QUANTA FlashTM h-tTG IgA
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1. o 2 Conserve os calibradores por abrir a 2 8 C Nao congele Os reagentes permanecem estaveis ate a data de validade indicada quando armazenados e manipulados conforme descrito no protocolo Devem eliminar se os calibradores abertos apos 8 horas Procedimento 1 Tem de calibrar se cada lote do cartucho de reagente novo antes da primeira utiliza o O software nao permitira utilizar um lote novo ate que seja calibrado Antes da utiliza o tem de misturar se suavemente cada calibrador para garantir a homogeneidade Evite a forma o de espuma uma vez que as bolhas podem interferir com a dete o do n vel do l quido dos instrumentos Destape cada tubo calibrador e coloque ambos num rack de amostras com os c digos de barras virados para a frente atrav s dos espa os no rack Coloque o rack de amostras no carrossel de amostras no instrumento BIO FLASH e feche a porta O instrumento ler os c digos de barras nos tubos calibradores e identificar o cartucho de reagente necess rio Consulte o manual do operador fornecido com o sistema BIO FLASH relativamente a instru es de funcionamento pormenorizadas do analisador quimioluminescente BIO FLASH e do software BIO FLASH O instrumento testar ent o cada calibrador em triplicado Ap s os Calibradores terem sido testados o software exigir a valida o da calibra o A partir do ecr Instrument Summary clique no bot o de seta Choose more options Ctrl M V2. 2 Consulte a sec o intitulada Calibradores Sm 701121 QUANTA Flash deste Folheto de Instru es relativamente a instru es pormenorizadas sobre como calibrar o cartucho de reagente 3 Quando a calibra o tiver sido validada o lote do cartucho de reagente onde se realizou a calibra o est pronto a ser utilizado Programa o e realiza o de testes 1 Pressione o bot o Worklist na parte superior do ecr e selecione o separador Racks no fundo 2 Selecione o rack de amostra a utilizar real ando o rack no ecr ou digitalizando o c digo de barras com o leitor de c digo de barras port til Digitalize ou escreva o nome da amostra selecione o tipo de amostra o tipo de recipiente tubo ta a e selecione Sm a partir do painel do ensaio Repita estes passos para todas as amostras 3 Carregue as amostras nas posi es selecionadas no rack de amostras e carregue o rack no carrossel de amostras do instrumento 4 Se todos os materiais necess rios estiverem colocados no instrumento o cone iniciar estar dispon vel a verde na parte superior do ecr Pressione o cone Start F4 para iniciar o ensaio Controlo de qualidade Os Controlos QUANTA Flash Sm vendidos em separado INOVA Numero de Item 701122 cont m os Controlos h Sm Positivos e Negativos Consulte a sec o intitulada Controls 701122 QUANTA Flash Sm do Folheto de Instru es relativamente a instru es pormenorizadas sobre como introduzir todas
3. Selecione Calibration Ctrl F3 Na janela Calibration realce o ensaio pretendido e clique em Details Na nova janela Calibration Details selecione a calibra o que acabou de ser executada A Curva Modelo aparece como uma linha tracejada ao passo que a Curva de Trabalho aparece como uma linha cont nua Se os resultados da calibra o forem v lidos aparecer um bot o de valida o no canto inferior esquerdo do ecr Clique no bot o Validate Calibration Quando a calibra o tiver sido validada o lote do cartucho de reagente onde se realizou a calibra o esta pronto a ser utilizado Recomenda se testar os Controlos QUANTA Sm vendidos separadamente numero de pe a 701122 ap s a calibra o de um lote de cartucho de reagente Rastreabilidade N o est dispon vel soro de refer ncia internacional para anticorpos anti Sm que permita a normaliza o de ensaios de anticorpo anti Sm Em vez deste testou se o soro de refer ncia dos Centers for Disease Control and Prevention para anticorpos anti Sm 182076 ANA 5 anti Sm e determinou se uma concentra o de gt 693 5 UQ Limita es Estes calibradores est o concebidos para 4 calibra es O tempo total em que os tubos calibradores podem estar destapados dentro do instrumento de 8 horas Se se deixarem os calibradores destapados dentro do instrumento durante mais tempo dever se o eliminar Utilizar os mesmos tubos calibradores durante mais de 4 calibra es e o
