Descarga - Revista Investigación Agropecuaria
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1. 189 uno Los resultados indican que la vacunaci n reduce significativamente la cantidad de metac stodos vesiculares en conejas dom sticas infectadas con huevos de T pisiformis en un 86 a los 7 y en un 94 a los 21 d as post infecci n p lt 0 01 Con base en los resultados obtenidos en este estudio se concluye que la vacuna es capaz de reducir el n mero de metac stodos de T pisiformis Palabras clave Taenia pisiformis inmunizaci n S3Pvac ABSTRACT The rabbit Orictolagus cuniculus L is a domestic animal that could be infected by several micro organisms among them the more frequent cestodiasis is caused by Taenia pisiformis T pisiformis n the present study the effect of the vaccination Investigaci n Agropecuaria 2008 Volumen 5 2 p 189 196 with S3Pvac was evaluated on the parasitic load metacestodes number and liver lessons Thirty one female New Zealand white rabbits were used and divided randomly in two groups The first group contained 7 rabbits treated as follow vaccinated and infected the rest of animals were only infected all animal were humanely killed 7 days post infection The second group with 17 rabbits was divided and 10 animals were infected the rest of the animals received the vaccine plus infection all the animals were euthanized 21 days post infection In all cases the female rabbits were infected by orally rout with 3 000 7 pisiformis eggs and the vaccinated rabbits were2. R Beltr n C Garc a G Mart nez J J Larralde C Sciutto E Synthetic peptide vaccine against Taenia solium pig cysticercosis successful vaccination in a 195 controlled field trial in rural M xico Vaccin 2002 20 262 266 Lightowlers M W Colebrook AL Gaucci CG Gaucci SM Kingdon CT Monkkhouse JL Vallejo CR Read AJ Rolfe RA Sato C Vaccinations against cestode parasites anti helminth vaccine that work and why Vet parasitol 2003 115 83 123 L pez M Losada H Sandoval S Bennett R Arias L Rangel J Soriano R Cortez J The influence of urban tourism on household agriculture the rabbit a new guest in the southeast of the metropolitan area of Mexico city Livest Res Rur Develop 1999 11 3 L pez Moreno HS 2002 Cestodiasis tisulares participaci n de los linfocitos th cooperadores 1 y 2 Salud p blica de M xico 44 145 152 Mart nez M A 2004 Cunicultura 2da ed divisi n continua M xico Molinari JL Rodr guez D Tato P Soto R Arechavaleta F Solano S 1997 Field trial for reducing porcine Taenia solium cisticercosis in Mexico by systematic vaccination of pigs Vet par sitol 69 1 2 55 63 Morales J Velasco T Tovar V Fragoso G Fleurry A Beltr n C Villalobos N Aluja A Rodarte LF Sciutto E Larralde C 2002 Castration and pregnancy of rural pigs significantly increase the prevalence of naturally acquired Taenia solium cysticercosis
3. Vet par sitol 108 41 48 Quiroz RH 2003 Parasitolog a y enfermedades parasitarias de animales dom sticos duod cima reimpresi n Limusa Rodr guez VR Rosada AA Basto EG Garc a VZ Rosario CR Fragoso SH 2006 Manual t cnico para el control de Investigaci n Agropecuaria 2008 Volumen 5 2 p 189 196 garrapatas en el ganado bovino Publicaci n t cnica 4 18 Ronald F Ronald W experimental cysticercosis in rabbits Lab anim sc 62 165 1975 Lesions of domestic Sciutto E Fragoso G Fleury A Laclette JP Sotelo J Aluja A Vargas L Larralde C Taenia solium disease in humans and pigs an ancient par sitosis disease rooted in developing countries and emerging as a major health problem of global dimensions Microbes Infect 2000 15 1875 1890 Smith WD Jackson F Avances recientes en la investigaci n de vacunas para el control de par sitos helmintos de rumiantes en pastoreo En Torres AJFJ Aguilar CAS C mara SR Editores 4 Curso Internacionalmente Epidemiolog a control integral de nematodos gastrointestinales de importancia econ mica en peque os rumiantes Yucat n 127 137 196 Toledo A Fragoso G Rosas G Hern ndez M Gevorkian K L pez Casillas F Hern ndez B Aceros G Huerta M Larralde C Sciutto E 2001 Two ep topes shared by Taenia crassiceps and Taenia solium confer protection against murine Taenia crassiceps cysticercosis alon
