Leica EM AFS2 Leica EM FSP
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1. Abb 7 9 Eintauchen des Harzblocks in LN2 Bringen Sie den gek hlten Probentrager in Kontakt mit dem erw rmten Abtrenn werkzeug siehe Abb 7 10 Beobachten Sie den Vorgang bis das kondensierte Eis auf der Oberfl che des Tr gers zu schmelzen beginnt Neigen Sie dann den Block vorsichtig Uberhitzen Sie das Harz es 1 nicht da ein schmelzender Te EN Block beim Neigen nicht nur Abb 7 10 Kalter Probentr ger in Kontakt mit den Objekttr ger sondern erw rmter Klinge des Abtrennwerkzeugs auch die Probe freigibt Neigen Sie den Harzblock vollst ndig sodass der Probentr ger unter der Klinge bleibt und von der scharfen Kante gehal ten wird siehe Abb 7 11 Bi Abb 7 11 Probentr ger bleibt unter der Klinge des Abtrennwerkzeugs wenn der Harzblock mit der Probe vollst ndig geneigt ist 80 7 2 2 Flach eingebettete Proben Montieren Sie das M4 Werkzeug als Griff an das Abtrennwerkzeug sodass die Klinge wie in Abb 7 12 dargestellt nach oben zeigt Erwarmen Sie das Abtrennwerkzeug z B auf EM MP auf ca 80 C wenn es sich um Epoxy Harze handelt siehe Abb 7 5 oder ca 40 C wenn es sich um Acryl harze handelt siehe Abb 7 5 auf vorheri ger Seite Klemmen Sie den Harzblock in einen Probentrager beispielsweise den Proben trager fur ein Leica Ultramikrotom siehe Abb 7 13 Trennen Sie das Harz wie in Abb 7 13 dargestellt mit einer scharfen Rasierklinge von der Unters2. Ein Speicherstift wird automatisch von der Software erkannt wenn darauf bereits ein AFS2 Programm gespeichert ist _ Save Program Disk Falls 2 oder mehr Speicherstifte vorhan den sind unterscheidet die Software nicht zwischen ihnen Es wird daher empfohlen nur jeweils einen Speicherstift zu verwen den Wahlen Sie die Quelle z B die Festplat W hlen Sie das Ziel z B die Festplatte te und die Programmdatei aus und den Ordner aus Save Program File Bee kesm LJ Fee Ina ere Fer Let iira Der A ra da Fima njiram er Sd e in Cer ed Phe ex See wess L Ee ee WE AN Kate Ihn x Slpsiueugw iuhan p mi Erbe p ticked dk pirea allze tat ISAL D da d ee Le a PL cha iri pig Aktivieren Sie NEW um ein neues Pro 2 Taste Close gramm in der Programmeditoranzeige zu schreiben NEW gt Aktivieren Sie CLOSE um den PC Programmeditor zu schlie en CLOSE Aktivieren Sie PRINT um ein Programm uber Ihren PC zu drucken _ i 3 Feld Programmname Geben Sie den gewunschten Programm namen maximal 13 Zeichen ein Aktivieren Sie Settings um das Temperaturformat f r den PC Programm PAOI ARET 4 Programmmodus manuell oder FSP Settings Wahlen Sie den Programmmodus aus EE dem Pulldown Men aus Das Einstellungsfenster wird angezeigt Manual MM Settings Temperature Unit f Celsius Fahrenheit Pa MANUAL f
3. LGR 1 Program ERIE REWAWE SAVE CLOSE iver COPT PASTE DELETE ee Se Em FSP Programmmodus Im Programmmodus FSP A oder FSP A B pr ft die Pr ffunktion das Programm auf logische Fehler Beispiel Typ von Schritt 1 und T von Schritt 2 stimmen nicht berein START hnlich wie beim Programmmodus ma nual wird in diesem Fall ein blaues Infor mationsfenster angezeigt aus dem der Anwender die Position des Fehlers erf hrt in obigem Beispiel Schritt 2 Andere Fehler auf die mit der Pr ffunktion gepr ft wird mix mit einer Verd nnungsdifferenz von lt 10 mix mit unterschiedlichen Reagenzien bertragungsschritte oder R hren nach x UV bertragungsschritte nach reduce mix zum Erreichen einer 100prozentigen Verd nnung wird automatisch in exch fill ge ndert 3 Falls keine logischen Fehler im Programm vorhanden sind erscheint die FSP Anzeige freen Heni Er irm gpi Meg he H iA he Pe FRA JO IE HRA 20 1s IH ET Lern Ham bheOH Care neren bebe dd SP Informationen hierzu siehe Kapitel 4 1 5 Die FSP Anzeige im berblick und 4 1 6 Funktionen der FSP Anzeige Klicken Sie zur Best tigung auf RETURN 4 1 5 Die FSP Anzeige im Uberblick fresh MeOH 100 4 ludwig plt fresh MeOH 100 fresh MeOH 100 HM 20 100 HM 20 100 HM 20 100 HM 20 100 empty
4. zu verwenden Eine Zifferntastatur wird angezeigt Geben Sie die gew nschte Temperatur ein z B 90 C und best tigen Sie mit OK W hrend das Ger t im Begriff ist eine voreingestellte Temperatur z B 90 C zu erreichen wird gt XX C angezeigt gt 90 C Gei temperature W hrend der Ausf hrung eines Pro gramms wird processing angezeigt W hlen Sie alternativ Deep Freeze oder Processing Standby W hrend der Unterbrechung eines Pro gramms wird paused angezeigt paused Bei Abschluss eines Programms wird finished angezeigt 2 Pause Schritt Ende Anzeiger Ablesen des Anzeigers Ursprunglicher Status Die angezeigte Datums Uhrzeitangabe bezieht sich auf den Beginn der nachsten Pause Ist keine Pause eingestellt wird das Ende ange zeigt Klicken Sie die Maustaste um spezifische Informationen zum aktiven Programm auszuwahlen Diese Informationen sind dann im Anzeiger zu sehen Beginn des n chsten Schritts der n chsten Pause Ende des Programms im Speicher und erforderlicher Austausch der UV Lampe Bedingungen Bei Aktivierung von next step erscheint folgende Anzeige next step U0 35 04 08 2003 Dieselbe Art von Informationen wird f r next pause end oder UV lamp nee ded angezeigt Wenn das Programm angehalten wird erscheint folgende Anzeige pause Since LU UU Dieselbe Art von Informati
5. Leica EM AFS2 Leica EM FSP Bedienungsanleitung fi Bestellnummer 16200031 Leica EM AFS2 12 05 MICROSYSTEMS Wichtiger Hinweis Leica behalt sich das Recht vor technische Spezifikationen sowie Herstellungsprozesse ohne vorherige Ank ndigung zu ndern Nur auf diese Weise k nnen die Technologien und Herstellungsverfahren kontinuierlich verbessert werden um unseren Kunden hervorragende Produkte zu bieten Die Urheberrechte an diesem Dokument besitzt Leica Mikrosysteme GmbH Wien Jede Reproduktion von Text und Abbildungen oder Teilen davon durch Druck Fotokopieren oder andere Methoden einschlie lich elektronischer Systeme und Medien erfordert eine ausdr ckliche schriftliche Genehmigung Die Ger teseriennummer finden Sie auf dem Typenschild an der R ckseite Herausgegeben von Leica Mikrosysteme GmbH Hernalser Hauptstrasse 219 A 1170 WIEN Leica EM AFS2 Leica EM FSP Bedienungsanleitung Leica EM AFS2 Seriennummer Leica EM FSP Seriennummer Kaufdatum Bitte lesen Sie diese Bedienungsanleitung Io sorgfaltig bevor Sie das Gerat in Betrieb nehmen 3 Inhalt Im vorliegenden Handbuch verwendete Symbole und Abk rzungen und ihre Bedeutung 1 Sicherheitshinweise 9 2 Einleitung 13 2 1 Einf hrung in EM AFS2 13 2 2 Einf hrung in EM FSP 13 2 3 Packliste EM AFS2 14 2 4 Packliste Stereomikroskopsystem f r AFS2 14 2 5 Packliste UV Lampe 14 2 6 Packliste EM FSP 14 2 7 Packliste Mikror
6. wenn die Gef e durch unsachgem e Behandlung besch digt wurden oder dem nat rlichen zeitlich bedingten Verschlei unterlegen sind Der Arbeitsbereich sollte immer gut bel ftet sein Gegenst nde mit Raumtemperatur sollen vorsichtig mit LN in Ber hrung gebracht werden Zun chst bildet sich eine isolieren de Gasschicht die eine gr ere W rme bertragung verhindert In dieser Anfangs phase verdampft nur wenig LN Sobald sich jedoch der Gegenstand abgek hlt hat kann es zu unerwartetem Kochen und Aufsprit zen des LN kommen Im Falle von Verbrennungen durch aufsprit zendes LN sind die betroffenen Hautparti en sofort mit reichlich handwarmem Was ser abzusp len Bei ernsthaften Verbren nungen sollte unverz glich ein Hautspezia list aufgesucht werden Falls LN in die Augen gelangt ist sofort mit handwarmem Wasser aussp len und einen Augenspezialist aufsuchen Verwenden Sie Glas Dewar Gef e vor al lem Dewar Gef e mit einem F llverm gen von mehr als 2 Litern im Labor nie ohne vollst ndige Metallummantelung Glas De war Gef e platzen oft aus unersichtlichen Gr nden oder in Folge einer unbeabsich Doten fehlerhaften Handhabung z B Kon takt mit Metallinstrumenten usw Tragen Sie bei der Arbeit mit LN in Glas Dewar Gef en immer eine Schutzbrille Abb 1 1 Tragen Sie bei der Arbeit mit LN keine Schutzbrillen a Stiefel c geschlossenen Schuhe e oder Schutzhandschuhe g
7. 11 AcetonQs 12 Aceton 12 Epon 1 3 14 Epon 1 1 15 Epon 3 1 16 Epon pure sl 18 HM 20 1 3 19 Hil 20 1 1 20 HM 20 31 d A Abb 4 4 Reagenzienanzeige 1 Taste Close 2 Reagenzienliste 3 Umbenennen vorhandener Reagenzien 4 Reagenzieneditor 40 4 1 8 Funktionen der Reagenzien Zum Auswahlen eines Namens in der verwaltungsanzeige Reagenzienliste klicken Sie auf den Rea genziennamen siehe oben Verwenden Sie das Pulldown Men zu Position um die Position des Namens 1 Taste Close innerhalb der Liste auszuw hlen oder zu ndern Aktivieren Sie CLOSE um die Reagenzienverwaltung zu schlie en und zur Programmieranzeige zur ckzukehren 2 Reagenzienliste W hlen Sie einen Reagenziennamen aus den Sie anschlie end umbenennen kopieren oder l schen k nnen 4 Reagenzieneditor 3 Umbenennen vorhandener Reagenzien Aktivieren Sie Aktivieren Sie RENAME um den aktiven Namen in der Reagenzienliste umzube nennen COPY um den Reagenziennamen zu Kopieren PASTE um einen kopierten Reagenziennamen einzuf gen Eine Tastatur wird angezeigt Geben Sie den gew nschten Namen ein und best ti gen Sie mit ENTER DELETE um den ausgew hlten Reagents Reagenziennamen zu l schen INSERT um eine neue Reagenz einzu f gen 4 1 9 Die Men anzeige im berblick Leica E
