FLEX Monoclonal Mouse Anti-Human CD68 Clone PG-M1
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1. 4 CE FLEX Monoclonal Mouse Anti Human CD68 Clone PG M1 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus Code 15613 ENGLISH Intended use For in vitro diagnostic use FLEX Monoclonal Mouse Anti Human CD68 Clone PG M1 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus is intended for use in immunohistotochemistry together with Dako Autostainer Autostainer Plus instruments This antibody labels macrophages and is useful for the identification of M4 myelomonocytic and M5 monocytic types of acute myeloid leukemia AML and histiocytic sarcoma 1 The clinical interpretation of any staining or its absence should be complemented by morphological studies using proper controls and should be evaluated within the context of the patient s clinical history and other diagnostic tests by a qualified pathologist Summary and explanation CD68 is a highly glycosylated lysosomal membrane protein with a Mr of 110 000 The CD68 protein belongs to a family of lysosomal glycoprotein LGP plasma membrane shuttling proteins that play a role in endocytosis and or Iysosomal trafficking CD68 is expressed strongly in cytoplasmic granules and weakly on the surface of macrophages monocytes neutrophils basophils and NK cells Additionally CD68 is expressed by approximately 40 of peripheral blood B cells and is weakly expressed in 50 of B cell type acute lymphoblastic leukemia B ALL cells CD68 can also be found in the cytoplasm of non haematopoieti2. len um Metallazidansammlungen in den Leitungen vorzubeugen 3 Wie alle Produkte biologischen Ursprungs m ssen auch diese entsprechend gehandhabt werden 4 Geeignete Schutzkleidung tragen um Augen und Hautkontakt zu vermeiden 5 Nicht verwendete L sung ist entsprechend rtlichen bundesstaatlichen und staatlichen Richtlinien zu entsorgen Explanation of symbols Explication des symboles Erl uterung der Symbole Catalogue number Temperature limitation Use by Reference catalogue Limites de temp rature Utiliser avant Bestellnummer Zul ssiger Temperaturbereich Verwendbar bis In vitro diagnostic medical device Contains sufficient for lt n gt tests Manufacturer Contenu suffisant pour lt n gt tests Fabricant Dispositif medical de diagnostic in vitro In vitro Diagnostikum Inhalt ausreichend f r lt n gt Tests Hersteller Lagerung Bei 2 8 aufbewahren Nach Ablauf des auf dem Fl schchen aufgedruckten Verfalldatums nicht mehr verwenden Werden die Reagenzien nicht entsprechend den angegebenen Bedingungen aufbewahrt m ssen die Bedingungen vom Anwender verifiziert werden Es gibt keine offensichtlichen Anzeichen f r eine eventuelle Produktinstabilit t Positiv und Negativkontrollen sollten daher zur gleichen Zeit wie die Patientenproben getestet werden Falls es zu einer unerwarteten F rbung kommt die sich nicht durch Unterschiede bei Laborverfahren erkl ren l sst und auf ein Problem mit dem Antik rper hindeutet ist der tech
3. granulaire Caract ristiques de performance Tissus sains Dans le sang p riph rique normal l anticorps marque uniquement les monocytes Dans un grand nombre de tissus test s tous les macrophages taient marqu s Dans la moelle osseuse galement les ost oclastes taient positifs alors que les granulocytes et les pr curseurs my lo des taient invariablement n gatifs Une faible r activit de certains m gacaryocytes a t observ e dans environ 20 des cas Les cellules de Kupffer du foie les mastocytes et les cellules synoviales taient les seules autres cellules normales tre marqu es par l anticorps 3 Les macrophages des centres germinatifs des amygdales ont pr sent une coloration mod r e forte tandis que la coloration des cellules microgliales du cerveau tait faible mod r e Tissus tumoraux Sur 431 cas de cancers du syst me lympho h matopo tique la r activit avec l anticorps tait limit e aux leuc mies aigu s my lo des de types M4 et M5 aux vrais sarcomes histiocytaires et aux mastocytoses Des r sultats n gatifs constants ont t obtenus pour les leuc mies aigu s my loblastiques de types M1 M2 et M3 les Iymphomes malins non hodgkiniens lymphocytes B et T le lymphome de Hodgkin les leuc mies aigu s lymphoblastiques et la leuc mie my lo de chronique Les 370 tumeurs non h matopo tiques taient pour la plupart n gatives l anticorps l exception de 15 cas
