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Manual de Inmunohematología - Hospital Regional Rancagua

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1. Proceso de estudio para test de coombs directo positivo en Gel T cnico param dico Tecn logo m dico Paciente secci n secci n inmunohematolog a inmunohematolog a PREPARAR PREPARAR II CENTRIFUGAR RESULTADO S R Resultado Lista de tareas para flujograma de informaci n PREPARAR I Centrifugar muestra Identificar muestra Agregar muestra de gl bulos rojos al tubo Lavar muestra de gl bulos rojos 4 veces con soluci n PBS PREPARAR II Manual de Inmunohematolog a Calidad y Seguridad del Paciente Hospital Regional Rancagua HOSPITAL REGIONAL z RANCAGUA Manual de Inmunohematolog a HRR C digo SGC MIH Fecha 30 Julio 2015 Versi n 4 0 P gina 36 de 59 Diluir al 1 con DG sol la muestra Agregar suspensi n en gel RESULTADO Leer interpretar y registrar resultado en correspondiente Imprimir resultado V Registros software y libro Los resultados son registrados en Libro de Policl nico ubicado en estante colgante de secci n Inmunohematolog a Adem s los resultados deben ser registrados en el sistema computacional e Delphyn La forma correcta de realizar los registros se presentan en el Anexo N 3 Registro de resultados para clasificaci n ABO RhD Test de Antiglobulina humana y Detecci n de anticuerpos irregulares Realizar la inspecci n del procedimiento en el anexo N 16 Pauta de cotejo
2. B AB y O Adem s determina la presencia de anticuerpos naturales anti A y anti B Permite tambi n la detecci n de los ant genos del tipo Rh D en la membrana de los eritrocitos El Test de Antiglobulina directo permite identificar el recubrimiento de membrana de los eritrocitos por anticuerpos del tipo IgG o fracciones de complemento que ocurre in vivo a este proceso se llama sensibilizaci n in vivo II Alcance M dico solicitante Funcionarios de la Unidad de Medicina Transfusional como M dico jefe Tecn logo M dico Supervisor Tecn logos M dicos y T cnicos Param dicos Todo paciente susceptible de recibir una transfusi n de hemocomponentes IIT Encargado de la ejecuci n y su responsabilidad Tecn logo m dico La clasificaci n de grupo sangu neo ABO RhD y Test de Antiglobulina directo es responsabilidad del Tecn logo M dico de turno en secci n de Inmunohematolog a T cnico Param dico preparar material e insumos necesarios para que Tecn logo M dico realice an lisis de clasificaci n de grupo sangu neo y Rh IV Desarrollo 4 1 Desarrollo 4 1 1 Reunir los siguientes materiales muestra de 2 ml de sangre sin anticoagulante micropipetas puntas DG steppers centr fuga DG Spin gradilla l piz marcador tarjetas con columnas de gel centrifuga Rotofix 32A 4 1 2 Obtener muestra de sangre del paciente a estudiar en tubo sin anticoagulante 4 1 3 Identificar muestra Ver anexo N 1 Identific
3. 1 10 Centrifugar para lectura por 9 minutos a 1500 rpm en la centr fuga DG Spin Ver anexo N 4 Manejo de la centr fuga DG Spin 4 1 11 Determinar presencia o ausencia de aglutinaci n en la fuente de luz 4 1 16 Si existe aglutinaci n informar en cruces dependiendo de la intensidad de la aglutinaci n 4 1 17 Registrar los resultados 4 2 Descripci n del procedimiento 4 2 1 El procedimiento se realiza en la secci n de Inmunohematolog a de la Unidad de Medicina Transfusional 4 2 2 El procedimiento debe ser realizado por el tecn logo m dico encargado de la secci n de Inmunohematolog a 4 2 3 El procedimiento tarda aproximadamente 45 minutos por muestra 4 3 Documentos relacionados 4 3 1 Instructivo del test de Coombs indirecto en gel 1 1 Obtener muestra de sangre del paciente a estudiar 1 2 Identificar muestra 1 3 Centrifugar muestra 1 4 Marcar las columnas con el n mero de matraz 1 5 Preparar una diluci n al 1 de los gl bulos rojos del donante 1 6 Agregar 50 yl de la diluci n mencionada en el punto 4 1 5 1 7 Agregar 25 pl de suero de paciente a las columnas 1 8 Incubar a 37 C por 15 minutos 1 9 1 1 1 1 DARARRARARA UY 0 0 WU Y UY UY WU y 4 4 Interpretaci n e La presencia de aglutinaci n indica que la unidad a transfundir es incompatible por lo que debe ser descartada e La ausencia de aglutinaci n indica que la unidad a transfundir es COMPATIBLE por lo que puede ser administra
4. 4 0 P gina 7de59 Lista de tareas para flujograma de informaci n MUESTRA Obtenci n de muestra de paciente para su posterior an lisis RECEPCIONAR Recibir orden de examen junto con muestra del paciente Se registra en la orden quien recepciona y hora de recepci n Corroborar que la muestra est en condiciones para su posterior an lisis en tubo correcto sin hem lisis sin co gulos y en cantidad correcta si existen dudas consultar con Tecn logo M dico Corroborar que datos de la orden coincidan con los datos del tubo si no es as devolver orden al servicio solicitante y retener muestra en UMT y solicitar nueva muestra Registrar datos b sicos del paciente en software de la unidad solicitar examen e imprimir etiquetas 2 con c digo de barra nico Pegar etiquetas impresas una en orden de examen y la segunda en tubo con muestra PREPARAR 1 Corroborar que datos de la orden coincidan con la muestra ver etiquetas adheridas si no es as devolver a secci n ventanilla para su investigaci n y posterior correcci n Centrifugar muestra Registrar en libro correspondiente Identificaci n de tubos para estudio de la muestra Agregar antisueros y gl bulos A y B a cada tubo Dejar sobre mes n de trabajo muestra preparada en conjunto con orden PREPARAR II Agregar a los tubos ya identificados con sus respectivos antisueros y gl bulos A y B muestra del paciente ANALIZAR Agitar visualizar e interpretar r
5. DiaMed 4 1 6 Agitar tubos suavemente hasta desprender el precipitado del fondo del tubo y leer 4 1 7 Tomar con la pipeta pl stica un volumen de gl bulos del tubo piloto y lavar 4 veces la muestra con PBS 4 1 8 Una vez lavada la muestra y eliminado el sobrenadante preparar una diluci n de los gl bulos rojos del paciente al 1 con DG Gel Sol para ello se debe tomar 5 ul de los gl bulos rojos lavados y agregar 500 ul del diluyente DG Gel Sol 4 1 9 Identificar una columna del gel con el N del paciente Reci n Nacido 4 1 10 Agregar 50 pul de la diluci n al 1 a la columna previamente identificada 4 1 11 Agregar 25 pl de Antisuero anti D IgG o IgM 1gG a la columna 4 1 12 Incubar a 37 C por 15 minutos en incubador DG Therm Ver anexo N 5 Manejo del incubador DG Therm 4 1 13 Centrifugar para lectura por 9 minutos a 1500 rpm en la centr fuga DG Spin Ver anexo N 4 Manejo de la centr fuga DG Spin 4 1 14 Determinar la presencia o ausencia de aglutinaci n en la fuente de luz Ver anexo N 6 Manejo de fuente de luz Si existe aglutinaci n el Rh D es positivo y se informa como Rh D positivo d bil de no existir aglutinaci n se informa como Rh D negativo 4 1 15 Controlar el resultado realizando test de Coombs directo Ver procedimiento Test de Coombs directo en gel El resultado de este debe ser negativo para confirmar el resultado del estudio del Rh D positivo d bil 4 1 16 Si existe aglutinaci n informar en
6. Leer 1 11 Registrar los resultados BAARAABARABADAADO w Www ww WWW WWW 4 4 Interpretaci n Manual de Inmunohematolog a Calidad y Seguridad del Paciente Hospital Regional Rancagua HOSPITAL REGIONAL RANCAGUA YAA Manual de Inmunohematolog a HRR C digo SGC MIH Fecha 30 Julio 2015 Versi n 4 0 P gina 30 de 59 eSi existe aglutinaci n en el punto 4 1 11 significa que hay en el suero del paciente un anticuerpo de tipo IgG o fracciones del complemento eLa ausencia de aglutinaci n indica que en el suero del paciente no hay Acs 4 5 FLUJOGRAMA DE INFORMACI N Proceso test de coombs indirecto en gel Paciente T cnico param dico secci n inmunohematolog a Tecn logo m dico secci n inmunohematolog a a PREPARAR PREPARAR II CENTRIFUGAR RESULTADO CD Ea R Resultado Manual de Inmunohematolog a Calidad y Seguridad del Paciente Hospital Regional Rancagua C digo SGC MIH ESI NAL A Fecha 30 Julio 2015 RANCAGUA Manual de Inmunohematolog a HRR E rs Versi n 4 0 P gina 31de 59 Lista de tareas para flujograma de informaci n PREPARAR I Centrifugaci n de la muestra del paciente a estudiar Identificaci n de tubo PREPARAR II Agregar muestra paciente Incubar RESULTADO Lectu
7. Regional Rancagua HOSPITAL REGIONAL RANCAGUA E Manual de Inmunohematolog a HRR C digo SGC MIH Fecha 30 Julio 2015 Versi n 4 0 P gina 47 de 59 Lista de tareas flujograma de informaci n PREPARAR I Centrifugar muestra de paciente a estudiar Dejar mes n de trabajo con insumos para estudio de muestra por Tecn logo m dico PREPARAR II Identificar columna s a utilizaren tarjeta Diluir al 1 gl bulos rojos del donante Agregar diluci n a columna s Agregar suero del paciente a estudiar Incubar RESULTADO Leer interpretar y registrar resultados en correspondiente Imprimir resultado V Registros software y libro Los resultados son registrados en Libro de Pruebas Cruzadas ubicado en estante colgante de secci n Inmunohematolog a y en Transfusi n Adem s los resultados deben ser registrados en el sistema computacional e Delphyn La forma correcta de realizar los registros se presentan en el Anexo N 3 Registro de resultados para clasificaci n ABO RhD Test de Antiglobulina humana y Detecci n de anticuerpos irregulares Manual de Inmunohematolog a la Solicitud de Calidad y Seguridad del Paciente Hospital Regional Rancagua C digo SGC MIH ESI NAL gt Fecha 30 Julio 2015 RANCAGUA Manual de Inmunohematolog a HRR rs Versi n 4 0 P gina 48 de 59 TOMA DE MUESTRA EN LA UNIDAD DE MEDICINA TRANSFUSIONAL I
