Home

Bedienungsanleitung – BioSpectrometer fluorescence

1. Parameter Erl uterung Nucleic acids Diese Parameter werden bei der Auswahl einer Nukleins ure bei der Programmierung einer Methode der Gruppe Dye labels in die Methodenparameter geladen e NA name Der Faktor wird zur Berechnung der Konzentration aus der Extinktion Factor benutzt e Double stranded Der Parameter Double stranded hat Einfluss auf die Berechnung der molaren Nukleins urekonzentration siehe Umrechnung in molare Konzentrationen und Nukleins uremengen auf S 104 Dyes Diese Parameter werden bei der Auswahl eines Farbstoffs Dyes bei der Programmierung einer Methode der Gruppe Dye labels in die Methodenparameter geladen e Dye name Neben dem Namen k nnen Sie zur Definition des Faktors f r die e Wavelength Berechnung der Konzentration aus der Extinktion die folgenden Daten e Ext coeff eingeben Factor Faktor oder Extinktionskoeffizient e Corr A260 Die Korrekturfaktoren fur die Extinktionen bei 260 bzw 280 nm werden e Corr A280 benutzt wenn die Korrekturfunktion in den Methodenparametern aktiviert ist Genaueres ist im Kapitel zur Auswertung beschrieben siehe Korrektur A269 und Korrektur A2g auf S 103 Units Aus allen verfugbaren Einheiten konnen Sie bei der Programmierung von Methodenparametern eine Einheit auswahlen e Unit Eine noch nicht programmierte Einheit fur das Konzentrationsergebnis eingeben e Kenndaten f r Proteine die nicht ab Werk vorprogrammiert sind k nnen in der Datenbank
2. Conc Abs Linear regression pg ml Asos not calculated Standard 1 100 SC x Standard 2 250 x Standard 3 500 x randard 4 Curve Fit Graph ee Methoden Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 45 Deutsch DE Der erste zu messende Standard ist in der Anzeige markiert Messen Sie nach dem Leerwert Taste blank der Reihe nach alle Standards Taste standard Wenn Sie mehr als ein Replikat pro Standard messen wird der Mittelwert f r jeden Standard automatisch errechnet und angezeigt Mit den Cursor Tasten und k nnen Sie auch gezielt bestimmte Standards zur Messung ausw hlen Auch eine Neumessung einzelner Standards ist so m glich Last call Die zuletzt gespeicherte Standardauswertung f r diese Methode aufrufen um diese f r Probenmessungen zu nutzen e Curve fit Verfahren zur Standardauswertung ausw hlen Sie k nnen das Verfahren auch nachtr glich ndern solange das Ergebnis nicht gespeichert wurde Hinweise zur Auswahl des Auswerteverfahrens finden Sie im Kapitel Auswerteverfahren siehe Auswertung mit Standardkurve gerade auf S 101 e Graph In die grafische Anzeige der Standardergebnisse wechseln Conc Abs Quadratical regression D n Asos Conc 532 44 A g 234 21 A X 0 393 71 562 0 710 Standard 3 500 0 708 Coefficient ot determination X 0 709 R 0 9998 0 927 Standard 4 750 0 929 X 0 928 Info Standard 5 1000 ER
3. Entries 03 Total volume of sample 50 pL ID Molecular mass 8300 bases 0 kDa Calculations 9 Dat ssDNA 9 0 yg mL 0 244 Aso 0 5 pg total amount in sample Dye 1 0 2146 Cy3 0 214 pMolyL 10 7 pmol total amount in sample d t H H save Cancel Methoden Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 57 Deutsch DE Methodengruppe Nucleic acids Nach Eingabe der Molmasse alternativ in Basen Basenpaaren oder in kDa Konzentrationsergebnis in die molare Konzentration umrechnen Nach Eingabe des Probenvolumens Gesamtmenge in der Probe berechnen Methodengruppe Dye labels Nukleins ure e Nach Eingabe der Molmasse alternativ in Basenpaaren oder in kDa Konzentrationsergebnis in die molare Konzentration umrechnen Nach Eingabe des Probenvolumens Gesamtmenge in der Probe berechnen Farbstoff Nach Eingabe des Volumens der Probe Gesamtmenge in der Probe berechnen F r dsDNA wird bei der Berechnung der molaren Konzentration eine doppelstr ngige Nukleins ure angenommen F r die Methoden ssDNA RNA und Oligo wird eine einzelstr ngige Nukleins ure angenommen e F r Methoden die in der Hauptgruppe Routine Methodengruppe Nucleic acids ber lt New Method gt neu programmiert wurden werden f r die Berechnung der molaren Konzentration immer doppelstr ngige Nukleins uren angenommen Peak detection Dr cken Sie den Softkey Peaks Zur
4. 111 9009 68 719 Device Calibration diene a a E A E OES R ARE RE 70 7 2126 NA LIE 71 8 u Instandhaltung MEET 73 8 1 Reinigung ass He 3 73 8 1 1 K vettenschachtabdeckung rengen 74 8 2 Desinfektion Dekontamination 0 0 0 eee eee eens 75 83 3 wee 00 75 8 3 1 Spektrometereinheit 0666 75 8 3 2 Fluoreszenzeinheit berpr fen troei ana aea e ce eee eee 79 8 3 3 gt Selbsttest des 2 2 80 8 4 73516 80 8 5 Dekontamination vor Versand 81 9 Problembehebung A ahs ace 7 1 80 83 SCH Allgemeine Fehler ar e a aa a aa e a aa a a e aa a p a AEE a a E RRA 83 9 2 FehlermMe ldungen iceriye ma aan Tan Ta EAR e aE nal adele een Ab Ase 85 93 Ergebniskennzelchnung emis Ai ie Seel el ate 22 ea Ae ern Ae Be ee eg re pl eg wate es 89 10 Transport Lagerung und Entsorgung ccc cece ce oss 93 101 Transport wc er eee ec ee 6 1111 93 10 2 ans I ARI Rane GaN 93 10 3 Entsorgung 7 2727 77 7 77 7 1 1 71 1 94 11 12 13 I
5. IP address Subnet mask Default gateway DNS Get DNS settings via DHCP Primary DNS server Secondary DNS server 192 168 20 61 255 255 255 0 192 168 20 1 Test MAC Info Save Cancel Funktionen Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 69 Deutsch DE General Device Settings Sprache ausw hlen Deutsch Englisch Franz sisch Spanisch Italienisch Ger tename H ufigkeit der automatischen Selbst berpr fung nach dem Einschalten des Ger ts einstellen Hinweis auf Anzeige des Lichtwegs Informationen zum letzen Selbsttest werden angezeigt Softkeys Save nderungen speichern und in die Funktionsauswahl zur ckkehren e Cancel In die Auswahl der Parametergruppe ohne nderung zur ckkehren Network Settings Fragen Sie ihren Netzwerk Administrator welche Einstellungen erforderlich sind Auswahl ob IP Einstellungen automatisch per DHCP erfolgen sollen Die IP Einstellungen k nnen auch manuell eingegeben werden IP Adresse Subnetzmaske Standardgateway Auswahl ob DNS Einstellungen automatisch per DHCP erfolgen sollen Nur verf gbar wenn IP Einstellungen automatisch per DHCP bezogen werden Folgende DNS Einstellungen k nnen manuell eingegben werden Prim rer DNS Server Sekund rer DNS Server Softkeys e MAC Info Informationen zu Netzwerkeinstellungen e Save nderungen speichern und in die Funktionsauswahl zur ckkehren e Cancel In die
6. X Nex they Last C Curve Fit Graph Abort lt Back Next gt Abs A 7 Quadratical regression 1 200 u Cone 924 41 A E H 34 52 A 2 Wei 14 0 900 i A Coefticient of Vd 4 determination 0 600 R 0 9970 0 300 4 i j 0 000 A and lt and gt E EES ES Next gt Softkeys Sobald die minimale Zahl von Ergebnissen f r die Auswertung mit dem gew hlten Verfahren Curve fit vorliegt wird das Auswertungsergebnis im rechten Teil der Anzeige dargestellt Eine vorzeitige Speicherung der Auswertung und Wechsel zur Probenmessung ber die Taste Next gt ist dann m glich Grafische Ansicht der Standardauswertung Mit den Cursor Tasten und navigieren Sie zwischen den Standards um die Ergebnisse anzuzeigen Bei mehr als einem Replikat pro Standard k nnen Sie mit und zwischen den Replikatergebnissen wechseln Auch aus der grafischen Anzeige k nnen Sie einzelne Standards anw hlen und messen oder neu messen e Table In die tabellarische Anzeige der Standardergebnisse wechseln Next gt Standardauswertung speichern und zur Probenmessung wechseln 46 Methoden Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Deutsch DE 6 5 3 measure samples Mit der Taste sample messen Sie der Reihe nach Ihre Proben Leerwertergebnisse bleiben f r eine Messreihe gespeichert eine neue Leerwertmessung ist aber jederzeit m glich Mit den Tasten und 9 k nnen Si
7. e Stadt ausw hlen e Anzeige der aktuellen Zeit ManuelleZeiteinstellung Datum und Zeit eingeben Netzwerkzeit Zeitserver Gew nschten Zeitserver eintragen Softkeys e Save nderungen speichern und in die Funktionsauswahl zur ckkehren Cancell In die Auswahl der Parametergruppe ohne nderung zur ckkehren Die Ger te berpr fung ist separat beschrieben siehe Ger t berpr fen auf S 75 7 1 6 Functions Main Groups Info Sub Groups Functions Results memory Gen method param Abs spectra library Device settings Device calibration Funktionen Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 71 Deutsch DE Unter dem Men punkt Copyright finden Sie Lizenzinformationen zur Open Source Software und Informationen zu eingetragenen Warenzeichen Funktionen 72 Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Deutsch DE Instandhaltung Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 73 Deutsch DE 8 Instandhaltung 8 1 Reinigung A GEFAHR Stromschlag durch eintretende Fl ssigkeit Schalten Sie das Ger t aus und trennen Sie es vom Stromnetz bevor Sie mit der Reinigung oder Desinfektion beginnen 9 Lassen Sie keine Fl ssigkeiten in das Geh useinnere gelangen F hren Sie keine Spr hreinigung Spr hdesinfektion am Geh use durch 9 Schlie en Sie das Ger t nur innen und au en vollst ndig getrocknet wieder an das Stromnetz an ACHTUNG Korrosion durch a
8. Luftfracht 40 C 55 C 10 95 30 kPa 106 kPa 10 2 Lagerung Lufttemperatur Relative Luftfeuchte Luftdruck in Transportverpackung 25 C 55 C 25 75 70 kPa 106 kPa ohne 5 C 45 C 25 75 70 kPa 106 kPa Transportverpackung 93 94 Transport Lagerung und Entsorgung Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Deutsch DE 10 3 Entsorgung Bei einer Entsorgung des Produkts sind die einschl gigen gesetzlichen Vorschriften zu beachten Hinweise zur Entsorgung von elektrischen und elektronischen Ger ten in der Europ ischen Gemeinschaft Innerhalb der Europ ischen Gemeinschaft wird die Entsorgung von elektrischen Ger ten durch nationale Vorschriften geregelt die auf der EU Richtlinie 2012 19 EU ber Elektro und Elektronik Altger te WEEE basieren Nach diesen Vorschriften d rfen alle nach dem 13 August 2005 gelieferten Ger te im Business to Business Bereich in den dieses Produkt einzuordnen ist nicht mehr im kommunalen Abfall oder Hausm ll entsorgt werden Um dies zu dokumentieren sind sie mit folgendem Symbol gekennzeichnet Da sich die Entsorgungsvorschriften innerhalb der EU von Land zu Land unterscheiden k nnen bitten wir Sie sich bei Bedarf bei Ihrem Lieferanten zu informieren Technische Daten Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Deutsch DE 95 11 Technische Daten 11 1 Stromversorgung Spannungsversorgung 100 V bis 240 V 10 50 Hz bis 60 Hz berspannungs
9. Regressionsauswertung deutet auf eine erhebliche Abweichung der Messpunkte von der Regressionsgeraden hin Tr bungen in der Messl sung Messungen an den Grenzen des photometrischen Messbereichs Abhilfe 9 Ergebnis der Standardauswertung akzeptieren oder Standards neu messen gt Auf klare Messl sungen achten Das Bestimmtheitsma f r die Regressionsauswer tung der Standardreihe ist lt 0 8 Bei Methoden mit Auswertung von Standardreihen uber Regressionsverfahren Warnung erscheint nach Messungen von Proben wenn die Regressionsauswertung fur die Standardreihe nichtlinear war die Standardauswertung aber vom Anwender akzeptiert wurde 9 Probenergebnisse unter dem genannten Vorbehalt verwenden oder Standardreihe und Proben neu messen Scan Einige gemessene Extinktionen sind zu hoch und werden nicht angezeigt Bei mindestens einer Wellenlange des Scans war die Extinktion oberhalb des Messbereichs Tr bungen in der Messl sung Messungen an den Grenzen des photometrischen Messbereichs gt Wenn die nicht angezeigten Bereiche des Scans relevant sind Probe verdunnen bzw durch Zentrifugation Trubung beseitigen und Messung wiederholen Extinktion bei der Messwellenlange ist zu hoch Emission bei der Messwellenlange ist zu hoch Tr bungen in der Messl sung Optische Flachen der Kuvette verschmutzt Kuvette in falscher Orientierung in den Kuvettenschacht gesteckt Photometrie zu
10. RiboGreen NanoOrange and Qubit are registered trademarks of Molecular Probes Inc USA Eppendorf and the Eppendorf logo are registered trademarks of Eppendorf AG Germany Eppendorf BioSpectrometer Eppendorf SpectraZoom and UVette are registered trademarks of Eppendorf AG Germany Registered trademarks and protected trademarks are not marked in all cases with or in this manual This product is manufactured under license to issued U S Patent No 6 122 052 Protected by U S Patent No 8 464 171 6137 900 058 03 062015 Inhaltsverzeichnis Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Deutsch DE Inhaltsverzeichnis T Amwendungshinweise cece cee cece cere tere cette reece tenses eens 7 1 1 Anwendung dieser Anleitung 7 1 2 Gefahrensymbole und Gefahrenstufen eeeeo eos 7 1 2 1 Gef hrensymbole 3 re see 7 ES SC Geelen EC EE EE 7 1 3 Darstellungskonventonen 222220 a E e E E een een en eee teen e eee eens 8 11111 9 2 Allgemeine Sicherheitsbhlnmwelse 2 6 11 2 1 Bestimmungsgem er Gebrauch 11 2 2 Anforderung an den Anwender 0 cee cence nent een nes 11 2 3 Gef hrdungen bei bestimmungsgem em Gebrauch 11 2 3 1 Personenischaden NEEN ENEE NENNEN EN ee a anne 11 2 3 2 Gef tesch den u N en AE
11. 0 oe samples S word Single A 2010 07 02 14 15 18 e Extinktion bei der 01 Sei KS Messwellenl nge e Nur bei Verd nnung oder anderer K vette als 10 mm Zus tzliche 4 390 Anzeige des Extinktionswerts vor Ayo 0 439 Avo on der Umrechnung a iv y Dilution ID Finish lt Back Next gt Multi A Ergebnisanzeige Mell Cues es measure samples Multi A 2010 07 09 16 08 45 gez Extinktionen bei den 01 u SS Messwellenl ngen Zusatzdaten Softkey Data e erw e Nur bei Verd nnung oder anderer 2 0 735 K vette als 10 mm xs Te Extinktionswerte vor der A4 0 006 Axe Umrechnung a vi Dilution Edit 1D J Eech 1 lt Back J Noxt gt Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Methoden 49 Deutsch DE Methodengruppe Photometrie Scan Ergebnisanzeige Scan check parameters measure samples A Samples dl Hp amp export If Scan 2010 07 09 16 08 18 Abs A 01 ID 0 800 0 600 0 400 ome C 0 000 230 260 290 am 350 A 305 Abs 0 012 a r I gan 10 J_Finish_J lt Back Next gt Erlauterung Ergebnisanzeige e Scan Graph mit Extinktions Wellenl nge Anzeige e Navigieren Sie zwischen den Messpunkten im Graphen mit und Hauptgruppe Routine Nucleic acids process results tx dsDNA measure samples dsDNA 2010
12. 07 16 16 32 54 heck parameters Abs A 01 ar Ch ID oe 25 2 vom DE 0 504 Ay 0 180 i A260 A280 1 86 0 090 info Pepe 0 000 290 260 290 320 am S i Sa A 260 Abs 0 504 H gt key Dilution H Gan H Data H Finish H lt Back H Next gt Ergebnisanzeige Konzentrationsergebnis mit Extinktion bei der Messwellenl nge Falls in den Parametern aktiviert Ratio A260 A280 Falls in den Parametern aktiviert Scan Navigieren zwischen den Messpunkten im Graphen die f r die Ergebnisberechnung herangezogen werden k nnen mit und O Zusatzdaten Softkey Data Sofern die entsprechenden Parameter aktiviert wurden Extinktionswert fur 280 nm Ratio A260 A230 und Extinktionswert fur 230 nm Extinktionswert f r die Background Wellenlange 50 Methoden Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Deutsch DE Methodengruppe Photometrie Proteins direct UV Ergebnisanzeige 66 samples process results L Albumin A 280 2010 12 16 18 05 23 Abs A 0 800 0 600 1 0 400 0 200 0 000 320 260 280 280 Abs 0 966 A nm 30 ID 1 46 nom 0 966 Ax da Dilution Edit ID Data Finish Next gt Erl uterung Ergebnisanzeige e Konzentrationsergebnis mit Extinktion bei der Messwellenlange Falls
13. 1 b A2 c d und a A7 b A2 c d 40 Methoden Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Deutsch DE Parameter Eingabe Erl uterung Formula d Werteeingabe Nur f r die Methodengruppe Dual wavelength Wert f r d in der Wert f r d in den Formeln a A1 b A2 c d und a A1 Auswerteformel b A2 c d Grenze max 5 stellig einschlie lich Dezimalpunkt Calculation Auswahl Auswerteverfahren f r die Berechnung der Factor Standard Probenkonzentration aus der gemessenen Extinktion Factor Werteeingabe Faktor fur die Umrechnung von Extinktionswerten RFU Werten Faktor in die Konzentration Grenze max 6 stellig Bei den folgenden Methodengruppen k nnen Sie auch einschlie lich negative Faktoren eingeben Dual wavelength Factor Dezimalpunkt Bei der Methodengruppe Dye labels geben Sie die Faktoren nicht einzeln im Methodenablauf ein Sie importieren sie ber die einfache Auswahl von Biomolek l sowie Farbstoff automatisch aus der Funktion General Method Parameters Protein Auswahl Nur f r die Methodengruppen Dye labels und Proteins direct Liste von Proteintypen UV die in der Funktion Bei der Auswahl des Proteins wird aus der Funktion General General Method Method Parameters Proteins auch der dort programmierte Parameters Proteins zugeh rige Parameter Factor importiert hinterlegt sind Standards Werteeingabe Zahl der verschiedenen Standardkonzentrationen f r die Zah
14. 16 16 32 54 Abs A 7 0 450 f A ah fA 25 2 0 270 0 180 0 090 j V key 0 000 E A ar 230 260 290 320 om Zoom More Calc Data Finish 1 5 3 2 7 Drucken und exportieren dsDNA Hneasure samples process results print amp export frew series dsDNA 2015 06 04 10 16 30 Data packets Samples Results Format Opata Gas GGraph OPDF Graph data XLS only OXLS amp PDF Method GParameters data packets Print Export Samples Finish lt Back Next gt 1 Dr cken Sie Finish um die Messreihe zu beenden und zur Methodenauswahl zur ckzukehren 2 Schalten Sie nach Abschluss aller Messungen das Ger t aus und schlie en Sie die K vettenschachtabdeckung um den K vettenschacht vor Verschmutzung zu sch tzen Bei einigen Methoden k nnen Sie im Methodenschritt process results Ergebnisse nachbearbeiten Zum Beispiel k nnen Sie in Spektren die Zoom Funktion SpectraZoom nutzen gt W hlen Sie mit den Cursor Tasten O und gezielt Ergebnisse der Messreihe fur die Nachbearbeitung aus 1 Stellen Sie Datenpakete fur alle oder fur ausgewahlte Proben zusammen 2 Drucken Sie die Daten aus speichern Sie sie auf einem USB Stick bertragen Sie sie ber ein USB Kabel an einen PC oder exportieren Sie sie per E Mail 5 3 3 d Bedienung Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 31 Deutsch DE Wichtige Hinweise f r die Messungen B
15. A and V keys 238 246 270 ois Move A cursor d and gt keys os Iran Ae Jest seve J carca Would you like to apply the change to all samples in the dsDNA 2010 07 02 14 series of measurements Yes Apply to all samples No Apply only to the current sample H J J Yes No Cancel Methoden Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 55 Deutsch DE Optionen f r die Nachbearbeitung werden auf den beiden linken Softkeys angeboten In diesem Beispiel Zoom und More Calculations Nach nderungen k nnen Sie den aktuellen Modus mit den beiden rechten Softkeys verlassen Save nderung speichern und zum Methodenschritt process results zur ckkehren Cancell Abbrechen und zum Methodenschritt process results zur ckkehren Nach Speicherung der nderungen k nnen Sie diese mit Yes auf alle Proben der Messreihe bertragen Methoden Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Deutsch DE 6 5 6 process results Optionen Zoom Dr cken Sie den Softkey Zoom und w hlen Sie eine der folgenden Varianten aus se eege Cursor Tasten und Wellenl ngen Cursor Abs A 01 S ID bewegen Dieser bestimmt den Zoom Mittelpunkt 0 460 ber der x Achse 0 400 25 2 e Cursor Tasten und Angezeigten Ausschnitts SE a der x Achse stufenweise nach dem A260 A280 1 86 SpectraZoom Verfahren vergr ern und Lc verkleinern 0 220 Der angezeigte A
