Hoefer SE900
Contents
1. Apaga todos controles de alimentaci n y desconecta los plomos del poder antes de quitar la tapa de la seguridad Circula s lo agua o 50 50 glicol de agua etileno por el intercambiador de calor si se es el caso equiparon No conecte el intercambiador de calor a un toque de la agua ni cualquier fuente del l quido refrigerante donde la presi n del agua est libre Nunca introduce anticongelante ni alg n solvente org nico en cualquier parte del instrumento Los solventes org nicos causar n da o irreparable a la unidad No opera con temperaturas de b fer encima del m ximo especific especificaciones t cnicas Recalentar causar da o irreparable a la unidad Viktig Information Swedish om denna utrustning anv nds i ett s tt som inte har specificeras av Hoefer Inc skyddet tillhandah ll vid utrustningen kan skadas Detta instrument formges f r inomhuslaboratorium anv ndning bara Bara medhj lpare och delar godk nde eller levererade vid Hoefer Inc kan anv ndas f r fungera underh lla och servicing denna produkt anvander bara en kraft tillg ng som ar CE markerade eller s kerhet intygade vid en nationellt erk nd testande laboratorium S kerheten locket m ste vara p platsen f re koppla kraften tillg ngen blyen till en kraft tillg ng V nder sig alla kraft tillg ng kontroller av och kopplar bort kraften blyen f re flytta s kerheten locket Cirkulerar bara vatten eller 50 50 vatten ethylene g2. Quando si esegue un pieno di 6 gel impostare l alimentazione per 480 mA Runs dovrebbe essere completata in circa 6 ore La tensione e la potenza deve essere impostato a loro massimi 600 V e 100 W rispettivamente in modo da non limitare la corrente Per le corse notturne 18 ore impostare l alimentazione 80 V costante La corrente e la potenza dovrebbe essere impostato non superiore a 500 mA e 100 W La pista completa quando il colorante inseguimento ha raggiunto il lato opposto dei gel Spegnere l alimentazione le pompe di circolazione e la vasca esterna di acqua di ricircolo se utilizzato e p17 Nota NON usare le pompe di circolazione del buffer per aiutare il drenaggio del serbatoio pi veloce Fig 22 Le porte di drenaggio p18 Dopo elettroforesi 1 2 10 11 12 13 Staccare i cavi per l alimentazione Togliere il coperchio spostando gli interblocchi di sicurezza mentre si solleva il coperchio Sollevare con cautela fuori ogni gel Le cassette sono scivolosi Non utilizzare la cremagliera pagina come gel porta rack le piastre possono sfilare delle guarnizioni in gomma di ribaltamento o spostato Posizionare la cassetta di vetro su una superficie piana e pulita Utilizzare il Wedge Wonder per aprire delicatamente il lato della cassetta nonhinged gel Utilizzare il Wedge Wonder per tagliare delicatamente il gel lontano dai distanziatori laterali Rimuovere accuratamente il gel dalla cass
3. 5 sulla gel sono difficili da gestire in gel di grande formato ma pu essere miscelato in gel gradiente per una migliore risoluzione e maneggevolezza Le ricette qui riportate sono da considerarsi indica tive quando casting gel gradiente Use volume totale richiesto ogni soluzione durante il lancio gel gradiente Utilizzando le soluzioni di cui all appendice A tutti i gel sono reticolati con il 2 6 C Gel Laemmli per 400 ml di soluzione di gel Risoluzione Solution Gel 400 ml 10 0 12 596 15 0 17 5 20 Acrylamide Stock Sol 1 133 3 166 7 200 0 233 3 266 7 1 5 M TrisCI pH 8 8 Sol 2 100 0 100 0 100 0 100 0 100 0 10 SDS Sol 3 4 0 4 0 4 0 4 0 4 0 H20 deionizzata 158 0 124 8 915 58 3 25 0 10 APS Sol 4 4 0 4 0 4 0 4 0 4 0 10 TEMED Sol 5 0 68 0 55 045 040 0 34 Volume finale 400 0 400 0 400 0 400 0 400 0 Gel Laemmli per 200 ml ciascuna soluzione di gel Gradient Gel Solution 200 ml LUCE 5 0 7 5 10 0 12 5 15 0 17 5 Acrylamide Stock Sol 1 33 3 50 0 66 7 83 3 100 0 116 7 1 5 M TrisCl 50 0 50 0 50 0 50 0 50 0 50 0 pH 8 8 Soluzione 2 10 SDS Soluzione 3 2 0 230 2 0 2 0 2 0 2 0 H20 deionizzata 112 2 95 5 79 0 62 4 45 8 29 1 10 APS Soluzione 4 2 0 20 2 0 2 0 2 0 2 0 10 TEMED Sol 5 0 50 0 46 0 34 0 27 0 23 0 20 Volume finale 200 0 200 0 200 0 200 0 200 0 200 0 200 ml PESANTE 7 5 10 0 12 5 15 0 17 5 20 Acrylamide Stock Sol 1 50 0 66 7 83 3 100 0 116 7 133 3 1 5 M Tri
4. agitazione Tris FW 121 1 0 25 M 151 28 Glycine FW 75 07 1 92 M 720 6 g SDS FW 288 4 35 mm 50 0 g H20 deionizzata a 5 0 litri Il pH di questo tampone di circa 8 3 Non regolare il pH Conservare temperatura ambiente per un massimo di 2 mesi 8 Buffer 1X elettroforesi 0 025 M Tris 0 192 M glicina 0 196 SDS 1X buffer di elettroforesi 12 0 litri Elettroforesi Buffer 10X Soluzione 7 1200 ml H20 deionizzata 10 81 Esso pu essere preparato nel serbatoio di separazione Aggiungi 10X stock acqua quindi il rack PAGE Delicatamente alzare e abbassare la cremagliera PAGE per facilitare la miscelazione quindi consentire il sistema di ricircolo per miscelare il buffer prima dell uso Attenzione SDS pu causare la soluzione a bollire quindi attenzione durante il riscalda mento ed evitare trabocchi Nota le strisce IPG devono essere equilibrati poco prima PAGE dimensin secondo Non equilibrare le strisce IPG prima della conservazione a 20 C 9 196 Agarosio in 1X tampone di elettroforesi 100 ml In un pallone da 500 ml aggiungere Agarosio lg Elettroforesi Buffer 10X Soluzione 8 10 ml H20 deionizzata 90 ml Blu di bromofenolo 3 mg Mescolare delicatamente la sospensione di agarosio Riscaldare a bassa potenza in un forno a microonde fino agarosio completamente disciolto Dividere in provette da 1 5 ml a vite in plastica top Conservare in aliquote a 4 C 10 Gradient Gel Casting Solution d
5. camera di miscelazione Porre a gradiente su un agitatore magnetico e cominciare agitazione ad una velocit che mescola bene ma non introdurre bolle nella soluzione 8 Accendere la pompa peristaltica a un livello basso e aprire il rubinetto tra le due camere SG500 9 La soluzione gel dovrebbe lentamente strato nella regione triangolare nella parte inferiore della ruota gel multiple e riempire le cassette uniformemente dal basso verso l alto 10 Una volta quasi tutta la soluzione uscito la pausa produttore gradi ente temporaneamente la pompa e riempire il produttore di gradiente con 200 ml di soluzione di spostamento Riavviate la pompa e la soluzione attraverso il tubo forzando le soluzioni fino acrilammide nelle cassette gel fino al raggiungimento dell altezza desiderata Fermare la pompa 11 Sovrapporre ogni gel con 1 ml di acqua satura di n butanolo o buffer gel diluito per ottenere la migliore superficie superiore gel Lenta mente fornire la soluzione di sovrapposizione su un lato minimizzando miscelazione e permettere la sovrapposizione di fluire attraverso la superficie superiore nudo 12 Lasciare i gel per polimerizzare per un minimo di un ora Dopo la polimerizzazione versare overlay e sciacquare la superficie del gel pi volte con acqua distillata 13 Preparare la soluzione di monomero gel di impilamento Versare il gel di impilamento al di sopra del gel risolvere Lasciare un minimo di un ora per il gel di impi
6. controls off and disconnect the power leads before removing the safety lid Circulate only water or 50 50 water ethylene glycol through the heat exchanger if so equipped Do not connect the heat exchanger to a water tap or any coolant source where the water pressure is unregulated Never introduce antifreeze or any organic solvent into any part of the instrument Organic solvents will cause irreparable damage to the unit Do not operate with buffer temperatures above the maximum specified technical specifications Overheating will cause irreparable damage to the unit Dulezit Informace Czech Pokud by toto zarizeni je pouzito zp sobem ktery neni podle Hoefer Inc ochrana poskytovan na z klad za zen m e byt naru ena Tento n stroj je ur en pro vnit n pou it v laborato i pouze Pouze p slu enstv a sti schv len nebo poskytnut ch Hoefer Inc mohou b t pou ity pro provoz dr bu a dr b tohoto v robku zdroj nap jen pou vaj jen e je opat en ozna en m CE osv d ena nebo bezpe nost vnitrost tn uznan mi zku ebn mi laborato Bezpe nosti lid mus b t zavedena p ed p ipojen m nap jec zdroj nap jen vede k Turn ve ker nap jen kontroly vypnuto a odpojit p ed odb rem energie vede bezpe nostn v ko Rozeslat pouze voda nebo 50 50 voda ethylenglykolu prost ednictv m v m n k tepla je li to vybavena Nemaj p ipojen v m n k tepla s vo
