Methodenkursmit deckblatt
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1. Betriebsanweisung 1 Umgang mit gef hrlichen Stoffen Molmasse Schmelz Siede Gefahrstoff Substanz g mol punkt punkt symbol R S tze S S tze Acetylsalicyls ure 180 15 136 Xn 22 Salicyls ure 138 12 157 159 211 Xn 22 41 22 24 26 39 Essigs ureanhydrid 102 09 73 138 40 C 10 20 22 34 26 36 37 39 45 Calciumchlorid 110 99 772 gt 1600 Xi 36 22 24 Schwefels ure konz 98 08 15 310 C 35 26 30 45 Ethanol 46 07 114 5 78 3 F 11 16 2 Schutzma nahmen sowie Anweisungen zur Ersten Hilfe und Verhaltensregeln bei kleinen Unf llen Substanz Schutzma Schutzm Anweisun Anweisun Anweisun Anweisun St rverhalten bei kleinen Bnahmen Ja nahme gen zur genzur genzur genzur Unf llen allgemein n ersten ersten ersten ersten K rper Hilfe Hilfe Hilfe Hilfe Haut Augen Inhalation Verschluc ken Acetylsalicyls ure DT BK WK W L WEA WSchP Salicyls ure DT BK WK WA L WEAF WSchP Essigs ureanhydrid AD BHK WK WA LA WA P Calciumchlorid ADL BHK WA WA L WEA Schwefels ure 25 ADL BHK WF WA LA WA Auf Umgebung abstimmen Ethanol DKL BHK WK WA L WA CSchP Kurzprotokoll Reaktionsgleichung Durchf hrung mit Beobachtungen Allgemeines zur Umkristallisation Schmelzpunkt Rohprodukt Schmelzpunkt gereinigtes Produkt Ausbeute Rohprodukt Ausbeute gereinigtes Produkt 2 Einfache und Vakuumdestillation Siedepunkt Brechungsindex Arbeitstechniken Apparaturen Auf2. hyd Richtlinie 67 548 EWG L sungsmittel und ent sorgen in Beh lter f r halogenfreie L sungs mittel Kalium tert F C 11 14 35 16 26 L sen in H20 und ent butanolat 36 37 39 sorgen in Beh lter f r 43 12 45 7 9 andere Basen 18 Krone 6 Xn 22 24 25 L sen in H2O und ent sorgen in Beh lter f r andere Basen Dichlormethan x 40 23 24 25 Beh lter f r halogen 30137 haltige organische L sungsmittel E 4 4 N Ethyl N 2 hydroxyethyl ami no styryl benzaldehyd Nicht vollst ndig untersuchter Stoff L sen in THF und ent sorgen in Beh lter f r halogenfreie L sungsmittel tert Butanol F X 11 20 36 9 16 Beh lter f r halogen 36 37 39 freie organische L sungsmittel e Xa 21 22 52 53 2736 37 61_ T sen in Ethanol und oxid entsorgen in Beh lter f r halogenfreie L sungsmittel 7 7 P 4a Kaliumiodid Kein gef hrliches Produkt im Sinne der Richtlinie 67 548 EWG L sen in H gt O und ent sorgen in Beh lter f r andere Basen Verdacht auf Krebs erzeugende Wirkung P S Alle Angaben in diesem Musterprotokoll sind nur beispielhaft 37 38 4 Tipps und Hinweise zu den Protokollen Formatierung Seiteneinrichtung e Seitenr nder 25 mm e Schriftart TIMES NEW ROMAN oder ARIAL e Schriftgr e 12 pt e Zeilenabstand 1 5 e Blocksatz e Alle Seiten au er dem Deckblatt sind mit fortlaufenden Sei
3. Literatur IR KBr Pressling v cm 1668 C 0 H NMR 300 MHz CDCI 25 C TMS ppm 9 88 s 1 H CHO 7 96 d J H H 9 5 Hz 2 H C H 7 56 d J H H 9 5 Hz 2 H C H 7 34 d J H H 9 0 Hz 2 H C LH 7 16 d J H H 16 2 Hz 1 H C Y _H 6 96 d J H H 16 2 Hz 1 H C H 6 84 d J H H 9 0 Hz 2 H C H 3 81 t Y HH 72 Hz 2 H CH gt O 3 50 m 4 H 2x N CH 1 20 t J H H 7 2 Hz 3 H CH Weitere H NMR Signale ppm 7 26 s CHC 2 17 s Aceton 1 56 s H O 1 26 0 86 Schlifffett 0 00 TMS Die genaue Zuordnung der aromatischen und olefinischen Signale zu konkreten Wasserstoff kernen war auch mit Hilfe eines H H COSY NMR Spektrums nicht m glich Des Weiteren stimmen die gemessenen H NMR Daten mit denen aus der Literatur berein 13C NMR 100 6 MHz CDCH 25 C TMS ppm 191 7 CHO 144 5 134 5 132 3 3x C quart r 130 3 128 4 126 3 124 3 123 9 5x C H 122 8 C quart r 112 5 C H 60 2 CH OH 52 5 45 7 2x N CH 11 9 CH3 35 Weitere C NMR Signale ppm 77 0 t C D 32 Hz CDC 29 8 Schlifffett 0 0 TMS In der Literatur sind keine C NMR Daten bekannt UV Vis CH2C12 Amax nm 480 12000 351 5000 In der Literatur sind keine UV Vis Daten bekannt MS ED m z 295 100 M 264 63 M CH OH 235 5
4. 5 g des Stoffgemisches werden in einem 250 mL Rundkolben mit Magnetr hrst bchen mit soviel L sungsmittel versetzt dass sie gerade berschichtet sind Unter R hren wird zum R ckfluss erhitzt L st sich die Substanz nicht v llig f gt man ggf wiederholt durch den K hler wenige Milliliter L sungsmittel zu solange bis die Substanz in der Hitze klar gel st ist Zwischendurch wird die L sung wieder zum Sieden erhitzt Falls in der L sung nicht gel sten Bestandteilen vorhanden sind werden diese so hei wie m glich abfiltriert Trichter und Auffanggef u U vorw rmen oder beheizten Trichter verwenden und das Filtrat zum langsamen Auskristallisieren verschlossen abgestellt Farbige Verunreinigungen sind durch Zugabe von Aktivkohle und anschlie ender Filtration zu entfernen Falls das Produkt nicht auskristallisiert kann man den Proze durch Reiben eines Glasstabes an der Gef wand oder durch Zusatz eines Impfkristalls unterst tzen Das auskristallisierte Produkt wird saugfiltriert mittels B chnertrichter und Saugflasche Um die Wirksamkeit des Trockensaugens zu erh hen wird der Feststoff mit einem Glasstopfen fest angedr ckt Zur Ausbeutebestimmung wird nach dem Trocknen ausgewogen Eine Charakterisierung erfolgt durch Bestimmung des Schmelzpunktes Produkt Acetylsalicyls ure Schmp 136 Gef hrdung Acetylsalicyls ure und Salicyls ure sind gesundheitssch dlich beim Verschlucken R 22 Beim Umgang mit Salicyls
5. 00 12 00 Uhr Protokoll Angaben zur Messung tabellarische Auflistung der Fragmente Kennzeichnung des Molek l und Basispeaks weitere Zuordnung 25 26 12 NMR Spektroskopie Studierende der Studieng nge Chemie und Lebensmittelchemie lassen von drei Pr paraten und Studierende des Studienganges H heres Lehramt von einem Pr parat ein 1H NMR Spektrum an einem 400 MHz Ger t im Institut aufnehmen Die Spektren werden in L sungen aufgenommen In der Regel wird als L sungsmittel Deuterochloroform CDCl das schon den inneren Standard Tetramethylsilan TMS enth lt verwendet Arbeitsschritte Probenvorbereitung Bereitung der Probenl sung feste oder fl ssige Substanzen Die L sung wird in einem Pr parategl schen vorbereitet Dazu werden 20 mg der Substanz eingewogen und mit 0 6 mL des deuterierten L sungsmittels Dosierung mit einer Spritze versetzt Falls keine Spritze zur Verf gung steht kann die L sungsmittelmenge folgenderma en abgemessen werden Das NMR R hrchen wird 4 cm hoch mit dem L sungsmittel entspr 0 6 mL gef llt Durch leichtes Sch tteln des Pr parategl schens mu die Substanz vollst ndig in dem L sungsmittel gel st werden Tr be Proben k nnen nicht vermessen werden Danach wird mit einer sauberen Pipette die L sung in das NMR R hrchen berf hrt Kontrolle der F llh he 4 cm und eventuelles Auff llen mit L sungsmittel schlie en die Probenvorbereitung ab Der Begleitzettel ist v
6. Magnesium mit reinem Methanol und gibt dieses Gemisch zur Hauptmenge wenn die Methylatbildung begonnen hat Dabei ist etwas mehr Magnesium anzuwenden als oben angegeben Toluol Toluol wird durch azeotrope Destillation gro en Vorlauf nehmen absolutiert und danach ber Molsieb 4A aufbewahrt Trichlorethylen Trichlorethylen wird zuerst mit Kaliumcarbonat und dann mit Wasser gut durchgesch ttelt dann ber Calciumchlorid vorgetrocknet und anschlie end abdestilliert Das Azeotrop mit Wasser siedet bei 73 6 Trichlorethylen bei 87 2 Chloroform 1 Chloroform wird mit wasserfreien Calciumchlorid 20 g I 5 h unter R ckfluss erhitzt und anschlie end unter Normaldruck abdestilliert Ether besondere Hinweise zum Umgang mit Diethylether Gefahr Diethylether kann wie auch THF Dioxan Peroxyde enthalten die sich unter Einflu von Licht und Sauerstoff bilden Diese Peroxyde k nnen schwere Explosionen ausl sen 28 Pr fung auf Peroxyde Zu 1 mL Diethylether wird 1 mL einer 10 igen L sung von Natriumiodid in Essigs ure gegeben Eine Gelbf rbung zeigt eine geringe Konzentration an Peroxyden an eine Braunf rbung eine hohe Vernichten der Peroxyde Der peroxydhaltige Diethylether wird mit einer konzentrierten Eisen Il sulfat L sung gesch ttelt oder ber eine S ule mit aktiven Aluminiumoxyd filtriert Aufbewahrung des Ethers In dunklen Flaschen ber festem KOH Trocknen von Ether Ether wird mit Natriumdraht der mi