16. Advanced Methoden f r die Auswertung von Zwei Wellenl ngen Messverfahren Favorites In Favorites k nnen Sie mit lt New Folder gt eigene Ordner einrichten und Ihre h ufig benutzten Methoden in diese Ordner kopieren um schnell auf diese Methoden zugreifen zu k nnen 34 Methoden Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Deutsch DE Tab 6 2 Fluorimetrische Methoden Routine Fluorimetrische Nukleins ure und Proteinmessungen mit den Reagenzien der Firma Invitrogen Die Durchf hrung dieser Verfahren k nnte eine Lizenz der Firma Molecular Probes Inc Eugene OR USA oder Invitrogen Corporation Carlsbad CA USA erfordern Basic e Methoden f r die Auswertung von Fluoreszenzmessungen mit Standard oder Standardkurve gerade e Methode Raw fluorescence f r die schnelle Messung der Fluoreszenz ohne weitere Auswertung In allen Ordnern k nnen Sie mit lt New Method gt neue Methoden erstellen In Favorites k nnen Sie eigene Ordner erstellen z B f r personenorientierte Zuordnung umbenennen und l schen Tab 6 3 Softkeys in der Methodenauswahl Cut und Paste Methoden ausschneiden und einf gen Copy und Paste Methoden kopieren und einfugen Delete Methoden l schen Renamel Methoden umbenennen Kopierte oder ausgeschnittene Methoden k nnen Sie entweder in einen anderen Ordner unter Favorites oder unter neuem Namen in den urspr nglichen Ordner einf gen Navigieren
17. Auswahl der Parametergruppe ohne nderung zur ckkehren 70 Funktionen Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Deutsch DE E Mail Settings mailserver example com Port EH Sender e mail address biospec example com SMTP authentication YE Password ed Recipient e mail address email example comy jv SMTP server Test ABC Save Cancel E mail address eat J New Delete ok Region Europe ly City Berlin I Current time 2015 06 04 10 16 00 Manual time setting Date 2015 06 04 YYYY MM DD Time 10 15 10 HH MM SS ONetwork time Time server pool nip org L_ tS save canca 7 1 5 Device Calibration E Mail Settings Fragen Sie ihren Netzwerk Administrator welche Einstellungen erforderlich sind SMTP Server E Mail Server eingeben e Port eintragen Absender Ger tenamen eingeben SMTP Authentifizierung verwenden Falls eine Authentifizierung erforderlich ist muss ein Benutzername und ein Passwort vergeben werden e Empf nger E Mail Adresse Liste mit E Mail Adressen E Mail Adressen bearbeiten Wahlen Sie in der Dropdownliste Edit und best tigen Sie mit enter Es ffnet sich ein Fenster in dem die E Mail Adressen bearbeitet werden k nnen Softkeys e Edit E Mail Adresse bearbeiten New Neue E Mail Adresse anlegen e Delete E Mail Adresse l schen Date and Time Settings Region ausw hlen
18. EG EN 2011 65 EU ce ce O Vorstand Board of Management 07 08 2013 ce ce Hamburg Date ce 6 6 o Eppendorf AG Barkhausenweg 1 22339 Hamburg Germany Sc Se ee no ce ce Ze te Te nu ce ee EY cE Ve CE Xe CE ce Ce SY ce Ce ce Cee 7 ce CE e 4 H e C a ce 6 A ce et 0015 033 50 LE ca cn ce et ce ce 6 LE ce Wis ce t c Evaluate Your Manual Give us your feedback www eppendorf com manualfeedback Your local distributor www eppendorf com contact Eppendorf AG 22331 Hamburg Germany eppendorf eppendorf com www eppendorf com eppendorf
19. Extinktionswerte auf S 99 Faktoren wie 50 fur die Berechnung von dsDNA Konzentrationen mussen daher nicht von Ihnen verandert werden wenn Sie den Parameter Cuvette verandern No of Werteeingabe Nur f r die Methodengruppe Multi A wavelengths Bereich 2 bis 6 Anzahl der Wellenlangen bei denen gemessen werden soll Wavelength Werteeingabe Messwellenlange Auf der Basis der bei dieser Wellenlange Messwellenlange in gemessenen Extinktion wird die Konzentration ausgerechnet nm Bei den Methodengruppen Multi A sowie Dual wavelength Bereich 200 bis 830 geben Sie mehr als eine Wellenl nge ein Fur einige nm Methodengruppen z B Nucleic acids und Proteins direct UV sind die Wellenlangen fest vorprogrammiert Bei der Methodengruppe Dye labels geben Sie die Messwellenlangen nicht einzeln im Methodenablauf ein Sie importieren sie Uber die einfache Auswahl von Biomolekul sowie Farbstoff automatisch aus der Funktion General Method Parameters Methoden Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Deutsch DE 39 Parameter Wavelength em Eingabe Auswahl 520 nm 560 nm Erl uterung Nur f r fluorimetrische Methodengruppe Basic Messwellenl nge Auf Basis der bei dieser Wellenl nge Emissionswellenl nge gemessenen Fluoreszenz wird die Konzentration ausgerechnet Bei den Methoden der Gruppe Routine ist die Wellenl nge fest vorprogrammiert Wavelength ex Keine Eingabe m glich Wellen
20. Fa eee 0 13 2 4 Hinweise zur Produkthaftumng 2 eee eo 14 2 5 Sicherheitshinweise am Ger t 14 3 7 4 le 3 3 9 15 3 1 1 0 15 3 2 Lieferumfang 1 111111111 15 3 3 Produkteigenschaften 20 et eee EEE EAEN 16 3 3 1 Methoden wars ner de NR 3 09 16 33 2 erlebe essen 16 232 Erfgebnisausgabe r 2 Hensel ee ENER STEE ew S 17 3 3 4 Selbsttest des Ger te 17 4 224 ei ola Gea Pa Ds ira eg 19 4 1 Installation vorbereiten ec ee 19 4 2 Standort wahlen a en ea ee ee 19 4 3 Ger tandashNetzanschleben rennen sense tence eee en 19 4 4 Ger t mit einem Netzwerk verbinden 0 cece cee eee eee e eee 20 4 5 Drucker am USB Anschluss anschlie en 0 cece ene 20 4 5 1 Thermodrucker DPU S445 222eooooo ts 20 4 6 PC oder USB Stick fur Datenexport anschlie en 2 2 2 eee 21 5a Bedienung a iis eens 5 0 0 5 E 0 00 23 5 1 bersicht Bedienelemente e deed BEE ee 2 23 5 1 1 TexXteingeben ara um 0 3 ST 25 5 2 KUVEette ISEBEN sn ES I SN Se te n A aa 26 5 3 bersicht ber den Messablaut isi eoret ian E a E a EAE I Ea e a E Ra 27 5 3 1 Messung vorbereiten 27 5 3 2 7 Messablauf ir un aan PES TTC mans bse Lge dna ENE 28 5 3 3 Wichtige Hinweise f r die Messungen tenes 31 Inhaltsverzeichnis Eppendorf BioSpectr
21. Ger t nur in der Originalverpackung ACHTUNG Sch den durch unsachgem e Reinigung des K vettenschachts gt Reinigen Sie den K vettenschacht nur mit einem feuchten Wattest bchen siehe Reinigung auf S 73 9 Lassen Sie keine Fl ssigkeit in den K vettenschacht gelangen 9 Fassen Sie nicht mit dem Finger in den K vettenschacht 2 4 Hinweise zur Produkthaftung In den folgenden F llen kann der vorgesehene Schutz des Ger ts beeintr chtigt sein Die Haftung f r entstehende Sach und Personensch den geht dann auf den Betreiber ber Das Ger t wird nicht entsprechend der Bedienungsanleitung benutzt Das Ger t wird au erhalb des bestimmungsgem en Gebrauchs eingesetzt Das Ger t wird mit Zubeh r oder Verbrauchsartikeln verwendet die nicht von Eppendorf empfohlen werden Das Ger t wird von Personen die nicht von Eppendorf autorisiert wurden gewartet oder instand gesetzt Am Ger t werden vom Anwender unautorisiert nderungen vorgenommen 2 5 Sicherheitshinweise am Ger t Darstellung A Bedeutung Gefahrenstelle gt Beachten Sie die Bedienungsanleitung Ort R ckseite des Ger ts Ger t nach dem ffnen justieren Adjust device after opening Wenn das Ger t ge ffnet wird muss es neu justiert werden gt Ger t nicht ffnen Unterseite des Ger ts Produktbeschreibung Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 15 Deutsch DE 3 Produ
22. Hellma k nnen einen K vettenleerwert bis ca A 1 besitzen Um diesen Betrag wird der verf gbare photometrische Messbereich reduziert Den K vettenleerwert k nnen Sie absch tzen wenn Sie die mit demineralisiertem Wasser gef llte K vette als Probe gegen den leeren K vettenschacht als Blank messen Der K vettenleerwert der Eppendorf uCuvette G1 0 ist zu vernachl ssigen nahe A 0 Fluorimetrie Eine erh hte Eigenfluoreszenz der K vette typisch bei K vetten aus Kunststoff kann den zur Verf gung stehenden Messbereich einschr nken Entfernen Sie nach der Messung die Messl sung vollst ndig bevor Sie die n chste Messl sung einf llen um Verschleppung zu minimieren Wenn aufgrund von hohen Konzentrationsunterschieden Verschleppung von einer Probe zur n chsten Probe zu erwarten ist sp len Sie die K vette zwischen den Messungen Bei Temperaturunterschieden zwischen Lampe und Umgebung kann photometrische Drift auftreten Bringen Sie daher ein Ger t das aus einer k lteren Umgebung kommt zun chst auf Umgebungstemperatur Vermeiden Sie schnelle Temperaturwechsel F hren Sie bei l ngeren Messreihen oder bei Messungen nach einem l ngeren Zeitraum eine neue Leerwertmessung durch Bedienung 32 Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Deutsch DE Methoden Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 33 Deutsch DE 6 Methoden 6 1 Methode ausw hlen Methoden und Methoden Templates sind bereits mit Auslieferung vorprogramm
23. ID Bedienung Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 29 Deutsch DE Bei Auswertung ohne Standards z B DNA Messungen entf llt dieser Methodenschritt 1 Messen Sie zun chst einen Leerwert Taste blank 2 Messen Sie der Reihe nach alle Standards Taste standard In der Anzeige ist jeweils der n chste zu messende Standard markiert Mit den Softkeys Graph bzw Table k nnen Sie die Ergebnisansicht wechseln gt Mit Next akzeptieren Sie die aus den Standardergebnissen errechnete Auswertung gt Mit der Taste sample messen Sie der Reihe nach Ihre Proben Leerwertergebnisse bleiben f r eine Messreihe gespeichert Eine neue Leerwertmessung ist aber jederzeit m glich In der hier gezeigten Abbildung eines Messablaufs mit Auswertung ber Standardkurve wird zus tzlich zum Probenergebnis der Graph der Standardauswertung angezeigt 30 Bedienung Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Deutsch DE 5 3 2 5 Methode abschlie en Bradford Hmeasure BEE measure samples i samples ERIC new series Bradtord 2010 11 25 16 28 23 Abs A 3 15 an x ID 9g 797 vom 0 929 Ary 0 600 0 300 Measure blank or sample wm i k 0 300 600 800 1206 6 ml GE Conc 797 Abs 0 929 A and Dilution Edit ID N Data Finish Next gt 5 3 2 6 Optional Ergebnisse nachbearbeiten dsDNA measure samples N process results print amp export new series dsDNA 2010 07
24. Konzentrations Graph en der Standardauswertung linear regression Polynomregression f r Polynom Mindestens 3 Standards ersten Grades quadratical regression Polynomregression f r Polynom Mindestens 4 Standards zweiten Grades cubical regression Polynomregression f r Polynom Mindestens 5 Standards dritten Grades spline interpolation Interpolation durch nat rliche Mindestens 3 Standards kubische Splines Zus tzlich kann f r Regressionsverfahren gew hlt werden dass die Regressionsgerade Regressionskurve durch den Nullpunkt geht 102 Auswerteverfahren Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Deutsch DE Verwenden Sie f r Kalibrationsgeraden das Verfahren linear regression Testen Sie bei kurvenf rmigen Verl ufen welches Auswerteverfahren quadratische Regression kubische Regression Spline Interpolation die f r die Standardauswertung am besten geeignete Funktion ergibt Die Spline Interpolation verbindet die Messpunkte durch kubische Polynome w hrend die Regressionsverfahren eine quadratische bzw kubische Funktion so zwischen die Messpunkte legen dass f r die Messpunkte m glichst geringe Abweichungen von der Funktion resultieren Bei den Regressionsverfahren wird neben der berechneten Regressionsgleichung auch das Bestimmtheitsma coefficient of determination als Ma f r die Streuung der Messpunkte um die berechnete Funktion angezeigt Bei einem Wert von lt 0 8 f r das Best
25. Messungen bereit siehe K vette einsetzen auf S 26 3 Stellen Sie die Messl sungen f r die Messungen der Leerwerte ggf der Standards und der Proben bereit 4 ffnen Sie die Abdeckung des K vettenschachts Messlosungen fur Standards und Proben mit geringeren Extinktionen als 0 05 A sollten nicht eingesetzt werden Die Nachweisgrenze des Gerats liegt zwar wesentlich niedriger jedoch ist der Einfluss von St rungen aus den Messl sungen z B Partikel Blasen Trubungen auf die Zuverl ssigkeit des Ergebnisses bei diesen geringen Extinktionen sehr gro Weitere Informationen wie z B den Userguide Nr 013 finden Sie auf unserer Internetseite www eppendorf com 28 Bedienung Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Deutsch DE 5 3 2 Messablauf 5 3 2 1 Methode ausw hlen Method Selection Main Groups Methods Photometry Sub Groups Bradford Bradford micro BCA BCA micro Lowry Lowry micro B lt New Method gt Cut lI Copy Rename Delete Paste CH check parameters measure standards measure samples P Cuvette 10 mm Page 1 2 Wavelength 595 nm Unit pg mL Calculation Standard Standards 6 Replicates 1 Decimal places 0 Autoprint off Edi paramotors Page dn Abort lt Back Next gt 5 3 2 2 Parameter pr fen CH check parameters measure standards measure samples L Cuvette 10 mm Page 1 2 Wavel
26. Parameter ist nicht definiert gt Wahlen Sie einen anderen Parameter aus der vorhandenen Liste Falls erforderlich programmieren Sie in General Method Parameter einen neuen Listeneintrag um bei der Programmierung einer Methode darauf zur ckgreifen zu k nnen Ung ltiges Zoom Intervall Beim Zoom Vorgang mit freier Eingabe der Grenzen Softkey Free Die Untergrenzen f r den Zoombereich wurden unterschritten gt Werte so eingeben dass das Intervall nicht die Berreichsgrenzen von 0 02 A und 10 nm unterschreitet Die eingegebenen Standardkonzentrat ionen sind nicht monoton steigend bzw monoton fallend Bitte Standardkonzentrat ionen korrigieren Siehe Fehlertext gt Die Standardkonzentrationen so eingeben dass der erste Standard die niedrigste Konzentration erh lt und die weiteren Standardkonzentrationen eine aufsteigende Folge bilden Mindestens zwei eingegebene Standardkonzentrat ionen sind gleich Bitte Standardkonzentrat ionen korrigieren Siehe Fehlertext gt Die Standardkonzentrationen so eingeben dass der erste Standard die niedrigste Konzentration erh lt und die weiteren Standardkonzentrationen eine aufsteigende Folge bilden Problembehebung Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Deutsch DE 87 Symptom Meldung Die Messwerte sind nicht streng monoton M gliche Ursache Fehler bei der Messung einer Standardreihe Die gemesse
27. Peak Erkennung k nnen Sie zwei Kriterien variieren A Raster Beurteilungsraster auf der Wellenl ngenskala f r die Peak Erkennung z B 10 nm Beispiel 10 nm Der Spektrenausschnitt von 5 nm bis 5 nm in Bezug auf den zu erkennenden Peak wird beurteilt e Mind A Abs Minimale Differenz zwischen dem zu erkennenden Peak und der niedrigsten Extinktion im Beurteilungsraster Gleichzeitig darf kein Extinktionswert im Raster h her sein als der Wert des Peaks z B 0 5 58 Methoden Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Deutsch DE Beispiele 0 process results peak detect Scan 2010 07 09 16 01 35 Abs A 03 ID 0 800 2 Raster 100 nm 0 600 Min A Abs 0 050 0 400 929 A resolution 0 000 4 and P keys 5 200 50 0 ne A eo A and V keys J Peak table I Save Cancel EOE process results peak detect Scan 2010 07 09 16 01 35 Abs A 03 ID 0 800 2 Raster 20 nm 0 600 Min A Abs 0 400 0 400 0 200 Ar on 0 000 gek i 230 260 290 320 350 Nam yove A cursor A and V keys Scan 2010 07 09 16 01 35 03 ID 2 Raster 20 nm Min A Abs 0 050 230 260 290 320 350 Nam A Raster 100 nm Mind A Abs 0 050 Der Peak wird nicht erkannt da das A Raster zu gro ist Die Extinktionen am linken Rand des Rasters sind gr er als die Extinktion des Peaks A Raster 20 nm Mi
28. Ratio A260 A280 und Ratio A260 A230 Ratio Werte nur f r Nukleins uren Extinktions Wellenl ngen Spektrum Bei der Methodenprogrammierung werden durch einfache Auswahl des Biomolek ls sowie des Farbstoffs aus vorgegebenen Listen verschiedene zugeh rige Parameter wie Messwellenl ngen und Auswertefaktoren importiert Die Definition dieser Parameter erfolgt separat in den Funktionen der Gruppe Gen method param Verschiedene Nukleins uren Proteine und Farbstoffe sind in Gen method param vorprogrammiert Sie k nnen weitere Nukleins uren Proteine und Farbstoffe hinzuf gen Nur f r markierte Nukleins uren Umrechnung der Konzentrationen in molare Konzentrationen sowie nach Eingabe des Probenvolumens in Nukleins ure und Farbstoffmengen m glich Methodenschritt process results Bacterial density e Tr bungsmessung zur Bestimmung der Bakteriendichte Messung bei 600 nm ist bereits vorprogrammiert Zusatzinformationen Extinktions Wellenl ngen Spektrum 6 2 3 Methodengruppe Basic Factor Standard Messung bei einer Wellenl nge und Auswertung ber Faktor oder Standard e Methoden f r die Auswertung ber Faktor und Standard sind vorprogrammiert Calibration curve Messung bei einer Wellenl nge und nachfolgende Auswertung mit einer Reihe von 2 bis 12 Standards Verschiedene Auswerteverfahren Curve fit wie lineare Regression nichtlineare Regression sind ausw hlbar Grafische und tabellarische Anzeige
29. Sie mit den Cursor Tasten in die Spalte Methods des gew nschten Ordners und dr cken Sie pastel zum Einf gen der Methode 6 2 Methodenbeschreibung Photometrie In diesem Kapitel werden die vorprogrammierten Methoden und Methoden Templates beschrieben 6 2 1 Methodengruppe Absorbance Single A Extinktionsmessung bei einer Wellenl nge e Keine nachgeschaltete Auswertung Multi A Extinktionsmessungen bei zwei bis sechs Wellenl ngen Keine nachgeschaltete Auswertung Scan Messung eines Extinktions Wellenlangen Spektrums ber einen definierten Wellenl ngenbereich e Anzeige von Wellenl nge und Extinktion im Spektrum durch Navigation mit einem Wellenl ngen Cursor Ver nderung des Spektrenausschnitts ber 3 verschiedene Zoom Varianten m glich Peak Erkennung m glich Methoden Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Deutsch DE 6 2 2 Methodengruppe Routine Die Methoden der Gruppe Routine sind als feste Methoden vorprogrammiert Nach nderung von Methodenparametern in den fest vorprogrammierten Methoden muss daher ein neuer Methodenname vergeben werden Nucleic acids Konzentrationsbestimmung von Nukleins uren durch Messung bei 260 nm und Auswertung ber Faktor Verschiedene Nukleins uremethoden wie dsDNA oder RNA sind vorprogrammiert Die Parameter unterscheiden sich durch den Faktor Vorprogrammierte Methode f r Mikroliterk vetten Messung von DNA in Probenvolumen im Mikroliterbereich mit Li
30. aufrufen und eine neue Messreihe starten i Info new IL _Finisn lt Back 1 Messreihe abschlie en und eine neue Methode w hlen e Softkey Finish Messreihe abschlie en und Methodenauswahl aufrufen Funktionen Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 63 Deutsch DE 7 Funktionen 7 1 Funktionen der Hauptgruppe User Mit der Taste function oder dem Softkey Function gelangen Sie in ein Menu mit Funktionen wie Ger teeinstellungen oder Abrufen gespeicherter Ergebnisse Die Funktionen sind analog zur Methodenauswahl in 3 Spalten strukturiert F r Sie sind die Funktionen in der Hauptgruppe User zug nglich Wie in der Methodenauswahl navigieren Sie mit den Cursor Tasten um zun chst die gew nschte Untergruppe und danach in der rechten Spalte die gew nschte Funktion auszuw hlen Mit enter rufen Sie die Funktion auf Functions Main Groups SOUPS Functions User Albumin A 280 Gen method param D Abs spectra library Device settings Device calibration Info Inte H H Method Softkey Info Firmware Version und Seriennummer des BioSpectrometer fluorescence aufrufen Tab 7 1 bersicht ber die Funktionen Untergruppe Erl uterung Results memory Gespeicherte Ergebnisse anzeigen Die Ergebnisse sind nach Methoden und nach Messreihen strukturiert abrufbar und k nnen aus dem Speicher heraus gedruckt und exportiert werden General method pa
31. d Faktoren die in den Parametern eingegeben werden Es k nnen auch negative Zahlen eingegeben werden 108 Auswerteverfahren Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Deutsch DE 12 8 Fluorimetrie 12 8 1 RFU Werte Relative Fluorescence Unit RFU Werte sind ein Ma f r die gemessene Fluoreszenz Anders als die Extinktionswerte bei der Photometrie sind die RFU Werte nicht von Ger t zu Ger t vergleichbar sondern m ssen immer auf Standards bekannter Fluoreszenz oder Konzentration bezogen werden 12 8 2 Blank Alle RFU Werte sind immer auf den zuletzt gemessenen Blank Leerwert bezogen Eine Blank Messung ist daher zu Beginn einer jeden Messreihe obligatorisch und auch w hrend einer Messreihe jederzeit m glich Die Blank Messung sollte idealerweise alle Einflussm glichkeiten auf den RFU Wert der Messl sung kompensieren k nnen Der Blank sollte daher mit dem auch f r die Probenmessung benutzten Puffer sowie in derselben K vette wie der Probenwert gemessen werden es sei denn die f r Blank und Probenmessung benutzten K vetten sind optisch gegeneinander abgeglichen haben also denselben RFU Wert bei der Messwellenl nge 12 8 3 Auswertung mit Standard und Standardkurve gerade Verd nnung Die Auswertung mit einem Standard bzw mit Standardkurve gerade ist analog zur Auswertung photometrischer Methoden siehe Auswertung mit Faktor oder Standard auf S 100 Wird mit mehr als einem Standard ausgewertet k nnen mit dem Cur