7. i obs ugi tego produktu korzysta jedynie zasilacza e jest nosz ce oznakowanie CE lub bezpiecze stwa uwierzytelnione przez uznane na poziomie krajowym laboratorium badawcze Bezpiecze stwo lid musi by w miejsce przed pod czeniem zasilania prowadzi do zasilania Za wszystkie r d a zasilania urz dzenia steruj ce off i od czy moc prowadzi przed odbiorem bezpiecze stwa lid Kr tylko wody lub wody 50 50 ethylene glycol wymiennik ciep a poprzez je li tak wyposa one Nie nale y po czy wymiennik ciep a woda z kranu lub jakimkolwiek ch odziwo r d a je eli ci nienie wody jest nieuregulowanych Nigdy nie wprowadza rozpuszczalnika organicznego przeciw zamarzaniu lub jakichkolwiek na dowoln cz dokumentu Rozpuszczalniki organiczne spowoduje nieodwracalne szkody dla jednostki Nie dzia aj w buforze temperatury powy ej maksymalnego okre lone specyfikacje techniczne Przegrzania spowoduje nieodwracalne szkody dla jednostki Informa es Importantes Portuguese Se este equipamento usado numa maneira n o especificada por Hoefer Inc que a protecc o fornecida pelo equipamento pode ser comprometida Este instrumento projectado para uso de interior de laborat rio s S acess rios e partes aprovaram ou forneceu por Hoefer Inc pode ser usada para operar manter e servicing este produto S usa um estoque de poder que CE marcou ou seguranca registrada por um
8. l applicazione della sovrapposizione Lasciare solidificare l agarosio prima di gel nel serbatoio di separazione e p15 Attenzione Non far funzionare le pompe di circolazione senza buffer nel serbatoio di separazione Attenzione Cassette di vetro non sar facile scivolare in un serbatoio a secco Riempire con il primo tampone e utiliz zare acqua o tampone per lubrificare le cassette di vetro e flap in gomma Fig 19 Gel orientamento p16 Pagina Separazione Togliere il coperchio di sicurezza 2 Riempire il serbatoio con 12 litri di tampone di elettroforesi 1X Esso pu essere preparato nel serbatoio di separazione aggiungendo stock 10X e acqua Delicatamente alzare e abbassare la cremagliera PAGE per facilitare la miscelazione in tampone 3 Accendere le pompe di circolazione L interruttore si trova sul lato infe riore destro del SE900 4 Inserire la cremagliera PAGE al fondo del serbatoio di separazione assicurandosi che le caratteristiche di trasparenza sono allineati 5 Inserire gel nelle fessure nel rack PAGE C un orientamento specifico per le cassette gel La cerniera gomma deve essere sul fondo del serbatoio di separazione La striscia IPG sigillato deve essere a sinis tra il lato con il nero blocco di sicurezza e il filo nero ad alta tensione nel coperchio di sicurezza Fig 18 6 Verificare che entrambe le estremit del gel sono esposti al buffer Le lastre di vetro deve essere centrato Fig 1
9. utile per indagare separatamente le lastre di vetro dopo elettroforesi Gel Seal GelSeal viene utilizzato nel serbatoio di separazione per lubrificare i canali per la cremagliera PAGE e aiutare lo scorrere in posizione Se il rack PAGE inizia ad aderire in quanto inserito nel serbatoio applicare uno strato sottile di gel tenuta all interno dei quattro canali con un dito guantato Gel Seal viene utilizzato anche sulla guarnizione nel gel caster multipla Plate Rack Il Plate Rack SE914 possono essere ordinati separatamente E molto comodo per tenere le cassette di vetro durante l assemblaggio della ruota gel multiple e nell applicare strisce IPG all inizio dei gel seconda dimensione e p9 Nota Non rimuovere lo strato di gel dalla tenuta all interno dei canali bianchi che la posizione del rack PAGE Nota Non eseguire le pompe a secco Fig 13 Pannello situato sul lato inferiore destro della SE900 L alimentazione si inserisce nella presa di alimentazione sulla destra ll ON OFF interruttore sulla sinistra e p10 Istruzioni per l uso Separazione serbatoio Setup 1 Posizionare il SE900 con il blocco di sicurezza nero sulla sinistra come illustrato in Figura 20 a pagina 17 Posizionare il serbatoio di separazione nei pressi di un pozzo per la soluzione di facilitare il drenaggio e lo smaltimento Prima di utilizzare per la prima volta smontare l unit e lavare con una soluzione diluita di un d
10. 9 Un buon posizionamento centrato tra lembi Posizionamento Bad sigilli pattina chiusa alla fine del gel la corrente non pu arrivare a gel Fig 20 Gel orientamento Corretto livello di riempimento IPG Strip 7 8 9 Fig 21 Far scorrere il coperchio in posizione di sicurezza 10 Nota Il cavo nero ad alta tensione deve essere sullo stesso lato della striscia IPG 11 12 Nero Piombo High Voltage Nero di sicurezza Interlock Red Piombo High Voltage Red Safety Interlock l or Dopo che tutti i gel sono collocati nel serbatoio controllare il livello del buffer nel serbatoio di separazione II livello corretto circa met del distanziatore sul bordo superiore del cassettte gel Il livello del buffer deve anche essere inferiore alla linea di riempimento massimo Applicare il coperchio di sicurezza al serbatoio di separazione con l orientamento corretto montaggio e spostando la parte superiore del blocco di sicurezza attraverso le aperture sul coperchio e collegando l alta tensione conduce alle banane Il blocco di sicurezza garantir il coperchio in posizione Fig 21 Collegare l alta tensione porta ad una alimentazione in grado di trasportare almeno 300 V 500 mA 90 W come il Hoefer PS300 B Adattatori pu essere necessario se si utilizzano altri alimentatori Impostare l alimentazione ai valori desiderati e iniziare la corsa Nota per giorni corre impostare l alimentazione per 80 mA gel
11. Hoefer Inc la protezione fornito dall apparecchiatura potrebbe essere indebolita Questo strumento disegnato per l uso di laboratorio interno solo Solo gli accessori e le parti hanno approvato o hanno fornito da Hoefer Inc potrebbe essere usato per operare per mantenere e per revisionare questo prodotto usa Solo un alimentatore che CE ha marcato o la sicurezza certificato da un nazionalmente riconosciuto testando il laboratorio Il coperchio di sicurezza deve essere nel luogo prima di collegare i piombi di alimentatore a un alimentatore Spegne tutto i controlli di alimentatore e disinserisce i piombi di potere prima di togliere il coperchio di sicurezza Circola solo l acqua o 50 50 glicole di acqua etilene attraverso lo scambiatore di calore se cosi equipaggiato Non collegare lo scambiatore di calore a un rubinetto di acqua o qualunque fonte di refrigerante dove la pressione di acqua sregolata Non introduce mai l antigelo o qualunque solvente organico in qualunque parte dello strumento solventi organici causeranno il danno irreparabile all unit Non opera con le temperature di tampone al di sopra del massimo ha specificato le descrizioni tecniche Il surriscaldamento causer il danno irreparabile all unit Viktig Informasjon Norwegian Hvis dette utstyret blir brukt i en m te ikke spesifisert ved Hoefer Inc beskyttelsen som ha blitt git av utstyret kan bli svekket Dette instrumentet er utforme
12. Que utente Italiano Hoefer SE900 Secondo Dimension Sistema di Elettroforesi Hoefer mu SE900 IM Italian Rev BO 06 12 Indice Informazioni Importantt nenne ii Rifiuti di apparecchiature elettriche ed elettroniche RAEE V F nzlorie e descrIZIOrlg iniri sanctis bacc Loo Deoa du ir pcc de v ti Se 1 le ee 2 Apertura della confezione e Inventory 3 Istruzioni per LUSO getest enee eh RC dd ae 10 Uso del Gel Caster multgla 0 ccccccccccceeeccseeeeeeeeeeeeeeesneeesaeeees 11 IPG Strip equilibrazione EE 14 Pagina Separazione isla dabei EEN Seed 16 Cura e Manten zurita 19 Assistenza tecnica e riparazlone 19 Risoluzione del proble Musical 20 Informazioni per l ordinazione occccoccccoccncnnnnonnononnnnnnnnnncnncncnnns 23 Appendice A Teoria e Riceite 24 Ier uns 25 erii TE 28 Appendice B Riterimentt 30 Important Information English If this equipment is used in a manner not specified by Hoefer Inc the protection provided by the equipment may be impaired This instrument is designed for indoor laboratory use only Only accessories and parts approved or supplied by Hoefer Inc may be used for operating maintaining and servicing this product Only use a power supply that is CE marked or safety certified by a nationally recognized testing laboratory The safety lid must be in place before connecting the power supply leads to a power supply Turn all power supply