8. cruces dependiendo de la intensidad de la aglutinaci n 4 1 17 Registrar los resultados 4 2 Descripci n del procedimiento Manual de Inmunohematolog a Calidad y Seguridad del Paciente Hospital Regional Rancagua C digo SGC MIH ESI NAL gt Fecha 30 Julio 2015 RANCAGUA Manual de Inmunohematolog a HRR a rs Versi n 4 0 P gina 20 de 59 4 2 1 El procedimiento se realiza en la secci n de Inmunohematolog a de la Unidad de Medicina Transfusional 4 2 2 El procedimiento debe ser realizado por el Tecn logo M dico encargado de la secci n de inmunohematolog a 4 2 3 El procedimiento tarda aproximadamente 45 minutos por muestra 4 3 Documentos Relacionados 4 3 1 Instructivo para la investigaci n RhD Variante en gel Rh coombs 4 3 1 1 Identificar muestras de sangre del paciente con resultado negativo para Rh D determinado en la clasificaci n ABO y Rh D 4 3 1 2 Utilizar el tubo Rh de la clasificaci n ABO y Rh D 3 Agrega 2 gotas de antisuero anti D 4 Centrifugar y leer 5 Tomar un volumen de gl bulos rojos del tubo piloto 6 Lavar 4 veces 7 Resuspender con DG sol al 1 Agregar 50 ul de la suspensi n al 1 a la columna de gel Agregar 25 ul de Antisuero anti D a la columna de gel 10 Incubar a 37 C por 15 minutos 10 Centrifugar para lectura 11 Leer e interpretarlos resultados 12 Realizar test de Coombs directo en gel si procede 13 Leer e interpretar los re
9. de Estudio de muestras Coombs Directo positivo Manual de Inmunohematolog a Calidad y Seguridad del Paciente Hospital Regional Rancagua C digo SGC MIH ESI NAL A Fecha 30 Julio 2015 RANCAGUA Manual de Inmunohematolog a HRR E rs Versi n 4 0 P gina 37 de 59 TITULACI N DE ANTICUERPOS IRREGULARES I Objetivo La titulaci n de Anticuerpos irregulares es una forma semicuantitativa de medir la cantidad de anticuerpos presentes en una muestra en estudio Los t tulos tambi n pueden ayudar a determinar la fuerza relativa del ant geno presente en diferentes tipos de c lulas II Alcance M dico solicitante Funcionarios de la Unidad de Medicina Transfusional como M dico jefe Tecn logo M dico Supervisor Tecn logos M dicos y T cnicos Param dicos Todo paciente susceptible de recibir una transfusi n de hemocomponentes III Encargado de ejecuci n y responsabilidad Tecn logo m dico La realizaci n de la t cnica para la titulaci n de anticuerpos irregulares es responsabilidad del Tecn logo M dico de turno en secci n de inmunohematolog a T cnico Param dico preparar material e insumos necesarios para que Tecn logo M dico realice el an lisis IV Desarrollo y Descripci n del procedimiento 4 1 Desarrollo 4 1 1 Reunir los siguientes materiales muestra de 10 ml de sangre en tubo sin anticoagulante pipetas pl sticas tubos Khan gradilla l piz marcador c lu
10. del hemocomponente a transfundir n mero del matraz y resultado de la prueba de compatibilidad al TM de transfusiones 4 8 En los casos de solicitudes de PLQ PFC CPP realizar la clasificaci n de grupo sangu neo si fuese necesario 5 Registros e Sistema Computacional e Libro de Pruebas de Compatibilidad e Libro de Sala e Solicitud de Transfusi n Manual de Inmunohematolog a Calidad y Seguridad del Paciente Hospital Regional Rancagua C digo SGC MIH ESI NAL gt Fecha 30 Julio 2015 RANCAGUA Manual de Inmunohematolog a HRR rs Versi n 4 0 P gina 44 de 59 PRUEBAS DE COMPATIBILIDAD PRUEBAS CRUZADAS EN GEL I Objetivo Las pruebas de compatibilidad permiten determinar si la s unidad es de Gl bulos Rojos Leucorreducidos o leucodepletados del donante enfrentadas al suero del paciente resultan o no compatibles de manera tal de brindar una transfusi n segura al paciente II Alcance M dico solicitante Funcionarios de la Unidad de Medicina Transfusional como M dico jefe Tecn logo M dico Supervisor Tecn logos M dicos y T cnicos Param dicos Todo paciente susceptible de recibir una transfusi n de hemocomponentes III Encargado de ejecuci n y responsabilidad Tecn logo m dico La realizaci n de las pruebas de compatibilidad en gel es responsabilidad del Tecn logo M dico de turno en secci n de inmunohematolog a T cnico Param dico preparar m
11. gt Gobierno ZN de Chile HOSPITAL REGIONAL RANCAGUA A AA Manual de Inmunohematolog a RESPONSABLE REVIS Y APROB ELABORACI N NOMBRE Alejandra Carrillo zal Barrera Ortiz CARGO Tecn logo M dico M dico Jefe Supervisor s FECHA 25 Marzo 2015 325 Marzo 2015 va Manual de Inmunohematolog a Calidad y Seguridad Del Paciente Hospital Regional Rancagua C digo SGC MIH ESI NAL A Fecha 30 Julio 2015 RANCAGUA Manual de Inmunohematolog a HRR E rs Versi n 4 0 P gina 1de59 INDICE CONTENIDO Contenidos P gina Clasificaci n ABO y Rh D en tubo 02 Clasificaci n ABO y Rh D en l mina 09 Clasificaci n ABO RhD y Test de Antiglobulina Directo en GEL para Reci n Nacidos 13 Investigaci n de RhD variante para Reci n Nacidos 18 Test de Coombs directo en gel 24 Test de Coombs indirecto en gel 28 Estudio de muestras Coomb Directo positivo en pacientes de policl nico oncolog a 32 Titulaci n de anticuerpos irregulares 37 Estudios pre transfusionales 42 Pruebas de compatibilidad en gel 44 Toma de muestras en UMT 48 Definiciones y Abreviaturas 52 Anexos P gina Anexo N 1 Identificaci n de muestras 53 Anexo N 2 Manejo de la centrifugar ROTOFIX 32 A 53 Anexo N 3 Registro de resultados para clasificaci n ABO Rh Test de Antiglobulina humana y Detecci n de anticuerpos irregulares 54 Anexo N 4 Manejo de centr fuga DG Spin 55 A
12. muestra 4 3 Documentos relacionados 4 3 1 Instructivo de clasificaci n de grupo sangu neo ABO RhD y Test de Antiglobulina directo Obtener muestra del paciente estudiar Identificar muestra Centrifugar muestra Resuspender gl bulos rojos de la muestra en su propio suero huNa Manual de Inmunohematolog a Calidad y Seguridad del Paciente Hospital Regional Rancagua HOSPITAL REGIONAL RANCAGUA YAA Manual de Inmunohematolog a HRR C digo SGC MIH Fecha 30 Julio 2015 Versi n 4 0 P gina 15de 59 4 3 1 5 Agregar 1 gota de suspensi n en tubo Khan 4 3 1 6 Lavar 4 veces 4 3 1 7 Resuspender con DG sol al 1 4 3 1 7 Agregar 50 ul gotas suspensi n a pocillos de gel 4 3 1 8 Centrifugar para lectura 4 3 1 9 Leer 4 3 1 10 Si existe aglutinaci n informar en cruces 4 4 Interpretaci n Sistema ABO Microtubo Microtubo Microtubo Microtubo Grupo A B AB Ctl ABO 0 0 0 0 0 0 0 A 0 0 0 B 0 AB Sistema Rh Ant geno D Microtubo Microtubo Microtubo Interpretaci n Dvi Dvi Ctl 0 D positivo 0 0 0 D negativo 0 0 D d bil o parcial 0 0 AB Si microtubo Dvi y Dvi resultan negativos se debe realizar la investigaci n RhD variante en GEL Test de Antiglobulina Directo Los resultados por s solos no son un diagn stico deben valorarse en conjunto con la informaci
13. software y libro correspondiente Imprimir resultado V Registros Los resultados son registrados en Libro de Sala pacientes hospitalizados mayores de 6 meses Libro de Reci n Nacidos pacientes hospitalizados menores de 6 meses o en Libro de Policl nico pacientes tratados en los diferentes policl nicos del Hospital estos libros est n ubicados en estante colgante de secci n Inmunohematolog a Adem s los resultados deben ser registrados en el sistema computacional e Delphyn La forma correcta de realizar los registros se presentan en el Anexo N 3 Registro de resultados para clasificaci n ABO RhD Test de Antiglobulina humana y Detecci n de anticuerpos irregulares Realizar la inspecci n del procedimiento en el anexo N 14 Pauta de cotejo del test de Coombs directo en gel Manual de Inmunohematolog a Calidad y Seguridad del Paciente Hospital Regional Rancagua C digo SGC MIH ESI NAL A Fecha 30 Julio 2015 RANCAGUA Manual de Inmunohematolog a HRR E a Versi n 4 0 P gina 28 de 59 DETECCION DE ANTICUERPOS IRREGULARES TEST DE COOMBS INDIRECTO EN GEL I Objetivo El test de Coombs indirecto permite identificar anticuerpos presentes en el suero o plasma de paciente estos anticuerpos pueden interferir en las transfusiones de sangre II Alcance M dico solicitante Funcionarios de la Unidad de Medicina Transfusional como M dico jefe Tecn logo M dico Sup
14. una bola de algod n empapado en alcohol desnaturalizado 700 Espere hasta que el etanol se evapore 4 4 8 Rotular con letra clara los tubos de muestra con nombre paciente fecha y examen solicitado 4 4 9 Sacar la jeringa y atornillar la aguja en el extremo agudo de esta retirando el capuch n que cubre la aguja o arme el sistema venojet atornillar la aguja envuelta en goma en la camisa o recept culo para tubos y del otro extremo retirar el capuch n de protecci n de la aguja 4 4 10 Puncionar la piel y luego la vena en ngulo de 25 con respecto a la piel de forma lenta y segura 4 4 11 Al observar el reflujo de sangre debe soltar la ligadura continuar aspirando la sangre suavemente tirando el embolo hacia atr s hasta obtener Manual de Inmunohematolog a Calidad y Seguridad del Paciente Hospital Regional Rancagua C digo SGC MIH ESI NAL 7 Fecha 30 Julio 2015 RANCAGUA Manual de Inmunohematolog a HRR n a Versi n 4 0 P gina 50 de 59 el volumen deseado En el caso de sistema venojet una vez hecha la punci n poner tubos con EDTA sin anticoagulante o ambos Este sistema permite recolectar varios tubos de sangre con una sola punci n 4 4 12 Sacar la ligadura luego la aguja y aplicar presi n suave con algod n seco de preferencia est ril por dos minutos hasta lograr correcta hemostasia 4 4 13 Llenar el o los tubos con la muestra recolectada si utiliz jeringa 4 4 14 Eliminar
15. y Seguridad del Paciente Hospital Regional Rancagua C digo SGC MIH ESI NAL gt Fecha 30 Julio 2015 RANCAGUA Manual de Inmunohematolog a HRR E rs Versi n 4 0 P gina 22de 59 4 4 FLUJOGRAMA DE INFORMACI N Proceso Investigaci n RhD variante en Gel T cnico param dico Tecn logo M dico Paciente secci n secci n inmunohematolog a inmunohematolog a CD PREPARAR ANALIZAR CENTRIFUGAR RESULTADO R Resultado Manual de Inmunohematolog a Calidad y Seguridad del Paciente Hospital Regional Rancagua C digo SGC MIH ESI NAL A Fecha 30 Julio 2015 RANCAGUA Manual de Inmunohematolog a HRR E rs Versi n 4 0 P gina 23 de 59 Lista de tareas para el flujograma de informaci n PREPARAR Lavar cuatro veces la muestra del paciente a estudiar Dejar mes n de trabajo preparado con insumos para an lisis ANALIZAR Diluir gl bulos rojos al 1 Identificar columna del gel con la que se trabajar Agregar 50 microlitros de diluci n al 1 Ss Agregar 25 microlitros de suero anti D E Incubar 15 minutos a 37 C RESULTADO Lectura e interpretaci n de resultado Si el resultado es POSITIVO realizar Coombs directo a la muestra interpretar y registrar resultado en software y libro correspondiente Si el resulta
