec le m canisme de la balance retarde sa r ponse ou fausse d finitivement les mesures Note En g n ral le fabricant ou l installateur effectue l entretien r gulier des balances maintenance selon des proc dures qui varient selon le type et le mod le 1 Guidelines for calibration in laboratories Drinking Water Inspectorate by LGC Teddington Ltd December 2000 27 CHAPITRE 4 BALANCES 28 Balance lectronique La balance ne s allume pas La lecture du poids est incorrecte La balance n indique pas les unit s de mesures souhait es sur l cran La configuration de la balance ne peut tre modifi e partir du menu La balance ne garde pas les s lections ni les modifications effectu es Le lecteur de la balance est instable L cran donne une lecture incomplete ou est bloqu L cran affiche un code d erreur Lectures non reproductibles hyst r sis Lectures non lin aires Le r sultat affich n arr te pas de monter ou de descendre Le r sultat affich n arr te pas de monter et descendre L cran est vide ou affiche des signes qui ne veulent rien dire L cran indique une surcharge ou une valeur n gative en l absence de charge La balance ne peut tre talonn e GUIDE DE D PANNAGE CAUSE PROBABLE Le cable de raccordement est d branch ou la fiche est mal connect e a la balance La prise de courant n est pas aliment e La ba
317. sur une certaine distance Ce d placement est d tect par une cellule photo lectrique e qui envoie un signal lectrique au servo ampilificateur f Ce signal modifie le flux de courant lectrique traversant la bobine de l lectroaimant c de telle fa on que le syst me mobile revient sa position d quilibre sous l effet de l ajustement du champ magn tique dans l lectroaimant Par cons quent le poids de la masse G peut tre mesur indirectement au d but du passage du courant lectrique qui traverse le circuit mesurant la tension V au moyen d une r sistance de pr cision R soit V I x R Actuellement de nombreux syst mes de pes e utilisent un syst me lectronique pour effectuer des mesures tr s exactes de la masse et du poids Le sch ma ci dessous explique le fonctionnement des balances lectroniques Figure 12 El ments des balances lectroniques AEREE M canisme de transfert F P amp a Cellule de charge Ecran et processeur de signal Figure 13 Principe de la force de compensation V PR 77 D Uo I A PA REAN E bara K x l a JJ Syst me de traitement du signal Le syst me de traitement du signal se compo
318. t ristiques que le filtre d origine V rifier le fonctionnement du ventilateur 4 Passer l aspirateur sur le condenseur et ses ailettes diffusantes 5 Remettre la grille de protection et le filtre Avertissement Si le condenseur n est pas propre cela interfere avec le processus de transfert de chaleur et le r frig rateur peut chauffer ou fonctionner a une temp rature diff rente de celle s lectionn e Int grit du joint d tanch it de la porte Fr quence recommand e une fois par trimestre Il est recommand de contr ler p riodiquement l int grit du joint d tanch it de la porte II doit rester en bon tat et ne pas pr senter de craquelures de perforations ni de fissures D givrage Fr quence recommand e une fois tous les six mois Chaque fois qu il est n cessaire de d givrer le cong lateur il faut proc der comme suit 1 Transf rer les produits congel s dans un autre cong lateur ayant les m mes caract ristiques de fonctionnement 2 Eteindre l appareil et laisser l int rieur de la cuve remonter la temp rature ambiante 3 Enlever la glace et l eau accumul es l int rieur de la cuve 4 Si on per oit des odeurs trang res laver l int rieur de la cuve avec du bicarbonate de sodium et de l eau chaude 5 Nettoyer l ext rieur avec un d tergent doux le s cher et appliquer une cire protectrice si n cessaire Avertissement Ne jamais utiliser d instruments point
319. t chimique agir jusqu au lendemain ou selon les instructions du fabricant 9 Le lendemain matin vidanger le contenu du r servoir 1 Les sels min raux d pos s sur la gaine des r sistances sont particuli rement mauvais conducteurs de la chaleur et emp chent le transfert efficace de la chaleur entre la r sistance et l eau lors du processus de distillation Cela provoque une augmentation de la temp rature de la r sistance au dessus de sa temp rature normale de fonctionnement ce qui risque de l endommager 10 Ajouter de l eau propre laver et vidanger jusqu ce que le produit chimique et les r sidus de tartre soient enti rement limin s 11 Remettre le couvercle en place 12 Remettre le panneau avant ou refermer la porte de l appareil 13 Faire fonctionner l appareil normalement Avertissement La solution utilis e pour liminer le tartre ne doit en aucun cas tre distill e Remplacement du filtre au charbon actif Fr quence tous les trois mois Normalement le filtre au charbon actif est immerg au dessous du syst me de distribution qui se trouve en aval du r cipient de stockage de l eau distill e Il est mont sur un logement install dans la conduite de distribution d eau distill e En g n ral il s agit d un dispositif facile remplacer La proc dure est habituellement la suivante 1 D visser le dessus du filtre 2 Enlever l l ment filtrant usag 3 Monter un nouvel l ment fi
320. t des charbons Remplacer les charbons par de nouveaux ayant les m mes caract ristiques Proc dure valable pour les centrifugeuses quip es d un syst me de transmission par courroies 51 CHAPITRE 7 CENTRIFUGEUSES 52 DAANEN Charbon Dispositif qui transmet l nergie lectrique entre l alimentation lectrique externe cables l tat statique et les composants internes en rotation d un moteur En g n ral les charbons sont r alis s en graphite de structure tr s souple et dans les moteurs doivent tre chang s r guli rement tous les six mois Aussi appel balai Densit Voir Masse volumique Force centrifuge Force apparente gale et oppos e la force centrip te tendant loigner un corps en rotation du centre de rotation et r sultant de l inertie du corps C est l une des composantes du vecteur d inertie qui est gal l ensemble des forces agissant sur le corps Son intensit est toujours gale m x a et sa direction est radiale du centre vers l ext rieur Force centrifuge relative FCR Relation entre l acc l ration de la force centrifuge pour une vitesse et un rayon donn s rw2 et l acc l ration normale de la pesanteur g Elle se calcule par la formule FCR rw2 g dans laquelle r rayon en mm w vitesse angulaire en radians par seconde w 27 x rpm 60 g acc l ration normale de la pesanteur 9807 mm s Masse volumique Masse d un corps par unit de
321. t doit avoir les m mes sp cifications que le joint d origine On le monte dans sa rainure et on le maintient en place avec le syst me de fixation qui peut tre dans certains incubateurs un simple jeu de vis 2 Les l ments chauffants syst me de r sistances Les l ments qui constituent le corps de chauffe de l incubateur sont g n ralement situ s dans le bas de celui ci Pour les remplacer il est n cessaire de d monter les panneaux de protection et le panneau inf rieur de l appareil Dans certains incubateurs il faut galement d monter les portes porte ext rieure m tallique et porte int rieure en verre Une fois les panneaux de protection enlev s on d connecte les r sistances et les capteurs de temp rature et on les remplace par de nouveaux ayant les m mes sp cifications que les l ments d origine On remonte ensuite tous les l ments et on effectue un talonnage 3 Le ventilateur de refroidissement S il est d fectueux cet l ment doit tre remplac par un ventilateur ayant les m mes caract ristiques que le ventilateur d origine Pour le remplacer il faut ouvrir le compartiment ou il est install Dans certains incubateurs il faut galement d monter les portes et certains panneaux de protection Une fois cela fait on d connecte le ventilateur endommag et on le remplace par le nouveau en v rifiant que l air souffle dans la bonne direction On remonte ensuite tous les l ments Pour r