13. S Buffer 10X E GR149 1 Urea 1 kg GR143 1 e p23 e p24 Appendice A Teoria e Ricette Laemmli sistema Gel Il sistema Laemmli il protocollo pi comune per elettroforesi SDS proteine denaturate Lo ione leader in questo sistema tampone discontinuo e lo ione cloruro finale glicina Di conseguenza il gel risoluzione e il gel di impilamento opzionale contengono Tris Cl buffer di diversa concentrazione e pH e il tampone di elettroforesi contiene Tris glicina Tutti i buffer conten gono 0 1 SDS Gel poliacrilammide composizione indicata da due diverse percentuali T total acrylamide g acryl bis x 100 100 96 C crosslinker g bis x 100 g acryl bis La percentuale totale di acrilammide T nel gel risoluzione che pu variare da 5 a 20 determina la dimensione dei pori Comun emente la quantit di reticolante usato C 2 6 Attenzione L acrilamide una neurotossina Estrema attenzione deve essere utilizzato durante la manipolazione e preparazione delle soluzioni di acrilammide Soluzioni 1 Acrilamide Soluzione madre 30 8 2 6 T C Bis 1000 ml L acrilamide FW 71 08 30 ww 300g Bis N N Methylenebisacrylamide FW 154 2 0 8 wv 8g H20 deionizzata a 1000 ml Conservare a 4 C al riparo dalla luce 2 1 5 M TrisCl pH 8 8 4X tampone Resolving gel 2 litri Tris FW 121 1 1 5 M 363 3 g Si sciolgono in 1 5 litri H20 deionizzata 4 N HCI 4N acido clori
14. a regolata ricircolo bagno d acqua per il raffreddamento attivo del serbatoio di separazione Il bagno d acqua di ricircolo deve avere una pressione massima di uscita di 12 psi Usare acqua o fino ad una miscela 50 di glicole etilenico in acqua nella vasca di ricircolo Non collegare mai ad una fonte non regolamentata di acqua come un acqua di rubinetto PAGE Rack Canale Fig 4 Key si allinea con una funzione di accoppiamento nel rack PAGE per assicurare il corretto orientamento Interblocchi di sicurezza Interblocchi di sicurezza sono montati sui lati del serbatoio Uno rosso e l altra nero per aiutare con i gel orientare correttamente all interno del serbatoio del gel Per ragioni di sicurezza la parte superiore del blocco di sicurezza mantiene il coperchio durante l elettroforesi e il fondo impedisce l accesso alla porta di scarico Questo impedisce pericolo elettrico di drenaggio tampone elettrificato Una chiave sul fondo del serbatoio di separazione figura 4 si allinea con una caratteristica di accoppiamento nel rack PAGE Figura 6 per assicurare il corretto orientamento Una porta di scarico incluso nella parte inferiore dietro il nero blocco di sicurezza Lo scarico protetto da un filtro amovibile che blocca parti di gel di ostruire la luce di scarico Questo filtro dovrebbe essere rimosso e risciacquato periodicamente e pd Fig 5 PAGE rack Fig 6 Orientamento funzione Fig 7 Bana
15. amite un accessorio opzionale l 5G500 Maker Gradient Hoefer La mescola G500 bassa percentuale e alte percentuali soluzioni gel che vengono pompati nella porta nella parte inferiore della ruota gel multiplo utilizzando una pompa peristaltica Versando un Gel Linear Gradient 1 Montare il caster multiple gel come descritto a pagina 11 con le due seguenti eccezioni Non inserire la guarnizione triangolare in gomma nella parte inferiore della ruota gel e Rimuovere il tappo dalla porta di ingresso dal basso 2 Collegare un estremit del tubo grado di laboratorio alla porta di uscita SG500 Inserire il tubo attraverso una pompa peristaltica e collegare l altra estremit alla porta di ingresso del frontalino SE915 multiple caster gel 3 Calcolare il volume di soluzione di monomero necessario Dividete il volume totale a met e preparare questo volume di entrambi i supe riore e inferiore percentuale di acrilammide soluzioni 4 Opzionale Regolare la percentuale superiore soluzione acrilammide al 15 w v saccarosio o fino al 25 v v glicerolo per migliorare la stratificazione 5 Versare il percentuale o pesante soluzione acrilammide nella camera SG500 pi lontano dalla presa Aprire il rubinetto per il tempo neces sario a spostare l aria tra le camere e poi chiudono 6 Versare la percentuale minore o pi leggero soluzione acrilammide nella camera di miscelazione la camera con l uscita SG500 7 Inserire un ancoretta nella
16. cale verso il basso dalla parte superiore del gel verso il fondo del gel Strip IPG non posizionato correttamente sulla superficie del gel Evitare di gel scriccatura separazione durante il caricamento strisce Eseguire il trattamento iodoacetamide Assicurarsi striscia IPG uniformemente a contatto con la superficie del gel lungo l intera lunghezza della striscia Sovraccarico di proteine Striature orizzontale delle proteine Scarsa preparazione del campione Messa a fuoco inadeguati Scarso contatto tra la Striscia di IPG e il gel seconda dimensione Spot sono inclinate o distorte Gel correre troppo veloce la migrazione irregolare Sovrapporre il gel soluzione con acqua satura di n butanolo prima della polim erizzazione inizia ad evitare la formazione di una superficie irregolare gel Gel polimerizzazione irregolare o formazione di pendenze Vedere colata problemi di maggiore sostegno Strip IPG non posizionato correttamente sulla superficie del gel Evitare di gel scriccatura separazione durante il caricamento strisce Ingresso campione nel gel seconda dimensione troppo elevata funzionare a un livello di potenza Esegui gel in condizioni di tempi di rodaggio Bubbles presenti in gel seconda dimensione distorcer la migrazione spot Nessun proteine visibili su gel seconda dimensione dopo colorazione Quantit caricata troppo poco per il metodo di rilevazione Aumentare il ca
17. dn mi set epn nebo jak koli chladic kapaliny zdroje kde tlak vody je neregulo Nikdy zav st prost edek proti zamrznut nebo jak koli organick rozpou t dla do jak koli sti z tohoto n stroje Rozpustidl m zp sob nenapraviteln po kozen jednotka Nejsou provozov na s pufru teplot ch nad maxim ln stanovenou technick mi specifikacemi P eh t zp sob nenapraviteln po kozen jednotka Vigtig Information Danish Hvis dette udstyr bruges i en m de ikke specificeret ved Hoefer Inc den beskyttelse som er blevet forsynet af udstyret kan m ske sv kkes Dette instrument er designet for indend rs laboratoriumbrug bare Bare tilbeh r og del godkendede eller forsynede ved Hoefer Inc kan m ske bruges for drive funktionsfejl og betjening dette produkt bruger Bare en stromforsyning der er CE markerede eller sikkerhed som er blevet attesteret af en som nationalt er blevet anerkendt prove laboratorium Sikkerhedl get m vaere p plads fer forbinding stremforsyningsblyet til en stromforsyning Drejer alle stromforsyningskontroller af og afbryder kraftblyet for fjerning sikkerhedl get Cirkulerer bare vand eller 50 50 vand ethylene glykol gennem varmeveksleren i s fald udrustet Forbind ikke varmeveksleren til en vandhane eller nogen kelemiddelkilde hvor vandtrykket er unregulated Introducerer Aldrig antifreeze eller noget organisk oplosningsmiddel ind i nogen del af inst
18. do colata gel percentuale unica mano versare la soluzione di gel lungo il canale nella parete posteriore della ruota Fig 11 Le cassette si riempir dal basso la produzione di gel di qualit migliore e ridu cendo le possibilit di cattura bolle d aria Quando colata gel gradiente la soluzione di gel deve essere lenta mente pompato attraverso la porta in basso La spina triangolare nella parte inferiore deve essere rimosso La regione triangolare costi tuisce uno spazio per il gel gradiente di diffondere e inserire le cassette di vetro in modo uniforme Quando si utilizza sovrapposizioni butanolo cercare di ridurre al minimo contatto con il butanolo multicaster plastica Il contatto prol ungato con butanolo pu mania la plastica del multicaster Space Saver Il Space saver usato per riempire lo spazio all interno del gel caster multipla e ridurre la quantit di soluzione di gel Uno spazio saver equivale a uno di spessore 1 0 millimetri di vetro cassette Nel cast di gel sei 1 0 mm di spessore utilizzare uno saver lo spazio sul retro della ruota gel multiple Uno spazio saver incluso con il gel caster multipla Ulteriori rispar miatori spazio SE912 possono essere ordinati separatamente se meno di 6 gel sono regolarmente espressi Fig 12 Plate rack SE914 Fogli separatori I fogli hanno una pellicola protettiva su entrambi i lati che dovreb bero essere rimossi prima dell uso Wonder Wedge Il Wonder Wedge
