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Informations sur la mesure de volumes

1. Des mesures effectu es avec de l eau ont permis de consta ter qu en raison du mouillage r siduel le volume vacu est r duit d une valeur correspon dant peu pr s la limite d er reur de l prouvette gradu e Condition le liquide est vacu lentement et d une seule traite et pour l coulement du liquide restant l prouvette est tenue inclin e pendant 30 s Eprouvettes bouch es Tout comme les prouvettes gradu es les prouvettes bouch es sont calibr es pour contenir In Elles poss dent de plus un col rod et un bouchon Les prouvettes bouch es peuvent tre utilis es comme les fioles jaug es pour r aliser des solutions standard et des dilutions M Suite la mesure par exemple de diff rentes quantit s de liquides ces derniers peuvent tre direc tement agit s et m lang s dans l prouvette bouch e Remarque Lors du m lange de deux li quides il se peut que le volume change BRAND Appareils de volum trie en verre Maniement Maniement des burettes Les burettes sont des appareils de volum trie en verre calibr s pour couler Ex qui servent pour le titrage appliqu l analyse talon Remarque concernant le temps d attente Contrairement aux pipettes les burettes ne sont dans la pratique pas utilis es de la m me mani re que lors du calibrage Habituel lement un volume inf rieur au volume nominal est utilis pour
2. Evacuation Dans le cas de pipettes cali br es pour contenir In tourner la molette de r glage vers l avant jusqu ce que le liquide soit vacu Rincer au moins 3 fois la pipette avec la solution diluante Dans le cas de pipettes cali br es pour coulement Ex pour coulement libre appuyer sur le bouton d a ration jusqu ce que le liquide soit coul tout en respectant le temps d attente si applicable o Appareils Liquid Handling Travailler avec des appareils Liquid Handling Les exigences de plus en plus s v res quant la qualit des r sultats d analyses et l augmentation des chantillons analyser dans les laboratoires exigent des appareils de mesure qui permettent de r aliser les travaux de routine dans la pr paration d chantillons le plus efficacement possible Pour r pondre ces n cessit s les fabricants de mat riel de laboratoire ont d velopp les appareils Liquid Handling representant le perfectionnement des appareils de volum trie en verre et en mati re plastique et permettant un travail rationnel avec un maximum de pr cision et de confort de manipulation Les appareils de Liquid Handling des diff rents fabricants fonctionnent presque tous selon un principe similaire mais en fonction du fabricant il existe des diff rences parfois importantes au niveau des d tails de la construction et des mat riaux utilis s Pour l explication du principe de fonctionnement et
3. de calibrage d usine Les cer tificats de qualit sont de tels certificats Tous les r sultats de contr le sont document s et archiv s pendant 7 ans au minimum ainsi si l on conna t le num ro de lot ou bien le num ro de s rie il est possible de recourir a chaque instant a des resul tats individuels du moment de la fabrication De par le fait que BRAND est fabricant d appa reils de volum trie marquage DE M l assurance de la qualit BRAND ainsi que la qualit de ses produits sont surveill es par le bureau de v rification des poids et mesures alle mand Ainsi les exigences sont satistaites en ce qui concerne la surveillance des moyens de contr le et sa tra abilit par raccordement aux talons nationaux ainsi que la qualifica tion du personnel Nettoyage Le nettoyage des appareils de laboratoire Nettoyage la main et en machine Les appareils de laboratoire en verre ou mati re plastique peuvent tre nettoy s la mains dans un bain selon la m thode de trempage ou en machine laver de laboratoire On devrait nettoyer les appareils de laboratoire juste apr s leur emploi basse temp rature pen dant une courte dur e et avec un produit l g rement alcalin Les appareils de laboratoire ayant t en contact avec des substances infectieuses sont tout d abord d sinfect s avant d tre nettoy s puis le cas ch ant st rilis s l autoclave Ce n est que de cette fa on que
4. es avec davantage de doigt Une soupape antiretour incorpor e offre en combinaison avec Maniement Le pipetage est command au moyen de deux grands boutons de fonction A Aspiration Appuyer sur le bouton de pipetage sup rieur pour aspirer le liquide pipet ter La vitesse d aspiration augmente continuellement mesure que l on pousse le bouton dans l appareils V Evacuation La vitesse d vacuation augmente continuellement mesure que l on pousse le bouton dans l appareil s lectionner coulement libre ou vacuation par soufflage avec support du moteur vacuation du liquide coulement libre ou par soufflage On fait le choix entre les deux modes de vacuation selon l application Au laboratoire analytique par exemple on travaille principalement dans le mode coulement libre pour obtenir l exactitude n cessaire des volumes pipetter Afin d obtenir l exactitude indiqu e sur la pipette l coulement li bre du milieu est indispensable tout en respectant les temps d coulement et d attente BRAND Par contre dans le domaine de la microbiologie l exacti tude de volume est de moindre importance Dans ce cas c est la mesure uniforme et rapide de solutions de cultures etc qui est primordiale C est pourquoi on pr f re dans ce domaine d application travailler dans le mode vacuation par soufflage Il est interdit de pipetter la bouche ou avec un tuyau
5. l aide d une cr maill re ou s engr ne un pignon pas pas en combinaison avec les pointes d placement direct Pour cette raison ces appareils ne permet tent qu un nombre d termin d op rations de distribution clairement d finies Il n est pas Distributeurs r p tition m caniq par ex le HandyStep de BRAND BRAND possible d ajuster des volumes interm diaires Le principal avantage de ces appareils est leur construction robuste le d savantage est souvent la fatigue due aux efforts musculaires Le principe de fonctionne ment prouv du distributeur r p tition est galement le d placement positif Les milieux probl matiques comme par ex les solutions haute pression de vapeur de viscosit lev e ou les milieux moussants ne repr sentent aucun probl me pour le distributeur r p tition En fonction de la gamme de volume souhait le distributeur r p tition peut tre utilis avec les pointes DD tips d placement direct de diff rentes capacit s Le distributeur r p tition simplifie le pipetage en s rie en va cuant en plusieurs fractions de volume un liquide pr alablement aspir En fonction de la capacit des pointes DD tips utilis es qui varient entre 2 ul et 5 ml jusqu 49 op rations de pipetage peuvent tre r alis es sans remplir l appareil a nouveau Ces donn es sont calcul es partir de la position ajust e du b
6. nisque s immobilise Pour vacuer le liquide d placer le levier de pipetage compl te ment vers le bas Pour garantir le respect de l exactitude de la classe A ne pas souffler le liquide restant Auxiliaire de pipetage standard classique pour les pipettes jaug es et les pipettes gradu es Maniement 1 introduire la pipette 2 Presser sur A et compri mer la poire tablir une d pression 3 Presser sur S et aspirer le liquide jusque l g rement au dessus du trait souhait 4 En pressant sur E laisser le liquide s couler jusqu au trait souhait ou bien va cuer la pipette Soufflage Pour le soufflage de liquides visqueux il faut comprimer la petite poire l ouverture lat rale tant obtur e Soufflage Souvent les pointes de pipettes ne se vident pas enti rement lors du pipetage de liquides visqueux par coulement libre Dans ce cas vacuer le liquide restant en appuyant sur la bulle en caoutchouc de l auxiliaire de pipetage macro Attention Ne pas conserver la poire l tat comprim ne pas aspirer de liquide BRAND A Appareils de volum trie en verre Auxiliaires de pipetage Auxiliaires de pipetage manuels pour pipettes de petits volumes jusqu 1 ml Pour ces pipettes des auxiliaires de pipetage sp ciaux ont t mis au point Ils sont utilis s entre autres dans le domaine m di cal en combinaison avec des pipettes capillaires des pip
7. rature du liquide d essai Placer une nouvelle pointe de pipette Conditionner la pipette aspirer le liquide d essai cing fois et l vacuer Ce proc d augmente l exactitude du contr le Pr rincer une fois la pointe de pipette Placer le r cipient pes e sur la balance et la remettre z ro Enlever le r cipient pes e de la balance Evacuer l chantillon dans le r cipient pes e Ce faisant vider totalement la pointe de pipette l aide de la surcourse Placer le r cipient pes e sur la balance prendre note de la valeur obtenue de la pes e Remettre la balance z ro R p ter les n 2 9 dix fois et inscrire les valeurs obtenues des pes es de 100 50 et 10 du volume nominal au proc s verbal d essai Valeurs du contr le gravim trique Les valeurs obtenues des pe 21 5 C Z 1 0032 s es lors du contr le gravim Volume contr l ul 200 0000 trique ne sont que des valeurs Valeur vraie mg 199 3620 de masse du volume pipette x 200 2000 Pour obtenir le volume r el x 199 6000 il est n cessaire d effectuer X 199 4900 une correction qui tient en x 199 7000 comptelatemp rature voir ci x 199 7000 dessous Des instructions de X 199 2900 contr le d taill es pour tous x 199 3500 les appareils de volumetrie de x 199 4100 BRAND peuvent tre t l x 199 2000 charg es sur www brand de x 199 1900 o 2 Calculer l exactitude Extrait de la
8. toutes les pi ces tant d ball es Essai de fonctionnement 1 Placer une nouvelle pointe de pipette 2 Pr rincer une fois la pointe de pipette avec le liquide d essai eau distill e d ionis e 3 La pointe de pipette tant remplie tenir l appareil verticale ment et observer environ 10 sec s il se forme une goutte au bout de la pointe de pipette Ce faisant veiller ce que la pointe ne s chautte pas par ex sous l effet du soleil ou d autres facteurs similaires Ensuite vacuer le liquide d essai Pour les petits volumes inf rieurs environ 50 ul la forma tion de gouttes est emp ch e ceci m me en cas de perte d tanch it tension superficielle Un petit conseil Evacuer une petite goutte de la pointe remplie de mani re a ce qu un petit coussin d air bulle d air se forme en bas Si le coussin d air descend il y a un d faut d tanch it 1 Calculer le volume moyen Le calcul se r alise en multipliant la valeur moyenne des valeurs obtenues des pes es X par le facteur Z ul mg qui tient en compte la densit de l eau la temp rature du contr le et la pres sion atmosph rique Z se monte 1 0032 ul mg se r f rant 21 5 C et 1013 mbar hPa lt I Il xI N X X X X Il S N n 200 2 199 6 199 49 199 19 D lt I 1 0032 V 199 513 1 0032 V 200 1514 BRAND Contr le gravim trique D terminer la temp
9. de l utilisation d appareils Liquid Handling voici a titre d exemple la description de quelques appareils de BRAND Distributeur Distributeur Burette Pipette coussin Pipette coussin adaptable sur flacon adaptable sur flacon adaptable sur flacon d air un canal d air multicanaux Dispensette seripettor Titrette Transferpette S Transferpette S 8 12 m canique m canique Pipette coussin Pipette coussin Pipette d place Distributeur Distributeur d air un canal d air multicanaux ment positif r p tition r p tition Transferpette electronic Transferpette 8 12 Transferpettor HandyStep HandyStep electronic electronic m canique BRAND T 7 Appareils Liquid Handling Distribution Distribution avec des distributeurs adaptables sur flacon Qu est ce qu on entend par distribution Par distribution on entend la mesure de quantit s d finies Pour la distribution simple rapide et pr cis de r actifs on utilise fr quemment des distributeurs adap tables sur flacon qui s adaptent directement ou a l aide d adaptateurs sur les flacons de r actif cou rants De ce fait le transvasement de produits chimiques n est plus n cessaire ce qui rend le travail nettement plus facile en particulier la distribution en s rie substitution des prouvettes gradu es Principe commun du fonctionnement des distributeurs adaptables sur flacon En d pla ant
10. des d chets galement respecter les r gles techniques g n ralement admises comme par ex les normes DIN ou ISO etc Quelques conseils importants concernant la s curit M Avant d utiliser un appareil de laboratoire l utilisateur doit v rifier que celui ci est bien appropri pour cette application et en contr ler le bon fonctionnement M Toujours saisir une pipette pr s de l extr mit du tube d aspiration et la pousser avec pr caution dans l adap tateur de l aide de pipetage jusqu ce qu elle soit bien fix e Ne pas forcer Le verre bris peut provoquer des blessures Avant une r utilisation contr ler si l appareil a t endommag Cette mesure est particuli rement im portante pour les appareils fonctionnant sous vide ou sous pression dessicateurs par ex flacons vide ou autres Un appareil de laboratoire d fectueux repr sente un danger ne pas souses timer coupures par ex br lures par acide ou risque d infection Au cas o une r paration conforme aux r gles ne serait pas rentable ou serait impossible il fau dra l liminer correctement Quelques remarques pour l utilisation Lorsqu on travaille avec du verre il faut tenir compte des limi tes de ce mat riau sous l influence de chocs thermiques ou de contraintes m caniques et suivre des mesures de s curit tr s strictes M Ne pas chauffer des appa reils de volum trie comme par ex eprouvette