4. sur 15 de myoblastomes cellules granulaires 6 cas sur 13 de carcinomes cellules claires du rein 4 cas sur 10 de glioblastomes 10 cas sur 18 de m ningiomes et 5 cas sur 50 de m lanomes et comme pr vu 2 cas sur 2 de tumeurs des os cellules g antes et 7 cas sur 7 de xanthogranulomes 3 L anticorps PG M1 marque quelques cancers non h matopo tiques en particulier 10 des m lanomes 3 Par cons quent le diagnostic du sarcome histiocytaire doit toujours tre confirm par une positivit des cellules n oplasiques au moins un autre marqueur sp cifique des macrophages et ou l antigene leucocytaire commun et par une n gativit aux antig nes associ s aux pith liums et aux m lanomes 1 DEUTSCH Zweckbestimmung Zur In vitro Diagnostik FLEX Monoclonal Mouse Anti Human CD68 Clone PG M1 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus ist zur Verwendung in der Immunhistochemie in Verbindung mit Dako Autostainer Autostainer Plus Ger ten bestimmt Dieser Antik rper markiert Makrophagen und dient zur Identifizierung von M4 myelomonozytischen und M5 monozytischen Typen akuter myeloider Leuk mie AML sowie histiozytischer Sarkome 1 Die klinische Auswertung einer eventuell eintretenden F rbung sollte durch morphologische Studien mit ordnungsgem en Kontrollen erg nzt werden und von einem qualifizierten Pathologen unter Ber cksichtigung der Krankengeschichte und anderer Diagnostiktests des Patienten vorgenom
5. valu e en fonction des ant c dents cliniques du patient et d autres tests diagnostiques par un pathologiste qualifi R sum et explication La CD68 est une prot ine membranaire lysosomale tr s glycosyl e d un poids mol culaire de 110000 La prot ine CD68 appartient une famille de glycoprot ines lysosomales LGP proteines navette de la membrane cytoplasmique qui jouent un r le dans l endocytose et ou dans le trafic lysosomal La CD68 est fortement exprim e dans les granules cytoplasmiques et faiblement exprim e la surface des macrophages des monocytes des neutrophiles des basophiles et des cellules NK De plus la CD68 est exprim e par environ 40 des lymphocytes B du sang p riph rique et est faiblement exprim e par 50 des cellules de leuc mie aigu lymphoblastique lymphocytes B LAL B La CD68 peut galement tre pr sente dans le cytoplasme de tissus non h matopo tiques en particulier dans le foie et dans les tubules et glom rules r naux 2 A la difference de nombreux autres antigenes leucocytaires CD la mol cule de CD68 est tr s h t rog ne d un point de vue antig nique et diff rents anticorps anti CD68 pr sentent diff rentes r activit s cellulaires 3 Se r f rer aux nstructions g n rales de coloration immunohistochimique de Dako ou aux instructions du syst me de d tection relatives aux proc dures IHC pour plus d informations concernant les points suivants 1 Principe de proc du
6. Cordell JL Falini B Flenghi L Jones DB Pileri S Radzun HJ et al M15 CD68 cluster workshop report In Knapp W D rken B Gilks WR Rieber EP Schmidt RE Stein Workshop und Konferenz ber leukozytendifferenzierende Antigene als Anti CD68 geclustert 4 H et al editors Leukocyte typing IV White cell differentiation antigens Proceedings of the 4th International Workshop and Conference 1989 Feb 21 25 Vienna Austria Der Antik rper markiert COS 1 und WOP Zellen die mit CD68 cDNA transfiziert sind Im Gegensatz zu anderen CD68 Antik rpern die sowohl Makrophagen als auch Oxford New York Tokyo Oxford University Press 1989 p 925 7 Myeloidzellen markieren weist der PG M1 Antik rper ein fixiermittelresistentes Epitop auf der makrophagenbeschr nkten Form des CD68 Antigens nach 3 Geliefertes Reagenz Gebrauchsfertiger monoklonaler Maus Antik rper in fl ssiger Form in einem Puffer der stabilisierendes Protein und 0 015 mol L Natriumazid enth lt Klon PG M1 3 Isotyp IgG3 Kappa 2 Immunogen Pr parat aus menschlichen mononukle ren Milzzellen mit mehr als 80 Gaucher Zellen 3 Vorsichtsma nahmen 1 Nur f r Fachpersonal bestimmt 2 Dieses Produkt enth lt Natriumazid NaN eine in reiner Form u erst giftige Chemikalie Natriumazid kann auch in als ungef hrlich eingestuften Konzentrationen mit Blei und Kupferrohren reagieren und hochexplosive Metallazide bilden Nach der Entsorgung stets mit viel Wasser nachsp