322. t en g n ral sous 120 V 60 Hz ou 230 V 60 Hz Leur installation et leur utilisation sont facilit es par la pr sence d un vier proximit pour les remplir d eau et les vider 2 V rifier que l emplacement choisi est horizontal et suffisamment solide pour supporter le poids du bain marie lorsque celui ci est rempli de liquide 3 V rifier que l emplacement choisi laisse assez de place pour d poser les chantillons et les accessoires n cessaires pour l utilisation normale du bain marie 4 Eviter de placer le bain marie dans les courants d air par exemple devant un climatiseur ou une fen tre car cela pourrait interf rer avec son fonctionnement normal S curit 1 Eviter d utiliser le bain marie dans un environnement o se trouvent des mat riaux inflammables et combustibles L appareil poss de des l ments r sistances produisant de hautes temp ratures qui pourraient provoquer un incendie ou une explosion accidentels 2 Toujours raccorder l appareil une prise de courant reli e la terre afin de prot ger l utilisateur et l appareil contre les chocs lectriques Le raccordement lectrique doit satisfaire aux normes en vigueur dans le pays et dans le laboratoire 3 Utiliser exclusivement le bain marie avec des liquides non corrosifs et non inflammables 4 Utiliser un quipement de protection personnelle lors du travail avec un bain marie L appareil poss de des r sistances qui peuvent provoquer des br
323. t entretien des cuves Les cuves doivent tre rigoureusement propres pour que les mesures soient exactes Les nettoyer comme d crit au chapitre 11 Les recommandations suppl mentaires suivantes sont applicables 1 Toujours tenir les cuves par leurs parois opaques non optiques 2 Sauf instructions contraires du fabricant ne faire aucune mesure sans avoir fait une lecture blanc au pr alable 3 Utiliser une cuve unique ou un jeu de cuves assorties pour un fonctionnement optimal de l appareil Note L absorbance des cuves ne doit pas d passer 0 01 lorsqu on fait la mesure sur de l eau distill e Pour viter des r sultats incorrects une cuve dont l absorbance d passe cette limite ne doit pas tre utilis e dans une s rie sauf si elle est appari e avec une cuve ayant la m me absorbance avec l eau distill e 4 Enlever les bulles pr sentes dans la solution en tapotant doucement la cuve avec le doigt 5 V rifier que le niveau de solution dans la cuve est suffisamment haut au dessus du faisceau lumineux pour que la r flexion de la lumi re la surface du liquide n interf re pas avec la mesure 6 Toutes les solutions utilis es et l chantillon analyser doivent tre limpides Si le m lange entre la solution de r actif et l chantillon est trouble la mesure doit tre refaite apr s avoir v rifi et confirm la transparence et la propret de la cuve 7 Si on effectue une mesure cin tique sur une lon
324. t install et utilis il peut fonctionner sans probl mes pendant plusieurs ann es On trouvera ci dessous une description des proc dures d entretien de routine recommand es par les fabricants Pour les proc dures sp cialis es on suivra soigneusement les recommandations du fabricant Nettoyage Fr quence une fois par mois 1 Nettoyer l appareil en le laissant en position verticale pour viter que les produits de nettoyage n atteignent les l ments internes 2 Utiliser un d tergent doux Appliquer sur les surfaces externes avec un chiffon en tissu tr s fin comme du tissu mouchoirs 3 V rifier que l appareil est bien sec avant de le rebrancher Remplacement de la surface en c ramique Fr quence a effectuer si n cessaire On trouvera ci dessous des recommandations g n rales concernant le remplacement de la surface en c ramique 1 V rifier que la plaque chauffante est d branch e et refroidie afin d viter le risque de choc lectrique et de brdlure 2 Manipuler l appareil avec la plus grande prudence car une surface en c ramique cass e a des bords tr s coupants Retourner l appareil c t c ramique vers le bas 4 D faireles vis de fixation du panneau inf rieur et enlever le panneau 5 Localiser et d connecter les c bles d alimentation des r sistances lectriques sur les mod les avec r sistances 6 D connecter les c bles qui relient le panneau de contr le aux r sistances
325. t sur la surface de la 113 CHAPITRE 15 MICROSCOPE 114 lentille Si n cessaire r p ter l op ration avec un nouveau tampon d ouate Lorsque toutes les moisissures ont t enlev es nettoyer avec un coton propre Entretien courant du microscope Fr quence tous les jours apr s utilisation 1 Bi Nettoyer l huile immersion de l objectif 100X Utiliser du papier optique ou d faut du coton hydrophile Nettoyer la platine porte objet Nettoyer le condenseur Mettre le rh ostat de r glage de l intensit lumineuse sur le minimum et teindre le syst me d clairage Couvrir le microscope d une housse en plastique ou en tissu S assurer que le microscope se trouve dans un endroit bien ventil o la temp rature et l humidit sont contr l es Si le microscope poss de une bo te de rangement ventil e et quip e d une ampoule lectrique pour lutter contre l humidit le mettre dans la bo te allumer l ampoule et fermer la bo te Fr quence une fois par mois Is Enlever la poussi re du corps du microscope Utiliser un chiffon humect avec de l eau distill e Enlever la poussi re des oculaires des objectifs et du condenseur Utiliser une poire en caoutchouc pour souffler de l air afin de chasser les restes de poussi re Ensuite nettoyer la surface des lentilles avec une solution de nettoyage pour lentilles de microscope Ne pas appliquer directement la solution sur les lentilles
326. t un outillage ad quats on peut gravement alt rer la qualit de l image et m me casser l l ment du microscope o Miroirs Leur surface r fl chissante est directement expos e et peut se corroder Si une r paration est n cessaire il faut d monter le miroir l enlever de la t te binoculaire et le remplacer par un autre qui sera coup coll et align directement dans sa position d finitive Figure 46 Syst me d clairage 10 i 12 Io 43 NS y4 16 15 10 Verre protecteur avec filtres interchangeables 11 Bouton de r glage du diaphragme de champ 12 Miroir concave 13 Lampe a incandescence 14 Support de la lampe avec bague de r glage 15 Lentille du collecteur 16 Miroir S C est un l ment fondamental du microscope Si le syst me d clairage ne fonctionne pas bien le microscope est inutilisable car l intensit lumineuse et le contraste sont indispensables pour observer les chantillons Plusieurs facteurs peuvent affecter le syst me d clairage les plus courants sont l encrassement et la d t rioration des miroirs et des lentilles les d fauts de la tension d alimentation ou l utilisation d ampoules autres que celles recommand es par le fabricant Ces anomalies provoquent de petites ombres dans le champ de vision et une intensit lumineuse trop faible ou un manque d uniformit de l clairage Poussi re et encrassement internes Cela se produit lorsque les syst mes d c
327. tabilisateur de tension entre la prise et le microscope Le c ble d alimentation est mal connect la prise de Brancher correctement le cable Si un l ment est courant d fectueux le remplacer l ampoule est mal install e et a un mauvais contact Remettre l ampoule en place correctement Il y a des d p ts m talliques ou des taches noires sur Remplacer l ampoule l ampoule l chantillon n est pas clair de fa on uniforme La source lumineuse nest pas centr e Rectifier l alignement du condenseur L objectif n est pas bien centr Tourner lentement le revolver porte objectif jusqu entendre l encliquetage l chantillon est insuffisamment clair iris du diaphragme est presque ferm Ouvrir l iris du diaphragme jusqu ce que l clairage soit suffisant Le condenseur est loin de l chantillon trop bas Rapprocher le condenseur Les lentilles du condenseur pr sentent de la poussi re ou Nettoyer le condenseur Enlever la poussi re avec un des moisissures pinceau Enlever les moisissures avec une solution de nettoyage pour lentilles de microscope L image pr sente un contraste excessif L iris du diaphragme du condenseur est presque ferm Ouvrir l g rement l iris du diaphragme L image est l g rement trop claire et brillante Liris du diaphragme du condenseur est tr s ouvert Fermer l g rement l iris du diaphragme Syst me optique m canique CUS CAUSE PROBABLE SOLUTION La platine ne ga