4. Este considerado um resultado positivo O software BIO FLASH disponibiliza uma op o de Novo teste autom tico Se esta op o estiver selecionada o instrumento retestar automaticamente qualquer amostra que tenha um resultado gt 693 5 UQ diluindo a ainda por um fator de 10 e calcular a UQ real utilizando este fator de dilui o adicional Interpreta o dos resultados O Ensaio QUANTA Flash tem capacidade para detetar pequenas diferen as em popula es de doentes Cada laborat rio aconselhado a verificar o intervalo de refer ncia fornecido pelo fabricante e pode estabelecer o seu pr prio intervalo normal baseando se nos seus pr prios controlos e na popula o de doentes de acordo com os procedimentos estabelecidos pelo mesmo Sugere se que os resultados apresentados pelo laborat rio incluam a declara o Obtiveram se os seguintes resultados com o imunoensaio quimioluminescente INOVA QUANTA Flash Sm Os valores obtidos com m todos de ensaio de diferentes fabricantes n o podem ser comparados A magnitude dos n veis de autoanticorpos descritos n o pode ser sempre correlacionada com um t tulo final Limita es do procedimento 1 Nem todos os doentes com LES sao positivos para anti Sm 2 Os resultados deste ensaio devem ser utilizados em conjunto com as conclus es cl nicas e outros testes serol gicos 3 A ressuspensao inadequada das esferas revestidas Sm pode apresentar valores inferiores aos de uma r
5. m de anti dsDNA Os anticorpos Sm foram inclu dos nos crit rios do American College of Rheumatology para a classifica o de LES A rea o imune anti Sm consiste em m ltiplos anticorpos que se ligam a m ltiplos antigenios proteicos Assim o anticorpo anti Sm na verdade mais bem descrito como um sistema de anticorpos Os principais autoantig nios no LES s o as prote nas Sm D e B embora a presen a de anti Sm D seja considerada a especificidade mais importante Utilizou se uma variedade de m todos incluindo dupla difus o de Ouchterlony e aglutina o passiva para detetar anticorpos contra RNP Tamb m se desenvolveram ensaios ELISA teis clinicamente para detetar anticorpos anti Sm O QUANTA Flash Sm um imunoensaio quimioluminescente altamente sens vel para dete o e medi o de anticorpos anti Sm que fornece resultados semiquantitativos sobre uma vasta gama de medi o anal tica com a conveni ncia do acesso aleat rio carregamento de amostra cont nuo e tempo de ensaio curto Princ pios do Procedimento O antigenio Sm purificado nativo est revestido por esferas paramagn ticas que est o guardadas no cartucho de reagente em condi es que conservam o antig nio no seu estado reativo Quando o cartucho do ensaio estiver pronto a ser utilizado pela primeira vez adiciona se uma solu o tamp o ao tubo que cont m as esferas conservadas e as esferas s o misturadas com o tamp o O cartucho de reagente en
6. no entanto os utilizadores tamb m dever o considerar os requisitos regulamentares locais nacionais Antes da utiliza o tem de misturar se suavemente cada controlo para garantir a homogeneidade Evite a forma o de espuma uma vez que as bolhas podem interferir com a dete o do n vel do l quido dos instrumentos Destape cada tubo de controlo e coloque ambos num rack de amostras com os c digos de barras virados para a frente atrav s dos espa os no rack Coloque o rack de amostras no carrossel de amostras no instrumento BIO FLASH e feche a porta O instrumento ler os c digos de barras nos tubos de controlo e identificar o cartucho de reagente necess rio Consulte o manual do operador fornecido com o sistema BIO FLASH relativamente a instru es de funcionamento pormenorizadas do analisador quimioluminescente BIO FLASH e do software BIO FLASH Rastreabilidade N o est dispon vel soro de refer ncia internacional para anticorpos anti Sm que permita a normaliza o de ensaios de anticorpo anti Sm Em vez deste testou se o soro de refer ncia dos Centers for Disease Control and Prevention para anticorpos anti Sm 182076 ANA 5 anti Sm e determinou se uma concentra o de gt 693 5 UQ Limita es Estes controlos est o concebidos para 15 utiliza es A etiqueta de cada tubo de controlo tem uma fila de 15 caixas que podem retirar se para verificar o numero de utiliza es O tempo total em que os tubos de controlo pod