7. N 2 hydroxyethyl amino styryl benzaldehyd Pr paratenummer 24 2 Sonja Superstudi Assistent Alex Freundlich 1 Abgabe Datum Unterschrift 2 Abgabe Datum Unterschrift 3 Abgabe Datum Unterschrift Darstellung von E 4 4 N Ethyl N 2 hydroxyethyl aminostyryl benzaldehyd CjsH NO Reaktionsgleichung N H H 18 Krone 6 CH CI N X ok P Phal O O HO C2H3 INOP CsH602 C4HoKO C12H2406 CH gt Ch 567 44 g mol 134 13 g mol 112 21 g mol 264 32 g mol 84 93 g mol 4 N Ethyl N 2 hydroxy Benzol 1 4 dicarb K Kalium tert 18 Krone 6 Dichlor ethyl amino benzyltri aldehyd butanolat methan phenylphosphoniumiodid A N ws H 4 OH PhP 0O KI HO O C19H3 NO gt C4H 00 C sH sOP IK 295 38 g mol 74 12 g mol 278 28 g mol 166 00 g mol E 4 4 N Ethyl N 2 hydroxy tert Butanol Triphenyl Kaliumiodid ethyl amino styryl benzaldehyd phosphanoxid Mechanismus H Ph Pha R P Phal tert BuOH KI P Ph RH R CH erythro Form threo Form R H R R H aH HH HOC HO Ph P 0 H R H H i O OH E Olefin Z Olefin Nach der Deprotonierung der aktivierten Methylengruppe des Phosphoniumsalzes durch die starke nicht nucleophile Base Kalium rerr butanolat reagiert das gebildete Ylid mit dem Aldehyd unter Bildung eines intermedi ren Oxaphosphetan Ringes Dieser Kann in der erythro oder threo Form 33 vorliegen Da das Ylid semistabil ist bildet sich ein Gemisch aus beiden Formen Bei d
8. absolutem Ethanol umkristallisiert und anschlie end im Vakuum getrocknet wurde Ausbeute Es wurden 1 64 g eines orangenen kristallinen Feststoffes erhalten 5 54 mmol 36 bezogen auf Benzol 1 4 dicarbaldehyd Die Literaturausbeute betr gt 64 F r die deutlich niedri gere Ausbeute k nnen zwei Gr nde genannt werden Zum einen wurde versehentlich ein zu gro er berschuss an Kalium tert butanolat verwendet der in diesem Ausma zu Nebenreak tionen gef hrt haben wird Weiterhin wurde der Teil des Produktes der in Mischfraktionen verunreinigt vorlag verworfen bzw nicht vollst ndig bei der s ulenchromatographischen Reinigung eluiert 34 Charakterisierung Das Produkt ist ein orangener kristalliner Feststoff Der Schmelzpunkt betrug 170 C Lite ratur 173 174 C R Wert 0 3 SiO2 EE PE 1 1 UV 254 u 350 nm IR KBr Pressling v cm 3042 w Aryl H Valenzschwingung 2970 s CH3 Valenz schwingung 2873 s CH gt Valenzschwingung 1673 s C O Valenzschwingung 1591 m C C Valenzschwingung aromatischer Ring 1521 m C C Valenzschwingung aromati scher Ring 1402 m CH Deformationsschwingung 1353 m CH3 Deformationsschwin gung 1306 s O H Deformationsschwingung 1276 m C N Valenzschwingung 958 m C H Deformationsschwingung Alken 821 s C H Deformationsschwingung 1 4 disub stituierter aromatischer Ring Weitere IR Bande v cm 3454 w OH Valenzschwingung H20 in KBr
9. end unter vermindertem Druck getrennt Vakuumdestillation Vor dem Umbau der Apparatur bzw dem Anlegen des verminderten Druckes muss die Fl ssigkeit im Destillationskolben abgek hlt sein ca 40 Zur Erzeugung des Vakuums dient eine Wasserstrahlpumpe oder besser falls vorhanden eine Membranpumpe Dabei ist zwischen Wasserstrahlpumpe und Destillationsapparatur Vorsto immer eine Sicherheitsflasche Woulfsche Flasche zu schalten W hrend der Destillation soll unbedingt die Siedetemperatur und der dazugeh rige Druck notiert werden Temperaturschwankungen um etwa 5K entstehen durch Druckschwankungen und beeinflussen das Trennergebnis nicht Um einen m glichst niedrigen Druck zu erreichen ist die Apparatur spannunggsfrei aufzubauen sind die Glasger te gut zu fetten und m ssen die Schl uche fest angeschlossen sein Auch bei der Destillation im Vakuum m ssen Siedeverz ge durch R hren bzw durch Siedekapillaren verhindert werden Sie wird abgebrochen wenn sich im Destillationskolben weniger als ca 3 mL Fl ssigkeit befinden Bei Beendigung ist zuerst die W rmequelle zu entfernen Dann kann nach Abk hlung von mindestens 10 K langsam das Vakuum aufgehoben werden DIE GETRENNTEN FRAKTIONEN BITTE NICHT ENTSORGEN SONDERN IN SAMMELFLASCHEN GEBEN Arbeitssicherheit Gef hrdung Die ausgegebenen Fl ssigkeitsgemische bestehen aus L sungsmitteln Mit folgenden Gef hrdungen ist h chstens zu rechnen giftig Einatmen der D mpfe und Kontakt
10. ige L sung in einem unpolaren L sungsmittel aufgetragen Die Konzentration auf der DC Folie mu gen gend gro sein Aber zu gro e Mengen verschlechtern den Trenneffekt und f hren zur Schwanzbildung Zum Auftragen verwendet man selbstgezogene Kapillaren aus den Spitzen von Pasteurpipetten bzw Schmelzpunktr hrchen in die man die L sung eindringen l sst Beim vorsichtigen Aufsetzen der gef llten Kapillare auf die Schicht tritt die L sung wieder aus Der Durchmesser des entstehenden Flecks soll 2 3 mm der Abstand vom unteren Rand der DC Platte 1 cm und von seitlichen Rand 0 5 cm betragen Es ist darauf zu achten dass die Schicht beim Auftragen nicht zerst rt wird Es wird mehrmals aufgetragen wobei man das L sungsmittel immer erst verdunsten l t eventuell mit dem F n leicht erw rmen Vergleichsl sung Neben der Untersuchungsl sung werden auf der gleichen Platte immer Standardsubstanzen oder ein sog Vergleichsgemisch bestehend aus 2 5 Substanzen bekannter Konzentration chromatographiert Diese 11 Vergleichssubstanzen sollen m glichst Verbindungen sein die in der Untersuchungsl sung enthalten sind Zur Herstellung von Vergleichs und Untersuchungsl sungen wird das gleiche L sungsmittel verwendet Entwickeln der Platte Das Entwickeln des Chromatogramms geschieht in einer dicht verschlie baren Kammer Im Praktikum wird hierf r eine 250 mL Feststofflasche verwendet Zur S ttigung der Atmosph re mit den D mpfen der
11. ist der Schmelzpunkt und die Ausbeute zu bestimmen Anschlie end soll es umkristallisiert werden Nach Trocknung wird nochmals der Schmelzpunkt und die Ausbeute bestimmt Ansatz 2 3 g Salicyls ure 5 mL Essigs ureanhydrid Calciumchlorid Schwefels ure Ethanol Durchf hrung Unter Feuchtigkeitsausschluss und R hren werden Salicyls ure und frisch destilliertes Essigs ureanhydrid mit 5 Tropfen konz Schwefels ure versetzt Sobald die exotherme Reaktion nachl sst wird das Heizbad 10 Minuten auf 100 erw rmt Nach dem Abk hlen wird das Reaktionsgemisch zur Hydrolyse des bersch ssigen Acetanhydrids in 50 mL Eiswasser gegossen U U muss unter R hren erw rmt werden Der Ester beginnt w hrend der Abk hlung auszufallen Er wird von der Fl ssigkeit abgetrennt mehrfach mit Wasser gewaschen und dann getrocknet Nachdem vom Rohprodukt der Schmelzpunkt und die Ausbeute bestimmt wurde soll dieser umkristallisiert werden In Vorversuchen ist zun chst das geeignete L sungsmittel zur Umkristallisation zu ermitteln Dazu werden jeweils ca 50 mg eine Spatelspitze der Substanz in Reagenzgl sern mit verschiedenen L sungsmitteln Wasser Ethanol Wasser Ethanol im Verh ltnis 1 1 vorsichtig erhitzt Au erdem wird mit diesen Vorversuchen gekl rt ob unl sliche Bestandteile enthalten sind was bei der Menge des einzusetzenden L sungsmittels zu be r cksichtigen ist Die eigentliche Umkristallisation erfolgt in einer R ckflussapparatur
