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Correlación de parámetros de biometría hemática
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1. 1600 1400 1200 1000 800 600 400 200 Advia 120 T T 0 500 1000 1500 BC 6800 y 1 0784x 0 3457 r 0 989 e PLT Lineal PLT Figura 3 Correlaci n de la cuenta de plaquetas entre el Advia 120 y el BC 6800 www medigraphic com patologiaclinica 234 Montiel Cervantes LA et al Evaluaci n de la cuenta de c lulas sangu neas en el analizador hematol gico BC 6800 HGB 25 20 15 E 3 10 gt 0 T T T 0 5 10 15 20 BC 6800 y 0 9781x 0 6457 HGB r 0 9701 Lineal HGB Figura 4 Correlaci n de la cuenta de hemoglobina entre el Advia 120 y el BC 6800 HCT 70 60 50 3 40 5 3 30 z 20 10 4 0 T T 0 20 40 60 80 BC 6800 y 0 9974x 0 5009 HCT r 0 9237 Lineal HCT Figura 5 Correlaci n de la cuenta de hematocrito entre el Advia 120 y el BC 6800 Cuadro II Recuento manual de reticulocitos versus automatizado en el BC 6800 en muestra de paciente con anemia 9500 12 000 100 000 Total Total 500 2 000 ICSH f rmula IMSS f rmula ICSH f rmula IMSS f rmula BC 6800 RET 18 79 3 24 3 35 377 3 92 4 46 RBC 538 2 014 3 35 3 92 Observador 1 Total Total 500 2 000 100 000 500 2 000 ICSH f rmula IMSS f rmula ICSH f rmula IMSS f rmula BC 6800 RET 18 78 3 24 3 35 3 73 3 87 4 46 RBC 538 2 014 3 3 3 87 Observador 2 N mero de
2. of eS Vario vo Palabras clave Diferencial evaluaci n analizador hematol gico reticulocitos Key words Differential evaluation hematology analyzer reticulocytes Investigador Asociado Investigador Principal Laboratorio de Hematolog a Especial Departamento de Hematolog a Hospital de Especialidades Dr Antonio Fraga Mouret del Centro M dico Nacional La Raza Correspondencia Laura Arcelia Montiel Cervantes Seris y Zaachila s n Colonia La Raza Delegaci n Azcapotzalco 02990 M xico D F Tel 57245900 ext 23213 E mail lauramontielcervantes Coutlook com Recibido 22 09 2015 Aceptado 01 10 2015 Revista Latinoamericana de Patolog a Cl nica Correlaci n de par metros de biometr a hem tica entre dos analizadores y cuenta reticulocitaria manual y automatizada Laura Arcelia Montiel Cervantes Gloria Hern ndez Neri Gerardo Vargas Rend n RESUMEN Los laboratorios de hematolog a requieren instrumentos innovadores que provean mayor informaci n sobre las anormalidades celulares el analizador BC 6800 Mindray Medical Systems realiza una tinci n fluorescente que permite conocer el ndice de DNA RNA de las c lulas muestra una excelente sensibilidad y buen desempe o en la velocidad del proceso de muestras cuantifica reticu locitos normoblastos y plaquetas inmaduras entre otros par metros Se evalu el desempe o del BC 6800 y se anal
3. 0 19 0 05 0 51 1 60 12 41 CV 3 1 4 4 5 Alto Media 20 31 5 57 17 37 56 11 455 42 DS 0 42 0 07 0 25 0 65 9 16 CV 2 1 1 1 2 Rev Latinoam Patol Clin Med Lab 2015 62 4 230 235 www medigraphic com patologiaclinica Montiel Cervantes LA et al Evaluaci n de la cuenta de c lulas sangu neas en el analizador hematol gico BC 6800 233 An lisis estad stico e Se realizar un an lisis descriptivo de la informaci n utilizando medidas de tendencia central y dispersi n media desviaci n est ndar mediana percentiles 25 y 75 e Se correlacionar n los resultados de los dos equi pos con la prueba de correlaci n de Pearson las cantidades de hemoglobina cantidad de eritrocitos concentraci n media de hemoglobina corpuscular hemoglobina corpuscular media volumen globular medio cantidad de leucocitos y plaquetas Se considerar como estad sticamente significativo un valor de p lt 0 05 e Se utilizar el programa SPSS v18 0 RESULTADOS El an lisis estad stico del BC 6800 mostr un buen des empe o con coeficientes de variaci n menor de 5 en todos los casos cuadro l Se procesaron 370 muestras de pacientes en ambos instrumentos para determinar los coeficientes de co rrelaci n La correlaci n entre ambos instrumentos fue excelente El coeficiente de correlaci n para los leucoci tos WBC fue de 0 9976 para los eritrocitos RBC fue de 0 9923 plaquetas PLT 0 989 hemoglobina HGB 0 970