328. tance sous tension lt a AU R sistances 95 CHAPITRE 13 TUVE 96 CONTR LE DE QUALIT Le contr le de qualit des tuves est assez exigeant car la st rilisation par la chaleur s che a pour param tres critiques la temp rature et le temps En g n ral des spores de Bacillus subtilis vari t Niger sont utilis es comme indicateurs biologiques Elles doivent tre incub es pendant plusieurs heures apr s la fin du processus de st rilisation La charge en spores initiale de l indicateur se situe entre 5 x 10 et 1 x 10 L efficacit du cycle d pend de la diffusion de la chaleur de la quantit de chaleur disponible et des pertes de chaleur Son effet germicide est affect par la pr sence de mati res organiques ou d impuret s sur l objet st riliser La st rilisation par la chaleur s che doit tre r serv e aux articles qui ne peuvent pas tre st rilis s en autoclave ENTRETIEN DE ROUTINE Une tuve n a besoin que d un entretien simple et aucune intervention de maintenance complexe n est n cessaire en routine Les proc dures g n rales ci dessous sont appliquer selon les besoins Elles peuvent varier selon le type d tuve et les diff rents mod les propos s par les fabricants Avertissement Avant toute intervention d entretien de routine sur une tuve s assurer qu elle est temp rature ambiante et que le cable d alimentation est d connect de la prise
329. tes d placement d air Pour cela aspirer de la solution de travail plusieurs reprises en la vidant dans un bac d chets On r duit ainsi le risque d aspirer des bulles d air lorsqu on travaille avec des liquides denses ou hydrophobes Cette fa on de faire permet aussi d obtenir une humidit homog ne l int rieur du coussin d air de la pipette espace entre la base du piston et la surface du liquide Il n est pas n cessaire de pr humidifier les pipettes d livrant des volumes inf rieurs ou gaux 10 ul Il n est pas non plus n cessaire d humidifier les pipettes d placement positif 4 Apr s avoir rempli la pointe de la pipette liminer les gouttes qui pourraient rester sur la pointe en la faisant doucement glisser le long de la paroi du tube contenant le liquide Il peut tre n cessaire d utiliser un mat riau absorbant en vitant de toucher l extr mit de la pointe et en prenant les pr cautions voulues si le mat riel pr lev pr sente des signes de contamination 5 Pour d livrer le liquide pr lev placer la pointe contre la paroi du tube receveur La pointe de la pipette doit former un angle compris entre 30 et 45 avec le tube une distance de 8 10 mm au dessus de la surface du liquide Technique de pipetage correcte On trouvera ci dessous une description de la proc dure g n rale suivre lors de l utilisation d une pipette m canique d placement d air L op rateur doit tenir c
330. teur d ajustement en ul mg 1 La proc dure d crite ici est un guide g n ral Pour plus de d tails consulter la norme BS EN ISO 8655 6 2002 ou ses mises jour 2 La valeur de Z d pend de la temp rature et de la pression pour l eau distill e Se r f rer aux publications sp cialis es telles que la norme BS EN ISO 8655 6 2002 Annexe A MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE GUIDE DE D PANNAGE CAUSE PROBABLE iO RUE ETO La pointe est mal ajust e sur la pipette Monter la pointe selon les indications du fabricant Il y a des corps trangers entre la pointe et l embout Nettoyer le raccord Retirer la pointe et nettoyer l embout Mettre une nouvelle pointe ll y a des corps trangers entre le piston et le joint D monter et nettoyer l ensemble cylindre piston torique dans le cylindre Lubrifier et remonter Le piston et ou le joint torique ne sont pas assez D monter et lubrifier lubrifi s Le joint torique est tordu ou endommag Remplacer le joint torique D monter nettoyer remplacer le joint lubrifier et remonter Le piston est sale Nettoyer le piston et lubrifier l g rement L embout est mal ajust Ajuster l embout Des gouttes sont visibles dans la pointe de la pipette L humidification de la paroi en plastique n est pas Mettre une nouvelle pointe homog ne La pipette est inexacte La pipette est utilis e de fa on incorrecte Contr ler la technique de pipetage et c
331. tifi e par la lettre grecque p ro Dans le syst me international d unit s la masse volumique est exprim e en kilogrammes par m tre cube kg m Microgramme ug Unit de poids quivalente 1 x 10 grammes 9 Microlitre ul Unit de capacit quivalente 1 x 10 litres I Un 1 ul d eau p se exactement un 1 mg et a un volume de 1 mm Milligramme mg Unit de poids quivalente 1 x 10 grammes g Millilitre mp Unit de capacit quivalente 1 x 10 litres I Un 1 ml d eau p se exactement un 1 g et a un volume de 1 cm Pr cision Concept en relation avec les erreurs de mesure Un instrument ou une m thode sont pr cis lorsqu en r p tant une mesure lors d essais ind pendants on obtient des r sultats similaires Volume Quantit d espace physique qu occupe une masse On le calcule en divisant la masse du corps par sa masse volumique moyenne Chapitre 17 MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE Agitateur chauffant Code GMDN 36815 Code ECRI 16 287 Plaques chauffantes L agitateur chauffant ou plaque chauffante avec agitateur est con u pour chauffer et m langer des liquides contenus dans des r cipients de laboratoire tels que des fioles Erlenmeyer des tubes essais et des b chers PHOTOGRAPHIE D UN AGITATEUR CHAUFFANT Figure 54 Panneau de contr le d un agitateur chauffant Photo avec l aimable autorisation de Cole Parmer Instrument Co
332. tout fluide et l ve la temp rature de la zone o il est install Il est n cessaire de laisser un espace libre autour de l appareil pour permettre l air de circuler Certains distillateurs sont mont s dans un ch ssis m tallique et doivent tre install s sur un support permettant l air de circuler dessous 2 Un raccordement au r seau d eau potable En g n ral le tuyau de raccordement a un diam tre d environ 1 25 cm Pour assurer un bon fonctionnement il faut v rifier la qualit de l eau alimentant le distillateur afin de d terminer s il est n cessaire d installer un syst me de traitement pour viter les d p ts et le tartre dans le r servoir du g n rateur de vapeur et sur les r sistances immersion On utilise l eau potable pour alimenter le g n rateur de vapeur et pour r frig rer le condenseur 3 Un syst me de distribution de l eau distill e L eau distill e produite est d abord recueillie dans un r cipient de stockage Dans les appareils de grande capacit elle est distribu e partir de ce r servoir vers les postes d utilisation au moyen d un r seau Dans les appareils de taille r duite ou moyenne elle est transvas e dans d autres r cipients partir desquels elle est pr lev e par les utilisateurs 4 Un tuyau de vidange On l utilise pour vider dans un vier situ proximit de l appareil les impuret s qui peuvent s accumuler dans le r servoir du g n rateur de vapeur
333. tre dans le compresseur non indiqu sur le sch ma de la figure 56 Isolation thermique Ensemble constitu de mat riaux ayant la propri t de ralentir le transfert de chaleur L isolation thermique sert viter que l nergie thermique provenant de l environnement n atteigne l enceinte r frig r e une vitesse gale la vitesse d absorption de l nergie thermique interne par le syst me Tous les appareils de r frig ration poss dent une isolation thermique ad quate dans ce but Les mat riaux isolants les plus utilis s sont la mousse de polyur thane et la laine de verre De m me les surfaces internes sont couramment r alis es en mat riaux tels que le plastique ABS Robinets de service Robinets utilis s pour charger le circuit en gaz r frig rant Ils servent connecter le syst me de remplissage et le syst me de vidange de fa on ce que l appareil de r frig ration fonctionne selon les sp cifications du fabricant Seul le fabricant et les techniciens sp cialis s ont acc s ces robinets non indiqu s sur le sch ma de la figure 56 Protection thermique Syst me de protection qui est activ et qui d connecte le compresseur en cas de surcharge touchant les bobines dans le champ du compresseur Il fait partie du syst me lectrique et n est pas indiqu sur le sch ma du circuit de r frig ration Note L vaporateur ainsi que le condenseur sont r alis s en mat riaux bons conducteurs de