12. jeweils ein Schild Polycarbonatplatten vor die Apparatur gesetzt werden 0 Bedienungsanleitung f r den Vakuum Controller Im Praktikum soll Regelbetrieb manuell verwendet werden Der Vakuum Controller wird in Verbindung mit der Membranpumpe und dem Rotationverdampfer betrieben und erlaubt den Betrieb des Rotationverdampfers bei einem vorgegebenen konstanten Vakuumintervall Das Ger t verf gt ber mehrere Betriebsarten Manuell Halbautomatisch und Automatisch Die Tasten haben teilweise in Abh ngigkeit von der gew hlten Betriebsart Doppelfunktionen Einmal gespeicherte Werte f r die Arbeitsdr cke p p2 bzw Ap bleiben gespeichert auch wenn der Controller zwischenzeitlich ausgeschaltet wurde Regelbetrieb manuell Der Einsatz erfolgt gew hnlich bei der destillativen Abtrennung bekannter L sungsmittel f r die die Druckparameter auf der beiliegenden Liste vom Hersteller vorgegeben werden 1 Regelbereich einstellen Bei kurzem Tastendruck erscheint in den Anzeigefeldern p bzw p2 der gespeicherte Wert bei l ngerem Tastendruck nach ca 1 sec ndert sich der Druck entsprechend der gedr ckten Taste zu h heren oder tieferen Werten Die Taste vent bt vor allem die Bel ftungsfunktion aus Soll der Wert p erh ht werden ist nach kurzem Dr cken auf die untere Taste innerhalb der Einblendzeit des eingestellten Druckes die Taste vent zu bet tigen Der angezeigte Druckwert kann jetzt h he
13. mobilen Phase Laufmittel wird ein Filterpapier u f rmig an die Innenw nde der Kammer angelegt und mit der mobilen Phase befeuchtet Maximal 2 3 der Kammer sind mit Filterpapier auszukleiden um eine Beobachtung des Chromatogramms zu erm glichen Nach der S ttigung 10 15 min ist die Kammer zum Einstellen des Chroma togramms nur kurz zu ffnen Die Kammer enth lt die mobile Phase mit einer F llh he von 5 8 mm in die die Auftragszone darf nicht eintauchen darf Beim Entwickeln soll die Laufstrecke fast vollst ndig ausgenutzt etwa 1 cm vor dem oberen Rand der Platte werden Das dauert in der Regel 15 30 Minuten wobei das Laufmittel durch Kapillarkr fte entgegen der Schwerkraft in der station ren Phase hoch steigt Wenn das Chromatogramm der Kammer entnommen wird ist unbedingt schnell die H he der Laufstrecke zu markieren Ist der Anteil leicht fl chtiger Komponenten im Flie mittel hoch mu f r jede Trennung um vergleichbare Werte zu erhalten das Flie mittel neu angesetzt werden Mehrfache Nutzung des Flie mittels ist bei Gemischen u erst problematisch Laufmittel Front OOD OE ONIA OS En Tr a ee eh graphietrog mit D nn schichtplatte 20 x 20 cm Re Wert 0 45 Sat 2 a o SE EN Vergleichs Analysen substanzen probe eT REEE ok en 1 2 En TEE 3 TI al nn ee 12 Auswertung Detektion Die entwickelte Platte wird an der Luft getrocknet wobei die Laufmittelfront sofort nach der Entnahme aus der Kamme
14. ure besteht die Gefahr ernster Augensch den R 41 Es gilt Staub nicht einatmen S 22 Ber hrung mit der Haut vermeiden S 24 bei Ber hrung mit den Augen sofort gr ndlich mit Wasser absp len und Arzt konsultieren S 26 Schutzbrille Gesichtsschutz tragen S 39 Essigs ureanhydrid ist entz ndlich R 10 gesundheitssch dlich beim Einatmen und Verschlucken R 20 22 und verursacht Ver tzungen R 34 Es gilt bei Ber hrung mit den Augen sofort gr ndlich mit Wasser absp len und Arzt konsultieren S 26 bei der Arbeit geeignete Schutzkleidung Schutzhandschuhe und Schutzbrille Gesichtsschutz tragen S 36 37 39 bei Unfall oder Unwohlsein sofort Arzt hinzuziehen wenn m glich dieses Etikett vorzeigen S 45 Calciumchlorid reizt die Augen R 36 Es gilt Staub nicht einatmen S 22 Ber hrung mit der Haut vermeiden S 24 Konzentrierte Schwefels ure verursacht schwere Ver tzungen R 35 Es gilt bei Ber hrung mit den Augen sofort gr ndlich mit Wasser absp len und Arzt konsultieren S 26 niemals Wasser hinzugie en S 30 bei Unfall oder Unwohlsein sofort Arzt hinzuziehen wenn m glich dieses Etikett vorzeigen S 45 Ethanol ist leicht entz ndlich R11 Es soll von Z ndquellen ferngehalten werden S16 Entsorgung Reaktionsl sung in Sammelbeh lter f r anorganische S uren Diethylether sowie Petrolether in Sammelbeh lter f r halogenfreie organische L sungsmittel
15. 5 M CH gt OH CHO 206 24 M CH gt OH CHO C2H5 178 72 C14H10 Literatur MS FAB m z 295 100 C H N Analyse ber f r Ci9H2 NO2 C 77 29 H 7 12 N 4 74 gef C 77 45 H 7 32 N 4 35 Literatur 1 H G O Becker u a Organikum 20 bearbeitete und erweiterte Auflage Johann Ambrosius Barth Verlag H thig Gmbh Heidelberg Leipzig 1996 S 506 507 2 D D Perrin W L F Armarego Purification of Laboratory Chemicals 3 ed Pergamon Press Oxford 1988 S 135 3 J Hua J Luo J Qin Y Shen Y Zhang Z Lu J Mater Chem 2002 12 863 867 4 a ChemDAT Die Merck Chemie Datenbank zu finden unter http de chemdat info mda de start html 2006 b Chemikalien Reagenzien Hrsg Merck KGaA Darmstadt 2003 c Aldrich Katalog 2005 2006 d Fluka Riedel de Ha n Laborchemikalien und analytische Reagenzien 2005 2006 e Acros Organics Handbuch f r Feinchemikalien 2006 2007 Anlagen IR Spektrum H NMR Spektrum H H COSY NMR Spektrum BC NMR Spektrum MS EI Spektrum Sicherheit und Entsorgung Subst nz Gefahren R S tze S S tze Entsorgun gl symbol 4 N Ethyl N 2 Nicht vollst ndig untersuchter Stoff L sen in CH gt Cl und hydroxyethyl amino entsorgen in Beh lter benzyltriphenylphos f r halogenhaltige phoniumiodid L sungsmittel Benzol 1 4 dicarbalde Kein gef hrliches Produkt im Sinne der L sen in halogenfreiem
16. Grundpraktikum der Organischen Chemie Methodenkurs und Hinweise zu Labortechniken f r Studierende der Fachrichtung Chemie und Lebensmittelchemie sowie H heres Lehramt Dr Brita Werner Universit t Hamburg Fachbereich Chemie Institut f r Organische Chemie 29 Januar 2007 a 0D U e OON o 11 12 13 Darstellung von Acetylsalicyls ure Einfache und Vakuumdestillation Siedepunkt Brechungsindex D nnschichtchromatographie S ulenchromatographie Eigenschaften organischer Verbindungen Aussch tteln und Umgang mit dem Scheidetrichter Rotationsverdampfer Aufbau eines Protokolls Abgabe der Protokolle IR Spektroskopie Massenspektroskopie NMR Spektroskopie Trocknung von L sungsmiitteln Anlagen Betriebsanweisung zum Umgang mit gef hrlichen Stoffen Schutzma nahmen und Anweisungen zur 1 Hilfe K rzel Schutzma nahmen und Anweisungen zur 1 Hilfe Musterprotokoll Tipps und Hinweise zu den Protokollen Seite 8 10 14 16 22 22 24 24 25 25 26 27 29 30 30 38 1 Darstellung von Acetylsalicyls ure Arbeitstechniken Apparaturen Aufbau einer R ckflussapparatur unter Feuchtigkeitsausschluss Umkristallisation eines Feststoffes Trocknung eines Feststoffes Ausbeutebestimmung Schmelzpunktbestimmung Aufgabe In einer entsprechenden Reaktionsapparatur soll Acetylsalicyls ure hergestellt werden Es ist auf Feuchtigkeitsausschluss zu achten Vom getrockneten Rohprodukt
17. H H 1 1 90 1 78 m 2H H 2 1 54 1 39 m 2H H 3 0 934 t 3H H 4 3 1 2 6 87 Hz Js 7 34 Hz Im NMR Spektrum wurde eindeutig 1 Brombutan nachgewiesen Die vier Signale deuten auf vier chemisch unterschiedliche Gruppen von H Atomen hin H 1 H 2 H 3 H 4 H NMR Signale von CHs und CH2 Gruppen liegen typisch im Bereich zwischen 0 5 und 2 1 ppm H 2 H 3 H 4 Ein elektronenziehender Substituent bewirkt eine Entschirmung und damit eine Verschiebung zu h heren ppm H 1 Durch Kopplung der unterschiedlichen Nachbar H Atome untereinander kommt es zu einer zus tzlichen Aufspaltung H 1 koppeln mit H 2 H 4 koppeln mit H 3 Es ergibt sich jeweils ein Triplett H 3 koppeln mit H 2 und H 4 H 2 koppeln mit H 1 und H 4 Es ergeben sich Multipletts 13 Trocknen von L semittel besondere Hinweise Ethanol Ethanol werden in einem Zweihalskolben mit R ckflussk hler und Trockenrohr Portionsweise mit geschnittenen Natrium 7 g 100 mL versetzt Die Mischung erw rmt sich dabei zum Sieden Die Zugabe soll so erfolgen dass die L sung immer gelinde siedet Nach dem Abklingen der Reaktion wird der absolute Ethanol abdestilliert Auch hier muss ein Trockenrohr aufgesetzt werden Propanol wie Ethanol Methanol Man setzt pro Liter Methanol 5 g Magmesiumsp ne zu l sst nach Abklingen der Reaktion 2 bis 3 Stunden unter R ckfluss kochen und destilliert Wenn der Wassergehalt mehr als 1 betr gt So behandelt man in diesem Fall etwas