4. apertura de conteo Eritrocitos y plaquetas el m todo de impedancia enfocada minimiza la interferencia tradicionalmente en contrada en la impedancia convencional para producir histogramas gaussianos Por este motivo los par metros relacionados con el histograma tales como volumen corpuscular medio coeficiente de variaci n del tama o eritrocitario y desviaci n est ndar del tama o eritrocitario son m s precisos y proporcionan informaci n cl nica m s confiable El BC 6800 cuenta con programas para el reporte de 37 par metros tales como leucocitos porcentaje de lin focitos monocitos neutr filos bas filos eosin filos n mero total de eritrocitos concentraci n de hemoglobina hematocrito volumen corpuscular medio hemoglobina corpuscular media concentraci n media de hemoglo bina corpuscular eritrocitaria coeficiente de variaci n del tama o eritrocitario desviaci n est ndar del tama o eritrocitario reticulocitos en porcentaje y por microlitro reticulocitos inmaduros alta fluorescencia reticulocitos de baja y mediana fluorescencia normoblastos en por centaje y en microlitro plaquetas volumen plaquetario medio ancho de distribuci n plaquetaria plaquetocrito n mero de plaquetas grandes porcentaje y n mero total de granulocitos inmaduros fracci n de plaquetas inma duras entre otros 8 Lo anterior conlleva a proporcionar resultados confia bles al derechohabiente con patolog a hematol gic
5. cellular abnormalities The BC 6800 Mindray Medical Systems hematology analyzer makes a fluorescent staining specific for genetic material which permits to determine the rate of DNA RNA inside the cell providing information about the maturity of the cells the equipment performance was adequate in terms of sensitivity through put reticulocyte count immature platelet normoblasts and other parameters The study was conducted to evaluate the performance of the BC 6800 and to determine whether there is a good correlation between the parameters of cell blood count in oncohematological samples obtained from patients processed by the Advia 120 and BC 6800 equip ments a comparative study regarding the reticulocyte manual counting and the BC 6800 was performed The study was conducted at the Department of Special Hema tology of the Hospital Centro M dico Nacional La Raza in December 2014 Statistical analysis using measures of central tendency and dispersion was performed The results between the two instruments were correlated using the Pearson method An average correlation of 0 9745 was found between the parameters performance of Advia 120 and BC 6800 in oncohematological samples The manual reticulocyte counting versus the automated counting in the BC 6800 showed a correlation of 0 9435 Analizadores de hematolog a El ADVIA 120 es un analizador con una exce lente sensibilidad y especificidad para detectar la presencia de c lulas
6. 1 y para el hemat crito HCT fue de 0 9237 las figuras 1 a 5 muestran respectivamente las correlaciones Para la comparaci n de la cuenta manual reticulocita ria versus el BC 6800 se realizaron dos conteos manuales WBC 500 450 400 350 300 250 200 150 100 50 0 Advia 120 T T T T T 0 100 200 300 400 500 600 BC 6800 y 0 8177x 0 7895 r 0 9976 WBC Lineal WBC Figura 1 Correlaci n de la cuenta de WBC entre el Advia 120 y el BC 6800 Rev Latinoam Patol Clin Med Lab 2015 62 4 230 235 con dos observadores diferentes cada uno de ellos rea liz el conteo total de 500 c lulas rutina laboratorio del IMSS y 2 000 c lulas recomendaci n de la ICSH ambos hicieron el recuento de reticulocitos en muestras pato l gicas diagnosticadas con anemia y anemia apl sica en contraste el analizador BC 6800 cont 100 000 c lulas Los cuadros II y IlI muestran las diferencias entre la cuenta manual con dos observadores de 500 y 2 000 c lulas versus las 100 000 c lulas contadas por el anali zador en una muestra de paciente con anemia y otra con anemia apl sica respectivamente la correlaci n promedio encontrada fue de 0 9435 RBC 8 7 6 g 5 w 4 3 x 3 2 1 0 T T T 0 2 4 6 8 BC 6800 y 1 0066x 0 0435 RBC 1 0 9923 Lineal RBC Figura 2 Correlaci n de la cuenta de RBC entre el Advia 120 y el BC 6800 PLT 1800 NR