32. der Standardergebnisse Nutzung der letzten gespeicherten Standardauswertung ist m glich Eine Methode f r die Auswertung mit Standardkurve ist vorprogrammiert Methoden Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 37 Deutsch DE 6 2 4 Methodengruppe Advanced Dual wavelength Messung bei zwei Wellenl ngen und Auswertung der gemessenen Extinktionswerte Uber zwei Grundformeln Subtraktion Division e Varianten der Grundformeln k nnen definiert werden Des Resultat kann mit einem Faktor mit einem Standard oder mit einer Standardreihe ausgewertet werden e Methoden f r die Berechnung ber Subtraktion sowie ber Division und nachfolgender Auswertung mit Faktor sind vorprogrammiert 6 3 Methodenbeschreibung Fluorimetrie 6 3 1 Methodengruppe Routine Die Methoden der Gruppe Routine sind als feste Methoden vorprogrammiert Nach nderung von Methodenparametern in den fest vorprogrammierten Methoden muss daher ein neuer Methodenname vergeben werden Die folgenden vorprogrammierten Methoden basieren auf den Arbeitsvorschriften der Firma Invitrogen f r das jeweilige Reagenz Die Durchf hrung dieser Verfahren k nnte eine Lizenz der Firma Molecular Probes Inc Eugene OR USA oder Invitrogen Corporation Carlsbad CA USA erfordern Nucleic acids Fluorimetrische Konzentrationsbestimmung von Nukleins uren nach Reaktion mit Reagenzien Messung von DNA mit PicoGreen Auswertung mit Standardkurve gerade Messung vo
33. durch den Messablauf gef hrt Eine Hilfebox in der Anzeige gibt Ihnen bei Bedarf Hinweise Die 3 runden Messtasten standard blank sample erm glichen den schnellen direkten Start einer Messung Produktbeschreibung Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 17 Deutsch DE 3 3 3 Ergebnisausgabe Das BioSpectrometer fluorescence gibt die Ergebnisse ber die Ger teanzeige oder ber einen bei Eppendorf erh ltlichen Drucker aus ber den USB Anschluss k nnen Sie Ergebnisdaten aus dem Ger t auf einen USB Stick einen Drucker oder direkt auf einen PC bertragen Wenn das Ger t mit einem Netzwerk verbunden ist k nnen die Ergebnisse auf einem Netzwerkdrucker ausgedruckt oder per E Mail verschickt werden Es ist nicht m glich die Ergebnisse auf einem Netzlaufwerk zu speichern 3 3 4 Selbsttest des Ger ts Direkt nach dem Einschalten berpr ft das Ger t selbstt tig die Funktion der Spektrometereinheit und der Fluoreszenzeinheit Um das Ger t umfassender zu pr fen rufen Sie die Funktion Device calibration auf siehe Selbsttest des Ger ts auf S 80 Produktbeschreibung 18 Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Deutsch DE Installation Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 19 Deutsch DE 4 Installation 4 1 Installation vorbereiten gt Heben Sie den Transportkarton und das Verpackungsmaterial f r einen sp teren sicheren Transport oder f r eine Lagerung auf gt Kontrollieren Sie anhand der Angaben zum Lieferu
34. elektronischen Bauteilen durch Kondensatbildung Nach dem Transport des Ger ts von einer k hlen in eine w rmere Umgebung kann sich im Ger t Kondensat bilden gt Warten Sie nach dem Aufstellen des Ger ts mindestens 3 h Schlie en Sie das Ger t erst danach an das Stromnetz an ACHTUNG Beeintr chtigung der Funktion durch mechanische Sch den gt Stellen Sie nach einer mechanischen Besch digung des Ger tes durch eine berpr fung sicher dass die Mess und Auswertefunktionen des Ger tes korrekt ablaufen ACHTUNG Sch den durch berhitzung 9 Stellen Sie das Ger t nicht in der N he von W rmequellen z B Heizung Trockenschrank auf 9 Setzen Sie das Ger t keiner direkten Sonneneinstrahlung aus gt Gew hrleisten Sie eine ungehinderte Luftzirkulation Halten Sie um alle L ftungsschlitze einen Abstand von mindestens 5 cm frei Allgemeine Sicherheitshinweise 14 Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Deutsch DE ACHTUNG Sachsch den durch falsche Anwendung 9 Setzen Sie das Produkt nur f r den in der Bedienungsanleitung beschriebenen bestimmungsgem en Gebrauch ein 9 Achten Sie auf eine ausreichende Materialbest ndigkeit bei der Anwendung von chemischen Substanzen gt Wenden Sie sich in Zweifelsf llen an den Hersteller dieses Produktes ACHTUNG Sch den durch unsachgem e Verpackung Die Eppendorf AG haftet nicht f r Sch den durch unsachgem e Verpackung 9 Lagern und transportieren Sie das
35. hlte Parametergruppe editieren e New Neue Parametergruppe erstellen e Delete Ausgew hlte Parametergruppe l schen e OK In die Funktionsauswahl zur ckkehren Funktionen Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 65 Deutsch DE gt Wenn Sie Ergebnisse drucken oder exportieren m chten w hlen Sie die Datenpakete aus Der Ablauf f r Druck und Export sowie die Bedeutung der Funktionstasten entspricht dem Methoden Schritt print amp export gt Wahlen Sie in der rechten Spalte die Parametergruppe aus f r die Sie Parameter editieren m chten gt Best tigen Sie mit enter In diesem Beispiel sind Parametergruppen f r verschiedene Dyes Farbstoffkomponenten f r die Dye Methoden zusammengefasst und jeweils unter einem Namen abgelegt Unter diesem Namen kann die gew nschte Parametergruppe bei der Editierung einer Dye Methode in das Methodenprogramm importiert werden Display links Name des Dyes W hlen Sie mit O und rechts zugeh rige Parameter 66 Funktionen Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Deutsch DE General Method Parameter Dye name New dye Wavelength 550 nm J Ext coeff 100000 L mol cm Factor 10 pMol pL Corr A260 19 0 Corr A280 0 Keyboard H ab H 1 ok Cancel Softkeys gt Um eine Parametergruppe zu editieren w hlen Sie mit und den zu editierenden Parameter gt Best tigen Sie mit enter e OK Eingabe speichern
36. hohe Extinktion der Messl sung Fluorimetrie zu hohe Emission der Messl sung gt Unter Ber cksichtigung der m glichen Ursachen neu messen Das berechnete Ergebnis ist negativ Messl sung falsch angesetzt Faktor falsch eingegeben falsches Vorzeichen gt Unter Ber cksichtigung der m glichen Ursachen neu messen Mindestens eines der Ergebnisse ist negativ Bei Methoden mit mehreren Ergebnissen z B Dye labels Messl sung falsch angesetzt Faktor falsch eingegeben falsches Vorzeichen gt Unter Ber cksichtigung der m glichen Ursachen neu messen Problembehebung Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Deutsch DE 91 Symptom Meldung Ergebnis hat mehr als 6 Vorkommastellen M gliche Ursache Sehr hohe Probenkonzentration Konzentrationseinheit passt nicht zu dem erwarteten Bereich der Probenkonzentrationen Abhilfe gt Probe verd nnen und neu messen gt Konzentrationseinheit Parameter Unit ndern und neu messen Das Ergebnis liegt um mehr als 5 au erhalb des Bereichs der Standardkonzentrat ionen Bei Methoden mit Auswertung ber Standardkurven nichtlinearen Auswerteverfahren Das Probenergebnis liegt um mehr als 5 au erhalb des Bereichs der Standardkonzentrationen gt Probe unter Bedingungen neu messen unter denen das Ergebnis im Bereich der Standardkonzentrationen liegt Probe verd nnen Standardkonzentrationen v
37. in Betrieb die fachgerecht installiert oder instand gesetzt wurden gt Trennen Sie das Ger t im Gefahrenfall von der Netzspannung durch Ziehen des Netzsteckers aus dem Ger t oder der Netzsteckdose oder mit Hilfe der vorgesehenen Trennvorrichtung z B Notschalter im Labor WARNUNG Schaden durch UV Strahlung Mikroliterk vetten wie z B Hellma TrayCell oder Mikroliterk vetten hnlicher Bauart leiten die Strahlung der Lichtquelle innerhalb der K vette um sodass die Strahlung der Lichtquelle bei nicht geschlossenem Deckel nach oben austreten kann gt Vergewissern Sie sich vor dem Start einer Messung dass der Deckel auf der Mikroliterk vette aufliegt WARNUNG Gesundheitssch digung durch giftige radioaktive oder aggressive Chemikalien sowie durch infekti se Fl ssigkeiten und pathogene Keime gt Beachten Sie die nationalen Bestimmungen zum Umgang mit diesen Substanzen die biologische Sicherheitsstufe Ihres Labors sowie die Sicherheitsdatenbl tter und Gebrauchshinweise der Hersteller 9 Tragen Sie Ihre pers nliche Schutzausr stung Entnehmen Sie umfassende Vorschriften zum Umgang mit Keimen oder biologischem Material der Risikogruppe Il oder h her dem Laboratory Biosafety Manual Quelle World Health Organization Laboratory Biosafety Manual in der jeweils aktuell g ltigen Fassung WARNUNG Gesundheitsgefahr durch kontaminiertes Ger t und Zubeh r gt Dekontaminieren Sie Ger t und Zubeh r vor dem Lag
38. in den Parametern aktiviert Scan Navigieren zwischen den Messpunkten im Graphen die fur die Ergebnisberechnung herangezogen werden konnen mit und O Zusatzdaten Softkey Data Sofern die entsprechenden Parameter aktiviert wurden e Extinktionswert f r 260 nm e Extinktionswert f r die Background Wellenl nge Proteins with reagent Bradford Abs A 1 200 IBA S 0 900 pte 0 600 Pal 0 300 f 0 000 0 300 600 900 amer ml Conc 213 Abs 0 393 samples print amp export Bradford 2010 11 25 16 28 23 08 ID 2 1 3 pg mL 0 393 Ass A ar Dilution 1 Edit ID Dai Finish SS Next gt Ergebnisanzeige e Konzentrationsergebnis mit Extinktion bei der Messwellenlange e Bei Auswertung mit Standardreihe Graph der Standardauswertung mit eingezeichnetem Probenergebnis Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Methoden 51 Deutsch DE Methodengruppe Photometrie Dye labels Ergebnisanzeige measure samples process results ase ssDNA Cy 3 Icheck parameters ssDNA Cy 3 2010 11 24 14 37 18 Abs A 02 0 440 ID 0 350 1 0 DH 0 pg mL 0 260 W 0 269 Are J 0 170 Dye 1 0 25 1pMobpt I LN 0 080 i Info mn 30 40 520 e Ami A 260 Abs 0 269 4 r Dilution Edit ID Data Finish lt Back Next gt Erlauterung Ergebnisanzeige e Konzent
39. regression wurde kein verwertbares Ergebnis erhalten Einige Bei mindestens einer gt Wenn die Extinktionswerte der Extinktionswerte bei Nebenwellenl ngen sind zu hoch und werden nicht angezeigt Nebenwellenl nge war die Extinktion oberhalb des Messbereichs Nebenwellenl ngen werden nicht f r die Berechnung des Konzentrationsergebnisses herangezogen sondern f r andere Zwecke benutzt Z B Methode dsDNA Extinktion bei 280 nm f r die Berechnung von Ratio 260 280 Tr bungen in der Messl sung Messungen an den Grenzen des photometrischen Messbereichs Nebenwellenl ngen relevant sind Probe verd nnen bzw durch Zentrifugation Tr bung beseitigen und Messung wiederholen Das Ergebnis liegt au erhalb des Bereichs der Standardkonzentrat ionen Bei Methoden mit Auswertung ber Standardkurven nichtlineare Auswerteverfahren Das Probenergebnis liegt um bis zu 5 au erhalb des Bereichs der Standardkonzentrationen 9 Messergebnis akzeptieren oder Probe unter Bedingungen neu messen bei denen das Ergebnis im Bereich der Standardkonzentrationen liegt Probe verd nnen oder Standardkonzentrationen ver ndern und neu messen 90 Problembehebung Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Deutsch DE Symptom Meldung Das Bestimmtheitsma ist lt 0 8 Mogliche Ursache e Bei Methoden mit Auswertung von Standardreihen ber Regressionsverfahren Das Bestimmtheitsma f r die
40. 2 5 3 Umrechnung in molare Konzentrationen und Nukleins uremengen 104 12 5 4 Berechnung des Faktors f r Protein in General Method Parameter 105 12 6 Spezielle Auswerteverfahren f r die Dye Methoden 106 12 6 1 Berechnung des Faktors f r den Farbstoff aus dem Extinktionskoeffizienten 106 12 6 2 Berechnung der FOI 2 2 3 0 re ee 106 12 6 3 Umrechnung in Farbstoffmengen eeeeeee ee eee 107 12 7 Dual wavelengths ten sca cca leon AER E ee SEENEN er ee ices i eS 107 1228 5 Puttes ter Muda 35 5 6 0 108 12 81 3 3 320 090 108 12 8 2 Blank ee e EE ee ee 108 12 8 3 Auswertung mit Standard und Standardkurve gerade Verd nnung 108 Bestellinformationen cc ccc ce cece eee cere eee eee eee ee eter tense eens 109 Zertifikate 1111 15900 111 6 Inhaltsverzeichnis Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Deutsch DE Anwendungshinweise Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Deutsch DE 1 Anwendungshinweise 1 1 Anwendung dieser Anleitung gt Lesen Sie diese Bedienungsanleitung vollst ndig bevor Sie das Ger t das erste Mal in Betrieb nehmen Beachten Sie ggf die Gebrauchsanweisungen des Zubeh rs Diese Bedienungsanleitung ist Teil des Produkts Bewahren Sie sie gut erreichbar auf F gen Sie diese Bedienungsanleitung bei Weitergabe des Ger ts an Dritte bei gt Die aktuelle Versio
41. 4 0 9620 989 1 469 1 503 0 139 0 162 0 955 0 981 1 439 1 474 0 130 0 153 0 917 0 966 1 364 1 417 1 015 1 166 0 127 0 150 0 896 0 948 1 308 1 367 Random error of wavelength Random error of photometer Limiting values CV Grenzwerte VK 3 0 52 0 515 550 800 nm 53 0 52 0 53 0 Fluorescence unit SN 6137 Zeng EE 0 95 1 05 0 95 1 05 Random error of fluorescence Zuf llige Messabweichung der Fluorescencemessung Pp Limiting values CV Grenzwerte VK 7 Wavelength and photometric accuracy Wellenl ngen und photometrische Richtigkeit traceable to r ckf hrbar auf NIST SRM 2034 SN 04 A und SN 667 au characterization i is Seege ona Cay 100 Bio er UV Vis spectrophotometer SN EL 99023107 The instrument is requalified regularly by the manufacturer and is confirmed and documented to perform within manufacturer s specifications The current instrument qualification is valid through April 2014 For the current instrument qualification the following NIST traceable certified secondary spectrometric calibration standards were used Alle Fre werden auf einem Soen 100 Bio Referenz UV Vis Spektrophotometer Seriennummer EL99023107 durchgef hrt Dieses Instrument wird regelm ig vom Hersteller requalifiziert und die spezifikationsgem e Funktion dokumentiert Die aktuelle Qualifizierung ist bis April 2014 g ltig und verwendet folgende NIST r ckf hrbare und zertifizierte spektrom
42. B dsDNA E Bradford Main Groups Sub Groups GEW choose measurement series Parameters ample results L gt Wahlen Sie die gewunschte Messreihe mit den Cursor Tasten D dsDNA 2010 07 09 15 07 35 ee B dsDNA 2010 07 08 11 02 35 gt Best tigen Sie mit enter dsDNA Ehoose measurement Betrag Wie im Methodenablauf k nnen Sie auch hier der Reihe nach durch die Anzeigen der Parameter der Cuvette 10 mm eee Standards der Probenergebnisse und zuletzt der Unit pg mL Datenpakete fur Druck und Export wechseln Molar Unit pmol mL Die Belegung der Softkeys entspricht der Belegung Factor 50 im Methodenablauf Decimal places 1 A260 A280 on A260 A230 off Autoprint off Page at Page ut Page dn Abort lt Back Next gt dsDNA ar parameters sample results DNA 2012 06 29 155728 Data packets Samples Results print amp export Data Graph data not for printing Method GParameters __Print_ _Export_ Samples Finish lt Back Nox gt 7 1 2 General Method Parameters Functions Main Groups Sub Groups Functions Proteins HIE Nucleic acids me I I I EC Dye name ey5 Wavelength 650 nm Ext coeff 250000 L mol cm pMol pL Corr A260 Io Corr A280 0 05 Factor Edit J New H Delete H H OK Softkeys e Edit Ausgew
43. Extinktion bei der Messwellenl nge des Biomolek ls 260 bzw 280 nm Die Farbstoffspektren haben z T eine geringe Extinktion bei 260 und 280 nm Diese Extinktionen verf lschen die Berechnungen f r die Nukleins uren bzw Proteine dieser Methoden Zur Minimierung dieser Verf lschung werden Korrekturfaktoren benutzt sofern diese f r die jeweiligen Farbstoffe bekannt sind Wird der Parameter eingeschaltet wird der Korrekturfaktor aus der Funktion General Method Parameters Dyes importiert Correct A 280 1 Dye 2 active Dye 2 Auswahl ein aus Auswahl ein aus Auswahl Liste von Farbstoffen die in der Funktion General Method Parameters Dyes hinterlegt sind Nur fur die Methodengruppe Dye labels Zur Erlauterung siehe Beschreibung des obigen Parameters Correct A 260 1 Nur fur die Methodengruppe Dye labels Moglichkeit auch einen zweiten Farbstoff parallel zu messen Anwendung Markierung eines Biomolekuls mit zwei Farbstoffen Nur fur die Methodengruppe Dye labels bei Messung von 2 Farbstoffen Auswahl des zweiten Farbstoffs vgl Parameter Dye 1 Correct A260 2 Auswahl Nur fur die Methodengruppe Dye labels bei Messung von 2 ein aus Farbstoffen Analog zu Parameter Correct A 260 1 Correct A 280 2 Auswahl Nur fur die Methodengruppe Dye labels bei Messung von 2 ein aus Farbstoffen Analog zu Parameter Correct A 280 1 Show scan Auswahl Anzeige eines Scans Extinktions Wellenlangen G
44. FOI Background Extinktionen Fluorimetrie RFU Konzentration Display VGA TFT Display 5 7 Sprachen f r Bedienerf hrung Englisch Franz sisch Spanisch Italienisch Deutsch Schnittstellen USB Master F r USB Stick und Thermodrucker DPU S445 USB Slave F r Verbindung mit einem PC Serielle Schnittstelle RS 232 F r Thermodrucker DPU 414 Ethernet Schnittstelle RJ45 F r Verbindung mit einem Netzwerk Angeschlossene Ger te m ssen den Sicherheitsanforderungen gem IEC 60950 1 entsprechen Technische Daten 98 Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Deutsch DE 11 7 Anwendungsparameter Methoden Vorprogrammierte und frei programmierbare Methoden f r alle Mess und Auswerteverfahren e Extinktionsmessungen bei einer oder mehreren Wellenl ngen Scans Fluoreszenzmessungen bei 520 nm oder 560 nm Nukleins uren und Proteine OD600 Dye Methoden parallele Messung von Biomolek l und Farbstoff Markierung Methoden mit Auswertung ber Faktor Standard und Standardreihe Zweiwellenl ngen Verfahren mit Subtraktions und Divisionsauswertung Methodenabh ngige Auswertung Extinktion Konzentration ber Faktor und Standard RFU Konzentration ber Standard Konzentration ber Standardreihe e Lineare Regression e Nichtlineare Regression Polynom 2 und 3 Grades e Spline Auswertung e Lineare Interpolation Punkt zu Punkt Auswertung Extinktionsverrechnungen ber Subtraktion und Div
45. Ger t entfernt gt USB Stick neu formatieren oder ersetzen gt USB Stick erneut anschlie en und Export wiederholen Der Drucker konnte nicht initialisiert werden Drucker nicht angeschlossen oder ausgeschaltet Drucker falsch konfiguriert gt Drucker anschlie en und anschalten gt Drucker neu konfigurieren Die Druckereinstellungen zur richtigen Konfiguration finden Sie in der Installationsbeschreibung siehe Drucker am USB Anschluss anschlie en auf S 20 Blank Messung Eine Intensit t an einem eine Haupt oder Neben oder Scanwellenl nge beeinflussenden Pixel ist zu niedrig e Die fur die Blank Messung benutzte Leerwertl sung hat eine zu hohe Extinktion Falsche oder tr be Leerwertl sung e Bei Scans Wellenl ngenbereich zu gro da die Probe in einem Teil des Wellenl ngenbereichs sehr stark absorbiert 9 Leerwertl sung berpr fen und Blank ggf neu messen gt Bei Scans Wellenl ngenbereich an Spektrum der Probe anpassen Blank Messung Die Emission an der Messwellenl nge ist zu hoch e Die f r die Blank Messung benutzte Leerwertl sung hat eine zu hohe Fluoreszenz Falsche oder tr be Leerwertl sung 9 Leerwertl sung berpr fen und Blank neu messen Der eingegebene Name ist nicht g ltig Fehler bei der Eingabe von Namen Verschiedene Ursachen sind m glich Zur konkreten Ursache bitte die Information in der Hilfebox be