7. L dispense volume Autoprogram CD68PG without counterstaining or CD68PGH with counterstaining The Auxiliary step should be set to rinse buffer in staining runs with lt 10 slides For staining runs with gt 10 slides the Auxiliary step should be set to none This ascertains comparable wash times All incubation steps should be performed at room temperature For details please refer to the Operator s Manual for the dedicated instrument If the protocols are not available on the used Dako Autostainer instrument please contact Dako Technical Services Optimal conditions may vary depending on specimen and preparation methods and should be determined by each individual laboratory If the evaluating pathologist should desire a different staining intensity a Dako Application Specialist Technical Service Specialist can be contacted for information on re programming of the protocol Verify that the performance of the adjusted protocol is still valid by evaluating that the staining pattern is identical to the staining pattern described in Performance characteristics Counterstaining in hematoxylin is recommended using EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8018 Non aqueous permanent mounting medium is recommended 115219 002 IS613 EFG MNI 2009 12 04 p 1 4 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 9595 CVR No 33 21 13 17 Posit
8. amp paisseur des coupes d chantillons de tissu doit tre d environ 4 um Un pretraitement avec d masquage d Epitope induit par la chaleur HIER est n cessaire avec le Dako PT Link R f PT100 PT101 Pour plus de d tails se r f rer au Guide d utilisation du PT Link Des r sultats optimaux sont obtenus en pr traitant les tissus l aide de la EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x R f K8010 K8004 Coupes incluses en paraffine le pr traitement des coupes tissulaires fix es au formol et incluses en paraffine est recommand l aide de la proc dure de pr paration d chantillon 3 en un pour le Dako PT Link Suivre la proc dure de pr traitement indiqu e dans la notice de la EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x R f K8010 K8004 Remarque apr s coloration les coupes doivent tre d shydrat es lav es et mont es l aide d un milieu de montage permanent Coupes d paraffin es le pr traitement des coupes tissulaires d paraffin es fix es au formol et incluses en paraffine est recommand l aide du Dako PT Link en suivant la m me proc dure que pour les coupes incluses en paraffine Apr s coloration un montage aqueux ou permanent des lames est recommand Les coupes de tissus ne doivent pas s cher lors du traitement ni lors de la proc dure de coloration immunohistochimique suivante Pour une meilleure adh rence des coupes de tissus sur les lames de verre il est
9. c tissues especially the liver and renal glomeruli and tubules 2 Unlike many other CD leucocyte antigens the CD68 molecule is antigenically very heterogenous and different antibodies to CD68 show different cellular reactivities 3 Refer to Dako s General Instructions for Immunohistochemical Staining or the detection system instructions of IHC procedures for 1 Principle of Procedure 2 Materials Required Not Supplied 3 Storage 4 Specimen Preparation 5 Staining Procedure 6 Quality Control 7 Troubleshooting 8 Interpretation of Staining 9 General Limitations Reagent provided Ready to use monoclonal mouse antibody provided in liquid form in a buffer containing stabilizing protein and 0 015 mol L sodium azide Clone PG M1 3 Isotype IgG3 kappa Immunogen Human mononuclear spleen cell preparation containing more than 80 Gaucher s cells 3 Specificity Anti Human CD68 clone PG M1 was clustered as anti CD68 at the Fifth International Workshop and Conference on Human Leucocyte Differentiation Antigens 4 The antibody labels COS 1 and WOP cells transfected with CD68 cDNA Unlike other CD68 antibodies which label both macrophages and myeloid cells the PG M1 antibody detects a fixative resistant epitope on the macrophage restricted form of the CD68 antigen 3 Precautions 1 For professional users 2 This product contains sodium azide NaN a chemical highly toxic in pure form At product concentrations though n