11. du liquide par ex le Transferpettor de BRAND Domaines d application Les milieux de viscosit lev e comme par ex les solutions prot iques tr s concentr es les huiles les r sines ou les graisses Les capillaires ou bien les poin tes n ont pas besoin d tre jet s apr s chaque op ration de pipetage tant donn que le mouillage r siduel est minime et peut tre n glig en r gle g n rale Toutefois dans le cas o aucun entra nement de liquide n est admissible par ex avec des milieux infectieux ou radioactifs il est recommand d utiliser une pipette coussin d air pour le travail avec des pointes usage unique Les milieux haute pression de vapeur comme par ex les alcools les thers et les hydro carbures Maniement analogue des pipettes coussin d air R glage du volume R gler sur le volume souhait en tournant le bouton de pipe tage Aspiration Enfoncer le bouton de pipe tage et le piston jusqu la but e plonger la pointe dans le milieu et aspirer le milieu en laissant revenir lentement le bouton de pipetage Avantage Un maximum de pr cision et un travail rapide Les pointes ou bien capillaires peuvent tre utilis s plusieurs fois La lecture du m nisque n est plus n cessaire lors du pipetage Les milieux ayant tendance mousser comme par ex les solutions tensio actives Evacuation Appuyer la pointe le capillaire contre
12. jusqu quel point les valeurs mesur es s approchent de la valeur nominale c est dire elle indique l erreur syst matique L exactitude est la diff rence entre la valeur moyenne V etla valeur nominale V omina se r f rant la valeur nominale en Coefficient de variation CV Le coefficient de variation CV indique jusqu a quel point les valeurs mesur es individuelles s approchent les unes des autres c est dire il indique l erreur al atoire Le coefficient de varia tion est d fini comme cart type en se r f rant a la valeur moyenne Q 2 SV 3 LE gt V S OO nominale CV r elle nominale BRAND Q s 100 V contr le de volumes partiels V Par contre la conversion pour les volumes partiels ne sera pas faite si E et CV sont donn s en unit s de volume par ex ml Limite d erreur partir des valeurs E et CV Il est possible partir de l exactitude et du coefficient de varia tion de calculer de mani re approximative la limite d erreur LE de l appareil par ex pour le volume nominal V Reproductibilit Si la dispersion des r sultats de mesure individuels autour de la valeur moyenne V est indiqu e en unit s de volume on utilise le terme reproductibilit 0 0 E gt E 2CV l Vp 100 A de mani re analogue pour CV E Surveillance de moyens de contr le La surveillance des moyes de contr le A quel mom
13. l on peut emp cher un collage des souillures et une d t rioration des appareils pouvant tre caus e par des restes de produits chimiques Note Le materiel de laboratoire doit tre d sinfect avant nettoyage du fait de la possibilit d accident pendant celui ci La m thode d essuyage Le proc d le plus connu est la m thode d essuyage On essuie ou frotte les utensiles souill s avec un chiffon ou une ponge imbib s d une solution d tergente Les appareils de laboratoire ne doivent jamais tre trait s avec des produits ou ponges abrasifs qui pour raient abimer leur surface Le nettoyage en machine Le nettoyage dans des ma chines laver de laboratoire m nage les appareils bien plus que le nettoyage selon la m thode de trempage Car les appareils ne sont en contact avec la solution d tergente que lors des phases relativement courtes pendant les quelles celle ci est pomp e par des gicleurs ou des tubes injecteurs sur la surface nettoyer E Les appareils de laboratoire l gers doivent tre prot g s par des filets afin de ne pas tre project s et abim s par le jet de lavage Les appareils de laboratoire sont mieux prot g s des d t riorations de leurs sur faces quand les paniers de la machine laver sont rev tus de mati re plastique La m thode de trempage Pour le nettoyage la main selon la m thode de trempage on plonge g n ralement les ap pareils de labor
14. le titrage et peu avant le virage de couleur la solution talon est ajout e en goutte a goutte afin d viter un sur titrage Diff rents mod les de burettes Burette z ro Burette z ro auto matique de Pellet Burette avec robinet lat ral automatique du Dr Schilling BRAND Calibrage Classe AS Ex 30 s Classe B Ex Cet ajout en goutte goutte n cessite un temps identique voire sup rieur au temps d attente d fini Par cons quent il n est alors pas n cessaire de respecter le temps d attente de 30 secondes lors de l utilisation de burettes de classe AS Maniement 1 Rincer la burette avec la solution talon utiliser et l orienter de telle mani re que le tube de la burette se trouve a la verti cale Il faut veiller a n utiliser que des solutions talon enti re ment homog nes Aucune opacit floculation ni aucun d p t ne doivent tre visibles 2 Remplir la burette jusque l g rement au dessus du z ro en suite laisser le liquide s couler au maximum jusqu au volume nominal pour d sa rer le robinet de burette S il reste une pe tite bulle d air dans la burette pencher l appareil et tapoter l g rement avec le doigt sur l endroit o se trouve la bulle 3 Aspirer la solution talon sans formation de bulles d air jusqu environ 5 mm au dessus du z ro La paroi de verre au dessus du z ro ne doit pas tre mouill e 4 Ajuster exactement au z ro
15. le piston vers le haut la quantit de liquide ajust e est aspir e directement du flacon de r actif dans le cylindre de l appareil En d pla ant le piston vers le bas le i joint d tanch it liquide est vacu l aide d un syst me de soupapes travers la canule de distribution Il n est plus n cessaire ni d ajuster le m nisque ni de respecter les temps d attente On distingue deux types de distributeurs adaptables sur flacon distributeurs piston flottant et distributeurs avec piston Distributeurs piston flottant adaptables sur flacon Ce syst me fonctionne sans joint de piston tant pour cela tr s robuste et d un entretien facile Le piston est incorpor dans le cylindre de distribution sans avoir contact avec celui ci Il existe un espace minime entre piston et cylindre de distribution de seulement quelques milli mes de milli m tre rempli de liquide Ce film de liquide fonctionne comme un lubrificateur C est pourquoi le piston glisse avec tr s peu de frottement par ex la Dispensette de BRAND BRAND Domaines d application Pour la distribution de r actifs corrosifs tels que des acides tr s concentr es comme H PO H S0 lessives al calines comme NaOH KOH solutions salines ainsi qu un Materialien En fonction de l ex cution les parties en contact avec le liquide sont en mat riaux parti culi rement r sistants par ex c ramique pl
16. mouillage c est dire au film de liquide qui adh re aux parois int rieures de l appareil Le volume de ce film de liquide d pend du temps d coulement pris en compte lors de l ajustage de l appareil Erreurs de volume possibles Le volume distribu d une pipette ou d une burette diminue lorsque la pointe est cass e temps d coulement plus bref ou bien il augmente lorsque la pointe n est pas propre et que l coulement du liquide est entrav temps d coulement plus long Le volume augmente galement si la quantit de liquide restant dans la pointe apr s le pipetage est souffl e par erreur Pour conna tre la manipulation correcte des pipettes voir page 13 Le temps d coulement Le temps d coulement est d fini en tant que temps requis pour la chute libre du m nisque vacuation d eau par gravit entre le trait de graduation de volume sup rieur et le trait de graduation de volume inf rieur ou la pointe d coulement Avec les appareils de volum trie de la classe AS ce temps d coulement est suivi d un temps d attente d fini Le temps d attente Le temps d attente com mence d s que le m nisque a atteint le trait de graduation de volume inf rieur ou qu il s est immobilis dans la pointe d coulement Durant ce temps d attente le liquide restant qui adh re aux parois s coule vers le bas Exemple de temps d coulement et d attente se r f rant aux diff rentes classes de pipette
17. moyens de contr le selon les directives ISO et BPL les appareils de volum trie doivent Distributeurs avec piston joint d tanch it adaptables sur flacon Outre les distributeurs piston flottant on utilise galement des distributeurs quip s d un joint d tanch it Souvent ce syst me demande des forces d actionnement plus importantes et le frotte ment entra ne l usure du joint de piston par ex le seripettor de BRAND Ici l ensemble du syst me est con u de telle mani re que l unit de distribution puisse tre remplac e dans son int gralit Les forces d actionnement plus lev es requises lors du remplissage sont diminu es gr ce l action de levage automatique d un ressort tre r guli rement contr l s quant leur exactitude et tre r ajust s si n cessaire voir page 33 L exemple pr sent est un distributeur peu co teux pour les simples t ches de distribution de volumes compris entre 0 2 et 25 mi Domaines d application et mat riaux Le domaine d application est dans la routine quotidienne pour distribuer les alcalins les acides faible concentration tampons biologiques milieux pour la culture de cellules d tergents biologiques et solvants polaires Le distributeur seripettor pro est l appareil id al pour la dis tribution d acides par ex HCI concentr de solvants polaires par ex ac tone d huiles essentielles et de mi
18. ou de st rilisation que lorsque ces derni res sont froid puis les chauffer M Une fois le temps de s chage ou de st rilisation r volu laisser les appareils se refroidir lentement dans l tuve M Ne jamais chauffer des appareils de volum trie sur plaques chauffantes M Pour les appareils plastiques la temp rature maximale est la temp rature d utilisation BRAND ke ol E D 9 Ra 3 v te 3 Q Perte de poids mg 100 cm O 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 temp rature C Attaque de lessive sur le verre Boro 3 3 en fonction de la temp rature calcul e a partir des pertes de poids c NaOH 1 mol l Dur e d attaque 1h Diagrammes de la brochure Technische Gl ser de SCHOTT AG Mainz Attaque de lessive sur le verre Boro 3 3 en fonction du pH a 100 C Dur e d attaque 3h Remarques quant la st rilisation M Une st rilisation efficace la vapeur n a vraiment lieu que si la vapeur est satur e et qu elle peut atteindre tous les endroits contamin s sans emp chement M Les r cipients doivent toujours tre ouverts afin d viter toute surpression M Les appareils de laboratoire r utilisables souill s doivent tre soigneusement nettoy s avant d tre st rilis s la vapeur Autrement les r sidus seraient cuits et coll s pendant la st rilisation la vapeur Les microorganismes prot g s par ces souillu
19. ou B Num ro de lot M Le cas ch ant temps d attente SOUSA forme ExT 595 M Nom ou logo du fabricant BRAND Classification en classes d exactitude En g n ral les appareils de volum trie sont divis s en deux classes d exactitude Classe A AS Les appareils de volum trie de la classe A et AS poss dent des limites d erreur identiques d termin es par la norme DIN EN ISO En g n ral seuls les appareils de volum trie en verre sont en mesure de respecter ces limites tant con us pour r pondre aux exigences les plus s v res les fioles jaug es en PFA et PMP ainsi que les prouvettes gradu es en PMP de BRAND qui ap partiennent galement la classe A constituent une exception Dans le cas des appareils de volum trie de la classe AS avec cali brage pour couler Ex la mention S signifie coulement rapide Les appareils de volum trie de la classe AS se sont largement impos s Avec les pipettes et burettes poss dant une pointe a grande ouverture le risque d obturation est faible Le comporte ment d coulement des diff rents liquides est compens par le respect du temps d attente prescrit voir Temps d coulement et d attente page 11 Classe B Les appareils de volum trie de la classe B sont disponibles en verre ou en mati re plastique Pour la classe B les limites d er reur correspondent g n ralement au double de celles de la classe A AS Aucun temps d attente n
20. proc der un nouveau titrage ajuster a nouveau le point z ro le processus de titrage devant toujours commencer au point z ro Afin d effectuer les titrages on a besoin part de burettes de tioles jaug es de pipettes jaug es et de fioles Erlenmeyer DE Maniement des pycnometres Appareils de volum trie en verre Maniement Les pycnom tres servent en particulier pour d terminer la densit de liquides pas tr s visqueux Bien qu ils ne soient pas consid r s comme des appareils de volum trie ils sont calibr s pour contenir In tout comme les fioles jaug es On distingue deux types de pycnom tres Pycnom tre Pycnometre avec a bouchon thermom tre et capillaire lat ral recommand pour les liquides avec une pression de vapeur lev e Maniement 1 D terminer le poids vide du pycnom tre sec 2 Remplir le pycnom tre de liquide sans formation de bulles d air Le col rod doit tre rempli jusqu un tiers environ 3 Ajuster la temp rature du pycnom tre et du liquide dans un bain marie 20 C 4 Aligner le bouchon ou bien le thermom tre du pycnom tre sur le corps conform ment la marque et l introduire soigneuse ment Ce faisant le tube du capillaire se remplira et du liquide d plac d bordera 5 Essuyer et s cher soigneusement avec un tissu de cellulose la surface du bouchon ou bien celle du capillaire lat ral ainsi que l ext rieur du pycnom tre ATTENTIO