8. Klappe vorhanden 1 Entfernen Sie die Klappe des FSP Abb 6 23 und legen Sie sie flach auf die Arbeitsplattform des AFS2 oder einen Tisch Abb 6 23 Abnehmen der Klappe des FSP 2 Stecken Sie eine Fullnadel auf eine Abfullspritze 3 Setzen Sie die Abf llspritze mit der F llnadel wie in Abb 6 24 dargestellt in das Pr fwerkzeug ein Abb 6 24 Spritze mit Nadel in Ausrichtungspr f werkzeug 73 Die Fullnadel ist korrekt ausgerichtet wenn die Nadel wie in Abb 6 25 oben und unten dargestellt durch die Offnung des Ausrichtungsprufwerkzeugs passt Abb 6 25 Die korrekte Ausrichtung der Nadel ist im Ausrichtungsprufwerkzeug oben und unten erkennbar Die Fullnadel ist nicht korrekt ausgerichtet wenn die Nadel wie in Abb 6 26 oben und unten dargestellt nicht durch die Offnung des Ausrichtungspr fwerkzeugs passt Wenn die Nadel nicht korrekt ausgerichtet ist entfernen Sie sie und drehen Sie sie um 180 Stecken Sie sie dann wieder auf die Spritze und pr fen Sie die Ausrichtung der Nadel erneut wie oben beschrieben Falls die Ausrichtung immer noch nicht korrekt ist versuchen Sie es mit einer anderen Nadel oder Spritze Wiederholen Sie den Vorgang bis die Nadel korrekt ausgerichtet ist 74 6 2 3 Einfuhren der Abfullspritze Ziehen Sie den Spritzenkolben bis Zu Position 5 5 ml heraus siehe Abb 6 27 roter Kreis E E A apen 8 8 pe E u bm E Ss rte em E j A
9. aus denen eingedrungenes LN nur schwer entweichen kann LN das durch Sprit zer in geschlossene Schuitzbrillen a Stiefel c geschlossene Schuhe e oder Schutzhandschuhe g gelangt ist verdampft pl tzlich und kann dabei ernsthafte Verbrennungen verursachen Tragen Sie immer eine seitlich geschlossene Schutzbrille b die oben und unten ge ffnet ist Tragen Sie nur Stiefel wenn das Hosenbein weit genug ist um ber die Schuhe berzustehen d und die frei bleibende L cke vollst ndig abzudecken Tragen Sie im Labor nur Schl pfsandalen f keine Turn oder StraBenschu he Tragen Sie immer Hosen ohne Aufschlag wenn Sie Schl pfsandalen tragen Tragen Sie nie Schutzhandschuhe wenn Sie LN umgie en oder den Dewar Kopf auf ein Dewar Gef setzen Sch tzen Sie Ihre H nde in einem solchen Fall nur mit einem losen Flanelltuch h gegen die K lte Handschuhe sollten nur getragen werden wenn kalte trockene Teile angefasst werden m ssen Sie eignen sich jedoch nicht fur die Arbeit mit CN 10 Verwenden Sie nur Dewar GefaBe aus Me tall die ausdrucklich fur die Lagerung von LN vorgesehen sind da nur mit GefaBen dieser Art die bei der Lagerung bestehen den Risiken vermieden werden konnen Fur Routine Kryopraparationen sind Metalltroge mit 1 cm Styroporisolierung Styroporbe halter oder Plastiktroge vollkommen geeig net da sie eine risikoarme Kryopraparation gewahrleisten Prufen Sie die Verdampfungsrate des De war Meta
10. hrchen Einbettungssystem 14 3 Installation des EM AFS2 und EM FSP 18 3 1 Auspacken des EM AFS2 18 3 2 Auspacken des EM FSP 18 3 3 Einrichtung des EM AFS2 19 3 4 Montage des Stereomikroskops optional 21 4 Mausgesteuerte Anzeigen 23 4 1 Mausgesteuerte Anzeige 23 4 1 1 Die Hauptanzeige im berblick 23 4 1 2 Funktionen der Hauptanzeige 24 4 1 3 Die Programmieranzeige im berblick 30 4 1 4 Funktionen der Programmieranzeige 31 4 1 5 Die FSP Anzeige im berblick 38 4 1 6 Funktionen der FSP Anzeige 39 4 1 7 Die Reagenzienverwaltungsanzeige im berblick 40 4 1 8 Funktionen der Reagenzienverwaltungsanzeige 41 4 1 9 Die Men anzeige im berblick 42 4 1 10 Funktionen der Men anzeige 43 4 1 11 Die Einrichtungsanzeige im berblick 46 4 1 12 Funktionen der Einrichtungsanzeige 47 4 1 13 Die Protokolldateianzeige im berblick 50 4 1 14 Funktionen der Protokolldateianzeige 51 4 1 15 Die Daten bertragungsanzeige im berblick 52 4 1 16 Funktionen der Daten bertragungsanzeige 53 5 Bedienung des EM AFS2 54 5 1 Montage des Deckels 54 5 2 Montage der LED UV Lampe 55 5 3 F llen des LN2 Dewar Gef es 57 5 3 1 F llen mithilfe des Trichters 57 5 3 2 F llen aus einem Dewar Druckgef 59 5 4 Vorbereitung auf GS 61 5 4 1 EM AFS2 Zubeh r 61 5 4 2 EM FSP Zubeh r 61 5 4 3 EM AFS Zubeh r 62 6 Bedienung der EM FSP 6 1 Vorbereitung fur GS im FSP 6 1 1 Vorbereitung der FSP Probenbehalter 6 1 2 Bef llen der Kammer f r den FSP Durchlauf 6 1 3 Ein
11. r ein manuelles Programm ohne EM FSP Sotware version 1 01 rSP A fur ein FSP Programm mit Cancel 1 Probenbeh lter an Position A rSP A B f r ein FSP Programm mit 2 Probenbehaltern Wenn der Programmmodus FSP A oder FSP A B ausgew hlt wird k nnen Ver d nnen R hren und bertragungsmodus im Programmeditor eingestellt werden Wenn der Programmmodus manual gew hlt wird sind Verd nnen R hren und Ubertragungsmodus nicht aktiv 86 5 Programmeditor Das Bearbeiten von Programmen wird in Kapitel 4 1 4 Funktionen der Program mieranzeige beschrieben 6 Weiter zur Reagenzienverwaltung Aktivieren Sie Manage Reagents um den Editor zur Bearbeitung der Reagenzienliste aufzurufen Manage Reagents _ Reagenzienlisten auf dem PC und dem AFS2 k nnen voneinander abweichen Beim bertragen eines Programms wer den daher die erforderlichen Reagenzien namen mit bertragen Es ist nicht not wendig die Reagenzienliste manuell zu aktualisieren Das Reagenzienverwaltungsfenster wird angezeigt Manz Bepprzts Ausf hrliche Informationen hierzu siehe Kapitel 4 1 7 Die Reagenzien verwaltungsanzeige im berblick und 4 1 8 Funktionen der Reagenzien verwaltungsanzeige 7 Einf gen und L schen von Zeilen in einem Programm Pr ffunktion Aktivieren Sie INSERT um Programmschritte im Programmeditor einzuf gen INSERT DE
12. rbox mit Sechskantschl ssel M4 Werkzeug Zange Die komplette Arbeitsausstattung enth lt zus tzlich zu den oben genannten Gegenst nden LED UV Lampe Stereomikroskopsystem Empfohlenes Zubeh r Ersatzkapsel und Flacheinbettungssystem Mikror hrchen Einbettungssystem SD FS System 2 2 Einf hrung in EM FSP Der EM FSP Freeze Substitution Proces sor ist ein automatisches Reagenzienbe arbeitungssystem Auf dem EM AFS2 montiert gibt er Reagenzien f r das GS und das PLT Verfahren aus Er ver d nnt GS Medien und Harze aus 100pro zentigen Stamml sungen automatisch in Reagenzienbeh ltern Eine integrierte LED UV Lampe erm glicht die sofortige Polymerisation von Proben EM AFS2 und EM FSP werden ber einen mausgesteuerten Bildschirm rechts vom EM AFS2 bedient Ein USB Anschluss f r einen Speicherstift erm glicht die bertragung von Program men und Protokolldateien f r beide Instru mente 2 3 Packliste EM AFS2 1 Basisgerat 1 LN Trichter mit Erweiterungsanschluss 1 Bajonett Verschluss 1 Abluftschlauch n a 1 Maus n a 1 Speicherstift n a 1 Kryowerkzeug mit M4 Gewinde n a 1 Sechskantschl ssel mit Griff 3 mm n a 1 Spezialzange mit Isolier beschichtung n a 1 17 mm Spanner n a 2 4 Packliste Stereomikroskop system f r AFS2 1 x Stereotr ger 1 x S6E Stereomikroskop mit 0 5 x Objektiv und 2 x Okularen 10 x 2 5 Packliste UV Lampe 1 x LED UV Lampe 2
13. vorgang endet 2 Minuten vor Beginn des n chsten Schritts In einem laufenden Pro gramm wird die Pause am Ende eines Programm schritts aktiviert UV wird zu Beginn eines Pro bertragung grammschritts aktiviert Klicken Sie in die Programmzeile unter Transfer Ein Pulldown Men wird ange Wenn der Programmmodus FSP A oder zeigt PSP A B ausgew hlt wurde k nnen Verd nnen R hren und Ubertragungsmo dus im Programmeditor eingestellt werden stay mx ex chill reduce ees em empty e ae e W hlen Sie den gew nschten bertra onan gungsmodus aus Diese Aktion wird vom FSP automatisch in einem laufenden Programm ausgefuhrt Bei Auswahl von stay bleibt der Inhalt des Probenbehalters im Beh lter keine Aktion des FSP Bei Auswahl von mix wird die unter angegebene gew nschte Verd nnung hergestellt INSERT DELETE CHECK Bei Auswahl von exch fill wird der gesamte Verd nnung Inhalt 4 ml aus dem Probenbeh lter Klicken Sie in die Programmzeile unter entfernt Anschlie end wird der Proben Eine Zifferntastatur wird angezeigt Geben peh lter mit frischer Stamml sung 4 ml Sie die gew nschten Werte f r die Verd n aus einem Reagenzienbeh lter gef llt nung ein und best tigen Sie mit OK Bei Auswahl von reduce wird das Volu men des Probenbeh lterinhalts auf 1 ml reduziert Das ist vor der Polyme