334. tres de fonctionnement se situent dans les tol rances d finies par le fabricant 7 Effectuer les contr les trimestriels de routine r 1 Il se forme des d p ts de tartre lorsque l eau utilis e par le g n rateur de vapeur n a pas t trait e comme il convient Jauge de niveau d eau Bornes des r sistances H Bride de montage Sooo Tuyau d arriv e d eau des r sistances Tuyau d vacuation de la vapeur Flotteur R sistances immersion Couvercle du g n rateur de vapeur Tuyau de vidange du g n rateur de vapeur 89 CHAPITRE 12 AUTOCLAVES 90 MAINTENANCE DES L MENTS SP CIALIS S Les op rations ci dessous doivent tre confi es un technicien de maintenance et s appliquent certains l ments de l autoclave Etant donn qu il existe une grande vari t de mod les les proc dures d crites ici ne s appliquent qu certains appareils Entretien des lectrovannes 1 Contr ler le son produit par les bobines ou sol no des bourdonnement Un bruit excessif est le signe d une surchauffe due au passage de courants lectriques anormalement intenses dans le sol noide Le courant alternatif augmente lorsque l imp dance du circuit Z diminue Cela se produit lorsque le sol noide n est pas correctement enferm dans une cage de fer II peut se cr er
335. trifuge relative ou FCR acr g La force centrifuge relative est l outil qui permet de comparer des rotors de diff rentes sp cifications lorsqu on recherche des effets de centrifugation quivalents EL MENTS DE LA CENTRIFUGEUSE Les l ments les plus importants d une centrifugeuse sont Panneau de contr le qui se compose en g n ral des l ments suivants 1 Panneau de contr le qui se compose en g n ral des l ments suivants Interrupteur marche arr t r glage du temps de fonctionnement minuteur r glage de la vitesse de rotation sur certaines centrifugeuses r glage de la temp rature sur les centrifugeuses r frig r es contr le des vibrations m canisme de s curit et syst me de freinage Figure 20 Le concept de force centrifuge Syst me de r frig ration sur les centrifugeuses r frig r es Syst me de vide sur les ultracentrifugeuses non indiqu sur la figure Base Couvercle Bo tier Moteur lectrique Rotor Il existe diff rents types de rotors Les plus courants sont les rotors angle fixe godets oscillants tubes verticaux et tubes quasi verticaux qui seront d crits ci apr s A Lp Se Coupe transversale d une centrifugeuse les num ros correspondent aux l ments d crits ci dessus Fp Fp P CONCEPT APPLICATION Pa Force Centrifuge Rotor Echantillon R SULTAT 46 1 Les lois de
336. u e ll y a un bourrage de papier dans l imprimante Enlever l exc dent de papier avec des pinces fines Eteindre l imprimante enlever le papier et rallumer l imprimante L alimentation en papier de l imprimante Le papier n est pas install correctement Eteindre l imprimante remettre le rouleau de papier ne fonctionne pas ou le papier n avance pas en place a ii L avant du papier n est pas align ou est froiss Eteindre l imprimante Remettre le rouleau de papier en place Couper l avant du papier et r aligner le papier dans le syst me d alimentation La commande d alimentation en papier ne r pond Appeler le repr sentant pas La cuve n est pas de la bonne taille Utiliser la taille de cuve sp cifi e par le fabricant Le m canisme d ajustement de la cuve est mal Corriger la position du m canisme d ajustement positionn La cuve ne rentre pas dans le compartiment porte chantillon de l analyseur en chimie liquide La bandelette n est pas lue par l analyseur en chimie La bandelette n a pas t plac e correctement dans V rifier que le d clic s entend lorsque la bandelette s che l analyseur est mise en place selon le type d appareil 7 La V rifier que la bandelette a t plac e dans le bon sens dans l analyseur avec la face noire vers le bas L analyseur sur en chimie s che ne fonctionne pas La bandelette utilis e ne convient pas pour le test V rifier que la bandelette cor
337. u niveau du filtre F P Il y a un blocage au niveau des grilles ou des fentes de reprise V rifier que les grilles ne sont pas obstru es par du mat riel La conduite d vacuation est obstru e V rifier qu il n y a pas de blocage ou d obstruction dans la conduite d vacuation Il y a un blocage ou une obstruction sous le plan de travail V rifier que le tuyau situ sous le plan de travail n est pas obstru ll ya une contamination des chantillons Les modes op ratoires sont incorrects V rifier que l enceinte est utilis e conform ment au manipul s dans l enceinte mode d emploi et aux bonnes pratiques Obstruction au niveau des fentes de reprise ou blocage dela Tester le syst me d vacuation et de reprise pour conduite d vacuation v rifier l absence d obstruction Des facteurs ext rieurs l enceinte affectent la circulation de V rifier le secteur d installation de l enceinte et les l air l int rieur et provoquent une contamination proc dures qui y sont effectu es Le filtre HEPA est d fectueux Remplacer le filtre HEPA est proc der la certification de l enceinte 1 Purifier Delta Series Biological Safety Cabinets User s Manual Kansas City Labconco Corporation Part N 36960 20 Rev A ECO B296 43 CHAPITRE 6 ENCEINTE DE S CURIT BIOLOGIQUE 44 DAANEN A rosol Suspension de fines particules solides ou liquides dans l air Le diam tre moyen des particules se situe entre 10 et
338. ubir de chocs l lectrode Comme elle est en g n ral r alis e en verre et est tr s fragile il est n cessaire de la manipuler avec beaucoup de pr caution en vitant les chocs 2 Ne pas oublier que l lectrode a une dur e de vie limit e 3 Lorsqu elle n est pas utilis e conserver l lectrode dans la solution tampon de stockage GUIDE DE D PANNAGE CAUSE PROBABLE ll y a des bulles d air dans l lectrode Faire tremper l lectrode pour liminer les bulles Le pH m tre donne des valeurs instables L lectrode est sale L lectrode n est pas immerg e L lectrode est cass e La r ponse de l lectrode est lente L lectrode est sale ou grasse SOLUTION Nettoyer l lectrode et la r talonner V rifier que l chantillon recouvre enti rement la pointe de l lectrode Remplacer l lectrode Nettoyer l lectrode et la r talonner L cran affiche un message d erreur S lection incorrecte du mode de fonctionnement V rifier le mode de fonctionnement s lectionn S lectionner une op ration valide L cran affiche un message d talonnage ou d erreur Il y a une erreur d talonnage R talonner le pH metre L talonnage de la valeur tampon est erron V rifier les valeurs tampons utilis es L lectrode est sale Nettoyer et talonner l lectrode Le pH m tre est allum sur ON mais il n y a pas de Les piles sont mal install es V rifier la polarit des pile
339. ue comment fonctionnent les r frig rateurs et cong lateurs compression Figure 56 Circuit de r frig ration Circuit de r frig ration Le circuit de base pr sent sur la figure 56 montre comment fonctionne un r frig rateur Sur le c t gauche on distingue les l ments suivants vaporateur condenseur compresseur d tendeur filtre et tubulures de raccordement Un gaz r frig rant circule dans chacun de ces l ments Sur le c t droit de la figure se trouve un graphe repr sentant la relation entre la temp rature T et l entropie S qui d montre le fonctionnement d un cycle de r frig ration id al Les num ros qui figurent sur le sch ma de gauche montrent les points des processus adiabatiques compression 1 2 et tranglement 3 4 et des processus impliqu s dans le transfert de chaleur entre l vaporateur et l enceinte r frig r e 4 1 et entre le condenseur et l ext rieur 2 3 Le cycle complet est repr sent par la s quence 1 2 3 4 1 Evaporateur Se compose d un r seau de tuyaux dans lesquels circule le gaz r frig rant Dans l vaporateur un processus de transfert de la chaleur Ql s effectue a pression constante Pour que le processus de r frig ration se produise l environnement refroidir doit tre entour par un syst me d isolation thermique Ce syst me vite que l nergie thermique ne p n tre dans la zone d influence de l vaporateur une vitesse gale celle d
340. uelle quantit de complexe antig ne anticorps est pr sente la fin du test 8 Alafin de la p riode d incubation on ajoute un r actif pour stopper la r action enzyme substrat et le changement de coloration Ce r actif est en g n ral un acide dilu 9 Enfin on lit la plaque l aide du lecteur de microplaques Les valeurs obtenues sont utilis es pour d terminer la quantit exacte ou la pr sence d antig nes ou d anticorps dans l chantillon Note Certains des puits sont utilis s pour les talons et les t moins Les talons permettent de d finir les valeurs seuils Les talons et les t moins contiennent des quantit s connues et sont utilis s pour mesurer la bonne ex cution du test en valuant les donn es obtenues par rapport aux concentrations connues pr sentes dans chaque t moin La proc dure d crite ci Laveur de J plaque ELISA J Incubateur Systeme de distribution ae eee ee een een TES S Ordinateur dessus est valable en g n ral mais il existe de fl nombreux tests ELISA pr sentant des variantes sp cifiques J Lecteur ELISA 1 Pour des explications plus d taill es se reporter la litt rature sp cialis e CONDITIONS REQUISES POUR L INSTALLATION Pour que le lecteur de microplaques fonctionne correctement il faut respecter les points suivants 1 Un environnement prop