16. 0 Agregar 2 gotas de suero anti D al tubo 3 4 1 11 Resuspender gl bulos rojos de muestra en su propio suero a concentraci n de 3 4 4 1 12 Agregar 1 gota de suspensi n realizada en el punto anterior en tubos 1 2 3 y 6 4 1 13 Agregar 1 gota de gl bulos rojo testigo A al tubo 4 Ver anexo N 8 Preparaci n de gl bulos rojos testigo 4 1 14 Agregar 1 gota de gl bulos rojo testigos B al tubo 5 4 1 15 Centrifugar tubos 15 segundos a 1500 rpm en centr fuga DiaCent 12 DiaMed 4 1 16 Agitar tubos para desprender el bot n de aglutinaci n 4 1 17 Determinar la presencia de aglutinaci n sobre una fuente de luz Ver anexo N 6 Manejo de fuente de luz 4 1 18 Interpretar los resultados 4 1 19 Registrar los resultados Ver anexo N 93 Registro de resultados Manual de Inmunohematolog a Calidad y Seguridad del Paciente Hospital Regional Rancagua HOSPITAL REGIONAL RANCAGUA IE Manual de Inmunohematolog a HRR C digo SGC MIH Fecha 30 Julio 2015 Versi n 4 0 P gina 4de 59 4 2 Descripci n del procedimiento 4 2 1 El procedimiento se realiza en la secci n de Inmunohematolog a de la Unidad de Medicina Transfusional 4 2 2 El procedimiento debe ser realizado por el Tecn logo M dico encargado de la secci n de Inmunohematolog a 4 2 3 El procedimiento tarda aproximadamente 15 minutos por muestra 4 3 Documentos relacionados 4 3 1 Instructivo de clasificaci n ABO y Rh D e
17. 8 Centrifugar para lectura 9 Leer AAAAAAARAAD w w Ww Ww UUU WWW papa pa pe ps ps pp pd Manual de Inmunohematolog a Calidad y Seguridad del Paciente Hospital Regional Rancagua C digo SGC MIH ESI NAL A Fecha 30 Julio 2015 RANCAGUA Manual de Inmunohematolog a HRR E rs Versi n 4 0 P gina 34 de 59 4 3 1 10 Si existe aglutinaci n informar en cruces 4 4 Interpretaci n Prueba determinada por el resultado que se obtenga en los microtubos AHG IgG y C3d Notas El microtubo Ctl debe ser negativo Si es positivo invalidar la prueba Repetir la determinaci n lavando previamente los hemat es con soluci n salina fisiol gica y preparar de nuevo la suspensi n de los hemat es lavados Si el microtubo Ctl de la repetici n es negativo se pueden interpretar los resultados de la prueba si es positivo invalidar la prueba Los resultados positivos obtenidos en el microtubo AHG deben contrarrestarse con los obtenidos en los microtubos IgG y C3d Se recomienda revisar investigar los resultados discrepantes que se obtengan Manual de Inmunohematolog a Calidad y Seguridad del Paciente Hospital Regional Rancagua HOSPITAL REGIONAL RANCAGUA YAA Manual de Inmunohematolog a HRR C digo SGC MIH Fecha 30 Julio 2015 Versi n 4 0 P gina 35de 59 4 5 FLUJOGRAMA DE INFORMACI N
18. ANCAGUA Manual de Inmunohematolog a HRR C digo SGC MIH Fecha 30 Julio 2015 Versi n 4 0 P gina 17 de 59 Diluir al 1 con DG sol la muestra Agregar suspensi n en gel RESULTADO Leer interpretar y registrar resultado en correspondiente Imprimir resultado V Registros software y libro Los resultados son registrados en Libro de Reci n Nacidos ubicado en estante colgante de secci n Inmunohematolog a Adem s los resultados deben ser registrados en el sistema computacional e Delphyn La forma correcta de realizar los registros se presentan en el Anexo N 3 Registro de resultados para clasificaci n ABO RhD Test de Antiglobulina humana y Detecci n de anticuerpos irregulares Manual de Inmunohematolog a Calidad y Seguridad del Paciente Hospital Regional Rancagua C digo SGC MIH ESI NAL gt Fecha 30 Julio 2015 RANCAGUA Manual de Inmunohematolog a HRR a Versi n 4 0 P gina 18 de 59 INVESTIGACI N RHD VARIANTE EN GEL RH COOMBS I Objetivo La investigaci n de RhD variante permite identificar una variante del ant geno Rh D que presenta una expresi n m s d bil que no es identificada por la clasificaci n ABO y Rh D convencionales La t cnica es en gel y se realizar s lo a Reci n Nacido cuya primera lectura del RhD haya sido negativa II Alcance M dico solicitante Funcionarios de la Unidad de Medicina
19. E INFORMACI N Proceso toma muestra en UMT T cnico param dico Paciente aia o Tecn logo m dico Tecn logo m dico secci n inmunohematolog a CD VENOPUNCI N Q UMT unidad de medicina Transfusional Lista de tareas para flujograma de informaci n VENOPUNCI N Verificar nombre del paciente Explicar el procedimiento que se realizar Lavado cl nico de manos Uso de guantes Rotulaci n de tubos con nombre y dos apellidos del paciente fecha y examen solicitado Ligar y ubicar vena a puncionar Desinfectar zona de punci n por arrastre con algod n con alcohol a 70 Realizar punci n Manual de Inmunohematolog a Calidad y Seguridad del Paciente Hospital Regional Rancagua HOSPITAL C digo SGC MIH REGIONAL A Fecha 30 Julio 2015 RANCAGUA Manual de Inmunohematolog a HRR E rs Versi n 4 0 P gina 52de 59 Conseguir volumen deseado seg n examen Retirar ligadura Poner algod n con tela adhesiva en sitio de punci n Eliminar desechos en caja de material corto punzante Despedir al paciente Llevar muestra a Tecn logo m dico de la secci n de Inmunohematolog a Definiciones y abreviaturas 1 1 Definiciones 1 1 1 Aglutinaci n Es la formaci n de la uni n ant geno anticuerpo que se puede detectar a simple vista 1 1 2 Anticuerpos Se conocen tambi n como inmunoglobulinas son prote na
20. HRR C digo SGC MIH Fecha 30 Julio 2015 Versi n 4 0 P gina 26 de 59 4 4 Interpretaci n La aglutinaci n de los eritrocitos indica que sus membranas han sido recubiertas por anticuerpos IgG o fracciones del complemento in vivo Las aplicaciones son 4 5 FLUJOGRAMA DE INFORMACI N Diagn stico de Enfermedad Hemol tica del Reci n Nacido Diagn stico de Enfermedad Hemol tica autoinmune Investigaci n de Reacci n hemol tica transfusional Proceso test de coombs directo en gel Paciente T cnico param dico secci n inmunohematolog a Tecn logo m dico secci n inmunohematolog a CD PREPARAR PREPARAR II CENTRIFUGAR RESULTADO S Ea R Resultado Manual de Inmunohematolog a Calidad y Seguridad del Paciente Hospital Regional Rancagua C digo SGC MIH ESI NAL 7 Fecha 30 Julio 2015 RANCAGUA Manual de Inmunohematolog a HRR rs Versi n 4 0 P gina 27 de 59 Lista de tareas para flujograma de informaci n PREPARAR I Centrifugar muestra Identificar muestra Agregar muestra de gl bulos rojos al tubo Lavar muestra de gl bulos rojos 4 veces con soluci n PBS PREPARAR II Diluir al 1 con DG sol la muestra Agregar suspensi n en gel RESULTADO Leer interpretar y registrar resultado en
21. Objetivo Estandarizar el proceso de extracci n de muestras sangu neas en pacientes hospitalizados y ambulatorios por T cnicos param dicos alumnos en pr ctica y Tecn logos M dicos de la Unidad de Medicina Transfusional del Hospital Regional Rancagua I1 Alcance 2 1 Campo de aplicaci n Clasificaci n de grupo sangu neo ABO y Rh detecci n de anticuerpos irregulares pruebas de compatibilidad TAI TAD 2 2 Personas Funcionarios de la Unidad de Medicina Transfusional como M dico jefe Tecn logo M dico Supervisor Tecn logos M dicos y T cnicos Param dicos M dico solicitante Todo paciente susceptible de recibir una transfusi n de hemocomponentes Toda persona que acuda a donar sangre III Encargado de ejecuci n y responsabilidad Tecn logo m dico La realizaci n de la toma de muestras es responsabilidad del Tecn logo M dico de transfusiones y tecn logo M dico de donantes T cnico Param dico La realizaci n de la toma de muestra tambi n es responsabilidad del T cnico Param dico de Transfusiones y T cnico Param dico de Donantes as como tambi n de preparar material e insumos necesarios para que Tecn logo M dico realice el procedimiento IV Desarrollo 4 1 Fundamento La toma de muestras sangu neas es el conjunto de procedimientos destinados a obtener una parte representativa de sangre para el correcto diagn stico e interpretaci n de ex menes solicitados por el cl nico Manual d
22. Transfusional como M dico jefe Tecn logo M dico Supervisor Tecn logos M dicos y T cnicos Param dicos Todo paciente susceptible de recibir una transfusi n de hemocomponentes II1 Encargado de ejecuci n y responsabilidad Tecn logo m dico La investigaci n RhD variante es responsabilidad del Tecn logo M dico de turno en secci n de inmunohematolog a T cnico Param dico preparar material e insumos necesarios para que Tecn logo M dico realice el an lisis IV Desarrollo y Descripci n del procedimiento 4 1 Desarrollo 4 1 1 Reunir los siguientes materiales muestra de 5 ml de sangre sin anticoagulante suero anti D pipetas pl sticas tubos Khan Centr fuga Rotofix 32 Hettich Zentrifugen centr fuga DG Spin gradilla l piz marcador soluci n DG Gel Sol tarjetas con columnas de gel micropipeta puntas DG steppers 4 1 2 Identificar muestras de sangre del paciente con resultado negativo para Rh D determinado en la clasificaci n ABO y Rh D 4 1 3 Utilizar el tubo marcado como Rh de la clasificaci n ABO y Rh D 4 1 4 Agregar 2 gotas de suero anti D al tubo marcado como Rh Manual de Inmunohematolog a Calidad y Seguridad del Paciente Hospital Regional Rancagua C digo SGC MIH HOSPITAL REGIONAL 7 Fecha 30 Julio 2015 RANCAGUA Manual de Inmunohematolog a HRR n a Versi n 4 0 P gina 19de 59 4 1 5 Centrifugar tubos 15 segundos a 1500 rpm en centr fuga DiaCent 12
23. a concentraci n del 1 4 1 9 Agregar 50 ul de la mezcla anterior a microtubo de la tarjeta de gel 4 1 10 Centrifugar para lectura por 9 minutos a 1500 rpm en la centr fuga DG Spin Ver anexo N 4 Manejo de la centr fuga DG Spin 4 1 11 Determinar la presencia o ausencia de aglutinaci n en la fuente de luz 4 1 12 Si existe aglutinaci n informar en cruces dependiendo de la intensidad de la aglutinaci n 4 2 Descripci n del procedimiento 4 2 1 El procedimiento se realiza en la secci n de Inmunohematolog a de la Unidad de Medicina Transfusional 4 2 2 El procedimiento debe ser realizado por el tecn logo m dico encargado de la secci n de Inmunohematolog a 4 2 3 El procedimiento tarda aproximadamente 30 minutos por muestra 4 3 Documentos relacionados 4 3 1 Instructivo del test de Coombs directo en gel 1 1 Obtener muestra del paciente estudiar 1 2 Identificar muestra 1 3 Centrifugar muestra 1 4 Resuspender gl bulos rojos de la muestra en su propio suero 1 5 Agregar 1 gota de suspensi n en tubo Khan 1 6 Lavar 4 veces 1 7 Resuspender con DG sol al 1 1 7 Agregar 50 ul gotas suspensi n a pocillos de gel 1 8 Centrifugar para lectura 1 9 Leer 1 10 Si existe aglutinaci n informar en cruces DBAAEABABABADARD w WWW WWW WWW Manual de Inmunohematolog a Calidad y Seguridad del Paciente Hospital Regional Rancagua HOSPITAL REGIONAL RANCAGUA YAA Manual de Inmunohematolog a