18. Stopfen liegt in der hohlen linken Hand Rechtsh nder so dass er jederzeit fest angedr ckt wird Die rechte Hand liegt am Schliffhahn Er wird ebenfalls w hrend des Sch ttelns fest angedr ckt Der Scheidetrichter wird in Schr glage mit Schliffhahn und Auslauf nach oben und vom K rper weggerichtet gehalten Es wird ca dreimal gesch ttelt und dann bel ftet indem der Hahn mit den Fingern der rechten Hand kurz ge ffnet wird Weitere Hinweise Das Aussch tteln einer Substanz aus einer L sung ist mit kleinen Volumina eines L sungsmittels mehrfach zu wiederholen H ufig entsteht w hrend des Aussch ttelns ein berdruck der durch Bel ften ausgeglichen werden muss Scheidetrichter d rfen mit dem Auslauf niemals auf andere Personen gerichtet werden Den Scheidetrichter im passenden Stativring mit geschlossenen Hahn erst f llen wenn darunter ein Becherglas o a steht Nach Bef llen des Scheidetrichters und Verschlie en noch vor dem Sch tteln bel ften Dann kurz und kr ftig durchsch tteln und erneut bel ften Es schlie en sich 2 3 weitere Sch ttelphasen an nach denen jedes Mal bel ftet wird Bevor die eine oder andere Phase entsorgt wird ist zu berlegen welche der beiden aufgrund der Dichte die obere und die untere bildet und in welcher sich die angereicherte Substanz befindet 7 Rotationsverdampfer Vom Assistenten wird die Bedienung des Rotationsverdampfers erleutert Allgemeines Ein Rotationsverdampfer ist
19. WA WA LA WA Nicht Wasser Toluol ADKL BHK WK W LA A PSch 2 4 Dinitrophenylhydrazin AD BK WK W L WEA WSch 30 N K RZEL Allgemeine Schutzma nahmen K rperschutzma nahmen t rverhalten Ma nahmen bei kleinen Unf llen Arbeiten nur unter dem Abzug Atemschutzmaske mit Filter Trockenl scher verwenden Beh lter dicht verschlossen halten Schutzbrille mit Wasser l schen Beh lter k hl aufbewahren a Gesichtsschutzschirm mit fl ssigkeitsbindendem Mittel aufnehmen Aufbewahrung und Verarbeitung an gut bel fteten Ort Sichern mit Schutzscheibe Schutzkittel oder Sch rze fe TPutve scher Beh lter im Gefrierschrank lagern Anweisungen zur Ersten Hilfe bei Hautkontakt bei Augenkontakt bei Inhalation bei Verschlucken K Kontaminierte Kleidung sofort entfernen T gesondert aufgef hrte Augentropfen benutzen L Frischluft zuf hren F gesondert aufgef hrte Fl ssigkeit trinken F mit gesondert aufgef hrter Fl ssigkeit F mit gesondert aufgef hrter Fl ssigkeit waschen Atmung kontrollieren w Wasser trinken waschen oder sp len oder sp len k nstliche Beatmung w mit Wasser sp len waschen oder Ww mit Wasser sp len Arzt aufsuchen A Arzt aufsuchen duschen V Verband als Infektionsschutz erforderlich V Augenverband erforderlich Dexamethason Spray E Erbrechen ausl sen anwenden Arzt aufsuchen Augenarzt aufsuchen Aktivkohleschl m mung trinken 3 MUSTERPROTOKOLL 31 OC Grundpraktrikum Darstellung von E 4 4 N Ethyl
20. bau einer einfachen Destillationsapparatur Aufbau einer Destillationsapparatur zur Destillation unter Unterdruck Vakuum Siedepunktbestimmung Bestimmung des Brechungsindex Aufgabe Ein Dreistoffgemisch ist mit Hilfe von fraktionierter Destillation unter Normaldruck bzw im Vakuum zu trennen Durchf hrung Die konkreten Versuchsbedingungen gibt der Assistent vor Apparatur Es wird eine Gleichstromdestillationsapparatur bestehend aus einem 100 mL Rundkolben als Destillationskolben einem Destillationsaufsatz mit Schliffihermometer Liebigk hler Vorsto und Spinne bzw Kolben als Vorlage aufgebaut Alternativ ist die Verwendung einer Destillationsbr cke m glich In den Destillationskolben soll ein Magnetr hrer gegeben werden Man achte darauf das alle Schliffe sparsam gefettet sind Destillation 40 mL eines Stoffgemisches werden mit Hilfe eines langstieligen Trichters durch den Thermometerstutzen in den Destillationskolben gef llt Anschlie end wird das Gemisch unter R hren mit Hilfe eines lbades zum Sieden erhitzt Tropfgeschwindigkeit soll 1 Tropfen sek sein Sobald die Siedetemperatur einen konstanten Wert angenommen hat wird die Vorlage Vorlauf gewechselt Steigt oder f llt die Temperatur so wird erneut die Vorlage gewechselt Solange das Gemisch destilliert wird die lbadtemperatur konstant gehalten danach wird sie erh ht bis maximal 180 Alle Fraktionen die bis dahin nicht bergegangen sind werden anschlie
21. den kann e H NMR Daten Bei Vorliegen eines Multipletts ist die Angabe eines Bereiches 8 05 7 55 ppm sinnvoll Alle Spektren die im Anhang vorhanden sind insbesondere NMR Spekren sollten bei der Charakterisierung erw hnt werden z B kurz beschreiben welche Informationen aus ihnen erhalten wurden Literaturzitate ganz allgemeine Information Literaturzitate sind im Stil der Angewandten zu schreiben Zeitschriften allgemein A Autor Zeitschrift Jahr Band Seite Seite Beispiel H J Ache Angew Chem 1989 101 1 21 Angew Chem Int Ed Engl 1989 28 1 20 B cher ohne Herausgeber K P C Vollhardt Organische Chemie 1 Aufl VCH Weinheim 1988 S 215 B cher mit Herausgeber T D Tullius in Comprehensive Supramolecular Chemistry Vol 5 Hrsg J L Atwood J E D Davies D D MacNicol F V gtle K S Suslick Pergamon 14 20 41 Oxford 1996 S 317 343 Sonstige Zitate M R Hofmann Dissertation Technische Universit t Berlin 1983 G Maas Methoden Org Chem Houben Weyl 4th ed 1952 Vol E 21 1 1983 S 379 397 S Novick Biography of Rotational Spectra for Weakly Bound Complexes zu finden unter http www wesleyan edu chem faculty novick vdw html 2005 Anlagen Referenzspektren sind sofern vorhanden zu nennen und beizuf gen Ganz besonders wird dem Leser das Verstehen erleichtert wenn die Spektren Banden Peaks Signale beschriftet sind Informatio
22. der L sungsmittel selbst ndig Wenn der Siedepunkt automatisch gefunden wurde kann durch kurzes Dr cken der Auto Taste in den manuellen Regelbetrieb bergegangen werden Regelbetrieb halbautomatisch Wenn die Auto Taste gedr ckt bleibt erfolgt die automatische Regelung der Destillation bis zur Trockene bzw bis zur vollst ndigen Abtrennung der verwendeten L sungsmittel Die zuletzt wirksame Druckeinstellung p und p2 wird bernommen 1 Automatik einschalten LED anzeige an der Auto Taste leuchtet 24 2 Ap wird mit den Tasten p2 eingestellt Kurzes Dr cken auf eine der beiden Tasten zeigt den aktuellen Wert an l ngeres Dr cken ndert den Wert in die gew hlte Richtung 3 Start Dr cken der Start Stop Taste die LED anzeigen ganz links Ist gt Soll an den Auto und Starttasten leuchten 4 Stop Dr cken der Taste Start Stop 5 Bel ften Dr cken derTaste vent 8 Aufbau eines Protokolls Inhalt Kopfteil Reaktionsgleichung Mechanismus Durchf hrung Ausbeute Charakterisierung Literatur Anlagen Entsorgung Hinweise Ein Musterprotokoll sowie Tipps und Hinweise zur Erstellung der Protokolle befinden sich im Anhang 9 Abgabe der Pr parate und Protokolle Die Abgabe der Pr parate erfolgt pers nlich beim diensthabenden Assistenten und in Chemikalienflaschen die beschriftet sind mit Gefahrstoffsymbol Nr und Name des Pr parates Name des Praktikanten Angeh ngt wird der ausgef llte Pr parat
23. e Strukturformeln Interpretation 20 Aldehydnachweis mit Tollensreagenz 1 mL einer 2 igen Silbernitratl sung werden im Reagenzglas mit so viel w ssriger Ammoniakl sung versetzt dass sich zun chst abgeschiedenes Silberhydroxyd gerade aufl st Man gibt dazu 5 Tropfen einer 5 igen Formalinl sung und erw rmt im Wasserbad Dabei scheidet sich an der Wand des Reagenzglases ein Silberspiegel ab Das Reagenzglas kann im Beh lter kontaminiertes Laborglas entsorgt werden Beobachtung Reaktionsgleichung 5 6 Identifizierung einer Carbonylverbindung mit Hilfe des 2 4 Dinitrophenylhydrazons In einem Reagenzglas werden zu einer Spatelspitze ca 0 4 g 2 4 Dinitrophenylhydrazin ca 2 mL konz Schwefels ure und anschlie end unter R hren und Sch tteln ca 3 mL Wasser gegeben Diese warme L sung wird mit 10 mL Ethanol und danach mit einer L sung der Carbonylverbindung in Ethanol 10 bis 20 ig 1 mL versetzt Das Hydrazon f llt in der Regel nach 5 10 Minuten aus Es wird abgesaugt getrocknet und der Schmelzpunkt bestimmt Zur Indentifizierung der Carbonylverbindung soll dieser mit den Literaturwerten verglichen werden Keton Aldehyd Schmelzpunkt des 2 4 Dintrophenylhydrazons Lit werte Hexan 2 on 108 Cyclohexanon 162 Campher 164 Benzophenon 232 Acetophenon 248 Beobachtung Vermutung Reaktionsgleichung 21 Gef hrdung Toluol ist leichtentz ndlich und gesundheit