7. as informa es necess rias de cada controlo no software bem como sobre o funcionamento dos controlos Recomenda se que se testem os controlos pelo menos uma vez nos dias em que se utiliza o ensaio no entanto os utilizadores tamb m dever o considerar os requisitos regulamentares locais nacionais C lculo dos resultados Para cada lote novo de QUANTA Flash Sm cria se na INOVA uma Curva Modelo de cinco pontos Esta curva log stica de quatro par metros est codificada no c digo de barras de cada cartucho de reagente Quando um cartucho de reagente tiver sido calibrado a curva de trabalho espec fica do instrumento ser utilizada para converter as ULR em UQ Pode ent o classificar se a reatividade do anticorpo ao Sm de acordo com a tabela abaixo Reatividade UQ Negativo lt 20 Positivo gt 20 A reatividade em UQ est relacionada diretamente com o t tulo do autoanticorpo na amostra do doente Aumentos e diminui es nas concentra es do autoanticorpo no doente refletir se o numa subida ou descida correspondente em UQ proporcionalmente quantidade de anticorpo O intervalo de medi o anal tica IMA do ensaio de 3 3 UQ para 693 5 UQ Se o resultado de um doente for inferior a 3 3 UQ ent o o sistema BIO FLASH indic lo como lt 3 3 UQ Visto ser inferior a 20 UQ considera se um resultado negativo Se o resultado de um doente for superior a 693 5 UQ ent o o sistema BIO FLASH indica lo a como gt 693 5 UQ
8. e deu resultados negativos para m todos aprovados pela FDA para anticorpos de HIV HBsAg e HCV Contudo nenhum teste pode garantir com certeza absoluta a aus ncia de HIV HBV HCV ou outros agentes infeciosos Portanto devem manipular se os Controlos QUANTA Flash Sm como se fossem qualquer material potencialmente infecioso 2 Usar equipamento de prote o individual apropriado para trabalhar com os reagentes fornecidos 3 Os salpicos de reagentes devem ser limpos imediatamente Observar todas as regulamenta es ambientais nacionais e locais relativas elimina o de res duos Precau es 1 Este produto destina se a utiliza o em diagn stico In Vitro 2 Os Controlos QUANTA Flash Sm destinam se a ser utilizados com o ensaio QUANTA Flash Sm 3 Nao transfira os reagentes do controlo para tubos secundarios O instrumento utiliza os c digos de barras nos tubos para identificar o controlo 4 Uma vez aberto cada tubo de controlo est em condi es de ser utilizado at 15 vezes com um tempo m ximo de 10 minutos inserido no instrumento por utiliza o A contamina o qu mica dos reagentes pode surgir devido a limpeza ou lavagem inadequada do instrumento Res duos de qu micos laboratoriais comuns como formalina lix via etanol ou detergente podem causar interfer ncia no ensaio Certifique se de que segue o procedimento de limpeza do instrumento recomendado conforme definido no manual do operador do BIO FLASH
9. e resolu o de problemas com este ensaio contacte a assist ncia t cnica da INOVA Diagnostics Inc no endere o ou atrav s do n mero de telefone indicados no final das Instru es deste Folheto Para esvaziar o recipiente de res duos s lidos abra a gaveta dos res duos Remova o recipiente de res duos s lidos e elimine as tinas usadas adequadamente Substitua o recipiente de res duos s lidos feche a gaveta dos res duos e clique em Yes na janela Empty Waste Drawer Para substituir os ativadores clique no bot o Bulks Inventory F9 superior direito a No ecr Inventory Bulks clique no bot o Triggers esquerda Aparecer uma janela nova intitulada Add Triggers Remove old bottles b Abra e retire a gaveta dos res duos no instrumento BIO FLASH Elimine quaisquer tinas na gaveta de res duos secos Clique em Yes na janela Empty Waste Drawer Retire as garrafas ativadoras dos respetivos suportes e clique no bot o Next Desaperte as tampas das garrafas antigas de ativadores e substitua por ativadores novos Certifique se de que as coloca uma de cada vez com as tampas coloridas correspondentes branca com branca e vermelha com vermelha c Siga as instru es na janela nova Add Triggers Add Trigger 2 bottle Quando o c digo de barras tiver sido aceite coloque o Ativador 2 no suporte com o c digo de cores branco Clique em Next d Siga as instru es na janela Add Triggers Add Trigger 1 bottle Quan
10. revestidas de Sm conservadas antes da primeira utiliza o b Tampao de ensaio cor de rosa contendo tampao salino Tris Tween 20 estabilizadores proteicos e conservantes 6 Marcador IgG anticorpo IgG anti humano marcado a isoluminol contendo tamp o estabilizadores proteicos e conservante 2 Tamp o de ressuspens o 1 frasco cor de rosa contendo tamp o estabilizadores proteicos e conservantes Advert ncias 1 O tamp o de ensaio cont m um qu mico 0 02 cloranfenicol conhecido no Estado da Calif rnia por causar cancro 2 A azida de s dio utilizada como conservante Este produto venenoso e pode ser t xico se for ingerido ou absorvido pela pele ou pelos olhos A azida de s dio pode reagir com componentes de chumbo ou cobre das canaliza es formando azidas met licas explosivas Por esta raz o ao deitar fora os restos de reagentes necess rio deixar correr gua em quantidade abundante para evitar a forma o destas subst ncias 3 Usar equipamento de prote o individual apropriado para trabalhar com os reagentes 4 Os salpicos de reagentes devem ser limpos imediatamente Observar todas as regulamenta es ambientais nacionais e locais relativas elimina o de res duos Precau es 1 Este produto destina se a utiliza o para diagn stico In Vitro 2 Este ensaio destina se apenas a utiliza o com o instrumento BIO FLASH 3 O protocolo para a ressuspens o deve ser criteriosamente res