24. aci n de muestras Manual de Inmunohematolog a Calidad y Seguridad del Paciente Hospital Regional Rancagua C digo SGC MIH ESI NAL gt Fecha 30 Julio 2015 RANCAGUA Manual de Inmunohematolog a HRR rs Versi n 4 0 P gina 14 de 59 4 1 4 Separar 2 gotas de sangre en un tubo khan agregar PBS y lavar 4 veces a una Centrifugaci n 1 minuto en la centrifuga Rotofix 32A Ver anexo N 2 Manejo de la centrifuga Rotofix 32A 4 1 5 Marcar el GEL de Reci n Nacido con n mero y apellidos del paciente El GEL debe mantenerse a temperatura ambiente para su uso 4 1 6 Diluir los gl bulos rojos del tubo Khan con soluci n DG sol hasta una concentraci n del 1 4 1 7 Agregar 50 ul de la mezcla anterior a los 8 microtubos de la tarjeta de gel 4 1 8 Centrifugar para lectura por 9 minutos a 1500 rpm en la centr fuga DG Spin Ver anexo N 4 Manejo de la centr fuga DG Spin 4 1 11 Determinar la presencia o ausencia de aglutinaci n en la fuente de luz 4 1 12 Si existe aglutinaci n informar en cruces dependiendo de la intensidad de la aglutinaci n 4 1 13 Registrar los resultados 4 2 Descripci n del procedimiento 4 2 1 El procedimiento se realiza en la secci n de Inmunohematolog a de la Unidad de Medicina Transfusional 4 2 2 El procedimiento debe ser realizado por el Tecn logo M dico encargado de la secci n de Inmunohematolog a 4 2 3 El procedimiento tarda aproximadamente 15 minutos por
25. ada como I 4 1 7 Agregar 50 ul de c lulas del panel II a la columna marcado como II 4 1 8 Agregar 25 ul de suero de paciente a las columnas marcadas como I y II 4 1 9 Incubar a 37 C por 15 minutos en el incubador DG Therm Ver anexo N 5 Manejo del incubador DG Therm 4 1 10 Centrifugar para lectura por 9 minutos a 1500 rpm en la centr fuga DG Spin Ver anexo N 4 Manejo de la centr fuga DG Spin 4 1 11 Determinar la presencia o ausencia de aglutinaci n en la fuente de luz 4 1 12 Si existe aglutinaci n informar en cruces dependiendo de la intensidad de la aglutinaci n 4 1 13 Registrar los resultados 4 2 Descripci n del procedimiento 4 2 1 El procedimiento se realiza en la secci n de Inmunohematolog a y despacho de transfusiones del banco de sangre 4 2 2 El procedimiento debe ser realizado por el tecn logo m dico encargado de la secci n de Inmunohematolog a 4 2 3 El procedimiento tarda aproximadamente 40 minutos por muestra 4 3 Documentos relacionados 4 3 1 Instructivo del test de Coombs indirecto en gel 1 1 Obtener muestra de sangre del paciente a estudiar 1 2 Identificar muestra 1 3 Centrifugar muestra 1 4 Marcar 2 columnas como 1 y II 1 5 Agregar 50 ul de c lulas del panel I a la columna I 1 6 agregar 50 ul de c lulas del panel II a la columna II 1 7 Agregar 25 ul de suero de paciente a las columnas I y II 1 8 Incubar a 37 C por 15 minutos 1 9 Centrifugar para lectura 1 10
26. agujas en caja de cortopunzantes el material no cortopunzante se elimina en caja de desechos biol gicos 4 4 15 Eliminar los guantes a la basura y realizar lavado cl nico de manos 4 4 16 Colocar algod n con tela adhesiva en el sitio de punci n y despedir al paciente gui ndolo a la salida 4 4 17 Registrar el procedimiento realizado en el caso de estar en sala 4 4 18 Enviar las muestras al banco de sangre junto con la orden de ex menes solicitados 4 5 Precauciones 4 5 1 La muestra se lleva a 37 en ba o termorregulado hasta separar el suero de eritrocitos 4 5 2 La compresi n demasiado fuerte de la extremidad con la ligadura puede producir hem lisis y equimosis en las zonas afectadas 4 5 3 Un aspirado de sangre demasiado r pido con jeringa puede producir colapso del vaso o hem lisis de la muestra 4 5 4 Las venas de elecci n para puncionar est n en fosa cubital venas bas licas cef licas y medianas En antebrazo venas radiales superiores cubitales y medianas 4 5 5 Verificar que la vena a puncionar no est cerca de un sitio de infusi n endovenosa 4 5 6 No puncionar un sitio recientemente puncionado y con claros signos de hematoma Manual de Inmunohematolog a Calidad y Seguridad del Paciente Hospital Regional Rancagua HOSPITAL REGIONAL RANCAGUA IE Manual de Inmunohematolog a HRR C digo SGC MIH Fecha 30 Julio 2015 Versi n 4 0 P gina 51de 59 4 6 FLUJOGRAMA D
27. aterial e insumos necesarios para que Tecn logo M dico realice el an lisis IV Desarrollo y Descripci n del procedimiento 4 1 Desarrollo 4 1 1 Reunir los siguientes materiales muestra de 5 ml de sangre sin anticoagulante micropipetas puntas DG steppers centr fuga DG Spin gradilla l piz marcador tarjetas con columnas de gel gl bulos rojos del donante centrifuga Rotofix 32A 4 1 2 Obtener muestra de sangre del paciente a estudiar en tubo sin anticoagulante 4 1 3 Identificar muestra Ver anexo N 1 Identificaci n de muestras 4 1 4 Centrifugar muestra a 3500 rpm por 3 minutos en la centrifuga Rotofix 32A Ver anexo N 2 Manejo de la centr fuga Rotofix 32A 4 1 5 Marcar las columnas del gel con los n meros de matraz del donante a cruzar 4 1 6 Realizar una diluci n de los gl bulos rojos del donante al 1 con DG Gel Sol tubos que han sido previamente rotulados 4 1 7 Agregar 50 ul de la diluci n de gl bulos rojos del punto 3 1 6 a la columna Manual de Inmunohematolog a Calidad y Seguridad del Paciente Hospital Regional Rancagua C digo SGC MIH ESI NAL gt Fecha 30 Julio 2015 RANCAGUA Manual de Inmunohematolog a HRR rs Versi n 4 0 P gina 45 de 59 4 1 8 Agregar 25 ul de suero de paciente a las columnas marcadas con el n mero de matraz del donante 4 1 9 Incubar a 37 C por 15 minutos en la incubador DG Therm Ver anexo N 5 Manejo del incubador DG Therm 4
28. ces 4 1 18 Agregar 2 gotas de suero antiglobulina humana SAGH 4 1 19 Centrifugar para lectura 4 1 20 Agitar suavemente hasta desprender precipitado 4 1 21 Determinar la presencia o ausencia de aglutinaci n en la fuente de luz Ver anexo N 9 Manejo de fuente de luz 4 1 22 Informar la ltima diluci n en la que se produjo aglutinaci n 4 2 Descripci n del procedimiento 4 2 1 El procedimiento se realiza en la secci n de Inmunohematolog a de la Unidad de Medicina Transfusional 4 2 2 El procedimiento debe ser realizado por el tecn logo m dico encargado de la secci n de inmunohematolog a 4 2 3 El procedimiento tarda aproximadamente 90 minutos por muestra Manual de Inmunohematolog a Calidad y Seguridad del Paciente Hospital Regional Rancagua HOSPITAL REGIONAL RANCAGUA E C digo SGC MIH Fecha 30 Julio 2015 Manual de Inmunohematolog a HRR Versi n 4 0 P gina 39 de 59 4 3 Documentos relacionados 4 3 1 Mat ps 56 ZPAPAAARARAASR O A A a ARADARARARA Instructivo del test de titulaci n de Anticuerpos irregulares 1 Obtener muestra de sangre del paciente 2 Identificar muestra 3 Poner la muestra en el ba o a 37 C hasta coagule completamente 4 Marcar 10 tubos Khan como Y Y 1 8 1 16 1 32 1 64 1 128 1 512 1 1024 5 Agregar 300 pl suero AB inerte a los tubos 6 Tomar 300 ul de la muestra y agregarlo al tubo Y 7 Realizar dilucione
29. da al paciente Manual de Inmunohematolog a Calidad y Seguridad del Paciente Hospital Regional Rancagua HOSPITAL REGIONAL RANCAGUA YAA Manual de Inmunohematolog a HRR C digo SGC MIH Fecha 30 Julio 2015 Versi n 4 0 P gina 46 de 59 4 5 INDICADOR Nombre del Indicador Proporci n de pruebas de compatibilidad PC incompatibles Tipo Proceso Dimensi n de la Calidad Cumplimiento Normas MINSAL Justificaci n Seguridad Transfusional Para la implementaci n de la t cnica de identificaci n de anticuerpos irregulares con posterior solicitud de fenotipificaci n de unidades al CSV F rmula N mero de PC incompatibles x 100 N Total de PC realizadas Fuente de datos Libro de registro de pruebas cruzadas Umbral de cumplimiento gt 5 Periodicidad Mensual Responsable del monitoreo de la Tecn logo M dico Supervisor Tecn logo informaci n M dico Supervisor subrogante UMT 4 6FLUJOGRAMA DE INFORMACI N Proceso pruebas cruzadas en gel Paciente T cnico param dico Tecn logo m dico secci n inmunohematolog a inmunohematolog a secci n PREPARAR I PREPARAR II CENTRIFUGAR RESULTADO E e Resultado Manual de Inmunohematolog a Calidad y Seguridad del Paciente Hospital
30. del Tecn logo M dico de turno en secci n de Inmunohematolog a T cnico Param dico preparar material e insumos necesarios para que Tecn logo M dico realice an lisis de clasificaci n ABO y Rh D IV Desarrollo 4 1 Desarrollo 4 1 1 Reunir los siguientes materiales muestra de 5 ml de sangre sin anticoagulante tubos Khan gradilla l piz marcador sueros anti A anti B y anti D gl bulos rojos testigos A y B pipetas pl sticas centr fuga DiaCent 12 DiaMed fuente de luz 4 1 2 Enumerar 6 tubos Khan correlativamente con las siguientes indicaciones Tubo 1 A Tubo 2 B Tubo 3 Rh Tubo 4 GRA Tubo 5 G R B Tubo 6 PA Manual de Inmunohematolog a Calidad y Seguridad del Paciente Hospital Regional Rancagua C digo SGC MIH ESI NAL 7 Fecha 30 Julio 2015 RANCAGUA Manual de Inmunohematolog a HRR rs Versi n 4 0 P gina 3de59 4 1 3 Ordenar tubos correlativamente en gradilla 4 1 4 Obtener muestra de sangre del paciente a clasificar en tubo sin Anticoagulante 4 1 5 Identificar muestra Ver anexo N 1 Identificaci n de muestras 4 1 6 Centrifugar muestra a 4000 rpm por 5 minutos en centr fuga Rotofix 32 A Hettich Zentrifugen Ver anexo N 2 Manejo de la centr fuga Rotofix 32 A Hettich Zentrifugen 4 1 7 Agregar 2 gotas de suero del tubo del paciente al tubo 1 2 3 y tubo 6 4 1 8 Agregar 2 gotas de suero anti A al tubo 1 4 1 9 Agregar 2 gotas de suero anti B al tubo 2 4 1 1
31. den evidenciarse de diferentes formas y las Unidades de Medicina Transfusional se visualizan por medio de la aglutinaci n de los Gl bulos Rojos INFORME DE AGLUTINACI N EN CRUCES FUERZA DE REACCI N ASPECTO 4 Aglutinado nico Ausencia de c lulas libres 3 Reacci n fuerte Presencia de aglutinados grandes Sin c lulas libres Manual de Inmunohematolog a Calidad y Seguridad del Paciente Hospital Regional Rancagua HOSPITAL REGIONAL RANCAGUA C digo SGC MIH P Fecha 30 Julio 2015 Manual de Inmunohematolog a HRR Versi n 4 0 P gina 59 de 59 2 Aglutinados grandes en un mar de aglutinados peque os Sin c lulas libres 1 Muchos aglutinados peque os Muchas c lulas libres 0 Ausencia de aglutinaci n Versi n y control de cambio 01 11 06 2012 VERSI N CAMBIO FORMATO COMPLETO DEL DOCUMENTO 02 15 06 2012 Actualizaciones generales 03 30 07 2015 Actualizaci n del protocolo Manual de Inmunohematolog a Calidad y Seguridad del Paciente Hospital Regional Rancagua