10. deren makrophagenbeschr nkten Marker bzw das Leucocyte Common Antigen sowie durch ein negatives Testergebnis f r epithel und melanomassoziierte Antigene 1 gest tzt werden References References Literatur 1 Falini B Flenghi L Pileri S Stein H D rkop H Pasqualucci L et al M15 1 PG M1 a new mAb directed against a fixative resistant macrophage restricted epitope of the CD68 molecule In Knapp W D rken B Gilks WR Rieber EP Schmidt RE Stein H et al editors Leukocyte typing IV White cell differentiation antigens Proceedings of the 4th International Workshop and Conference 1989 Feb 21 25 Vienna Austria Oxford New York Tokyo Oxford University Press 1989 p 928 30 Goyert SM MC12 CD68 workshop panel report In Kishimoto T Kikutani H von dem Borne AEG Goyert SM Mason DY Miyasaka M et al editors Leucocyte typing VI White cell differentiation antigens Proceedings of the 6th International Workshop and Conference 1996 Nov 10 14 Kobe Japan New York London Garland Publishing Inc 1997 p 1015 6 ee 3 Falini B Flenghi L Pileri S Gambacorta M Bigerna B Durkop H et al PG M1 A new monoclonal antibody directed against a fixative resistant epitope on the Spezifit t macrophage restricted form of the CD68 molecule Am J Pathol 1993 142 1359 72 Anti Human CD68 Clone PG M1 wurde bei dem der Fifth International Workshop and Conference on Human Leucocyte Differentiation Antigens 5 Internationale r 4
11. egative were acute myeloblastic leukaemias of M1 M2 and M3 type malignant non Hodgkin s lymphomas of B and T cell type Hodgkins Iymphoma acute Iymphoblastic leukemias and chronic myeloid leukemia The majority of 370 non haematopoietic tumours were negative with the antibody exceptions being 15 15 granular cell myoblastomas 6 13 kidney clear cell carcinomas 4 10 glioblastomas 10 18 meningiomas and 5 50 melanomas and as expected 2 2 giant cell tumours of the bone and 7 7 xanthogranulomas 3 The PG M1 antibody labels some non haematopoietic malignancies especially about 10 of melanomas 3 therefore the diagnosis of histiocytic sarcoma should always be supported by positivity of neoplastic cells for at least another macrophage restricted marker and or the leucocyte common antigen and negativity for epithelial and melanoma associated antigens 1 FRANCAIS Utilisation prevue Pour utilisation diagnostique in vitro FLEX Monoclonal Mouse Anti Human CD68 clone PG M1 Ready to Use Link est destin une utilisation en immunohistochimie avec les instruments Autostainer Link Cet anticorps marque les macrophages et est utile pour l identification des types M4 my lomonocytaire et M5 monocytaire de la leuc mie aigu myeloide LAM et du sarcome histiocytaire 1 L interpr tation clinique de toute coloration ou son absence doit tre compl t e par des tudes morphologiques en utilisant des contr les appropri s et doit tre
12. esseren Haftung der Gewebeschnitte an den Glasobjekttr gern wird die Verwendung von FLEX IHC Microscope Slides Code Nr K8020 empfohlen F rbeverfahren und erforderliche aber nicht mitgelieferte Materialien Das empfohlene Visualisierungssystem ist EnVision M FLEX High pH Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8010 Die F rbeschritte und Inkubationszeiten sind in der Software der Dako Autostainer Autostainer Plus Ger te mit den folgenden Protokollen vorprogrammiert Matrixprotokoll FLEXRTU2 200 uL Abgabevolumen oder FLEXRTU3 300 uL Abgabevolumen Autoprogram CD68PG ohne Gegenf rbung oder CD68PGH mit Gegenf rbung Bei F rbedurchl ufen mit h chstens 10 Objekttr gern sollte der Zusatz Schritt auf Puffersp lgang eingestellt werden F r F rbedurchl ufe mit mehr als 10 Objekttr gern den Zusatz Schritt auf Keine einstellen Dieses gew hrleistet vergleichbare Waschzeiten Alle Inkubationsschritte sollten bei Raumtemperatur durchgef hrt werden N here Einzelheiten bitte dem Benutzerhandbuch f r das jeweilige Ger t entnehmen Wenn die F rbeprotokolle auf dem verwendeten Dako Autostainer Ger t nicht verf gbar sind bitte den Technischen Kundendienst von Dako verst ndigen Optimale Bedingungen k nnen je nach Probe und Pr parationsverfahren unterschiedlich sein und sollten vom jeweiligen Labor selbst ermittelt werden Falls der beurteilende Pathologe eine andere F rbungsintensit t w nscht ka