46. H h tt z x elvipln m 7 Numeric keypad Save Eingegebenen Text speichern Numbers Space pads Cancel Texteingabe abbrechen Numbers abc Save H Cancel 26 Bedienung Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Deutsch DE 52 K vette einsetzen In die K vettenaufnahme k nnen Sie handels bliche Rechteckk vetten aus Glas oder Kunststoff einsetzen Au enma e 12 5 mm x 12 5 mm Lichtweghohe 8 5 mm ber dem K vettenboden Gesamth he mindestens 36 mm Die K vetten m ssen bei der jeweiligen Messwellenl nge optisch transparent sein F r Messungen im UV Bereich bietet Eppendorf mit der UVette eine Kunststoffk vette an die bei Wellenl ngen ab 220 nm transparent und damit auch f r die Messung von Nukleins uren geeignet ist Eppendorf mi i mi Cuvettes uCuvette G1 0 Hellma TrayCell UVette Ultra micro Semi micro Macro Basic area 12 5 mm x 12 5 mm Min overall height 36 mm Min filling level 10 mm Light path 8 5 mm Max height of base 7 mm O mm Min volume Photometry See manufacturer See manufacturer 50 uL 70 uL 400 uL 1000 uL information information Min volume Fluorimetry See manufacturer not suitable 60 uL 70 uL 400 uL 1000 uL information or similar microliter cuvette Voraussetzung K vette ist frei von Verschmutzung durch Staub oder Fingerabdr cke und frei von Kratzern K vettenschacht ist frei von Partikeln Stau
47. Hand die Abdeckung auf H he des Haltestifts und ziehen Sie die Abdeckung nach rechts bis der Haltestift ganz herausgezogen ist i e Ziehen Sie die Abdeckung im 90 Grad Winkel nach rechts 3 Reinigen Sie die Abdeckung mit einem Tuch oder einem fusselfreien Wattest bchen das Sie mit einem milden Reinigungsmittel befeuchtet haben 4 Schieben Sie den Haltestift bis zum Anschlag wieder in das Geh use hinein Der Haltestift ist im Geh use ganz verschwunden Verschlie en Sie bei Nichtgebrauch des Photometers den K vettenschacht mit der blauen K vettenschachtabdeckung um ihn vor Staub und anderen Verschmutzungen zu sch tzen Instandhaltung Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 75 Deutsch DE 8 2 Desinfektion Dekontamination f GEFAHR Stromschlag durch eintretende Fl ssigkeit AN Schalten Sie das Ger t aus und trennen Sie es vom Stromnetz bevor Sie mit der Reinigung oder Desinfektion beginnen 9 Lassen Sie keine Fl ssigkeiten in das Geh useinnere gelangen F hren Sie keine Spr hreinigung Spr hdesinfektion am Geh use durch 9 Schlie en Sie das Ger t nur innen und au en vollst ndig getrocknet wieder an das Stromnetz an 1 Reinigen Sie das Ger t vor der Desinfektion mit einem milden Reinigungsmittel siehe Reinigung auf 5 73 2 W hlen Sie eine Desinfektionsmethode die den f r Ihren Anwendungsbereich geltenden gesetzlichen Bestimmungen und Richtlinien entspricht 3 Verwende
48. LEK LE dye kb For 4 y 10 XMM A E Dye XXX S Wi Einheit pmol ug DNA bzw RNA FOI Zon x 10 E Dye Aaen x F NA Ayyy Extinktion des Farbstoffs Axxx Extinktion der Nukleins ure MM durchschnittliche Molmasse der Nukleotide 330 g mol Fna Faktor zur Berechnung der Nukleins ure Epye Extinktionskoeffizient f r den Farbstoff Einheit cm1M71 Auswerteverfahren Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 107 Deutsch DE 12 6 3 Umrechnung in Farbstoffmengen Die Berechnung der Menge Masse an Farbstoff im gesamten Probenvolumen erfolgt im Methodenschritt process results More calculations M CxV P total M berechnete Gesamtmenge Masse des Farbstoffs im Probengef Einheit pmol C aus der Messung berechnete Konzentration des Farbsroffs Einheit pmol uL Vp gesamt Gesamtvolumen der Probe im Probengef wird vom Anwender in More calculations eingegeben Einheit uL 12 7 Dual wavelength F r Methoden der Gruppe Dual Wavelength k nnen Extinktionen die bei zwei Wellenl ngen gemessen wurden miteinander verrechnet werden bevor die berechnete Extinktion in die weitere Auswertung mit Faktor oder mit Standard eingeht F r die Ermittlung der berechneten Extinktion kann in den Parametern eine Auswertung ber Division oder ber Subtraktion definiert werden ax A KE xc d alc bx A A ax A bx A xe d calc A1 A2 gemessene Extinktionen a b c
49. Sie mit Next gt zur Messung Folgen Sie den Anweisungen in der Ger teanzeige und messen Sie zun chst das Leerwertfilter AO und danach das erste Pr ffilter Al Das Gerat misst das Pruffilter 15 mal bei 9 Wellenl ngen und zeigt anschlie end die Mittelwerte sowie die VK Werte der Messreihe f r alle 9 Wellenl ngen an 78 Instandhaltung Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Deutsch DE EH spectrometer Unit Device Calbration Wavelength 260 nm 280 nm 320 nm 405 nm 550 nm 562 nm 595 nm 700 nm 800 nm Check photometric accuracy Mean 0 192 A 0 190 A 0 167 A 0 154 A 0 164 A 0 163 A 0 165 A 0 168 A 0 169 A VK 1 1 1 2 1 4 0 7 0 7 0 8 0 7 0 5 15 01 ID SAMPLE A1 Into AMPLE A2 and if Abort lt Back Next Spectrometer Unit Device Caltvation Check photometric accuracy 03 ID SAMPLE A3 Wavelength Mean VK 260 nm 1 404 A 0 3 280 nm 1 384 A 0 1 320 nm 1 382 A 0 3 405 nm 1 423 A 0 1 550 nm 1 412A 0 3 562 nm 1 406 A 0 3 595 nm 1 396 A 0 5 700 nm 1 359 A 0 2 ene ur 800 nm 1 342 A 0 3 4 Ergebnisanzeige nach Messung eines Pr ffilters zum Test auf Photometrische Richtigkeit Messen Sie die beiden anderen Pruffilter A2 und A3 Ergebnisanzeige nach Messung aller 3 Pruffilter zum Test auf Photometrische Richtigkeit Mit den Tasten und k nnen Sie sich nochmals die Ergebnisse fur die versch
50. Standards 6 Replicates 1 Decimal places 0 Autoprint off Edit Pave up Page dn Abort lt Back Next gt Ein Methodenablauf umfasst maximal 5 Schritte Der jeweils aktive Schritt ist optisch hervorgehoben Nach dem letzten Schritt print amp export einer Messreihe wird als weiterer Schritt der Start einer neuen Messreihe angeboten Diese beginnt wieder mit der Probenmessung Methodenschritt Erl uterung check parameters Methodenparameter berpr fen nderung bei Bedarf measure standards Nur bei Methoden mit Standardauswertung Standards messen und auswerten Alternativ Nutzung der zuletzt gespeicherten Standardauswertung m glich measure samples Proben messen process results Nur bei einigen Methoden Ergebnisse nachbearbeiten z B Scan Graphen zoomen print amp export Datenpakete f r Druck oder Export der Daten zusammenstellen Mit den Softkeys Next gt und lt Back navigieren Sie zwischen den Methodenschritten Mit Abort und Finish k nnen sie den Messablauf abbrechen bzw beenden Der Name dieses Softkeys wechselt nach der ersten Probenmessung von Abort auf Finish Methoden Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Deutsch DE 6 5 1 check parameters Cuvette 10mm Page 1 2 Wavelength 595 nm Unit pg mL Calculation Standard Standards 6 Replicates 1 Beca piacot 0 Autoprint off Edit paramete Edit Page Page dn Abort lt Back Next gt Cuvett
51. achten 9 Siehe Information in der Hilfebox Problembehebung Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Deutsch DE Symptom Meldung Es existiert bereits eine Methode oder ein Ordner Dye Protein Nucleic acid Unit mit diesem Namen M gliche Ursache e Der Name unter dem die Methode abgespeichert werden soll wurde bereits f r eine andere Methode in demselben Ordner verwendet e Die Meldung erscheint auch wenn bereits vergebene Namen f r einen Ordner oder unter General Method Parameter f r eine Nukleins ure Farbstoff Protein Konzentrationseinheit editiert wurden Abhilfe gt Anderen Namen vergeben Folgende Parameterwerte sind in General Method Parameter nicht definiert Beim ffnen einer Methode deren Parameter auf General Method Parameter zur ckgreift wurde festgestellt dass mindestens ein Parameter Farbstoff Nukleins ure Protein Einheit dort nicht mehr existiert also vermutlich gel scht wurde gt Wahlen Sie einen anderen Parameter aus der vorhandenen Liste Falls erforderlich programmieren Sie in General Method Parameter einen neuen Listeneintrag um bei der Programmierung einer Methode darauf zur ckgreifen zu k nnen Der Wert des mit markierten Parameters ist nicht in den Gen Meth Param definiert Bitte korrigieren Sie den Parameter Diese Fehlermeldung erscheint beim Editieren von Methodenparametern Parameter in General Method
52. annter Fluoreszenz oder Konzentration bezogen werden 12 1 Extinktionswerte Extinktionswerte werden als Axxx XXX steht f r die Wellenl nge dargestellt Diese Anzeigen entsprechen immer den direkt gemessenen Werten d h ohne Korrekturen die in die anschlie ende Auswertung einflie en wie z B Korrekturen f r optische Schichtdicken der K vette oder Background Korrekturen 12 1 1 Blank Alle Extinktionswerte sind immer auf den zuletzt gemessenen Blank Leerwert bezogen Eine Blank Messung ist daher zu Beginn einer jeden Messreihe obligatorisch und auch w hrend einer Messreihe jederzeit m glich Die Blank Messung sollte idealerweise alle Einflussm glichkeiten auf den Extinktionswert der Messl sung kompensieren k nnen Der Blank sollte daher mit dem auch f r die Probenmessung benutzten Puffer sowie in derselben K vette wie der Probenwert gemessen werden es sei denn die f r Blank und Probenmessung benutzten K vetten sind optisch gegeneinander abgeglichen haben also denselben Extinktionswert bei der Messwellenl nge 12 1 2 Background Korrektur Hauptanwendung Partielle Korrektur von Verf lschungen der Extinktion bei Nukleins uremessungen durch Tr bungen in der Messl sung Beispielsweise wird die Extinktion bei 320 nm die bei reinen Nukleins uren etwa bei 0 A liegen sollte von der Extinktion bei 260 nm der Messwellenlange f r Nukleins uren subtrahiert A A A XXX corrBkgr XXX Bkgr AXXX korrBkgr rechnerisc
53. ation Ma f r die Menge an Farbstoffmolek len bezogen auf die Zahl der Nukleotide in farbstoffmarkierten Biomolek len M mol L molar OD600 Optische Dichte bei der Wellenl nge 600 nm RFU Relative Fluorescence Unit relative Fluoreszenzeinheit Ma fur die Intensit t bei Fluoreszenzmessungen RNA Ribonucleic acid Ribonukleins ure RNS ssDNA single stranded DNA einzelstr ngige DNS UV Ultraviolette Strahlung Vis Visible light sichtbares Licht VK Variationskoeffizient Standardabweichung Mittelwert in Prozent 9 Anwendungshinweise 10 Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Deutsch DE Allgemeine Sicherheitshinweise Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 11 Deutsch DE 2 Allgemeine Sicherheitshinweise 2 1 Bestimmungsgem er Gebrauch Einsatzgebiet des BioSpectrometer fluorescence ist das Forschungslabor in Molekularbiologie Biochemie und Zellbiologie Das BioSpectrometer fluorescence ist ausschlie lich f r die Verwendung in Innenr umen bestimmt Die l nderspezifischen Sicherheitsanforderungen f r den Betrieb elektrischer Ger te im Laborbereich m ssen eingehalten werden Das BioSpectrometer fluorescence dient zur photometrischen Konzentrationsbestimmung von Analyten in Fl ssigkeiten und zur Aufnahme von Extinktions Wellenl ngen Spektren in K vetten Dar ber hinaus k nnen Fluoreszenz Messungen zur Quantifizierung von Biomolek len durchgef hrt werden Verwenden Sie ausschlie lic
54. b und Fl ssigkeit Messvolumen in der K vette ist ausreichend Minimales Messvolumen beachten Messl sung ist frei von Partikeln und Blasen Fluorimetrie Messl sung ist frei von Stoffen die unerw nschte Eigenfluoreszenz zeigen oder die Fluoreszenz des zu untersuchenden Stoffes schw chen K vettentemperatur ist oberhalb der Temperatur des Taupunktes der f r die Umgebungsbedingungen Feuchte und Temperatur gilt Bedienung Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 27 Deutsch DE Die Richtung des Lichtwegs ist mit einem Pfeil auf dem Geh use gekennzeichnet Photometrie Die Richtung des Lichtwegs von hinten nach vorn ist auf dem Geh use gekennzeichnet absorbance Fluorimetrie Die Richtung des Lichtwegs von rechts nach links und zur ck ist auf der K vettenschachtabdeckung gekennzeichnet fluorescence 26 LY Le Abb 5 2 Kennzeichnung der Lichtwege 1 Positionieren Sie die K vette so dass das optische Fenster der K vette in Richtung des Lichtwegs zeigt 2 Dr cken Sie die K vette beim Einsetzen gegen einen leichten Widerstand ganz nach unten 3 Fluorimetrie K vettenschachtabdeckung vor der Messung schlie en 5 3 bersicht ber den Messablauf 5 3 1 Messung vorbereiten 1 Schalten Sie das Ger t und gegebenenfalls den Drucker ein Das Ger t f hrt einen Selbsttest durch Dauer ca 1 Minute und zeigt die Methodenauswahl an 2 Stellen Sie die K vetten f r die
55. berpr fung der photometrischen Richtigkeit sowie 3 Filter zur berpr fung der Wellenl ngenrichtigkeit im Bereich von 260 nm bis 800 nm Die Extinktionen der Filter werden gegen das Leerwertfilter AD gemessen Zus tzlich zu den Informationen ber die Richtigkeit erhalten Sie auch Informationen ber die Pr zision Aus den jeweils 15 Messungen pro Wellenl nge wird neben dem Mittelwert auch der Variationskoeffizient VK Wert berechnet Zur Messung setzen Sie zun chst das Leerwertfilter f r die Leerwertmessung und anschlie end die Pr ffilter wie K vetten in den K vettenschacht ein Die f r die Pr ffilter gemessenen Extinktionswerte werden gegen den zul ssigen Wertebereich verglichen Die Grenzwerte f r den zul ssigen Bereich sind f r die einzelnen Filter in einer Tabelle im Deckel des Filterkastens abgedruckt Wenn Sie die Werte dokumentieren wollen schlie en Sie den Eppendorf Thermodrucker an Instandhaltung 76 Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Deutsch DE BioSpectrometer fluorescence eppendorf reference filter set Function Device calibration Spectrometer unit Order No Best Nr 6137 928 009 Set No Satz Nr 800 Limits measured against Blank A 0 at approx 20 C SN 6135 914 800 916 800 917 800 y r Sample Sample 260 nm 280 nm 0 159 0 183 0 154 0 178 0 982 1 005 1 703 1 735 0 147 0 170 0 977 1 001 1 668 1 699 0 143 0 166 0 985 1 008 1 615 1 647 0 142 0 165 0 955 0 984 1 474 1 513 0 141 0 16
56. cence Deutsch DE Problembehebung Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Deutsch DE 83 9 Problembehebung 9 1 Allgemeine Fehler Fehler M gliche Ursache Abhilfe Messergebnisse sind unpr zise Haltbarkeit des Reagenzes berschritten Reagenz nicht richtig vorbereitet Pipettierung nicht richtig Ablauf der Inkubation vor der Messung nicht richtig K vette verschmutzt K vette nicht vollst ndig und blasenfrei mit Messl sung bef llt Tr bungen in der Messl sung Spektralphotometer driftet K vettenschacht verschmutzt Fluorimetrie St rende Substanzen st rken oder schw chen das Fluoreszenzsignal Fluorimetrie Die K vettenschachtabdeckung ist nicht geschlossen gt Ka w v v v v gt Stellen Sie sicher dass das Reagenz noch haltbar ist und richtig vorbereitet wird Benutzen Sie f r die Vorbereitung sofern ben tigt sauberes demineralisiertes Wasser von ausreichender Qualit t Stellen Sie sicher dass die Pipette kalibriert ist und richtig pipettiert Sofern der Methodenablauf vor der Messung eine Inkubation erfordert stellen Sie sicher dass die Temperatur und Zeit f r die Inkubation korrekt eingehalten werden Reinigen und sp len Sie die K vette Achten Sie bei einem K vettenwechsel darauf dass das optische Fenster der K vette sauber bleibt und nicht mit den Fingern ber hrt wird Wenn das K vettenfenster durch Fingerabdr cke verschm
57. chrankung Fur Methodennamen sind nur Ziffern und Buchstaben sowie der Unterstrich _ erlaubt dsDNA Eingabe ber den Tastenblock Mit den Cursor Tasten und navigieren Sie im Eingabefeld und k nnen einzelne Positionen im Method name dsDNA Namen ver ndern Target directory 0716075 Keyboard Tastatur einblenden e abc Wechsel zwischen Gro und Kleinbuchstaben bei Eingabe ber den Tastenblock Save Eingegebenen Text speichern OFavorites MyMethods e W hlen Sie dasisklusile Verzeichnis Cancell Texteingabe abbrechen oder ein Zielverzeichnis in Favorites Keyboard abc Save Cancel 0 Mit den Cursor Tasten w hlen Sie die Enter tha name and storaga location eingeblendeten Zeichen aus und bestatigen jeweils Method name mit der Taste enter Wie bei einer PC Tastatur k nnen Sie mit der Shift bzw der Feststelltaste f r Target directory Favorites MyMethods RR e die n chstfolgende bzw f r alle folgenden Eingaben OFavorites MyMethods v f zwischen Gro und Kleinschreibung wechseln Softkeys l lalalals ie 78 eo e Numbers Zur Eingabe ber den Tastenblock GE e i 1 5 Current entry wechseln a a s a 1 Ijhjijk lj e Keyboard EI T
58. chtweg 1 mm mit Mikroliterk vetten wie Eppendorf uCuvette G1 0 oder Hellma TrayCell Zusatzinformationen zur Reinheit der gemessenen Nukleins ure Ratio A260 A280 Ratio A260 A230 Extinktions Wellenl ngen Spektrum der Nukleins ure Extinktion der Background Wellenl nge voreingestellt 320 nm die Extinktion der reinen Nukleins ure sollte hier ann hernd Null betragen Partielle Tr bungskorrektur ber Parameter Background m glich Umrechnung der Konzentrationen in molare Konzentrationen sowie nach Eingabe des Probenvolumens in Nukleins uremengen m glich Methodenschritt process results Proteins direct UV Konzentrationsbestimmung von Proteinen durch Messung bei 280 nm und Auswertung ber Faktor oder Standard Vorprogrammierte Methoden zur direkten Ausgabe der Extinktionen als Ergebnis Protein A 280 sowie zur Auswertung ber Albumin spezifischen Extinktionskoeffizienten Albumin A 280 Vorprogrammierte Methode f r Mikroliterk vetten Messung von Protein in Probenvolumen im Mikroliterbereich mit Lichtweg 1 mm mit Mikroliterk vetten wie Eppendorf uCuvette G1 0 oder Hellma TrayCell Zusatzinformationen zur Reinheit des gemessenen Proteins Extinktion der Background Wellenl nge voreingestellt 320 nm die Extinktion des reinen Proteins sollte hier ann hernd Null betragen Partielle Tr bungskorrektur ber Parameter Background m glich Bei der Methodenprogrammierung wird durch einfache Auswahl des Proteins aus einer
59. dengruppe Basic Raw fluorescence Messung des RFU Werts Eine Methode f r die Messung bei der Emissionswellenl nge 520 nm ist vorprogrammiert Standard Messung des RFU Werts und Auswertung ber Standard Eine Methode f r die Auswertung mit Standard ist vorprogrammiert Calibration curve Messung der RFU Werte und Auswertung ber 2 bis 12 Standards Verschiedene Auswerteverfahren wie lineare Regression Curve fit nichtlineare Regression sind ausw hlbar Grafische und tabellarische Anzeige der Standardergebnisse Nutzung der letzten gespeicherten Standardauswertung ist m glich Eine Methode f r die Auswertung mit Kalibrationskurve ist vorprogrammiert 6 4 Methodenparameter In diesem Kapitel werden die Parameter f r die Programmierung der Methoden erl utert Die Reihenfolge der Parameter in der Ger teanzeige kann im Vergleich zur Reihenfolge in der Tabelle bei einigen wenigen Methoden leicht ver ndert sein um die Parameter in der Anzeige bersichtlich darzustellen Die Tabelle stellt die Gesamtheit aller f r die verschiedenen Methoden verf gbaren Parameter dar F r die jeweilige Methode wird davon nur ein geringer Teil ben tigt und in der Anzeige dargestellt Parameter Eingabe Erl uterung Cuvette Auswahl Optische Schichtdicke der K vette Extinktionswerte werden 1015121110 510 21 vom Ger t immer automatisch auf die Schichtdicke 10 mm 0 1 mm einer Standardkuvette umgerechnet siehe
60. e 10mm Y Page 1 2 Wavelength 1595 nm Unit pg mL v Calculation Standard 7 Standards amp Replicates kb EES 2 Pino Autoprint G Number of repeat Jl Page dn Save Save As Cancel IECH check parameters save as OFavorites MyMethods Enter the name and storage location Method name Bradford 1 Target 0 00 v Softkeys e Page dn und Page up Zwischen den 1 bis 3 Parameterseiten wechseln e Edit In den Editiermodus f r Parameter wechseln Editiermodus f r Parameter Ge nderte Parameter werden mit einem roten Stern markiert solange die nderung nicht gespeichert wurde Softkeys Save und Save as nderungen speichern Bei Save as m ssen Sie der Methode einen neuen Namen geben Das ist immer der Fall wenn Sie die von Eppendorf vorprogrammierten Methoden der Gruppe Routine ndern Cancell Editiermodus ohne Speicherung der nderungen verlassen Speichern der Methode unter neuem Namen Sie k nnen die Methode entweder im selben Ordner speichern in dem Sie die Methode aufgerufen haben oder in der Methodengruppe Favorites in einem frei w hlbaren Ordner speichern Den Namen maximal 20 stellig k nnen Sie ber eine eingeblendete Tastatur Softkey Keyboard oder direkt ber den Tastenblock siehe Text eingeben auf S 25 eingeben Nach dem Speichern gelangen sie zur ck in die Anzeige check parameters 6 5 2 measure standards measure standards new