14. Abb 5 7 Die ordnungsgem montierte UV Lampe wird jetzt als Symbol oberhalb des Dewar Symbols angezeigt Einschub in Abb 5 7 Die UV Lampe kann durch Drehen gegen den Uhrzeigersinn wieder ge ffnet werden ae Abb 5 4 UV Lampe UV Lampen Symbol in der Anzeige sooo m mm ok nenn Em mp see zm mmm em ee E zm pe EE eps bis xb e H Nei GET ee ee go en ES preset es Fe u en Abb 5 7 UV Lampe geschlossen Einschub UV Lampen Symbol in der Anzeige 55 5 SchlieBen Sie das Kabel der UV Lampe wie in Abb 5 8 dargestellt an das AFS2 an Abb 5 8 UV Lampenkabel angeschlossen Die UV Lampe wird durch Starten eines Programms akti viert UV Licht wird durch ein blaues UV Lampensymbol mit den wei en Buchstaben UV in der Mitte dargestellt Das Fehlen von UV Licht wird durch ein wei es UV Lampen symbol mit den blauen Buch staben UV in der Mitte darge stellt 56 5 3 Fullen des LN2 Dewar GefaBes Metallteile k nnen extrem kalt werden und bei Ber h ren ohne entsprechende Schutzkleidung schwere Verletzungen verursachen 5 3 1 F llen mithilfe des Trichters 1 Verschlusskappe Abb 5 9 vom LN2 Anschluss abnehmen 2 Trichter wie in Abb 5 10 dargestellt anschlie en 3 Mit dem Bef llen des Dewar Gef es ber den Trichter beginnen Zum Abk hlen und Auff l len des warmen 35 Liter Dewar Gef es sind ca 40 Liter LN2 erforderlich Die erste
15. F llung kann bei geschlossenem Kammer deckel erfolgen Auf diese Weise f llt das LN2 bei berf llung des Dewar Gef es nicht die Kammer 4 Der F llpegel des Dewar Gef es wird in der Hauptanzeige dargestellt Abb 5 11 Zwischen 75 und 100 wird der Darstellungsbe reich in zwei Abschnitte von je 12 5 unterteilt um den F llpegel genauer anzuge ben 100 Pen RW SH au m a PRRI Abb 5 9 Verschlusskappe auf LN2 Anschluss des AFS2 Gage Le A a Abb 5 10 Trichter an das AFS2 angeschlossen START menu Coen Abb 5 11 Darstellung des F llpegels des Dewar Gef es in der Anzeige Sobald das Dewar Gef voll ist ert nt ein akusti sches Signal 5 T ne und die F llpegelanzeige zeigt 100 5 Beenden Sie das Einf llen des LN2 6 Entfernen Sie den Trichter nach dem Auff llen 7 Verschlie en Sie den LN2 Anschluss wieder mit der Verschlusskappe Ohne Verschlusskappe auf dem LN2 Anschluss hat das AFS2 einen erh hten LN2 Verbrauch 08 5 3 2 Fullen aus einem Dewar DruckgefaB 1 Bereiten Sie einen geeigneten Adapter vom LN2 Schlauch zum LN2 Anschluss des AFS2 vor siehe Abb 5 12 und 5 13 2 1 Nehmen Sie die Verschlusskappe Abb 5 9 vom LN2 Anschluss ab 2 Verbinden Sie den Schlauch mithilfe des Adapters mit dem LN2 Anschluss des AFS2 siehe Abb 5 14 und 5 15 Abb 5 12 Anschlie en eines geeigneten Adapters an den L
16. Test FS wife 1 20 Acelonds 90 C gt MANUAL Program 40 00 Leica EM AFS2 oss WO 02 OS 21 START MENU Abb 4 1 Hauptanzeige Statusanzeiger Pause Schritt Ende Anzeiger Kammerbeleuchtung und TF Regler Programmschrittanzeiger Programmanzeige Kammer und Dewar GefaB Pegelanzeiger Start Pause Fortsetzungstaste Men taste Anzeigensperr freigabetaste 0 Uhr 23 4 1 2 Funktionen der Hauptanzeige Bedingungen 1 Statusanzeiger Der urspr ngliche Ger testatus ist Stand Das obere Feld zeigt die aktuelle Kam by d h die Kammertemperatur ist nicht mertemperatur z B 90 C reguliert und das EM AFS2 stellt je nach LN2 Pegel im Dewar Gef die 40 C niedrigstm gliche Temperatur ein Bei einem vollen Dewar GefaB ist eine Stand by Temperatur von 140 C m glich Das untere Feld zeigt den aktuellen Im STANDBY Modus ist die Temperatur Voreinstellung der Kammertemperaturen Klicken Sie in das obere Feld um die gew nschte Kammertemperatur voreinzu Mit Deep Freeze wird die niedrigstm gli stellen oder den Status zu ndern che Temperatur eingestellt etwa 160 C Im unteren Feld erscheint dann a folgende Anzeige gt Min next pause gt MIN y oo Beim Tiefgefrieren Deep Freeze wird eine groBe Menge LN2 verbraucht um die niedrige Temperatur zu erreichen Daher empfiehlt es sich Deep Freeze bei vollem Dewar Gef
17. fresh MeOH 30 fresh MeOH 30 Abb 4 3 FSP Anzeige Reagenzienbehalter Stammlosungsliste Probenbehalter Stammlosungsliste Probenbehalterposition Programmname Reagenzienbehalterposition Cancel Start Ooh WN 38 4 1 6 Funktionen der FSP Anzeige 1 Reagenzienbehalter Stammlosungsliste Enthalt die Stammldsungen die an der entsprechenden Reagenzienbehalterposi tion einzufullen sind Beispiel In Abb 4 3 sind die Reagenzien beh lter 1 bis 3 mit je 10ml 100prozenti gem Methanol und die Reagenzienbehal ter 4 bis 7 mit je 10ml HM20 Harz zu fullen wahren Reagenzienbehalter 8 leer sein muss Abfallbeh lter 2 Probenbeh lter Stamml sungsliste Enth lt die Stamml sung die an der entsprechenden Probenbeh lterposition einzuf llen ist Beispiel In Abb 4 3 sind Probenbehalter A und B mit je 4 ml 30prozentigem Metha nol zu fullen 3 Probenbehalterposition zeigt die Probenbehalterpositionen fur A und B 4 Programmname zeigt den Namen des aktiven Programms 5 Reagenzienbehalterposition zeigt die Position des Reagenzienbehal ters 6 Cancel Start erm glicht das Abbrechen oder Starten des Programms 39 4 1 7 Die Reagenzienverwaltungsanzeige im Uberblick Leica EM AFS Reagents Reagent 3 2 emp o 3 Reagent 1 4 WaQHiHM 1 2 Ethanol DHhM 20 Wethanol 18 MeOH Hii T Reagent 3 Position ES 10 Reagent 2
18. hlen Sie den gew nschten Rea programmiert werden genziennamen aus dieser Reagenzienliste aus Klicken Sie in die Programmschritizeile Eine Zifferntastatur wird angezeigt Geben Sie die gew nschten Werte f r Anfangs ee erem Copy Paste DELETE temperatur Endtemperatur Temperatur TENERNE eg kurve und Uhrzeit ein Best tigen Sie mit OK Automatische Kurven Zeit Korrektur Wenn T gr oder T ge ndert wird wird die Kurve neu berechnet Wenn die Kurve ge ndert wird aber die Anfangs und Endtemperatur gleich bleibt wird die Zeit neu berechnet Siehe 6 Weiter zur Reagenzienverwal tung in diesem Kapitel bez glich der Bearbeitung der Reagenzienliste Markieren Sie das Feld P f r Pause und oder UV f r UV Licht Aktivierung 34 Lara EM AES Die eingestellte Verd nnung wird vom Program EEE dl EE SAVE CLOSE FSP automatisch anhand von Stamml Duration 1a Huu E cory PABTE DELETE sungen in den Reagenzienbeh ltern hergestellt Eine Pr ffunktion zeigt den Inhalt der Reagenzienbeh lter an die vom Anwender vorzubereiten sind Siehe 7 Einf gen und L schen von Zeilen in einem Programm Pr ffunktion in diesem Kapitel zur Verwendung der Pr ffunktion R hren W hlen Sie on oder off um R hren des Probenbeh lters zu aktivieren oder deaktivieren Das R hrvolumen betr gt 1 ml Die maxi male Dauer betr gt 7 Minuten Der R hr
19. kein akustisches Warnsignal Markieren Sie das Feld Extern Alarm um einen fernen Alarm zu aktivieren Wenn das Feld nicht markiert ist ist der ferne Alarm nicht aktiviert Markieren Sie das Feld Info hint enab led um die mausgesteuerte Anzeige von Infofenstern in der Hauptanzeige zu akti vieren next pause Click to set temperature Wird das Feld nicht markiert ist die maus gesteuerten Anzeige von Infofenstern nicht aktiviert 48 4 Auswahlen von Temperatureinheiten Wahlen Sie die gewunschten Temperatur einheiten aus 49 4 1 13 Die Protokolldateianzeige im berblick O Line Date Time Hours k 1 2005080 14 20 04 O 0 start 3 2005 080 14 20 04 0 0 pause 3 2005080 14 20 06 O 0 stop le ae Status Action Viscosity Transfer Fro Transfer T 1050805 00 cs MM O 1 Test1 F5PAUTO User USER 1 Abb 4 7 Protokolldateianzeige 1 Lesen der Protokolldateiinformationen 2 Navigation innerhalb der Liste mithilfe von Cursortasten 3 Auswahl der Protokolldatei 4 Taste Close 50 4 1 14 Funktionen der Protokolldatei anzeige 1 Lesen der Protokolldatei informationen Die Protokolldateien enthalten Informatio nen wie Datum Uhrzeit Temperatur Status FSP Aktionen 2 Navigation innerhalb der Liste mithilfe von Cursortasten 3 Auswahl der Protokolldatei ber das Pulldown Men k nnen Sie aus einer Liste vorhandener Protokolldateien w hlen
20. 10 ml 1 3 Installation der EM AFS2 und EM FSP 3 1 Auspacken der EM AFS2 Das EM AFS2 wird auf einer Palette in einem Karton geliefert Entfernen Sie den Umkarton und alle Zubeh rkartons des EM AFS2 Abb 3 1 Das Gerat ist mit drei Schrauben auf der Palette befestigt siehe Abb 3 2 L sen Sie das Ger t von der Palette indem Sie zwei Schrauben an den Seiten rote Kreise in Abb 3 2 und 1 Schraube an der R ckseite Pfeil in Abb 3 2 her ausdrehen Montieren Sie die beiden Rollen blauer Kreis in Abb 3 1 anstelle der Schrauben an den Seiten des Rolluntersatzes 3 2 Auspacken der EM FSP Nehmen Sie den EM FSP aus seinem Karton ffnen Sie die Klappe des EM FSP und entfernen Sie alle Transportsicherungen Abb 3 1 Karton entfernt EM AFS2 und Zubeh r box noch auf der Palette Rollen des Untersatzes noch auf der Palette blauer Kreis Abb 3 2 EM AFS2 mit Holzpalette verschraubt 3 3 Einrichtung der EM AFS2 1 SchlieBen Sie den Abluftschlauch an den in Abb 3 3 dargestellten Anschluss an Abb 3 3 Anschluss f r Abluftschlauch 2 Um die Maus am Steuergerat anzu schliessen heben Sie das Mousepad Der Anschluss ist direkt darunter Hier befindet sich auch der USB Anschluss f r den Memorystick 3 SchlieBen Sie das Netzkabel an blauer Kreis in Abb 3 5 und schalten Sie das Gerat mit dem Netzschalter ein roter Kreis in Abb 3 5 Abb 3 5 Netzschalter Netzanschlu