21. selon la m thode de microtitrage on pipette dans les plaques de microtitration de 8 x 12 cupules plaques de microtitration de 96 cupules dont les distances sont normalis es Cette technique permet entre autres la d termination d infimes quantit s de prot ines de la gamme micro et ne peut tre appliqu e de fa on rationnelle qu avec des pipettes multicanaux Les pipettes multicanaux sont particuli rement appropri es pour le transfert rationnel d chan tillons et pour les dilutions en s rie tant id ales pour le lavage des plaques de microtitration Domaines d application Techniques d analyse M Diagnostic clinique E Immunofluorescence IF M Analyse agroalimentaire M Dosage radio immunologique RIA E Immunologie E Biochimie E Dosage immunoenzymatique EIA ELISA M Dilution de cultures cellulaires WE Culture de cellules par ex la Transferpette S 8 12 de BRAND Maniement Preece de Aspirer le r actif Evacuer le r actif Ejecter la pointe Enfoncer la touche d jection 1 Appuyer sur le bouton de pipetage jusqu la premi re 1 Placer les pointes de la pipette contre la paroi du BRAND but e immerger les pointes 2 3 mm dans la liquide 2 Laisser doucement remonter le bouton de pipetage pour aspirer le liquide r cipient et appuyer le bouton de pipetage jusqu la premi re but e et l y maintenir Appuyer sur le bouton de pipetage jusqu la deu xi me b
22. simpli fication de la surveillance des moyens de contr le conform tique des valeurs de pes e Le syst me analyse ensuite automatiquement les valeurs EASYCAL 4 0 Proc s verbal d essai Suite la d finition des valeurs BRAND ment BPL et DIN EN ISO 9001 pour les appareils de Liquid Handling et appareils de volum trie en verre et mati re plastique Le pratique logiciel peut tre manipul de fa on intuitive Apr s d termination du type de l appareil contr ler appareil Liquid Handling ou appareil de volum trie en verre ou en mati re plastique on inscrit dans la fen tre Entr e des valeurs mesur es les donn es n cessit es les unes apr s les autres Pour la saisie des valeurs de pes e deux op tions sont disponibles la saisie limites EASYCAL effectue automatiquement tous les calculs Pour imprimer un rapport il suffit d appuyer sur le bouton Tous les r sultats sont enre gistr s dans une banque de donn es L historique des contr les gestionne les appa reils d j contr l s rendant ainsi la surveillance des moyens de contr le plus facile Les intervalles de contr le d ter min s en fonction des instruc tions de contr le SOPs peu vent tre d finis individuelle ment Commentaire manuelle et l import automa Service de calibrage pour des appareils Liquid Handling ISO 8655 Contr le suivant 05 2006 Le contr le a t effectu selon R sul
23. 349 808 98000 E Mail info brand de Internet www brand de JEU Au 3781460 BRAND
24. 7861 Wertheim Main Germany T l phone 49 9349 808 0 T l copieur 49 9349 808 98000 E Mail info brand de Internet www brand de BRAND GMBH CO KG Tous droits r serv s Table des mati res Vision g n rale des appareils de volum trie Fabrication des appareils de volum trie en verre De la mati re premi re l appareil de volum trie de pr cision Identification des appareils de volum trie Appareils de volum trie et leur classification en classes d exactitude Travailler avec des appareils de volum trie M nisque d un liquide Temps d coulement et d attente Pipettes en g n ral Maniement des pipettes Maniement des fioles jaug es Maniement des prouvettes bouch es et gradu es Maniement des burettes Maniement des pycnometres Travailler avec des auxiliaires de pipetage Travailler avec des appareils de Liquid Handling Distribuer avec des distributeurs adaptables sur flacon Titrer avec des burettes adaptables sur flacon Pipetter avec des pipettes coussin d air Pipetter avec des pipettes d placement positif Distribuer avec des distributeurs de fractions Sur l exactitude La surveillance des moyens de contr le Proc d du contr le de volume Logiciel de calibrage Service de calibrage Attestations de conformit et certificats Appareils de volum trie BLAUBRAND USP La directive DIV Gestion de la qualit Le nettoyage des appareils de laboratoire Conseils conce
25. Bien que les impacts soient les uns pr s des autres le but valeur nominale n est quand m me pas atteint Reproductibilit bonne Tous les impacts sont les uns pr s des autres R sultat Production mal contr l e d viation syst matique Il est n cessaire d exclure les appareils de volum trie dont les valeurs d passent les limites d erreur Plusieurs termes sont utilis s pour d crire la pr cision pour les appareils de volum trie en verre c est la reproductibilit alors que pour les appareils de Liquid Handling ce sont les termes statistiques exactitude et coefficient de variation Limite d erreur La limite d erreur LE d finie dans les normes correspondantes indique la d viation maximale admissible de l appareil par rapport la valeur assign e Volume partiel Exactitude bonne Tous les impacts sont tout pr s du centre donc pr s de la valeur nominale Reproductibilit bonne Tous les impacts sont les uns pr s des autres R sultat Cette production est parfaite ment contr l e par un sys t me d assurance de qualit accompagnant la fabrication D viation syst matique minime et dispersion serr e La limite admissible n est pas atteinte Une s lection n est pas n ces saire E et CV sont g n ralement rapport s au volume nominal V Ces valeurs donn es en doivent tre converties pour le Exactitude E L exactitude E indique
26. D ETERNA classe B Assurance de qualit Chez BRAND l assurance de qualit est garantie par des contr les continus durant la production et un contr le sta tistique lors du contr le final Pour des informations plus d taill es voir page 39 BRAND Appareils de volum trie en verre Fabrication Identification des appareils de volum trie Ft CT m i nes Num ro de lot Exemple Pipette jaug e BLAUBRAND le signe pour l attestation de conformit BRAND suivant les r gles allemandes sur talonnage des poids et mesures et la Fabricant norme DIN 12 600 Marque de BRAND pour D signation de la norme les appareils de volum trie de classe A AS Ti Pays d origine Ta ne pu f pe e Lael ae oe rm Temp rature de r f rence 20 C temps d attente 5 sec calibrage ici Ex coulement Volume nominal Limite d erreur Classe A signifie la classe de qualit la plus lev e S coulement rapide Ei 1 l MOH 8 AL ec MU Unit de volume 3 s n 2 Les indications suivantes doivent tre impri En outre les indications suivantes peuvent m es sur chaque appareil de volum trie figurer sur l appareil M Volume nominal Pays d origine M Symbole d unit ml ou cm3 Limite d erreur BMliecmperaitirede tcicienee 20 Marque dans notre cas BLAUBRAND M Calibrage Ex ou In Norme par ex ISO 648 M Classe A AS
27. Manuel pour travailler avec des appareils de laboratoire us BRAND sur la mesure de volumes BRAND Ne a _ _ E A M pos ee chose ti f i a j u s 4 a ee a i F7 T Ar 4 fa BRAND Preface La mesure de volumes est d une importance primordiale au labora toire L utilisateur doit clarifier l exactitude n cessaire pour la r ali sation d une mesure concr te partir de cette valuation il peut choisir l appareil qui convient sa mesure de volume Des mesures exactes exigent des appareils de mesure exacts et une manipulation correcte Pour une meilleure compr hension des appareils de volum trie utilis s dans le laboratoire et leur maniement une explication des termes les plus importants de classification et d utilisation est donn e dans la suite l exemple des appareils de laboratoire BRAND La brochure Informations sur la mesure de volumes a pour but de mettre disposition du lecteur une vision g n rale des appareils de volum trie Elle ne saurait toutefois remplacer les modes d emploi des appareils de Liquid Handling d crits Veuillez dans tous les cas lire le mode d emploi joint ces appareils avant de les mettre en service cela est dans l int r t de votre s curit Si vous d sirez d obtenir des informations compl mentaires n h sitez pas nous contacter BRAND GMBH CO KG P 0 Box 1155 9
28. N absolument viter d absorber du liquide d essai contenu dans le capillaire Le niveau du liquide d essai doit coincider exacte ment avec le bord sup rieur du capillaire 6 D terminer le poids du pycnometre rempli La densit est calcul e partir de la masse poids et du volume du liquide r f rant 20 C Le volume est grav sur l appareil On applique l quation suivante Densit p masse m volume V ll faut prendre en consid ration la pouss e a rostatique lors de la pes e Note Chaque pycnom tre calibr porte un num ro d appareil lequel est galement indiqu sur tous les composants Seuls des com posants portant le m me num ro peuvent tre utilis s ensemble BRAND Appareils de volum trie en verre Auxiliaires de pipetage Travailler avec des auxiliaires de pipetage Lors du travail avec des pipettes les auxiliaires de pipetage sont des aides indispensables On distingue deux types d auxiliaires de pipetage m Auxiliaires de pipetage manuels M Auxiliaires de pipetage moteur Auxiliaires de pipetage moteur Les auxiliaires de pipetage moteur conviennent particuli rement pour le pipetage de grandes s ries par ex dans le domaine de la culture cellulaire par ex accu jet pro de BRAND Gr ce la r gulation variable du r gime de moteur et au syst me de soupape sp cial les pipettes d un volume compris entre 0 1 et 200 ml doivent tre manipul
29. S est marquage DE M Graduation Les traits longs s tendent sur au moins 90 de la cir conf rence du tube ou sont imprim s sous forme de trait circulaire Classe B M en r gle g n rale le double des marges de tol rance de la classe A AS E Graduation Les traits longs s tendent sur env 20 40 de la circonf rence du tube Eprouvettes gradu es PMP classe A BRAND rs Appareils de volum trie en verre Mesure de volumes Travailler avec des appareils de laboratoire Le m nisque du liquide Le terme m nisque est utilis pour d crire la courbure de la surface d un liquide Le m nisque peut prendre une forme convexe ou concave La courbure r sulte du rapport entre les forces d adh sion et de coh sion Si les mol cules du liquide subissent une force d attrac tion plus forte de la part de la paroi de verre force d adh sion que de la part des autres mol cules du liquide force de coh sion le m nisque prend une forme concave C est dire le liquide monte pr s des bords du r cipient C est le cas par exemple des solutions aqueuses Ajustage du m nisque Si le diam tre d une pipette est suffisamment petit par ex celui d une pipette capillaire la force d adh sion suffit non seulement pour faire monter le liquide pr s des bords du r cipient mais en plus pour faire monter toute la surface du liquide effet de capillarit Une conditio
30. applique 0 Vi Pl V E 20 ul 200 ul El 0 5 E 1 5 20 ul ES eee ee see tue de mani re analogue 200 2 199 51 199 6 199 51 199 49 199 51 199 19 199 51 s Z s 1 00392 0 8393 s 1 0032 9 s 0 306 Que faire lorsque les valeurs d un appareil contr l se situent en dehors des limites d erreur 1 V rifier si toutes les in structions des instructions de contr le ont t effec tu es correctement 2 Prendre en consid ration les indications sur le paragraphe D rangement que faire du mode d emploi 3 Ajuster l appareil suivant les instructions dans le mode d emploi Si ces mesures ne livrent pas le r sultat souhait veuillez contacter le fabricant afin de pouvoir clarifier le proc d suivre BRAND A Surveillance de moyens de contr le Logiciel de calibrage Parfois la surveillance des moyens de contr le conform ment BPL et DIN EN ISO 9001 n est pas aussi simple que cela Non seulement il arrive facilement que l on fasse des erreurs de calcul cause des formules compliqu es la documentation des r sultats aussi entra ne parfois des difficult s Afin de vous faciliter ce travail le plus souvent difficile et fastidieux quelques fabricants de mat riel de laboratoire ont d velopp des logiciels de calibrage sp ciaux par ex EASYCAL le logiciel de calibrage de BRAND Une version de d monstration
31. as de la Transferpette electronic ces fonctions sont par exemple un programme permettant l ajustage simple et rapide de l appareil ainsi qu une fonction de r g n ration de la batterie Que signifie inverse L ordre des but es est invers Pour les pipettes m caniques cela signifie Pour aspirer du r actif on enfonce le bouton jusqu la deuxi me but e et le laisse lentement revenir dans sa position initiale Ensuite il suffit d enfoncer le bouton jusqu la premi re but e pour vacuer le volume r gl 2 Appareils Liquid Handling Pipetage Pipetter avec des pipettes a d placement positif La o les pipettes a coussin d air touchent aux limites physiques l efficacit des pipettes a d place ment positif se fait ressentir Elles sont particuli rement appropri es pour les liquides visqueux ou peu visqueux les liquides moussants ou haute pression de vapeur capillaire en verre piston d place ment positif r actif Principe de fonctionnement Contrairement aux pipettes coussin d air le piston de la pi pette a d placement positif est en contact direct avec le liquide pipetter Le piston essuie toujours parfaitement les parois des capillaires pointes ceci jusqu la derni re goutte dont la sortie de l orifice est bien visible Gr ce ce principe on obtient des r sultats reproduc tibles avec exactitude et ce ind pendamment des propri t s