7. H f rmula IMSS f rmula ICSH f rmula IMSS f rmula BC 6800 FRET 32 113 5 93 5 28 SS 4 44 RBC 508 2 028 6 30 5 57 Observador 1 Total Total EN TLN C OO 500 2 000 ICSH f rmula IMSS f rmula ICSH f rmula IMSS f rmula BC 6800 FRET 34 115 6 27 5 37 5 67 4 44 RBC 508 2 028 6 69 5 67 Observador 2 N mero de c lulas contadas manualmente por 2 observadores a 500 y 2 000 eritrocitos vs las 100 000 c lulas contadas por el analizador en muestras de pacientes con anemia y otra con anemia apl sica respectivamente el instrumento puede analizar muestras de l quidos corporales sin necesidad de reactivos adicionales esta caracter stica fue observada durante la evaluaci n y se obtuvieron recuentos celulares consistentes con los procedimientos manuales Con base en los resultados obtenidos y el trabajo de rutina realizado con el instrumento BC 6800 podemos afirmar que el analizador arroja resultados consistentes que el mantenimiento es sencillo y que es un equipo ro busto y confiable para el trabajo de rutina del laboratorio de hematolog a especial AGRADECIMIENTOS Agradecemos al Instituto Mexicano del Seguro Social por su apoyo durante el desarrollo del protocolo de validaci n CONFLICTO DE INTERESES Los investigadores principales y asociados declaran que no existen conflictos de inter s financieros ni de ning n tipo REFERENCIAS 1 International Committee for Standardization in Haemotology ICSH Protocol fo
8. a en menos tiempo de tal manera que el cl nico pueda aplcar el tratamiento oportuno www medigraphic com patologiaclinica 232 OBJETIVOS Evaluar el desempe o del analizador hematol gico BC 6800 determinar la correlaci n entre los par metros de la biometr a hem tica obtenidos en comparaci n con el Advia 120 y evaluar la cuantificaci n autom tica de los reticulocitos versus la cuenta manual de reticulocitos MATERIAL Y M TODOS Dise o de estudio Se realiz un estudio de observaci n prospectiva trans versal comparativo y abierto Universo de estudio Muestras El estudio se realiz utilizando muestras frescas de san gre perif rica procesadas dentro de las primeras cuatro horas de su recolecci n provenientes de la poblaci n de pacientes hospitalizados en el Servicio de Hematolog a del Hospital de Especialidades del CMN La Raza con diagn stico cl nico y morfol gico de padecimientos he matol gicos durante el periodo comprendido del 3 de noviembre al 3 de diciembre de 2014 Material Controles valorados que deben probarse en un periodo verificando que los resultados sean acorde a lo esperado controles para f rmula roja leucocitaria plaquetaria reticulocitaria y de normoblastos alto normal y bajo reactivos para el equipo Advia 120 Reactivos para el equipo BC 6800 Montiel Cervantes LA et al Evaluaci n de la cuenta de c lulas sangu neas en el analizador hematol gico BC 6800 Criterios
9. anormales sin embargo el instrumento no cuantifica las c lulas emite alarmas que tienen que ser corroboradas por los profesionales de laboratorio El instrumento utiliza el principio de tinci n con peroxidasa para diferenciar las poblaciones de los linajes mieloides y linfoides Antes de reportar los resultados del paciente el laboratorio valida www medigraphic com patologiaclinica Montiel Cervantes LA et al Evaluaci n de la cuenta de c lulas sangu neas en el analizador hematol gico BC 6800 231 y toma las acciones apropiadas de acuerdo con los procedimientos de operaci n establecidos Las alarmas plaquetarias s lo se activan si las plaquetas son grandes lo mismo que el indicador de normoblastos Analizador de hematolog a BC 6800 El BC 6800 opera bajo el principio de la tecnolog a de cubo basado en la dispersi n de luz con fluorescencia llamado tambi n cubo de an lisis celular para caracterizar y cuantificar los leucocitos eritrocitos plaquetas reticulocitos y normo blastos tambi n utiliza el m todo de impedancia enfoca da de corriente directa la cuantificaci n de eritrocitos y plaquetas La medici n de hemoglobina se realiza por co lorimetr a El cubo de dispersi n de luz con fluorescencia es una tecnolog a innovadora que se aplica para realizar un an lisis m s confiable de las c lulas sangu neas esta tecnolog a permite al equipo la capacidad de diferenciar entre leucocitos reticulocitos y normobla