19. drico a pH 8 8 H20 deionizzata a 2000 ml Conservare a 4 C 3 10 w v SDS Soluzione 100 ml Dodecilsolfato di sodio SDS FW 288 4 0 35 M 10g H20 deionizzata a 100 ml Conservare a temperatura ambiente 4 10 w v APS Iniziatore 1 ml Ammonio persolfato APS FW 228 2 0 44 mm 5g H20 deionizzata a 5 ml Preparare al momento dell uso APS Fresh gracchia quando si aggiunge acqua Se il vostro non sostituirlo con il brodo fresco 5 10 v v TEMED Catalizzatore 5 ml N N N N Tetramethylethylene diammina TEMED FW116 2 0 65M 05ml H20 deionizzata a 5 ml Preparare al momento dell uso Conservare in bottiglia di vetro scuro a temperatura ambiente lontano dalla luce TEMED infiammabile e deve essere erogato in una cappa aspirante e p25 p26 6 0 375 M Tris Cl 0 1 SDS pH 8 8 Risoluzione gel overlay 100 ml 1 5 M Tris Cl pH 8 8 Soluzione 2 0 375M 25ml 1096 SDS Soluzione 4 3 5 mm lmi H20 deionizzata a 100 ml Conservare a temperatura ambiente aO Saturo d acqua n butanolo Agitare n butanolo e H20 deionizzata in un imbuto separatore Rimuovere il acquosa inferiore di fase Ripetere questa procedura diverse volte Utiliz zare la fase superiore Conservare a temperatura ambiente 7 Tampone per elettroforesi 10X 0 25 M Tris 1 92 M Glycine 1 0 SDS Buffer Electrophoresis 10X 5 0 litri Aggiungi polveri lentamente a 4 litri di acqua deionizzata sotto
20. e gel sono stati eseguiti con cerniera laterale verso la parte superiore del serbatoio La cerniera sigilla anche il bordo inferiore del gel da perdite elettriche E meglio mettere cerniera cassette lato verso il basso per ottenere pi diritte fronti tintura Tampone inadeguata in alto Assicurarsi che il buffer si riempie modo Ya attraverso il distanziatore superiore per rendere il campo pi uniforme elettrica attraverso il gel e impedire il gel si asciughi Troppo tampone alla sommit del gel Assicurarsi che il buffer pieno modo Ye attraverso il distanziatore superiore di rendere pi uniforme il campo elettrico attraverso il gel e impedire la corrente di aggirare il gel in alto Controllare ricircolo buffer acceso e funziona correttamente Utilizzare un bagno d acqua refrigerata per mantenere la temperatura del tampone anche all interno del serbatoio Diminuire l impostazione corrente o tensione Curve fronte del colorante verso il basso aggrotta la fronte ai bordi Polimerizzazione scadente lungo i distanziali Assicurarsi per pulire le piastre bene ai bordi distanziatori che i lati sono liberi di sporco o grasso e che il gel sia completamente polimerizzata prima di rimuovere dal lanciatore Alimentazione rileva perdite di corrente Incrinata o rotta piastrina di allumina nel fondo del serbatoio di separazione Contatta Hoefer o il distributore Povero drenaggio del serbatoio Raccord
21. e e porre la parte posteriore della ruota piatta sulla panca Le due viti frontalino dovrebbe essere allentato ma pu rimanere in posizione La guarnizione triangolare deve essere messo in atto Posizionare il risparmiatore spazio nella parte posteriore della ruota Inserire un foglio di separazione sopra la saver spazio Inserire una cassetta di vetro sulla parte superiore del foglio primo Separatore Inserire un foglio di separazione sopra la cassetta di vetro Continuare a collocare alternando cassette di vetro e fogli di separaz ione per ogni fuso gel essere Completare il montaggio con l aggiunta di fogli di separazione suffici ente a riempire l incantatore appena sopra a filo Ingrassare leggermente la guarnizione nel frontalino con guarnizione gel per assicurare un casting perdite Sostituire la guarnizione il fron talino senza raggruppamento o allungare la guarnizione Completare il montaggio con un foglio separatore Far scorrere il frontalino in posizione sotto le due viti e serrare le viti Fissare i morsetti 6 rossi 3 per lato lungo i lati della ruota Assicurarsi che il tappo sulla porta inferiore della ruota prima di versare gel a mano Stand la ruota montata in posizione verticale su una superficie piana Viso Piastra Cassette di vetro Separator Foglio Space Saver Red Morsetto Gel Caster multipla e p11 Attenzione L acrilamide una neurotossina Estrema attenzione deve essere u
22. e collect s s par ment Contactez un repr sentant agr du fabricant pour obtenir des informations sur la mise au rebut de votre quipement Dieses Symbol kennzeichnet elektrische und elektronische Ger te die nicht mit dem gew hnlichen unsortierten Hausm ll entsorgt werden d rfen sondern separat behandelt werden m ssen Bitte nehmen Sie Kontakt mit einem autorisierten Beauftragten des Herstellers auf um Informationen hinsichtlich der Entsorgung Ihres Ger tes zu erhalten Este s mbolo indica que el equipo el ctrico y electr nico no debe tirarse con los desechos dom sticos y debe tratarse por separado Contacte con el repre sentante local del fabricante para obtener m s informaci n sobre la forma de desechar el equipo Denna symbol anger att elektriska och elektroniska utrustningar inte f r avyttras som osorterat hush llsavfall och m ste samlas in separat Var god kontakta en auktoriserad tillverkarrepresentant f r information ang ende avyttring av utrustningen e pv Fig 1 La Hoefer SE900 Funzione e descrizione La Hoefer SE900 verticale lastra di unit di elettroforesi su gel e destinato alla seconda dimensione di elettroforesi 2D Si progettato per i sistemi che utilizzano gel un singolo buffer all interno del serba toio gel come quelli descritti da Laemmli Entrambi i buffer utilizzati nelle camere anodiche e catodiche devono essere uguali Fino a 6 separazioni secondo gel dimensioni possono esse
23. e mai acqua alcool o miscele antigelo commerciale come il liquido di raffreddamento nel bagno d acqua di ricircolo Ci causer danni irreparabili al serbatoio di separazione Nota serbatoio di separazione chimicamente resistente ai comuni buffer elettroforetici ma non ai solventi organici o acidi forti e alcali Temperature superiori a 45 C pu causare acrilico a deformarsi Nota Non c bisogno di una ancoretta magnetica Le pompe del buffer circolare uniforme Fig 3 Separazione serbatoio Nota un leggero strato di tenuta gel e stato applicato all interno dei canali di guida nel serbatoio di separazione per consentire la cremagliera PAGE di scorrere facilmente nel serbatoio Non lavare Riapplicare se necessario vedere a pagina 9 istruzioni Seal Gel e p4 Separazione serbatoio Il serbatoio di separazione trasparente per consentire la visualizzazi one dei coloranti di rilevamento durante l elettroforesi La base della camera contiene una superficie ceramica di raffredda mento che contribuisce a raffreddare efficacemente il buffer all interno del serbatoio Si deve prestare attenzione a non far cadere nulla diret tamente sul piatto di ceramica Un sistema tampone pompa forze attraverso la superficie di raffreddamento e circola il buffer attraverso la regione centrale della vasca mantenendo una temperatura costante le cassette gel Porte di raffreddamento pu essere collegato a una temperatur
24. e specificaties Oververhittend zal onherstelbare schade aan de eenheid veroorzaken T rke Tietoa Finnish Jos tata varusteita k ytet n tavassa ei m ritetty Hoefer Inc suojelu ehk isty varusteille saattaa olla avuton T m valine suunnitellaan sis laboratoriok yt lle vain Vain lis varusteet ja osat hyv ksyiv t tai toimitti Hoefer Inc oheen voi k ytt k ytt miselle valvoalle ja servicing t m tuote e Vain k ytt k ytt j nnitett joka on CE merkitsi tai turvallisuus joka on todistanut aidoksi ohi joka on kansallisesti tunnustettnut testaaminen laboratoriota Turvallisuuskansi t ytyy olla paikallaan ennen yhdist minen e pii k ytt j nnitelyijyj k ytt j nnitteeseen Kiert kaikki k ytt j nnitevalvonnat ja irrottaa valtalyijyt ennen poistaminen turvallisuuskantta Kiert vain vesi tai 50 50 vesi ethylene glycol siin tapauksessa varustetun lamm nvaihtimen l pi l yhdist l mm nvaihdinta vesinapautukseen eik j hdytysnestel hteeseen miss vesipaine on unregulated Pakkasneste eik orgaaninen liuotin v lineen osassa ei esitele Koskaan Orgaaniset liuottimet aiheuttavat korvaamattoman vahingon yksikk n Ei k yt puskuria yll olevia l mp tiloja enint n m ritetyill teknisill t smennyksill Ylikuumeneminen aiheuttaa korvaamattoman vahingon yksikk n Information Importante French Si cet quipement est utili