24. e aus feink rnigem Material bestehende Trennschicht station re Phase befindet sich auf einer Tr gerplatte aus Glas Metall oder einer geeigneten Folie Das zu trennende und in L sung befindlich Gemisch wird punkt oder bandf rmig aufgetragen Start Nach dem Einstellen der Platte oder Folie in eine dichtschlie ende Kammer die ein geeignetes Flie mittel mobile Phase enth lt erfolgt beim kapillaren Ausbreiten des Flie mittels die Auftrennung Die Bedingungen sind so zu w hlen da die Unterschiede zwischen den zu trennenden Substanzen so gro wie m glich sind und eine der zu trennenden Substanzen 2 3 der Laufstrecke zur cklegt Farblose Substanzen m ssen anschlie end sichtbar gemacht werden Nachweis und Detektion Station re Phase Es wird im Grundpraktikum in der Regel handels bliche mit Kieselgel beschichtete Folie verwendet die in Streifen von 4 cm Breite und 9 cm L nge zugeschnitten werden Merck DC Alurolle Kieselgel 60 F254 oder Merck DC Alufolie 20x20 Kieselgel 60 F254 Mobile Phase Die mobile Phase ist das Transportmedium und besteht aus einem reinen oder aus einem Gemisch mehrerer L sungsmittel Sie wandert aufgrund der Kapillarkr fte in der station ren Phase d h der por sen Schicht Als Flie mittel werden in der Regel nur analysenreine L sungsmittel oder falls erforderlich m glichst einfache Gemische mit maximal 3 Komponenten verwendet Auftragen der Substanz Die Substanzen werden als etwa 1
25. eabgabeschein Der Schein wird von Frau Leon gegengezeichnet und gemeinsam mit den entleerten Flaschen zur ckgegeben Er soll an das Protokoll angeh ngt werden 10 IR Spektroskopie Aufgabe Aufnahme eines IR Spektrums von jedem hergestellten Pr parat und Auswertung im Protokoll s Musterprotokoll au erdem immer Abgabe eines Literatur Vergleichsspektrums mit Diskussion Aufnahme der IR Spektren Proben fl ssige 1 Tropfen zwischen NaCI Platten feste 2 mg mit 200 mg KBr verreiben und zur Tablette pressen Ger t FT IR Spektrometer 1720X von der Fa Perkin Elmer zur Verf gung Einweisung am Ger t durch Frau Leon OC R18 Tel 2865 CHARAKTERISTISCHE BANDEN IM IR SPEKTRUM 3300 3500 cm NH schmal 1 3300 3700 cm OH freie 3650 3590 assoziiert 3600 3200 breit gt 3000 cm CH aromatisch olefinisch lt 3000 cm CH ges ttigt 3000 2000 2300 cm SH 2200 cm CN C C 1680 1800 cm C O 1800 cm S urechlorid Anhydrid 1725 1705 ges ttigte Ketone 1740 1720 ges ttigte Aldehyde 1725 1700 ges ttigte Carbons uren 11 Massenspektroskopie Aufgabe Anfertigung eines Massenspekrums von einem hergestellten Pr parat und Auswertung in einem gesonderten Protokoll Probenabgabe ca 20 mg Substanz in Pr parategl schen beschriftet mit Name Substanzname und OC Grundpaktikum Auftragszettel ausf llen El Direkteinlass ankreuzen Abgabe bei Frau Leon OC Raum 18 9
26. ein f r den Laborgebrauch entwickeltes Ger t zum Eindampfen von L sungen d h es dient der Abtrennung von L sungsmitteln Prinzip ist dabei eine D nnschichtverdampfung aus einer rotierenden Blase weshalb auf Siedebeihilfen Siedestein verzichtet werden kann Die Erzeugung des Unterdrucks erfolgt durch eine Membranpumpe Angeschlossen ist ein Vakuum Controller Arbeitsschritte Gefetteten Destillationskolben maximal 2 3 gef llt an den Rotationsverdampfer ansetzten Bel ftungshahn ist geschlossen Wasserk hlung anschalten Rotationsverdampfer anschalten Umdrehungsgeschwindigkeit einstellen Membranpumpe und Vakuum Controller auf die gew nschte Betriebsart einstellen F r das Arbeiten im Grundpraktikum wird Regelbetrieb manuell empfohlen Heizbad unter dem Destillationskolben und auf die gew nschte Temperatur einstellen In der Regel auf 50 600 da f r diese Wasserbadtemperatur die vom Hersteller empfohlenen Vakuumangaben gelten Ausnahme bei der Destillation von Diethylether dann soll die Wasserbadtemperatur nicht 400 berschreiten Nach beendeter Destillation zuerst Heizbad entfernen und abschalten dann am Vakuum Controller Bel ftungsventil vorsichtig ffnen und den Destillationskolben schnell abnehmen 23 Membranpumpe Vakuum Controller abschalten K hlung abdrehen abdestillierte L sungsmittel f r die Wiederverwertung destillieren oder entsorgen Apparatur reinigen Sicherheit Beim Arbeiten muss zum Schutz
27. er sich anschlie enden syn Eliminierung des Triphenylphosphanoxids wird deshalb auch das Olefin in der E und Z Form gebildet Durchf hrung Trocknung von Dichlormethan CH Ch 1 3 L Dichlormethan wurden zwei Tage ber CaCl vorgetrocknet Nach der Filtration wurde unter Stickstoffgasatmosph re drei Tage ber fein gem rsertem CaH refluxiert und schlie lich destilliert Reaktion Die Reaktion wurde unter Stickstoff als Inertgas durchgef hrt um Feuchtigkeit und Luftsau erstoff auszuschlie en 2 07 g 15 4 mmol Benzol 1 4 dicarbaldehyd und 8 80 g 15 5 mmol 4 N Ethyl N 2 hydroxyethyl amino benzyltriphenylphosphoniumiodid wurden bei Raum temperatur in 350 mL absolutem Dichlormethan gel st und ergaben eine klare gr ne L sung Nach erfolgter Zugabe von 4 42 g 39 4 mmol Kalium tert butanolat bei der das Gemisch tr b orange wurde und sich erw rmte sowie einer Spatelspitze 18 Krone 6 wurde das Reak tionsgemisch zwei Stunden an Raumtemperatur ger hrt Anschlie end wurde die nun rot braune Suspension filtriert und das dunkle gelbbraune Filtrat im Vakuum vom L sungsmittel befreit Der braune R ckstand wurde durch S ulenchromatographie an Kieselgel 100 200 m mit einem Laufmittelgemisch von Petrolether 60 90 C und Essigs urethylester im Verh lt nis 1 1 gereinigt und das Produkt als orangene L sung eluiert Nach Entfernen des L sungs mittels wurde ein orangener kristalliner Feststoff erhalten der aus nicht
28. erden ohne dass davon der angestrebte Blocksatz verhindert wird Durch die Tastenkombination strg Minustaste im Ziffernblock l sst sich erzwin gen Die Ausbeute wird mit zwei Stellen angegeben d h in der Regel wird auf ganze Pro zent gerundet 34 und nicht 33 7 Wenn die eigene Ausbeute von der Literaturaus beute stark abweicht soll ein Grund angegeben werden vgl Fehler Abweichungen Unf lle bei der Durchf hrung und ein gut gef hrtes Laborjournal Charakterisierung Zusatzinformationen e Drehwertangabe a Da 13 5 c 0 2 in Aceton Die Angabe einer Einheit ist erforderlich wenn sie von degem g dm f r a und von gem f r c abweicht e Schmelz bzw Siedepunktangabe Schmp Sdp 56 C 20 mbar Die Druckanga be ist unabdingbar wenn nicht Normaldruck vorlag insbesondere bei Vakuum destillationen e R Wert Laufstrecke der Substanz relativ zur Laufstrecke des Laufmittels welche feste Phase verwendet wurde L sungsmittel und Mischungsverh ltnis Nachweis methode e Ein Vergleich von quantitativen Messergebnissen wie Ausbeute Schmelz bzw Siedepunkt und Drehwert mit Literaturdaten muss erfolgen e IR Intensit tsangabe der Banden vs very strong sehr stark s strong stark m medium mittel w weak wenig intensiv vw very weak sehr schwach e H NMR Daten Eine Angabe der Anzahl der Wasserstoffatome pro Signal ist nur sinnvoll wenn die Anzahl aus den Integralen abgeleitet wer