4. metac stodo Gemmell 1965 lo cual difiere con el presente estudio ya que la efectividad de S3Pvac no fue del 100 Es importante considerar que ninguna vacuna actualmente disponible y aprobada posee un 100 de efectividad ya que otros factores inherentes al hu sped como pudieran ser el estatus inmunol gico y nutricional edad etapa fisiol gica gestante o no y susceptibilidad gen tica entre otros condicionan y limitan el efecto y la eficacia de una vacuna La reactividad cruzada observada es consistente con estudios previos en el modelo murino rat n de cisticercosis por T crassiceps los ep topes que originalmente se identificaron en T crassiceps denominados GK1 18 aa Ketc1 13 aa y Ketc 12 9 aa se sintetizaron qu micamente y resultaron ser compartidos por T solium y protectores en contra de ambas cestodiasis Toledo et al 1999 Toledo et al 2001 Huerta et al 2002 Cabe se alar la importancia de disponer en un futuro del ciclo completo de T pisiformis lo que permitir considerarlo como un modelo adecuado para evaluar diferentes ant genos vac nales y formas de administraci n para la prevenci n de la fase intestinal y larvaria del par sito Este trabajo constituye una evidencia experimental de la efectividad de la vacuna S3Pvac para proteger en contra de la infecci n con huevos de 7 pisiformis Investigaci n Agropecuaria 2008 Volumen 5 2 p 189 196 LITERATURA CITADA Aie
5. coneja Testigos 7 1 0 0 6 12 5 5 29 4 14 1 62 S3Pvac 7 0 0 3 1 0 0 0 4 0 57 0 42 P lt 0 05 Prueba de Tukey Kramer Valores expresados en Promedios Error Est ndar Cuadro 2 N mero de metac stodos obtenidos en conejas inmunizadas con S3Pvac a los 21 d as post infecci n l N mero N mero de metac stodos 57 si Taramienio conejas vesiculares por coneja Talal X EE Testigos 10 1 1 3 1 3 4 3 1 0 0 17 1 7 0 44 S3Pvac 7 0 0 0 1 0 0 0 1 0 14 0 14 P lt 0 05 Prueba de Tukey Kramer Valores expresados en Promedios Error Est ndar 193 Investigaci n Agropecuaria 2008 Volumen 5 2 p 189 196 Para los p ptidos Ketc1 y Ketc12 se obtuvieron porcentajes de protecci n en tres distintos ensayos que fueron de 66 7 75 3 y 100 cuando se empleo Ketci como inmun geno y de un 52 7 73 4 y 81 1 cuando se utiliz el p ptido Ketc12 como vacuna el termino protecci n hace referencia a la disminuci n que existi en la cantidad de metac stodos de T crassiceps respecto al grupo testigo Toledo et al 2001 en el presente estudio hay que considerar que se emplearon los dos p ptidos antes mencionados m s aparte el p ptido GK1 lo que podr a explicar el resultado en el cual la protecci n fue de un 86 y 98 7 a los 7 y 21 d as respectivamente Es importante tomar en cuenta que el porcentaje del 94 de protecci n observado en el presente estudio para la infecci n con huevos de T pisiformis es cer
6. n y cuantificaci n de Huevos de T pisiformis Para obtener los huevos del c stodo adulto de T pisiformis con un bistur se seccionaron los progl tidos gr vidos maduros y se utiliz un mortero para macerarlos De la suspensi n resultante del macerado del los progl tidos gr vidos maduros se tomaron 10 pl que se diluyeron 1 10 con soluci n salina fisiol gica y se depositaron en una c mara de Neubauer Investigaci n Agropecuaria 2008 Volumen 5 2 p 189 196 Con el uso de un microscopio ptico 40X se cuantificaron los huevos presentes en el cuadrante central de la c mara de Neubauer el valor obtenido de conteo se multiplic por 10 000 Flores P rez et al 2003 c Ensayo piloto para confirmar la identidad de 7 pisiformis Para confirmar la identidad de los huevos de T pisiformis se llev a cabo un ensayo piloto en el que se infectaron 3 conejas de la raza Nueva Zelanda de un peso promedio de 2 5 kg transcurridos los 7 d as se recuperaron en todos los casos metac stodos en estado vesicular en h gados con lesiones d Infecci n con huevos de T pisiformis Las conejas se infectaron con 3000 huevos de T pisiformis por v a oral en este procedimiento se empleo una sonda est ril que fue introducida hasta el est mago cuidando en todo momento de no lesionar el tracto digestivo del conejo En todos los casos los animales fueron previamente tranquilizados con ketamina anesket laboratori