21. 4 Auswahlen der Temperatureinheit 46 4 1 12 Funktionen der Einrichtungs 2 Bearbeiten von Anwenderlisten und anzeige Umbenennen von Anwendern ber das Pulldown Men k nnen Sie 1 Festlegen des Uhrzeit und Anzeige einen Anwendernamen ausw hlen formats Aktivieren Sie Set Clock SET CLOCK um zur Zeitformatanzeige zu wechseln USER 10 Uber die Schaltfl chen k nnen Sie Jahr Monat Tag Stunde und Minute Sege Markieren Sie das Feld Active um einen festlegen Best tigen Sie mit OK Anwender zu aktivieren ber die Pulldown Men s unter Display Format k nnen Sie zwischen dem 24 Wenn das Feld nicht markiert ist kann der und 12 Stunden Format Anwender nicht in der Begr ungsanzeige oder in der Men anzeige unter Change user aktiviert werden sowie zwischen den Datumsformaten Tag Monat Jahr Jahr Monat Tag und Monat Tag Jahr w hlen vi W IT IT c q mmga Yy 47 Aktivieren Sie Rename um einen Anwender umzubenennen Eine Tastatur wird angezeigt Geben Sie den gew nschten Namen ein und best ti gen Sie mit ENTER 1l2131s1s s zlalelol alwlelefelvlolifofstehe 3 Alarm und Info Einstellungen Markieren Sie das Feld Acoustic Alarm um den akustischen Alarm zu aktivieren Akustische Alarmsignale sind beispiels weise zu h ren wenn kein LN2 mehr vorhanden ist Wenn das Feld nicht markiert wird ert nt
22. 5 0 01 00 HMD STe mix on 07 35 35 0 01 00 HMD BO mix on 08 35 35 0 01 00 HM20 100 exchifill on 09 35 35 0 15 00 HMO 100 exchifill on 10 35 35 0 20 00 HMO 100 stay off K 11 35 20 13 8 04 00 HMO 100 stay off x 88 Anhang lll Technische Daten Technical data sheet EM AFS2 Product Name Technical Data Approvals Supply voltage Electrical Power consumption Socket Fuses Dimensions and weight Please also see attached drawing Instrument packed in One Box Leica EM AFS2 Freeze Substitution System GE 115V 230 V 50 60 Hz 350 W standard socket Thermal overcurrent circuit breaker combined with ON OFF switch Width Depth Height Net weight mm mm mm kg 594 612 B24 44 Width Depth Height Gross weight mm mm mm kg 1080 660 aro Ti 89 Die Zahlen geben die Abmessungen in Millimetern an 873 5 Die Zahlen geben die Abmessungen in Millimetern an 91 Die Zahlen zeigen die Abmessungen in Millimetern 92 EC Declaration of Conformity EG Konformitats Erklarung D claration CE de Conformite We Wir Nous Leica Mikrosysteme GmbH Hernalser Hauptstrasse 219 A 1170 Wien Austria declare in exclusive responsibility that the product erkl ren in alleiniger Verantwortung da das Produkt d clarons sous notre seule responsabilit que le produit Model Leica EM AFS2 Leica EM FSP Modell Leica EM AFS2 Leica EM FSP modele Leica EM AFS2 Leica EM FSP Type Typen
23. 6 Packliste EM FSP Abb 2 1 EM AFS2 Basisger t 1 x FSP Automatischer Gefriersubstitutions prozessor 1 x Probenverarbeitungsblock 1 x Blockabdeckung 20 Abfullspritzen 20 Fullnadeln 20 Reagenzienbader 10 Flacheinbettungseinsatze 10 Aclar Folien 10 Durchflussringe 20 Reagenzienbehalter mit Schraubver schl ssen 1 x Pr parationsnadeln 1 x Probentrager Abtrennwerkzeug f r beide Systeme zur Montage auf MP 1 x Schraubverschluss Halterohr n a 2 7 Packliste Mikror hrchen Einbettungssystem AFS 2 1 x Halteplatte f r Mikror hrchen Sarstedt Tuben 2 ml mit Schraubverschluss 100 St Glasflaschen 10 ml mit Schraubverschluss 10 St Mikror hrchen 0 75 ml 1000 St n a Plastikpipetten 3 ml 100 St n a Zubehorbox n a mm ge Abb 2 2 LN Trichter mit Erweiterungsanschluss 14 Abb 2 3 Bajonett Verschluss BI Abb 2 7 Probenverarbeitungsblock mit 2 Positio Abb 2 4 Stereotrager und S6E Stereomikroskop nen f r Probenbeh lter Abb 2 5 LED UV Lampe Abb 2 8 Blockabdeckung 15 Abb 2 9 Abfullspritzen Abb 2 12 Flacheinbettungseinsatze Abb 2 10 F llnadeln Abb 2 11 Reagenzienb der Abb 2 14 Durchflussringe 16 Abb 2 15 Reagenzienbehalter mit Abb 2 18 Kryor hrchen Einsatz Schraubverschlussen Abb 2 16 Pr parationsnadeln Abb 2 19 Sarstedt Tuben 2ml Abb 2 17 Probentr ger Abtrennwerkzeug Abb 2 20 Glasflaschen
24. AL Program Auswahl eines Programms Klicken Sie die Maustaste um ein Pulldown Men zu ffnen und w hlen Sie anschlie end aus einer Liste bereits ver f gbarer Programme 1 Testi w 01 1iTestt UO Si esti US yest U4 Test Bedingungen TF aus TF ein U5 Test EC Up Joachim OY uchadiO plt st MEE IWMI DIESE Us empty l FSP Program 26 5 Programmanzeige Die Schrittnummer und die Gesamtanzahl der Programmschritte wird oben rechts angezeigt Beispielsweise gibt I 8 an dass Schritt eins von insgesamt acht Schritten ausgef hrt wird 1 Cr a Dauer und Temperatur von drei Programmschritten werden in der Grafik anzeige dargestellt Zun chst wird der erste aktive Schritt links vor dunkelgrauem Hintergrund angezeigt Bei Erreichen des n chsten Programmschritts wird dieser in der Mitte vor dunkelgrauem Hintergrund angezeigt Die links von der Grafik ange zeigten Daten entsprechen diesem akti ven Schritt MANUAL Program Pause Tor Mithilfe der Tasten nN B k nnen Sie durch die Grafikanzeige links und rechts bl ttern Nach dem Starten eines Programms zeigt ein gr ner Punkt a der sich in Echtzeit bewegt den Fortschritt des Programms an Wenn das Programm unterbrochen wird wird ein roter Punkt a angezeigt Eine rote Linie zeigt eine Pause am Ende eines Schritts z B Schritt 7 an Eine blaue Linie zeigt die Aktivierung des UV Lichts am Anfang eines Schr
25. Beim ffnen des Men s ist die aktuelle oder j ngste Protokolldatei auto matisch ausgew hlt IN50803 02 cay INS0803 03 cav INS0803 04 cav 050803 05 csv 050803 06 csv 050803 07 csv O50803 08 csv O50805 00 csv 4 Close Aktivieren Sie Close Close um zur Menuanzeige zuruckzukehren 91 Maximal 10 Protokoll dateien werden im lokalen Speicher abgelegt Die n chste Protokolldatei Protokolldatei 11 ber schreibt automatisch die lteste Protokolldatei Hinweis Bei jedem Aktivieren von START wird eine neue Protokolldatei erstellt Zur Vermeidung von Datenverlust durch berschreiben k nnen Sie Protokoll dateien extern auf einem Speicherstift speichern Ausf hrlichere Informationen hierzu finden Sie in Kapitel 4 1 15 Die Daten bertragungsanzeige im berblick und 4 1 16 Funktionen der Daten bertragungsanzeige 4 1 15 Die Dateniibertragungsanzeige im Uberblick Stellen Sie vor dem Offnen der Datenubertragungsan zeige sicher dass ein Speicherstift angeschlos sen ist Transfer Programs cise U Local Memory Memory Stck Test PO Teste A Joachim Test F K lucwig plt st Joachim Ki a ludwig plt sh Demo Far Ly ludwig plt st Demo W Lampe y kalt 4 DemoF SF U Lampe 7 Demofsrreduce Introduction FLT CemoFSsPreduce 01 Introduction Dera FSP Fs Acetonelsog Introduction_Demo LW Lampe Introduction DemotGb Introduction DemoFsPreduce Int
26. LETE um Programmschritte aus dem Programmeditor zu loschen DELETE DEL ETE SCHECK um ein Programm im Programmeditor zu pr fen CHECK Ausfuhrliche Informationen hierzu siehe Kapitel 4 1 4 Funktionen der Programmieranzeige 8 Anhang II Mit dem EM AFS2 ausgelieferte Programme Mit dem EM AFS2 erhalten Sie zwei Pro gramme die unter User 1 installiert sind Das Programm FSAcetoneOsO4 ist ein manuelles Programm fur GS mit nachfol gender UV Polymerisation im EM AFS2 Leica AFS2 Program Editor Program FsAcetoneOs04 Date 16 08 2005 14 00 Step TStart T End Slope Time Reagent Content Transfer Agitaton UV Pause RS WK Cp Di mm 01 90 70 1 7 12 00 AcetoneOsO4 100 02 0 50 1 7 12 00 AcetoneOsO4 100 03 H 20 2 5 12 00 AcetoneOsO4 100 04 20 0 3 3 06 00 AcetoneOsO4 100 x 05 0 0 0 00 01 Acetone 100 x 06 0 20 20 01 00 Acetone 100 Di 07 20 20 0 01 00 HMZO 33 x 08 20 20 0 01 00 HM DEY x 09 20 20 d 01 00 HMZUO 100 x Das Programm PLT ist ein FSP A B Programm fur PLT mit nachfolgender UV Polymerisation im EM AFS2 Leica AFS2 Program Editor Program PLT Date 16 08 2005 14 52 Step TStart T End Slope Time Reagent Content Transfer Agitation UV Pause CG a ah Ahi 01 0 0 0 00 05 Ethanol 30 stay off 02 0 15 30 00 30 Ethanol 50 mix on 03 15 30 30 00 30 Ethanol TS mix on 04 30 35 10 00 30 Eihanol 100 exchrfill on 05 35 35 0 00 30 Eihanol 100 exchrfill on 06 35 3