25. eagenti o soluzioni sono vecchi e perdono la loro attivit quando esposta ad umidit Make up APS fresco tutti i giorni Se il persolfato di ammonio secco non scricchiolano quando l acqua viene aggiunta ad esso sostituire il prodotto con il brodo fresco Conservare il reagente ben chiuso e in un essiccatore per evitare l assorbimento di umidit Rimuovere ossigeno dall ambiente gel Degassare la soluzione di monomero 5 minuti prima di versare e quindi sovrapporre la superficie del gel con acqua satura di n butanolo Lasciare soluzioni gel a temperatura ambiente prima di casting un minimo di 20 C in particolare per i gel a bassa T Aumentare sia APS e TEMED del 30 50 Soluzioni con valori di pH estremi in particolare acido non pu polimeriz zare Controllare il pH del tampone di gel Polimerizzazione scadente lungo i distanziali Assicurarsi per pulire le piastre bene ai bordi distanziatori che i lati sono liberi di sporco o grasso e che il gel sia completamente polimerizzata prima di rimuovere dal lanciatore Gel troppo morbido troppo fragile o strisce bianche verticali proteine Regolare la concentrazione reticolante Crosslinker dovrebbe essere al 2 6 per C standard gel SDS dove 6 C g bis x 100 monomero g g bis Gel contiene turbinii Indica correnti convettive durante la polimerizzazione di solito da polimeriz zazione troppo veloce Se gel polimerizzato in 10 min catalizza
26. etergente laboratorio Sciacquare accurata mente con acqua prima e poi con acqua distillata Lastre di vetro deve essere lavato bene e asciugato completamente prima colata gel Collegare un estremit del gruppo di alimentazione in ingresso di alimentazione sul lato inferiore destro del SE900 Collegare l altra estremit in una presa di corrente a terra circolatori sono accesi con un interruttore sul lato inferiore destro del SE900 Fig 13 Collegare le porte di raffreddamento per un bagno esterno acqua di ricircolo se si desidera un raffreddamento attivo Nota Se lo si desidera etichette stampate su carta da filtro pu essere incluso nella cassetta Fogli di carta Whatman 1 filtro pu essere utilizzato per stampare i numeri identificativi dei gel tagliato in piccoli pezzi e posizionati negli angoli inferiori della cassetta Quando soluzioni gel vengono aggiunti i numeri saranno polimerizzati nel matrice gel consenta una pi agevole individuazione di gel seconda dimensione Attenzione bordi del vetro pu essere forte in modo da gestire le cassette di vetro con cura Fig 14 Multicaster montaggio Uso del Gel Caster multipla Casting Gel omogenee 1 2 o N O gl o 11 12 13 14 15 16 17 Assicurarsi che il caster e le cassette di vetro siano puliti e asciutti Chiudere ciascuna delle cassette di vetro assicurarsi che i bordi allineare filo Smontare la ruota pulita gel multipl
27. etta e posto nelle soluzioni di colorazione desiderata Attaccare un pezzo di tubo abbastanza lungo da raggiungere un lavan dino al connettore di scarico Fig 22 Inserire il connettore nella porta di scarico sul lato inferiore sinistro del SE900 dietro il blocco di Sicurezza nero Lasciare il serbatoio di scarico per gravit Il serbatoio si scarica al meglio avendo la linea di scarico di almeno 18 pollici 5O cm sotto il serbatoio Una volta svuotato reinserire rack vuoto PAGINA Riempire il serba toio con acqua deionied accendere le pompe di circolazione e per 5 10 minuti Spegnere le pompe e scarico di nuovo Estrarre il cestello PAGE e consentire ai componenti di asciugare all aria Rimuovere e lavare qualsiasi acrilammide residuo dal filtro di scarico sul fondo del serbatoio di separazione Sostituire il filtro di scarico in modo che sia inferiore a filo Cura e manutenzione Maneggiare il rack PAGE con cura per evitare di danneggiare i connettori a banana e fili elettrodi Non cadere oggetti sulla piastra ceramica sul fondo del serbatoio di separazione Se necessario pulire il serbatoio con un detergente neutro e risciac quare con acqua distillata Lasciare asciugare all aria e Le lastre di vetro puliti e distanziali con una soluzione diluita di un detergente laboratorio come RBS 35 e Sciacquare abbondantemente con rubinetto e acqua distillata Maneggiare le piastre con cura per evitare scheggia
28. ezza contiene i cavi ad alta tensione che si connet tono a un alimentatore esterno non fornito Il coperchio tenuto in posizione dalle interblocchi di sicurezza durante l elettroforesi Fig 8 I colorati cavi ad alta tensione hanno 4 spine di sicurezza mm che si interfacciano direttamente con alimentatori Hoefer Adattatori pu essere richiesto per collegare il SE900 ad altri alimentatori Control lare il collegamento prima di utilizzare il SE900 Cassette di vetro Le lastre di vetro sono 28 cm di larghezza x 21 cm di lunghezza Le cassette sono distanziali 1 mm di spessore di vetro incollate al suo posto e sono incernierate per un facile montaggio Fig 9 Sei cassette di vetro fornite con ogni SE900 1 0 Cassette possono essere ordinati separatamente come SE9102 1 1 0 E importante che le cassette essere posizionato con il lato cerniera verso il basso nel serbatoio di separazione durante l elettroforesi e p7 Fig 10 Gel caster multipla Fig 11 Multicaster linea di riempimento p8 Gel Caster multipla Il lanciatore multiplo gel incluso con il SE900 1 0 Fig 10 e possono essere ordinati separatamente come SE915 Il lanciatore multiplo gel viene utilizzato per lanciare fino a sette gel 1 mm di spessore allo stesso tempo Fogli separatori vengono collocati tra cassette di vetro prima del getto per mantenere le cassette si attac chino tra loro dopo la polimerizzazione Quan
29. i spostamento 50 di glicerina a 0 375 mM TrisCI 8 8 0 1 SDS 200 ml Glicerolo 100 ml 1 5M TrisCl ph 8 8 Soluzione 2 50 ml H20 deionizzata 50 ml Blu di bromofenolo 3 mg Mescolare bene 11 SDS equilibrazione soluzione tampone Questa soluzione viene utilizzata dopo IEF prima e seconda dimensione PAGE Le strisce IPG vengono immersi in soluzione in eccesso per aumen tare il pH del tampone striscia in modo che sia adatta per PAGE e per rivestire le proteine in SDS uniformemente in modo che la loro migrazione correttamente nel gel seconda dimensione Prepara 200 ml 6 M urea 75 mM Tris HCI pH 8 8 29 3 glicerolo 2 SDS 0 002 blu di bromofenolo Concentrazione finale Quantit Urea FW 60 06 6M 72 1 g 1 5M Tris HCI pH 8 8 soluzione stock 75 mM 10 0 ml Glicerolo 87 w w 29 396 v v 69 ml SDS FW 288 38 2 wiv 4 0 g Blu di bromofenolo 0 002 w v 4 mg H20 deionizzata per 200 ml Aliquotare in aliquote da 30 ml e congelare a 20 C o inferiore 24 centimetri IPG richiedono 5 10 ml per strip per passo equilibrio Pi brevi strisce possibile utilizzare il volume proporzionalmente meno per passo equilibrations e p27 p28 Gel Ricette Le ricette sono gel di Laemmli per 400 ml di una soluzione singola concentrazione sufficiente per sei 1 0 millimetri 25 x 20 cm gel Tabellare sono volumi di gel pori relativamente grandi 1096 inter vallo T cosi come piccoli pori gel 12 5 20 gamma T 5 e 7
30. ker per 10 15 minuti Dopo equilibrio scartare la prima soluzione di equilibrio in modo appropriato 6 Aggiungere 25 mg ml iodoacetamide IAA alla seconda aliquota di soluzione di equilibrazione 7 Aggiungere 6 5 ml di soluzione per ciascuno slot contenente una striscia di IPG 8 Posizionare il rocker per 10 15 minuti Dopo equilibrio eliminare la seconda soluzione di equilibrio in modo appropriato Equilibrazione seguito le strisce IPG sono posizionati sulla sommit del gel seconda dimensione e sigillato in posizione con la sovrapposizione agarosio Sigillando il IPG al Gel seconda dimensione 1 2 Fig 17 Applicando al strip IPG gel 3 seconda dimensione 4 Fig 18 Aggiunta di agarosio overlay Rimuovere il liquido residuo dalla parte superiore del gel seconda dimensione inclinando la cassetta e un angolo tamponando con un panno privo di pelucchi Applicare la striscia equilibrata IPG alla superficie del gel Fig 17 Una striscia di plastica sottile utile per delicatamente la IPG diret tamente contro la superficie del gel seconda dimensione Non premere la striscia in gel o i risultati possono essere distorti Evitare di inglo bare bolle d aria tra la Striscia ed il gel di seconda dimensione Sigillare la striscia IPG in atto mediante l applicazione a caldo agaro sio fuso sulla striscia di IPG Fig 18 Vedi Appendice A per ricetta suggerita Evitare l introduzione di bolle d aria durante