13. hr 20 der F lle wurde eine schwache Reaktivit t einiger Megakaryozyten beobachtet Kupffer Zellen in der Leber Mastzellen und Synovialzellen waren die einzigen anderen gesunden Zellen die vom Antik rper markiert wurden 3 Makrophagen in den Keimzentren der Mandeln weisen eine m ige bis starke F rbereaktion auf w hrend die Mikrogliazellen im Hirn eine schwache bis m ige F rbereaktion aufweisen Pathologisches Gewebe Bei 431 Malignit ten des lymphoh mopoietischen Systems war die Reaktivit t mit dem Antik rper auf akute myeloische Leuk mien des Typs M4 und M5 echte histiozytische Sarkome und Mastozytose beschr nkt Durchwegs negativ waren akute myeloblastische Leuk mien des Typs M1 M2 und M3 maligne Non Hodgkin Lymphome des B und T Zellen Typs Hodgkin Lymphome akute Iymphoblastische Leuk mien und chronische myeloische Leuk mie Der Gro teil von 370 nicht h matopoietischen Tumoren reagierte negativ mit dem Antik rper mit Ausnahme von 15 von 15 K rnerzellenmyoblastomen 6 von 13 klarzelligen Nierenkarzinomen 4 von 10 Glioblastomen 10 von 18 Meningiomen und 5 von 50 Melanomen und wie erwartet 2 von 2 Riesenzellkarzinomen des Knochens und 7 von 7 Xanthogranulomen 3 Der PG M1 Antik rper markiert einige nicht h matopoietische Malignit ten insbesondere ca 10 der Melanome 3 daher sollte die Diagnose eines histiozytischen Sarkoms immer durch ein positives Testergebnis f r neoplastische Zellen f r mindestens einen an
14. ive and negative controls should be run simultaneously using the same protocol as the patient specimens The positive control tissue should include tonsil and brain and the cells structures should display reaction patterns as described for these tissues in Performance characteristics in all positive specimens The recommended negative control reagent is FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus Code IS750 Staining interpretation Cells of the monocyte macrophage lineage labeled by the antibody display cytoplasmic diffuse or granular staining Performance characteristics Normal tissues In normal peripheral blood the antibody labels only monocytes In a wide range of tissues tested all macrophages were labeled In bone marrow also osteoclasts were positive whereas granulocytes and myeloid precursors were consistently negative A weak reactivity of some megakaryocytes was observed in about 20 of the cases Kuppfer s cells in the liver mast cells and synovial cells were the only additional normal cells labeled by the antibody 3 Macrophages in the germinal centers of tonsil show a moderate to strong staining reaction whereas the microglial cells in brain show a weak to moderate staining reaction Abnormal tissues Among 431 malignancies of the Iymphohemopoietic system reactivity with the antibody was restricted to acute myeloid leukemias of the M4 and ME type true histiocytic sarcomas and mastocytosis Consistently n
15. k rper eignet sich zur Markierung von formalinfixierten und paraffineingebetteten Gewebeschnitten Gewebeproben sollten in Schnitte von ca 4um St rke geschnitten werden Die Vorbehandlung durch hitzeinduzierte Epitopdemaskierung HIER mit Dako PT Link Code Nr PT100 PT101 ist erforderlich Weitere Informationen hierzu siehe PT Link Benutzerhandbuch Optimale Ergebnisse k nnen durch Vorbehandlung der Gewebe mit EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x Code Nr K8010 K8004 erzielt werden Paraffineingebettete Schnitte Die Vorbehandlung der formalinfixierten paraffineingebetteten Schnitte mit dem 3 in 1 Probenvorbereitungsverfahren f r Dako PT Link wird empfohlen