11. 1000 mg dL de triglic ridos 224 mg dL de colesterol ou 500 Ul mL IgM de fator reumatoide n o mostraram interfer ncia no ensaio QUANTA Flash Sm Ap s a colheita o soro deve ser separado do co gulo O documento H18 A4 da CLSI recomenda as seguintes condi es de conserva o para as amostras 1 N o conservar as amostras temperatura ambiente durante mais de 8 horas 2 Se o teste n o for conclu do num prazo de 8 horas guardar a amostra a 2 8 C 3 Se o teste n o for conclu do num prazo de 48 horas ou para transporte da amostra congelar a 20 C ou temperatura inferior As amostras congeladas devem ser bem agitadas depois de descongelarem e antes de serem testadas Procedimento Materiais Fornecidos 1 Cartucho de Reagente QUANTA Flash Sm 1 Tamp o de ressuspens o 1 Pipeta de transfer ncia Materiais Adicionais Necess rios mas N o Fornecidos Instrumento BIO FLASH com computador Lavagem do Sistema BIO FLASH N mero de Pe a 3000 8205 Ativadores BIO FLASH N mero de Pe a 3000 8204 Tinas BIO FLASH N mero de Pe a 3000 8206 Calibradores QUANTA Flash Sm N mero de Pe a 701121 Controlos QUANTA Flash Sm N mero de Pe a 701122 Utilizar o Analisador Quimioluminescente BIO FLASH i Consulte o manual do operador fornecido com o sistema BIO FLASH relativamente a instru es de funcionamento pormenorizadas do analisador quimioluminescente BIO FLASH e do software BIO FLASH Para informa es adicionais
12. Condi es de conserva o 1 Conserve os controlos por abrir a 2 8 C Nao congele Os reagentes permanecem estaveis ate a data de validade indicada quando armazenados e manipulados conforme descrito no protocolo Podem utilizar se os controlos abertos ate 15 vezes com um tempo maximo de 10 minutos inseridos no instrumento por utiliza o O tempo total em que os tubos de controlo podem estar abertos colocados no instrumento de 2 horas e meia ou 10 minutos por utiliza o Se se deixarem os controlos abertos colocados no instrumento por um per odo total superior a 2 horas e meia dever se o eliminar Utilizar os mesmos tubos de controlo durante mais de 15 utiliza es e ou mais de um total de 2 horas e meia pode originar resultados errados Para a estabilidade ideal retire os controlos do sistema imediatamente ap s a amostragem e guarde os a 2 8 C tapados no frasco original Procedimento Para criar novos materiais de CQ para o Ensaio Sm 1 Antes de utilizar Controlos QUANTA Flash Sm pela primeira vez no instrumento tem de introduzir no software o nome o lote a data de validade o valor ou dose e as informa es de DP alvo A partir do ecr Instrument Summary clique no bot o de seta Choose more options Ctrl M v Selecione QC Ctrl F2 Clique no bot o New QC Material Com cada kit de Controlos est inclu da uma ficha de dados espec fica do lote Introduza primeiro o nome o n mero do lote e a d
13. QUANTA Flash Sm 701123 Para Utiliza o em Diagn stico In Vitro APENAS PARA EXPORTA O NAO SE DESTINA A VENDA NOS ESTADOS UNIDOS Utiliza o Prevista O QUANTA Flash Sm um imunoensaio quimioluminescente IEQ para a determina o semiquantitativa de autoanticorpos para anti Sm em soro humano no instrumento BIO FLASH A presen a de anticorpos anti Sm em conjun o com conclus es cl nicas e outros testes laboratoriais pode auxiliar no diagn stico de L pus Eritematoso Sist mico LES Resumo e Explica o do Teste Os anticorpos antinucleares ANA encontram se numa grande variedade de doen as do tecido conjuntivo DTC e funcionam como um ensaio de rastreio de sensibilidade O soro positivo ANA reage com v rios antig nios nucleares diferentes incluindo o antig nio Smith Sm O antig nio Sm um complexo de proteinas n o hist nicas nucleares quer foi caracterizado em 1966 e foi o primeiro autoantig nio nuclear a ser descrito no LES O antig nio ao qual os anticorpos anti Sm se liga consiste numa s rie de prote nas B B D1 D2 D3 E F e G complexo com RNA nucleares pequenas U1 U2 U4 6 e U5 Estes complexos de proteinas nucleares e RNA denominam se part culas ribonucleoproteinas nucleares pequenas snRNPs s o importantes na excis o do RNA mensageiro precursor Os anticorpos para o antigenio Sm encontram se numa m dia de 5 30 dos doentes com LES e s o considerados um anticorpo marcador para al