61. e zwischen den bisher in der Messreihe erzielten Probenergebnissen navigieren Brodtord EE WEE Bradford 2010 11 25 16 28 23 Das Konzentrationsergebnis 6 stellig mit ST eu Flie komma wird deutlich hervorgehoben SS e Mit Grafik Ergebnis rechts in der Anzeige 0 900 Pag te GE e Ohne Grafik Ergebnis zentral in der Anzeige A 0 393 Zus tzlich zum Ergebnis wird der zugrunde SES 7 liegende Extinktionswert kleiner angezeigt 0 300 d 7 00 oo 600 900 120655 Pomi Dilution Edit ID Finish lt Back Next gt Weitere Daten oben rechts 1 Zeile Probennummer wird fortlaufend gez hlt und f r jede neue Messreihe wieder auf 1 gesetzt Probenverd nnung sofern eingegeben oben rechts 2 Zeile Probenidentifikation ID sofern eingegeben e oben links Dateiname unter dem die Daten im Methodenschritt print and export als Excel Datei exportiert werden siehe S 59 Softkeys e Dilution Probenverd nnung eingeben e Edit ID Proben ID eingeben e Data Zus tzliche Ergebnisdaten anzeigen nicht bei allen Methoden e Finish Messreihe beenden und zur Methodenauswahl zur ckkehren i Die angezeigten Extinktionswerte entsprechen immer den direkt gemessenen Werten Verdunnungs oder Kuvettenfaktor sowie Backgroundextinktionen werden erst fur die anschlie ende Ergebnisberechnung einbezogen siehe Extinktionswerte auf S 99 Verd nnung eingeben U measure sa
62. eachten Sie bei jeder Messung Bei Kunststoffk vetten Wie viele Messungen nacheinander k nnen in der K vette zuverl ssig durchgef hrt werden Messen Sie vor Proben oder Standardmessungen den Leerwert der K vette um neben dem Reagenzleerwert auch den K vettenleerwert zu kompensieren Leerwertergebnisse bleiben f r eine Messreihe gespeichert eine neue Leerwertmessung ist aber jederzeit auch zwischen Probenmessungen m glich Die angezeigten Extinktionswerte und RFU Werte entsprechen immer den direkt gemessenen Werten Verd nnungs oder K vettenfaktor sowie Background Extinktionen werden erst f r die anschlie ende Ergebnisberechnung einbezogen siehe Extinktionswerte auf S 99 Die Dauer vom Start einer Messung bis zur Anzeige eines Messergebnisses betr gt typischerweise ca 2 bis 3 Sekunden Wenn wenig Licht auf den Empf nger gelangt hohe Extinktionswerte oder niedrige RFU Werte kann die Messzeit automatisch auf bis zu 9 Sekunden Photometrie bzw 6 Sekunden Fluorimetrie verl ngert werden um die Pr zision der Messung zu erh hen Achten Sie darauf dass die gemessenen Extinktionswerte die Obergrenze des photometrischen Messbereichs nicht berschreiten Verwerfen Sie in diesem Fall das Messergebnis Die Obergrenze des photometrischen Messbereichs ist nicht nur von der Wellenl nge siehe Photometrische Eigenschaften auf S 96 sondern auch vom K vettenleerwert abh ngig Ultramikrok vetten mit kleiner Blende wie TrayCell
63. ei 260 nm Ablesegenauigkeit AA 0 001 Zufallige Messabweichung des Photometers lt 0 002 bei A 0 lt 0 005 0 5 bei A 1 Systematische Messabweichung 1 beiA 1 des Photometers Falschlichtanteil lt 0 05 11 5 Fluorimeter Messprinzip Konfokales Filterfluorimeter mit Referenzstrahl Lichtquelle LED Spektrale Zerlegung Filteranordnung aus Dichroiden und Langpassfilter Strahlungsempf nger Photodiode Anregungswellenl nge 470 nm Bandbreite 25 nm Emissionswellenl nge 520 nm Bandbreite 15 nm Emissionswellenl nge Il 560 nm Bandbreite 40 nm Messbereich 0 5 nM bis 1 000 nM Fluorescein Emissionswellenlange 520 nm Zufallige Messabweichung des Fluorimeters 2 bei 1 nM Fluorescein Emissionswellenl nge 520 nm Technische Daten Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 97 Deutsch DE 11 6 Weitere technische Parameter Kuvettenmaterial Fur Messungen im UV Quarzglas oder UV transparenter Kunststoff UVette von Eppendorf 220 nm bis 1600 nm Fur Messungen im sichtbaren Bereich Glas oder Kunststoff Kuvettenschacht 12 5 mm x 12 5 mm untemperiert Gesamthohe der Kuvetten Mind 36 mm Hohe des Lichtstrahls in der 8 5 mm K vette Tastatur 22 Folientasten 6 Folientasten als Softkeys Ergebnisausgabe Extinktion Konzentration Scan Extinktions Wellenl ngen Spektrum Methodenabh ngig weitere Zusatzdaten Ratio
64. ength 595 nm Unit pg mL Calculation Standard Standards 6 Replicates 1 Decimal places 0 Autoprint off Edt parametore Show more parameters Page up or Page din Page dn Abort lt Back Next gt Wahlen Sie mit den Cursor Tasten die gewunschte Methode und rufen Sie die Methode mit der Taste enter auf Eine bersicht und detaillierte Beschreibung der Methoden finden sie im n chsten Kapitel siehe Methoden auf S 33 Wizard Der Wizard am oberen Rand der Anzeige f hrt Sie schrittweise durch den Methodenablauf Hilfebox Bei jedem Schritt des Ablaufs erhalten Sie unten rechts in der Anzeige Hilfetexte Softkeys Mit den Softkeys lt Back und Next gt bewegen Sie sich im Wizard einen Methodenschritt vor oder zuruck gt berpr fen Sie die Parametereinstellung Mit den Softkeys Page dn und Page up rufen Sie die Seiten der Parameterliste auf Mit Edit andern und speichern Sie Parameter 5 3 2 3 Blank und Standards messen d Linear regression not calculated Standard 2 2 Standard 3 500 are key Select 4 en Curve Fit Graph Abort lt Back Next Quadratical regression Conc 924 41 A 134 52 A 123 14 Coefficient of determination R 0 9970 Aand Y keys 0 600 0 300 0 000 D 300 600 00 12060 mL Conc 213 Abs 0 393 2 1 Som 0 393 Ass Dilution Edit
65. eppendorf Register your instrument www eppendorf com myeppendorf fluorescence fluorescence 0 O O ee Bedienungsanleitung Copyright 2015 Eppendorf AG Germany All rights reserved including graphics and images No part of this publication may be reproduced without the prior permission of the copyright owner Trademarks Cy is a registered trademark of GE Healthcare UK Ltd UK Hellma is a registered trademark of Hellma GmbH amp Co KG Germany OliGreen PicoGreen
66. er ndern und neu messen Berechnung ist nicht m glich weil durch Null geteilt wird Extinktionserge bnis ist Null Fehler bei der Berechnung Division durch Null Bei der Auswertung musste durch ein Extinktionsergebnis mit dem Wert Null geteilt werden Das ist mathematisch nicht zul ssig Beispiele Berechnung eines Faktors bei Einpunktkalibrierung Berechnung einer Ratio 260 280 bei Nukleins uremessungen gt berpr fen Sie die verwendeten Reagenzien und Proben und wiederholen Sie die Messung Berechnung ist nicht m glich weil durch Null geteilt wird Extinktionsergebnis oder Parameter Formula b ist Null Bei der Auswertung einer Methode des Typs Division Methodengruppe Dual wavelength musste durch ein Extinktionsergebnis mit dem Wert Null geteilt werden Das ist mathematisch nicht zul ssig gt berpr fen Sie die verwendeten Reagenzien und Proben und wiederholen Sie die Messung gt Geben Sie als Wert f r den Parameter Formula b nicht Null ein Problembehebung 92 Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Deutsch DE 10 10 1 Transport Transport Lagerung und Entsorgung Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Transport Lagerung und Entsorgung gt Verwenden Sie die Originalverpackung f r den Transport Deutsch DE Lufttemperatur Relative Luftfeuchte Luftdruck Allgemeiner Transport 25 C 60 C 10 95 30 kPa 106 kPa
67. er Standardauswertung mit eingezeichnetem Probenergebnis Hauptgruppe Advanced Dual wavelength neien rg measure samples E print amp export Hfrew serios Division 2010 07 02 14 27 47 02 Dil 10 90 pL ID 20 08 pg mL 0 803 A M 0 679 Az n LE A2 0 845 Ass A v Dilution Edit ID Finish lt Back Next gt Ergebnisanzeige e Konzentrationsergebnis Wird aus Acalc Mit Faktor oder Standardauswertung berechnet Acalc Wird mit der in den Parametern definierten Formel aus den bei den beiden Wellenl ngen gemessenen Extinktionen berechnet e Extinktionswerte die bei den beiden Messwellenl ngen gemessen wurden Zusatzdaten Softkey Data Sofern die entsprechenden Parameter aktiviert wurden Extinktionswert f r die Background Wellenl nge Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Methoden 53 Deutsch DE Methodengruppe Fluorimetrie Ergebnisanzeige Hauptgruppe Routine Erl uterung Nucleic acids PicoGreen ui measure samples print amp export PicoGreen 2012 02 02 17 03 27 Fluor RFU 03 Bo ID A A 60 00 X 4 75 ng mL 40 00 Ba 53 7 Zei SA 20 00 f A into a e K 20 40 e Boore Pomi Conc 75 Fluor 53 70 A and V key Finish 1 lt Back 1 Next gt Dilution Edit ID Ergebnisanzeige Konzentrationsergebnis mit RFU Wert bei der Messwellenlange Graph der Standardau
68. erhalb von Eingabefeldern Methodenauswahl aufrufen Au erhalb von Eingabefeldern Funktionsauswahl aufrufen 6 6 5 66 Softkey Funktionen anw hlen Die Belegung der Taste wechselt mit dem Software Dialog Die aktuelle Funktion wird im Display direkt ber der Taste angezeigt Cursor nach links rechts oben unten bewegen Navigieren zwischen Eingabefeldern e Cursor Tasten und innerhalb eines Eingabefeldes Innerhalb der Zeichenfolge navigieren Tasten und in einer Ergebnisanzeige Zwischen den Probenergebnissen der Messreihe navigieren e Tasten und innerhalb eines Graphen Auf der x Achse des Graphen navigieren um z B in einem Scan die Wellenl ngen abh ngigen Extinktionswerte anzuzeigen Tasten und in einem Extinktions Wellenl ngen Spektrum Bildausschnitt ver ndern Verfahren SpectraZoom siehe Tab 6 4 auf S 56 delete Aktuelle Auswahl in die nachsthohere Ebene verlassen Eingabe l schen Innerhalb einer Zeichenfolge wird das Zeichen links vom Cursor gel scht Ausgew hlte Methode oder Funktion aufrufen Auswahlliste ffnen Eingabe oder Auswahl best tigen standard Standardmessung starten Leerwertmessung starten Probenmessung starten Bedienung Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 25 Deutsch DE 5 1 1 Text eingeben Texte konnen Sie bei der Vergabe von Methodennamen und Ergebniseinheiten eingeben Eins
69. ern oder Versenden VORSICHT Sicherheitsm ngel durch falsche Zubeh r und Ersatzteile Zubeh r und Ersatzteile die nicht von Eppendorf empfohlen sind beeintr chtigen die Sicherheit Funktion und Pr zision des Ger ts F r Sch den die durch nicht empfohlene Zubeh r und Ersatzteile oder unsachgem en Gebrauch verursacht werden wird jede Gew hrleistung und Haftung durch Eppendorf ausgeschlossen 9 Verwenden Sie ausschlie lich von Eppendorf empfohlenes Zubeh r und Original Ersatzteile 2 3 2 Allgemeine Sicherheitshinweise Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 13 Deutsch DE Ger teschaden L ACHTUNG Sch den durch aggressive Chemikalien 9 Verwenden Sie am Ger t und Zubeh r keine aggressiven Chemikalien wie z B starke und schwache Basen starke S uren Aceton Formaldehyd halogenierte Kohlenwasserstoffe oder Phenol gt Reinigen Sie das Ger t bei Verunreinigungen durch aggressive Chemikalien umgehend mit einem milden Reinigungsmittel ACHTUNG Ger teschaden durch Begasung mit aggressiven Chemikalien gt F hren Sie am Ger t keine Desinfektion durch Begasung durch ACHTUNG Korrosion durch aggressive Reinigungs und Desinfektionsmittel 9 Verwenden Sie weder tzende Reinigungsmittel noch aggressive L sungs oder schleifende Poliermittel gt Inkubieren Sie das Zubeh r nicht l ngere Zeit in aggressiven Reinigungs oder Desinfektionsmitteln ACHTUNG Sch den an
70. etrische Sekund rstandards Starna RM O660HLKCSITX Hellma 666 F1 666 F2 666 F3 666 F4 SRM 2031a SN 667 valid through g ltig bis 12 2014 The valid certificates are part of the requalification documentation Die G ltigkeitszertifikate sind Teil der Qualifizierungsdokumentation Please protect against dust heat cold and liquid The limits are valid for max 2 years Bitte vor Staub Hitze K lte und Fl ssigkeiten sch tzen Signature Die Grenzwerte ge 3 5 Unterschrift Abb 8 1 Deckel Innenseite des Filterkastens Muster 8 3 1 1 Photometrische Richtigkeit berpr fen Functions Main Groups Sub Groups Functions y B Spectrometer unit ei thod f D Fluorescence unit OA f brary Perform selltest t Device calibration into A IOO J JO Vene UC spectrometer Unit 260 nm 280 nm 800 nm Check photometric accuracy Device Calibration Spectrometer unit Device Calbration Check photometric accuracy ID Insert filter AO and press blank EEE EEE H Abort lt Back Next gt J Instandhaltung Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 77 Deutsch DE W hlen Sie in der Gruppe Device calibration die Funktion Spectrometer unit und best tigen Sie mit enter W hlen Sie aus ob Sie die Wellenl ngenrichtigkeit oder die Photometrische Richtigkeit berpr fen wollen und best tigen Sie mit enter Wechseln
71. expasy ermittelt werden http www expasy org tools protparam html e Eine Tabelle mit A o Werten f r viele Proteine finden Sie auch in C N Pace et al Protein Science 1995 4 2411 2423 Tabelle 5 Die Ayo Werte m ssen mit 0 1 multipliziert werden um die ben tigten Ag 1 Werte zu erhalten 68 Funktionen Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Deutsch DE 7 1 3 Absorbance Spectra Library Functions Main Groups Sub Groups Functions Nitrophenol Functions Main Groups Sub Groups Functions Results memory Gen method param Abs spectra library Device setting Device calibration Info Cone I II I Lues In der rechten Spalte w hlen Sie das Spektrum aus das Sie aufrufen m chten und best tigen Sie mit enter Softkeys Export und Print Auf einen USB Stick oder per USB Kabel zu einem PC exportieren bzw drucken siehe print amp export auf S 59 e OK In die Funktionsauswahl zur ckkehren Folgende Einstellungen k nnen angepasst werden Device Settings General e Network e E Mail Date and Time General Device Settings Language Device name Indication of light path Engish T BioSpectrometer fluorescence Self test interval Weekly e last self test 2015 06 04 09 52 46 Spectrometer unit Fluorescence unit A Kack EK save Hosea Network Settings IP OGetiPsettingsviaDHEP 0
72. ggressive Reinigungs und Desinfektionsmittel 9 Verwenden Sie weder tzende Reinigungsmittel noch aggressive L sungs oder schleifende Poliermittel gt Inkubieren Sie das Zubeh r nicht l ngere Zeit in aggressiven Reinigungs oder Desinfektionsmitteln 1 Wischen Sie die Oberfl chen mit einem Tuch ab das Sie mit einem milden Reinigungsmittel befeuchtet haben K vettenschacht reinigen 2 Reinigen Sie den K vettenschacht nur mit einem mit Ethanol oder Isopropanol befeuchteten fusselfreien Wattest bchen Vermeiden Sie dass Fl ssigkeit in den K vettenschacht gelangt Sofern zur Beseitigung der Verunreinigung mit Wasser befeuchtet werden musste reinigen Sie abschlie end mit einem mit Ethanol oder Isopropanol befeuchteten Wattest bchen um das Trocknen des K vettenschachts zu beschleunigen An der linken Innenseite des K vettenschachts ist im Lichtweg eine Glasscheibe eingebracht Reinigen Sie die Glasscheibe sorgf ltig 74 Instandhaltung Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Deutsch DE 8 1 1 K vettenschachtabdeckung reinigen Wenn Sie nicht nur die direkt zug ngliche Oberfl che der K vettenschachtabdeckung reinigen m chten k nnen Sie die Abdeckung ausbauen gt Weichen Sie die K vettenschachtabdeckung nicht in Reinigungsmittel ein gt Reinigen Sie die K vettenschaftabdeckung wie beschrieben 1 Heben Sie die K vettenschachtabdeckung mit einer Hand an 2 Fassen Sie mit der anderen
73. ginn sondern auch wahrend der Probenserie Bei starkerer Drift des Reagenzleerwerts ist das Reagenz nicht geeignet fur fehlerfreie Messungen und muss durch neues Reagenz ersetzt werden gt Positionieren Sie die K vette so im Kuvettenschacht dass die optischen Fenster in Lichtwegrichtung zeigen gt Lichtweg Photometrie von hinten nach vorn gt Lichtweg Fluorimetrie von rechts nach links 9 2 Fehlermeldungen Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Problembehebung 85 Deutsch DE Ger teanzeigen mit Fehlermeldungen k nnen Sie mit dem Softkey OK verlassen Systemfehler erfordern eine Beurteilung durch den Technischen Service Diese Fehler werden in Englisch dargestellt System error Bitte wenden Sie sich in diesen F llen an den Technischen Service Andere Fehlermeldungen bei denen Sie selbst Ma nahmen ergreifen k nnen sind in der folgenden Tabelle erl utert Symptom Meldung Selbsttest fehlgeschlagen M gliche Ursache K vettenschachtabdeckung war beim Selbsttest offen e Der K vettenschacht war beim Selbsttest nicht leer Abhilfe Wiederholen Sie den Selbsttest mit leerem Kuvettenschacht und geschlossener Kuvettenschachtabdeckung Ger t ist defekt Wenden Sie sich an den Eppendorf Service Die Datei konnte nicht exportiert werden Beim Export von Daten e USB Stick falsch formatiert oder defekt e USB Stick zu fr h w hrend des Exports aus dem
74. h Eppendorf Zubeh r oder von Eppendorf empfohlenes Zubeh r 2 2 Anforderung an den Anwender Ger t und Zubeh r d rfen nur von ausgebildetem Fachpersonal bedient werden Lesen Sie vor der Anwendung die Bedienungsanleitung und die Gebrauchsanweisung des Zubeh rs sorgf ltig und machen Sie sich mit der Arbeitsweise des Ger ts vertraut 2 3 Gef hrdungen bei bestimmungsgem em Gebrauch 2 3 1 Personenschaden A GEFAHR Stromschlag durch eintretende Fl ssigkeit A 9 Schalten Sie das Ger t aus und trennen Sie es vom Stromnetz bevor Sie mit der Reinigung oder Desinfektion beginnen 9 Lassen Sie keine Fl ssigkeiten in das Geh useinnere gelangen gt F hren Sie keine Spr hreinigung Spr hdesinfektion am Geh use durch 9 Schlie en Sie das Ger t nur innen und au en vollst ndig getrocknet wieder an das Stromnetz an GEFAHR Explosionsgefahr gt Betreiben Sie das Ger t nicht in R umen in denen mit explosionsgef hrlichen Stoffen gearbeitet wird gt Bearbeiten Sie mit diesem Ger t keine explosiven oder heftig reagierenden Stoffe gt Bearbeiten Sie mit diesem Ger t keine Stoffe die eine explosive Atmosph re erzeugen k nnen 12 Allgemeine Sicherheitshinweise Eppendorf Bi Deutsch DE oSpectrometer fluorescence A A A WARNUNG Stromschlag durch Sch den am Ger t oder Netzkabel 9 Schalten Sie das Ger t nur ein wenn Ger t und Netzkabel unbesch digt sind gt Nehmen Sie nur Ger te
75. h korrigierte Extinktion bei der Wellenl nge XXX nm Axxx gemessene Extinktion bei der Wellenl nge XXX nm ABkgr gemessene Extinktion bei der Background Wellenl nge 100 Auswerteverfahren Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Deutsch DE 12 1 3 Kuvettenkorrektur S mtliche Extinktionswerte die in Ergebnisberechnungen eingehen sind auf die K vetten Schichtdicke 10 mm normiert Wird eine K vette mit einer anderen Schichtdicke benutzt muss diese Schichtdicke im Parameter Cuvette definiert werden In diesem Fall werden die gemessenen Extinktionen vor der Umrechnung in Probenergebnisse auf Messergebnisse mit einer K vette der Schichtdicke 10 mm korrigiert Diese Korrektur wird angewendet auf e Methoden mit Auswertung ber Faktor e Methoden der Gruppe Absorbance bei denen nur Extinktionswerte ausgegeben werden Die Korrektur wird nicht angewendet auf e Methoden mit Auswertung ber Standards da vorausgesetzt wird dass Standards und Proben in K vetten derselben Schichtdicke gemessen werden e Berechnungen mit Division Methode Division Methodengruppe Dual wavelength sowie Berechnung von Ratios wie A26 A2g0 bei Nukleins uremessungen 4 4 ge XXX corrCuv XXX Cuv Axxx korrCuv rechnerisch korrigierte Extinktion bei der Wellenl nge XXX nm Axxx gemessene Extinktion bei der Wellenl nge XXX nm Cuv Schichtdicke der K vette 12 2 Auswertung mit Faktor oder Standard C AxF C berechnete Konze