Vorbehandlung gem der Beschreibung in der Packungsbeilage f r EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x Code Nr K8010 K8004 durchf hren Hinweis Nach dem F rben m ssen die Schnitte dehydriert gekl rt und mit permanentem Einbettmedium auf den Objekttr ger aufgebracht werden Entparaffinierte Schnitte Eine Vorbehandlung der entparaffinierten formalinfixierten paraffineingebetteten Gewebeschnitte mit Dako PT Link nach demselben Verfahren wie f r die paraffineingebetteten Schnitte beschrieben wird empfohlen Die Objekttr ger nach dem F rben mit einem w ssrigen oder permanenten Einbettmedium bedecken Die Gewebeschnitte d rfen w hrend der Behandlung oder des anschlie enden immunhistochemischen F rbeverfahrens nicht austrocknen Zur b
16. men werden Zusammenfassung und Erkl rung CD68 ist ein hochglykosyliertes Membranprotein mit einem Mr von 110 000 Das CD68 Protein z hlt zu einer Familie von Lysosomal Glykoprotein LGP Plasmamembran Shuttleproteinen die bei der Endozytose bzw beim Iysosomalen Trafficking eine Rolle spielen CD68 wird in zytoplasmatischen Granula stark und auf der Oberfl che von Makrophagen Monozyten Neutrophilen Basophilen und NK Zellen schwach exprimiert Au erdem wird CD68 von ca 40 der B Zellen im peripheren Blut exprimiert und bei 50 der Zellen bei akuter lymphoblastischer Leuk mie des B Zellen Typs B ALL schwach exprimiert CD68 tritt auch im Zytoplasma von nicht h matopoietischen Geweben insbesondere der Leber und in Nierenglomeruli und tubuli auf 2 Anders als viele anderen CD Leukozyten Antigene ist das CD68 Molek l antigen sehr heterogen und verschiedene Antik rper gegen CD68 weisen unterschiedliche zellul re Reaktivit ten auf 3 Folgende Angaben bitte den Allgemeinen Richtlinien zur immunhistochemischen F rbung von Dako oder den Anweisungen des Detektionssystems f r IHC Verfahren entnehmen 1 Verfahrensprinzip 2 Erforderliche aber nicht mitgelieferte Materialien 3 Aufbewahrung 4 Vorbereitung der Probe 5 F rbeverfahren 6 Qualit tskontrolle 7 Fehlersuche und behebung 8 Auswertung der F rbung 9 Allgemeine Beschr nkungen Vorbereitung der Probe und erforderliche aber nicht mitgelieferte Materialien Der Anti
17. ng EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x Code K8010 K8004 Paraffin embedded sections Pre treatment of formalin fixed paraffin embedded tissue sections is recommended using the 3 in 1 specimen preparation procedure for Dako PT Link Follow the pre treatment procedure outlined in the package insert for EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x Code K8010 K8004 Note After staining the sections must be dehydrated cleared and mounted using permanent mounting medium Deparaffinized sections Pre treatment of deparaffinized formalin fixed paraffin embedded tissue sections is recommended using Dako PT Link and following the same procedure as described for paraffin embedded sections After staining the slides should be mounted using aqueous or permanent mounting medium The tissue sections should not dry out during the treatment or during the following immunohistochemical staining procedure For greater adherence of tissue sections to glass slides the use of FLEX IHC Microscope Slides Code K8020 is recommended Staining procedure including materials required but not supplied The recommended visualization system is EnVision FLEX High pH Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8010 The staining steps and incubation times are pre programmed into the software of Dako Autostainer Autostainer Plus instruments using the following protocols Template protocol FLEXRTU2 200 uL dispense volume or FLEXRTUS3 300 u
18. nische Kundendienst von Dako zu verst ndigen Consult instructions for use Batch code Voir les instructions d utilisation Numero de lot Gebrauchsanweisung beachten Chargenbezeichnung 115219 002 IS613 EFG MNI 2009 12 04 p 3 4 115219 002 IS613 EFG MNI 2009 12 04 p 4 4 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17