14. ata de validade desta folha de dados no software Em seguida clique no bot o Add Assay Na nova janela certifique se de que a caixa Show All Assays est marcada Selecione o ensaio Sm da lista e clique em Add Por fim introduza na dose alvo e DP alvo Clique em Save Execute este processo para ambos os controlos Para criar um novo lote para materiais de CQ existentes 1 Antes de utilizar um lote novo de Controlos QUANTA Flash Sm pela primeira vez tem de introduzir no software o lote a data de validade o valor ou dose e as informa es de DP alvo A partir do ecr Instrument Summary clique no bot o de seta Choose more options Ctrl M v Selecione QC Ctrl F2 Realce o ensaio Sm na coluna do lado esquerdo Em seguida realce o material do controlo adequado direita SmN para o Controlo Negativo ou SmP para o Controlo Positivo Clique no bot o New QC Lot Com cada kit de Controlos est inclu da uma ficha de dados espec fica do lote Introduza as informa es desta ficha de dados no software Estas dever o incluir o n mero do lote a data de validade a dose alvo e o DP alvo Se necess rio clique no bot o Add Assay Na nova janela certifique se de que a caixa Show All Assays est marcada Selecione o ensaio Sm da lista e clique em Add Clique em Save Execute este processo para ambos os controlos Recomenda se a utiliza o dos controlos do QUANTA Flash Sm uma vez por cada dia que se utilize o ensaio
15. classification of systemic lupus erythematosus Arthritis Rheum 1997 40 1725 1734 Mahler M Fritzler MJ Bluthner M Identification of a SmD3 epitope with a single symmetrical dimethylation of an arginine residue as a specific target of a subpopulation of anti Sm antibodies Arthritis Res Ther 2005 7 R19 29 Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories BMBL 5 Edition Centers for Disease Control National Institute of Health 2009 S mbolos Utilizados S 09 ns LO a jajem ONTROL p ONTR O 2 gt O gt N E gt Dispositivo m dico para diagn stico n Vitro Consultar as instru es de utiliza o Limite de temperatura N o reutilizar Riscos biol gicos C digo do lote N mero de cat logo Utilizar at Fabricante Representante autorizado Cont m o suficiente para lt n gt testes Controlo Positivo Controlo Negativo Calibrador 1 Calibrador 2 Reciclar a caixa de papel Este lado para cima QUANTA Flash uma marca comercial registada da INOVA Diagnostics Inc BIO FLASH uma marca comercial registada da Biokit S A O 2012 Fabricado por INOVA Diagnostics Inc 9900 Old Grove Road San Diego CA 92131 Estados Unidos da Am rica Assist ncia T cnica apenas EUA e Canad 877 829 4745 Assist ncia T cnica Fora dos EUA 00 1 858 805 7950 support inovadx com Representante Autorizado na UE Medical Technology Pro
16. do o c digo de barras tiver sido aceite coloque o Ativador 1 no suporte com o c digo de cores vermelho Clique em Finish Substitua a gaveta dos res duos e feche a Para substituir o recipiente da Lavagem do Sistema clique no bot o Bulks Inventory F9 canto superior direito No ecr Inventory Bulks clique no bot o Sys Rinse Na nova janela Add System Rinse Remove bottles clique em Next Siga as instru es na janela nova Add System Rinse Add bottle Quando o c digo de barras tiver sido aceite se necess rio clique em Finish Para esvaziar o recipiente de res duos de fluido a partir do ecr Inventory Bulks clique no bot o Fluid Waste Retire e elimine os res duos de fluido Clique em Next Quando tiver substitu do a garrafa vazia clique em Finish M todo Prepara o do cartucho de reagente Da primeira vez que utilizar o cartucho do reagente tem de seguir os passos seguintes para instalar corretamente o cartucho no instrumento BIO FLASH Nota n o utilize o cartucho de reagente se observar quaisquer sinais de danos e Coloque o cartucho de reagente numa superf cie s lida Com uma m o segure o cartucho de reagente no lugar Com a outra m o segure firmemente a patilha vermelha na parte de tr s do cartucho de reagente e puxe a totalmente para fora Pressione as duas patilhas nos lados da tampa perfurada parte cinzenta e exer a press o na parte superior do cartucho de reagente at