27. M AFS Qc LOSE Leica EM AFS2 Zee SHANGE USER Edit Program Copy Program 3 Data Transfer DO 3 Manage Reagents SERVICE Abb 4 5 Men anzeige 1 Taste Close 2 Andern des Anwenders 3 Bearbeiten und Kopieren von Programmen Verwalten von Reagenzien 4 Anzeige der Protokolldateien 5 bertragung von Daten Programmen oder Protokolldateien zu von einem Speicherstift 6 Wechseln zur Einrichtungsanzeige 7 Wechseln zur Serviceanzeige kennwortgesch tzt 42 4 1 10 Funktionen der Menuanzeige 3 Bearbeiten und Kopieren von Programmen Verwalten von Reagenzien 1 Taste Close Aktivieren Sie Edit Program Aktivieren Sie CLOSE um die Men anzeige zu schlie Ben und zur vorherigen Anzeige zur ckzu kehren ae um Programme anderer Anwender zu bearbeiten oder zu importieren Aktivieren Sie Manage Reagents um den Editor zur 2 ndern des Anwenders Bearbeitung der Reagenzienliste aufzuru fen Aktivieren Sie Dies ist f r alle inaktiven Programme aber nicht f r das derzeit ausgef hrte Programm m glich Die Begr ungsanzeige erscheint 43 4 Anzeige der Protokolldateien Aktivieren Sie View Log um zur Protokolldateianzeige zu wech seln T DERD Wee 2 ee ie g i a jad d Pe er Ausf hrliche Informationen hierzu siehe Kapitel 4 1 13 Die Protokolldateianzeige im berblick und 4 1 14 F
28. M FSP 2 Platzieren Sie den FSP wie in Abb 6 18 dargestellt auf die AFS2 Kammer Abb 6 18 Platzieren des FSP auf der AFS2 Kammer 70 Die vorderen Ecken des FSP befinden sich jetzt genau Uber den Ausrichtungs marken siehe Abb 6 19 Der FSP wird noch nicht ber dem Dewar Symbol Einschub in Abb 6 19 angezeigt Abb 6 19 vordere Ecken des EM FSP genau ber Ausrichtungsmarken 3 Drehen Sie den FSP im Uhrzeigersinn um den Bajonett Verschluss zu schlie en Der ordnungsgem montierte FSP wird jetzt als Symbol oberhalb des Dewar Symbols angezeigt Einschub in Abb 6 20 Abb 6 20 FSP per Bajonett Verschluss fest mit AFS2 verbunden 71 4 Der Bajonett Verschluss befindet sich jetzt in der korrekten verriegelten Position Abb 6 21 und die Ausrichtungsmarken sind wieder sichtbar rote Kreise in Abb 6 21 Der FSP kann durch Drehen gegen den Uhrzeigersinn demontiert werden Abb 6 21 EM FSP verriegelt 5 SchlieBen Sie das Kabel des FSP wie in Abb 6 22 dargestellt an das AFS2 an Abb 6 22 FSP uber Kabel mit AFS2 verbunden 12 6 2 2 Justage der Fullnadel Vor dem Einsetzen einer Abfullspritze muss gepruft werden ob die Fullnadel auf der Abfullspritze genau mit der Mitteloff nung des Probenbehalters ausgerichtet ist Nur dann hat die Nadel Zugang zum Probenbeh lter Zum Ausrichten der F llnadel ist ein Pr f werkzeug an der Innenseite der FSP
29. N2 Schlauch Abb 5 13 Anschlie en eines geeigneten Adapters an den LN2 Schlauch Abb 5 14 Verbinden des Schlauchs mithilfe eines Adapters mit dem Anschluss des AFS2 3 Beginnen Sie das AFS2 Dewar Gef mittels Schlauch zu f llen siehe Abb 5 16 Zum Abk hlen und Auff l len des warmen 35 Liter Dewar Gef es sind ca 40 Liter LN2 erforderlich 4 Der F llpegel des Dewar Gef es wird in der Hauptanzeige dargestellt Abb 5 11 e WT Wa a 8 Le ll u Abb 5 15 Verbinden des Schlauchs mithilfe eines Zwischen 75 und 100 E _ Adapters mit dem Anschluss des AFS2 wird der Darstellungsbe reich in zwei Abschnitte von je 12 5 unterteilt um den F llpegel genauer anzuge ben 5 Sobald das Dewar GefaB _ voll ist ert nt ein akusti sches Signal 5 T ne und die F llpegelanzeige zeigt 100 5 Beenden Sie das Einf llen des LN2 6 Entfernen Sie den Schlauch nach dem Auff llen 7 Verschlie en Sie den LN2 Anschluss wieder mit der Verschlusskappe Ohne Verschlusskappe auf dem LN2 Anschluss hat das AFS2 einen erh hten LN2 Verbrauch Abb 5 16 Bedienung der Ventile des Dewar 60 5 4 Vorbereitung auf GS 5 4 1 EM AFS2 Zubehor Kuhlen Sie die Kammer auf die ge wunschte Anfangstemperatur F llen Sie die Kammer zur H lfte mit Athanol um eine gute W rmeleitf higkeit zu gew hrleisten Setzen Sie den Kryor hrchen Einsatz mit Glasflaschen mit GS Medi
30. Schraubverschluss Halterohr mit Schraubverschluss offener Reagenzienbeh lter Setzen Sie die Probenbehalter wie in Abb 6 6 6 7 dargestellt ein Reagenzien bader weisen Ausrichtungsmarken auf die das korrekte Einpassen in den Verarbei tungsblock erleichtern siehe rote Kreise in Abb 6 6 6 7 Verwenden Sie entweder Leica Durchflussringe ODER Flacheinbettungs formen aber nicht gleichzeitig unterschied liche Typen 66 Abb 6 6 Eingesetztes Reagenzienbad mit Durch flussring Roter Kreis Ausrichtungsmarke Abb 6 7 Eingesetztes Reagenzienbad mit Flach einbettungsform Roter Kreis Ausrichtungsmarke Abb 6 8 Falsche Anordnung zweier unterschiedli cher Arten von Reagenzienb dern sie k nnen die Abdeckung des Verarbei tungsblocks beispielsweise fur die Zwi schenlagerung von Proben in den Rea genzienbadern verwenden Abb 6 9 Entfernen Sie die Abdeckung vor dem Starten eines FSP Durchlaufs Ein Probenubertragungsbehalter kann uber dem Praparationstisch in der Mitte platziert werden siehe Abb 6 10 ltere Proben bertragungsbeh lter vom Typ EM PACT passen wenn die Reagenzienbeh lter an den Positionen 3 und 6 entfernt werden siehe Abb 6 11 Abb 6 9 Verarbeitungsblock mit Abdeckung Abb 6 10 Proben bertragungsbeh lter in der Kammer Abb 6 11 lterer Proben bertragungsbeh lter in der AFS2 Kammer Reagenzienbeh lter 3 und 6 entfernt 6 6 1 3 Einb
31. _ GEFAHRENHINWEIS FL SSIGER STICKSTOFF LN Erstickung Jedes Gef das LN enth lt ist eine m gliche Gefahrenquelle Ein Liter LN ergibt 700 Liter N Gas N Gas ist geruch und geschmacklos Der Sauerstoffgehalt kann in geschlossenen Raumen durch Verdrangung des Sauerstoffs durch N rasch fallen wenn groBe Volumen LN gehandhabt oder umgefullt werden Dies kann zu sofortiger Ohnmacht und Bewusstlosigkeit f hren Verwenden Sie LN nur in gut bel fteten Bereichen Gehen Sie dabei umsichtig vor Lagerung Aus den genannten Gr nden d rfen mit LN gef llte Dewar Gef e nicht in geschlossenen R umen gelagert werden Verbrennungen Der Siedepunkt von LN liegt bei 196 C Fl ssiger Stickstoff ist extrem kalt und kann ernsthafte Verbrennungen verursachen Bitte beachten Sie im Hinblick auf einen korrekten Umgang mit fl ssigem Stickstoff die Sicherheits hinweise die allen Leica Produkten beigelegt sind 2 Einleitung 2 1 Einfuhrung in EM AFS2 Das Leica EM AFS 2 ist ein programmier bares Gefriersubstitutions und Tieftempe ratureinbettungssystem das sowohl fur GS als auch fur PLT geeignet ist Das EM AFS 2 Basisgerat umfasst folgende Komponenten GS Kammer mit integrierter LED Beleuchtung und Edelstahl Arbeitsplattform Bajonett Verschluss Dewar Gef auf Rolluntersatz Steuereinheit mit Maus und Farbbildschirm Verbindungskabel Abluftschlauch Trichter zum Nachf llen des Dewar Gef es Zubeh
32. an Haut und Augen verursachen Wenn LN verdampft kommt es zu einer Volumenausweitung im Verh ltnis von 1 700 Ein Liter LN ergibt fast 1 m GN Deshalb ist im Falle einer Verdampfung gro Ber Stickstoffmengen z B beim Umf llen von LN unbedingt auf eine gute Raumbe luftung zu achten Entsorgung von LN Leeren Sie LN in eine Grube oder einen Beh lter im Freien die der mit Kies gef llt ist dort kann der Stick stoff rasch und sicher verdampfen GN ist geruch und geschmacklos und wird wie Sauerstoff eingeatmet GN ist nicht to xisch doch reduziert ein hoher Anteilan GN in der Luft gt 78 den Sauerstoffgehalt lt 21 was ohne zuvor erkennbare Sym ptome zu pl tzlicher Ohnmacht und einer tiefen Bewusstlosigkeit f hren kann Falls Sie Zweifel hinsichtlich einer ausrei chenden Bel ftung hegen pr fen Sie den Sauerstoffgehalt mit einem Sauerstoffana lysator Skala von O bis 25 Der Sauer stoffgehalt darf nicht unter 18 liegen Falls eine bewusstlose Person nicht aus ei ner Umgebung mit niedrigem Sauerstoffge halt entfernt wird kann dies zum Tod f h ren Nehmen Sie bei Aussetzen der Atmung un verz glich eine k nstliche Beatmung vor und rufen Sie sofort einen Arzt sowie den Kran kenwagen Aus den genannten Gr nden d rfen Dewar Gef e mit LN nie in einem geschlosse nen Lagerraum aufbewahrt werden Die Verdampfungsrate aus Dewar Gef en kann bis zu mehrere Liter pro Tag betragen
33. arbeitet aber noch nicht gesichert wurde wird ein Bestati gungsfeld angezeigt Wahlen Sie YES NO oder CANCEL LISER Program 0 Tes gd REMAWE SAVE Ji CLOSE Duration Fee COPY PASTE DELETE 3 Gesamtdauer des Programms Gibt die Gesamtdauer des Programms im Editor an nachdem die Taste CHECK gedr ckt wurde 4 Programmmodus manuell oder FSP W hlen Sie den Programmmodus aus dem Pulldown Men aus MANUAL f r ein manuelles Programm ohne EM FSP FSP A f r ein FSP Programm mit 1 Probenbehalter FSP A B f r ein FSP Programm mit 2 Probenbehaltern Wenn der Programmmodus FSP A oder FSP A B ausgew hlt wird k nnen Ver d nnen R hren und bertragungsmodus im Programmeditor eingestellt werden Wenn der Programmmodus manual gew hlt wird sind R hren und Ubertra gungsmodus nicht aktiv 5 Programmeditor Die Nummer des Programmschritts wird automatisch eingestellt Zum Starten der Programmierung w hlen Sie Add new program step Progra mm EEN RWE save CLOSE Burson 2P9 EE GER LESER 1 Program mmm ENAWE _SAVE_ CLOSE Duration Fiver Ceopr PASTE PELETE Get ee LL Keen INSERT DELETE CHECK Die maximale Dauer eines Schrittes be tragt 99h 59 min Klicken Sie in die Programmzeile unter Neagent Ein Pulldown Men wird ange Es k nnen maximal 99 Programmschritte zeigt W