341. uences recommand es par le fabricant Les proc dures de base qui peuvent tre effectu es en routine au laboratoire sont les suivantes 1 Nettoyer l ext rieur du spectrophotom tre y compris les boutons de commande et les crans ou cadrans On peut utiliser un chiffon en tissu fin comme du tissu mouchoirs humect avec de l eau distill e Inspecter et nettoyer le cable d alimentation lectrique 3 V rifier que la lampe est propre et en bon tat Si elle ne fonctionne pas la remplacer par une nouvelle lampe ayant les m mes caract ristiques que la lampe d origine Avec les spectrophotom tres modernes l tat de la lampe est d tect automatiquement par un logiciel de contr le de l tat et du fonctionnement des divers l ments de l appareil ce qui permet de savoir quand il est n cessaire de la changer Remplacer la lampe et faire les r glages comme apres tout remplacement selon les recommandations du fabricant 4 V rifier l tat du fusible de protection Avant d ouvrir le compartiment du fusible v rifier que le spectrophotom tre est teint puis v rifier que ses contacts sont propres et en bon tat Si n cessaire remplacer le fusible par un nouveau ayant les m mes caract ristiques que le fusible d origine en suivant les recommandations du fabricant 5 Mettre l appareil en configuration de fonctionnement 6 Mettre l interrupteur marche arr t sur ON et laisser chauffer l appareil pendant cinq 5 minut
342. uilibre Les acides lib rent en permanence des ions hydrog ne H et l organisme neutralise ou quilibre cette acidit en lib rant des ions bicarbonate HCO L quilibre acido basique est assur par les reins organes dans lesquels toute substance pr sente en exc s est limin e Le pH plasmatique est l un des param tres qui se modifient sous l effet de facteurs tels que l ge ou l tat de sant du patient Le tableau 1 pr sente les valeurs caract ristiques du pH de certains liquides biologiques Valeur du pH de certains liquides biologiques PHOTOGRAPHIE ET L MENTS D UN PH METRE Bras porte lectrode et lectrode Panneau de contr le avec touches de r glage de la temp rature de s lection du mode de fonctionnement veille mV pH et d talonnage Ecran affichage num rique PRINCIPES DE FONCTIONNEMENT Le pH m tre mesure la concentration d ions hydrog ne H au moyen d une lectrode sensible aux ions En th orie cette lectrode devrait r pondre uniquement en pr sence d un certain type d ion Mais dans la pratique il existe toujours des interactions ou des interf rences avec les autres types d ions pr sents dans la solution L lectrode de mesure du pH lectrode pH est en g n ral une lectrode combin e dans laquelle une lectrode de r f rence et une lectrode interne en verre sont int gr es dans une m me sonde La partie inf rieure de la sonde se compose d une ampoule de ver
343. un plan de travail propre sec et parfaitement horizontal loin de toute source de vapeurs pouvant nuire a son fonctionnement Il faut pr voir un espace libre autour de l appareil pour faciliter la ventilation et le passage des cables raccords et tuyaux reliant le diluteur aux r servoirs de solvants aux ordinateurs et aux syst mes de distribution L espace libre autour du diluteur doit tre d environ 10 cm Il doit y avoir une prise de courant 220 240 V 50 60 Hz en bon tat et reli e la terre ou 115 V 60 Hz selon les sp cifications du fabricant et ou les normes lectriques en vigueur dans le pays Tableau des calibres et volumes des seringues MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE Figure 24 Seringue et doseur Seringue A _ ee EE a a A SET ee I get POR AOL PAT AL HL 7 CALE CO il ANE FO 7 A aval Doseur ENTRETIEN DE ROUTINE L entretien de routine consiste essentiellement a liminer les contaminants qui pourraient s accumuler dans le m canisme et ou les tuyaux en contact avec les liquides manipul s Les t ches les plus courantes sont Nettoyage des surfaces ext rieures Fr quence une fois par jour Avertissement D brancher le diluteur de la prise de courant avant de commencer le nettoyage ext rieur 1 Nettoyer les surfaces ext rieures avec u
344. ur Elle poss de normalement des dispositifs de s curit qui emp chent de l ouvrir lorsque la cuve est sous pression Elle est galement munie de joints qui emp chent la vapeur de sortir de l appareil pendant le fonctionnement Les portes de l autoclave peuvent tre actionn es manuellement ou par un syst me lectrom canique Figure 32 Circuit de vapeur d un autoclave MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE 10 Ih Poign e de la porte Dispositif qui sur certains appareils permet l op rateur d ouvrir et de fermer la porte En g n ral les autoclaves de grand volume ont une porte actionn e par un dispositif motoris Cuve de st rilisation Aussi appel e chambre de st rilisation Espace o les objets ou mat riels st riliser sont d pos s Lorsque la porte est ferm e la cuve est isol e de l ext rieur Lorsque le processus de st rilisation est en cours l espace est occup par de la vapeur sous pression Tuyau d vacuation du liquide de condensation de la cuve Conduite qui permet de recueillir le liquide de condensation qui se forme dans la cuve de st rilisation par suite du transfert de chaleur entre la vapeur et les objets st riliser Thermom tre Instrument qui indique la temp rature laquelle le processus de st rilisation s effectue l int rieur de la cuve de l autoclave Tuyau d vacuation du liquide de condensation de la double enveloppe Conduite per
345. ur enlever la glace ou le givre de l vaporateur Cela pourrait perforer la paroi de l vaporateur et laisser chapper le gaz r frig rant ce qui occasionnerait une panne grave n cessitant l intervention d un technicien sp cialis MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE GUIDE DE D PANNAGE CAUSE PROBABLE MOJEGO Le fusible a saut V rifier le fusible L appareil est d branch V rifier le raccordement au secteur La prise de courant n est pas aliment e ou le courant Tester la connexion lectrique est insuffisant L appareil ne fonctionne pas V rifier l interrupteur principal coupe circuit Le cong lateur fonctionne en permanence mais ne refroidit pas Le thermostat est r gl trop haut V rifier le r glage du thermostat R gler le thermostat sur une temp rature plus basse L appareil contient trop de givre D givrer l appareil La temp rature de l appareil est fluctuante Le r glage de la temp rature n est pas talonn Etalonner la temp rature de fonctionnement selon la proc dure indiqu e par le fabricant Le condenseur est sale Nettoyer le condenseur selon la proc dure indiqu e pour l entretien de routine La temp rature de l appareil est trop lev e La porte est ouverte V rifier que la porte est bien ajust e et ferm e La fermeture de la porte n est pas tanche Mettre l appareil de niveau et ajuster la fermeture ou remplacer le
346. ur 65 quoi sert un distributeur 65 Principes de fonctionnement 67 Conditions requises pour le fonctionnement de l appareil 67 Guide de d pannage 68 D finitions 68 CHAPITRE 11 SPECTROPHOTOMETRE 69 Photographies de spectrophotom tres 69 quoi sert un spectrophotom tre 69 Principes de fonctionnement 69 El ments du spectrophotom tre 72 Conditions requises pour l installation 73 Entretien du spectrophotom tre 73 Bonnes pratiques d utilisation du spectrophotom tre 75 Guide de d pannage 77 D finitions 79 CHAPITRE 12 e AUTOCLAVE 81 Photographie d un autoclave 81 quoi sert un autoclave 81 Principes de fonctionnement 82 Utilisation de l autoclave 84 Conditions requises pour l installation 87 Entretien de routine 88 Maintenance des l ments sp cialis s 90 Guide de d pannage 91 D finitions 92 CHAPITRE 13 ETUVE 93 Photographies d tuves 93 quoi sert une tuve 93 Principes de fonctionnement 93 Conditions requises pour l installation 94 Utilisation de l tuve 94 Commandes de l tuve 95 Contr le de qualit 96 Entretien de routine 96 Guide de d pannage 97 D finitions 98 CHAPITRE 14 INCUBATEURS 99 Photographies d incubateurs 99 Principes de fonctionnement 99 Commandes de l incubateur 101 Conditions requises pour l installation 101 Entretien de routine et utilisation de l incubateur 101 Guide de d pannage 103 D finitions 104 TABLE DES MATI RES vi 000 CHAPITRE 15 e MICROSCOPE Photographies de mic