32. atine iridi tantale ETFE PFA grand nombre de solvants organiques Dispensette Ill Pour la distribution des solvants organiques tels que des hydro carbures chlor s et fluorur s comme le trichlorotrifluoro thane et le dichlorom thane ou des acides comme HCI et HNO concentr s ainsi que pour l acide trifluorac tique TFA le tetrahydrofurane THF et les peroxydes Dispensette Organic Non appropri pour la distribu tion d acide fluorhydrique HF La s curit avant tout Lors de la s lection de distribu teurs adaptables sur flacon il faut tenir compte des disposi tifs de s curit de l appareil Comment par exemple le risque de blessure en cas de bris de verre peut il tre r duit Comment la projection acciden telle lors de la purge est elle vit e Comment le contact avec le milieu est il limit lors de l obturation de la canule de distribution L utilisateur doit galement v rifier si le distributeur convient pour le milieu distribuer Des remarques ce sujet figurent dans le mode d emploi en g n ral au chapitre Fonctions et limites d emploi En cas de doute adressez vous directe ment au fabricant Le mode d emploi doit ga lement contenir des informa tions sur la maintenance et surveillance des moyens de contr le Appareils Liquid Handling Distribution Surveillance des moyens de contr le Calibrage Dans le cadre de la surveillance des
33. atoire dans une solution d tergente pendant 20 30 minutes temp rature ambiante puis on les rince avec de l eau de ville et ensuite avec de l eau distill e N aug menter le temps d immersion et la temp rature que dans le cas de souillures tenaces Les appareils en verre Dans le cas d appareils en verre les temps d immersion prolong s au dessus de 70 C sont viter dans des milieux alcalins Ceci pourrait tout particuli rement dans le cas d appareils de volum trie mo difier les volumes par d gage ment de verre ou d truire les graduations Les appareils en mati re plastique Les appareils en mati re plasti que ont g n ralement des sur faces lisses et non mouillables ce qui permet en g n ral de les nettoyer facilement avec un produit l g rement alcalin Les appareils de laboratoire en polys tyr ne et polycarbonate particu li rement les tubes centrifuger ne doivent tre nettoy s qu la main et avec des d tergents neutres Un temps d immersion prolong influence la solidit m me s il s agit de d tergents l g rement alcalins La r sis tance chimique des mati res plastiques utilis es est v rifier pour chaque cas individuel Les bains ultrasons Les bains ultrasons peuvent tre utilis s aussi bien pour nettoyer les appareils en verre et ceux en mati re plastique Il faut cependant viter tout contact direct avec la mem brane Le nettoyage dans le
34. buccal Par cons quent utiliser imp rativement un au xiliaire de pipetage Ce dernier contribue consid rable ment la r duction du risque d infection et de blessure une membrane filtrante une protection efficace contre les infiltra tions de liquides Afin de prot ger l appareil contre la corrosion les vapeurs de liquide sont vacu es de l appareil par compensa tion de pression active Auxiliaires de pipetage manuels Les auxiliaires de pipetage manuels sont utilis s avant tout pour le pipetage de petites s ries dans les laboratoires chimiques par ex l auxiliaire de pipetage macro de BRAND Le macro est l auxiliaire appropri pour toutes les pipettes jaug es et les pipettes gradu es de 0 1 200 ml Un syst me de sou papes sp cial aux changement de pression fait de l ajustage sen Maniement i Etablissement d une d pression Aspiration D placer le levier de pipetage vers le haut Plus le levier est pouss vers le haut plus la pipette se remplit rapidement Comprimer le soufflet d aspiration La poire pour pipetage Appareils de volum trie en verre Auxiliaires de pipetage sible et exact du m nisque Une membrane filtrante hydrophobe prot ge le syst me contre les infiltrations de liquide Ajustage du m nisque Evacuation ecoulement libre D placer le levier de pipetage quelque peu vers le bas Le m nisque descend d s que vous relachez le levier le m
35. c le liquide sont en mat riaux particuli rement r sis tants par ex verre borosilicat PTFE platine iridi c ramique AlO Pipetter avec des pipettes coussin d air Qu est ce qu on entend par pipetage Par pipetage on entend l aspiration et l vacuation pr cises et uniques de liquides La pipette coussin d air sert pipeter des liquides aqueux dans la gamme du microlitre au millilitre Elle fonctionne selon le principe du coussin d air air interface tige de pipette pointe usage unique coussin d air r actif Appareils Liquid Handling Pipetage Principe commun de fonctionnement En d pla ant le piston dans la tige de pipette vers le haut et le bas il se produit un vide partiel ou bien une surpression dans la tige De cette fa on le Avantage Pas de mouillage de l appa reil vu que le liquide entre seulement dans la pointe qui n est utilis e qu une seule fois Ainsi est assur un travail sans Pipettes monocanal m caniques par ex la Transferpette S de BRAND liquide est aspir dans la pointe ou bien vacu Le liquide est s par du piston par un coussin d air r sidus ce qui est particu li rement important pour les domaines dans lesquels il faut travailler de fa on st rile ou sans contamination Calibrage Dans le cadre de la surveillance des moyens de contr le selon les directives ISO et BPL les appareils de volum trie doivent t
36. d vacuation se met en marche Le piston des poin tes se d place l aide d un moteur l vacuation du volume et le nombre d op rations sont par ex le HandyStep electronic de BRAND Distribution Mode standard Une fois le liquide aspir celui ci est distribu de fa on r p t e dans les fractions de volume ajust es par l uti lisateur pilot s par un microprocesseur Cette combinaison d ergonomie et de dessin permet un travail d tendu Le piston essuie toujours parfaitement les parois int rieures des pointes ce qui permet d obtenir des r sultats exactement reproductibles ind pendamment des in Les pointes DD tips de BRAND poss dent un code de capacit incorpor dans leur piston Une fois la pointe log e sa capaci t identifi e est automatique ment affich e Les erreurs sont ainsi vit es et le volume do fluences d un coussin d air Les pointes a d placement direct rendent possible la distribution de liquides a haute densit de liquides tr s volatils ou a haute pression de vapeur et de liquides ayant tendance a mousser ser et le programme souhait peuvent tre facilement s lec tionn s Le r glage de l appa reil reste conserv en logeant une nouvelle pointe de la m me capacit Tandis que les distributeurs r p tition m caniques de par leur construction servent uniquement pour la distribution de fractions de volume nombres entiers sa
37. demande un maniement simple et par la r alisation rapide et cono mique Les instructions de contr le et le logiciel EASYCAL sp cialement d velopp s a cette fin en combinaison avec les appareils de volum trie avec certificat individuel ou de lot sont appropries pour attein dre une diminution consid rable du temps investi dans le controle Le contr le est il galement n cessaire pour les appa reils de volum trie mar quage DE M Comme tous les moyens de contr le les appareils de volu m trie marquage DE M selon la norme DIN 12600 sont ga lement soumis la surveillance des moyens de contr le Il n est pas d termin claire ment et sans quivoque si pour ces appareils le premier contr le est obligatoire ou non Il est donc de la responsabilit de l utilisateur de d cider com ment proc der Toutefois par s curit il est conseill d effectuer le premier contr le sur un chantillon repr sentatif choisi par un pro c d al atoire Ceci documente en m me temps l tat initial pour les contr les futurs Une alternative est dans le meilleur des cas l utilisation d appareils de volum trie avec certificat du fabricant Termes techniques des moyens de contr le Calibrage On entend par calibrage la d termination du volume r el Afin de permettre un calibrage rapide et simple et d viter les sources d erreurs BRAND propose titre gratuit des ins truc
38. du logiciel est disponible sur ig Liquid Handling Entr e des valeur b xj EASYCAL vous pargne les calculs et effectue automati Contr leur Contr leur 2 Date 14022006 Num ro de fapparei 0564878 quement la documentation qui Internet www brand de pour Appatel Transterpete yi Val obtenues du contr le gravim trique en fait partie cet effet vous tre t l charg e ou peut tre Type Digna n avez besoin que d une balance obtenue gratuitement sur Volume nominal 200 vil v f a SEALE 2 zf PT 0 A 2 analytique d un ordinateur per CD ROM Valeur moia Bes SS sonnel d une imprimante en op 3 73930 tion et du logiciel EASYCAL 199 13 99 85 19 89 19942 99 81 19 93 A j j 4 FT ee M Contr le des appareils inde No de balance 19945 9983 1988 pendamment de leur fabri 33 19939 9981 Tyne de balance A amp D HF xl Le controle a t effectu selon liso 8655 X cant i No de thermom tre 1 Type de thermom tre Goldbrand Me Signaler l appareil d fectueux a Do nnees d e base d nom breux appareils d j d po s es Entrer la pression atmosph rique f1004 hPa Valeur de correction 1 00314 Temp de contr le 21 40 7052 F E Contr le conform ment aux normes ISO 4787 ISO 8655 et autres Fermer Entr e des valeurs limites Surveillance des moyens de contr le rendue facile Le logiciel de calibrage EASYCAL offre une
39. e lecture du m nisque sont ainsi vit es Les burettes adaptables sur flacon s adaptent directement sur le flacon de r actif En d pla ant le piston vers le haut le liquide est aspir du flacon de r actif dans le cylindre de l ap pareil En d pla ant le piston ensuite vers le bas le liquide est lentement vacu travers la canule de titrage dans la solution contenant l analyte jusqu a ce que le titrage soit termin par ex virage de cou leur de l indicateur par ex la Titrette de BRAND en 10 ml 25 ml et 50 ml Le fait de tourner les molettes d place le piston et du liquide est alors aspir ou vacu Par le biais du sens de rotation l lectronique de l appareil re conna t automatiquement si l ap pareil est utilis pour remplir ou pour titrer Il est possible d as pirer le liquide rapidement mais aussi de le distribuer tr s len tement et tr s exactement une goutte apr s l autre Lors de la purge la soupape de purge as sure le retour du liquide dans le flacon De cette mani re les bulles d air peuvent tre limi n es quasiment sans perte de milieu L appareil peut tre fa cilement d sassembl au labo ratoire pour les travaux de net toyage et de maintenance Domaines d application Utilisable dans de nombreux domaines avec des solutions aqueuses et non aqueuses par ex KOH alcoolique jusqu 1 M Mat riaux Les parties venant en contact ave
40. e de fl che Aspiration Indicateur de volume Les programmes de pipetage Pipetage Le programme standard Un volume programm pr alablement est aspir puis expuls M lange d chantillon Programme permettant un m lange des liquides Un chantillon est aspir puis expuls plusieurs reprises et le nombre de cycles est affich sur l cran Pipetage inverse Programme sp cialement con u pour le pipetage de liquides viscosit lev e et tension de vapeur lev e ainsi que pour le pipetage de fluides moussants En plus du volume r gl la pipette aspire le volume de surcourse Apr s l vacuation ce volume reste dans la pointe afin d viter que du liquide ne continue s couler de mani re ind finie et pour emp cher les projections et la formation de mousse ou de bulles Pipetage lors de l lectrophor se Programme permettant de charger les gels d lectrophor se Un volume d chantillon variable est aspir a une grande vitesse programmable avant d tre expuls tr s lentement Le volume tr s pr cis de liquide expuls est affich sur l cran Distribution Programme permettant de distribuer les liquides Un volume aspir est ject en plusieurs fractions Fonctions suppl mentaires Selon leur qualit et leur ex cution les pipettes lec troniques peuvent offrir des fonctions suppl mentaires sp cifiques venant s ajouter aux programmes de pipetage Dans le c
41. e fabricant BRAND atteste des appareils selon les r gulations allemandes sur l ta lonnage des poids et mesures Selon la norme DIN 12600 le sigle DE M est imprim directe ment sur les appareils Dans chaque certificat de lot et certificat individuel BRAND indique tous les moyens de con tr le utilis s Certificat de lot USP Le certificat indique la valeur moyenne et l cart type du lot ainsi que la date de d livrance num ro de lot ann e de fabri cation lot Certificat individuel USP Le certificat indique le volume mesur l incertitude de mesure et la date de d livrance num ro de s rie individuel ann e de fabrication lot num ro d ordre de l appareil La directive IVD Importance et effets Directive IVD de l UE La directive de UE concernant les dispositifs m dicaux de dia gnostic in vitro directive IVD a t publi e le 7 d cembre 1998 dans le bulletin officiel de l Union Europ enne et avec cela est entr e en vigueur Son application est possible depuis le 7 juin 2000 Qu est ce qu on entend par dispositif m dical de dia gnostic in vitro IVD On entend par dispositif m di cal de diagnostic in vitro tout dispositif m dical utilis dans l examen in vitro d chantillons provenant du corps humain y compris les dons du sang et de tissus ces dispositifs appartiennent des r actifs des substances ou dispositifs de calibrage des substances o