7. Investigaci n Agropecuaria 2008 Volumen 5 2 p 189 196 S3PVAC POSIBLE OPCI N TERAP UTICA PARA INTERRUMPIR EL CICLO PARASITARIO DE Taenia pisiformis Liliana Aguilar Garc a Edda Sciutto Conde Virginio Aguirre Flores Reyes V squez Rosales Agustin Orihuela Trujillo Juan Jos Zarate Ramos Fernando Iv n Flores P rez Facultad de Ciencias Agropecuarias de la Universidad Aut noma del Estado de Morelos Cuernavaca Morelos CP 62209 M xico Correo e ivanfloresperezOyahoo com mx Instituto de Investigaciones Biom dicas UNAM Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia UANL Autor para correspondencia RESUMEN El conejo Orictolagus cuniculus L es una especie dom stica y pueden afectarlo diversas enfermedades dentro de estas la cestodiasis m s frecuente es la causada por la Taenia pisiformis T pisiformis En el presente estudio se evalu el efecto de la vacunaci n con l trip ptido sint tico s3pvac en la carga parasitaria n mero de metac stodos y lesiones hep ticas en conejas dom sticas infectadas experimentalmente con huevos de T pisiformis los huevos de T pisiformis se obtuvieron a partir del c stodo adulto de intestinos de perros posteriormente se realiz la infecci n v a oral utilizando 3 000 huevos para cada coneja se utilizaron 31 conejas en total las cuales se dividieron aleatoriamente en 2 grupos de 14 y 17 cada Recibido 2 07 2008 Aceptado 24 09 2008
8. Investigaci n Agropecuaria 2008 Volumen 5 2 p 189 196 transportar huevos de T pisiformis As mismo es conveniente considerar que en nuestro pa s parte de la cr a de conejos se desarrolla en condiciones de traspatio que prevalecen en zonas rurales como periurbanas en las que existe la presencia de perros portadores de T pisiformis Eguia Aguilar et al 2005 En conejos salvajes de la Isla de Macaronesia se registr una prevalencia de T pisiformis del 8 8 al 30 4 los metac stodos se encontraron en mesenterio y tambi n se observaron lesiones en h gado Foronda et al 2003 Con la finalidad de controlar a las cestodiasis que afectan a otras especies como el ser humano y el cerdo diversas estrategias han sido utilizadas entre estas destacan la educaci n pr cticas de higiene b sicas la irradiaci n de carne de cerdo infectado con el metac stodo de T solium entre otras Molinari et al 1997 Sciutto et al 2000 Flores P rez et al 2003 Las cestodoasis producidad por T pisiformis y T craciceps han sido empleados como modelo de estudios para la teniasis cisticercosis que afecta al humano Lop z Moreno 2002 Actualmente se ha desarrollado una vacuna denominada S3Pvac que se encuentra conformada por tres p ptidos que han demostrado tener una efectividad en contra del metac stodo de 7 solium al reducir la prevalencia en un 52 6 y la intensidad de la infecci n con cisticercos viables
9. cano al porcentaje de un 98 7 observado para la infecci n con T solium en el caso de otras vacunas empleadas con el objetivo de combatir otras enfermedades cuando se obtiene un porcentaje de eficacia de un 80 se permite su comercializaci n por lo que en el presente estudio se sugiere que la vacuna S3Pvac podr a estar sujeta a comercializaci n En M xico como ejemplo de estas vacunas se encuentra disponible la vacuna recombinante denominada GAVACO Laboratorios Revetmex en contra de la garrapata Boophilus microplus que contiene el ant geno Bm86 esta vacuna ha mostrado la inducci n de una respuesta protectora en bovinos inmunizados bajo condiciones controladas y en pruebas de campo y se ha encontrado una efectividad entre el 51 y 91 Willadsen et al 1995 Rodr guez Vivaz et al 2006 Otra vacuna validada y probada en contra del nem todo pulmonar de rumiantes Dictyocaulus vivivarus es Dictol8 que presenta un 98 de efectividad en animales vacunados Smith y Jackson 2006 194 En un trabajo en el que se emplearon embriones hexacanto eclosionados de 7 pisiformis y huevos de T pisiformis como vacuna se observ que existi una efectividad del 100 al emplearse una dosis de 2000 embriones hexacanto ya que no se recuper ning n metac stodo de T pisiformis Sin embargo al vacunar con 50 000 embriones hexacanto se recuperaron dos metac stodos y posteriormente al inmunizar con 50 000 huevos se recupero un