347. ur OFF UTILISATION DE L ANALYSEUR EN CHIMIE LIQUIDE Seul un personnel qualifi et autoris doit pouvoir utiliser l analyseur en chimie liquide La proc dure d crite ci dessous s applique a un analyseur portable semi automatique avec filtres int gr s et affichage num rique Pour les autres mod les se reporter au manuel d utilisation fourni par le fabricant 1 Brancher l appareil sur la prise de courant et l allumer 2 Le temps de chauffage s affiche en secondes 3 Pr parer sur un portoir toutes les solutions en tubes essais blanc talons solutions analyser Lorsque l appareil est pr t faire une mesure blanc Faire une mesure avec chacun des tubes essais Enregistrer les r sultats Selon le type d alimentation lectrique teindre l appareil en mettant l interrupteur sur OFF et le d brancher ou d connecter les bornes de la pile interrupteur sur OFF LOU ENTRETIEN COURANT DES ANALYSEURS DE CHIMIE Certains analyseurs de chimie n exigent qu un entretien minimal et effectuent automatiquement des proc dures d auto talonnage On trouvera ci dessous des proc dures g n rales applicables la plupart des analyseurs de chimie Pour l talonnage les contr les p riodiques et la maintenance de l analyseur utilis au laboratoire toujours suivre les instructions du fabricant Fr quence une fois par jour 1 Toute claboussure sur l appareil ou proximit doit tre imm diatement nett
348. ur et accessoires 10 11 Levier de remplissage Levier m canique actionn la main pour aspirer le liquide dans le r servoir de l adaptateur Bouton d jection M canisme qui lib re l l ment doseur adaptateur de la t te du distributeur Raccord du distributeur Dispositif permettant de raccorder l l ment doseur la t te du distributeur Il se compose d un syst me de joints et de coulisses pour assurer un ajustement parfait Echelle de dosage Elle indique le volume maximal qui peut tre d livr avec l adaptateur s lectionn Dans certains cas elle indique galement le volume restant Adaptateur du distributeur r servoir R cipient qui re oit la solution aspir e ou d livr e lors des cycles de distribution Il en existe de nombreuses variantes selon le mod le de distributeur l adaptateur peut tre unique ou combin avec des embouts appropri s Embout de distribution Facilite la distribution ou l aspiration de solutions L embout est situ l extr mit de l adaptateur du distributeur Sans embout il est impossible d utiliser le distributeur Interrupteur marche arr t ON OFF Non repr sent sur la figure Un compartiment pour piles Non repr sent sur la figure Accessoires Pour effectuer certaines t ches avec le distributeur des accessoires appropri s sont n cessaires La figure ci dessous montre des exemples d adaptateurs Adaptateurs et embouts Distributeur
349. ur la figure 2 La figure 3 montre les diff rents types de puits les plus couramment trouv s sur les microplaques Chaque type de puits convient pour un type particulier de test Proc dure de lavage Le lavage de la microplaque constitue l une des tapes de la technique ELISA On utilise pour cela des solutions sp ciales Parmi les solutions les plus couramment employ es figure la solution tamponn e au phosphate ou PBS Elle est stable pendant 2 mois si on la conserve a 4 C On estime qu il faut 1 a 3 litres de solution pour laver une microplaque a raison de 300 ul par puits et par cycle de lavage Le lavage peut tre fait manuellement mais il est pr f rable d utiliser un laveur automatis pour obtenir un meilleur rendement et pour r duire au minimum la manipulation de produits potentiellement contamin s Il existe diverses proc dures de lavage selon les mod les de laveurs o Aspiration du haut vers le bas Lorsque la phase d aspiration commence les aiguilles se d placent verticalement et l aspiration commence d s qu elles entrent en contact avec le liquide aspiration se poursuit jusqu ce que les aiguilles atteignent leur position la plus basse pr s du fond des puits Elles sont alors stopp es pour viter d aspirer l air qui se d place le long des parois internes des puits Ce type d aspiration emp che le courant d air de dess cher les prot ines li es la surface des puits a 09 Pompes
350. ures de travail vont de 10 C 75 C ou un peu plus Certains incubateurs ont un syst me PHOTOGRAPHIE D UN INCUBATEURS Incubateur standard Photo avec l aimable autorisation de Cole Parmer Instrument Co Incubateur ana robie MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE d injection de CO pour obtenir des conditions favorables au d veloppement de diverses esp ces de micro organismes et de cultures cellulaires PRINCIPES DE FONCTIONNEMENT Lincubateur utilise divers moyens de transfert de la chaleur et de contr le de l environnement de fa on obtenir les conditions requises pour des techniques de laboratoire sp cialis es Il poss de en g n ral un syst me de r sistances lectriques contr l par thermostat ou par microprocesseur En ce qui concerne les syst mes de transfert de la chaleur les incubateurs utilisent la conduction ou la convection naturelle ou forc e Conduction thermique Dans les incubateurs qui fonctionnent par conduction thermique des r sistances lectriques transf rent directement la chaleur vers les parois de l enceinte d incubation ou sont d pos s les chantillons Les r sistances constituent une r gion de haute temp rature et l enceinte une r gion de basse temp rature Le transfert d nergie thermique se fait toujours du corps le plus chaud vers le corps le plus froid selon la loi de Fourier exprim e par la formule q ou ox dans laquelle q qua
351. urrait le rendre perm able et fausser les r sultats MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE 75 CHAPITRE 11 SPECTROPHOTOMETRE 76 Nettoyer soigneusement les cuves en verre apr s usage Jeter celles qui sont ray es sur la face transparente Utiliser des r actifs de qualit sup rieure Les r actifs de basse qualit peuvent provoquer une contamination m me tr s faible concentration Les diluants utilis s eau et solvants ne doivent pas contenir d impuret s V rifier que les chantillons ou les talons ne d gazent pas l int rieur des cuves Ce ph nom ne produit des bulles la surface interne des cuves et entra ne des erreurs de lecture 10 Tenir compte du fait que toutes les substances n ob issent pas la loi de Beer Effectuer des tests de lin arit sur l intervalle de concentrations qui sera utilis Il est recommand de pr parer une s rie de solutions talons connues de forte concentration et de v rifier les r sultats Les ph nom nes qui influent sur la loi de Beer sont les suivants a Concentration lev e par association mol culaire d esp ces ioniques b Variation du degr d hydratation aux faibles concentrations modifiant la nature des ions complexes c Pour les absorptions qui ne r pondent pas la loi de Beer il faut tablir une repr sentation graphique des r sultats obtenus avec des talons connus On aura ainsi une indication de la
352. us lev e tout ne peut pas tre st rilis par la chaleur humide Pour les En contr lant la pression de la vapeur d eau l autoclave peut l ments craignant la chaleur et l humidit d autres m thodes dans sa cuve herm tique atteindre des temp ratures d passant de st rilisation ont t labor es Au laboratoire on utilise les 100 C inversement en contr lant la temp rature il peut autoclaves vapeur et les tuves fonctionnant la chaleur atteindre des pressions sup rieures la pression atmosph rique s che en l absence d humidit Voir le chapitre 13 Etuve Les graphiques ci dessous montrent le comportement de l eau dans diverses conditions de temp rature et de pression Courbe temp rature volume Courbe pression temp rature Point Courbe de fusion critique Phase liquide Point critique HA Phase solide Pressure Courbe de 7 vapeur satur e Temp rature L C Phase vapeur F Courbe de liquide satur Courbe de sublimation Temp rature Volume 1 Ce graphique montre deux courbes d finies la courbe de liquide satur 1 Ce graphique montre le comportement de l eau et les relations entre les courbe de gauche et la courbe de vapeur satur e courbe de droite phases solide liquide et gazeuse selon les conditions de temp rature et de pression 2 Lorsque la pression augmente la temp rature augmente aussi V