19. nn ein Anwendungsspezialist oder Kundendiensttechniker von Dako bei der Neuprogrammierung des Protokolls helfen Die Leistung des angepassten Protokolls muss verifiziert werden indem gew hrleistet wird dass das F rbemuster mit dem unter Leistungsmerkmale beschriebenen F rbemuster identisch ist Die Gegenf rbung in H matoxylin sollte mit EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8018 ausgef hrt werden Empfohlen wird ein nichtw ssriges permanentes Fixiermittel Positiv und Negativkontrollen sollten zur gleichen Zeit und mit demselben Protokoll wie die Patientenproben getestet werden Das positive Kontrollgewebe sollte Mandelgewebe und Hirn enthalten und die Zellen Strukturen m ssen in allen positiven Proben die f r dieses Gewebe unter Leistungsmerkmale beschriebenen Reaktionsmuster aufweisen Das empfohlene Negativ Kontrollreagenz ist FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr IS750 Auswertung der F rbung Von Monozyten Makrophagen abstammende Zellen die vom Antik rper markiert werden weisen eine zytoplasmatische diffuse oder granul re F rbung auf Leistungsmerkmale Gesundes Gewebe Bei normalem peripherem Blut markiert der Antik rper nur Monozyten Bei einer gro en Anzahl getesteter Gewebe wurden alle Makrophagen markiert Im Knochenmark waren auch Osteoklasten positiv w hrend Granulozyten und myeloische Vorl ufer durchwegs negativ waren Bei ungef
20. ot classified as hazardous sodium azide may react with lead and copper plumbing to form highly explosive build ups of metal azides Upon disposal flush with large volumes of water to prevent metal azide build up in plumbing 3 As with any product derived from biological sources proper handling procedures should be used 4 Wear appropriate Personal Protective Equipment to avoid contact with eyes and skin 5 Unused solution should be disposed of according to local State and Federal regulations Storage Store at 2 8 Do not use after expiration date stamped on vial If reagents are stored under any conditions other than those specified the conditions must be verified by the user There are no obvious signs to indicate instability of this product Therefore positive and negative controls should be run simultaneously with patient specimens If unexpected staining is observed which cannot be explained by variations in laboratory procedures and a problem with the antibody is suspected contact Dako Technical Support Specimen preparation including materials required but not supplied The antibody can be used for labeling formalin fixed paraffin embedded tissue sections Tissue specimens should be cut into sections of approximately 4 pm Pre treatment with heat induced epitope retrieval HIER is required using Dako PT Link Code PT100 PT101 For details please refer to the PT Link User Guide Optimal results are obtained by pretreating tissues usi
21. ration et doivent tre d termin es par chaque laboratoire individuellement Si le pathologiste qui r alise l valuation d sire une intensit de coloration diff rente un sp cialiste d application sp cialiste du service technique de Dako peut tre contact pour obtenir des informations sur la re programmation du protocole V rifier que l ex cution du protocole modifi est toujours valide en v rifiant que le sch ma de coloration est identique au sch ma de coloration d crit dans les Caract ristiques de performance Il est recommand d effectuer une contre coloration l aide d hematoxyline EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus R f K8018 L utilisation d un milieu de montage permanent non aqueux est recommand e Des contr les positifs et n gatifs doivent tre r alis s en m me temps et avec le m me protocole que les chantillons du patient Les tissus de contr le positifs doivent comprendre les amygdales et le cerveau et les cellules structures doivent pr senter des sch mas de r action tels que d crits pour ces tissus dans les Caract ristiques de performance dans tous les chantillons positifs Le contr le n gatif recommand est le FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus R f IS750 Interpr tation de la coloration Les cellules de la lign e monocytaire macrophagique marqu es par l anticorps pr sentent une coloration cytoplasmique diffuse ou