10. en un 97 9 esto fue observado en un estudio de campo en 2 comunidades rurales de M xico en cerdos que se infectaron de manera natural con T solium Huerta et al 2002 Estos p ptidos Ketc1 Ketc12 y GK1 originalmente aislados de T crassiceps fueron identificados en T solium hasta la fecha la vacuna S3Pvac es la nica constituida por ant genos definidos y validada en campo Huerta et al 2002 191 En el presente trabajo se evalu en conejos infectados experimentalmente con huevos de T pisiformis el efecto de la vacuna S3Pvac en la carga parasitaria MATERIALES Y M TODOS a Obtenci n del c stodo adulto de T pisiformis la finalidad de obtener al c stodo adulto de T pisiformis se muestrearon 125 intestinos de perros adultos callejeros sin importar su sexo Con Para cada perro se obtuvo el intestino delgado y se procedi a ligar el extremo craneal y caudal con el objeto de evitar que el contenido intestinal saliera Los intestinos identificados por separado se mantuvieron a 4 C posteriormente se llev a cabo un corte longitudinal en cada uno de ellos y se revisaron las paredes en busca de los c stodos adultos de 7 pisiformis La identificaci n del c stodo adulto se llev a cabo tomando en cuenta sus caracter sticas morfol gicas Quiroz 2003 los c stodos adultos recuperados fueron depositados en un tubo de 125 ml que conten a soluci n fisiol gica y almacenados a4 C b Obtenci
11. g with a prominent Tiresponse Infect Immun 69 3 1766 1773 Toledo A Larralde C Fragoso G Gevorkian G Manoutcharian K Hern ndez M Acero G Rosas G Lopez Casillas F Garfias C K Vazquez R Terrazas l Sciutto E 1999 Towards a Taenia solium cysticercosis vaccine an epitope shared by Taenia crassiceps and Taenia solium protects mice against experimental cysticercosis Infect and Immun 67 2522 2530 Willadsen P Bird P Cobon GS Hungerford J 1995 Commercialization of a recombinat vaccine against Boophilus micropulus parasitol 110 s43 s59
12. immunized subcutaneously with S3Pvac 15 ug per each peptide 7 days after infection The results indicated that the vaccination significantly reduces the number of metacestodes P lt 0 01 at 7 and 21 days post infection Based on these results we conclude that the S3Pvac vaccine is effective to interrupt the T pisiformis life cycle Key words Taenia pisiformis immunization S3PVAC INTRODUCCI N Se ha referido que ciertas enfermedades de origen viral parasitario y bacteriano pueden afectar al conejo domestico Aiello 1998 Quiroz 2003 y que la enfermedad parasitaria originada por c stodos m s frecuente es la Taenia pisiformis T pisiformis seg n un estudio en el que se evaluaron un total de 17 354 conejos en el cual la frecuencia fue de 6 9 lo que equivale a 1 201 conejos infectados de esta par sitosis Flatt y Campbell 1974 El ciclo parasitario de T pisiformis involucra a un hu sped portador de tenia que puede ser el perro zorro o gato cuando la materia fecal es expulsada al exterior se liberan progl tidos gr vidos maduros que se caracterizan por contener 190 en su interior miles de huevos estos ltimos est n dotados de una cubierta de queratina que permite su sobrevivencia en diversas condiciones ambientales Quiroz 2003 El conejo o las liebres se consideran como hu spedes intermediarios y en algunas ocasiones se alimentan con forrajes contaminados con huevos de T pisiformis posterio
13. llo BS The Merck Manual 1998 1398 1399 Veterinary Eugia Aguilar P Cruz Reyes A Martinez Maya J Ecological analysis and description of the intestinal helminths present in dogs in Mexico city Vet Par sitol 2005 20 127 2 139 46 Flatt R Campbell W Cysticercosis in rabbits incident and lesions of the naturally occurring disease in young domestic rabbits Lab Anim Sc 1974 6 914 918 Flores P rez Fl Rosas Velasco C Lavielle Rosa E P rez Mart nez M Da os histol gicos en h gados de conejos infectados experimentalmente con el metac stodo de Taenia pisiformis resultados preliminares III Congreso Internacional de Epidemiolog a Oaxaca Resumen in Extenso 2003 656 662 Foronda P Valladares B Morales Lorenzo J Ribas A Feliu C Casanova C J Helminths of the wild rabbit Orictolagus cuniculus L in Macaronesia J Par sitol 2003 89 5 952 957 Gemmell MA Immunological responses of the mammalian host against tapeworm infections Il species specificity of hexacanth embrios in protecting rabbits against taenia pisiformis Immunololgy 1965 8 270 284 Huerta L Terrazas L l Sciutto E Larralde C Immunological mediation of gonadal effects on experimental murine cysticercosis caused by Taenia crassiceps metacestodes J Par sitol 1992 78 3 471 6 Huerta M Aluja A S Fragoso G Toledo A Villalobos N Hern ndez M Gevorkian G Acero G D az A lvarez l vila