34. bb 6 27 5 5 ml Stellung der Spritze Setzen Sie die Abfullspritze wie in Abb 6 28 dargestellt in den FSP ein Abb 6 28 Einsetzen der Spritze in den FSP 73 setzen Sie die Abfullspritze wie in Abb 6 29 dargestellt in die Halter im FSP ein Abb 6 29 Einsetzen der Abf llspritze in die Halter Der Kolben wird jetzt von zwei Stiften gehalten roter Pfeil in Abb 6 30 w hrend der Spritzenk rper von einer Blattfeder gehalten wird blauer Pfeil in Abb 6 30 el Dy 1 Abb 6 30 Von Blattfeder blauer Pfeil gehaltene Abfullspritze von zwei Stiften roter Pfeil gehalte ner Kolben 76 7 Post Polymerisations verfahren 7 1 Abtrennung von Harzblocken 1 Trennen Sie die Harzbl cke mithilfe einer scharfen Rasierklinge von den Pro benbeh ltern Abb 7 1 bis 7 3 Abb 7 1 Probenbeh lter mit polymerisierten Proben Rasierklinge Abb 7 2 Probenbeh lter mit polymerisierten Proben Abb 7 3 Polymerisierte HPF Probentr ger gelb Epon durchsichtig HM20 Harz T 7 2 Trennen von Probentragern und Harzblocken Bereiten Sie ein Stereomikroskop mit geeignetem Arbeitsabstand vor 7 2 1 Durchflussring Montieren Sie das M4 Werkzeug auf das Probentrager Abtrennwerkzeug Die Klin ge zeigt nach hinten siehe Abb 7 4 Die Klingen k nnen bei Bedarf ausgetauscht wer den Erwarmen Sie das Abtrennwerkzeug z B auf EM MP auf ca 80 C wenn es sich um Epoxy Har
35. be Aktivieren Sie MENU um die Men an Aktivieren Sie zeige aufzurufen LOCK um die Anzeige zum Schutz vor versehentlichen nderungen zu sperren Sperren und Freigeben der Anzeige Sobald die Taste LOCK aktiviert wird erscheint der Text UNLOCK Sobald die Taste UNLOCK aktiviert wird erscheint der Text LOCK Informationen hierzu siehe Kapitel 4 1 9 Die Men anzeige im berblick und 4 1 10 Funktionen der Men anzeige 10 Uhr Aktivieren Sie die Uhr um Datum und Uhrzeit festzulegen 29 4 1 3 Die Programmieranzeige im Uberblick Leica EM AFS i Program 01 Test FS U S ENAM SAVE CLOSE Duration 102 00 COPY PASTE DELETE Step Start TEnd Slope Time Reagent OD Transfer Agit UV P 01 490 40 LU 40 00 Acetonds 1 02 490 60 327 US UU Acetons 1 03 60 DU J 12 00 Acetons 1 U4 DU 30 38 UG UU Acetonds 1 x ss asl J J200 Aceton 1 Up 30 70 D UG UU Epon 1 3 1 OF 20 20 J UG UU Epon 1 1 1 Us 270 70 J UG UU Epon 3 1 1 09 0 20 J Us 00 Epon pure 1 au Zehn _ Manage Reagents _ en Abb 4 2 Programmieranzeige 1 Liste verf gbarer Programme 2 Schaltfl chen zum Umbenennen Sichern Kopieren Einf gen und L schen von Programmen sowie zum Schlie en der Programmieranzeige 3 Gesamtdauer des Programms 4 Programmmodus manuell oder FSP 5 Programmeintr ge 6 Weiter zur Reagenzienverwaltung 7 Ei
36. bezeichnung type 707101 707125 to which this declaration relates is in conformity with the following standards auf das sich diese Erkl rung bezieht mit den folgenden Normen bereinstimmt auquel se r f re cette d claration est conforme aux normes EN 61010 1 EN 50081 1 EN 50082 1 EN 61000 4 following the provisions of directive gem den Bestimmungen der Richtlinie conform ment aux dispositions de directive 89 336 EEC Electromagnetic compatibility Elektromagnetische Vertr glichkeit 73 23 EEC Low Voltage Equipment Niederspannungsrichtlinie 89 392 EEC Machinery Maschinen Mae Leong Ad Wien 1 August 2005 Dr Reinhard Lihl Entwicklungsleiter R amp D Manager Chef du service d veloppement 93 Leica Mikrosysteme GmbH Hernalser Hauptstrasse 219 A 1170 Vienna Phone 43 1 48899 Fax 43 1 48899 350 www em preparation com MICROSYSTEMS
37. bringen von Proben in den Probenbehalter 6 2 Vorbereitung des EM FSP 6 2 1 Montage des EM FSP 6 2 2 Justage der F llnadel 6 2 3 Einf hren der Abf llspritze 7 Post Polymerisationsverfahren 7 1 Abtrennung von Harzbl cken 7 2 Trennen von Probentr gern und Harzbl cken 7 2 1 Durchflussring 7 2 2 Flach eingebettete Proben Anhang Programmiersoftware II Mit dem EM AFS2 ausgelieferte Programme III Technische Daten IV EG Konformitatserklarung Im vorliegenden Handbuch verwendete Symbole und Abkurzungen Achtung Besonders vorsichtig vorgehen Wichtige Informationen fur den Benutzer Abkurzungen SE Steuereinheit n a nicht abgebildet GS Gefriersubstitution HDG Hochdruck Gefrieren LN2 fl ssiger Stickstoff N S Nord Sud PLT Progressive Lowering of Temperature fortschreitende Temperaturabsenkung RT Raumtemperatur TF Transfer Bitte lesen Sie diese Bedienungsanleitung sorgfaltig bevor Sie das Gerat in Betrieb nehmen Technische nderungen sind jederzeit m glich 1 Sicherheitshinweise Fl ssiger Stickstoff LN Beachten Sie beim Umgang mit fl ssigem Stickstoff LN dass LN extrem kalt ist Der Siedepunkt liegt bei 196 C Stickstoffgas GN entweicht bei sehr niedrigen Tempe raturen aus dem kochenden LN LN und GN sowie gek hlte Teile z B R hren Ventile Schl uche Beh lter oder Verschl s se k nnen schwerwiegende Erfrierungen und Verbrennungen
38. eite des Probentragers ab Ein guter thermischer Kontakt zwischen der Kupferflache und dem erwarmten Abtrennwerk zeug ist eine wesentliche Voraussetzung f r eine erfolgreiche Trennung Trennen Sie mit einer scharfen Rasierklin ge das Harz entlang der Probentr gerr n der ab L sen Sie das Harz voll st ndig entlang der R nder ab Dies ist f r eine erfolg reiche Trennung unerl ss lich Abb 7 12 Probentr ger Abtrennwerkzeug mit nach oben zeigender Klinge Abb 7 13 Abl sen des Harzes von der unteren Fl che des HPF Probentr gers Abb 7 14 Abl sen des Harzes entlang der R nder des HPF Probentr gers Tauchen Sie die Spitze des Harzblocks mit dem Probentrager einige Sekunden in LN2 siehe Abb 7 9 Bringen Sie den gek hlten Probentrager in Kontakt mit dem erw rmten Abtrenn werkzeug siehe Abb 7 15 Beobachten Sie den Vorgang bis das kondensierte Eis auf der Oberfl che des Tr gers zu schmelzen beginnt Neigen Sie dann den Block vorsichtig berhitzen Sie das Harz nicht da ein schmelzender Block beim Neigen nicht nur den Objekttr ger sondern auch die Probe freigibt Neigen Sie den Harzblock sodass der Probentr ger von der scharfen Kante gehalten zur ckbleibt Abb 7 16 7 17 Abb 7 15 Kalter Probentr ger in Kontakt mit erw rmter Klinge des Abtrennwerkzeugs Abb 7 16 Probentr ger bleibt unter der Klinge des Abtrennwerkzeugs w hrend de
39. en und Sar stedt Tuben und oder Eppendorf Tuben ein Abb 5 17 bertragen Sie die Proben in das ge w nschte Kryor hrchen Tauschen Sie GS Medien und Harze ma nuell beispielsweise mithilfe einer Pipette nach dem Protokoll Ihrer Wahl aus Polymerisieren Sie im Trockenschrank oder im AFS2 mit UV Lampe nach dem Protokoll Ihrer Wahl 5 4 2 EM FSP Zubeh r FSP Probenbeh lter k nnen auch f r manuelle GS und UV Polymerisation mit Verarbeitungsblock und Abdeckung oder ohne Verarbeitungsblock verwendet werden Ausf hrliche Informationen zu Proben beh ltern finden Sie in Kapitel 6 Bedie nung des EM FSP Tauschen Sie GS Medien und Harze ma nuell beispielsweise mithilfe einer Pipette nach dem Protokoll Ihrer Wahl aus Polymerisieren Sie im Trockenschrank oder im AFS2 mit UV Lampe nach dem Protokoll Ihrer Wahl Flacheinbettungsformen f r UV Polymerisation ist eine Aclar Folie auf der Flacheinbettungsform erforderlich Oi o u Abb 5 17 Kryor hrchen Einsatz in der Kammer des AFS2 Abb 5 18 Verarbeitungsblock mit Abdeckung Abb 5 19 Aclar Folie auf der Flacheinbettungs 61 form 5 4 3 EM AFS Zubehor Alle Reagenzien und Probenbehalter des EM AFS passen auch in die Kammer des EM AFS 2 siehe Abb 5 20 5 22 Kuhlen Sie die Kammer auf die ge wunschte Anfangstemperatur F llen Sie die Kammer zur H lfte mit Athanol um eine gute W rmeleitf hig
40. ht werden um Speicherplatz freizugeben 2 Close Aktivieren Sie Close Close um zur Menuanzeige zuruckzukehren 53 5 Bedienung des EM AFS2 5 1 Montage des Deckels 1 Legen Sie den Deckel wie in Abb 5 1 dargestellt auf die AFS2 Kammer Abb 5 1 Bajonett Verschluss 2 Achten Sie darauf dass sich der Bajo nett Verschluss in der korrekten offenen Position befindet Abb 5 2 Der Ver schluss wird noch nicht uber dem Dewar Symbol Einschub in Abb 5 2 angezeigt schlusssymbol in der Anzeige 3 Drehen Sie den Deckel im Uhrzeiger sinn um den Bajonett Verschluss zu schlieBen 4 Der Bajonett Verschluss befindet sich jetzt in der korrekten geschlossenen Posi tion Abb 5 3 Der ordnungsgem montierte Deckel wird jetzt als Symbol oberhalb des Dewar Symbols angezeigt Einschub in Abb 5 3 Der Deckel kann durch Drehen gegen den Uhrzeigersinn wieder ge ffnet werden symbol in der Anzeige 54 5 2 Montage der LED UV Lampe 1 Platzieren Sie die UV Lampe wie in Abb 5 4 dargestellt auf die AFS2 Kammer 2 Achten Sie darauf dass sich der Bajo nett Verschluss in der korrekten offenen Position befindet Abb 5 5 Die UV Lampe wird noch nicht ber dem Dewar Symbol Einschub in Abb 5 angezeigt 3 Drehen Sie die UV Lampe im Uhrzei gersinn um den Bajonett Verschluss zu schlieBen 4 Der Bajonett Verschluss befindet sich jetzt in der korrekten geschlossenen Posi tion