42. en laissant s couler du liquide La lecture se fait la hauteur des yeux sans parallaxe Dans le cas de burettes z ro automatique remplir galement jusqu environ 5 mm au dessus du point z ro Celui ci s ajuste auto matiquement apr s d sa ration 5 Essuyer la goutte ventuellement suspendue la pointe de la burette 6 Ouvrir le robinet de burette et ajouter lentement la solution ta lon la solution contenant la substance analyser avec indi cateur Le robinet de burette ne doit pas toucher la paroi de verre Lors de l ajout en goutte goutte de la solution talon agiter l g rement le r cipient ou le poser sur un agitateur ma gn tique Atin de faciliter la visualisation du virage de couleur le r cipient pes e devrait tre plac sur une base blanche D s que le point de virage est atteint l indicateur change de couleur fermer le robinet de burette Le titrage est termin 7 La lecture du volume de la solution titr e se fait la hauteur des yeux Etant donn e la dur e du titrage le temps d attente classe AS 30 sec s est d j coul dans la pratique pen dant le processus de titrage Il doit uniquement tre pris en compte lors du calibrage de l appareil 8 Essuyer la goutte ventuellement suspendue la pointe de la burette du robinet contre la paroi int rieure du r cipient pes e pour l ajouter elle fait partie du volume de la solution titr e M Avant de
43. ent et quelle fr quence est il n cessaire d effectuer le contr le Dans le cadre de la surveil lance des moyens de contr le il est obligatoire de connaitre et de documenter l exactitude et l incertitude de mesure de tous les syst mes de mesure avant de les lib rer pour l utilisation De m me il est obligatoire d effectuer des contr les p rio diques selon un rythme d fini voir DIN EN ISO 10012 Le motif L exactitude de mesure d ap pareils de volum trie peut tre modifi e r sultant par ex de l utilisation de produits chimiques agressifs des pro c d s et de la fr quence du nettoyage Etant donn que l exactitude exig e pour les mesures d pend de fa on consid rable des conditions d application l utilisateur lui m me doit d fi nir le rythme des contr les Les intervalles de contr le typiques pour les appareils de Liquid Handling et appareils de volum trie en plastique sont de 3 12 mois et pour les appa reils de volum trie en verre de 1 3 ans Qu est ce qu on entend par moyens de controle On entend par moyens de contr le tous les syst mes de mesure utilis s pour la v rification des caract ristiques publi es des produits Dans tout laboratoire analytique l exactitude des moyens de contr le utilis s doit tre vidente afin d obtenir des r sultats d analyse fiables Cette exigence est valable dans une large mesure pour les laboratoires qui travaillent c
44. est sp cifi pour les appareils de mesure de la classe B avec calibrage pour couler Ex Que choisir des appareils de volum trie en verre ou en mati re plastique Le mat riau universel r pon dant toutes les exigences du laboratoire n existe pas Le choix du verre ou des ma ti res plastiques est fonction de l application pr vue pour le produit de son ex cution des propri t s sp cifiques du mat riau en question et des aspects economiques L excellente r sistance la casse et la l g ret sont les avantages les plus d cisits des appareils de volum trie en mati re plastique Le PP le PMP et le PFA ont d j fait leurs preuves Le PP est utilis pour fabriquer des pipettes jaug es des pi pettes gradu es de m me que des fioles jaug es et des prou vettes gradu es dont l exac titude correspond aux limites d erreur de la classe B Le PMP et le PFA sont ga lement utilis s pour des appa reils de mesure avec des limites d erreur identiques celles de la classe par ex des fioles jau g es PMP PFA et des prou vettes gradu es PMP En rai son de sa grande puret le PFA est avant tout utilis dans le do maine de l analyse de traces Appareils de volum trie en verre Fabrication Classe A AS WE d signe toujours la classe d exactitude la plus lev e S signifie coulement ra pide pipettes et burettes seule la classe A A
45. estion de la qualit BRAND commence d j avec la phase de projet d un produit et accompagne son d velop pement jusqu ce que celui ci soit pr t pour la fabrication en s rie Les contr les perma nents du proc d de fabrication sur toute sa longueur ont pour but de produire des appareils de volum trie diff rant le moins possible de la valeur nominale exactitude et dont les valeurs individuelles ont une plage de dispersion coefficient de va riation la plus r duite possible Pour finir le r sultat de cette commande statistique de la fabrication SPC est contr l par un essai sur pr l vement selon la norme DIN ISO 3951 au cours du contr le final BRAND Le proc d du syst me de gestion de la qualit r alis chez BRAND certifi selon la norme DIN EN ISO 9001 est une combinaison de sur veillance de la capacit de la fabrication et d essais sur pr l vement Le niveau de qualit limite acceptable N Q A est d au moins 0 4 Cela signifie que les valeurs limites donn es sont observ es avec une pro babilit statistique de 99 6 au minimum Tous les moyens de contr le utilis s dans l assurance qualit sont r guli rement contr l s et raccord s aux talons natio naux du PTB Institut F d ral de Physique et de M trologie Ce syst me de gestion de la qualit r alis conform ment la norme DIN EN ISO 9001 constitue galement la base pour la d livrance de certificats
46. ettes dilution de sang et pour sucre sanguin jusqu un volume maximal de 1 ml par ex l auxiliaire de pipetage micro de BRAND Maniement Aspiration Evacuation En tournant la molette le liquide est aspir ou bien vacu Les pipettes calibr es pour contenir In sont rinc es par un remplissage et une vi dange r p t s avec la solution diluante par ex l auxiliaire de pipetage micro classic de BRAND En raison de sa forme coud e il est particuli rement appropri pour les travaux au microscope dans le laboratoire FIV et le labo ratoire m dical Maniement Il est interdit de pipetter a la bouche ou avec un tuyau buccal Par cons quent utiliser imp rativement un au xiliaire de pipetage Ce dernier contribue consid rable ment la r duction du risque d infection et de blessure Evacuation coulement libre Pour l vacuation de liquides de pipettes calibr es pour couler Ex appuyer sur le bouton d a ration respecter le cas ch ant le temps d attente Ejection La touche large sert pour jecter sans les toucher les pipettes utilis es Fixation de la pipette Fixer toujours la pipette a l extr mit courte c est dire tenir la pipette au niveau du code couleur et l ins rer avec pr caution dans l adaptateur BRAND Aspiration Tourner la molette de r glage vers l arri re jusqu ce que le liquide atteigne exactement le trait souhait
47. fl ches au niveau du m nisque La lecture se fait au point de contact des deux pointes 2 m nisque Si la force de coh sion entre les mol cules d un liquide est sup rieure la force d adh sion entre les mol cules du liquide et celles de la paroi de verre le m nisque prend une forme convexe C est le cas par exemple du mercure Remarque importante Lors de l application pratique la temp rature du liquide et la temp rature ambiante jouent un r le important Alors que la dilatation des appareils de volum trie en verre est n gli geable il faut tenir compte de la dilatation des liquides qui va rie en fonction des diff rentes temp ratures Afin que l erreur de volume soit aussi faible que possible tous les volumes des liquides ayant un rapport entre eux doivent tre mesur s la temp rature habituelle r gnant tous les jours Lors de la com position de solutions standard notamment il est pr f rable d effectuer le pipetage de l chantillon et le titrage a la m me temp rature Par ailleurs les grandes diff rences de temp rature entre l appareil et le liquide sont viter Appareils de volum trie en verre Mesure de volumes Temps d coulement et d attente Dans le cas des appareils de volum trie con us pour distribuer des liquides calibrage pour couler Ex le volume distribu est toujours inf rieur au volume contenu dans l appareil Cela est d au
48. g Administ ration sont contraints de respecter les exigences de l USP United States Pharmacopoeia L USP actuelle d crit au chapitre 31 que les appareils de volum trie en verre doivent respecter les limites d erreur de classe A selon les normes ASTM Ces limites d erreurs sont r pertori es dans des tableaux pour les fioles jaug es pipettes jaug es et burettes Pour les pipettes gradu es jusqu 10 ml les limites d erreur sont indiqu es dans le texte Limite d erreur Les appareils de volum trie en verre BRAND sont fabriqu s selon les normes DIN EN ISO actuelles Comme les prescrip tions des normes DIN EN ISO diff rent de celles des normes ASTM les limites d erreur sont diff rentes pour les diff rents appareils de mesure BRAND confirme pour les ap pareils de mesure USP dans les certificats USP joints que les limites d erreur de classe A ont t respect es selon les nor mes ASTM BRAND Ouslit tezertifikat Cerntilicate of Performance Certificat de qualit Certificade de calidad BLAUBRAN GD Volumenmessgerite Volumetric Instruments Appareils de volum tric Materiel volum trico usp Changmeprutung Gatch contel trol diel bole Pogi HD CLSTIFILC German Volipipette Volum Pipettes Pipettes Jaugees Pipetas Aforadas BLAUBRAND USP AS DIN EN 150 648 Marquage DE M Tous les appareils de volum trie BLAUBRAND sont mar quage DE M en s rie Avec le sigle DE M l
49. haque instant des r sultats individuels obte nus partir de mesures effectu es au moment de la fabrication Attestations de calibrage Attestation de calibrage officiel Cette attestation de calibrage est d livr e par le bureau allemand de v rification des poids et mesures et est reconnue en Alle magne et dans beaucoup d autres pays L appareil de mesure et l attestation de calibrage portent un num ro de s rie individuel pour l identification et l ann e de d livrance Attestation de calibrage DAkkS Le Service de Calibrage Allemand DKD fut fond en 1977 comme institution commune de l Etat et de l conomie laquelle repr sente le lien entre les moyens de mesure des laboratoires de l industrie de la recherche des instituts de contr le ainsi que des pouvoirs publics et les talons nationaux du PTB Institut F d ral Physico Technique Allemand A partir du 2010 l accr ditation DKD a t sur une base l gale plac successivement dans l agr ment DAkkS Deutsche Akkre ditierungsstelle GmbH L attestation de calibrage DAkkS avec le signe de calibrage DAkkS documente en tant que certificat officiel de haut niveau le rattachement des valeurs mesur es tra abilit des ta lons nationaux et internationaux et avec cela des unit s du SI comme l exigent entre autres les normes DIN EN ISO 9001 et ISO IEC 17 025 pour la surveillance des moyens de contr le Une diff rence d terminante entre les
50. ignitie les ramener a un tat tel qu ils ne pr sentent plus de risque Pour cela traiter les appa reils de laboratoire avec des d tergents d sinfectants par example Si besoin est et si le mat riau est appropri les appareils pourront tre st rili s s ala vapeur autoclav s par la suite R sistance a la chaleur Tous les appareils de volum trie r utilisables BLAUBRAND et 1 4 um a 100 C soit donc le d cuple Pour cette raison viter les temp ratures de nettoyage au dessus de 70 C et pr f rer des d tergents l g rement alcalins st rilisation La st rilisation la vapeur St rilisation la vapeur auto clavage signifie l extinction et ou l inactivation irr versible de tous les microorganismes susceptibles de se multiplier sous l action de vapeur satur e 121 C 2 bar selon DIN EN 285 L ex cution conforme de la st rilisation et ce jusqu la s curit biologique fait partie de la responsabilit de la personne charg e du secteur hygi ne SILBERBRAND peuvent subir une temp rature allant jusqu 250 C dans les tuves de s chage ou de st rilisation sans risque que leur volume soit ensuite modifi Il faut toutefois faire attention au fait que le chauffage irr gulier des appareils en verre ou les chocs thermiques brusques provoquent des contraintes thermiques qui peuvent causer leur casse Donc M Ne placer les appareils en verre dans les tuves de s chage
51. imin es par un r chauf tement et un refroidissement contr l s des bauches Le calibrage Chaque appareil de volum trie en verre de BRAND est ajust individuellement Pour ce faire une quantit d eau d finie est dos e avec pr cision et le trait de jauge est appliqu au point le plus bas du m nisque Dans le cas des appareils de volu m trie gradu s deux traits de jauge sont appliqu s Lors de la production enti rement auto matis e des syst mes pilot s par ordinateurs assurent la pr cision maximale possible La commande statistique de la fa brication permet alors de pro duire des appareils de volum trie pr sentant des carts aussi petits que possible par rapport la valeur nominal exactitude ainsi qu une faible variation des valeurs individuelles coefficient de variation BRAND Cela est indispensable pour obtenir une solidit m canique optimale et garantir que le volume reste constant lors de sollicitations thermiques ult rieures Les appareils de volum trie BLAUBRAND et SILBERBRAND peuvent donc subir une temp rature allant jusqu 250 C dans les tuves Ebauches de foiles jaug es En principe on diff rencie deux fa on de calibrage calibrage pour contenir In et calibrage pour couler Ex Calibrage pour contenir In La quantit de liquide contenue correspond au volume imprim Parmi ces appareils de me sure on compte par exemple les pro
52. ion d une fiole jaug e pour la pr paration d une solution talon 1 Placer dans la fiole jaug e la quantit de substance exacte ment pes e ou bien verser un concentr liquide standard 2 Remplir la fiole d eau distill e jusqu la moiti environ et l agi ter afin de r aliser la dissolution ou bien le m lange 3 Ajouter de l eau distill e presque jusqu au trait de jauge 4 Ajouter le volume restant n cessaire l aide d une pissette ou pipette jusqu ce que le m nisque se trouve exactement au niveau du trait circulaire Important la lecture doit tre effec tu e la hauteur des yeux La paroi de verre au dessus du trait ne doit pas tre mouill e 5 Ensuite boucher la fiole et l agiter en la retournant plusieurs fois pour r aliser le m lange Maniement des prouvettes bouch es et gradu es Eprouvettes gradu es Les prouvettes gradu es classe et B sont des ap pareils de volum trie calibr s pour contenir In c est dire qu elles indiquent exactement le volume contenu Maniement M Verser un liquide M Ajuster le m nisque au trait souhait effectuer la lecture la hauteur des yeux WE La paroi de verre au dessus du trait ne doit pas tre mouill e M Le volume lu correspond la quantit de liquide con tenue Remarque Au laboratoire l prouvette gradu e est souvent utilis e comme un appareil de mesure calibr pour couler Ex