22. re 2 Mat riels requis mais non fournis 3 Conservation 4 Pr paration des chantillons 5 Proc dure de coloration 6 Contr le qualit 7 D pannage 8 Interpr tation de la coloration 9 Limites g n rales R actifs fournis Anticorps monoclonal de souris pr t l emploi fourni sous forme liquide dans un tampon contenant une prot ine stabilisante et 0 015 mol L d azide de sodium Clone PG M1 3 Isotype IgG3 kappa Immunog ne Pr paration de cellules humaines mononucl es de la rate contenant plus de 80 de cellules de Gaucher 3 Sp cificit Anti Human CD68 clone PG M1 a t class comme un anti CD68 la Fifth International Workshop and Conference on Human Leucocyte Differentiation Antigens Cinqui me Conf rence et Atelier Internationaux sur les Antig nes de Diff renciation des Leucocytes Humains HLDA qui s est tenu Boston en 1993 4 L anticorps marque les cellules COS 1 et WOP transfect es avec l ADNc de la CD68 la diff rence des autres anticorps anti CD68 qui marquent les macrophages et les cellules my lo des l anticorps PG M1 d tecte un pitope r sistant aux fixateurs sur la forme de l antigene CD68 qui est sp cifique aux macrophages 3 Pr cautions 1 Pour utilisateurs professionnels 2 Ce produit contient de l azide de sodium NaN produit chimique hautement toxique dans sa forme pure Aux concentrations du produit bien que non class comme dangereux l a
23. recommand d utiliser des lames FLEX IHC Microscope Slides R f K8020 Proc dure de coloration y compris le mat riel requis mais non fourni Le syst me de visualisation recommand est le EnVision FLEX High pH Dako Autostainer Autostainer Plus R f K8010 Les tapes de coloration et d incubation sont pr programm es dans le logiciel des instruments Dako Autostainer Autostainer Plus l aide des protocoles suivants Protocole mod le FLEXRTU2 volume de distribution de 200 uL ou FLEXRTUS3 volume de distribution de 300 uL Autoprogram CD68PG sans contre coloration ou CD68PGH avec contre coloration 115219 002 IS613 EFG MNI 2009 12 04 p 2 4 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 9595 CVR No 33 21 13 17 L tape Auxiliary doit tre r gl e sur rinse buffer lors des cycles de coloration avec lt 10 lames Pour les cycles de coloration de gt 10 lames l tape Auxiliary doit tre r gl e sur none Cela confirme des temps de lavage comparables Toutes les tapes d incubation doivent tre effectu es temp rature ambiante Pour plus de d tails se r f rer au Manuel de l op rateur sp cifique l instrument Si les protocoles ne sont pas disponibles sur l instrument Dako Autostainer utilis contacter le service technique de Dako Les conditions optimales peuvent varier en fonction du pr l vement et des m thodes de pr pa
24. zide de sodium peut r agir avec le cuivre et le plomb des canalisations et former des accumulations d azides m talliques hautement explosifs Lors de l limination rincer abondamment l eau pour viter toute accumulation d azide m tallique dans les canalisations 3 Comme avec tout produit d origine biologique des proc dures de manipulation appropri es doivent tre respect es 4 Porter un v tement de protection appropri pour viter le contact avec les yeux et la peau 5 Les solutions non utilis es doivent tre limin es conform ment aux r glementations locales et nationales Conservation Conserver entre 2 et 8 C Ne pas utiliser apr s la date de p remption indiqu e sur le flacon Si les r actifs sont conserv s dans des conditions autres que celles indiqu es celles ci doivent tre valid es par l utilisateur Il n y a aucun signe vident indiquant l instabilit de ce produit Par cons quent des contr les positifs et n gatifs doivent tre test s en m me temps que les chantillons de patient Si une coloration inattendue est observ e qui ne peut tre expliqu e par un changement des proc dures du laboratoire et en cas de suspicion d un probleme li l anticorps contacter l assistance technique de Dako Pr paration des chantillons y compris le mat riel requis mais non fourni L anticorps peut tre utilis pour le marquage des coupes de tissus inclus en paraffine et fix s au formol L
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