31. lamento per polimerizzare p13 Nota Rack Plate SE914 un accessorio utile per contenere temporaneamente le cassette gel caso di smontaggio del caster multiple gel e p14 Smontaggio del Caster multipla Gel 1 Posizionare la ruota verso il basso sulla sua schiena in un vassoio o nel lavandino Rimuovere le pinze rosse e le viti che fissano il frontalino al caster Sfilare il frontalino Rimuovere cassette di gel e fogli di riempimento Sciacquare al di fuori delle cassette gel per rimuovere l eccesso di acrilammide polim erizzata 5 Pulire le molteplici componenti caster gel con un detergente di labora torio Risciacquare e lasciare asciugare all aria IPG Strip equilibrazione Prima strisce IPG sono posizionati sulla sommit del gel seconda dimensione il buffer nelle strisce deve essere sostituita con un tampone appropriato per PAGE Equilibrare IPG strisce nei buffer equilibrazione appropriati Tipi camente un equilibrio due step prima con DTT e un secondo con iodoacetamide d risultati migliori rispetto a un solo passo equilibrio DTT La seguente procedura raccomandata Procedura di equilibrazione 1 Scongelare due aliquote della soluzione di equilibrazione 2 Aggiungere 10 mg ml di DTT una soluzione 3 Posizionare le strisce IPG nella reidratazione equilibrio vassoio o un tubo di vetro 4 Aggiungere 6 5 ml di soluzione per ciascuno slot contenente una striscia di IPG 5 Posizionare il roc
32. lycol genom varmen exchanger i s utrustad fall Inte kopplar v rmen exchanger till en vatten kran eller n got kylmedel k lla dar vattnet trycket ar unregulated Inf r aldrig kylv tska eller n got organiska l sningsmedel in i n gon del av instrumentet Organiskt l sningsmedel ska orsaka irreparable skada till enheten Anv nd inte med buffert temperaturer ver det h gsta angivna tekniska specifikationerna Overhettning skulle orsaka irreparabla skador p enheten piv Italian SH English SH French E German et Spanish Y Swedish et Rifiuti di apparecchiature elettriche ed elettroniche RAEE Questo simbolo indica che i rifiuti derivanti da apparecchiature elettriche ed elettroniche non devono essere smaltiti come rifiuti municipali indifferenziati e devono invece essere raccolti separatamente Per informazioni relative alle modalita di smantellamento delle apparecchiature fuori uso contattare un rappresentante autorizzato del fabbricante This symbol indicates that the waste of electrical and electronic equipment must not be disposed as unsorted municipal waste and must be collected separately Please contact an authorized representative of the manufacturer for information concerning the decommissioning of your equipment Ce symbole indique que les d chets relatifs l quipement lectrique et lectronique ne doivent pas tre jet s comme les ordures m nag res non tri es et doivent tr
33. na spina p6 PAGE Rack Il rack ha tre scopi 1 Si divide il serbatoio in camere anodiche e catodiche e supporti e guarnizioni dei cassetti gel verticalmente all interno del serbatoio di separazione con guarnizioni in gomma 2 Contiene gli elettrodi di platino filo che conducono la corrente durante l elettroforesi 3 Caratteristiche nella base creare il modello di circolazione per mantenere la temperatura costante e fornire raffreddamento effi cace se il SE900 collegato ad un bagno di acqua di ricircolo La pagina individua cremagliera a quattro canali in chiaro i lati del serbatoio Il rack PAGE ha un solo orientamento corretto Un taglio nella base Fig 6 si allinea con una chiave nel serbatoio di separa zione Se il rack PAGE inserita in modo errato la circolazione del buffer non funziona correttamente e il coperchio di sicurezza non si adatta Gli elettrodi terminano in connettori a banana che si connettono al coperchio di sicurezza Fig 7 Slot con guarnizioni in gomma accettare le cassette gel e tenerli verti calmente nel serbatoio di separazione Se una delle sei posizioni vuoto le guarnizioni in gomma eliminare le perdite elettriche senza la necessit di cassette vuote o riempitivi spazio Attenzione Installare sempre il coperchio di sicurezza prima dell uso Fig 8 Coperchio di sicurezza 1 P Fig 9 SE9102 1 1 0 cassetta vetro Coperchio di sicurezza Il coperchio di sicur
34. nacionalmente reconhecido testando laborat rio A tampa de seguranga deve estar em lugar antes de ligar o estoque de poder leva a um estoque de poder Desliga todos controlos de estoque de poder e desconecta os chumbos de poder antes de retirar a tampa de seguranga Circulam s gua ou 50 50 glicol de gua ethylene pelo exchanger de calor se for assim equiparam N o ligue o exchanger de calor a uma torneira de gua nem qualquer fonte de refrigerante onde a press o de gua n o regulado Nunca introduz anticongelante nem qualquer org nico solvente em qualquer parte do instrumento Org nico solvente causar agress o irrepar vel unidade N o opera com temperaturas de buffer acima do m ximo especificou especificac es t cnicas Superaquecer causar agress o irrepar vel unidade Informaci n Importante Spanish Si este equipo es utilizado en una manera no especificado por Hoefer Inc la protecci n proporcionado por el equipo puede ser da ada Este instrumento es dise ado para el uso interior del laboratorio s lo S lo accesorios y partes aprobaron o suministraron por Hoefer Inc puede ser utilizado para operar para mantener y para atender a este producto S lo utiliza una alimentaci n que es CE marc o la seguridad certificada por un nacionalmente reconocido probando el laboratorio La tapa de la seguridad debe estar en el lugar antes de conectar la alimentaci n lleva a una alimentaci n
35. ntamente applicare la sovrapposizione vicino alla superficie del gel da un lato avendo cura di evitare la miscelazione Lasciare che la sovrapposizione di fluire attraverso la superficie nudo Fig 16 Lasciare polimerizzare il gel per circa un ora p gel p Rimuovere la mascherina sciacquando la superficie del gel pi volte con acqua distillata Utilizzare tampone diluito gel come risciacquo finale Optional storage gel seconda dimensione pu essere temporanea mente memorizzati nella caster gel seconda dimensione pu anche essere rimosso dal caster e memorizzato 1 2 giorni immersi in tampone gel prima dell uso Vi il rischio che con una conservazione prolungata l acqua abosrb gel e la cassetta apre parzialmente portando a oblique fronti tinture Nota una buona idea fare pratica con l acqua e la pompa peristaltica per determinare empiricamente i volumi e le portate al espressi gel gradiente buone Nota Evitare bolle d aria nel tubo della pompa le bolle d aria interferisce con la formazione di pendenza adeguata Nota La soluzione di spostamento richiesto La pendenza non si former correttamente senza spostare il acrilammide dentro le cassette Esso consente inoltre di mantenere acrilammide dalla polimerizzazione nel tubo e nel fondo della ruota semplificando di pulizia La soluzione spostamento non deve entrare il fondo delle cassette Gradient Gel Gel gradiente lineari possono essere lanciato tr