17. em estar abertos colocados no instrumento de 2 horas e meia ou 10 minutos por utiliza o Se se deixarem os controlos abertos colocados no instrumento durante mais tempo dever se o eliminar Utilizar os mesmos tubos de controlo durante mais de 15 utiliza es e ou mais de um total de 2 horas e meia pode originar resultados errados Refer ncias LP 2 Tan EM Autoantibodies to nuclear antigens ANA Their immunobiology and medicine Advances in Immunology 1982 33 167 239 Migliorini P Baldini C Rocchi V Bombardieri S Anti Sm and anti RNP antibodies Autoimmunity 2005 38 47 54 Benito Garcia E Schur PH Lahita R American College of Rheumatology Ad Hoc Committee on Immunologic Testing Guidelines Guidelines for immunologic laboratory testing in the rheumatic diseases anti Sm and anti RNP antibody tests Arthritis Rheum 2004 51 1030 1044 Egner W The use of laboratory tests in the diagnosis of SLE J Clin Pathol 2000 53 424 432 Kavanaugh A Tomar R Reveille J Solomon DH Homburger HA Guidelines for clinical use of the antinuclear antibody test and tests for specific autoantibodies to nuclear antigens American College of Pathologists Arch Pathol Lab Med 2000 124 71 81 Tan EM Cohen AS Fries JF et al The 1982 revised criteria for the classification of systemic lupus erythematosus Arthritis Rheum 1982 25 1271 1277 Hochberg M Updating the American College of Rheumatology revised criteria for the
18. enas no estudo de compara o de m todos Sensibilidade cl nica e a especificidade para a LES n 146 utilizando a popula o de controlo n 191 do QUANTA Flash Sm An lise Cl nica Diagn stico An lise n 337 N o LES Intervalo de seguran a de 95 E TC CA Sensibilidade 14 4 9 1 21 1 QUANTA Flash Sm Especificidade 96 9 93 3 98 8 Total 146 19 a7 OOS saud vel e uma de um doente com VIH Distribui o das popula es de controlo utilizadas no estudo de vacan rupodedoentes LN ___Negativo __ _Positivo _ Doen a do f gado autoimune Esclerodermia Artrite reumatoide Sindrome de Sjogren Outras doen as reum ticas sist micas Hepatite viral VIH S filis Compara o do m todo com dispositivo implicado As amostras para compara o de m todos inclu ram as amostras dos estudos de valida o cl nica doentes com LES outros controlos de doen a amostras desconhecidas e dadores de sangue que estavam dentro do IMA do ensaio Testaram se estas amostras no QUANTA Flash Sm e no dispositivo implicado ELISA Compara o do M todo Sm ELISA Concord ncia de percentagem N 121 Intervalo de seguran a de 95 QUANTA Concord ncia Pos 92 1 78 6 98 3 Flash Concord ncia Neg 91 6 83 4 96 5 Sm IEQ Concord ncia Total 91 7 85 3 96 0 Precis o e reprodutibilidade A precis o intraensaio foi avaliada examinando se 7 amostras em 10 r plicas dentro de um teste e os dado
19. encaixar numa posi o bloqueada As patilhas dever o deixar de estar vis veis NAO VIRE O CARTUCHO ABERTO Ressuspender as micropart culas de Sm a Destape o frasco do tamp o de ressuspens o e recolha fluido para a pipeta de transfer ncia fornecida Ser utilizado todo o conte do do frasco b Fa a deslizar a porta no cartucho de reagente para a posi o de aberta pressionando suavemente o lado estreito no cartucho de reagente e mantenha a nesta posi o Transfira analiticamente todo o conte do do frasco para o tubo do reagente de micropart culas atrav s de um unico orif cio na parte superior do cartucho de reagente C Misture os conte dos do tubo do reagente de microparticulas aspirando e doseando o l quido pelo menos 30 vezes Se estiverem vis veis peda os de esferas continue a misturar a solu o mais 30 vezes Se as micropart culas n o ficarem em ressuspens o NAO UTILIZE O CARTUCHO d Certifique se de que pipeta todo o liquido antes de retirar a pipeta do tubo e elimina la Retire o autocolante da parte superior do cartucho de reagente para por a vista os outros tr s orificios Coloque o cartucho de reagente em qualquer ranhura aberta no carrossel do reagente do instrumento BIO FLASH Calibra o do ensaio 1 Tem de calibrar se cada lote do cartucho de reagente novo antes da primeira utiliza o O software n o permitir utilizar um lote novo at que seja calibrado
20. essuspens o correia 4 As carateristicas de desempenho deste ensaio nao foram determinadas para outras matrizes al m do soro Intervalo de refer ncia Determinou se o corte do ensaio testando um Conjunto de Forma o de 258 amostras caracterizadas formado por 232 amostras de indiv duos de refer ncia e 26 amostras caracterizadas de doentes com LES Estabeleceu se o corte ao percentil gt 99 dos resultados obtidos nos indiv duos refer ncia e foi atribu do um valor de 20 UQ Valores esperados Analisaram se os n veis de autoanticorpo Anti Sm utilizando o QUANTA Flash Sm num painel de 101 dadores de sangue aparentemente saud veis 71 mulheres e 30 homens entre os 18 e os 55 anos de idade com uma idade m dia de 34 anos Com um corte de 20 UQ um 1 0 das amostras foi positivo no QUANTA Flash Sm A concentra o m dia foi 3 6 UQ e os valores variaram entre lt 3 3 a 20 5 UQ Sensibilidade e especificidade cl nicas Utilizou se um total de 471 amostras no estudo de valida o cl nica incluindo 146 amostras de doentes com LES de dois coortes diferentes Como controlos inclu mos 160 amostras de doentes com doen as reum ticas 2 amostras de doentes com doen a autoimune do f gado e 29 doentes com v rios anticorpos de doen a infeciosa Adicionalmente analisaram se 33 amostras desconhecidas do College of American Pathologists CAP e do United Kingdom National External Quality Assessment Service UKNEQAS e utilizaram se ap