29. ieselgel abgesp lt Wenn die berstehende Fl ssigkeit bis auf 1 0 cm eingezogen ist wird mit einer d nnen Watteschicht gegen Verschwemmung gesichert Probenaufgabe 15 Das zu trennende Gemisch bringt man als m glichst konzentrierte L sung auf die S ule wobei am besten die mo bile Phase als L sungsmittel verwendet wird Aufgetragen wird wenn die ber der S ulenf llung stehende Fl ssigkeit gerade eingezogen ist Die Aufgabe mu sehr gleichm ig erfolgen Man verwendet hierf r eine Pasteurpipette die einige Millimeter ber der Watteschicht an der inneren S ulenwandung angesetzt und w hrend des Ausflie ens im Kreis herumgef hrt wird Auch hierbei ist ein Trockenlaufen durch Schlie en des Hahns unbedingt zu vermeiden Einige Tropfen der Probe werden f r eine sp tere DC Chromatographie in einem Pr parategl schen aufbewahrt Mit sehr wenig Elutionsmittel wird wie oben beschrieben nachgesp lt Elution Die Trennung erfolgt durch Nachwaschen mit einem geeigneten Elutionsmittel Der erste Anteil des Elu tionsmittels wird wie die Probenl sung sehr vorsichtig aufgegeben um ein Verschwemmen der Oberfl che zu vermeiden Weitere Mengen werden in den leeren oberen Teil der S ule eingef llt Wenn eine L sungsmittel schicht vorhanden ist kann dies auch vorsichtig mit dem Becherglas erfolgen Bei der Gradientenelution setzt man L sungsmittelgemische ein deren Zusammensetzung w hrend der Elution ge ndert wird Das Eluat wird
30. immen Hinweis Die s ulenchromatographische Trennung erfordert ein z giges Arbeiten eine gute Vorbereitung und Ar beitsorganisation Besonders im Fall der Gradientenelution sind die einzelnen L sungsmittelgemische vor Beginn der Trennung herzustellen Protokoll Es ist kein gesondertes Protokoll anzufertigen Eine Darstellung zur Durchf hrung und Ergebnissen ist im Protokoll zum Pr parat zu machen 16 5 Eigenschaften organischer Verbindungen Ziel Aufgabe Einige organische Verbindungen sollen hinsichtlich ihrer physikalischen und chemischen Eigenschaften untersucht werden Ziel ist die Herstellung von Zusammenh ngen zwischen Struktur und Eigenschaften 5 1 Brennbarkeit Jeweils ca 0 5 mL Ethanol Toluol Cyclohexan und Dichlormethan werden in einer Prozellanschale angez ndet Es ist die Brennbarkeit und Flammenf rbung zu beobachten Brennbarkeit Flammenf rbung Ethanol Toluol Cyclohexan Dichlormethan 5 2 L slichkeit Dichte Jeweils ca 2 mL Ethylacetat Toluol Diethylether und Dichlormethan werden in Reagenzgl sern mit 5 mL Wasser versetzt Es ist das L severhalten zu beobachten F r den Fall des Nichtl sens ist die untere und obere Phase zu bestimmen Beobachtung Ethylacetat Toluol Diethylether Dichlormethan 17 5 3 Versuche mit unges ttigten Verbindungen Addition von Brom Zu einer L sung des Olefins 3 Tropfen Cyclohexen in 1 mL Chloroform wird eine verd nnte L su
31. in der Vergangenheits sowie passiven Form zu schreiben ich und man sind absolut tabu Der eventuell unbedarfte Leser soll nach vollziehen k nnen was gemacht wurde Insbesondere Beobachtungen z B Farb umschl ge Erw rmung Gasbildung Niederschlagsbildung Eintr bung etc und 7 8 9 39 Reaktionsbedingungen z B Schutzgas Temperatur Reaktionsdauer Druck etc sind zu erw hnen e Die Beschreibung der Apparatur Dreihalskolben R ckflussk hler Tropftrichter etc ist nicht gew nscht es sei denn der Leser br uchte diese Information um nach der Vorschrift die Synthese selber durchf hren zu k nnen Meist handelt es sich dabei um besondere Apparaturen z B Destillation ber eine Kolonne Kugelrohr oder Wasserdampfdestillation Erhitzen im Sandbad evt KPG R h rer etc e Im Protokoll soll das stehen was tats chlich gemacht wurde incl Abweichungen Fehler oder Unf lle Dazu ist es notwendig dass das Laborjournal zuvor gut ge f hrt wurde Ein einfaches Abschreiben der Vorschrift ist nicht Sinn der bung e Ungenaue Angaben sind zu vermeiden z B nicht etwas Natriumchlorid son dern ca XX mg Natriumchlorid oder auch eine Spatelspitze Natriumchlorid nicht ber Nacht sondern f r XX Stunden e Den Text bitte in grammatikalisch richtigen ganzen S tzen verfassen und auf Abk rzungen z B min h NaCl m glichst verzichten Signifikante S
32. je nach Trennbedingungen in Fraktionen von 5 bis 10 mL in Reagenzgl sern aufgefangen Nachweis der eluierten Substanzen in den Fraktionen Detektion Der Nachweis der eluierten Substanzen in den einzelnen Fraktionen geschieht durch geeignete analytische Methoden in der Regel jedoch d nnschichtchromatographisch Von jeder Fraktion wird ein D nnschichtchromatogramm angefertigt um einen berblick ber die Trennung zu bekommen Als Vergleich dient das Ausgangsmaterial oder wenn m glich die reine zu isolierende Substanz Als L sungsmittel f r die Standardverbindungen ist in den meisten F llen Dichlormethan gut geeignet Die Konzentration sollte ca 0 5 bzw 0 2 betragen jedoch ist die optimale Auftragsmenge die f r eine sehr gute Trennung Voraussetzung ist durch Versuche unbedingt zu ermitteln Nach der Entwicklung der Chromatogramme und Sichtbarmachung der einzelnen Substanzen wird anhand der Chromatogramme festgestellt wie die Trennung verlaufen ist Hierbei ist folgendes zu betrachten In welcher Fraktion ist die gesuchte Substanz enthalten ist sie schon vollst ndig eluiert und kann eine weitere Elution unterbleiben In welchen Fraktionen ist die Substanz ohne Begleitstoffe enthalten Die reinen Fraktionen werden in einem ausgewogenen Rundkolben vereinigt und schonend eingeengt Das Pro dukt ist auszuwiegen und durch ein IR Spektrum zu charakterisieren Bei festen Substanzen ist au erdem der Schmelzpunkt zu best
33. mit dem menschlichen K rper vermeiden leichtentz ndlich F von offenen Flammen W rmequellen und Funken fernhalten Entsorgung R ckgabe in ein gesondertes entsprechend beschriftetes Gef Kurzprotokoll 1 Fraktion Siedetemperatur Druck Brechungsindex Ausbeute in mL Identifizierung anhand physikalischer Konstanten 2 Fraktion Siedetemperatur Druck Brechungsindex Ausbeute in mL Identifizierung anhand physikalischer Konstanten 3 Fraktion Siedetemperatur Druck Brechungsindex Ausbeute in mL Identifizierung anhand physikalischer Konstanten Evtl Zwischenfraktionen Siedetemperatur Druck Ausbeute in mL Siedetemperatur Druck Ausbeute in mL Siedetemperatur Druck Ausbeute in mL 10 3 D nnschichtchromatographie Arbeitstechniken Apparaturen Durchf hrung einer D nnschichtchrommatographie Bestimmung von Rr Werten Aufgabe Ein Farbstoff aus mehreren Komponenten ist d nnschichtchromatographisch zu trennen Es sollen die Rr Werte in Abh ngigkeit vom L sungsmittel bzw L sungsmittelgemisches bestimmt werden Allgemeines Die D nnschicht Chromatographie DC ist ein physikalisch chemisches Trennverfahren das in der Regel zur Identifizierung von Substanzen der berpr fung der Reinheit der Produkte oder der Beobachtung des Reakti onsverlaufs dient Die d nn
34. ne Form die Flash Chromatographie werden heute f r die routinem ige Trennung und Reinigung von Reaktionsprodukten allgemein eingesetzt Sie sollen im Grundprak tikum erste Erfahrungen mit dieser Methode sammeln die mit zu den wichtigsten Fertigkeiten eines organischen Chemikers geh rt Die Trennung eines Substanzgemisches mittels der S ulenchromatographie beruht auf seiner multiplikativen Adsorption auf einer geeigneten station ren Phase in der Regel Aluminiumoxid oder Kieselgel die sich in einem senkrecht stehenden Glasrohr befindet und die unter dem Einflu der Schwerkraft von einem L sungsmittel mobile Phase durchstr mt wird Im Idealfall findet man jede einzelne Substanz in einer schmalen Adsorptionszone die durch weiteres Elutionsmittel aus der S ule herausgewaschen wird Praktisch bedeutet dies die zu trennenden oder reinigenden Stoffe werden oben auf die S ulenf llung gegeben und mit einem L sungsmittel durch die S ule transportiert wobei sie je nach ihrer Affinit t zur station ren Phase und zum L sungsmittel verschieden schnell wandern N here Erl uterungen finden Sie in der Literatur wobei die 20 Auflage des Organikums 1996 S 70 72 eine kurze und gute Einf hrung bietet Arbeitsschritte Vorbereitung und Bef llen der Trenns ule L sen und Auftragen des Substanzgemisches Elution Nachweis der eluierten Substanzen in den Fraktionen Abtrennung des Laufmittels F llen der Trenns ule Im Praktik