36. o Ingresso Certificazioni di prodotto 28 x 21cm 25 x 20 cm 100 W 600 V 1000 mA 45 C Uso interno 4 40 C Umidit fino al 80 Altitudine fino a 2000 m Categoria di installazione Il Grado di inquinamento 2 12 psi 43 x 43 x 20 cm 10 1 kg 100 240 V 50 60 Hz 2A EN61010 1 2001 CE Fig 2 Il SE900 II serbatoio di separazione rack PAGE e coperchio di sicurezza Apertura della confezione e Inventory Scartare tutti i pacchetti con attenzione e confrontare i contenuti con il packing list assicurandosi che tutti gli elementi sono arrivati Se una parte manca rivolgersi all ufficio vendite locale Controllare tutti i componenti per i danni che possono essersi verificati mentre l unit era in transito Se una parte risulta danneggiata contattate immedi atamente Essere sicuri di mantenere tutto il materiale di imballaggio per richieste di risarcimento danni o per utilizzare qualora risultasse necessario restituire l unit Coperchio di sicurezza SE9056 PAGE Rack SE9054 Separazione serbatoio Manuale Utente SE900 IM a Gel Seal SE6070 Wonder Wedge SE1514 ef Tubing Kit Bath ricircolo SE908 Alimentatore con 115 Cord V e 230 V EU e UK Cord Filtri di scarico SE917 Il SE900 1 0 I sistema comprendente il SE900 sopra caster gel multipla 6 cassette di vetro Cassette di vetro Gel Caster multipla SE9102 1 1 0 SE915 e p3 Attenzione Non usar
37. o di scarico diventato intasato da detriti Delicatamente back flush acqua attraverso la linea di scarico Tempi insolitamente lungo periodo Troppo tampone alla sommit del gel Assicurarsi che il buffer pieno modo Ye attraverso il distanziatore superiore di rendere pi uniforme il campo elettrico attraverso il gel e impedire la corrente di aggirare il gel in alto Scarsa qualit del reagente Le soluzioni di acrilammide pu accumularsi acido acrilico nel tempo Non mantenere le soluzioni di acrilammide maga zzino pi di 3 mesi e acrilammide conservare a 4 C Buffer errato preparato Utilizza il modulo di base della Tris Non regolare il pH del tampone dopo la preparazione Controllare le impostazioni di alimentazione e regolare se necessario e p21 Problema Soluzione Strumento Problemi Nessuna tensione o corrente all inizio della corsa Lo strumento non collegato correttamente alla rete elettrica Assicurarsi che cavi di alta tensione sono collegate in corrette terminali ed sicuro In alcuni casi pu essere necessario adattatori Elettrodo rotto Verificare la continuit del filo con un voltmetro Il coperchio non fissato correttamente su connettori a banana Riposizionare il coperchio e controllare adatto saldamente in posizione Interruzione linea piombo HV Verificare la continuit del filo con un voltmetro Risultati 2D Problemi Striature di campione verti
38. ober Hill Road Holliston MA 01746 Numero verde 1 800 227 4750 Telefono 1 508 893 8999 Fax 1 508 893 0176 E mail support hoeferinc com Web www hoeferinc com Hoefer un marchio registrato di Hoefer Inc 2012 Hoefer Inc Tutti i diritti riservati Stampato negli Stati Uniti Hoefer
39. re eseguite contempo raneamente La separazione prima dimensione di 2 D elettroforesi delle proteine deve essere eseguita su gel di pH immobilizzati gradiente denominato IPG strisce in questo manuale Il IEF100 Hoefer puo essere utilizzato per generare separazioni prima dimensione in cui vengono separate le proteine da pl Le strisce concentrati vengono trasferiti al gel SE900 seconda dimensione lastra di separazione dimensioni Il SE900 offerto come un sistema di gel auto cast Le SE900 cassette di vetro sono 28 cm di larghezza e 21 cm di lunghezza produzione di gel di 25 cm x larghezza fino a 20 cm di altezza e 1 mm di spessore Il SE900 terr anche lastre di vetro e gel di altri fornitori Il SE900 il serbatoio di separazione come unit a s stante Il SE900 1 0 comprende il serbatoio di separazione una ruota gel multi pla e sei cassette di vetro pl Questa dichiarazione di conformit valida solo per lo strumento quando e utilizzato in ambienti di laboratorio e utilizzati cosi come forniti dal Hoefer Inc salvo alterazioni descritte nel manuale d uso e collegato ad altri marcati CE strumenti o prodotti raccomandati o approvati da Hoefer Inc p2 Specificazioni Gel Dimensioni piastra L x A Gel Dimensioni Massima watt Massima tensione Massima ampere Temperatura massima Condizioni operative ambientali Massima pressione dell acqua di ricircolo Dimensioni L x A x P Pes
40. rico di proteine o di provare un metodo di colorazione pi sensibile Campione troppo poco applicata al gel prima dimensione Controllare la concentrazione proteica del campione Equilibrazione passaggi troppo corto o troppo lungo Eseguire ogni passaggio di equilibratura per 10 15 minuti Regioni vuote nel gel seconda dimensione p22 Tris sali e SDS possono provocare alterazioni della posizione di messa a fuoco delle proteine nella prima dimensione Ridurre o eliminare questi composti dalla prima dimensione Bolle tra la striscia e il gel seconda dimensione Informazioni per l ordinazione Prodotto Quantit Codice Formato grande PAGE 1 SE900 Formato grande PAGE completa 1 SE900 1 0 Kit tubi per il ricircolo Chiller 1 SE908 Multicaster 1 SE915 Space Saver Plate Gel Caster multipla 1 SE912 Glass Cassette cerniera 25 x 20 1 mm 1 SE9102 1 1 0 Plate Rack 1 SE914 Filtro di scarico 3 SE917 Gel Seal 1 SE6070 Prodotti correlati Unit di messa a fuoco isoelettrica 1 IEF100 Ricircolo Chiller 1 RCB20 PS300B Alimentazione 1 PS300B Acrilammide 1 kg GR141 1 Agarosio 500 g GR140 500 Ammonio persolfato 10 g GR152 10 Brilliant Blue G 258 GR134 25 Brilliant Blue R 25g GR135 25 Blu di bromofenolo 10 g GR120 10 Ditiotreitolo DTT 58 GR122 5 Glicerolo 1L GR124 1 Glycine 1 kg GR125 1 N N metilene bis acrilammide 100 g GR142 100 Sodio dodecil solfato 500 g GR126 500 TEMED 258 GR151 25 Tris 1 kg GR132 1 Tris Glicina SD
41. rumentet Organiske oplosningsmidler vil for rsage uboelig skade til enheden Driver ikke med stedpudetemperaturer over maksimummet specificerede tekniske specifications Overheding vil for rsage uboelig skade til enheden Belangrijke Informatie Dutch Indien deze uitrusting in een manier wordt gebruikt die niet door Hoefer Inc is gespecificeerd de bescherming die door de uitrusting is verzorgd kan worden geschaad Dit instrument is voor binnenlaboratoriumgebruik enkel ontworpen Enkel onderdelen en delen keurden goed of leverden door Hoefer Inc kan voor het bedienen worden gebruikt handhavend en onderhouden van dit product gebruik Enkel een netvoeding die CE is markeerde of veiligheid die door een is gecertificeerd die nationaal is herkend testene laboratorium Het veiligheidsdeksel moet in plaats voor het verbinden van de netvoeding leidt tot een netvoeding zijn Doe alle netvoedingscontroles Uit en koppel los de machtleiding voor het verwijderen van het veiligheidsdeksel Circuleer enkel water of 50 50 water ethyleenglycol door de hitte exchanger zo ja uitrust Verbind de hitte exchanger naar een waterkraan of koelmiddelbron niet waar de waterdruk niet geregulariseerd is Stel Nooit antivriesmiddel of organische oplosmiddelen in deel van het instrument voor Organische oplosmiddelen zullen onherstelbare schade aan de eenheid veroorzaken Bedien niet met buffertemperaturen boven het maximum specificeerde technisch
42. s dans une mani re pas sp cifi par Hoefer Inc la protection fourni par l quipement pourrait tre diminu e Cet instrument est concu pour l usage de laboratoire int rieur seulement Seulement les accessoires et les parties ont approuv ou ont fourni par Hoefer Inc pourrait tre utilis pour fonctionner maintenir et entretenir ce produit utilise Seulement une alimentation qui est CET a marqu ou la s curit certifi par un nationalement reconnu essayant le laboratoire Le couvercle de s curit doit tre sa place avant connecter l alimentation mene une alimentation Tourner tous contr les d alimentation de et d brancher les avances de pouvoir avant enlever le couvercle de s curit Circuler seulement de l eau ou 50 50 glycol d eau thyl ne par l exchanger de chaleur si si quip Ne pas connecter l exchanger de chaleur un robinet d eau ou la source d agent de refroidissement o la pression d eau est non r gul e Ne Jamais introduire d antigel ou du dissolvant organique dans n importe quelle partie de l instrument Les dissolvants organiques causeront des dommages irr parables l unit Ne pas fonctionner avec les temp ratures de tampon au dessus du maximum a sp cifi des sp cifications techniques La surchauffe causera des dommages irr parables l unit Wichtige Informationen German Wenn diese Ausr stung gewisserma en nicht angegeben durch Hoefer Inc verwendet