14. os la pisa M xico a una dosis de 25 mg kg por v a intramuscular e Animales y asignaci n de grupos Se utilizaron un total de 31 conejas Nueva Zelanda con un peso de 2 5 Kg cl nicamente sanas que fueron alimentadas con concentrado Purina 16 prote na cruda y agua a libre demanda Un total de 14 conejas se dividieron de manera aleatoria en dos grupos de 7 el primer grupo fue infectado con 3 000 huevos de T pisiformis el resto de las conejas fue infectada con la misma cantidad de huevos con la variante de ser inmunizadas con S3Pvac y sacrificadas a los 7 d as posteriores a la infecci n 192 Para el siguiente grupo se emplearon 17 conejas y se seleccionaron 10 de manera aleatoria que se infectaron con 3 000 huevos las 7 restantes se infectaron con la misma dosis y se inmunizaron con S3Pvac y se sacrificaron a los 14 d as post infecci n f Inmunizaci n con S3Pvac Este procedimiento consisti en inmunizar por v a subcut nea y aplicando por separado cada uno de los tres p ptidos a una dosis de 15 ug de cada p ptido gk 1 ketc1 ketc12 50 ug de saponina en todos los casos los animales se inmunizaron 7 d as antes de la infecci n g Necropsias De manera individual se registraron los hallazgos de la necropsia para cada animal mediante el uso de un protocolo h An lisis Los datos de los resultados se analizaron con una prueba de rango de Wilcoxon RESULTADOS Y DISCUSI N En ambos experimento
15. rmente el huevo migra hasta el intestino y en este sitio anat mico eclosiona para dar origen al embri n hexacanto eclosionado u onc sfera el cual penetra la pared intestinal y por medio de la circulaci n sangu nea se transporta al h gado Quiroz 2003 La onc sfera da origen a la fase de metac stodo o cisticerco de T pisifomis y se localiza en la cavidad abdominal de conejos y liebres y a simple vista se observa como una ves cula de 6 a 12 mm de largo por 4 a 6 mm de ancho con una pared delgada y traslucida Ronald y Ronald 1975 Cuando un conejo infectado con el metac stodo de T pisiformis es ingerido por el perro zorro o gato se concluye el ciclo y se origina nuevamente un c stodo adulto o T pisifomis Quiroz 2003 Los huevos de T pisiformis infectan al conejo sin embargo no son infectivos para el humano como ocurre con otros c stodos Lightowlers et al 2003 tambi n se ha informado que en las hembras son m s susceptibles a la infecci n por metac stodos de Taenia solium T solium y Taenia crassiceps T crassiceps y se propone que esta susceptibilidad esta relacionada con la secreci n de hormonas ov ricas Huerta et al 1992 Morales et al 2002 En el caso de M xico la frecuencia de T pisiformis se desconoce sin embargo se ha referido que los conejos son alimentados con forrajes desperdicio de verduras y agua L pez et al 1999 los cuales constituyen veh culos ideales para
16. s se consideran como metac stodo de T pisiformis en estado vesicular los que fueron similares a los observados en la figura 1 A los 7 d as post infecci n en el grupo de conejos inmunizados se encontraron 4 metac stodos vesiculares y el n mero m ximo de metac stodos encontrados fue de 3 en una sola coneja y en el caso del testigo el n mero total de metac stodos de T pisiformis fue de 29 Cuadro 1 Investigaci n Agropecuaria 2008 Volumen 5 2 p 189 196 A los 21 d as en el caso del grupo testigo sin inmunizar el n mero m ximo de metac stodos fue de 4 en una coneja y el total de 17 metac stodos vesiculares de t pisiformis y en los vacunados con S3Pvac se encontr uno cuadro 2 En el presente estudio se observ una reducci n en el n mero de metac stodos de T pisifomis en conejas infectadas y vacunados con S3Pvac a los 7 y 21 d as post infecci n en el caso de los 7 d as la disminuci n fue de un 86 y en el caso de los 21 d as la reducci n fue de un 94 los resultados obtenidos concuerdan con lo previamente referido en relaci n al efecto que S3Pvac posee al reducir el n mero de metac stodos de T solium en un 98 7 en cerdos infectados Huerta et al 2002 Figura 1 Metac stodos de T pisiformis en estado vesicular Cuadro 1 N mero de metac stodos de 7 pisiformis a los 7 d as post infecci n Tratamiento N mero N mero de metac stodos Total X EE Conejas vesiculares por
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