32. do es NEGATIVO interpretar y registrar resultado en software y libro correspondiente V Registros Los resultados son registrados en Libro de Reci n Nacidos ubicado en estante colgante de secci n Inmunohematolog a Adem s los resultados deben ser registrados en el sistema computacional e Delphyn La forma correcta de realizar los registros se presentan en el Anexo N 3 Registro de resultados para clasificaci n ABO RhD Test de Antiglobulina humana y Detecci n de anticuerpos irregulares Realizar la inspecci n del procedimiento en el anexo N 13 Pauta de cotejo de investigaci n RhD Variante en gel Manual de Inmunohematolog a Calidad y Seguridad del Paciente Hospital Regional Rancagua C digo SGC MIH ESI NAL gt Fecha 30 Julio 2015 RANCAGUA Manual de Inmunohematolog a HRR a Versi n 4 0 P gina 24 de 59 TEST DE ANTIGLOBULINA DIRECTO COOMBS DIRECTO EN GEL I Objetivo El test de Coombs directo permite identificar el recubrimiento de membrana de los eritrocitos por anticuerpos del tipo IgG o fracciones de complemento que ocurre in vivo a este proceso se llama sensibilizaci n in vivo II Alcance M dico solicitante Funcionarios de la Unidad de Medicina Transfusional como M dico jefe Tecn logo M dico Supervisor Tecn logos M dicos y T cnicos Param dicos Todo paciente susceptible de recibir una transfusi n de hemocomponentes III Encargado de ejecuci n y
33. e Inmunohematolog a Calidad y Seguridad del Paciente Hospital Regional Rancagua C digo SGC MIH REGIONAL gt Fecha 30 Julio 2015 RANCAGUA Manual de Inmunohematolog a HRR a Versi n 4 0 P gina 49 de 59 4 2 Materiales insumos y equipos 4 2 1 Materiales 4 2 1 1 Guantes de l tex o vinilo 4 2 1 2 Bolas de algod n hidrof lico del tama o de una nuez 4 2 1 3 Contenedor de cortopunzante 4 2 1 4 Botella de 1000 ml de alcohol desnaturalizado 700 4 2 1 5 Jeringa pl stica desechable de 5 10 20ml seg n cantidad de muestra a extraer o sistema venojet 4 2 1 6 Aguja de 21Gx1 1 2 0 8 x 38mm 4 2 1 7 Ligadura de brazo 4 2 1 8 Tela adhesiva 4 2 1 9 Tubos pl sticos de capacidad 5 ml sin anticoagulante 4 2 1 10 Tubos pl sticos de capacidad 10 ml sin anticoagulante tapa roja 4 2 2 Insumos 4 2 2 1 NO APLICA 4 3 Equipos 4 3 1 Ba o termorregulador a 370 C 4 4 Descripci n 4 4 1 Reunir el material a utilizar y trasladarlo hacia el paciente en una bandeja o cooler 4 4 2 Aseg rese que el paciente corresponde al indicado en la orden de examen 4 4 3 Explique el procedimiento al paciente 4 4 4 Realizar lavado cl nico de manos 4 4 5 Poner guantes de l tex o vinilo 4 4 6 Poner la huincha de ligadura 8cm sobre la fosa cubital de cualquier brazo para identificar venas a puncionar 4 4 7 Ubicar la vena a puncionar limpiar y desengrasar por arrastre la zona a puncionar con
34. er unidad isogrupo En la secci n de Inmunohematolog a se realizar la clasificaci n de grupo sangu neo anticuerpos irregulares y pruebas de compatibilidad seg n corresponda 4 5 Registrar los resultados de clasificaci n de grupo sangu neo y anticuerpos irregulares en libro de clasificaci n y sistema inform tico el resultado de las pruebas de compatibilidad se registran en libro de Pruebas de Compatibilidad servicio nombre paciente n mero de matraz y compatibilidad en caso de no hallar unidades compatibles revisar el resultado del test de coombs indirecto y realizar test de coombs directo de ser negativo seguir buscando Manual de Inmunohematolog a Calidad y Seguridad del Paciente Hospital Regional Rancagua C digo SGC MIH HOSPITAL REGIONAL gt Fecha 30 Julio 2015 RANCAGUA Manual de Inmunohematolog a HRR rs Versi n 4 0 P gina 43 de 59 hasta encontrar unidades compatibles de ser positivo informar al m dico el resultado de los estudios para que determine las medidas a seguir 4 6 Los hemocomponentes a transfundir deben ser registrados adem s en sistema inform tico si son GSL el TM de Inmunohematolog a debe hacer las Prueba de compatibilidad y luego la reserva de la s unidad es 4 7 Se imprimir n las etiquetas las que se pegaran en la solicitud de transfusi n y unidad a transfundir Entregar luego la orden de transfusi n en la cual se registr el tipo y grupo Rh
35. ervisor Tecn logos M dicos y T cnicos Param dicos Todo paciente susceptible de recibir una transfusi n de hemocomponentes III Encargado de ejecuci n y responsabilidad Tecn logo m dico La realizaci n del test de Coombs indirecto es responsabilidad del Tecn logo M dico de turno en secci n de inmunohematolog a T cnico Param dico preparar material e insumos necesarios para que Tecn logo M dico realice el an lisis IV Desarrollo y Descripci n del procedimiento 4 1 Desarrollo 4 1 1 Reunir los siguientes materiales muestra de 5 ml de sangre sin anticoagulante micropipetas puntas DG steppers centr fuga DG Spin gradilla l piz marcador tarjetas con columnas de gel c lulas del panel I y II Serascan Diana 2 gl bulos rojos con ant genos conocidos centrifuga Rotofix 32A 4 1 2 Obtener muestra de sangre del paciente a estudiar en tubo sin anticoagulante 4 1 3 Identificar muestra Ver anexo N 1 Identificaci n de muestras 4 1 4 Centrifugar muestra a 4000 rpm por 5 minutos en la centrifuga Rotofix 32A Ver anexo N 2 Manejo de la centrifuga Rotofix 32A 4 1 5 Marcar 2 columnas del gel como I y II Manual de Inmunohematolog a Calidad y Seguridad del Paciente Hospital Regional Rancagua C digo SGC MIH ESI NAL gt Fecha 30 Julio 2015 RANCAGUA Manual de Inmunohematolog a HRR rs Versi n 4 0 P gina 29 de 59 4 1 6 Agregar 50 ul de c lulas del panel I a la columna marc
36. esultados Los resultados deben registrarse en libro correspondiente y tambi n en software de la unidad Impresi n de resultados Manual de Inmunohematolog a Calidad y Seguridad del Paciente Hospital Regional Rancagua C digo SGC MIH ESI NAL gt Fecha 30 Julio 2015 RANCAGUA Manual de Inmunohematolog a HRR a Versi n 4 0 P gina 8de59 V Registros Los resultados son registrados en Libro de Sala pacientes hospitalizados o en Libro de Policl nico pacientes tratados en los diferentes policl nicos del Hospital ambos libros est n ubicados en estante colgante de secci n Inmunohematolog a Adem s los resultados deben ser registrados en el sistema computacional e Delphyn La forma correcta de realizar los registros se presentan en el Anexo N 3 Registro de resultados para clasificaci n ABO RhD Test de Antiglobulina humana y Detecci n de anticuerpos irregulares Manual de Inmunohematolog a Calidad y Seguridad del Paciente Hospital Regional Rancagua C digo SGC MIH ESI NAL gt Fecha 30 Julio 2015 RANCAGUA Manual de Inmunohematolog a HRR a Versi n 4 0 P gina 9de 59 CLASIFICACI N ABO Y RH D EN L MINA I Objetivo La clasificaci n ABO y Rh D en l mina se usa s lo para Recontrol permite la determinaci n de los grupos sangu neos mediante la detecci n de los ant genos A y B presentes en la membrana del eritrocito pudiendo as c
37. formaci n PREPARAR Preparar en mes n de trabajo insumos necesarios para el an lisis ANALIZAR Dispensar muestra de paciente Dispensar antisueros Mezclar Agitar l mina Interpretar resultados V Registros Los resultados son registrados en Libro de Sala pacientes hospitalizados o en Libro de Policl nico pacientes tratados en los diferentes policl nicos del Hospital o Libro Reci n Nacidos pacientes reci n nacidos estos libros est n ubicados en estante colgante de secci n Inmunohematolog a Adem s los resultados deben ser registrados en el sistema computacional e Delphyn La forma correcta de realizar los registros se presentan en el Anexo N 3 Registro de resultados para clasificaci n ABO RhD Test de Antiglobulina humana y Detecci n de anticuerpos irregulares Manual de Inmunohematolog a Calidad y Seguridad del Paciente Hospital Regional Rancagua C digo SGC MIH HOSPITAL REGIONAL gt Fecha 30 Julio 2015 RANCAGUA Manual de Inmunohematolog a HRR a Versi n 4 0 P gina 13de 59 CLASIFICACI N ABO RHD Y TEST DE ANTIGLOBULINA DIRECTO COOMBS DIRECTO EN GEL PARA RECIEN NACIDOS I Objetivo La clasificaci n ABO y Rh D en GEL permite la clasificaci n de los grupos sangu neos mediante la detecci n de los ant genos A y B presentes en la membrana del eritrocito pudiendo clasificar donantes y receptores en los cuatro grupos sangu neos existentes A
38. g a PREPARAR PREPARAR II CENTRIFUGAR RESULTADO Manual de Inmunohematolog a Calidad y Seguridad del Paciente Hospital Regional Rancagua C digo SGC MIH ESI NAL A Fecha 30 Julio 2015 RANCAGUA Manual de Inmunohematolog a HRR E rs Versi n 4 0 P gina 41 de 59 Lista de tareas para flujograma de informaci n PREPARAR I Identificaci n de la muestra del paciente a estudiar Rotulaci n de 10 tubos PREPARAR II Incubar muestra a 37 C Realizar diluci n seriada Agregar diluci n y gl bulos rojos del panel de c lulas Incubar a 37 C por una hora RESULTADO Leer interpretar y registrar resultados en software y libro correspondiente V Registros Los resultados son registrados en Libro de Sala pacientes hospitalizados mayores de 6 meses Libro de Reci n Nacidos pacientes hospitalizados menores de 6 meses o en Libro de Policl nico pacientes tratados en los diferentes policl nicos del Hospital estos libros est n ubicados en estante colgante de secci n Inmunohematolog a Adem s los resultados deben ser registrados en el sistema computacional e Delphyn La forma correcta de realizar los registros se presentan en el Anexo N 3 Registro de resultados para clasificaci n ABO RhD Test de Antiglobulina humana y Detecci n de anticuerpos irregu