53. ipetage voir page 18 Remplissage Pipette Type 2 jaug e 1 trait coulement total i 1 A l aide d un auxiliaire de pipetage remplir la pipette jusqu 5 mm au dessus du trait de graduation de volume souhait volume nominal en haut 2 Essuyer l ext rieur de la pointe de la pipette avec un tissu de cellulose r gler le 3 R gler le menisque menisque 1 fois 4 Essuyer les gouttes res tantes sur la pointe Evacuation 5 Tenir la pipette verticale ment a inte d appuyer la pointe de aad la pipette contre la paroi du r cipient tant tenu inclin et PL laisser s couler le contenu ue i Ne pas carter la pointe de pipette de la paroi 6 D s que le m nisque s im mobilise dans la pointe com mence le temps d attente de 5 s seulement pour classe AS 7 Une fois le temps d attente coul faire glisser et essuyer le long de la paroi la pointe de la pipette sur environ 10 mm vers le haut Une partie du liquide restant s coule alors r gler le menisque 1 fois Remarque La petite quantit de liquide qui reste dans la pointe ne doit pas tre ajout e par ex par souttlage ou vers e dans le r cipient 5 i cette quantit a d ja t F3 ela prise en consid ration lors du calibrage de la pipette 4 Aspirer Essuyer Ajuster le Evacuer menisque Type 1 Type 3 si coulement coulement n partiel A total
54. la paroi du r cipient et enfoncer le bouton de pipetage une seconde fois jusqu la but e Les pipettes d place ment positif ne poss dent pas de surcourse BRAND Appareils Liquid Handling Distribution Distribution avec des distributeurs de fractions Un des travaux les plus importants et les plus fr quents dans les laboratoires m dicaux pharma ceutiques et biologiques est la distribution de liquides Des techniques de travail habituelles et tr s utilis es sont le dosage la distribution et le pipetage La distribution est l vacuation r p titive de quantit s de liquide identiques Cette technique poss de un grand avantage sur le pipetage elle per met une conomie consid rable de temps vu que l aspiration r p t e n est plus n cessaire tant donn e l utilisation r pandue de cette technique de travail l ergonomie et le dessin des appareils jouent un r le essentiel Les travaux de distribution au laboratoire sont rarement r alis s avec des syst mes compl tement automatiques liminant toute manipulation manuelle Pour ces travaux de routine on utilise en r gle g n rale des distributeurs r p tition On distingue deux types de distributeurs de fractions M distributeurs r p tition totalement m caniques M distributeurs r p tition lectroniques moteur Principe de fonctionnement Dans le cas de distributeurs r p tition m caniques le r glage du volume s effectue
55. lieux sen sibles aux rayons UV Par rap port au distributeur seripettor certains composants de cet appareil comme les soupapes sont r alis s en mat riaux plus r sistants BRAND Appareils Liquid Handling Titrage Titrer avec des burettes adaptables sur flacon Qu est ce qu on entend par titrage Le titrage est une m thode d analyse volum trique servant la d termination quantitative d une substance en solution Comment a fonctionne Une quantit d finie d un chantillon liquide avec une proportion inconnue d une substance dissoute par ex de l acide ac tique est remplie dans une fiole Erlenmeyer au moyen d une pipette jaug e Suite la dilution de ce liquide avec de l eau on ajoute environ 3 gouttes d un indicateur Ensuite tout en agitant la fiole on ajoute l aide d une burette un r actif titrant appropri d une concentration connue par ex NaOH 0 1 M jusqu ce que le virage de couleur de l indicateur indique la fin du titrage Par le biais de la consommation en r actif titrant et l aide de l quation de la r action chimique il est possible de calculer la quantit de la substance dissoute dans l chantillon w o a Principe commun du fonctionnement des burettes adaptables sur flacon Lecture du volume Dans le cas de burettes adap tables sur flacon le volume de la solution titr e peut tre lu directement dans l affichage de la burette des erreurs d
56. lle des pipettes gradu es M Mod les de pipettes jaugees Le mod le principal est 25 la pipette jaug e 1 trait coulement total j Le mod le 2 traits est moins courant coulement partiel Pipette jaug e avec 1 trait Pipettes capillaires par ex intraMARK BLAUBRAND E calibr es pour contenir In E un trait circulaire M volume compris entre l ex tr mit et le trait circulaire BRAND i Pipette gradu e type 2 volume nominal en haut Pipettes gradu es E Calibrage Classe AS Ex 5 s Classe B Ex E Gr ce la graduation pos sibilit de lire des volumes partiels M ypes de pipettes gradu es Type 2 volume nominal en haut coule ment total m me pour volumes partiels Type 1 volume nominal en bas coule ment partiel de tous les volumes Type 3 volume nominal en bas coule ment total unique ment pour le volume nominal Pipettes capillaires par ex intraEND BLAUBRAND M calibr es pour contenir In M sans trait M volume compris entre les deux extr mit s capillaires End to End Appareils de volum trie en verre Maniement Maniement des pipettes Pipettes calibr es pour coulement Ex Pipetage correct avec des pipettes jaug es 1 trait ici volume nominal 25 ml et pipettes gradu es type 2 classe AS ici volume partiel 3 ml Accessoire auxiliaire auxiliaire de p
57. n essentielle pour la mesure exacte de volumes est l ajustage exact du m nisque M nisque concave dans une pipette gradu e Dans le cas d un m nisque concave la lecture du volume se fait au point le plus bas de la surface du liquide Ce faisant le point le plus bas du m nisque doit toucher le bord sup rieur du trait Lecture du m nisque Pour obtenir un ajustement sans parallaxe du m nisque il convient de tenir l appareil de volum trie la verticale L ceil de l utilisateur doit se trouver la m me hauteur que le m nisque Dans cette position le trait circulaire appara t en tant que ligne droite Lorsque l on tient une feuille de papier fonc derri re l appareil juste en dessous du trait cir culaire ou d une subdivision le m nisque devient plus sombre et par cons quent plus visible sur un fond clair BRAND M nisque convexe dans une pipette gradu e Dans le cas d un m nisque convexe la lecture du volume se fait au point le plus haut de la surface du liquide Ce faisant le point le plus haut du m nisque doit toucher le bord inf rieur du trait trait circulaire Indication du m nisque par la bande photophore d une burette La bande photophore est une troite bande bleue au centre d une bande blanche Elle est imprim e au dos des burettes afin d am liorer la lisibilit En raison de la r fraction la bande bleue appara t sous forme de deux
58. nc e plusieurs fois avec du diluant Remplissage M Aspirer le volume de liquide le plus pr cis ment possible jusqu au trait souhait M Tenir le capillaire horizonta lement et l essuyer douce ment avec un tissu de cellulose Evacuation M Afin de vider vacuer le liquide par soufflage l aide d un auxiliaire de pipetage et rincer 2 3 fois avec du Aspirer Essuyer Evacuer diluant le capillaire tant calibr pour contenir In M Les capillaires end to end sont souvent d pos s directement dans la solu tion diluante et rinc s en secouant Porte pipette avec capillaire end to end BRAND Maniement des fioles jaug es Les fioles jaug es classe A et B sont des appareils de volu m trie calibr s pour contenir In qui servent en particulier pour pr parer des solutions exactes comme par ex solu tions talons et standards et dissolutions Les m thodes d analyse mo dernes exigent des fioles jau g es de petits volumes Les fioles jaug es de forme standard dans cette gamme de volumes jusqu env 50 ml ont tendance se renverser cause de leur centre de gravit lev et leur base r duite Les fioles jaug es de forme trap ze offrent une stabilit nettement am lior e Leur cen tre de gravit se place plus bas et leur base est plus du double de celle d une fiole standard volume gal Appareils de volum trie en verre Maniement Utilisat
59. ns d cimaux le distributeur r p tition lectronique permet la distribution de fractions de volume telles que 1 01 ml Les diff rents programmes de travail Distribution automatique L appareil calcule la valeur moyenne sur trois fractions et continue a travailler automati quement dans ce rythme y Sr i j Pipetage Travailler comme avec une pipette d placement positif Un volume d fini auparavant est aspir et vacu BRAND SR Exactitude Sur l exactitude Que signifient dans la mesure volum trique limite d erreur exactitude coefficient de variation et pr cision Repr sentation graphique de pr cision et exactitude La cible repr sente la plage de volumes autour de la valeur nominale qui est au centre Les points noirs sont les valeurs obtenues de diff rentes mesures d un volume d fini Exactitude mauvaise Les impacts sont loin du centre Reproductibilit mauvaise Les impacts sont tr s disper s s R sultat Ces appareils de volum trie sont de qualit m diocre Exactitude bonne Les impacts sont r partis r gu li rement autour du centre Reproductibilit mauvaise Pas d erreur grossi re mais les impacts sont tr s dispers s R sultat Toutes les d viations ont la m me probabilit Il est n cessaire d exclure les appareils de volum trie dont les valeurs d passent les limites d erreur Exactitude mauvaise
60. nt le proc d d attestation de marquage DE M sont d crits dans la r glementation d talonnage et de mesure allemande du d cembre 2014 Par le marquage DE M le fabricant d clare que l appareil corres pondant satisfait aux exigences de la r glementation d talonnage et de mesure allemande ainsi que des normes applicables En g n ral le marquage DE M est directement imprim sur les appa reils et en ce qui concerne les articles usage unique compl mentaires sur l emballage signe de conformit Marquage DE M Tous les appareils de volum trie BLAUBRAND sont identifi s par DE M Par ce marquage le fabricant BRAND certifie la confor mit des appareils la r glementation d talonnage et de mesure allemande En g n ral le marquage DE M est directement imprim sur les appareils Dans chaque certificat de lot et certificat individuel BRAND indique tous les moyens de contr le utilis s Certificats de qualit L assurance de qualit r alis e conform ment la norme DIN EN ISO 9001 constitue la base pour la d livrance d attestations de calibrage d usine et les certificats de qualit sont de tels certificats Ces certificats d usine sont disponibles en tant que certificat de lot ou certificat individuel Tous les r sultats de contr le sont document s et archiv s pendant 7 ans au minimum ainsi si l on conna t le num ro de lot ou bien le num ro de s rie il est possi ble de recourir c
61. on us pour les m mes applications par les diff rents fabricants fonctionnent tous selon un principe similaire En fonction du fa bricant il existe cependant des diff rences parfois importantes au niveau des d tails de la construction et du design des appareils La s lection d appareils de Liquid Handling de BRAND pr sente Distributeur Distributeur Burette adaptable sur flacon adaptable sur flacon adaptable sur flacon Pipettes coussin Pipettes coussin Pipette d place Distributeur r p ti Distributeur r p d air un canal d air multicanaux ment positif tion m canique tition lectronique BRAND A gt Appareils de volum trie en verre Fabrication Fabrication d appareils de volum trie en verre De la mati re premi re l appareil de volum trie de pr cision Les bauches Les pipettes jaug es et gra du es sont r alis es en verre de chimie par ex AR GLAS et pour les fioles jaug es prouvettes gradu es et les burettes on emploie du verre borosilicat par ex Verre bo rosilicat 3 3 Ces verres pos s dent une r sistance chimique et physique lev e qui est adapt e aux applications du la boratoire Des bauches de grande qualit ainsi qu un contr le sta tistique rigoureux des crit res de qualit exig s sont indispen sables la production d ap pareils de volum trie de haute qualit Ainsi les contraintes thermiques pr sentes doivent tre l
62. onform ment aux directives BPL qui sont accr dit s selon la norme DIN EN ISO IEC 17 025 ou certifi s selon DIN EN ISO 9001 et suivantes Ces directives exigent l exis tence d instructions crites qui d crivent en d tail le proc d du contr le des moyens de contr le ll faut aussi indiquer pour les moyens de contr le le limite d erreur ou bien l exactitude et le coeffi cient de variation et il faut d terminer quelles mesures sont prendre en cas de d passement de ces valeurs limites Quel est le proc d selon le quel s effectue le contr le Le contr le des appareils de volum trie s effectue de fa on gravim trique dans le cas des appareils Liquid Handling selon la norme ISO 8655 et dans le cas des appareils de volum trie en verre selon ISO 4787 Lors de la r alisation il faut tenir compte de nombreux facteurs BRAND met disposition pour tous les appareils de volum trie des instructions de contr le qui d crivent un point apr s l autre le proc d du contr le Outre cela BRAND offre un logiciel qui effectue tous les calculs n cessaires les enregistre dans une banque de donn es et imprime les r sultats dans un proc s verbal d essai au choix de l utilisateur Investissement de temps pour le contr le La surveillance des moyens de contr le ne doit pas devenir le travail principal au labora toire analytique mais doit tre limit e un espace de temps raisonnable Ceci