35. nen zu Sicherheit und Entsorgung sind f r alle bei der Reaktion vorkom menden Stoffe also auch L sungsmittel Nebenprodukte gegebenenfalls Zwischen produkte anzugeben Allgemeine Tipps Schreiben Sie das Protokoll so dass ein Leser der sich nicht mit der Materie befasst hat verstehen und nachvollziehen kann was gemacht wurde Bestenfalls kann der Leser das Pr parat anhand des Protokolls selber synthetisieren Dennoch keine Romane schreiben In der K rze liegt die W rze
36. ng der Flie Bmittelfront vom Startpunkt Die R Werte liegen auf Grund der Definition zwischen 0 00 und 1 00 und sind nur auf zwei Stellen nach dem Komma zu bestimmen Der R Wert ist eine f r jede Verbindung charakteristische Gr e der aber sehr durch die Chromatogaphiebedingungen variieren kann Aus diesem Grund ist immer eine Chromatogaphie der Vergleichsl sung erforderlich Durchf hrung Ein Farbstoffgemisch aus zwei Substanzen ist chromatographisch zu trennen Zur Identifizierung werden Vergleichsubstanzen Chlorphenolrot Methylorange Methylrot Sudangelb und p Xylenolblau jeweils 1 ige Aceton L sung ebenfalls aufgetragen Als Laufmittel werden a Dichlormethan b Ethanol und c ein Gemisch aus Dichlormethan und Ethanol im Verh ltnis 3 1 verwendet Gef hrdung Dichlormethan steht im Verdacht auf krebserzeugende Wirkung Ethanol ist leichtentz ndlich Entsorgung In die Sammelbeh lter f r organische L sungsmittel Dichlormethan in den f r halogenhaltige alle anderen in den f r halogenfreie Kurzprotokoll Skizze der DC in 13 a Dichlormethan Ethanol Gemisch aus Dichlormethan und Ethanol Angabe der R Werte Laufmittel Rr Stoff 1 Rr Stoff 2 Interpretation 14 4 S ulenchromatographie Aufgabe Im Rahmen der Anfertigung eines Pr parates ist ein Substanzgemisch s ulenchromatographisch zu trennen Allgemeines S ulenchromatographie und vor allem ihre moder
37. ng von Brom im gleichen L sungsmittel gegeben Beobachtung Reaktionsgleichung 18 5 4 Bestimmung der Basizit t von organischen Stickstoffverbindungen Von drei in Wasser gel sten organischen Stickstoffverbindungen Cyclohexylamin m Toluidin Acetamid deren Konzentration exakt 0 1 molL betr gt soll durch Messung des pH Wertes mit Spezialindikatorpapier der pKs Wert d h ihre Basizit t bestimmt und verglichen werden Vgl pKs NH3 4 7 Durchf hrung Zun chst wird je ein Tropfen der ausstehenden L sungen auf Universalindikatorpapier aufgebracht und so der pH Wert grob ermittelt Danach soll der pH Wert mit T pfelindikatorpapier genauer ermittelt werden pH Papier immer vorher mit dest Wasser anfeuchten Beobachtung Strukturformel pH Wert pKs Wert Cyclohexylamin m Toluidin Acetamid Berechnung Interpretation 19 5 5 Redoxverhalten organischer Sauerstoffverbindungen Redoxverhalten von D Glucose D Fructose und Saccharose verglichen werden Durchf hrung in drei Reagenzgl sern werden jeweils 3 Tropfen Fehling Kupferlisulfat in Wasser und Fehling Il Natriumtartrat in NaOH L sung vereinigt Dazu werden jeweils eine Spatelspitze D Glucose D Fructose und Saccarose gegeben und im Wasserbad erw rmt Bei positivem Nachweis bildet sich ein roter Niederschlag Beobachtung Glucose Fructose Saccarose Reaktionsgleichung mit Glucose Strukturformeln Reaktionsgleichung mit Fructos
38. ollst ndig auszuf llen Die Angaben zum L sungsmittel und die Mengenangabe sind unbedingt erforderlich Abgabe der Proben R hrchen mit durchgesteckten Auftragsschein im Raum 00021 Keller in dem St nder 400 MHz Ger t H NMR Hinweise Die Mindestl nge der NMR R hrchen ohne Kappe betr gt 16 cm Es d rfen keine abgebrochenen R hrchen benutzt werden Nach Entsorgung der L sung in den Beh lter mit halogenhaltigen organischen L sungsmitteln kann das NMR R hrchen gut mit einem Pfeifenreiniger ges ubert und anschlie end im Trockenschrank bei 80 getrocknet werden Die Kuns tstoffkappe nicht im Trockenschrank trocknen Gef hrdung Tetramethylsilan ist leicht entz ndlich F von offenen Flammen W rmequellen und Funken fern halten Deuterochloroform und Chloroform sind gesundheitssch dlich Xn Kontakt mit dem menschlichen K rper und Einatmen der D mpfe vermeiden Spektren und Auswertung Sie erhalten die Spektren im Raum 021 bzw drucken sie sich selbst aus Die Einweisung am Rechner im Grundpraktikum erfolgt durch den diensthabenden Assistenten Protokoll Auswertung des Spektrums Angabe der Messbedingungen des Messger tes Auflistung der Ergebnisse Signal Zuordnung Verschiebung Verh ltnis der Integrale Aufspaltung durch Kopplung Kopplungskonstanten zur Zuordnung Strukturformel durchnummerieren Erkl rung 27 Beispiel 1 Brombutan H NMR 400 MHz CDCl TMS Standard ppm 3 410 t 2
39. r gestellt werden Bei nderung von p bleibt der gespeicherte Abstand zu p2 konstant kann aber durch Dr cken auf p2 ge ndert werden 2 Start Kurzes Dr cken der Start Stop Taste Die LED Anzeigen ganz links und am Startknopf leuchten Wenn der Sollwert p1 erreicht ist erlischt die LED Anzeige ganz links wenn der Sollwert p2 erreicht ist wird wieder auf p gepumpt und die LED Anzeige ganz links leuchtet Zweckm ige Wahl von Ar bei h her siedenden L sungsmitteln H2O Toluol wird ein Bereich von 5 mbar bei leicht siedenden L sungsmitteln Dichlormethan Aceton ein Bereich von 30 50 mbar empfohlen Diethylether sollte am Rotationsverdampfer bei 900 950 mbar abdestilliert werden F r alle diese Werte gilt eine Wasserbadtemperatur von 60 700 3 Stop Dr cken der Start Stop Taste 4 Bel ften Dr cken des Knopfes vent Dauerpumpen In dieser Betriebsart wird bis zum Enddruck der Pumpe abgepumpt z B Abpumpen bis zur Trockene Dieser Betriebsart wird nur in ganz seltenen F llen angewendet 1 Start Dr cken der Taste Start Stop bis LED anzeige an der Starttaste blinkt die LED anzeige ganz links leuchtet In dieser Betriebsart werden die aktuellen von p und p2 erreichten Werte bernommen 2 Stop Dr cken der Taste Start Stop 3 Bel ften Dr cken der Taste vent Regelbetrieb halbautomatisch und automatisch In dieser Betriebsart ermittelt der Vakuum Controller den optimalen Druck f r die Destillation
40. r markiert wird Zum Erkennen farbloser Substanzen auf dem Chromatogramm gibt es verschiedene M glichkeiten Am einfachsten gelingt der Nachweis mit der UV Lampe wenn die Verbindungen eine Eigenabsorption im kurzwelligen UV Bereich haben Ist dies nicht der Fall so mu eine Sichtbarmachung aufgrund einer chemischen Reaktion eventuell mit anschlie endem Erhitzen versucht werden Als allgemeines Nachweisreagenz gibt Joddampf mit vielen organische Substanzen braune Flecken Hierf r legt man das Chromatogramm in eine 250 mL Feststofflasche die einige Jodkristalle enth lt Die Substanzen erscheinen als braune Flecken Au erdem gibt es verschiedene gruppenspezifische Nachweisreagenzien in die das Chromatogramm kurz getaucht werden kann F r ein Tauchbad wird eine 250 mL Feststoffflasche verwendet 2 4 Dintrophenylhydrazin Tauchbad 7 g 2 4 Dintrophenylhydrazin in einer Mischung aus 175 mL Methanol 56 mL Wasser und 35 mL konz Schwefels ure gel st Ethanol soll deshalb nicht als L sungsmittel verwendet werden da es mit Aceton verg llt ist Ninhydrin Tauchbad 0 75 g Ninhydrin werden in einem Gemisch aus 240 mL Butanol und 7 mL Eiseesig gel st Die Lage der Substanzflecken nach der Entwicklung wird durch den R Wert eng ratio of fronts charakterisiert Er ist das Verh ltnis der von der Substanz zur ckgelegten Strecke zu der Strecke zwischen Startlinie und Front der mobilen Phase Entfernung des Fleckmittelpunkts vom Startpunkt Entfernu