39. gel poner las tarjetas de gel que se deseen centrifugar procurando equilibrar Cerrar la tapa de la centrifuga Presionar el bot n START para comenzar la centrifugaci n Terminada la centrifugaci n presionar el bot n LID para abrirla tapa de la centrifuga Retirar las tarjetas de gel del interior de la centrifuga Anexo N 5 Manejo del incubador DG Therm ONUN Comprobar que el incubador est conectado a la corriente Encender el equipo en el bot n POWER que est en la parte posterior del incubador y esperar que tome temperatura Levantar la tapa del incubador Poner las tarjetas de gel en las ranuras correspondientes Si se desea incubar tubos ponerlos en los capachos que se encuentran en el borde exterior del incubador Cerrar la tapa del incubador Presionar el bot n Start y comenzar a correr el tiempo de incubaci n 15 minutos Terminado el tiempo de incubaci n levantar la tapa del incubador Manual de Inmunohematolog a Calidad y Seguridad del Paciente Hospital Regional Rancagua C digo SGC MIH REGIONAL gt Fecha 30 Julio 2015 RANCAGUA Manual de Inmunohematolog a HRR a Versi n 4 0 P gina 56 de 59 8 Retirar las tarjetas de gel o los tubos seg n corresponda 9 Cerrar la tapa del incubador Anexo N 6 Manejo de la fuente de luz ea Comprobar que la fuente de luz est operativa Encender la luz presionando el interruptor Si se utiliza la l
40. lares Manual de Inmunohematolog a Calidad y Seguridad del Paciente Hospital Regional Rancagua C digo SGC MIH HOSPITAL REGIONAL gt Fecha 30 Julio 2015 RANCAGUA Manual de Inmunohematolog a HRR rs Versi n 4 0 P gina 42 de 59 REALIZACI N DE ESTUDIOS PRE TRANSFUSIONALES 1 Objetivo Realizar estudios pre transfusionales de manera de brindar una terapia transfusional segura oportuna y de calidad de acuerdo a los criterios de prioridad y stock disponibles a los pacientes que lo requieren 2 Definiciones GSL gl bulos rojos leucorreducidos PFC plasma fresco congelado PLQ plaqueta CPP crioprecipitado 3 Alcance Tecn logo M dico TM T cnico Param dico TP 4 Modo de Operaci n 4 1 La secretaria o T cnico param dico que recepciona la solicitud debe corroborar que los datos est n completos y correctos de lo contrario debe entregar la orden al responsable para la correcci n del error 4 2 En el caso de que el paciente no est clasificado y la solicitud sea de GSL la muestra con la solicitud de transfusi n ser entregada al TP de la secci n Inmunohematolog a si la solicitud corresponde a PFC PLQ o CPP ser entregada al TM de Transfusiones 4 3 Confirmar en PC el grupo sangu neo que debe coincidir con lo anotado en la solicitud de transfusi n 4 4 Comenzar estudios pre transfusionales de acuerdo al hemocomponente a transfundir Si fuera GSL escog
41. las del panel I y II suero AB inerte ba o a 37 C 4 1 2 Obtener muestra de sangre del paciente en tubo sin anticoagulante 4 1 3 Identificar muestra Ver anexo N 1 Identificaci n de muestras 4 1 4 Poner la muestra en el ba o a 37 C hasta que coagule completamente 4 1 5 Marcar 10 tubos Khan como Y Y 1 8 1 16 1 32 1 64 1 128 1 256 1 512 1 1024 4 1 6 Agregar 300 pl de suero del paciente al tubo 1 2 Manual de Inmunohematolog a Calidad y Seguridad del Paciente Hospital Regional Rancagua C digo SGC MIH ESI NAL A Fecha 30 Julio 2015 RANCAGUA Manual de Inmunohematolog a HRR E rs Versi n 4 0 P gina 38 de 59 4 1 7 Agregar 300 ul de suero AB inerte al tubo v2 Ver anexo N 3 Preparaci n de reactivos 4 1 8 Mezclar con la micropipeta 4 1 9 Agregar 300 ul de suero AB inerte al resto de los tubos Ver anexo N 7 Preparaci n de reactivos 4 1 10 Tomar 300 ul de la soluci n del tubo Y y traspasarlo al tubo Y 4 1 11 Mezclar con la micropipeta 4 1 12 Tomar 300 pul de la soluci n del tubo 1 4 y traspasarlo al tubo 1 8 y repetir esta acci n correlativamente hasta completar la totalidad de los tubos 4 1 13 Marcar 10 tubos del 1 al 10 al N 1 marcar SD sin diluir 4 1 14 Traspasar 100 pl de cada diluci n usando una punta nueva para cada tubo 4 1 15 Agregar a cada tubo 50 ul de las c lulas del panel 4 1 16 Incubar a 37 C por 1 horas en incubador 4 1 17 Lavar 4 ve
42. las flechas arriba o abajo hasta llegar a las revoluciones deseadas que se encuentra bajo la leyenda RPM RCFx100 10 Presionar la tecla START para comenzar la centrifugaci n O OT EO pN Manual de Inmunohematolog a Calidad y Seguridad del Paciente Hospital Regional Rancagua C digo SGC MIH ESI NAL gt Fecha 30 Julio 2015 RANCAGUA Manual de Inmunohematolog a HRR rs Versi n 4 0 P gina 54 de 59 11 Cuando la centrifugaci n finalice se encender la luz que est al lado del bot n LID 12 Presionar la tecla LID para abrir la tapa de la centrifuga 13 Retirar los capachos con los tubos 14 Sacar los tubos de los capachos Poner nuevamente los capachos en su posici n correspondiente en la centrifuga Anexo N 3 Registro de resultados para clasificaci n ABO Rh Test de Antiglobulina humana y Detecci n de anticuerpos irregulares Los resultados deben ser consignados en el sistema computacional y los libros correspondientes y deben indicar los siguientes datos A Nombre y apellidos B Fecha de nacimiento C Edad D RUT E Ubicaci n del paciente F Numero de solicitud G Resultados del o los ex menes realizados Todos estos resultados deben ser consignados en el recuadro correspondiente para cada dato Para registrar en el sistema computacional e Delphyn A M dulo Laboratorio B Resultados por muestra C Ingresar N mero de Solicitud con pistola l ser o manual D I
43. lasificar donantes y receptores en los cuatro grupos sangu neos existentes A B AB y O Permite tambi n la detecci n de los ant genos del tipo Rh D en la membrana de los eritrocitos Este procedimiento es realizado cuando llegan segundas muestras de un paciente Recontrolar unidades de gl bulos rojos y Recontrol en pacientes que se transfundir n I1 Alcance M dico solicitante Funcionarios de la Unidad de Medicina Transfusional como M dico jefe Tecn logo M dico Supervisor Tecn logos M dicos y T cnicos Param dicos Todo paciente susceptible de recibir una transfusi n de hemocomponentes IIT Encargado de ejecuci n y responsabilidad Tecn logo m dico La clasificaci n ABO y RhD es responsabilidad del Tecn logo M dico de turno en la secci n correspondiente T cnico Param dico preparar material e insumos necesarios para que Tecn logo M dico realice an lisis de reclasificaci n ABO y RhD IV Desarrollo y Descripci n del procedimiento 4 1 Desarrollo 4 1 1 Reunir los siguientes materiales muestra de sangre sueros anti A anti B y anti D pipetas pl ticas si corresponde l mina de vidrio con separaciones mezcladores fuente de luz centr fuga DiaCent 12 DiaMed 4 1 2 Obtener muestra de sangre del paciente a clasificar en tubo sin anticoagulante 5 ml 4 1 3 Identificar muestra seg n anexo N 1 Identificaci n de muestras Manual de Inmunohematolog a Calidad y Seguridad del Paciente Hospi
44. lio 2015 RANCAGUA Manual de Inmunohematolog a HRR rs Versi n 4 0 P gina 57 de 59 f Establezca ausencia en aglutinaci n empleando Gl bulos rojos de antigenicidad conocida y a las T se aladas en el punto a incube 1 hora luego centrifugar y realizar las pruebas hasta Coombs Anexo N 8 Preparaci n de gl bulos rojos testigos 1 Recolectar dos bolsas de sangre una de grupo A y una del grupo B que tengan serolog a negativa 2 Tomar 2 ml de sangre de la bolsa A y depositarlos en un tubo Khan de 10 ml previamente marcado como A 3 Tomar 2 ml de sangre de la bolsa B y depositarlos en un tubo Khan de 10 ml previamente marcado como B Llenar con PBS hasta 1 cm del borde superior del tubo Tapar con parafilm y mezclar por inversi n 4 veces Centrifugar 4000 rpm por 5 minutos Eliminar el sobrenadante con una pipeta Pasteur Repetir este proceso desde el punto 4 al 7 hasta obtener un sobrenadante libre de hemolisis 9 Tomar 2 tubos de 10 ml 10 Identificar 1 tubo como gl bulos rojos testigos A 11 Identificar 1 tubo como gl bulos rojos testigos B 12 Agregar un volumen suficiente de los gl bulos lavados A al tubo identificado como gl bulo rojo testigo A Si es necesario agregar m s gl bulos rojos lavados hasta conseguir una concentraci n de 2 3 13 Agregar un volumen suficiente de los gl bulos lavados B al tubo identificado como gl bulo rojo testigo B Si es necesario agregar m s gl bulos r
45. mina realizar el aseo posterior a su uso Apagar la fuente de luz posterior a su uso presionando el interruptor Anexo N 7 Preparaci n de reactivos 1 1 1 1 1 1 2 Buffer fosfato salino PBS pH 7 1 Para preparar 2 litros de PBS 2 Se deben agregar 2 tabletas de Buffer fosfato salino 3 Se rotula con la fecha de preparaci n y responsable de preparaci n 4 Se deja reposar para que las pastillas se disuelvan 5 Mezclar antes de usar Suero AB inerte El suero AB inerte tiene m ltiples usos en inmunohematolog a desde suero control negativo de reacciones serol gicas hasta diluyente de Acs en titulaci n Al calentar el plasma 1 hora a 56 C se denatura el fibrin geno precipitando y se inactiva el complemento Materiales Plasma fresco AB con tamizaje microbiol gico negativo Ba o mar a a 56 C Centr fuga T cnica a El plasma AB debe ser de un donante que no posea Ac Irregulares en ning n medio haciendo los estudios a 4 C 22 C y 37 C b Ponga el plasma en la misma bolsa bien sellada en el ba o mar a a 56 C durante 1 hora c Centrifugar a alta velocidad por 10 minutos y transferir el sobrenadante a tubos limpios d Deje los tubos toda la noche a 4 C e Filtre el suero y gu rdelo en al cuotas de 1 mla 30 C Manual de Inmunohematolog a Calidad y Seguridad del Paciente Hospital Regional Rancagua C digo SGC MIH HOSPITAL REGIONAL 7 Fecha 30 Ju
46. muestra en su propio suero 4 1 6 Agregar 1 gota de suspensi n realizada en el punto anterior en un tubo Khan previamente marcado para su identificaci n 4 1 7 Lavar 4 veces el tubo con PBS 4 1 8 Diluir los gl bulos rojos del tubo Khan con soluci n DG sol hasta una concentraci n del 1 4 1 9 Agregar 50 ul de la mezcla anterior a los 4 microtubos de la tarjeta de gel 4 1 10 Centrifugar para lectura por 9 minutos a 1500 rpm en la centr fuga DG Spin Ver anexo N 4 Manejo de la centr fuga DG Spin 4 1 11 Determinar la presencia o ausencia de aglutinaci n en la fuente de luz 4 1 12 Si existe aglutinaci n informar en cruces dependiendo de la intensidad de la aglutinaci n 4 2 Descripci n del procedimiento 4 2 1 El procedimiento se realiza en la secci n de Inmunohematolog a de la Unidad de Medicina Transfusional 4 2 2 El procedimiento debe ser realizado por el tecn logo m dico encargado de la secci n de Inmunohematolog a 4 2 3 El procedimiento tarda aproximadamente 30 minutos por muestra 4 3 Documentos relacionados 4 3 1 Instructivo del estudio de muestras de Coombs Directo Positivo en Gel 1 Obtener muestra del paciente estudiar 2 Identificar muestra 3 Centrifugar muestra 4 Resuspender gl bulos rojos de la muestra en su propio suero 5 Agregar 1 gota de suspensi n en tubo Khan 6 Lavar 4 veces 7 Resuspender con DG sol al 1 7 Agregar 50 ul gotas suspensi n a pocillos de gel