10. c lulas contadas manualmente por 2 observadores a 500 y 2 000 eritrocitos vs las 100 000 c lulas contadas por el analizador en muestras de pacientes con anemia y otra con anemia apl sica respectivamente DISCUSI N El analizador BC 6800 cumple con el desempe o espe rado de acuerdo con el protocolo de la NCCLS National Committee for Clinical Laboratory Standards as como con las especificaciones lineamientos y l mites establecidos por el fabricante en el manual de operaciones La correlaci n de los par metros entre el Advia 120 y el BC 6800 fue excelente de entre 0 9237 a 0 9976 Rev Latinoam Patol Clin Med Lab 2015 62 4 230 235 El BC 6800 present una correlaci n promedio de 0 9435 en la cuenta de reticulocitos al compararse con la cuenta manual es importante tener en cuenta que el equipo es m s exacto al tomar como referencia la cuenta total de 100 000 c lulas El BC 6800 orient positivamente el diagn stico hematol gico en pacientes con padecimientos tales como anemias y leucemias gracias a su tecnolog a de fluorescencia ptica en tres dimensiones asimismo www medigraphic com patologiaclinica Montiel Cervantes LA et al Evaluaci n de la cuenta de c lulas sangu neas en el analizador hematol gico BC 6800 235 Cuadro III Recuento manual de reticulocitos versus automatizado en el BC 6800 en muestra de paciente con anemia apl sica 0500 12 000 100 000 Total Total 500 2 000 ICS
11. de realizar la revisi n microsc pica por personal especializado Reticulocitos los par metros relacionados con la de tecci n de reticulocitos proporcionan informaci n sobre el estado de la eritropoyesis y apoyan en el diagn stico diferencial y o monitoreo terap utico de las anemias Mediante la tecnolog a del cubo de fluorescencia los reticulocitos se diferencian de otras c lulas eritroides Rev Latinoam Patol Clin Med Lab 2015 62 4 230 235 por su patr n de tinci n fluorescente Adem s de los par metros tradicionales como el n mero y porcentaje de reticulocitos el BC 6800 proporciona informaci n re lativa a reticulocitos inmaduros los cuales pueden ayudar en el diagn stico temprano de anemia y monitorear la respuesta de la m dula sea en la terapia hematol gica Plaquetas las plaquetas pueden ser identificadas mediante la tecnolog a del cubo de dispersi n de otras poblaciones de c lulas que interfieren El resultado ob tenido del n mero de plaquetas por este m todo evita la interferencia de eritrocitos microc ticos fragmentados plaquetas grandes y o conglomerados de plaquetas M todo de impedancia enfocada de corriente directa El m todo de impedancia enfocada de corriente directa utiliza dos fluidos envolventes para asegurar un ambiente confiable para el conteo celular Las c lulas hidrodin micamente dirigidas se miden por la resistencia al paso el ctrico entre los electrodos colocados en la
12. de selecci n Criterios de inclusi n Muestras de biometr a hem tica EDTA de menos de cuatro horas de haber sido extra das provenientes de pacientes hospitalizados en el Servicio de Hematolog a del HECMNR mayores de 16 a os con problemas hematol gicos Con valores de hemoglobina desde 4 0 hasta 18 0 g dL leucocitos desde 100 hasta 400 000 por microlitro plaquetas desde 8 000 hasta 1 500 000 por microlitro reticulocitos desde cero hasta 70 0 y muestras que contengan normoblastos No se requiere firma de consentimiento informado debido a que las muestras que se utilizar n ser n las de desecho de los estudios de rutina el investigador prin cipal garantizar la privacidad de los resultados Criterios de no inclusi n Muestras de pacientes que hayan sido tomadas de cat ter Criterios de eliminaci n Muestras de pacientes que presenten co gulos Tama o de la muestra correlaci n entre dos va riables num ricas Za Zp n bin E 3 2 1 r en la que a 0 01 Za 2 576 Z 1 282 Potencia 1 P 0 9 r 0 99 cada par metro x 13 Cuadro I An lisis de reproducibilidad en la cuenta de leucocitos WBC eritrocitos RBC hemoglobina HGB hematocrito HCT y plaquetas PLT procesados en el BC 6800 WBC x10 uL RBC 10 uL HGB g dL HCT PLT x10 uL Bajo Media 3 98 2 51 6 12 20 65 6l DS 0 09 0 03 0 08 0 34 3 26 CV 2 1 1 2 5 Normal Media 7 47 5 58 13 73 44 09 244 31 DS
13. ess for classifying and counting leukocytes Patent No US 8685661 B2 Date of patent 2014 Apr 1 Shao J et al United States Patent Asymetric cyanine fluorescent dyes compositions and their use in staining biological samples Patent No US 8067602 B2 Date of patent 2011 Nov 29 Dawson B Trapp RG M todos de medicina basada en evidencias Cap tulo 8 En Bioestad stica m dica 3a edici n M xico Manual Moderno 2002 pp 203 232 www medigraphic com patologiaclinica