76. iedenen Pruffilter ansehen Mit Finish beenden sie die Prufung Vergleichen Sie die Mittelwerte und VK Werte mit der mitgelieferten Tabelle Sollten die gemessenen Werte nicht mit dem zul ssigen Wertebereich bereinstimmen wenden Sie sich an den Eppendorf Service Lassen Sie die Filter nach 2 Jahren vom Eppendorf Service neu zertifizieren 8 3 1 2 Wellenl ngenrichtigkeit berpr fen gt F r die berpr fung der Wellenl ngenrichtigkeit verfahren Sie entsprechend Hier messen Sie mit 3 Pr ffiltern bei der entsprechenden Wellenl nge 8 3 2 Fluoreszenzeinheit berpr fen Functions 1 Main Groups Sub Groups Functions Spectrometer unit B Fluoresc nit 2 Perform selftest Fluorescence unit calibration i Wavelength Ratio CV 520 nm 0 992 0 1 560 nm 0 978 0 1 Kalibrierung abgeschlossen Measure OK Instandhaltung Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Deutsch DE 79 Wahlen Sie in der Gruppe Device calibration die Funktion Fluorescence unit Bestatigen Sie mit enter Setzen Sie das Filter F1 in den Kuvettenschacht Drucken Sie den Softkey Measure Das Gerat misst das Pruffilter 15 mal bei 2 Emissionswellenlangen Nach der Messung zeigt das Display 2 Kennwerte an Ratio als Ma f r die korrekte Justierung sowie CV als Ma f r das Rauschen Vergleichen Sie die Kennwerte mit den Werten in der mitgelieferten Tabelle Sollten die gemessenen Werte nicht mit dem
77. iert Die beiden Hauptgruppen Photometry und Fluorimetry sind in Untergruppen geordnet Method Selection Main Groups Sub Groups dsDNA 1mm ssDNA EI RNA Oligo lt New Method gt copy J I J Eunction Schreibgesch tzte Methoden Die wichtigsten Methoden der Molekularbiologie Sie k nnen die Parameter zwar ver ndern dann aber nur unter neuem Methodennamen abspeichern GE Nicht schreibgesch tzte Methoden Sie k nnen die Parameter beliebig ver ndern und nach Speichern direkt mit der Messung beginnen m3 Templates f r neue Methoden Jede Methodengruppe enth lt ein Template das zur Erleichterung der Programmierung neuer Methoden bereits mit kompletten Parameters tzen vorprogrammiert ist Die Parameter k nnen beliebig ver ndert und unter neuem Namen abgespeichert werden ER Um eine Methode aufzurufen w hlen Sie mit den Cursor Tasten zun chst die Hauptgruppe Untergruppe und die Methode aus Best tigen Sie jeweils mit enter Tab 6 1 Photometrische Methoden Absorbance Methoden f r schnelle einfache Extinktionsmessungen ohne weitere Auswertungen Routine H ufig genutzte Methoden der Molekularbiologie Die Methoden sind fest vorprogrammiert Eine nderung von Parametern ist aber mit Speichern unter neuem Namen m glich Basic Methoden f r die Auswertung von Extinktionsmessungen mit Faktor Standard oder Standardkurve gerade
78. immtheitsma wird das Ergebnis mit einer Warnung versehen Wenn der erste Standard die Konzentration 0 hat w hlen Sie die Einstellung dass die Regressionsgerade Regressionskurve durch den Nullpunkt geht Wenn keines der f r kurvenf rmige Verl ufe empfohlenen Verfahren zufriedenstellende Ergebnisse bringen w hlen Sie das Verfahren linear interpolation d 12 4 Verd nnung Im Methodenschritt measure samples eingegebene Verd nnungen werden bei der Ergebnisberechnung ber cksichtigt 7 r Vp tr Eug C Dil korr C x m V P Lou korr Mit Verd nnungsfaktor umgerechnetes Ergebnis Vp Volumen der Probe in der Messl sung Vpy Volumen des Diluents in der Messl sung Auswerteverfahren Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 103 Deutsch DE 12 5 Spezielle Auswerteverfahren f r Nukleins uren und Protein UV Dieser Abschnitt bezieht sich auf die Auswertung von Nukleins uren bzw Proteinen in den Methodengruppen Nucleic acids und Proteins direct UV sowie der entsprechenden Biomolek lkomponenten in der Methodengruppe Dye labels 12 5 1 Korrektur A260 und Korrektur Azgo Anwendung Korrektur des Einflusses der Farbstoffextinktion auf die Nukleins ure bzw Proteinextinktion bei 260 und 280 nm bei den Methoden der Gruppe Dye labels Die Anwendung des Auswerteverfahrens kann in den Parametern Correct A260 bzw Correct A280 aktiviert werden A Ay CF x Apy XXX corr Axxx korr rechnerisch korrigierte Extinkti
79. ion des Proteins bei einer Konzentration von 0 1 1 g L Bei Eingabe des molaren Extinktionskoeffizienten und der relativen Molmasse des Proteins kann Ag 1 hieraus berechnet werden P Avie MM ep molarer Extinktionskoeffizient des Proteins Einheit cm 1M 1 MM p relative Molmasse des Proteins Einheit Da Eingabe in General Method Parameter in kDa 106 Auswerteverfahren Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Deutsch DE 12 6 Spezielle Auswerteverfahren f r die Dye Methoden 12 6 1 Berechnung des Faktors f r den Farbstoff aus dem Extinktionskoeffizienten Bei den Dye Methoden wird die Konzentration des Farbstoffs mit einem Faktor aus der gemessenen Extinktion errechnet siehe Auswertung mit Faktor oder Standard auf S 100 Der Faktor wird in der Funktion General Method Parameter Dyes f r jeden Farbstoff eingegeben Alternativ zur Eingabe des Faktors kann der Extinktionskoeffizient eingegeben werden In diesem Fall wird der Faktor wird wie folgt berechnet 6 10 Dye E Dye F Faktor f r den Farbstoff Einheit pmol uL Extinktionskoeffizient f r den Farbstoff Einheit cm 1Mol 1L 12 6 2 Berechnung der FOI Als Wert f r das Verh ltnis von Farbstoffmolek len zur Menge der Nukleotide in der Nukleins ure wird bei den Dye Methoden die Einbaurate FOI Frequency of Incorporation berechnet und angezeigt Die Berechnung kann f r zwei verschiedene Ergebniseinheiten ausgew hlt werden Einheit MO
80. ision Zusatzdaten f r Nukleins uren Ratio 260 280 und 260 230 Molare Konzentration Gesamtausbeute Zusatzdaten f r Dye Methoden FOI Frequency of incorporation Markierungsdichte Scans Zoom Peak Auswertung Methodenspeicher gt 100 Methodenprogramme Messwertspeicher und Kalibrationsspeicher Speicher f r gt 1 000 Ergebnisse mit allen Daten der Ergebnis und Standardauswertung Probennummer Probenname Datum und verwendetem Parametersatz des Methodenprogramms Die Anzahl der gespeicherten Ergebnisse ist abh ngig von der Anzahl der gespeicherten Methoden Auswerteverfahren Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 99 Deutsch DE 12 Auswerteverfahren Dieses Kapitel beschreibt die in den Methodenprogrammen verf gbaren Auswerteverfahren sowie die Berechnung einer Verd nnung durch die Ger te Software Beachten Sie beim Vergleich Messergebnissen mit den Ergebnissen anderer Photometer Spektralphotometer dass die Werte von der Bandbreite der Ger te abh ngen k nnen In den folgenden F llen k nnen die Unterschiede erheblich sein Das Extinktionsspektrum weist bei der Messwellenl nge einen schmalen Peak auf e Es wird nicht am Maximum sondern auf der Flanke eines Peaks gemessen Kontrollieren Sie daher die Richtigkeit der Methode durch die Messung von Standards In der Fluorimetrie sind die RFU Werte nicht von Ger t zu Ger t vergleichbar sondern m ssen immer auf Standards bek
81. kategorie Verschmutzungsgrad 2 Leistungsaufnahme Maximal auftretende Leistung laut Typenschild 25 W Ca 15 W im Bedienablauf Ca 5 W mit gedimmtem Display Zul ssige Netzunterbrechung Ca 10 ms bei 90 V Ca 20 ms bei 230 V Schutzklasse Sicherungen T 2 5 A 250 V 5 mm x 20 mm 2 St ck 11 2 _Umogebungsbedingungen Betrieb Umgebungstemperatur 15 C bis 35 C Rel Luftfeuchte 25 bis 70 Luftdruck 86 kPa bis 106 kPa Luftdruck Verwendung bis zu einer H he von 2000 m ber Meeresh he Vor direktem Sonnenlicht sch tzen 11 3 Gewicht Ma e Gewicht 5 4 kg Abmessungen Breite 295 mm Tiefe 400 mm Hohe 150 mm Benotigter Raum Breite 500 mm mit Thermodrucker 750 mm Tiefe 500 mm 96 Technische Daten Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Deutsch DE 11 4 Photometrische Eigenschaften Messprinzip Absorptions Einstrahlspektralphotometer mit Referenzstrahl Lichtquelle Xenon Blitzlampe Spektrale Zerlegung Holographisches Aberations korrigiertes Konkavgitter Strahlungsempfanger CMOS Photodiodenarray Wellenlangen 200 nm bis 830 nm Wellenlangenwahl Methodenabhangig frei wahlbar Spektrale Bandbreite lt 4nm Kleinste Schrittweite 1 Systematische Messabweichung 1 nm der Wellenl nge Zuf llige Messabweichung der lt 0 5 nm Wellenl nge Photometrischer Messbereich 0A bis 3 0 A b
82. keinstellungen siehe Device Settings auf S 68 Voraussetzung Ethernet Kabel RJ45 1 Verbinden Sie das Ethernet Kabel mit der Anschlussbuchse des Netzwerks 2 Verbinden Sie das Ethernet Kabel mit der Anschlussbuchse Ethernet 10 siehe Gesamtillustration auf S 15 Netzwerkdrucker Ein Netzwerkdrucker wird unter folgenden Voraussetzungen automatisch vom Ger t erkannt e Drucker befindet sich im gleichen Netzwerksegment wie das Ger t e Drucker unterst tzt das Zeroconf Protokoll Drucker ist PostScript f hig 4 5 Drucker am USB Anschluss anschlie en 4 5 1 Thermodrucker DPU S445 Voraussetzung Auf dem Ger t ist die Software Version 3 4 4 0 oder h her installiert In den Druckereinstellungen ist der Thermodrucker DPU S445 ausgew hlt siehe Device Settings auf S 68 Schlie en Sie den Thermodrucker DPU S445 an den USB Anschluss f r Drucker an 1 Verbinden Sie das Druckerkabel mit dem USB Anschluss f r Drucker 4 siehe Gesamtillustration auf S 15 2 Verbinden Sie das Druckerkabel mit dem Drucker 3 Schlie en Sie den Drucker ber das mitgelieferte Steckernetzteil und Netzkabel Zubeh r des Druckers an das Stromnetz an und schalten Sie ihn ein Hinweise zum Drucker finden Sie in der Bedienungsanleitung des Druckers Installation Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 21 Deutsch DE 4 6 PC oder USB Stick f r Datenexport anschlie en Sie k nnen einen USB Stick FAT 32 formatiert an den USB Anschlu
83. ktbeschreibung 3 1 Gesamtillustration 1 2 3 3 Abb 3 1 Vorder und R ckansicht 1 Display 7 Netzanschluss 2 K vettenschacht 8 USB Anschluss f r PC 3 K vettenschachtabdeckung 9 Anschluss RS 232 Drucker 4 USB Anschluss f r USB Stick und Drucker 10 Anschlussbuchse Ethernet 5 Netzschalter 11 Bedienelemente 6 Sicherungshalter Das Typenschild befindet an der Unterseite des Ger ts links hinten 3 2 Lieferumfang Anzahl Beschreibung 1 BioSpectrometer fluorescence 1 Netzkabel 4 4 UVetten Original Eppendorf Kunststoffk vette einzeln verpackt PCR clean Protein free 1 Bedienungsanleitung mehrsprachig 16 Produktbeschreibung Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Deutsch DE 3 3 Produkteigenschaften Das BioSpectrometer fluorescence vereint zwei spektroskopische Messverfahren Spektralphotometrie und Fluorimetrie Es kann sowohl spektrophotometrische Messungen im UV Vis Bereich von 200 nm bis 830 nm als auch fluorimetrische Messungen bei zwei definierten Wellenl ngenkombinationen im sichtbaren Bereich 470 nm Anregung 520 nm Emission und 470 nm Anregung 560 nm Emission durchf hren Es ist f r die Messung von Fl ssigkeiten in K vetten im molekularbiologischen biotechnologischen biochemischen und zellbiologischen Bereich in Entwicklung und Forschung vorgesehen Sie k nnen Glask vetten und Kunststoffk vetten im Volumenbereich von 1 uL bis 3000 uL Photometrie bz
84. l nge 470 nm Nur fur fluorimetrische Methodengruppen Anregungswellenlange 470 nm wird angezeigt Unit Auswahl mg mL ug mL ng mL pg mL ug uL mg dL umol mL nmol mL pmol mL pmol uL U U mL U L Abs A min Zusatzlich freie Programmierbarkeit weiterer Einheiten in der Funktion General Method Parameters Units Max 7 Stellen Einheit fur das Konzentrationsergebnis Die Auswahl ist bei den fest vorprogrammierten Methoden der Gruppe Routine auf fur diese Methoden sinnvolle Einheiten begrenzt Formula type Auswahl division subtraction Nur f r die Methodengruppe Dual wavelength Formeltyp f r die Verrechnung der Extinktionen bei den beiden Messwellenl ngen vor Auswertung mit Faktor oder Standard Formula a Werteeingabe Nur f r die Methodengruppe Dual wavelength Wert f r a in der Wert f r a in den Formeln a A1 b A2 c d und a A7 Auswerteformel b A2 c d Grenze max 5 stellig einschlie lich Dezimalpunkt Formula b Werteeingabe Nur f r die Methodengruppe Dual wavelength Wert f r b in der Wert f r b in den Formeln a A 1 b A2 c d und a A7 Auswerteformel b A2 c d Grenze max 5 stellig einschlie lich Dezimalpunkt Formula c Werteeingabe Nur f r die Methodengruppe Dual wavelength Wert fur c in der Auswerteformel Grenze max 5 stellig einschlie lich Dezimalpunkt Wert f r c in den Formeln a A
85. l der Standards Auswertung mit Standards Bereich 1 bis 12 Bei einigen Methoden ist der Bereich f r die Anzahl der Standards auf einen kleineren Bereich als 1 bis 12 begrenzt Replicates Werteeingabe Zahl der Wiederholungsmessungen f r die verschiedenen Zahl der Replikate pro Standardkonzentrationen Standard Bereich 1 bis 3 Std Conc Werteeingabe Je nach Zahl der Standards wird dieser Parameter f r alle Konzentrationswerte der Standards Grenze Max 6 stellig einschlie lich Dezimalpunkt Standards angeboten z B Std Conc 1 Std Conc 2 Decimal places Werteeingabe Zahl der Nachkommastellen f r das Ergebnis Bereich 0 bis 3 Zahl der Nachkommastellen f r das berechnete Konzentrationsergebnis Methoden Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 41 Deutsch DE Parameter Dye 1 Eingabe Auswahl Liste von Farbstoffen die in der Funktion General Method Parameters Dyes hinterlegt sind Erl uterung Nur f r die Methodengruppe Dye labels Bei der Auswahl des Farbstoffs werden aus der Funktion General Method Parameters Dyes auch die dort programmierten dem Farbstoff zugeh rigen Parameter importiert Faktor Wellenl nge ggf Korrekturfaktoren f r die Messung bei 260 bzw 280 nm siehe Beschreibung des folgenden Parameters Correct A260 1 Auswahl ein aus Nur f r die Methodengruppe Dye labels Korrektur des Einflusses des Farbstoffspektrums auf die
86. lts und print amp export Im Schritt process results k nnen Sie bei einigen Methoden die Ergebnisse nachbearbeiten Beispiel Ver nderung des Spektrenausschnitts eines Scans Wie in der Ergebnisanzeige k nnen Sie mit den Cursor Tasten und zwischen den Probenergebnissen der Messreihe navigieren und gezielt Ergebnisse zur Nachbearbeitung ausw hlen Tab 6 4 Optionen bersicht Option Erl uterung Verf gbar in Methode Zoom Achsenbegrenzung bei Grunds tzlich alle Methoden f r die Extinktions Wellenl ngen Graphen ver ndern um die Darstellung auf vergr erte Ausschnitte des Graphen zu beschr nken der Parameter Scan angeboten wird und aktiviert wurde e Multi A e Scan e Nucleic acids e Proteins direct UV e Dye labels More calculations Konzentrationsergebnisse in molare Konzentrationen sowie nach Volumeneingabe in Gesamtmengen umrechnen e Nucleic acids e Dye labels mit Nukleins uren als Biomolek l Peak detection Peaks in Extinktions Wellenl ngen Spektren erkennen e Scan dsDNA R measure samples kont amp export new series 0 2010 07 16 16 3254 25 2 0 504 A 0 270 230 260 290 320 Alam Z Mi Zoom Joro Cate Ss J Finan pat Non gt 0 2010 07 16 16 32 54 Abs A 01 ID 0 460 0 00 25 2m 0 504 Aso 0 340 A260 A280 1 86 0 280 0 220 Change image section A
87. mfang die Vollst ndigkeit der Lieferung siehe Lieferumfang auf S 15 gt Pr fen Sie alle Teile auf eventuelle Transportbesch digungen 4 2 Standort w hlen W hlen Sie den Standort f r das BioSpectrometer fluorescence nach folgenden Kriterien e 2 Steckdosen mit Schutzleiter f r das BioSpectrometer fluorescence und f r den Drucker Fester Labortisch mit waagerechter Arbeitsplatte Platzbedarf des Ger tes 50 cm mit Drucker 75 cm Breite 50 cm Tiefe Temperatur 15 C bis 35 C Vermeiden Sie Temperaturschwankungen z B durch ge ffnete Fenster Vermeiden Sie direktes Sonnenlicht Luftfeuchtigkeit 25 bis 70 relative Feuchtigkeit i Achten Sie darauf dass keine Gegenst nde unter dem Ger t liegen z B lose Bl tter Hefte die die Luftzufuhr behindern k nnen 4 3 Ger t an das Netz anschlie en 1 Stellen Sie das BioSpectrometer fluorescence auf eine geeignete Arbeitsfl che 2 berzeugen Sie sich dass Netzspannung und Netzfrequenz mit den Angaben auf dem Typenschild bereinstimmen 3 Verbinden Sie das Ger t mit dem Stromnetz und schalten Sie es mit dem Netzschalter ein 4 Entfernen Sie die Schutzfolie vom Display 20 Installation Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Deutsch DE 4 4 Ger t mit einem Netzwerk verbinden i Die Verbindung des Ger ts mit einem Netzwerk ist optional Sie k nnen das Ger t auch ohne Netzwerkverbindung betreiben Informationen zu Netzwer
88. mples dilution Enter dilution for next sample 20 ut sample BQ yt diluent I 1 Clear ai 1 ok J cancel Softkeys Methoden Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 47 Deutsch DE Der Softkey Dilution ist aktiviert nachdem der Leerwert Taste blank gemessen worden ist 1 Dr cken Sie den Softkey Dilution 2 Geben Sie die Volumina f r die Probe maximal 3 stellig und f r den Verd nnungspuffer maximal 4 stellig ein Die nachfolgenden Probenergebnisse werden vom Ger t mit dem errechneten Verd nnungsfaktor multipliziert e Clear dil Werte f r die Probenverd nnung l schen OK Probenverd nnung best tigen und zur Probenmessung zur ckkehren e Cancel Eingabe abbrechen und zur Probenmessung zur ckkehren Die Verd nnung wird f r alle nachfolgenden Probenergebnisse angewendet bis sie durch erneute Eingabe ge ndert wird Proben ID eingeben Die ID wird f r das nachfolgende Probenergebnis angewendet Bei Eingabe einer ID wird die zuletzt eingegebene ID vorgegeben um so schnell fortlaufend strukturierte IDs eingeben zu k nnen Eine doppelte Vergabe derselben ID innerhalb einer Messreihe ist nicht m glich measure samples sample id Enter a sample ID for the next sample Sample 1D Keyboard I 1 op Cancel Softkeys Keyboard Tastatur einblenden 1 Dr cken Sie den Softkey Edit ID 2 Geben Sie die Pr
89. n RNA mit RiboGreen Auswertung mit Standardkurve gerade Messung von Oligonukleotiden mit OliGreen Auswertung mit Standardkurve gerade Varianten der Methodenprogramme wurden als short methods programmiert In short methods k nnen Sie mit nur zwei Standards Nullstandard und ein weiterer Standard messen Die Ergebnisse sind nicht so genau wie bei der Messung mit mehreren Standards die Genauigkeit ist aber f r viele Zwecke ausreichend da die Standardkurve Beziehung zwischen Messsignal und Konzentration angen hert linear ist Messung von DNA mit Qubit Reagenzien Auswertung mit Standardkurve gerade Keine short method da die Standardkurve nicht linear ist Proteins Fluorimetrische Konzentrationsbestimmung von Proteinen nach Reaktion mit Reagenzien Messung von Proteinen mit NanoOrange Auswertung mit Standardkurve gerade Die Methode basiert auf der Arbeitsvorschrift der Firma Invitrogen f r dieses Reagenz Keine short method da die Standardkurve nichtlinear ist Die Methoden mit Qubit Reagenzien weichen von den Arbeitsvorschriften der Firma Invitrogen ab Es m ssen zus tzlich zwei Standard Verd nnungen hergestellt werden Zur Probenvorbereitung und Durchf hrung k nnen Sie weitere Informationen von Eppendorf erhalten Die Kontaktdaten des Application Support finden Sie auf der R ckseite dieser Bedienungsanleitung 38 Methoden Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Deutsch DE 6 3 2 Metho
90. n Sie z B Alkohol Ethanol Isopropanol oder alkoholhaltige Desinfektionsmittel 4 Wischen Sie die Oberfl chen mit einem Tuch ab welches Sie mit Desinfektionsmittel befeuchtet haben 5 Wenn zur Desinfektion die K vettenschachtabdeckung ausgebaut werden muss verfahren Sie zum Ausbau und Zusammenbau wie beschrieben siehe K vettenschachtabdeckung reinigen auf S 74 6 Die demontierte K vettenschachtabdeckung k nnen Sie mittels Spr hdesinfektion desinfizieren 8 3 Ger t berpr fen Voraussetzungen Umgebungsbedingungen einhalten siehe Umgebungsbedingungen auf S 95 Pr fung bei ca 20 C durchf hren Temperaturschwankungen vermeiden z B durch ge ffnete Fenster e Filter nur kurzfristig dem Filterkasten entnehmen und vor Verschmutzung oder Besch digung der Filteroberfl chen sch tzen e Filter vor Staub Hitze Fl ssigkeit und aggressiven D mpfen sch tzen Filter ist so eingesetzt dass der Aufkleber mit der Filterbezeichnung zum Detektor hin zeigt berpr fung der Spektrometereinheit Aufkleber zeigt nach vorn berpr fung der Fluoreszenzeinheit Aufkleber zeigt nach rechts K vettenschacht ist frei von Verschmutzungen 8 3 1 Spektrometereinheit berpr fen Zur berpr fung der photometrischen Richtigkeit und der Wellenl ngenrichtigkeit wird von Eppendorf ein Filtersatz BioSpectrometer Referenzfiltersatz angeboten Der Satz enth lt ein Leerwertfilter AO und drei Filter A1 A2 und A3 zur