21. medt Consulting GmbH Altenhofstrasse 80 D 66386 St Ingbert Alemanha Tel 49 6894 581020 Fax 49 6894 581021 www mt procons com 621120PRT Julho de 2012 Revisao 0
22. peitado 4 Uma vez aberto deve guardar se este cartucho de reagente no carrossel do reagente do instrumento Deve ter se cuidado para evitar entornar os reagentes quando se coloca pela primeira vez o cartucho de reagente no instrumento 5 A contamina o qu mica dos reagentes pode surgir devido a limpeza ou lavagem inadequada do instrumento Res duos de qu micos laboratoriais comuns como formalina lix via etanol ou detergente podem causar interfer ncia no ensaio Certifique se de que segue o procedimento de limpeza do instrumento recomendado conforme definido no manual do operador do BIO FLASH Condi es de conserva o 1 Conserve os cartuchos de reagente e o tamp o de ressuspens o por abrir a 2 8 C N o congele Os reagentes permanecem est veis at data de validade indicada quando armazenados e manipulados conforme descrito no protocolo 2 Devem guardar se no instrumento os cartuchos de reagente abertos e permanecem est veis durante um total de 30 dias per odo ap s o qual devem eliminar se O software BIO FLASH monitoriza as datas de validade dos cartuchos colocados bem como dos lotes do cartucho de reagente Colheita da Amostra Este procedimento deve ser efetuado numa amostra de soro As amostras de soro com contamina o bacteriana que sofreram tratamento t rmico ou contendo part culas vis veis n o devem ser utilizadas As amostras que cont m at 10 mg dL de bilirrubina 200 mg dL de hemoglobina
23. s s o apresentados abaixo Precis o intraensaio do QUANTA Flash Sm Amostra Amostra 2 Amostra 3 Amostra 4 Amostra 5 Amostra 6 Amostra 7 M dia UQ DP 04 114 05 09 54 28 186 WC 34 69 22 27 25 19 31 A precisao interensaio foi avaliada testando 6 amostras em dois testes num dia uma vez de manha e outra vez a noite durante 3 dias e os dados sao apresentados abaixo Precisao interensaio do QUANTA Flash Sm Amostrai Amostra2 Amostra3 Amostra4 Amostra5 Amostra 6 DP 09 Limites de dete o intervalos lineares e de medi o anal tica De acordo com a CLSI EP17 A o limite de dete o inferior deste ensaio 678 URL que esta muito abaixo do fundo do intervalo de medi o anal tico 3 3 UQ Todo o intervalo de medi o anal tico desde 3 3 UQ at 693 5 UQ linear Realizou se um estudo de linearidade de acordo com a CLSI EP6 A utilizando 4 amostras de soro com v rias concentra es de anti Sm Todas as 4 amostras mostraram linearidade de dilui o individualmente e os dados combinados apresentaram os resultados seguintes Teste UQ 95 IS 95 IS Todas as 3 27 a 742 59 0 997 0 979 a 1 015 0 018 3 983 a 4 019 os Amostras QUANTA Flash Sm 701121 Calibradores Para Utiliza o em Diagn stico In Vitro APENAS PARA EXPORTA O NAO SE DESTINA A VENDA NOS ESTADOS UNIDOS Utiliza o Prevista Os Calibradores QUANTA Flash Sm destinam
24. se a utiliza o com o imunoensaio quimioluminescente EQL QUANTA Flash Sm no instrumento BIO FLASH Cada calibrador estabelece um ponto de refer ncia para a curva de trabalho utilizada para determinar valores de Unidades Quimioluminescentes UQ na medi o de anticorpos anti Sm em soro Resumo e princ pios do procedimento O QUANTA Flash Sm CIA utiliza uma Curva Modelo espec fica do lote predefinida que est armazenada no c digo de barras do cartucho de reagente Os Calibradores QUANTA Flash Sm est o concebidos para produzir uma Curva de Trabalho espec fica do instrumento a partir de par metros da Curva Modelo com um ponto de decis o baseado nas carater sticas de desempenho e na avalia o cl nica do QUANTA Flash Sm CIA Antes da atribui o do valor testam se os calibradores em v rios instrumentos com diversos lotes de reagentes Reagentes 1 Calibrador 1 do QUANTA Flash Sm dois 2 tubos marcados com c digo de barras contendo 0 3 mL de reagente pr dilu do pronto a usar Calibradores contendo anticorpos humanos para Sm em estabilizadores e conservantes 2 Calibrador 2 do QUANTA Flash Sm dois 2 tubos marcados com c digo de barras contendo 0 3 mL de reagente pr dilu do pronto a usar Os calibradores cont m anticorpos humanos para Sm em estabilizadores e conservantes Advert ncias 1 Todo o material de origem humana utilizado na prepara o dos calibradores deste produto foi testado e deu resultados negati