63. ou ton coulissant 1 5 en combinaison avec le type de pointe utilis Les pointes d placement direct de BRAND sont disponibles en 10 capacit s diff rentes non st riles ou st riles Il est galement possible d utiliser des pointes compatibles d autres fabricants Tip size ml 1 25 2 5 5 10 Volume ul Exemple des possibilit s de combinaison avec des pointes DD tips diff rentes de BRAND Op rations et gammes de volume 12 5 50 1000 1500 2000 2500 3000 3500 4000 4500 5000 ae o 375 o 500 o 6 750 HET Ergonomie et dessin Appareils Liquid Handling Distribution Les travaux r p titifs de forme intense avec des appareils manuels peuvent provoquer de nombreux probl mes musculaires a divers gards ils pr sentent un risque particuli rement lev pour la mus culature de la nuque et des paules ainsi que celle des bras et des pouces Surtout pour les distri buteurs r p tition l exigence concernant un maniement conomisant les forces est tr s importante tant donn que ces appareils sont utilis s presque exclusivement pour les distribution en s rie Particuli rement pour la r alisation de longues s ries dans la m me position l ergonomie et le dessin des appareils jouent un r le d cisif Distributeurs r p tition lectroniques moteur Principe de fonctionnement En appuyant sur une touche le m canisme d aspiration ou bien
64. re r guli rement calibr s quant leur exactitude donc contr l s et tre ajust s si n cessaire voir page 33 Que ce soit dans le laboratoire de routine ou dans la recherche pr cision et fonctionnalit sont les caract ristiques qui devraient tre standard pour le pipetage avec des pipettes cousin d air piston Maniement Aspirer le r actif 1 Appuyer sur le bouton de pipetage jusqu la premi re but e Tenir l appareil la verticale et immerger la pointe dans le liquide Gamme de Profondeur Temps volume d immersion d attente in mm ens O 1 ul 1 pl 1 9 1 gt 1 pul 100 ul 2 3 1 gt 100 pl 1000 ul 2 4 1 gt 1000 ul 3 6 3 2 Laisser doucement remonter le bouton de pipetage pour aspirer le liquide Evacuer le r actif 1 Placer la pointe de la pipette contre la paroi du r cipient et appuyer le bouton de pipetage jusqu la premi re but e et l y maintenir 2 Appuyer sur le bouton de pipetage jusqu la deuxi me but e pour que les pointes se vide totalement et essuyer la pointe de la pipette contre la paroi du r cipient sur env 10 mm Ejecter la pointe Enfoncer la touche d jec tion BRAND T Appareils Liquid Handling Pipetage Pipettes multicanaux m caniques Les pipettes multicanaux fonctionnent galement selon le principe du coussin d air Avec elles 8 ou bien 12 pipetages simultan s peuvent tre effectu s En travaillant
65. res ne seraient pas tu s de fa on efficace de plus les produits chimiques collant encore aux parois pourraient abimer les surfaces des appareils sous l effet des temp ratures lev es M Les mati res plastiques ne r sistent pas toutes la st rilisation la vapeur Le polycarbonate par ex perd sa solidit raison pour laquelle les tubes centrifuger de ce mat riau ne doivent pas tre st rilis s la vapeur M Lors de la st rilisation la vapeur autoclavage les appareils en plastique ne doivent pas tre sollicit s de mani re m cani que par ex ne pas les empiler Afin d viter les d formations veillez ce que les b chers les flacons et les prouvettes gra du es par ex soient debout lorsqu ils sont st rilis s l auto clave Conseils concernant la s curit Conseils concernant la s curit Sur la manipulation de substances dangereuses La manipulation de substances dangereuses comme les produits chimiques les mat riels infectieux toxiques ou radioactifs ainsi que les organismes g n tiquement modifi s demande une grande res ponsabilit de la part de tous pour la protection de l homme et de l environnement Les r glements correspondants doivent strictement tre suivis par ex les Directives pour labo ratoires distribu es par les Caisses de Pr voyance et les r glements par les bureaux charg s de la protection de l environnement de la radioprotection et de l limination
66. rmanente du pouce volume dos et le mode de par un moteur l aspiration et tage lors du pipetage de grandes distribution qui ne sont pas s ries risque de RSI r alisables avec des pipettes Un autre avantage est la m caniques par ex la Transferpette electronic monocanal et multicanaux de BRAND Touches de programmation Touche de pipetage ___ Touche d jection____ des pointes 5 a a Ge 9 oo Transtarpette 5 el galt ore Il est tr s important que les pipettes monocanal et multicanaux lectroniques poss dent un design ergonomique une r partition adapt e du poids un logiciel intuitif et surtout qu elles soient accompagn es d une documentation technique claire et compr hensible Maniement Aspirer le r actif Evacuer le r actif Ejecter la pointe Plonger les pointes dans le Appuyer la touche pipetage Enfoncer la touche d jection r actif et appuyer une fois nouveau le liquide est ject des pointes sur la touche de pipetage le La surcourse s effectue auto volume r gl est aspir matiquement la fin Pour finir essuyer les pointes de pipette contre la paroi du r cipient sur env 10 mm BRAND 6 Appareils Liquid Handling Pipetage Programmes de pipetage de la micropipette Transferpette electronic 6 A DISP steps BRAND yi a AYIYI b LlLl ui Ecran d affichage Programme Indicateur de charge Symbol
67. rnant la s curit 10 11 12 13 15 15 16 17 18 22 24 29 29 30 34 36 36 10 21 32 33 37 38 39 40 41 43 Appareils de volum trie Vision g n rale des appareils de volum trie A ppare S d e VO U La mesure de volumes de liquides fait partie des travaux de routine de chaque laboratoire Les appareils de volum trie en verre comme les fioles jaug es les pipettes jaug es et gradu es les prouvettes m trie en verre gradu es et les burettes sont donc des instruments de base Ils peuvent tre en verre ou en mati re plastique Les appareils de volum trie propos s par les fabricants sont de qualit s diff rentes Les en plastic b chers gradu s b chers fioles Erlenmeyer entonnoirs robinet etc ne sont pas des appareils de volum trie Ils ne sont pas ajust s de mani re pr cise et leur chelle ne sert que de rep re approximatif Ci dessous une s lection d appareils de volum trie de qualit BRAND est present lt E HEHE amp 250m T ey Fioles jaug es Pipette jaug e Pipette gradu e Eprouvette gradu e Burette Appareils de Liquid Handling Afin de r pondre aux exigences de plus en plus s v res dans la mesure de volumes r alis e au laboratoire examens en s rie s ries de tests de nouveaux appareils ont t d velopp s en perma nence par exemple pour la distribution le pipetage et le titrage Les appareils c
68. rs de me sure doivent tre corrig es en cons quence Remarque En raison du faible coefficient de dilatation du verre la tem p rature de r f rence ne rev t que peu d importance dans la pratique tant donn que les carts de mesure dus la dila tation du volume des appareils de mesure sont en g n ral in t rieurs la limite d erreur La r alisation des impressions Apr s le calibrage on proc de l impression par s rigraphie BRAND utilise des crans de soie pour s rigraphie exten sibles pour toutes les pipettes gradu es les burettes les prouvettes gradu es et prou vettes bouch es En tirant les crans de soie ceux ci correspondent exactement aux traits de jauge et c est pourquoi m me les volumes interm diaires sont d une pr cision extr me En ce qui concerne les pipettes on applique sur leur extr mit sup rieure un anneau de cou leur d nomm code couleur pour une meilleure distinction des capacit s des pipettes qui sinon seraient faciles confondre Il est d fini dans la norme ISO 1769 quelle couleur correspond a quel volume nominal La cuisson La cuisson des inscriptions est la derni re phase du processus suivre de l bauche a l appa reil de volum trie fini Le proc d de cuisson soi gneusement contr l est une condition essentielle en plus du choix des couleurs d impri merie de qualit sp cialement fabriqu es a ce
69. s pipette jaug e de 25 ml Classe A marquage DE M 25 50 sec de temps d coulement pas de temps d attente Classe AS marquage DE M 19 20 sec de temps d coulement temps d attente 5 s Classe B 10 50 sec de temps d coulement pas de temps d attente Temps d attente classe AS Le temps d attente de 5 s d fini pour les pipettes jaug es et les pipettes gradu es de la classe AS est le temps qui est respecter suite l immobili sation apparente du m nisque dans la pointe d coulement et avant le retrait de la pointe d coulement de la surface du r cipient Le fabricant doit indiquer le temps d attente de 5 s sur la pipette voir page 8 BRAND Appareils de volum trie en verre Maniement Travailler avec des appareils de volum trie Pipettes en g n ral En r gle g n rale les pipettes sont des appareils de volum trie avec calibrage pour couler Ex ser vant mesurer des volumes de liquides Elles sont individuellement mesur es volum triquement lors du processus de fabrication et portent un ou plusieurs traits de jauge On distingue les pipettes jaug es et les pipettes gradu es avec calibrage pour couler Ex ainsi que les micropipettes pour des volumes jusqu 200 ul usage unique avec calibrage pour contenir In Pipettes jaug es M Calibrage Classe AS Ex D s Classe B Ex E Exactitude de mesure en g n ral plus lev e que ce
70. s analyses de traces Afin de r duire un mini mum les traces de m tal les appareils de laboratoire sont tremp s pendant 6 heures maximum dans du HCI 1N ou du HNO 1N a temp rature ambiante Les instruments de laboratoire en verre sont souvent bouillis pendant une heure dans du HNO TN Ils sont ensuite rinc s avec de l eau distill e Afin de r duire les souillures organiques il est possible de nettoyer les appa reils de laboratoire au pr alable avec des bases ou des sol vants par ex de l alcool BRAND A Nettoyage Nettoyage non agressif Afin de m nager les appareils de laboratoire on devrait les nettoyer juste apr s leur emploi temp rature basse pour une courte dur e et avec un produit l g rement alcalin Les temps d immersion prolong s au dessus de 70 C sont viter dans des milieux alcalins tout particuli rement dans le cas d appareils de volum trie en verre Autrement ceci pourrait modifier les volumes par d gagement de verre ou d truire les graduations Information Tandis qu une lessive caustique 1N d gage une couche d env 0 14 um seulement d une surface en Boro 3 3 verre borosilicat 3 3 en 1 heure a 70 C elle en d gagera env La desinfection et la La d sinfection Les appareils de laboratoire ayant eu contact avec du ma t riel infectieux ou organismes g n tiquement moditi s doivent tre d sinfect s avant tout autre usage limination cela s
71. s gra du es et fioles jaug es sur plaques chauffantes M Ne r aliser les r actions exothermes comme la dilu tion d acide sulfurique ou la dissolution d hydroxyde de sodium solide qu en bras sant et refroidissant dans une fiole Erlenmeyer par ex jamais dans une prouvette gradu e ou dans une fiole jaug e Ne jamais exposer des appareils en verre un brusque changement de temperature Donc ne pas les retirer encore chauds de l tuve de s chage et les d poser sur une paillasse froide ou m me mouill e Pour les applications sous pression seuls les appareils en verre pr vus cet effet doivent tre utilis s les tioles de filtration et des sicateurs par ex ne doivent tre mis en service qu apr s contr le du bon tat M Tout appareil retourn en vue de r paration doit tre net toy parfaitement et ven tuellement st rilis selon les prescriptions Les appareils contamin s radioactivement doivent tre d contamin s selon les prescriptions du bureau de radioprotection Les appareils de volum trie en verre endommag s comme les fioles jaug es les prouvettes gradu es etc ne devraient pas tre r par s L action de la chaleur pourrait provoquer des contraintes permanentes dans le verre risque de casse tr s lev l ou bien modifier le volume de fa on permanente ll est inadmissible de simple ment couper une prouvette gradu e lorsqu elle est d fec
72. services de calibrage en usine et les laboratoires de calibrage DAkkS consiste en l indi cation fiable de l incertitude de mesure une indication qui est surveill e par le DAkkS et dont le laboratoire se porte garant On fait usage de l attestation de calibrage DAkkS l o des cali brages d un laboratoire accr dit sont exig s et o il est ques tion de calibrages d une extr me qualit ainsi que de la mise a disposition d talons de r f rence et du calibrage d appareils de r f rence Le DAkkS est membre de l International Laboratory Accreditation Cooperation ILAC Etant donn des conventions multilat rales l attestation de calibrage DAkkS est homologu e obligatoirement dans de nombreux pays Elle est d livr e en plusieurs langues Certificat de lot Certificat individuel Tous les appareils de mesure et certificats d un lot de fabrica tion portent le m me num ro de lot Le certificat indique pour ce lot la valeur moyenne l cart type et la date de d li vrance L appareil de mesure et le certificat portent en plus du num ro de lot un num ro de s rie individuel Le certificat indique le volume mesur l in certitude de mesure et la date de d livrance BRAND O M Appareils de volum trie BLAUBRAND USP Les entreprises qui fabriquent des produits pharmaceutiques destin s au march am ricain et qui sont par cons quent audit es par des autorit s des Etats Unis comme la FDA Food and Dru