41. itts z B Schritt 9 an Programmieren eines Programms Aktivieren Sie den Programmiermodus indem Sie den Cursor in die grafische Programmanzeige bewegen und die Maustaste klicken Die Programmieranzeige erscheint Pruisch Program 07 Ludvig FS S RENANE SAVE CLOSE Duration 414 05 CFSP COPT PASTE DELETE Bap Te TEs Mine eg de A A A KK Sky EHHA i ri LS 03 CA C4 DE ur OF INSERT DELETE CHER Informationen zur Programmierung siehe Kapitel 4 1 3 Die Programmieranzeige im berblick und 4 1 4 Funktionen der Programmieranzeige 01 00 27 6 Kammer und Dewar Gef Pegelanzeiger Der obere Teil zeigt welche Art von Zube h r auf der AFS2 Kammer montiert ist Bedingungen Kammer offen Deckel geschlossen UV Lampe montiert kein UV Licht UV UV Lampe montiert UV Licht EM FSP montiert kein UV Licht EM FSP montiert UV Licht Der Dewar Gef Pegelanzeiger zeigt die F llh he des LN2 in folgenden Schritten an 0 12 5 25 50 75 87 5 und 100 7 Start Pause Fortsetzung Aktivieren Sie START um ein Programm zu starten START PAUSE um ein Programm zu unterbre chen PAUSE CONT um ein Programm fortzusetzen CONT OTOP um ein Programm zu beenden Links oben in der Anzeige erscheint an stelle des Leica Logos ein Best tigungs feld 8 Menu 9 Anzeigensperrung Freiga
42. keit zu gew hrleisten bertragen Sie die Proben in den ge w nschten Beh lter Tauschen Sie GS Medien und Harze manuell beispielsweise mithilfe einer Pipette nach dem Protokoll Ihrer Wahl aus Polymerisieren Sie im Trockenschrank oder im AFS2 mit UV Lampe nach dem Protokoll Ihrer Wahl Abb 5 20 Proben und Reagenzienbeh lter des EM AFS passen in die Kammer des EM AFS2 Abb 5 21 Proben und Reagenzienbeh lter des EM AFS passen in die Kammer des EM AFS2 i Abb 5 22 Proben und Reagenzienbeh lter des EM AFS passen in die Kammer des EM AFS2 62 6 Bedienung des EM FSP Das EM FSP darf nicht mit OsO4 verwendet werden OsO4 gef hrdet die Ge sundheit der Bediener und kann zur Besch digung des EM FSP f hren insbesondere wenn eine Mischung mit L sungsmitteln z B Aceton erfolgt oder bei h heren Temperaturen z B Raumtemperatur gearbeitet wird 6 1 Vorbereitung f r GS im FSP 6 1 1 Vorbereitung der FSP Proben beh lter Bereiten Sie einen Probenbeh lter vor indem Sie ein Reagenzienbad A in Abb 6 1 mit einem Durchflussring B in Abb 6 1 oder einem Flacheinbettungseinsatz C in Abb 6 1 kombinieren Probenbeh lter Reagenzienbad Durch flussring ODER Flach einbettungseinsatz Flacheinbettungsformen f r UV Polymerisation ist eine Aclar Folie auf der Flacheinbettungsform erforderlich Der Flacheinbettungseinsatz weist eine Ausrichtungsmarke auf die zu
43. llgefaBes regelm ig im Abstand von drei Monaten und vergleichen Sie den ermittelten Wert mit dem vom Hersteller angegebenen Wert Die Verdampfungsrate eines unbesch digten Dewar Metallgef es sollte deutlich unter 1 Liter LN pro Tag lie gen Besch digte Dewar Gef e mit einer h heren Verdampfungsrate stellen ein Si cherheitsrisiko dar und sollten repariert oder nicht weiter verwendet werden Bewahren Sie LN nicht in offenen Gef en auf in denen ein Austausch mit der Raum atmosph re m glich ist Der Siedepunkt von LN 196 C liegt unter dem Siedepunkt von fl ssigem Sauerstoff 183 C Wenn die Austauschfl chen gro genug sind kann Sauerstoff aus der Luft im Austausch ge gen Stickstoff aufgenommen werden LN mit einem hohen Sauerstoffgehalt hat eine leicht bl uliche Farbe Konzentrierter fl s siger Sauerstoff tr gt zu schweren Ver brennungen bei Vergewissern Sie sich dass das Dewar Gef nur f r LN verwendet wird Bringen Sie an der zentralen Verteilungsstelle f r Gase einen Hinweis an z B NUR FL SSIGER STICKSTOFF wenn verschiedene Fl ssiggase von dieser Stelle aus verteilt werden berpr fen Sie die Farbe des K ltemittels Eine bl uliche Farbe weist auf einen hohen Gehalt an fl s sigem Sauerstoff hin Die Konzentration von fl ssigem Sauerstoff erh ht sich bei einer langen Lagerzeit da der Siedepunkt von Sauerstoff 183 C ber dem Siedepunkt von LN 196 C liegt
44. m Reagenzienbad passt Abb 6 2 roter Kreis F r die Durchflussringe ist keine Ausrich tung erforderlich Abb 6 1 Reagenzienbad A Durchflussring B und Flacheinbettungsform C Abb 6 2 Ausrichtungsmarke der Flacheinbettungs form im Reagenzienbad 6 1 2 Befullen der Kammer fur den FSP Durchlauf Der Verarbeitungsblock weist eine Aus richtungsmarke an der Unterseite auf Abb 6 3 roter Kreis Setzen Sie den Verarbeitungsblock wie in Abb 6 4 dargestellt in die AFS2 Kammer ein Die Ausrichtungsmarke passt Zum Stift unten in der AFS2 Kammer Abb 6 3 Ausrichtungsmarke an Unterseite des Verarbeitungsblocks Abb 6 4 Einsetzen des Verarbeitungsblocks in die AFS2 Kammer setzen Sie die Reagenzienbehalter mit Stamml sungen wie in Abb 6 5 dargestellt ein Alle 8 Reagenzienbehal ter mussen in die AFS2 Kammer eingesetzt wer den Leere Reagenzienbe halter werden vom FSP als Abfallbeh lter genutzt Abb 6 5 Einsetzen der Reagenzienbeh lter 64 Schraubverschl sse auf Reagenzienbe h ltern k nnen bei niedrigen Temperatu ren mit dem Schraubverschluss Halterohr ge ffnet und geschlossen werden siehe Abb 6 5a b und c Alle Reagenzienbehalter mussen vor dem Starten eines FSP Programms ge ffnet werden 65 Abb 6 5a Mit Schraubverschluss verschlossener Reagenzienbeh lter Schraubverschluss Halterohr Abb 6 5b ffnen des Reagenzienbeh lters Abb 6 5c
45. nf gen und L schen von Zeilen in einem Programm Pr ffunktion 30 4 1 4 Funktionen der Programmier 2 Schaltflachen zum Umbenennen anzeige Sichern Kopieren Einfugen und Loschen von Programmen sowie zum schlieBen der Programmieranzeige 1 Liste verfugbarer Programme Aktivieren Sie Zum Programmieren eines neuen Pro gramms ffnen Sie das Pulldown Men NAME um ein Programm umzu und w hlen empty aus benennen Zum Bearbeiten eines vorhandenen Pro gramms ffnen Sie das Pulldown Men und w hlen Sie den Namen des ge Eine Tastatur wird angezeigt Geben Sie w nschten Programms aus den gew nschten Namen ein und best ti gen Sie mit ENTER LEGR Program E ven ae ELOSE eps DELETE CHECK Es k nnen maximal 99 Programme pro grammiert werden 31 Aktivieren Sie Aktivieren Sie SAVE um ein Programm zu sichern PASTE um ein Programm einzuf gen Ein Best tigungsfeld wird angezeigt Ein Best tigungsfeld wird angezeigt Best tigen Sie mit OK Best tigen Sie mit OK Ein Best tigungsfeld wird angezeigt Ein Best tigungsfeld wird angezeigt Best tigen Sie mit OK W hlen Sie YES oder NO Sara LER 1 Durston ete CFSP 3 MI 0 O a 11 IS Au vague gie Aktivieren Sie CLOSE um den Programmeditor zu schlie en und zur Hauptanzeige zur ck zukehren lt CLOSE Falls das Programm be
46. onen wird fur program started angezeigt 25 3 Kammerbeleuchtung und TF Regler Beleuchtung Der obere Schalter erm glicht das Ein Ausschalten und Regulieren der Kammer beleuchtung Einstellen der Beleuchtungsst rke Mithilfe der Tasten und k nnen Sie die Beleuchtungsst rke regeln Bedingungen Kammerbeleuchtung aus Kammerbeleuchtung ein und Beleuchtungsst rke z B Ubertragungsfunktion TF Transfer 4 Programmschrittanzeiger Die obere Zeile zeigt den Namen des Der untere Schalter erm glicht das Ein Programms im Speicher z B Ausschalten und Regulieren der TF Funktion Test FS y TF erzeugt einen Strom von kaltem trockenem GN2 w hrend Proben in der Die zweite Zeile zeigt das Reagenz des offenen Kammer bertra aktiven Programmschritts z B gen und gehandhabt wer den Wenn die Kammer Acetonelso4 geschlossen oder die UV Lampe oder der EM Die dritte Zeile zeigt die Temperatur des FSP montiert ist wird TF aktiven Programmschritts z B automatisch ausgeschaltet 90 OU Die vierte Zeile zeigt Datum und Uhrzeit Einstellen der TF Starke des Beginns des aktiven Programm Mit den Tasten und kann eingestellt schritts werden wie stark die Kammer mit N2 Gas gef llt wird w hrend sie offen ist z B wah 15 01 05 08 05 rend der bertragung von Proben TE Das untere Feld enth lt den Programmtyp manuelles Programm oder FSP A oder A B MANU