25. t o carregado no instrumento BIO FLASH No instrumento dilu se uma amostra do doente numa tina pl stica descart vel Pequenas quantidades de soro dilu do do doente as esferas de Sm e o tamp o de ensaio s o todos combinados numa segunda tina e misturados Incuba se esta tina a 37 C As esferas s o ent o magnetizadas e lavadas v rias vezes Adiciona se ent o tina o anticorpo IgG anti humano conjugado de isoluminol e incuba se a 37 C Mais uma vez as esferas s o magnetizadas e lavadas repetidamente O conjugado de isoluminol produz uma rea o luminescente quando se adicionam os reagentes Ativadores tina A luz produzida a partir desta rea o medida como Unidades Relativas de Luz URL pelo sistema tico BIO FLASH As URL s o proporcionais a quantidade de conjugado de isoluminol ligado que por sua vez proporcional quantidade de anticorpos anti Sm ligados ao Sm nas esferas O ensaio QUANTA Flash Sm utiliza uma Curva Modelo espec fica do lote predefinida que carregada no instrumento atrav s do c digo de barras do cartucho de reagente Baseando se no resultado da execu o de dois calibradores cria se uma Curva de Trabalho espec fica do instrumento que o software utiliza para calcular unidades quimioluminescentes UQ a partir do valor da URL obtido para cada amostra Reagentes 1 O cartucho de reagente QUANTA Flash Sm cont m os reagentes seguintes para 50 determina es a As esferas paramagn ticas
26. u mais de 8 horas pode originar uma calibra o incorreta do ensaio que por sua vez pode fornecer resultados errados QUANTA Flash Sm 701122 Controlos Para Utiliza o em Diagn stico In Vitro APENAS PARA EXPORTA O NAO SE DESTINA A VENDA NOS ESTADOS UNIDOS Utiliza o Prevista Utilizam se os Controlos QUANTA Flash Sm para controlo da qualidade do kit de imunoensaio quimioluminescente EQL QUANTA Flash Sm testado no instrumento BIO FLASH Resumo e princ pios do procedimento Os Controlos QUANTA Flash Sm s o constitu dos por um Controlo Negativo e um Controlo Positivo Cada um cont m uma quantidade diferente de anticorpos anti Sm O Controlo Negativo destina se a avaliar a precis o e a exatid o do ensaio com n veis de autoanticorpo muito baixos O Controlo Positivo destina se a avaliar a precis o e a exatid o do ensaio com n veis de autoanticorpo desde moderados a elevados Reagentes 1 Controlo Negativo do QUANTA Flash Sm dois 2 tubos marcados com codigo de barras contendo 0 5 mL de reagente pronto a usar Controlos contendo anticorpos humanos para Sm em estabilizadores e conservantes 2 Controlo Positivo do QUANTA Flash Sm dois 2 tubos marcados com c digo de barras contendo 0 5 mL de reagente pronto a usar Controlos contendo anticorpos humanos para Sm em estabilizadores e conservantes Advert ncias 1 Todo o material de origem humana utilizado na prepara o dos controlos deste produto foi testado
27. vos para m todos aprovados pela FDA para anticorpos de HIV HBsAg e HCV Contudo nenhum teste pode garantir com certeza absoluta a aus ncia de HIV HBV HCV ou outros agentes infeciosos Portanto devem manipular se os Calibradores QUANTA Flash Sm como se fossem qualquer material potencialmente infecioso 2 Usar equipamento de prote o individual apropriado para trabalhar com os reagentes fornecidos 3 Os salpicos de reagentes devem ser limpos imediatamente Observar todas as regulamenta es ambientais nacionais e locais relativas elimina o de res duos Precau es Este produto destina se a utiliza o em diagn stico In Vitro Os calibradores QUANTA Flash Sm destinam se a ser utilizados com o ensaio QUANTA Flash Sm N o transfira os reagentes calibradores para tubos secund rios O instrumento utiliza os c digos de barras nos tubos para combinar os calibradores com o tipo de ensaio adequado Ap s aberto um tubo calibrador mant m se bom durante um per odo de 8 horas ou 4 calibra es ap s o qual tem de eliminar se A contamina o qu mica dos reagentes pode surgir devido a limpeza ou lavagem inadequada do instrumento Res duos de qu micos laboratoriais comuns como formalina lix via etanol ou detergente podem causar interfer ncia no ensaio Certifique se de que segue o procedimento de limpeza do instrumento recomendado conforme definido no manual do operador do BIO FLASH Condi es de conserva
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