353. us pour enlever la glace ou le givre de l vaporateur Cela pourrait perforer la paroi de l vaporateur et laisser chapper le gaz r frig rant ce qui occasionnerait une panne grave n cessitant l intervention d un technicien sp cialis Entretien de la pile du syst me d alarme Fr quence tous les deux ou trois ans environ La pile du syst me d alarme doit tre chang e lorsqu elle est us e Pour la remplacer proc der comme suit 1 Enleverle panneau avant En g n ral la ou les piles sont situ es juste derri re le panneau avant 2 D connecter les bornes de la pile Enlever la pile us e 4 Installer une nouvelle pile ayant les m mes caract ristiques que la pile d origine Reconnecter les bornes 6 Remettre le panneau avant a MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE 139 CHAPITRE 18 R FRIG RATEURS ET CONG LATEURS GUIDE DE D PANNAGE CAUSE PROBABLE iO RUN ETO Le t moin Saas tension insuffisante est allum La prise de courant d livre une tension insuffisante V rifier la tension d alimentation Tester la connexion et ses dispositifs de s curit Le t moin de filtre sale est allum V rifier la propret du filtre Nettoyer le filtre de protection du condenseur S il est encrass le remplacer par un autre ayant les m mes caract ristiques que le filtre d origine Le t moin de batterie faible est allum La pile est us e Remplacer la pile par
354. utoclaves ceux ci peuvent se classer en mod les manuels semi automatiques ou enti rement automatiques 1 La Food and Drug Administration FDA classe la st rilit d un article en se basant sur des tudes statistiques Un article est consid r comme st rile si la probabilit de le rencontrer sous forme non st rile dans une s rie d articles soumis au m me processus de st rilisation est inf rieure un sur un million Cet indice est appel Sterility Assurance Level SAL et d crit le potentiel th orique d inactivation microbienne au cours d un processus de st rilisation 81 CHAPITRE 12 AUTOCLAVES PRINCIPES DE FONCTIONNEMENT Les autoclaves utilisent les propri t s thermodynamiques de Les autoclaves utilisent la vapeur satur e sous pression avec l eau qui peut tre consid r e comme une substance pure un titre en vapeur sup rieur 98 pour transmettre de Dans les conditions normales au niveau de la mer et sous l nergie thermique aux l ments st riliser Cette m thode est une pression de 1 atmosph re l eau en phase liquide bout g n ralement appel e st rilisation par la vapeur ou st rilisation et se transforme en vapeur phase gazeuse 100 C Si la par la chaleur humide Cette m thode est principalement utilis e pression diminue l eau bout une temp rature plus basse Si pour son efficacit sa rapidit et son faible co t Cependant la pression augmente elle bout une temp rature pl
355. uver des d fauts ou des impuret s qui pourraient interf rer avec le processus de st rilisation C est une op ration tr s importante pour laquelle on peut s aider d une loupe afin de distinguer des d tails tr s fins Nettoyage Elimination m canique de toutes les mati res trang res situ es la surface d objets inanim s en g n ral le nettoyage implique l utilisation d eau propre associ e un d tergent Il s agit d une proc dure de base r aliser avant de soumettre les objets leurs processus de st rilisation respectifs Le nettoyage peut tre fait la main ou par des m thodes automatis es Il faut savoir que le nettoyage ne d truit pas les micro organismes mais r duit seulement leur nombre Pascal Pa Unit de pression dans le syst me international d unit s qui correspond une force d un Newton N s exer ant sur un 1 m tre carr _IN m Pa Pi ge vapeur Dispositif destin r duire le passage de la vapeur et permettre le passage du liquide de condensation St rilisation Ensemble d op rations par lesquelles toutes les formes de vie sont d truites y compris les spores sur des objets inanim s au moyen de m thodes physiques chimiques et gazeuses Titre en vapeur Propri t thermodynamique identifi e en g n ral par la lettre X et d finie comme la relation entre la masse de vapeur et la masse totale dans des conditions satur es L tuve est utilis e au laborato
356. ver pour la sortir de ses gonds 2 Enlever les vis de fixation des charni res d fectueuses 3 Enlever la ou les charni res d fectueuses 4 Mettre la ou les nouvelles charni res en place et les fixer a l aide des vis de fixation 5 Remettre la porte en place 8 Remettre le capot de protection en place GUIDE DE DEPANNAGE CAUSE PROBABLE OJR OELLO L tuve n est pas aliment e en lectricit La temp rature est de temps en temps trop lev e L cran affiche le message Open ouvert Le circuit du thermocouple est ouvert V rifier la connexion du thermocouple ou remplacer le thermocouple L tuve pr sente des erreurs de chauffage Temp rature plus basse que la temp rature Changer la temp rature s lectionn e Attendre que s lectionn e la temp rature atteigne la valeur s lectionn e 97 CHAPITRE 13 TUVE 98 DAANEN Chaleur Forme d nergie transf r e d un syst me se trouvant une temp rature donn e un autre syst me se trouvant une temp rature plus basse du fait de la diff rence de temp rature entre les deux Lorsqu un syst me de masse lev e M est mis en contact avec un autre syst me de masse faible m se trouvant une temp rature diff rente la temp rature r sultante est proche de la temp rature initiale du syst me ayant la masse la plus lev e On dit alors qu une quantit de chaleur AQ a t transf r e du syst me ayant la temp rature la plus
357. vibration l int rieur de l enceinte pendant son fonctionnement 7 Test de protection du personnel du produit et tests biologiques de contamination crois e Ce test d termine si des a rosols sont pr sents dans l enceinte si des contaminants ext rieurs atteignent le plan de travail et si l enceinte r duit le taux d a rosols 8 Test de stabilit D termine si la structure de l enceinte est stable Analyse la r sistance aux chocs lat raux la distorsion sous l effet d une force au gauchissement et l inclinaison du plan de travail sous l effet d une charge 9 Test de vitesse du flux vertical D termine la vitesse de l air qui se d place verticalement vers le plan de travail 10 Test de vitesse du flux entrant D termine la vitesse laquelle l air entre dans l enceinte par l ouverture frontale et le volume d vacuation de l enceinte 11 Test avec fumig ne D termine si le flux d air le long du p rim tre de l ouverture frontale se dirige vers l enceinte et si le flux vertical descendant ne montre pas de lacunes ou de reflux vers le plan de travail 12 Test de drainage D finit la capacit du bac de r tention des claboussures situ sous le plan de travail 13 Test de fonctionnement du syst me moteur ventilateur D termine si le syst me fournit la pression statique n cessaire 14 Test du syst me lectrique D termine s il existe un risque potentiel de d charge lectrique Mesure le courant
358. visser et si l chelle indique moins que 100 tourner la vis dans le sens contraire des aiguilles d une montre d visser R p ter l op ration jusqu ce que la balance soit r gl e z ro et sensibilit 23 CHAPITRE 4 BALANCES 24 4 V rifier la but e du plateau Elle est mont e sur une tige filet e qui vient au contact du plateau afin de l emp cher d osciller lorsque la balance est bloqu e En cas de d s quilibre il faut tourner l g rement cet axe jusqu ce que la distance entre la but e et le plateau soit gale z ro lorsque la balance est bloqu e Entretien de la balance m canique L entretien des balances m caniques se limite aux op rations suivantes Fr quence une fois par jour V rifier le niveau V rifier le z ro V rifier le r glage de sensibilit Nettoyer le plateau de pes e oe SS Fr quence une fois par an 1 Etalonner la balance et enregistrer la proc dure par crit 2 D monter et nettoyer les composants internes Suivre la proc dure indiqu e par le fabricant ou s adresser une entreprise sp cialis e Balances lectroniques Les balances lectroniques poss dent trois l ments de base 1 Un plateau de pes e L objet peser qui est d pos sur le plateau exerce une pression r partie de fa on al atoire sur toute la surface de ce plateau Par un m canisme de transfert leviers supports guides la charge se trouve concentr e en une fo