73. t effet pour une graduation r sistante sur les appareils de volum trie Cela signifie chauffage et refroidis sement contr l s des appareils de volum trie gradu s La temp rature maximale est entre 400 C et 550 C selon le type de verre Appareils de volum trie en verre Fabrication Les couleurs d imprimerie BRAND utilise des couleurs d imprimerie de qualit fabriqu es sp cialement pour les appareils de volum trie en verrre Couleur maill e bleue Couleur maill e blanche La couleur maill e blanche est utilis e pour les appareils de volum trie SILBERBRAND classe B Contraste lev combinaison optimale de r sistance et de lisi bilit La couleur maill e bleue est utilis e pour les appareils de volum trie BLAUBRAND classe A AS R alisation des impressions sur les fioles jaug es la machine Ces TA d i i 1 4 4 yet EE RE 4 HM i zi z ven vi FH Eprouvettes gradu es avec impressions r alis es avant cuisson Couleur a diffusion brune Cette couleur se diffuse dans la surface du verre et ne peut tre limin e que par abrasion du verre Elle est employ e pour les appareils de volum trie soumis a des m thodes de nettoyage particuli rement agressives La couleur diffu sion brune est utilis e pour les appareils de volum trie BLAUBRAND ETERNA classe A AS ainsi que pour les appareils de volum trie SILBERBRAN
74. table Facteur Z pour appareils Liquid Handling E V Yimin vac Temp rature Facteur Z nominale C ml g 18 1 00245 EE 200 1514 200 100 18 5 1 00255 200 19 1 00264 19 5 1 00274 E 0 076 20 1 00284 20 5 1 00294 21 1 00305 21 5 1 00316 29 1 00327 99 5 1 00338 03 1 00350 03 5 1 00362 24 1 00374 24 5 1 00386 25 1 00399 25 5 1 00412 26 1 00425 Surveillance de moyens de contr le 3 Afin de pouvoir calculer le coefficient de variation calculer d abord l cart type x X x X x XK x 7Y 2 10 X n 1 4 Le coefficient de variation est alors obtenu du calcul suivant CV 5100 V cv 91 2 806 100 200 1514 CV 0 153 Pour l exemple calcul le r sultat suivant est obtenu Evaluation du contr le gravim trique Volume contr l ul 200 0000 Valeur moyenne ul 200 1514 E 0 076 CV 0 153 E nominale 0 600 CV nominale 0 200 limites d erreur du mode d emploi l appareil est en bon tat Si les valeurs calcul es de l exactitude E et du coef ficient de variation CV sont comprises dans le limites d erreur ou correspondent a ces derni res l appareil est en bon tat Note Dans le cas d un contr le de volumes partiels les donn es indiqu es pour PAS SOY A tar se r f rant au volume nominal V doivent tre converties Pour le volume de contr le de 20 ul s
75. tant que besoin aux contr les exig s Le fabricant applique ce signe sur le produit et tablit additionnellement une attesta tion de conformit certifiant la concordance du produit avec les directives et normes cit es Les dispositifs m dicaux four nis par BRAND appartiennent tous la gamme des dispositifs m dicaux de diagnostic in vitro IVD Parmi ces produits se trouvent entre autres cellules de num ration lamelles couvre objets pipettes capillaires usage unique tubes capillaires micro h matocrites cire de cachet pour h matocrites godets pour analyseur pots urine pots pour coprologie vials cryog niques pointes de pipette pointes DD tips micropipettes Transferpette distributeurs a r p tition HandyStep BRAND Gestion de la qualit Gestion de la qualit La gestion de la qualit est indispensable et devrait dans le cas id al commencer d j avec la phase de projet d un produit et accompagner son d veloppement jusqu ce que celui ci soit pr t pour la fabrication en s rie ainsi que la fabrication ult rieure Ceci assure l utilisateur la plus grande s cu rit possible lors du travail avec les appareils de laboratoire et la fiabilit de ses analyses Gestion de la qualit chez BRAND Gestion de la qualit l exemple des appareils de Liquid Handling et des appareils de volum trie BLAUBRAND La g
76. tat Date de contr te Contr leur Signature Contr le gravim trique pas ok 14 02 2006 Controteur2 BRAND offre un service complet comprenant calibrage et si besoin est galement r paration et ajustage des moyens de me sure aux personnes pour lesquelles le calibrage est un trop grand investissement de temps Proc s verbal d essai imprim BRAND D claration de conformit et certificats D claration de conformit et certificats On distingue M d claration de conformit M certificats de qualit certificats d usine M attestations de calibrage bureau allemand de v rification des poids et mesures DAkkS D claration de conformit R glementation d talonnage et de mesure et le marquage DE M Pour les appareils de volum trie mis disposition et utilis s pour des mesures dans des domaines r glement s par la loi par ex dans les secteurs m dicaux et pharmaceutiques fabrication et contr le de m dicaments la r glementation d talonnage et de mesure allemande exige une attestation de conformit au lieu d un talonnage Ces r gulations s appliquent galement aux accessoires importants pour la technique de mesure par ex pointes de pipette pour pipettes piston Qui atteste conformit Conformit DE M veut dire conformit d un appareil avec l homologation pour le secteur r gie par lois selon la reglemen tation d talonnage et de mesure allemande Les d tails concer na
77. tions de contr le d taill es pour tous ses appareils de volum trie Ajustage On entend par ajustage la correction de l cart de la valeur mesur e par rapport la valeur vraie En fonction du fabricant l ajustage d appareils de Liquid Handling s effectue g n ra lement en tournant une vis de r glage Suite au r glage il faut proc der a un nouveau ca librage des fins de contr le Cette proc dure doit tre r p t e jusqu ce que le volume se trouve dans les limites d erreur BRAND A Surveillance de moyens de contr le Proc d du contr le de volume par ex la micropipette Transferpette Variable 20 200uI Nous recommandons un calibrage une fois tous les 3 12 mois comme d crit par la suite En fonction de la fr quence d utilisation et des milieux employ s l utilisateur peut galement d terminer des intervalles de contr le diff rents EX Pr paration 1 D terminer le type de l appareil et le volume nominal 2 Lire le num ro de s rie 3 En cas de souillures d monter si n cessaire l appareil et le nettoyer voir mode d emploi 4 V rifier s il y a des d t riorations bo tier bout de la tige de pipette dispositif d jection piston joint et dans le cas de d t riorations se procurer des pi ces de rechange corres pondantes 5 Placer la Transferpette avec ses accessoires dans la salle d essai pendant au moins 2 heures pour les temp rer
78. tueuse Ceci a pour effet de raccourcir la dis tance entre le trait sup rieur et le bec verseur distance d finie par la norme DIN Le danger de renverser des liquides chimiques s en trouve augment et la s curit de travail n est plus garantie Les d chets doivent tre limin s selon les lois exis tantes Ceci est galement valable pour les articles usage unique usag s Ils ne doivent pas pr senter un danger pour l homme ou l environnement Les appareils de laboratoire doivent tre nettoy s avant d tre limin s Leur mise au rebut doit tre effec tu e en tenant compte des mat riaux utilis s et en respectant les prescriptions en vigueur Veuillez noter que le verre de laboratoire n est pas recycl BRAND Notes R pertoire des marques accu jet BLAUBRAND BRAND Dispensette EASYCAL HandyStep S seripettor Titrette Transferpette ainsi que les marques verbales et figura tives repr sent es ici sont des marques de la BRAND GMBH CO KG Allemagne Les marques ou les termes prot g s les sym boles ou les illustrations d autres d tenteurs ne sont mentionn s dans cette publication qu titre de r f rence et sans revendication d utilisation Les marques reproduites sont la propri t de leurs fabricants respectits 9946 45 Printed in Germany 21 0215 BRAND GMBH CO KG P O Box 1155 97861 Wertheim Germany Tel 49 9349 808 0 Fax 49 9
79. u dispositifs de contr le quipe ments instruments appareils syst mes ou galement des r cipients pour chantillons qu ils soient sous vide ou non s ils sont sp cifiquement destin s par le fabricant tre utilis s pour des chantillons m dicaux Les dispositifs m dicaux de diagnostic in vitro servent principalement a fournir des informations M concernant un tat physiolo gique ou pathologique M concernant une anomalie cong nitalen permettant de contr ler des mesures th rapeutiques Qu est ce qu on entend par dispositif m dical On entend par dispositif m dical tout instrument appareil quipement mati re ou autre article y compris le logiciel destin par le fabricant tre utilis chez l homme M des fins de diagnostic de pr vention de contr le de traitement d att nuation ou de compensation d une maladie d une blessure ou d un handicap M des fins d tude de remplacement ou modifica tion de l anatomie ou d un processus physiologique M des fins de ma trise de la conception Les agents pharmacologiques ou immunologiques r glemen t s par la l gislation sur les m dicaments n appartiennent pas ces dispositifs Directive DIV Marquage CE Avec le symbol CE sur un pro duit le fabricant atteste que ce produit r pond aux exigences fix es dans les directives de l UE pour les produits de ce genre et qu il a t soumis en
80. ut e pour que les pointes se vide totalement et essuyer les pointes de la pipette contre la paroi du r cipient sur env 10 mm DE Appareils Liquid Handling Pipetage Ergonomie et sollicitation En raison de la contrainte permanente les travaux intensifs et r p titifs avec les appareils m ca niques a ergonomie insuffisante peuvent entra ner l apparition d un grand nombre d atfections mus culaires On les conna t sous le nom de RSI Repetitive Strain Injury Les muscles les plus sollicit s se situent au niveau de la nuque de l paule des bras et des pouces C est pourquoi les travaux au laboratoire entra nent fr quemment des tendinites et le syndrome du canal carpien Dans le cas des micropipettes notamment il est donc primordial que la manipulation se fasse sans grand effort Pipettes monocanal et multicanaux lectroniques Principe de fonctionnement Avantages des pipettes lectroniques L actionnement de la touche de l vacuation du volume sont La combinaison du pipetage possibilit d ex cuter des pro pipetage d clenche le m ca command es par un micro motoris et du design ergono grammes de pipetage comme nisme d aspiration ou d va processeur Les touches de mique permet un travail sans le mode lectrophor se sur cuation avec surcourse Le commande permettent d entrer effort et d tendu et sans solli gel avec indication pr cise du piston de la pipette est d plac divers programmes de pipe citation pe
81. uvettes gradu es les tioles jaug es et les pipettes capillaires d un volume maximal de 200 ul Installation de calibrage pour pipettes gradu es de s chage ou de st rilisation sans risque que leur volume ll faut toutefois faire attention au fait que le chauffage irr gu lier des appareils en verre ou les chocs thermiques brusques provoquent des contraintes thermiques qui peuvent causer Calibrage pour couler Ex La quantit de liquide vacu e correspond au volume imprim La quantit r siduelle de liquide adh rant aux parois de appa reil de mesure mouillage a t prise en compte lors de l ajus tage Ce calibrage est effectu entre autres pour les pipettes jaug es et gradu es ainsi que pour les burettes Donc Ne placer les appareils en verre dans les tuves de s chage ou de st rilisation que lorsque ces derni res sont froid pour les chauffer lentement Une fois le temps de s chage ou de st rilisation r volu lais ser les appareils se refroidir lentement dans l tuve de s chage ou de st rilisation teinte Ne jamais chauffer des appa reils de volum trie sur plaques chauffantes Temp rature de r f rence La temp rature de r f rence normale c est dire la temp rature laquelle l appareil de volum trie doit contenir ou dis tribuer son volume est 20 C Si l ajustage ou le calibrage est effectu une temp rature dif f rente les valeu
82. x z ro en hu z ro en haut haut H r gler le menisque r gler le lg 2 fois fe menisque HI AM 2 fois i lal a be Ji anil 4 Type 1 et Type 3 En cas d utilisation des pipettes gradu es de type 1 ou 3 z ro en haut le m nisque 1 doit d abord tre r gl sur le point z ro puis le liquide doit tre vacu jusqu ce que le niveau se situe juste au dessus du volume partiel souhait 2 et apr s un temps d attente de 5 s il faut ajuster une nouvelle fois le m nisque Cette op ration s effectue beaucoup plus simplement et plus rapidement avec les pi pettes de type 2 De plus avec le type 1 et le type 3 utilis s jusqu pr sent il est possible qu une trop grande quantit de liquide soit vacu e lors du deuxi me ajustement indis pensable du m nisque et que l chantillon doive tre pr lev une seconde fois tout comme dans le cas de pipettes jaug es 2 traits BRAND T Appareils de volum trie en verre Maniement Maniement des pipettes Pipettes calibr es pour contenir In Pipetage correct avec des pipettes capillaires Accessoire auxiliaire auxiliaire de pipetage voir page 18 Les pipettes capillaires sont des pipettes d un tr s petit diam tre int rieur L aspiration du volume de liquide s effectue avec un auxiliaire de pipetage ou automatiquement par capillarit Apres l vacuation la pipette capillaire doit tre lav e et ri

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