47. r Harzblock mit der Probe vollst ndig geneigt ist Abb 7 17 Probentr ger bleibt unter der Klinge des Trennwerkzeugs w hrend der Harzblock mit der Probe vollst ndig geneigt ist 83 Anhang Programmiersoftware Installieren Sie die Software gem den mit der Datei gelieferten Anweisungen Die AFS2 Programmeditorsoftware Anzeige im Uberblick i AFS Program Editor C Loan E Program Siete Duration press Check Manual DCH K l Sain TI En Slope Wits Heagen WIEL UW Pause F T Esi hier er Stay z TE INSERT Li DELETE eck Funktionen f r Laden Speichern Neuerstellen Drucken Einstellungen Taste Close Feld Programmname Programmmodus manuell oder FSP Programmeditor Weiter zur Reagenzienverwaltung Einf gen und L schen von Zeilen in einem Programm Pr ffunktion 84 NO oR GA MM Funktionen der AFS2 Programmeditorsoftware Anzeige 1 Funktionen fur Laden Speichern Neuerstellen Drucken Einstellungen Aktivieren Sie SAVE um ein Programm auf der Festplatte oder dem Speicherstift zu sichern LOAD SAVE gt Aktivieren Sie LOAD um ein Programm in die Programmeditoranzeige zu laden Es wird ein Fenster geoffnet in dem nach der Quelle Festplatte oder Speicherstift gefragt wird Es wird ein Fenster geoffnet in dem nach dem Ziel Festplatte oder Speicherstift gefragt wird
48. ringen von Proben in den Probenbehalter Probentrager oder Proben werden in Durchflussringe oder Flacheinbettungsfor men eingesetzt Abb 6 12 HPF Probentrager auf Vorbereitungs plattform Fullen Sie den Proben behalter vor dem Einset zen von Proben mit 4 ml vorgek hltem GS Medi um Auf diese Weise vermei den Sie eine Erw rmung und Rekristallisation der gefrorenen Probe durch ein GS Medium das eine h here Temperatur als 90 C aufweist Alle HPF Probentr ger Abb 6 13 HPF Probentr ger in Durchflussringen m ssen so ausgerichtet sein dass die Probe nach oben zeigt In den Durchflussringen k nnen Sie die Tr ger mithilfe der Pr parations nadeln verschieben bis sie korrekt ausgerichtet sind Abb 6 14 HPF Probentr ger in Flacheinbettungs Abb 2 16 form 68 In den Flacheinbettungsformen mussen die Trager vorne platziert werden damit eine korrekte Entnahme nach der Polyme risation gewahrleistet ist Abb 6 15 HPF Trager an vorderer Position in Flacheinbettungsform Flacheinbettungsformen f r UV Polymerisation ist eine Aclar Folie auf der Flacheinbettungsform erforderlich T ia Abb 6 16 Aclar Folie auf der Flacheinbettungs form 69 6 2 Vorbereitung des EM FSP 6 2 1 Montage des EM FSP 1 Die Arbeitsplattform des AFS2 weist 2 Ausrichtungsmarken siehe rote Kreise in Abb 6 17 zur Montage des FSP auf Abb 6 17 Ausrichtungsmarken fur E
49. risation von Flacheinbettungsformen erforderlich Bei Auswahl von empty wird der gesam te Inhalt 4 ml aus dem Probenbehalter entfernt 6 Weiter zur Reagenzienverwaltung Aktivieren Sie Manage Reagents um den Editor zur Bearbeitung der Reagenzienliste aufzuru fen Canage Reagents Ausf hrliche Informationen hierzu siehe Kapitel 4 1 7 Die Reagenzien verwaltungsanzeige im berblick und 4 1 8 Funktionen der Reagenzien verwaltungsanzeige 36 7 Einf gen und L schen von Zeilen in einem Programm Pr ffunktion Aktivieren Sie INSERT um Programmschritte im Programmeditor einzuf gen INSERT DELETE um Programmschritte aus dem Programmeditor zu loschen DELETE CHECK um ein Programm im Programmeditor zu pr fen CHECK Manueller Programmmodus In einem manuellen Programm pr ft die Pr ffunktion das Programm auf logische Fehler Beispiel T_ von Schritt 1 und Ter Von Schritt 2 stimmen nicht berein a1 Star Teng Slope Time Roagent d Sl oo Ey CH i d EH J Us APO 1 1 IL GK UTAS HMD 1 1 ror Step 2 OK In diesem Fall wird ein blaues Informati onsfenster angezeigt aus dem der An wender die Position des Fehlers erf hrt in obigem Beispiel Schritt 2 Falls keine logischen Fehler im Programm vorhanden sind erscheint ein Best ti gungsfenster Klicken Sie zur Best tigung auf OK
50. roductian_FsAcetonedsl4 ki Copy Selected Program To Local Memory Copy All Programs To Local Memor Delete Selected Program From Stick Delete All Programs From Stick Copy Selected Program To Stick Copy All Programs To Stick Abb 4 8 Datenubertragungsanzeige 1 Wechseln zwischen Protokolldatei bertragung und Programmubertragung 2 Taste Close 3 Liste der Dateien im lokalen Speicher und auf dem Speicherstift 4 Kopieren und Loschen von Dateien im lokalen Speicher und auf dem Speicherstift 52 4 1 16 Funktionen der Daten 3 Liste der Dateien im lokalen ubertragungsanzeige Speicher und auf dem Speicherstift Verfugbare Programm oder Protokollda teien 1 Wechseln zwischen Protokolldatei bertragung und Programm bertragung 4 Kopieren und L schen von Dateien im lokalen Speicher und auf dem Speicherstift Aktivieren Sie Switch to log file transfer stick Switch ToLogr le Transfer Copy Selected Program To Stick um zur Protokolldateiubertragungsanzeige zu wechseln um Programme aus dem lokalen Speicher auf den Speicherstift zu kopieren Aktivieren Sie Copy selected programs to Aktivieren Sie andere Schaltflachen um Transfer Logfles veaiteesies Oe gew nschte Aktion auszuf hren iin rd Mresee Beem Siok Programmnamen werden bei der Ubertra gung in anwendername_programmname ge ndert Protokolldateien sollten gelegentlich aus dem lokalen Speicher gel sc
51. ss 19 4 Die BegruBungsanzeige erscheint Abb 3 6 Wahlen Sie einen von 10 Anwendern aus Weitere Informationen hierzu finden Sie in Kapitel 4 Mausgesteuerte Anzeigen Abb 3 6 BegruBungsanzeige 20 3 4 Montage des Stereo mikroskops optional 1 Packen Sie den Stereotrager aus und bereiten Sie ihn vor siehe Abb 3 7 2 Ziehen Sie den Stecker aus der hinte ren Stereoposition der AFS2 Bewahren Sie den Stecker f r zuk nftigen Gebrauch auf 3 Montieren Sie den Stereotr ger an der hinteren Stereoposition des AFS 2 siehe Abb 3 8 21 Abb 3 7 Stereotr ger Abb 3 8 Montage des Stereotr gers Der Stereotrager ist einsatzbereit fur das S6E Stereomikroskop Abb 3 9 Justieren Sie die Position in Nord God Richtung durch Verschieben des Tragers roter Pfeil in Abb 3 9 Abb 3 9 Stereotrager mit S6E Roter Pfeil zeigt Bewegung in N S Richtung Der Mikroskoptrager fur den Einsatz mit dem MZ6 Stereomikroskop kann nach unten ge schwenkt werden um den richtigen Arbeitsabstand zu gew hrleisten Abb 3 10 Abb 3 10 Stereotr ger nach unten geschwenkt f r Einsatz mit MZ6 22 4 Mausgesteuerte Anzeigen 4 1 Mausgesteuerte Anzeige EM AFS2 und EM FSP werden ber einen mausgesteuerten Bildschirm rechts vom EM AFS2 bedient 4 1 1 Die Hauptanzeige im berblick KI poo p 7 164 C end m S 14 59 MIERDSYSTEMS gt Min 06 08 2005 SS a A ges
52. unktionen der Protokolldateianzeige 5 bertragung von Daten Programmen oder Protokolldateien zu von einem Speicherstift Aktivieren Sie Data Transfer Data Transfer um zur Daten bertragungsanzeige zu wechseln Trar slar Programs ectieirgptezg Lead Mrsesg Bia Sin Titel hited feel Tei Tea bc kuchen ira r ef oo a ips bessa From Tore Diap veer b Frot Tee et Leire Zeng ab eg L si Ausf hrliche Informationen hierzu siehe Kapitel 4 1 15 Die Daten bertragungsan zeige im berblick und 4 1 16 Funktio nen der Daten bertragungsanzeige 6 Wechseln zur Einrichtungsanzeige Aktivieren Sie Set up um zur Einrichtungsanzeige zu wechseln Informationen hierzu siehe Kapitel 4 1 11 Die Einrichtungsanzeige im berblick und 4 1 12 Funktionen der Einrichtungs anzeige 7 Wechseln zur Serviceanzeige kennwortgesch tzt Aktivieren Sie Service SERVICE um zur Serviceanzeige zu wechseln Die Serviceanzeige ist kennwortgesch tzt und nur geschultem Wartungspersonal zug nglich 45 4 1 11 Die Einrichtungsanzeige im Uberblick __SETCLOCK Edit User List 09 25 02 08 2005 _ Leica EMAFS2 sl Display Format DJ Active Abb 4 6 Einrichtungsanzeige 1 Festlegen des Uhrzeit und Anzeige formats 2 Bearbeiten von Anwenderlisten und Umbenennen von Anwendern 3 Alarm und Info Einstellungen
53. ze handelt siehe Abb 7 5 oder ca 40 C wenn es sich um Acryl harze handelt Die untere EM MP Platte liefert 80 C die obere EM MP Platte 40 C Klemmen Sie den Harzblock in einen Probentr ger beispielsweise den Proben tr ger f r ein Leica Ultramikrotom siehe Abb 7 6 Abb 7 4 Probentr ger Abtrennwerkzeug mit nach hinten zeigender Klinge Abb 7 5 Probentr ger Abtrennwerkzeug auf hei er Platte ca 80 Abb 7 6 Harzblock in Universalhalter eines Leica Ultramikrotoms geklemmt 78 Trennen Sie das Harz wie in Abb 7 7 dargestellt mit einer scharfen Rasierklinge von der Vorderseite des Probentragers ab Ein guter thermischer Kontakt zwischen der Kupferflache und dem erwarmten Abtrennwerk zeug ist eine wesentliche Voraussetzung f r eine erfolgreiche Trennung Trennen Sie mit einer scharfen Rasierklin ge das Harz entlang der Probentr gerr n der ab Abb 7 8 L sen Sie das Harz voll st ndig entlang der R nder ab Dies ist f r eine erfolg reiche Trennung unerl ss lich NZ und Metallteile k nnen extrem kalt werden und bei Ber hren ohne entsprechen de Schutzkleidung schwere Verletzungen verursachen Tauchen Sie die Spitze des Harzblocks mit dem Probentr ger einige Sekunden in LN2 siehe Abb 7 9 Abb 7 7 Abtrennen des Harzes von der Vordersei te des Probentr gers Abb 7 8 Abl sen des Harzes entlang der R nder des HPF Probentr gers
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