359. volume g n ralement exprim e en grammes par cm Lorsque la masse volumique d un corps est rapport e celle de l eau on obtient la densit exprim e en valeur absolue D V Radian Unit de mesure angulaire gale l angle qui sous tend un arc de cercle de longueur gale au rayon du cercle Il est exprim par le quotient de la longueur de l arc que sous tend un angle ayant sa pointe au centre du cercle par le rayon de ce cercle Rev tement anodis Couche mince et dure d oxyde d aluminium d pos e sur la surface du rotor par un proc d lectrochimique afin d emp cher la corrosion Le rev tement re oit souvent une finition en diverses couleurs R sonance Situation dans laquelle un syst me m canique vibre en r ponse une force appliqu e la fr quence naturelle du syst me Sedimentation Ph nom ne par lequel les particules d une suspension tombent au fond du milieu sous l effet de la pesanteur Pendant la centrifugation ce processus est acc l r et les particules se d placent en S loignant de l axe de rotation S paration isopycnique M thode de s paration des particules bas e sur leur densit de flottation II s agit d une s dimentation l quilibre La vitesse d une particule due une diff rence de densit est donn e par la formule d p V iSu xg dans laquelle v vitesse de s dimentation dr dt d diametre de la particule p masse volumique de la particule p
360. xacts et fiables il est n cessaire que les op rateurs connaissent en d tail les proc dures correctes de pipetage Ils doivent pour cela suivre une formation puis une mise a jour r guli re de leurs connaissances sur l utilisation des pipettes On trouvera ci dessous un aper u g n ral de l utilisation appropri e des pipettes Avertissement Avant d utiliser une pipette v rifier qu elle est correctement talonn e et qu elle convient pour transf rer le volume de liquide envisag Recommandations g n rales 1 V rifier que la pipette est en position verticale pour aspirer un liquide Cette position garantit l absence d incertitude due de petites variations de la surface du liquide 2 Suivreles recommandations du fabricant pour la profondeur minimale laquelle la pointe doit tre immerg e pour aspirer des liquides Cette profondeur varie selon le type et la capacit de la pipette Le tableau ci dessous donne des indications g n rales ce sujet Profondeur d immersion de la pointe selon la plage de volume de la pipette Plage de volume de la pipette ul Profondeur d immersion mm 100 1000 1 000 5000 1 Blues J Bayliss D Buckley M The calibration and use of piston pipette UK National Physical Laboratory Teddington Middlesex 2004 page 6 www npl co uk Figure 52 Etapes de l utilisation d une pipette 3 Pour une meilleure justesse du pipetage humidifier les pointes des pipet
361. xpos une humidit excessive Plus l environnement est sec moins on risque de voir se d velopper des moisissures La housse peut tre en plastique ou en tissu fin et non pelucheux comme du tissu mouchoirs 10 Dans les zones tr s humides placer le microscope dans une bo te ou un placard clair par une ampoule de 40 W au maximum pendant la nuit Cela permet d viter l humidit et le d veloppement de moisissures Si on choisit cette solution il faut v rifier que des trous d a ration sont pr vus pour que l air puisse circuler l int rieur Proc dures de nettoyage Le nettoyage du microscope est l une des op rations de routine les plus importantes et doit tre consid r comme indispensable Le mat riel suivant est n cessaire 1 Un chiffon propre en tissu fin comme du tissu mouchoirs 2 Un flacon de solution de nettoyage pour lentilles de microscope que l on peut se procurer chez un opticien Normalement cette solution n alt re pas le rev tement protecteur des lentilles ni les adh sifs ou colles utilis s pour le montage L ther et le xylene figurent parmi les liquides de nettoyage les plus utilis s Avertissement Certains fabricants d conseillent l alcool ou l ac tone qui pourraient dissoudre les adh sifs et les colles servant au montage des lentilles MANUEL D ENTRETIEN ET DE MAINTENANCE DES APPAREILS DE LABORATOIRE 111 CHAPITRE 15 MICROSCOPE 112 3 Papier optique On peut n
362. yer avec un solvant appropri ou un d tergent doux en solution Consulter les recommandations du fabricant sur la compatibilit de la pipette avec les solvants afin de choisir celui qui convient 2 St riliser la pipette selon les instructions du fabricant Certaines pipettes peuvent tre st rilis es en autoclave avec un cycle de 121 C pendant 20 minutes environ Certaines devront tre d mont es pour permettre la vapeur d entrer en contact avec les l ments internes Pour le d montage il faut d gager et d visser le corps central de la pipette selon le mode d emploi indiqu par le fabricant Pour d monter ou remonter certaines pipettes il faut utiliser un jeu d outils cl s fourni par le fabricant au moment de l achat de la pipette Apr s le cycle de st rilisation attendre que la pipette soit revenue la temp rature ambiante pour la remonter Il faut aussi v rifier que les l ments sont secs Certains fabricants recommandent de st riliser les pipettes avec une solution d isopropanol 60 laver les l ments l eau distill e les s cher et les remonter 3 Si une pipette a t utilis e avec des substances dangereuses l utilisateur doit s assurer qu elle est enti rement d contamin e avant d tre utilis e pour d autres manipulations ou d tre sortie du laboratoire Il est conseill de pr parer sans tarder un rapport indiquant la marque le mod le et le num ro de s rie de la pipette les su
363. ysb edu facilities ehs lab cs shtml 6 Suivre les recommandations concernant la r duction de la vitesse de rotation lorsqu on travaille avec des solutions de densit lev e dans des tubes en acier inoxydable ou des adaptateurs en plastique Les fabricants fournissent les informations n cessaires 7 En cas de travail fr quent avec des solutions salines utiliser des rotors en titane 8 Prot ger le rev tement du rotor pour viter de d t riorer la base m tallique Ne pas utiliser de d tergents alcalins ou des solutions de nettoyage qui pourraient endommager le film protecteur Les rotors qui sont g n ralement en aluminium sont recouverts d une couche d aluminium anodis qui protege leur structure m tallique 9 Utiliser des brosses en plastique pour nettoyer les rotors Les brosses m talliques rayent le rev tement protecteur ce qui cr e des points de corrosion Celle ci est acc l r e dans les conditions de fonctionnement et abr ge la dur e de vie op rationnelle du rotor 10 En cas de projections de substances corrosives laver imm diatement le rotor 11 S cher le rotor l air apr s l avoir nettoy et rinc l eau 12 Stocker les rotors tubes verticaux et quasi verticaux t te en bas et sans couvercle 13 Stocker les rotors dans un lieu sec Eviter de les laisser dans la centrifugeuse 14 Stocker les rotors godets oscillants sans les couvercles 15 Lubrifier les joints h lico daux et l
364. z r frig rant Comme la temp rature du r frig rant est sup rieure la temp rature ambiante Ta il se produit un transfert de chaleur Qh du r frig rant vers l environnement pression constante Pour faciliter le transfert de chaleur les tuyaux du condenseur ont de fines ailettes qui augmentent la surface d change A mesure qu il perd de la chaleur Qh par transfert le r frig rant retourne l tat de liquide satur jusqu ce qu il atteigne le point 3 ou il p n tre dans le d tendeur D tendeur En faisant circuler le r frig rant de mani re contr l e le d tendeur oppose une r sistance au passage du r frig rant pour viter tout transfert de chaleur par un processus adiabatique La pression dans le d tendeur est donc tr s fortement r duite au point 4 Un filtre est en g n ral mont la sortie du d tendeur Certains fabricants remplacent le d tendeur par un tube capillaire qui a un effet d tranglement quivalent sur le passage du gaz r frig rant Filtre Retient l humidit et les impuret s qui pourraient se trouver dans le r frig rant A la sortie du filtre le syst me est nouveau connect l vaporateur au point 4 et le cycle ci dessus se r p te Collecteur de liquide El ment mont par certains fabricants avant l entr e du r frig rant dans le compresseur Il sert retenir toute partie du r frig rant encore en phase liquide pour assurer que seule la phase vapeur p n

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