43. sCl 50 0 50 0 50 0 50 0 50 0 50 0 pH 8 8 Soluzione 2 10 SDS Soluzione 3 2 0 2 0 2 0 2 0 2 0 2 0 H20 deionizzata 83 0 66 5 49 9 33 3 16 6 0 0 10 APS Soluzione 4 2 0 2 0 2 0 2 0 2 0 2 0 10 TEMED Gol 5 0 46 0 34 0 27 0 23 0 20 0 17 Glycerol 12 50 12 50 12 50 12 50 12 50 12 50 Volume finale 200 0 200 0 200 0 200 0 200 0 200 0 e p29 e p30 Appendice B Riferimenti Sistemi di gel denaturante Laemmli U K Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T Nature 227 680 685 1970 Elettroforesi bidimensionale Anderson Leigh and Anderson Norman G High resolution two dimensional electrophoresis of human plasma proteins Proc Natl Acad Sci USA 74 5421 5425 1977 Anderson L Tiwo Dimensional Electrophoresis Operation of the ISO DALT System Second Edition Large Scale Biology Press 1991 O Farrell P H High resolution two dimensional electrophoresis of proteins J Biol Chem May 25 250 10 4007 4021 1975 Bjellqvist B et al Isoelectric focusing in immobilized pH gradients principle methodology and some applications J Biochem Biophys Methods 6 317 339 1982 Gorg A et al The current state of two dimensional electrophoresis with immobilized pH gradients Electrophoresis 9 531 546 1988 G rg A Two dimensional electrophoresis with immobilized pH gradients current state Biochem Soc Trans 21 130 132 1993 Hoefer Inc 84 Oct
44. t for innend rs laboratoriumbruk bare Bare tilbehor og deler godkjente eller forsynte ved Hoefer Inc kan bli brukt for drive vedlikeholde og betjene dette produktet bruker Bare en kraftforsyning som er CE merket eller sikkerhet som ha blitt sertifisert av et som nasjonalt ha blitt anerkjent prover laboratorium Sikkerheten lokket m vaere p plass for forbinding kraftforsyningene blyene til en kraftforsyning Vender all kraftforsyningsstyring av og frakopler kreftene blyene for fjerning sikkerheten lokket Sirkulerer bare vann eller 50 50 vann ethylene glykol gjennom oppvarmingen veksleren i s fall utstyrer Ikke forbind oppvarmingen veksleren til en vanntapp eller noe kj lemiddelkilde hvor vannet e piii trykket er unregulated Introduserer Aldri antifreeze eller noe organisk losemiddel inn i noe del av instrumentet Organiske losemiddler vil for rsake irreparabel skade p enheten Driver med buffertemperaturer over maksimum ikke spesifiserte teknisk spesifikasjoner overoppheting vil for rsake irreparabel skade p enheten Wazne Informacje Polish Je eli ten sprz t jest wykorzystywany w spos b nie okre lone przez Hoefer Inc do ochrony przewidzianej przez urz dzenie mo e zosta obni ony Instrument ten jest przeznaczony do u ytku w laboratoriach kryty tylko Tylko akcesori w i cz ci zatwierdzone lub dostarczone przez Hoefer Inc mog by wykorzystane do eksploatacji utrzymania
45. tilizzato durante la manipolazione e preparazione delle soluzioni di acrilammide Fig 15 Versare la soluzione in un flusso lento continuo Fig 16 Applicazione di overlay Nota Un gel di impilamento pu essere utilizzato se desiderato ma non necessario Nota necessario rimuovere eventuali sovrapposizioni butanolo prima di registrare i gel della ruota Lasciando in butanolo l incantatore pu portare a sbiancamento e la fragilit della acrilico p12 Preparare la soluzione di acrilammide 1 Vedi Appendice A per SDS PAGE ricette Per colata sei SE9102 1 1 0 gel 400 ml necessaria De aerare la soluzione di gel per 5 minuti Aggiungere I iniziatore 10 w v APS e la catalizzatore 10 v v TEMED appena prima colata gel Versare la soluzione di gel nel canale nella parte posteriore della ruota La soluzione fluir lungo il canale e riempire i casssettes dal basso Fig 15 TEMED viene diluito al 10 per una migliore distribuzione durante la miscelazione delle soluzioni gel Versare la soluzione come un lento flusso continuo Provare a minimiz zare l introduzione di bolle d aria nel flusso Riempire soluzione di 0 5 1 cm sotto la parte superiore della lastra di vetro per lasciare spazio per la striscia IPG e una guarnizione agarosio Sovrapposizione ciascun gel con un sottile strato di acqua satura n butanolo o tampone gel diluito per ottenere il miglior superficie sulla sommit del gel Le
46. tore troppo Ridurre la concentra zione di persolfato di ammonio e TEMED del 25 Se gel polimerizzato in 5O min non catalizzatore sufficiente Aumentare la concentrazione di persolfato di ammonio e TEMED del 50 Assicurarsi che le soluzioni gel sono a temperatura ambiente durante il lancio I gel sono espressi contemporaneamente diverse dimensioni p20 Attendere un minuto prima sovrapponendo ciascun gel in modo che la soluzione risolve Utilizzare la stessa quantit di sovrapposizione su ciascun gel di separaz ione Aggiungere l overlay in modo uniforme tutta la superficie del gel Problema Soluzione Gradient gel stratificazione irregolare Aggiungere saccarosio 15 concentrazione finale o glicerolo 25 concen trazione finale alla soluzione di monomero alta cento Soluzioni pompato in troppo veloce Aggiungere una piccola quantit di blu di bromofenolo alla soluzione pesante per monitorare la formazione di pendenza Consentire soluzioni per sottofondo senza miscelazione eccessiva Attenzione Quantit eccessive di blu di bromofenolo inibire la polimerizzazione Elettroforesi Run Problemi Curve fronte del colorante fino ndr sorride ai bordi Questo indica corrente di dispersione nei distanziatori Assicurarsi per pulire le piastre bene ai bordi distanziatori che i lati sono liberi di sporco o grasso e che il gel sia completamente polimerizzata prima di rimuovere dal lanciator
47. ture e non tirare o sottolineare la cerniera di gomma e Non autoclave i componenti del sistema Non riscaldare una parte superiore a 45 C e Non usare solventi organici soluzioni di pulizia abrasivi forti o acidi o basi forti per pulire le camere Se il rack PAGE inizia ad aderire in quanto inserito nel serbatoio applicare uno strato sottile di gel tenuta all interno dei quattro canali con un dito guantato Assistenza tecnica e riparazione Hoefer Inc offre un completo supporto tecnico per tutti i nostri prodotti Se avete domande su come utilizzare questo prodotto o volete organizzare per ripararlo si prega di chiamare o inviare un fax il Hoefer locale Inc rappresentante e p19 Risoluzione dei problemi Problema Soluzione Problemi di casting Gel caster perdite Gel polimerizzazione scadente o incompleta Se lo stack troppo alto il pannello frontale non pu trovarsi ben saldo contro la guarnizione Rimuovere le piastre di riempimento o cassette fino alle guarnizioni di tenuta Applicare un sottile strato di gel tenuta alla guarnizione in schiuma ogni volta che viene utilizzato l apparecchio Controllare la guarnizione in schiuma per crepe o scheggiature e sostituirli se necessario Piastra Caster viso non correttamente allineato Controllare che il frontalino posizionato in modo uniforme sul caster Utilizzare solo magazzino recente dei reagenti di altissima qualit APS r
48. wird kann der durch die Ausr stung zur Verf gung gestellte Schutz verschlechtert werden Dieses Instrument wird f r den Innenlaborgebrauch nur daf r entworfen Nur Zus tze und Teile genehmigten oder lieferten durch Hoefer Inc kann f r das Funktionieren das Aufrechterhalten und die Wartung dieses Produktes verwendet werden Verwenden Sie nur eine Energieversorgung die CE gekennzeichnet oder durch ein national anerkanntes Probelaboratorium bescheinigte Sicherheit ist Der Sicherheitsdeckel muss im Platz vor dem Anschlie en der Energieversorgung sein f hrt zu einer Energieversorgung Alle Energieversorgungssteuerungen abdrehen und die Macht trennen f hrt vor dem Entfernen des Sicherheitsdeckels Nur Wasser oder 50 50 Glykol des Wassers Athylens durch den W rmeaustauscher wenn so ausgestattet in Umlauf setzen Verbinden Sie den W rmeaustauscher mit einem Wasserklaps oder jeder K hlmittel Quelle nicht wo der Wasserdruck ungeregelt wird F hren Sie nie Frostschutzmittel oder jedes organische L sungsmittel in jeden Teil des Instrumentes ein Organische L sungsmittel werden nicht wiedergutzumachenden Schaden der Einheit verursachen Mit Puffertemperaturen ber angegebenen technischen Spezifizierungen des Maximums nicht funktionieren Die berhitzung wird nicht wiedergutzumachenden Schaden der Einheit verursachen Informazioni Importanti Italian Se quest apparecchiatura usata in un modo specificato da
Download Pdf Manuals
Related Search