47. n cl nica y otros datos del paciente El microtubo Ctl debe ser negativo Si es positivo invalidar la prueba Repetir determinaci n lavando previamente los hemat es con soluci n salina fisiol gica y preparar de nuevo una suspensi n de los hemat es lavados Si el microtubo Ctl de la repetici n es negativo se pueden interpretar los resultados de la prueba si es positivo invalidar la prueba Manual de Inmunohematolog a Calidad y Seguridad del Paciente Hospital Regional Rancagua HOSPITAL REGIONAL RANCAGUA Y Manual de Inmunohematolog a HRR C digo SGC MIH Fecha 30 Julio 2015 Versi n 4 0 P gina 16 de 59 4 5 FLUJOGRAMA DE INFORMACI N Proceso clasificac n ABO RhD y Coombs directo en Gel para Reci n Nacidos Paciente T cnico param dico secci n inmunohematolog a Tecn logo m dico secci n inmunohematolog a EY PREPARAR PREPARAR II CENTRIFUGAR RESULTADO S LEY R Resultado Lista de tareas para flujograma de informaci n PREPARAR I Centrifugar muestra Identificar muestra Agregar muestra de gl bulos rojos al tubo Lavar muestra de gl bulos rojos 4 veces con soluci n PBS PREPARAR II Manual de Inmunohematolog a Calidad y Seguridad del Paciente Hospital Regional Rancagua HOSPITAL REGIONAL z R
48. n f sico Lectura apresurada y breve Temperatura inadecuada Centrifugaci n inadecuada en tiempo y o velocidad Falsos positivos a Dependientes de los gl bulos rojos Contaminaci n bacteriana b Dependientes del suero Contaminaci n bacteriana Mezcla de anticuerpos No respetar las indicaciones del fabricante c De orden f sico Centrifugaci n excesiva en tiempo y o velocidad Manual de Inmunohematolog a Calidad y Seguridad del Paciente Hospital Regional Rancagua C digo SGC MIH ESI NAL A Fecha 30 Julio 2015 RANCAGUA Manual de Inmunohematolog a HRR E ra Versi n 4 0 P gina 6de59 4 6 FLUJOGRAMA DE INFORMACI N Proceso clasificaci n ABO y Rh D en tubo Secretaria o T cnico param dico Tecn logo M dico Paciente Servicio T cnico param dico secci n secci n secci n ventanilla Inmunohematolog a inmunohematolog a CN Sa MUESTRA RECEPCIONAR OE PREPARAR OE QA PREPARAR II OE AS CENTRIFUGAR EA ANALIZAR OE Orden de examen R Resultados Manual de Inmunohematolog a Calidad y Seguridad del Paciente Hospital Regional Rancagua C digo SGC MIH ESI NAL A Fecha 30 Julio 2015 RANCAGUA Manual de Inmunohematolog a HRR rs Versi n
49. n tubo 1 Marcar 6 tubos como A B Rh GR A GR B y PA 2 Obtener una muestra de sangre del paciente 3 Identificar muestra 4 Centrifugar muestra 5 Agregar suero del tubo del paciente al tubo 4 tubo 5 y tubo 6 6 Agregar antisuero a tubo 1 2 y 3 7 Resuspender los gl bulos rojos en su propio suero 8 Agregar 1 gota de la suspensi n a tubos 1 2 3 y 6 9 Agregar gl bulos rojo testigo 10 Centrifugar tubos para lectura 11 Leer 12 Registrar los resultados DBARARAEAAAABAADRAD w WWW WWW WWW sA sdi d il 1 1 Eds La La yla dee A 4 4 Interpretaci n ANTI A ANTI B ANTI D GR A GR B PA A 0 0 0 B 0 0 0 AB 0 0 0 O 0 0 0 A 0 0 0 0 B 0 0 0 0 AB 0 0 0 0 O 0 0 0 0 Manual de Inmunohematolog a Calidad y Seguridad del Paciente Hospital Regional Rancagua C digo SGC MIH ESI NAL A Fecha 30 Julio 2015 RANCAGUA Manual de Inmunohematolog a HRR E rs Versi n 4 0 P gina 5de59 4 5 Factores de error Falsos negativos a Dependiendo de los gl bulos rojos Muestra hemolizada Inadecuada concentraci n de gl bulos Emplear gl bulos rojos testigo con ant genos d biles b Dependientes del suero Emplear suero de bajo t tulo Emplear sueros vencidos Emplear sueros mal conservados Presencia de hemolisinas en el suero en estudio c De orde
50. ncargado de la secci n correspondiente 4 2 3 El procedimiento tarda aproximadamente 5 minutos por muestra 4 3 DOCUMENTOS RELACIONADOS 4 3 1 Instructivo de clasificaci n ABO y Rh D en l mina 4 3 1 1 Obtener muestra de sangre del paciente Manual de Inmunohematolog a Calidad y Seguridad del Paciente Hospital Regional Rancagua C digo SGC MIH ED N AL P Fecha 30 Julio 2015 RANCAGUA Manual de Inmunohematolog a HRR E a Versi n 4 0 P gina 11 de 59 4 3 1 2 Identificar muestra 4 3 1 3 Resuspender gl bulos rojos de la muestra en su propio suero 4 3 1 4 Agregar 1 gotas de la resuspensi n a 4 separaciones diferente de la l mina 4 3 1 5 Agregar 2 gotas de antisuero correspondiente 4 3 1 6 Mezclar con mezcladores 4 3 1 7 Agitar la l mina 4 3 1 8 Leer e interpretar los resultados 4 4 FLUJOGRAMA DE INFORMACI N Proceso de clasificaci n ABO y Rh en l mina T cnico param dico Tecn logo m dico Paciente o unidad p 9 y secci n secci n sala o de gl bulos rojos transfusiones transfusiones PREPARAR ANALIZAR C D Manual de Inmunohematolog a Calidad y Seguridad del Paciente Hospital Regional Rancagua HOSPITAL REGIONAL RANCAGUA IS Manual de Inmunohematolog a HRR C digo SGC MIH Fecha 30 Julio 2015 Versi n 4 0 P gina 12de59 Lista de tareas flujograma de in
51. nexo N 5 Manejo del incubador DG Therm 55 Anexo N 6 Manejo de la fuente de luz 56 Anexo N 7 Preparaci n de reactivos 56 Anexo N 8 Preparaci n de gl bulos rojos testigos 57 Anexo N 9 Registro de resultados de Pruebas de Compatibilidad 58 Manual de Inmunohematolog a Calidad y Seguridad del Paciente Hospital Regional Rancagua C digo SGC MIH ESI NAL A Fecha 30 Julio 2015 RANCAGUA Manual de Inmunohematolog a HRR E rs Versi n 4 0 P gina 2de59 CLASIFICACI N ABO Y RH D EN TUBO I Objetivo La clasificaci n ABO y Rh D en tubo permite la clasificaci n de los grupos sangu neos mediante la detecci n de los ant genos A y B presentes en la membrana del eritrocito pudiendo clasificar donantes y receptores en los cuatro grupos sangu neos existentes A B AB y O Adem s determina la presencia de anticuerpos naturales anti A y anti B Permite tambi n la detecci n de los ant genos del tipo Rh D en la membrana de los eritrocitos Esta t cnica ser realizada en muestras de pacientes mayores de 6 meses I1 Alcance M dico solicitante Funcionarios de la Unidad de Medicina Transfusional como M dico jefe Tecn logo M dico Supervisor Tecn logos M dicos y T cnicos Param dicos Todo paciente susceptible de recibir una transfusi n de hemocomponentes IIT Encargado de la ejecuci n y su responsabilidad Tecn logo m dico La clasificaci n ABO y Rh D es responsabilidad
52. ngresar el Resultado del o los ex menes realizados El resultado de la clasificaci n ABO y Rh D debe ser consignado manualmente en el tubo As mismo para registrar en los libros se debe tener presente la AGLUTINACI N EN CRUCES esto debido a que las reaccione Ag Ac pueden evidenciarse de diferentes formas y las Unidades de Medicina Transfusional se visualizan por medio de la aglutinaci n de los Gl bulos Rojos Manual de Inmunohematolog a Calidad y Seguridad del Paciente Hospital Regional Rancagua C digo SGC MIH ED N AL gt Fecha 30 Julio 2015 RANCAGUA Manual de Inmunohematolog a HRR E Versi n 4 0 P gina 55 de 59 INFORME DE AGLUTINACI N EN CRUCES FUERZA DE REACCI N ASPECTO 4 Aglutinado nico Ausencia de c lulas libres 3 Reacci n fuerte Presencia de aglutinados grandes Sin c lulas libres 2 Aglutinados grandes en un mar de aglutinados peque os Sin c lulas libres 1 Muchos aglutinados peque os Muchas c lulas libres 0 Ausencia de aglutinaci n Los resultados positivos de coombs directos e indirectos deben registrarse con ROJO Anexo N 4 Manejo de centr fuga DG Spin 1 2 3 4 5 6 7 8 Comprobar si la centrifuga est conectada a la corriente Encender la centrifuga en el bot n POWER en parte posterior de la centrifuga Presionar el bot n OPEN para abrir la tapa de la centr fuga Para centrifugar tarjetas de
53. ojos lavados hasta conseguir una concentraci n de 2 3 14 Tapar los tubos y mezclar por inversi n 15 Conservarlos entre 2 8 C Su duraci n m xima es de un d a A Manual de Inmunohematolog a Calidad y Seguridad del Paciente Hospital Regional Rancagua C digo SGC MIH ESI NAL gt Fecha 30 Julio 2015 RANCAGUA Manual de Inmunohematolog a HRR a Versi n 4 0 P gina 58 de 59 Anexo N 9 Registro de resultados de Pruebas de Compatibilidad Los resultados deben ser consignados en Libro de pruebas Cruzadas e incluir n los siguientes datos A Nombre y apellidos B Procedencia C Clasificaci n ABO RhD del paciente D Hemocomponente compatibilizado Clasificaci n ABo RhD C digo Unidad Resultado de la prueba cruzada E Fecha Hora F Resultado Todos estos resultados deben ser consignados en el recuadro correspondiente para cada dato Los resultados positivos deben registrarse con l piz ROJO Para registrar en el sistema computacional e Delphyn A M dulo Paciente B Buscar informaci n por paciente C Ingresar el RUT y seleccionar el paciente D Seleccionar petici n E Reservar Unidad F A adir G Agregar la unidad compatibilizada H Aceptar Se deben registrar todas las unidades compatibilizadas ya sean negativas o positivas As mismo para registrar en los libros se debe tener presente la AGLUTINACI N EN CRUCES esto debido a que las reaccione Ag Ac pue
54. ra e interpretaci n del resultado con posterior registro en software y libro correspondiente Imprimir resultado V Registros Los resultados son registrados en Libro de Sala pacientes hospitalizados mayores de 6 meses Libro de Reci n Nacidos pacientes hospitalizados menores de 6 meses o en Libro de Policl nico pacientes tratados en los diferentes policl nicos del Hospital estos libros est n ubicados en estante colgante de secci n Inmunohematolog a Adem s los resultados deben ser registrados en el sistema computacional e Delphyn La forma correcta de realizar los registros se presentan en el Anexo N 3 Registro de resultados para clasificaci n ABO RhD Test de Antiglobulina humana y Detecci n de anticuerpos irregulares Manual de Inmunohematolog a Calidad y Seguridad del Paciente Hospital Regional Rancagua C digo SGC MIH ESI NAL 7 Fecha 30 Julio 2015 RANCAGUA Manual de Inmunohematolog a HRR a Versi n 4 0 P gina 32de 59 ESTUDIO DE MUESTRAS COOMBS DIRECTO POSITIVO EN GEL PARA PACIENTES DE POLICLINICO ONCOLOGIA I Objetivo Estudio de muestras Coombs Directo positivo en t cnica en Gel permite diferenciar hemat es sensibilizados in vivo por inmunoglobulinas de tipo IgG o la fracci n C3d del complemento Este estudio se realizar s lo a pacientes del Policl nico de Oncolog a cuyo Coombs directo est positivo II Alcance M dico solicitante F