41. sigs ure 60 05 10 118 C 10 35 23 2 26 36 37 39 45 Ethanol 46 07 114 5 78 3 F 11 16 Ethylacetat 88 10 83 77 F Xi 11 36 66 67 16 23 36 Essigester Methanol 32 04 98 64 5 T F 11 23 24 25 2 7 16 36 37 45 39 23 25 Natriumsulfat 142 04 888 Petrolether gt 80 50 70 F Xn N 11 38 48 20 51 53 9 16 33 36 37 61 62 62 65 67 Schwefels ure konz 98 08 15 310 C 35 26 30 45 Toluol 92 14 95 111 Xn F 11 20 16 25 29 33 2 4 203 Xn E 2 22 36 38 35 Dinitrophenylhydrazin 2 Schutzma nahmen sowie Anweisungen zur Ersten Hilfe und Verhaltensregeln bei kleinen Unf llen Substanz Schutzma Schutzm Anweisun Anweisun Anweisun Anweisun St rverhalten bei kleinen Bnahmen a nahme gen zur genzur genzur genzur Unf llen en nen ersten ersten ersten ersten allgemein K rper Hilfe Hilfe Hilfe Hilfe Haut Augen Inhalation Verschluc ken Benzoes ure ADL BHK KW WA L WA WCSchP Brom ATDKL BHK WK WA LA WA Butanol ADL BK WK WA L AW WCSchP Chloroform ADKL BHK WK WA LBA FKA Cyclohexan ADKL BHK WK WA L FA CSchP Dichlormethan ADKL BHK KW WA L WKA CSchP Diethylether ADL BHK WK WA LB FA PSch Essigs ure gt 90 AD BHK KFW WA LA WA TCW Ethanol DKL BHK WK WA L WA CSchP Ethylacetat ADL BKH WK WA LB WKFA PSch Methanol ADL BHK WK WA LB EFA PSch Natriumsulfat AD BK W W L Petrolether ADL BHK WK WA LA A PSch Schwefels ure konz ADL BHK
42. ssch dlich beim Einatmen Ethylacetat ist leichtentz ndlich reizt die Augen Wiederholter Kontakt kann zu spr der oder rissiger Haut f hren D mpfe k nnen Schl frigkeit und Benommenheit verursachen Petrolether ist leichtentz ndlich reizt die Haut Es besteht die Gefahr ernster Gesundheitssch den bei l ngerer Exposition durch Einatmen Es kann m glicherweise die Fortpflanzungsf higkeit beeintr chtigen beim Verschlucken Lungensch den verursachen Die D mpfe k nnen zu Schl frigkeit und Benommenheit f hren Ethanol ist leichtentz ndlich Methylenchlorid steht im Verdacht auf krebserzeugende Wirkung Cyclohexan ist leichtentz ndlich reizt die Haut Verschlucken kann zu Lungensch den f hren D mpfe k nnen Schl frigkeit und Benommenheit verursachen Chloroform ist gesundheitssch dlich beim Verschlucken Es reizt die Haut und steht im Verdacht auf krebserzeugende Wirkung Es besteht die Gefahr ernster Gesundheitssch den bei l ngerer Exposition durch Einatmen und durch Verschlucken 2 4 Dintrophenylhydrazin ist durch Schlag Reibung Feuer oder andere Z ndquellen explosionsgef hrlich Es ist gesundheitssch dlich beim Verschlucken und reizt die Augen und Haut Entsorgung in die entsprechenden Beh lter halogenfreie und halogenhaltige organische L semittel 22 6 Aussch tteln und Umgang mit dem Scheidetrichter Aufgabe Das Aussch tteln soll mit dem Scheidetrichter und aufgesetztem Stopfen blind ge bt werden Der
43. t Hilfe der Natriumpresse eingepresst wird getrocknet Intensivere Methode Der mit KOH Pl ttchen vorgetrocknete Ether wird in einer R ckflussapparatur mit Natrium 10 g l und Benzophenon 2 g l solange unter R ckfluss erhitzt bis die tiefblaue Farbe des Ketyl Radikalanions bestehen bleibt Zur Abtrennung des absoluten Ethers wird er abdestilliert nicht vollst ndig Natriumreste werden durch vorsichtige Zugabe von Ethanol vernichten Tetrahydrofuran THF Tetrahydrofuran wird ber Natriumdraht oder festem KOH aufbewahrt Die Reinigung und Trocknung erfolgt wie beim Diethylether Bzw 2 Absolutes Tetrahydrofuran wird durch mehrt giges Stehen ber Kaliumhydroxid Abfiltrieren und Destillieren erhalten und ber festem Kaliumhydroxid oder Molekularsieb 4A aufbewahrt 1 BETRIEBSANWEISUNG 1 Umgang mit gef hrlichen Stoffen 29 Molmasse Schmelz Siede Gefahrstoff Substanz g mol punkt punkt symbol R S tze S S tze Benzoes ure 122 12 121 123 249 Xn 22 36 24 Brom 159 82 7 58 8 T C N 26 35 50 7 9 26 45 61 Butanol 74 12 89 118 Xn 10 22 37 38 41 67 7 9 13 26 37 39 46 Dimethylsulfoxid 78 13 18 189 Xi 36 38 26 Chloroform 119 38 63 61 Xn 22 38 40 48 20 22 36 37 Cyclohexan 84 16 6 81 F Xn N 11 38 50 53 65 67 9 16 33 60 61 62 Dichlormethan 84 93 95 40 Xn 40 23 2 24 25 36 37 Diethylether 74 12 116 34 F Xn 12 19 22 66 9 16 29 33 Es
44. tellen Die jeweils letzte angegebene Stelle ist die fehlerbehaftete Stelle Bei Rechnungen kann die Genauigkeit der Werte nicht zunehmen aus z B 23 5 g drei signifikante Stellen k nnen nicht 0 023470 mol f nf signifikante Stellen die Null en vorher z hlen nicht mit berechnet werden sondern nur 0 0235 mol richtig runden F r detailliertere Informationen siehe Mortimer Das Basiswissen der Chemie Kapitel Einf hrung Einheiten e Ma zahl und Ma einheit sind durch ein Leerzeichen zu trennen also 2 05 g und nicht 2 05g C ist eine Einheit und wird ebenfalls abgetrennt 13 C ist keine Einheit und wird demzufolge auch nicht abgetrennt 32 e Ma zahl und Ma einheit sollen jedoch nicht durch einen Zeilenumbruch getrennt werden Dies l sst sich durch das gesch tzte Leerzeichen Tastenkombination strg shift space erreichen dann wird 45 C als eine zusammenh ngende nicht trennbare Zeichenfolge behandelt e Liter wird mit L abgek rzt und nicht mit l Das kleine 1 l sst sich sonst zu leicht mit einer l eins verwechseln also L und mL Tipp Zeilenumbruch erzwingen Falls vom Textverarbeitungsprogramm bei einem chemischen Namen z B 4 N durch einen Zeilenumbruch vom Rest des Namens Ethyl N getrennt wird kann vor dem Begriff durch die Tastenkombination strg enter ein Zeilenumbruch erzwun 10 11 12 13 40 gen w
45. tenzahlen zu versehen unten rechts 4 DECKBLATT Das Deckblatt braucht nur beim ersten Mal beiliegen Allerdings muss im Protokoll in der Kopfzeile jeweils die Nummer der aktuellen Version angegeben werden 1 Im Titel systematischen IUPAC Namen angeben 2 F r jede berarbeitete korrigierte Version die jeweils aktuelle Nummer angeben 3 Vollst ndige und ausgeglichene Reaktionsgleichung St chiometrie mit Summen formeln Molmassen und Substanznamen In der Reaktionsgleichung sollte nur eine Schriftart verwendet werden vorzugsweise Arial bitte insbesondere bei nachtr glich eingef gten Textfeldern beachten 4 Den Mechanismus detailliert mit allen Zwischenstufen beschreiben wobei Strukturen und Pfeile wichtiger sind als lange schriftliche Abhandlungen Im Text soll Fachtermi nologie verwendet und die Reaktion klassifiziert Sn2 Ar werden Bei komplizier teren Mechanismen sollen die wesentlichen Zusammenh nge erl utert werden 5 Zitate Zitate werden mit 1 beginnend durchnummeriert und in eckigen Klammern hochge stellt Insbesondere ist zu beachten dass sich bei nachtr glichen nderungen im Pro tokoll die Reihenfolge der zitierten Literatur ndern kann Literaturzitate sollen dort eingef gt werden wo sie inhaltlich genannt werden und nicht pauschal wie z B in der berschrift Bei mehreren Zitaten werden diese in eine Klammer geschrieben z B 73 59120 17 6 Durchf hrung e Die Durchf hrung ist
46. um wird im allgemeinen eine Trenns ule mit Hahn von 18 cm L nge und 1 4 cm Durchmesser verwendet Vor dem F llen mit der station ren Phase wird in das konische Ende eine Watteschicht gegeben Das Kieselgel station ren Phase wird mit soviel ca zwei bis dreifache Menge L sungsmittel mobile Phase versetzt dass eine d nnfl ssige gie f higen Suspension entsteht Zum Abklingen der W rmet nung l sst man die Suspension 15 Minuten stehen Danach wird sie durch einen Trichter in die S ule gegossen m glichst in einem Gu und bei geschlossenem Hahn Die F llung wird am gleichm igsten wenn die Suspension genau in die Mitte des S ulenquerschnitts auftrifft Das berstehende Suspensionsmittel wird abgelassen und in einem Reagenz oder Becherglas aufgefangen es kann weiter als Laufmittel verwendet werden Die S ule muss blasenfrei bef llt werden Um evtl Luftblasen zum Aufsteigen zu bringen wird mit einem Korkring seitlich an die S ule geklopft Man beginnt am unteren Ende und geht langsam aufw rts wobei man von verschiedenen Seiten klopft Das sich absetzende Sorbens mu stets mit Elutionsmittel bedeckt sein d h der Fl ssigkeits spiegel darf nicht unter die Oberfl che sinken Ein sogenanntes Trockenlaufen ist durch Schlie en des Hahns zu vermeiden Luftkanalbildung Eventuell Elutionsmittel vorsichtig mit einer Pasteurpipette nachf llen Mit dem gleichen Elutionsmittel und einer Pasteurpipette wird das an der Wand haftende K
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