91. n der Bedienungsanleitung in den verf gbaren Sprachen finden Sie auf unserer Internetseite www eppendorf com 1 2 Gefahrensymbole und Gefahrenstufen Die Sicherheitshinweise in dieser Anleitung haben die folgenden Gefahrensymbole und Gefahrenstufen 1 2 1 Gefahrensymbole Stromschlag Explosion Giftige Stoffe Be Sachschaden 1 2 2 Gefahrenstufen Gefahrenstelle GEFAHR Wird zu schweren Verletzungen oder zum Tod f hren WARNUNG Kann zu schweren Verletzungen oder zum Tod f hren VORSICHT Kann zu leichten bis mittelschweren Verletzungen f hren ACHTUNG Kann zu Sachsch den f hren Anwendungshinweise Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Deutsch DE 1 3 Darstellungskonventionen Darstellung Bedeutung 1 Handlungen in vorgegebener Reihenfolge 2 gt Handlungen ohne vorgegebene Reihenfolge Liste oder sample Taste dr cken um eine beschriebene Handlung durchzuf hren S Copy oder Copy Softkey dr cken um eine beschriebene Handlung durchzuf hren 0 Zus tzliche Informationen Anwendungshinweise Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Deutsch DE 1 4 Abk rzungen A Absorbance Extinktion DNA Deoxyribonucleic acid Desoxyribonukleins ure DNS dsDNA double stranded DNA doppelstr ngige DNS Dye Methoden Methoden der Gruppe Dye labels f r die Messung von farbstoffmarkierten Biomolek len FOI Frequency of Incorpor
92. nd A Abs 0 200 Der Peak wird nicht erkannt da der vorgegebene Wert f r Mind A Abs zu gro ist Die Differenz der Extinktion des Peaks und der niedrigsten Extinktion im Raster ist kleiner als 0 2 A A Raster 20 nm Mind A Abs 0 050 Der Peak wird erkannt Methoden Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 59 Deutsch DE 6 5 7 print amp export Im letzten optionalen Methodenschritt konnen Sie Datenpakete fur alle oder fur ausgewahlte Proben einer Messreihe zusammenstellen e f r den Ausdruck auf dem Drucker e f r den Export auf einen USB Stick e f r den Export ber USB Kabel direkt zu einem PC e f r den Export per E Mail Ee un ser Datenpakete ausw hlen dsONA 2015 06 04 10 16 30 Navigieren Sie mit den Cursor Tasten und Bate PARKER best tigen Sie mit enter Samples Ek Format xLS Format ausw hlen seh lad XLS Als Excel Tabelle exportieren oder Graph data XLS only OXLS amp PDF d k ausdrucken l ElParameters PDF Als PDF exportieren oder ausdrucken Softkeys Print Ausdruck starten Print Export Samples Finish H lt Back Next gt Exportl Export starten e Sample Einzelne Probenergebnisse ausw hlen Datenpakete ausw hlen Results Prim re Ergebnisdaten nicht ausw hlbar da sie immer bertragen werden Data Zus tzliche Ergebnisdaten die in den Ergebnisanzeigen w hrend der Messung mit dem Softkey Datal angezeigt we
93. nen Extinktionswerte der Standardreihe sind nicht kontinuierlich steigend oder fallend Abhilfe 9 Standardmessungen wiederholen oder einzelnes fehlerhaft gemessenes Standardergebnis l schen Die ID kann nicht gesetzt werden Zur konkreten Ursache bitte die Information in der Hilfebox beachten Fehler bei der Eingabe der Proben ID Verschiedene Ursachen sind m glich 9 Siehe Information in der Hilfebox Die Verd nnung kann nicht gesetzt werden Fehler bei der Eingabe der Verd nnung Verschiedene Ursachen sind m glich Zur konkreten Ursache bitte die Information in der Hilfebox beachten 9 Siehe Information in der Hilfebox Berechnung ist nicht m glich weil durch Null geteilt wird Extinktionsergebnis oder Parameter Formula b ist Null Bei der Auswertung einer Methode des Typs Division Methodengruppe Dual wavelength musste durch ein Extinktionsergebnis mit dem Wert Null geteilt werden Das ist mathematisch nicht zul ssig gt berpr fen Sie die verwendeten Reagenzien und Proben und wiederholen Sie die Messung gt Geben Sie als Wert f r den Parameter Formula b nicht Null ein Es kann nur noch eine Messung in dieser Messreihe durchgef hrt werden Die maximale Anzahl an Messungen in einer Messreihe ist erreicht Die Zahl an Messungen in einer Messreihe ist auf 99 begrenzt gt Nach maximal 99 Messungen eine neue Messreihe starten Problembeheb
94. nhaltsverzeichnis Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Deutsch DE Technische D ten then SG GS tee Eeer A eg 95 11 1 Stromversorgung 111 68 0 95 11 2 020 26 95 2 0 0 95 11 4 Photometrische Eigenschaften 96 ee 3 3 96 11 6 Weitere technische Parameter 97 11 7 A w ndungsparamete EE 98 Auswerteverfahten 33 3 1 ee MORRIS 99 12 1 Extinktionswerte 3 3 3 pe eee AE 99 Blank 0 ee EE cle fe eee deny RE 99 12 1 2 Background Korrektur 99 12 1 3 Kuvettenkorrektur es ote EEN ee oats 100 12 2 Auswertung mit Faktor oder Standard 2200 6006 100 12 3 Auswertung mit Standardkurve gerade eeeeeeee eee eee 101 12 4 Verd nnung Ee een ns nn hae aud hte er Grete Sd ad wee 102 12 5 Spezielle Auswerteverfahren f r Nukleins uren und Protein UV 103 12 5 1 Korrektur 260 und Korrektur Aggy ee ee es 103 12 5 2 Ratio A260 A280 und Ratio A260 A230 eee 103 1
95. ntration A Extinktion F Faktor Der Faktor ist in der Parameterliste programmiert und kann ver ndert werden Er bezieht sich immer auf die K vettenschichtdicke 10 mm Wenn Sie den Parameter Cuvette ndern wird die nderung vom Ger t bei der Ergebnisberechnung ber cksichtigt Sie m ssen den Faktor f r die Auswertung also nicht ndern Wenn Sie die Konzentrationseinheit ndern m ssen Sie dagegen darauf achten dass der Faktor an die gew hlte Einheit angepasst ist Auswerteverfahren Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 101 Deutsch DE Der Faktor wird entweder beim Auswerteverfahren Factor direkt als Parameter eingegeben oder beim Auswerteverfahren Standard Auswertung mit einer Standardkonzentration berechnet F berechneter Faktor Cs Konzentration des Standards als Parameter eingegeben As gemessene Extinktion des Standards Wurde f r den Standard Mehrfachmessung 2 oder 3 Replikate programmiert wird aus den gemessenen Extinktionen der Replikate der Mittelwert gebildet und als As eingesetzt 12 3 Auswertung mit Standardkurve gerade Wird mit mehr als einem Standard ausgewertet k nnen mit dem Curve fit im Methodenschritt measure standards new folgende Auswerteverfahren f r die Standardkurve gerade ausgew hlt werden Auswerteverfahren Beschreibung Erforderliche Mindestzahl an Standardpunkten linear interpolation Lineare Mindestens 2 Standards Punkt zu Punkt Verbindung im Extinktions
96. oben ID maximal 12 stellig ein Alternativen zur Texteingabe Tastenblock Bei mehrmaligem Dr cken der Taste direkt hintereinander werden die Eingabem glichkeiten dieser Taste durchlaufen Tastatur mit Softkey Keyboard einblenden Zeichen mit den Cursor Tasten ausw hlen und mit enter best tigen e abc Wechsel zwischen Gro und Kleinbuchstaben bei Eingabe ber den Tastenblock OK ID Eingabe best tigen und zur Probenmessung zur ckkehren e Cancel Eingabe abbrechen und zur Probenmessung zur ckkehren Methoden 48 Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Deutsch DE Ergebnisbild mit Verd nnung und ID Ergebnisbild mit Verd nnung und Proben ID UI measure samples print amp export ew series Bradford 2010 12 02 17 08 03 Abs A 09 Dil 20 80 pL at w Soe ID B12 a 0 900 1 71 6 pg mL Z 0 566 Ass 0 600 0 300 M blank or sample 0 000 k K 0 300 600 900 12067 6 ml Conc Abs 0 566 Aland key Dilution Edt ID Data Finish lt Back Next gt 6 5 4 measure samples Ergebnisanzeigen In diesem Abschnitt erhalten Sie fur alle Methodengruppen eine Darstellung typischer Ergebnisanzeigen sowie einen berblick ber weitere Ergebnisdaten die Sie ber den Softkey Data erreichen Methodengruppe Ergebnisanzeige Erl uterung Photometrie Hauptgruppe Absorbance Single A Ergebnisanzeige Br
97. ometer fluorescence Deutsch DE 6 Methoden eat eet 0 3 De Ban ae nee Freche nahe 33 6 1 Methode auswanhleni cc us Hr aa gehe 33 6 2 Methodenbeschreibung Photometrie cece tenet eens 34 6 2 1 Methodengruppe Absorbance 34 6 2 2 Methodengruppe Routine 35 6 2 3 Methodengruppe Basic 36 6 2 4 Methodengruppe Advanced 37 6 3 Methodenbeschreibung Fluorimetrie 2 2 ete tenet nes 37 6 3 1 Methodengruppe Routine 37 6 3 2 Methodengruppe Basic 38 6 4 Methodenparameter 2 eeee eo 38 6 5 Methodenablauf 11 090 43 6 5 1 check parameters er eh 0 44 6 5 2 measure standards ere Ee NN ee NNN EEN 45 6 5 3 Measure samples cee ede Meee eee NI EEE Ne ER Ow Nie Ke EEN 46 6 5 4 measure samples Ergebnisanzeigen 0 cece ete teens 48 6 5 5 lee UE 54 6 5 6 process results Optionen 2 0 eos 56 6 5 7 oe me i ee eee sehen 59 6 5 8 Messreihe abschlie en eee es 62 7 Funktionen EGE E Ee 3 3131 3111 9080 63 7 1 Funktionen der Hauptgruppe User 63 7 1 1 Results re a NEE ENEE Be in nt 64 7 1 2 General Method Parameter 65 7 1 3 Absorbance Spectra Library 68 TAA Device Settings arn
98. on bei der Wellenl nge 260 nm bzw 280 nm Axxx gemessene Extinktion bei der Wellenl nge 260 nm bzw 280 nm CF Korrekturfaktor fur die Wellenlange 260 nm bzw 280 nm die beiden Korrekturfaktoren fur 260 nm und fur 280 nm sind fur einen Farbstoff spezifisch und werden in General Method Parameter Dyes im Bereich Functions programmiert Ayyy gemessene Extinktion bei der Wellenlange des Farbstoffs Die in den Ergebnisanzeigen dargestellten Extinktionswerte sind die direkt gemessenen nicht korrigierten Extinktionswerte 12 5 2 Ratio A260 A280 und Ratio A260 A230 Anwendung Information zur Reinheit der gemessenen Nukleins ure Die Anwendung des Auswerteverfahrens kann in den Parametern A260 280 beziehungsweise A260 A230 aktiviert werden Ratio bezeichnet den Quotienten der gemessenen Extinktionen bei den genannten Wellenl ngen Literaturwerte f r die Ratio Werte bei reinen Nukleins uren A260 A280 e DNA 1 8 bis 1 9 RNA 1 9 bis 2 0 Current Protocols in Molecular Biology 1994 104 Auswerteverfahren Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Deutsch DE A260 A230 F r die Ratio A260 A230 findet man in der Literatur unterschiedliche Angaben f r reine Nukleins uren e DNA 2 3 bis 2 5 The Nucleic Acids 1955 DNA 1 9 Current Protocols in Molecular Biology 1994 Die Werte sind stark vom pH Wert abh ngig Nukleins uren sollten daher nicht in Wasser sondern in einem Puffer mit pH Wert 7 bis 7 2 gemes
99. otein free 0030 106 300 952010051 50 2 000 uL 80 St ck einzeln verpackt Eppendorf UVette routine pack 220 nm 1 600 nm Eppendorf Quality 0030 106 318 952010069 50 2 000 uL 200 St ck wiederverschlie bare Box Eppendorf macro Vis Cuvettes 0030 079 345 0030079345 10 x 100 St ck Eppendorf semi micro Vis Cuvettes 0030 079 353 0030079353 10 x 100 St ck 4308 078 006 940001102 K vettenst nder f r 16 K vetten Bestellinformationen 110 Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Deutsch DE E Ce E Ce CE Ce tat ee Ch ce Ce CE Ce ek at kai ce tE e CE ce CS ce C ce Ge CE Ce CE Te CE ce Ch ce Ch ee ie e ce Se ce GC eS ei GC ce e ec ce Ku Ce ce Se 6 66 6 ehe ren GE Te CE Ye CE te E GA EG Konformit tserkl rung wer AA EC Conformity Declaration RT Das bezeichnete Produkt entspricht den einschlagigen grundlegenden Anforderungen der H C aufgef hrten EG Richtlinien und Normen Bei einer nicht mit uns abgestimmten nderung des 2 C GE ce Produktes oder einer nicht bestimmungsgem en Anwendung verliert diese Erkl rung ihre G ltigkeit ce ce c The product named below fulfills the relevant fundamental requirements of ce c 6 ce the EC directives and standards listed In the case of unauthorized modifications to the product ce C H or an unintended use this declaration becomes invalid ce ce Produktbezeichnung Product name Eppendorf BioSpe _2004 108
100. play die Meldung FAILED zeigt ist der Selbsttest fehlgeschlagen Wenn sich dieser Fehler nicht beheben l sst siehe Fehlermeldungen auf S 85 wenden Sie sich an den Eppendorf Service 8 4 Sicherungen ersetzen GEFAHR Stromschlag A Schalten Sie das Ger t aus und ziehen Sie den Netzstecker bevor Sie mit der Wartung bzw Reinigung beginnen Der Sicherungshalter befindet sich zwischen der Netzanschlussbuchse und dem Netzschalter Ziehen Sie den Netzstecker Dr cken Sie die Kunststofffedern 1 oben und unten zusammen und ziehen Sie den Sicherungshalter 2 vollst ndig heraus Ersetzen Sie defekte Sicherungen und setzen Sie den Sicherungshalter wieder ein Achten Sie auf die korrekte Position der F hrungsschiene 3 Instandhaltung Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 81 Deutsch DE 8 5 Dekontamination vor Versand Wenn Sie das Gerat im Reparaturfall zum autorisierten Technischen Service oder im Entsorgungsfall zu Ihrem Vertragshandler schicken beachten Sie Folgendes WARNUNG Gesundheitsgefahr durch kontaminiertes Gerat A 1 Beachten Sie die Hinweise der Dekontaminationsbescheinigung Sie finden diese als PDF Datei auf unserer Internetseite www eppendorf com decontamination 2 Dekontaminieren Sie alle Teile die Sie versenden 3 Legen Sie der Sendung die vollst ndig ausgef llte Dekontaminationsbescheinigung bei Instandhaltung 82 Eppendorf BioSpectrometer fluores
101. rameters Parameter die bergreifend f r verschiedene Methoden genutzt werden sind im Bereich Functions zentral gespeichert Diese Parameter k nnen hier editiert ge ndert oder neu erstellt werden Im Methodenschritt Check parameters sind die bergreifenden Parameter ber Auswahlboxen dann einfach ausw hlbar e Proteins Nucleic acids Dyes enthalten Parameter die f r Methoden der Gruppe Dye labels und Proteins direct UV genutzt werden e Units Einheiten f r Konzentrationsergebnisse die f r viele Methoden genutzt werden k nnen Absorbance spectra library Extinktions Wellenl ngen Spektren wichtiger Substanzen z B DNA Die Spektren dienen der Information und k nnen als Vergleich zum Spektrum eines Probenergebnisses herangezogen werden Device settings Editierbare Ger teeinstellungen z B Sprache 64 Funktionen Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Deutsch DE Untergruppe Erl uterung Device calibration M glichkeit zur berpr fung des Spektralphotometers Hierzu ben tigen Sie einen Filtersatz von Eppendorf M glichkeit zur berpr fung der Fluoreszenzeinheit Info Open Source Lizenzen und Informationen zu eingetragenen Warenzeichen 7 1 1 Results Memory Wahlen Sie in der rechten Spalte die Methode aus f r die Sie gespeicherte Ergebnisse aufrufen m chten gt Best tigen Sie mit enter Functions Functions E Albumin A 280 D PicoGreen short
102. raphen ein aus zusatzlich zum Ergebnis bei der Probenmessung Start A Werteeingabe Startwellenlange fur die Aufnahme des Scans Wellenlange in nm Bereich 200 bis 830 nm 42 Methoden Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Deutsch DE Parameter Eingabe Erl uterung Stop A Werteeingabe Stoppwellenlange fur die Aufnahme des Scans Wellenlange in nm Bereich 200 bis 830 nm Wert muss h her sein als der Wert f r Start A A260 A280 Auswahl Nur fur Nukleinsauren ein aus Anzeige der Ratio A260 A280 zusatzlich zum Ergebnis bei der Probenmessung A260 A230 Auswahl Nur f r Nukleins uren ein aus Anzeige der Ratio A260 A230 zus tzlich zum Ergebnis bei der Probenmessung FOI Auswahl Nur f r die Methodengruppe Dye labels none dye kb pmole Anzeige des FOI zus tzlich zum Ergebnis bei der ug Probenmessung Der FOI Frequency of Incorporation ist ein Ma f r die Zahl der in die Nukleins ure eingebauten Farbstoffmolek le pro Molek l der Nukleins ure Einheiten sind dye kb Molek le Farbstoff pro 1000 Basen oder pmole ug pmol Farbstoff pro ug Nukleins ure none keine FOl Berechnung Background Auswahl Vor der Ergebnisberechnung einer Probe wird die Extinktion ein aus einer Background Wellenl nge bei der der zu messende Analyt die Extinktion Null zeigen soll von der Extinktion der Messwellenl nge subtrahiert H ufige Anwendung Partielle Tr bungskorrektur bei Mess
103. rationsergebnisse mit Extinktion bei der Messwellenlange des Biomolek ls Falls in den Parametern aktiviert Scan Navigieren Sie zwischen den Messpunkten im Graphen mit und Zusatzdaten Softkey Data Sofern die entsprechenden Parameter aktiviert wurden e Ratio A260 A280 und Ratio A260 A230 Extinktionswerte f r 280 nm und 230 nm sowie f r die Messwellenl nge des Farbstoffs FOl Wert Extinktionswerte f r die Background Wellenl ngen Bei der Messung von Farbstoff markierten Proteinen werden Ratios und FOI nicht angezeigt Bacterial density OD 600 measure samples e LT TL OD 600 2010 07 02 14 2039 01 ID 0 846 0 846 Ay A vi Dilution Edit 1D Wl Go lt Back I Next gt Ergebnisanzeige Berechnetes Ergebnis mit Extinktion bei der Messwellenlange Falls in den Parametern aktiviert Scan Navigieren Sie zwischen den Messpunkten im Graphen mit und Methoden 52 Deutsch DE Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Methodengruppe Photometrie Hauptgruppe Basic Ergebnisanzeige Erl uterung Factor standard Analog zu Protein direct UV siehe oben Ergebnisanzeige e Konzentrationsergebnis mit Extinktion bei der Messwellenl nge Calibration curve Analog zu Proteins with reagent siehe oben Ergebnisanzeige e Konzentrationsergebnis mit Extinktion bei der Messwellenl nge e Graph d
104. rden Graph Extinktions Wellenl ngen Spektrum Graph data Die nummerischen Basisdaten f r den Graphen export only Nur f r den Export nicht f r den Ausdruck verf gbar Parameters Methodenparameter Standards Results Ergebnisdaten der Standardauswertung Standards Graph Nur bei Standardauswertungen mit mehreren Standards Extinktions Konzentrations Graph In Abh ngigkeit von der Methode und von der Parametereinstellung werden nur die jeweils verf gbaren Datenpakete angeboten 60 Methoden Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Deutsch DE Einzelne Probenergebnisse ausw hlen a 0 e Dr cken Sie den Softkey Samples um die Probenauswahl aufzurufen Sample selection 01 0 000 Azs u i 01 0 33mg mL Navigieren Sie mit den Cursor Tasten und 02 1 34mg mL best tigen Sie mit enter 03 0 33mg mL 04 0 89mg mL 05 0 11mg mL Softkeys Select all Alle Proben ausw hlen De Sel alll Auswahl zur cksetzen Print Export Select all De sel all OK Cancel Export starten Die Daten werden als Excel Datei xls oder als PDF bertragen Excel Dateien sind mit Excel Versionen ab Excel 97 lesbar F r jedes der ausgew hlten Datenpakete wird ein Tabellenblatt in Excel angelegt Der Dateiname setzt sich aus dem Methodenamen der Uhrzeit und dem Datum der Messreihe zusammen Geen Navigieren Sie mit den Cursor Tasten und Select an export method OExport to e
105. remolek l eingegeben wurde wird MM aus der Zahl der Basen bzw Basenpaaren berechnet Fur dsDNA MM bpx2x330x10 Fur ssDNA RNA Oligo MM bx330x10 MM berechnete relative Molmasse Einheit kDa bp eingegebene Zahl der Basenpaare pro Molekul b eingegebene Zahl der Basen pro Molekul i e F r dsDNA wird bei der Berechnung der molaren Konzentration eine doppelstr ngige Nukleins ure angenommen F r die Methoden ssDNA RNA und Oligo wird eine einzelstr ngige Nukleins ure angenommen e F r Methoden die in der Hauptgruppe Routine Methodengruppe Nucleic acids ber lt New Method gt neu programmiert wurden werden f r die Berechnung der molaren Konzentration immer doppelstr ngige Nukleins uren angenommen 12 5 4 Berechnung des Faktors f r Protein in General Method Parameter Dieser Abschnitt gilt nur f r Berechnung der Proteinkomponente in den Methodengruppen Dye labels und Proteins direct UV Bei diesen Methodengruppen wird in den Parametern die Proteinkomponente ausgew hlt siehe Methodenparameter auf S 38 Der Proteinkomponente ist ein Faktor zugeordnet der in der Funktion General Method Parameter Proteins f r jedes Protein eingegeben wird Alternativ zur Eingabe des Faktors kann entweder Ag 79 oder der Extinktionskoeffizient plus die Molmasse des Proteins eingegeben werden In diesem Fall wird der Faktor wird wie folgt berechnet 41 Aoi F Faktor f r das Protein Einheit g L Fp Ao 1 Extinkt