55. responsabilidad Tecn logo m dico La realizaci n del test de Coombs directo es responsabilidad del Tecn logo M dico de turno en secci n de inmunohematolog a T cnico Param dico preparar material e insumos necesarios para que Tecn logo M dico realice el an lisis IV Desarrollo y Descripci n del procedimiento 4 1 Desarrollo 4 1 1 Reunir los siguientes materiales muestra de 5 ml de sangre sin anticoagulante micropipetas puntas DG steppers centr fuga DG Spin gradilla l piz marcador tubos Khan soluci n DG sol tarjetas con columnas de gel centrifuga Rotofix 32 A 4 1 2 Obtener muestra de sangre del paciente a clasificar en tubo sin anticoagulante 4 1 3 Identificar muestra Ver anexo N 1 Identificaci n de muestras 4 1 4 Centrifugar muestra a 4000 rpm por 5 minutos en la centr fuga Rotofix 32 A Ver anexo N 5 Manejo de la centrifuga Rotofix 32 A 4 1 5 Resuspender gl bulos rojos de la muestra en su propio suero Manual de Inmunohematolog a Calidad y Seguridad del Paciente Hospital Regional Rancagua C digo SGC MIH ESI NAL gt Fecha 30 Julio 2015 RANCAGUA Manual de Inmunohematolog a HRR rs Versi n 4 0 P gina 25 de 59 4 1 6 Agregar 1 gota de suspensi n realizada en el punto anterior en un tubo Khan previamente marcado para su identificaci n 4 1 7 Lavar 4 veces el tubo con PBS 4 1 8 Diluir los gl bulos rojos del tubo Khan con soluci n DG sol hasta un
56. s del tipo globulina se pueden encontrar en sangre y otros fluidos son los encargados de estimular la respuesta inmune 1 1 3 Ant genos Es cualquier sustancia que genera la formaci n de anticuerpos y pueden causar una respuesta inmune 1 1 4 Antisuero Es una soluci n que contiene anticuerpos que reaccionan espec ficamente con un ant geno 1 1 5 Enfermedad hemol tica del reci n nacido Es la reacci n inmunol gica del organismo de la madre contra en feto que puede estar determinada por una incompatibilidad sangu nea 1 1 6 Reacci n post transfusional Es cualquier complicaci n generada por la transfusi n ya sea hemolisis urticaria etc Debe ser consignada para futuras trasfusiones 1 1 7 Suero antiglobulina Es una soluci n que contiene anticuerpos cuyo ant geno son otras globulinas llamadas antiglobulinas 1 2 Abreviaturas 2 1 UMT Unidad de Medicina Transfusional 2 2 EDTA cido etilendiaminotetraac tico 2 3 EHRN Enfermedad hemol tica del reci n nacido 2 4 IgG Inmunoglobulina G 2 5 PBS buffer fosfato salino 2 6 SAGH Suero antiglobulina humana 2 7 Ag Ant geno 2 8 Ac Anticuerpo Rp pp Manual de Inmunohematolog a Calidad y Seguridad del Paciente Hospital Regional Rancagua C digo SGC MIH ESI NAL A Fecha 30 Julio 2015 RANCAGUA Manual de Inmunohematolog a HRR E rs Versi n 4 0 P gina 53 de 59 Referencias Manual t cnico AABB 2007 Manual inm
57. s seriadas al resto de los tubos 8 Agregar a cada tubo 100 pl de cada diluci n a los tubos previamente dos 9 Agregar 50 ul de las c lulas del panel que corresponda 10 Incubar a 37 C por 1 hora 11Centrifugar para lectura 12 Agitar suavemente y leer 13 Lavar 4 veces 14 Agregar 2 gotas de suero antiglobulina humana SAGH 15 Centrifugar para lectura 16 Agitar suavemente hasta desprender precipitado 17 Leer 18 Registrar los resultados 19 Informar la ltima diluci n en la que se produjo aglutinaci n 4 4 Consideraciones Esta t cnica da valores aproximados de la concentraci n de anticuerpos debido a que S lo determina la cantidad de anticuerpo unido al gl bulo rojo y no la cantidad total existente en el suero Depende de la afinidad del anticuerpo por el ant geno No se considera el factor de diluci n que introduce la adici n de la suspensi n de gl bulos rojos S lo cambios de t tulo de 2 tubos o m s se consideran significativos Manual de Inmunohematolog a Calidad y Seguridad del Paciente Hospital Regional Rancagua C digo SGC MIH ESI NAL gt Fecha 30 Julio 2015 RANCAGUA Manual de Inmunohematolog a HRR E rs Versi n 4 0 P gina 40 de 59 4 5 FLUJOGRAMA DE INFORMACI N Proceso titulaci n de anticuerpos irregulares T cnico param dico Tecn logo m dico Paciente secci n secci n inmunohematolog a inmunohematolo
58. sultados BARA AAADADADD A 3 1 pol pal 3d cl 3 1 8 3 1 9 dl e del ql pl 4 4 Interpretaci n e Si el resultado del test es Negativo se puede afirmar que esa persona es Rh D negativo e Si el resultado es Positivo aglutinaci n existen dos posibilidades 1 La persona tiene en sus gl bulos rojos un Ant geno D d bil 2 Los gl bulos rojos presentan autoanticuerpos ya sea por auto Ac tipo IgG fracciones del complemento o adem s por interacci n con el medio en que est preparado el antisuero usado Para descartar esta ltima posibilidad se prosigue la investigaci n efectuando un test de Coombs Directo a los gl bulos rojos en estudio Si el test de Coombs Directo es negativo se puede concluir que la persona es Rh D positivo d bil Manual de Inmunohematolog a Calidad y Seguridad del Paciente Hospital Regional Rancagua HOSPITAL REGIONAL RANCAGUA YAA Manual de Inmunohematolog a HRR C digo SGC MIH Fecha 30 Julio 2015 Versi n 4 0 P gina 21de 59 Si el test de Coombs Directo es positivo no se puede llegar a conclusiones apropiadas y el Rh de esa persona no puede ser diagnosticado Resumen de Resultados de la investigaci n Suero anti D T cnica Du Test de Coombs Informe Directo 4 Rh D positivo 0 0 Rh D negativo Rh D positivo Q Tr 0 d bil RhD 0 cds ay indeterminado Manual de Inmunohematolog a Calidad
59. tal Regional Rancagua C digo SGC MIH HOSPITAL REGIONAL gt Fecha 30 Julio 2015 RANCAGUA Manual de Inmunohematolog a HRR rs Versi n 4 0 P gina 10 de 59 4 1 4 Resuspender gl bulos rojos de la muestra en su propio suero a una concentraci n del 3 4 4 1 5 Agregar 1 gotas de la resuspensi n a 4 separaciones diferente de la l mina de vidrio 4 1 6 Agregar 2 gotas de suero anti A a la primera separaci n que contiene la suspensi n 4 1 7 Agregar 2 gotas de suero anti B a la segunda separaci n que contiene la suspensi n 4 1 8 Agregar 2 gotas de suero anti AB a la tercera separaci n que contiene la suspensi n 4 1 9 Agregar 2 gotas de suero anti D a la cuarta separaci n que contiene la suspensi n 4 1 10 Mezclar con los mezcladores en forma circular suavemente por 5 segundos cada separaci n 4 1 11 Agitar la l mina con movimientos circulares hasta que se forme la aglutinaci n 4 1 12 Determinar la presencia de aglutinaci n en la fuente de luz Ver anexo N 6 Manejo de fuente de luz 4 1 13 Interpretar los resultados 4 2 Descripci n del procedimiento 4 2 1 El procedimiento se realiza en la secci n de inmunohematolog a y en la secci n de despacho de transfusiones de la Unidad de Medicina Transfusional en donde se re controlan la unidades de Gl bulos Rojos leucorreducidos que ser n transfundidos 4 2 2 El procedimiento debe ser realizado por el tecn logo m dico e
60. uncionarios de la Unidad de Medicina Transfusional como M dico jefe Tecn logo M dico Supervisor Tecn logos M dicos y T cnicos Param dicos Todo paciente susceptible de recibir una transfusi n de hemocomponentes II1 Encargado de ejecuci n y responsabilidad Tecn logo m dico La realizaci n del estudio de muestras de Coombs Directo Positivo es responsabilidad del Tecn logo M dico de turno en secci n de inmunohematolog a T cnico Param dico preparar material e insumos necesarios para que Tecn logo M dico realice el an lisis IV Desarrollo y Descripci n del procedimiento 4 1 Desarrollo 4 1 1 Reunir los siguientes materiales muestra de 5 ml de sangre sin anticoagulante micropipetas puntas DG steppers centr fuga DG Spin gradilla l piz marcador tubos Khan soluci n DG sol tarjetas con columnas de gel centrifuga Rotofix 32 A 4 1 2 Obtener muestra de sangre del paciente a clasificar en tubo sin anticoagulante 4 1 3 Identificar muestra Ver anexo N 1 Identificaci n de muestras 4 1 4 Centrifugar muestra a 4000 rpm por 5 minutos en la centr fuga Rotofix 32 A Ver anexo N 5 Manejo de la centrifuga Rotofix 32 A Manual de Inmunohematolog a Calidad y Seguridad del Paciente Hospital Regional Rancagua C digo SGC MIH ESI NAL A Fecha 30 Julio 2015 RANCAGUA Manual de Inmunohematolog a HRR E rs Versi n 4 0 P gina 33 de 59 4 1 5 Resuspender gl bulos rojos de la
61. unohematolog a Universidad de Talca T cnicas inmunohematol gicas para el trabajo con geles marca Grifols ANEXOS Anexo N 1 Identificaci n de muestras Las muestras deben ser registradas en el sistema computacional y los libros correspondientes El sistema lanza un numero de petici n y en la etiqueta indica los siguientes datos A Nombre y dos apellidos B RUN C Edad D fecha E N mero de solicitud o petici n F Ubicaci n del paciente dentro del hospital si corresponde Las muestras deben ser identificadas con las etiquetas con los c digos de barras que permitan generar un control de la trazabilidad de la muestra desde su ingreso Estas etiquetas deben ser pegadas al tubo que contiene la muestra y a la solicitud de examen Anexo N 2 Manejo de la centrifugar ROTOFIX 32 A Comprobar si la centrifuga est conectada a la corriente Encender la centrifuga en el bot n POWER Presionar la tecla LID para abrir la tapa de la centrifuga Retirar los capachos del interior de la centrifuga Ordenar los tubos en los capachos procurando que est n equilibrados Poner en el interior de la centrifuga los capachos poniendo frente a frente los capachos que est n equilibrados Cerrar la tapa de la centrifuga Seleccionar el tiempo de centrifugaci n presionando las flechas arriba o abajo hasta llegar al tiempo deseado que se encuentran bajo la opci n SE 9 Seleccionar las revoluciones de centrifugaci n presionando

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