14. iz la correlaci n entre los par metros de la biometr a en muestras de pacientes oncohematol gicos obtenidos en los equipos Advia 120 y BC 6800 adem s se compar el desempe o del BC 6800 en la cuenta reticulocitaria versus la cuenta manual Para lo anterior se realiz un estudio pros pectivo transversal y comparativo en cuanto al desempe o de los equipos El presente estudio se llev a cabo en el Servicio de Hematolog a del Hospital de Especialidades del CMN La Raza en diciembre de 2014 Los resultados entre ambos instrumentos se correlacionaron utilizando el m todo de Pearson Se encontr una correlaci n promedio de 0 9745 entre los par metros de la biometr a hem tica de muestras de pacientes oncohematol gicos obtenidos en el Advia 120 y el BC 6800 en cuanto a la cuenta manual y automatizada de reticulocitos la correlaci n observada fue de 0 9435 INTRODUCCI N desarrollo de nuevas tecnolog as ha mejorado los equipos de apoyo para el laboratorio de patolog a este hecho tiene una importante repercusi n en la emisi n de un resultado de laboratorio exacto preciso y en tiempo En el laboratorio de hematolog a se sugiere el uso del protocolo propuesto por el International Committee for Standardization in Haematology ICSH para la evaluaci n de analizadores hematol gicos Rev Latinoam Patol Clin Med Lab 2015 62 4 230 235 ABSTRACT Laboratories need technologies that provide more informa tion about
15. r evaluation of automated blood cell counters Clin Lab Haemato 1984 6 69 84 Rev Latinoam Patol Clin Med Lab 2015 62 4 230 235 10 Manual del operador Sistema de hematolog a ADVIA 120 REF 01591698 06750104 01 RevB CE V 3 01 00 Siemens Health care Diagnostics Inc 2008 Malin MJ Fan SS Benezra J Mechanism of automated alkaline methods for the determination of hemoglobin in whole blood based on the micellization of ligated heme in the presence and absence of cyanide Anal Chim Acta 1992 262 67 77 Tycko DH Metz MH Epstein EA Grinbaum A Flow cytometric light scattering measurement of red blood cell volume and hemoglobin concentration Applied Optics 1985 24 9 1355 1365 Deng C etal United States Patent Application Publication Prepara tion and use of nucleated red blood cell simulating particles and hematology control mixtures Pub No US 2014 0099632 A1 Pub date 2014 Apr 10 Wang J Fan L Ma C Zhang Y Xu D Effects of parenteral lipid emulsions on leukocyte numerical and morphological parameters determined by LH750 hematology analyzer Int J Lab Hematol 2013 35 5 e4 7 Xu B etal United States Patent White blood cell differentiation re agent containing an asymetric cyanine fluorescent dye and method of use thereof Patent No US 7960099 B2 Date of patent 2011 Jun 14 Ting L et al United States Patent Reagent and kit for classifying and counting leukocytes the preparation thereof and proc
16. stos con una se alizaci n eficiente de las anormalidades presentes en las c lulas evaluadas Despu s de la reacci n de tinci n fluorescente de los componentes internos de las c lulas con los reactivos apropiados las c lulas sangu neas se someten al an lisis en tres dimensiones utilizando los par metros de dispersi n de luz se realiza la cuenta diferencial de los leucocitos de acuerdo con su tama o complejidad celular y contenido de DNA RNA Esta t cnica es de gran utilidad especialmente para revelar poblaciones de c lulas anormales no detectadas por otras tecnolog as La detecci n de par metros como el n mero de gra nulocitos inmaduros indica la presencia de c lulas como promielocitos mielocitos y metamielocitos que se carac terizan por presentar elevada fluorescencia los blastos y linfocitos at picos tambi n presentan esta caracter stica Con la tecnolog a del BC 6800 los bas filos se reconocen por ser c lulas m s grandes y m s complejas que otras subpoblaciones de leucocitos los normoblastos son otro tipo de c lulas que son detectadas en un canal espec fico del cubo de fluorescencia Por otra parte el BC 6800 corrige de forma autom tica el recuento total de leucocitos y emite el diferencial de seis partes cuando hay presencia de normoblastos lo que asegura un resultado de la cuenta diferencial de seis partes de los leucocitos de manera m s confiable y por consiguiente disminuye la necesidad
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