106. richten 2 Starten Sie mit Export den Versand an eine EMail Adresse e W hlen Sie in der Dropdownliste Edit und E mail address best tigen Sie mit enter Es ffnet sich ein Fenster in dem die E Mail Adressen bearbeitet werden k nnen com e Edit E Mail Adresse bearbeiten e New Neue E Mail Adresse anlegen e Delete E Mail Adresse l schen Edit New Delete OK Ausdruck starten Die Daten k nnen ber Drucker im Netzwerk oder ber einen angeschlossenen USB Drucker ausgedruckt werden Wenn das Ger t an ein Netzwerk angeschlossen ist werden automatisch alle kompatiblen Drucker im Netzwerk erkannt und angezeigt Besteht keine Verbindung zum Netzwerk steht nur ein angeschlossener USB Drucker zur Auswahl 2 Starten Sie mit Print den Ausdruck der Daten Mh HP Color LaserJet 2605dn IP address Seiko DPU S445 192 168 20 10 Seiko DPU 414 Print Cancel 62 Methoden Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Deutsch DE 6 5 8 Messreihe abschlie en Im Anschluss an den letzten Methodenschritt print amp export k nnen Sie eine neue Messreihe mit der gew hlten Methode starten oder eine neue Methode w hlen Messreihe abschlie en und neue Messreihe starten Softkey Next gt Methodenschritt new series Albumin A 280 2010 11 19 18 32 05 aufrufen Softkey New Methodenschritt measure samples
107. sen werden z B TE Puffer 12 5 3 Umrechnung in molare Konzentrationen und Nukleins uremengen Die Umrechnung kann nur f r Nukleins uren und Dye Methoden mit Nukleins uren als Biomolek lkomponente angewendet werden Sie erfolgt im Methodenschritt process results More calculations 12 5 3 1 Berechnung der Menge Anwendung Berechnung der Menge Masse an Nukleins ure im gesamten Probenvolumen M CxV gesamt M berechnete Gesamtmenge Masse der Nukleins ure im Probengef Einheit ug C aus der Messung berechnete Konzentration der Nukleins ure Einheit ug mL oder ng uL Vp gesamt Gesamtvolumen der Probe im Probengef Geben Sie diesen Wert in More calculations ein Einheit uL 12 5 3 2 Berechnung der molaren Konzentration Anwendung Berechnung der molaren Konzentration der Nukleins ure aus Massenkonzentration und relativer Molmasse Die Molmasse wird entweder direkt eingegeben oder vom Ger t aus der eingegebenen Zahl der Basen bzw Basenpaare pro Nukleins uremolek l errechnet Cx10 MM berechnete molare Konzentration der Nukleins ure Einheit pmol mL C aus der Messung berechnete Massenkonzentration der Nukleins ure Einheit ug mL oder ng uL MM relative Molmasse Einheit kDa Auswerteverfahren Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 105 Deutsch DE Falls in More calculations statt der relativen Molmasse die Zahl der Basen bzw Basenpaaren pro Nukleins u
108. ss 4 anschlie en siehe Gesamtillustration auf S 15 Alternativ k nnen Sie das Ger t f r den Datenexport ber ein USB Kabel direkt mit einem PC verbinden Voraussetzung e PC mit Windows Version XP SP2 oder h here Version USB Kabel mit je einem Stecker Typ A und Typ B gt Verbinden Sie das Ger t mit dem PC ber das USB Kabel am USB Anschluss 8 siehe Gesamtillustration auf S 15 e Sie ben tigen keine spezielle PC Software f r die Daten bertragung Ubertragene Datenpakete werden vom PC wie ein USB Stick als Wechseldatentr ger erkannt Um die Daten sichtbar zu machen m ssen Sie das angemeldete Datenpaket nur ffnen e Die bertragung von Daten auf den USB Stick oder an den PC starten Sie nach Abschluss der Messreihe im Methodenschritt print amp export siehe print amp export auf S 59 Installation 22 Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Deutsch DE Bedienung Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Deutsch DE 5 Bedienung 5 1 bersicht Bedienelemente Abb 5 1 Bedienelemente des BioSpectrometer fluorescence 23 24 Bedienung Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Deutsch DE Taste Funktion Tastenblock Zahlen und Text eingeben Tasten 1 bis 9 sowie 0 Bei Texteingabe k nnen Sie neben Ziffern auch Buchstaben und Sonderzeichen durch mehrmaliges Dr cken der Taste eingeben Alternativ wechseln Sie mit Keyboard zu einer eingeblendeten Tastatur Au
109. swertung mit eingezeichnetem Probenergebnis Proteins Analog zu Nucleic acids siehe oben Ergebnisanzeige Konzentrationsergebnis mit RFU Wert bei der Messwellenl nge e Graph der Standardauswertung mit eingezeichnetem Probenergebnis Hauptgruppe Basic Raw fluorescence Raw fluorescence check parameters measure e Raw fluorescence 2012 02 02 16 48 25 04 ID 143 A iv J Finish lt Back Next gt Dilution Editio Ergebnisanzeige e RFU Wert bei der Messwellenlange e Nur bei Verd nnung Zus tzliche Anzeige des RFU Werts vor der Umrechnung Standard Standard measure standards measure samples Standard 2012 02 02 16 50 31 02 ID B Taom 72 8 into A and Wh Dilution Edit 1D 1 Finish lt Back Next gt Ergebnisanzeige Konzentrationsergebnis mit RFU Wert bei der Messwellenlange 54 Methoden Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Deutsch DE Methodengruppe Fluorimetrie Calibration curve Ergebnisanzeige Analog zu Nucleic acids siehe oben Erl uterung Ergebnisanzeige Konzentrationsergebnis mit RFU Wert bei der Messwellenl nge e Graph der Standardauswertung mit eingezeichnetem Probenergebnis 6 5 5 process results Nach der Probenmessung folgen im Methodenablauf zwei optionale Schritte process resu
110. und in die Auswahl der Parametergruppe zur ckkehren e Cancel In die Auswahl der Parametergruppe ohne nderung zur ckkehren Bei der Programmierung einer Methode der Methodengruppen Dye labels oder Proteins direct UV k nnen Sie auf die Eintr ge in General Method Parameter zugreifen DEED check parameters edit Cuvette 10mm Page 1 3 Unit ont e Nucleic acid ssDNA Y Factor Decimal places 4 Dye 1 Correct A260 1 Correct A280 1 H H Page an J Save I Save As Cancel Tab 7 2 Parameter in General Method Parameter W hlen Sie den Namen des Dyes aus um die zugeh rige Parametergruppe in das Methodenprogramm zu importieren ber die Auswahl edit beim Parameter Nucleic acid k nnen Sie auch direkt in die Funktion General Method Parameter gelangen und dort die Parameter ansehen sowie editieren Parameter Erl uterung Proteins Diese Parameter werden bei der Auswahl eines Proteins bei der Programmierung einer Methode der Gruppe Dye labels sowie Proteins direct UV in die Methodenparameter geladen e Protein name Neben dem Namen und der Wellenl nge k nnen Sie zur Definition des Factor Faktors f r die Berechnung der Konzentration aus der Extinktion die e Au 1 folgenden Daten eingeben Ext coeff Faktor oder Ag 1 oder Extinktionskoeffizient und Molmasse e Molecular mass Funktionen Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 67 Deutsch DE
111. ung 88 Deutsch DE Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Symptom Meldung Ung ltiges Zoom Intervall M gliche Ursache Fehler im Methodenschritt process results im Zoom Modus Zul ssiger Zoom Bereich f r die Wellenl ngenskala e Wellenl ngenintervall mindestens 10 nm e Eingaben f r Wellenl ngen nur innerhalb des f r die Methode in den Parametern programmierten Bereichs Zul ssiger Zoom Bereich f r die Extinktionsskala e Extinktionsintervall mindestens 0 02 A e Ober und Untergrenze f r Extinktionsintervall 3 A bzw 3 A Abhilfe Beachten Sie beim Zoom Ablauf die genannten Grenzen 9 3 Ergebniskennzeichnungen Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Problembehebung 89 Deutsch DE Warnungen und Fehlermeldungen zu Ergebnissen erscheinen in der Hilfebox unten rechts im Display Bei Warnungen ist die Kopfzeile der Hilfebox gelb unterlegt bei Fehlermeldungen rot Warnungen Entscheiden Sie unter Ber cksichtigung der angezeigten Warnung ob das Ergebnis f r Sie nutzbar ist Fehlermeldungen Es wird kein Ergebnis dargestellt die Begr ndung wird in der Fehlermeldung angezeigt Symptom Meldung Standardkurve ist nicht monoton Bitte anderen Curve M gliche Ursache e Bei Auswertung einer Standardkurve mit den Curve Fit Verfahren spline interpolation quadratical Abhilfe 9 Anderes Curve Fit Verfahren w hlen Fit w hlen regression oder cubical
112. ung von Nukleins uren Background Wellenl nge hierf r 320 nm oder 340 nm Wavelength Wellenl nge in nm Wellenl nge bei der der Background gemessen werden soll Bereich 200 bis 830 nm Der zu messende Analyt sollte hier in reiner Form den Extinktionswert Null haben Background for dyes Auswahl ein aus Nur f r die Methodengruppe Dye labels Anwendung der Background Korrektur auf die Messung des Farbstoffs siehe Parameter Background Wavelength Wellenl nge in nm Nur f r die Methodengruppe Dye labels Bereich 200 bis 830 Wellenlange bei der der Background f r den Farbstoff nm gemessen werden soll Der zu messende Farbstoff in reiner nicht kontaminierter Form sollte bei dieser Wellenl nge den Extinktionswert Null haben Autoprint Auswahl Ausdruck eines Messergebnisses direkt nach der Messung mit ein aus dem Thermodrucker Es werden nur die wesentlichen Ergebnisdaten ausgedruckt F r die Ausgabe detaillierterer Daten k nnen Sie zum Abschluss der Messserie im Methodenschritt print amp export die gew nschten Datenpakete zusammen stellen und ausdrucken Methoden Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 43 Deutsch DE 6 5 Methodenablauf Der Wizard am oberen Rand der Anzeige f hrt Sie UH check parameters measure samples durch den Methodenablauf Der jeweils aktive Se 1 ase RR Methodenschritt ist hervorgehoben Wavelength 595 nm Unit pg mL Calculation Standard
113. usschnitt der y Achse wird bei 238 246 254 282 270 eil jedem Schritt automatisch so angepasst dass Maximum und Minimum der darzustellenden spectra wee Jesse save cancer Daten den Ausschnitt optimal ausnutzen ESNA Variante spectra 0 dsDNA 2010 07 16 16 32 54 Entspricht der Variante spectra mit der Ausnahme Abs A Die untere Grenze des dargestellten Ausschnitts der W er y Achse entspricht immer 0 A 0 360 25 2 0 270 0 504 Ay 0 180 A260 A280 1 86 0 090 0 000 SONA 2010 07 16 163254 Intervallgrenzen f r beide Achsen k nnen frei EER eingegeben werden pe Navigation zwischen den Eingabefeldern mit den sites DE P Cursor Tasten O 0 370 0 504 Axo 0 280 f A260 A280 1 86 0 190 235 248 257 266 275 5 spectra spectra 0 free eset 2 Save Cancel Bei allen 3 Varianten f hrt der Softkey reset zoom zur Ausgangsdarstellung des Spektrums zur ck More calculations Dr cken Sie den Softkey More calc process results more calc 0 2012 06 01 17 04 47 Entries 13 Total volume of sample 100 pL ID Molecular mass 297 basepairs 196 kDa Calculations 6 Orom dsDNA 6 0 ng mL 0 120 Axo 0 6 pg total amount in sample 30 7 pmol mL 3 1 pmol total amount in sample Il il H Save Cancel process results more calc ssDNA Cy 3 2010 11 29 12 08 12
114. utzt ist reinigen Sie es durch Abwischen mit einem fusselfreien Labortuch das mit Ethanol oder Isopropanol getr nkt ist Stellen Sie sicher dass das erforderliche Mindestvolumen der K vette f r eine Messung erreicht wird und dass keine Blasen in der Messl sung sind Zentrifugieren Sie tr be partikelhaltige Messl sungen und benutzen Sie den klaren berstand Wenden Sie sich an den Eppendorf Service Halten Sie die Umgebungsbedingungen ein Vermeiden Sie Temperaturschwankungen Reinigen Sie den K vettenschacht Entfernen Sie die st renden Substanzen Wenn die st renden Substanzen nicht entfernt werden k nnen kann die Messtechnik Fluorimetrie nicht verwendet werden gt Schlie en Sie die K vettenschachtabdeckung vor der Messung 84 Problembehebung Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Deutsch DE Fehler Messergebnisse sind unrichtig M gliche Ursache Methode falsch programmiert e Standardl sung nicht richtig vorbereitet e Extinktion des Reagenz driftet e Die K vette ist nicht richtig positioniert Abhilfe 9 Stellen Sie sicher dass die Methodenparameter richtig eingegeben sind 9 Stellen Sie sicher dass der richtige Standard benutzt wird und die Messl sung f r den Standard richtig vorbereitet wird gt Bei instabiler Reagenzextinktion und Endpunkt Methoden Messen Sie bei der Messung einer langen Probenserie den Reagenzleerwert nicht nur zu Be
115. ve fit im Methodenschritt measure standards new verschiedene Auswerteverfahren f r die Standardkurve gerade ausgew hlt werden siehe Auswertung mit Standardkurve gerade auf S 101 Die Ergebnisberechnung der Verd nnung erfolgt wie bei photometrischen Methoden siehe Verd nnung auf S 102 13 Bestellinformationen Bestellinformationen Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 109 Deutsch DE Best Nr International 6135 000 009 Best Nr Nordamerika Beschreibung Eppendorf BioSpectrometer basic 230 V 50 60 Hz Netzstecker Europa weitere Netzanschlussvarianten erh ltlich 6135 000 017 6135000017 120 V 50 60 Hz Netzstecker Nordamerika Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 6137 000 006 230 V 50 60 Hz Netzstecker Europa weitere Netzanschlussvarianten erhaltlich 6137 000 014 6137000014 120 V 50 60 Hz Netzstecker Nordamerika BioSpectrometer fluorescence Referenzfiltersatz 6137 928 009 6137928009 Filtersatz zur berpr fung der photometrischen Richtigkeit und Wellenl ngenrichtigkeit gem NIST sowie zur berpr fung der fluorimetrischen Pr zision zuf llige Messabweichung und Linearit t Thermodrucker DPU S445 inkl Netzteil und Druckerkabel 6135 011 000 230 V EU 6135 010 004 6135010004 115 V 110V USA JP 6135 012 007 230 V UK Thermopapier 0013 021 566 952010409 5 Rollen Eppendorf UVette 220 nm 1 600 nm Original Eppendorf Kunststoffk vette PCR clean Pr
116. vorgegebenen Liste der zugeh rige Faktor importiert Die Definition der Faktoren erfolgt separat in den Funktionen der Gruppe Gen method param Verschiedene Proteine sind in Gen method param vorprogrammiert Weitere k nnen Sie hinzuf gen Proteins with reagent Konzentrationsbestimmung von Proteinen durch Messung nach Farbreaktionen und Auswertung ber Standards oder Faktor typisch Auswertung mit Standardkurve e Die Methoden Bradford Bradford micro Lowry Lowry micro BCA und BCA micro sind bereits vorprogrammiert Je nach Reagenzhersteller muss gegebenenfalls der Curve fit Standardkurventyp ver ndert werden Methoden Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Deutsch DE Dye labels F r Farbstoff markierte Biomolek le Konzentrationsbestimmung des Biomolek ls Nukleins ure oder Protein durch Messung bei 260 bzw 280 nm sowie des Farbstoffs in einem Messablauf Auswertung mit Faktor Neben dem Biomolek l k nnen bis zu zwei Farbstoffe bei zwei unterschiedlichen Wellenl ngen parallel gemessen werden Zus tzlich Auswertung der Einbaurate des Farbstoffes FOI Auswahl zwischen zwei verschiedenen FOI Berechnungsverfahren Bereits vorprogrammierte Methoden ssDNA markiert mit Cy 3 bzw Cy 5 Korrektur des Einflusses des Farbstoff Spektrums auf die Richtigkeit der Biomolek lmessung ist m glich Partielle Tr bungskorrektur ber Parameter Background m glich Zusatzinformationen zur Reinheit der gemessenen Stoffe
117. w 60 uL bis 3000 uL Fluorimetrie benutzen 3 3 1 Methoden Photometrie Zahlreiche Methoden f r die Konzentrationsbestimmung von Nukleins uren Proteinen und Farbstoff markierten Nukleins uren und Proteinen sowie die Methode OD 600 f r die Bestimmung der Bakteriendichte durch Tr bungsmessung sind bereits vorprogrammiert Weiterhin sind Methoden Templates f r unterschiedliche Mess und Auswerteverfahren Ein und Mehrwellenl ngenmessungen Spektrenaufnahmen Auswertungen mit Faktor Standard und Standardkurve vorprogrammiert Eigene Methoden k nnen auf Basis der vorprogrammierten Methoden und Templates erstellt werden Mit den Templates der Methodengruppe Absorbance k nnen Sie schnell Extinktionen oder Spektren ohne weitere Auswertung messen Fluorimetrie Methoden f r die Konzentrationsbestimmung von Nukleins uren mit PicoGreen RiboGreen OliGreen und den Qubit Reagenzien sowie von Proteinen mit NanoOrange sind vorprogrammiert Kurzvarianten der Nukleins ure Methoden f r eine schnelle Messung mit nur zwei Standards sind ebenfalls enthalten Wie f r die Spektralphotometrie sind Methoden Templates f r unterschiedliche Auswerteverfahren ber Faktor Standard und Standardkurve vorprogrammiert 3 3 2 Bedienung Die vorprogrammierten Methoden und Templates sind in bersichtlichen Gruppen zusammengefasst aus denen Sie schnell Ihre gew nschte Methode ausw hlen k nnen Nach Methodenaufruf werden Sie in bersichtlichen Schritten
118. xternal storage medium best tigen Sie mit enter OE tto PC mmm Export to external storage medium Daten auf email example com z einen USB Stick speichern Wenn kein USB Stick angeschlossen ist ist diese Variante nicht anw hlbar e Export to PC Daten auf einem PC speichern Beben Export via email Daten an eine E Mail Adresse schicken J H I Export Cancel Export auf USB Stick 1 Schlie en Sie einen USB Stick FAT 32 formatiert an den USB Anschluss 4 an siehe Gesamtillustration aufS 15 2 Starten Sie mit Export den Export auf ein externes Speichermedium Export auf PC Voraussetzung f r das Betriebsystem des PC Windows XP SP2 oder h here Version 1 Verbinden Sie das Ger t mit dem PC ber das USB Kabel am USB Anschluss 8 siehe Gesamtillustration aufS 15 2 Stellen Sie bei wiederholtem Export sicher dass zuvor exportierte Daten auf die Festplatte des PC gespeichert wurden da diese sonst durch den erneuten Export berschrieben w rden Starten Sie mit Export den Export auf den PC 4 Das exportierte Datenpaket wird auf Ihrem PC als Wechseldatentr ger mit dem Namen eppendorf angezeigt ffnen Sie die Datei in diesem Laufwerk und speichern Sie sie auf der Festplatte Ss Methoden Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 61 Deutsch DE Export an eine E Mail Adresse 1 W hlen Sie aus der Liste eine E Mail Adresse oder w hlen Sie Edit um eine neue E Mail Adresse einzu
119. zul ssigen Wertebereich bereinstimmen wenden Sie sich an den Eppendorf Service 80 Instandhaltung Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Deutsch DE 8 3 3 Selbsttest des Ger ts Die H ufigkeit des automatischen Selbsttests Dauer ca 1 Minute k nnen Sie mit der Funktion Device settings einstellen siehe Device Settings auf S 68 Ab Werk ist als Selbsttest Intervall w chentlich eingestellt Beim Selbsttest werden die folgenden Punkte berpr ft berpr fung des Detektors Bestimmung der zuf lligen Messabweichung ber das gesamte verf gbare Spektrum berpr fung der Lichtquelle berpr fung der maximal verf gbaren Energie der Lichtquelle und der Qualit t der Lichtleitung durch das Ger t Bestimmung der zuf lligen Messabweichung eines Signals am Referenzsensor Bestimmung der Signalh he am Referenzsensor Separate Bestimmung der Lichtintensit t im UV Bereich Bestimmung der systematischen und zuf lligen Messabweichung der Wellenl nge Position eines Intensitatspeaks im UV Bereich des Spektrums Pr zision der Position eines Intensitatspeaks im UV Bereich des Spektrums Bestimmung der zuf lligen Messabweichung des Anregungslichts Rauschen Bestimmung der Signalh he und abweichung des emittierten Lichts W hlen Sie in der Gruppe Device calibration die Funktion Perform selftest und best tigen Sie mit enter Nach Ablauf des Selbsttest zeigt das Display die Meldung PASSED Wenn das Dis

Bedienungsanleitung – BioSpectrometer fluorescence

Contents

Download Pdf Manuals

Related Search

Related Contents

Bedienungsanleitung &ndash; BioSpectrometer fluorescence

Contents

Download Pdf Manuals

Related Search

Related Contents

Bedienungsanleitung – BioSpectrometer fluorescence