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MINICAP Hb A1c - Annar Diagnóstica Import

1.
2. MINICAP Hb A1c Ref 2215 Hb A1c 2013 01 UTILISATION Le kit MINICAP Hb A1c permet la s paration et la quantification de la fraction glyqu e HbA de l h moglobine du sang humain par lectrophor se capillaire en milieu basique pH 9 4 sur l instrument MINICAP FLEX PIERCING MINICAP FLEX PIERCING est un automate qui permet de r aliser toutes les s quences de l lectrophor se jusqu l obtention du profil des h moglobines pour l analyse quantitative de la fraction Les h moglobines s par es dans des capillaires en silice fondue sont d tect es directement au niveau d une cellule sur le capillaire par spectrophotom trie d absorbance 415 nm longueur d onde d absorption sp cifique des h moglobines L analyse est r alis e sur l h molysat de globules rouges du sang total pr lev sur anticoagulant contenant de l EDTAK ou EDTAK Le dosage de l HbA permet de juger de l efficacit des traitements moyen terme du contr le du glucose sanguin des patients diab tiques La technique MINICAP Hb r alis e avec l instrument MINICAP FLEX PIERCING est conforme la standardisation NGSP National Glycohemoglobin Standardization Program usage in vitro exclusivement PRINCIPE DU TEST La glycation de l h moglobine est une r action non enzymatique qui se produit entre le glucose intra rythrocytaire et l extr mit N terminale des cha nes B de l h moglobine
3. Glycated forms of common hemoglobin variants Hb S Hb C Hb D or Hb E for example co migrate with Hb AO fraction or minor Hb A1 fractions other Hb A fraction without any modification of the HbA result Some hemoglobin variants may appear as a shoulder of Hb A0 fraction that may not be detected by the software Only a visual examination of the electrophoretic pattern allows the detection of this shoulder Do not report any HbA result in that case It is necessary to analyze the hematologic state and to perform complementary studies in order to confirm the presence of a variant In addition among variants which migrate close to Hb AO or joined with Hb AO some of them may show an additional fraction X1c that migrates separately from HbA The electrophoretic pattern will be indentified as Atypical profile Do not report any result in that case When analyzing samples without any Hb A from homozygous patients or with heterozygous variants S S or S C for example and when Hb F is present it may be confused with Hb AO due to their similar migration positions No HbA result will be reported by the software due to the absence of HbA in this kind of sample 22 Hb A1c 2013 01 Individuals with recent significant blood loss exhibit falsely low HbA values due to a higher fraction of young erythrocytes Abnormal life span of red blood cells as found in hemolytic anemias polycythemia or pos
4. were mixed within different proportions and the dilutions were electrophoresed with the MINICAP Hb A1c procedure For each dilution samples were analyzed in duplicate The tests were determined to be linear within the entire ranges studied for HbA hemoglobin fraction until a maximum concentration of about 127 mmol mol between 4 8 and 13 8 In addition 3 different characteristic blood samples including a normal sample with HbA concentration at 31 mmol mol 5 0 HbA a sample with HbA level close to the cut off value at 46 mmol mol 6 3 and an elevated HbA level sample with HbA concentration at 79 mmol mol 9 3 HbA were all serially diluted in hemolysing solution and electrophoresed with the MINICAP Hb A1c procedure The tests were determined to be linear within the entire ranges studied from 2 5 to 31 1 g dL total hemoglobin and HbA fraction concentration and percentage were not affected by the hemoglobin concentration of the samples Accuracy Internal correlation The internal concordance study of the MINICAP Hb A1c procedure performed with the MINICAP FLEX PIERCING instrument was evaluated in a study based on the Clinical Laboratory Standards Institute CLSI USA EPO9 A2 guideline Method Comparison and Bias Estimation Using Patient Samples Approved Guideline Second Edition Interim Revision The results for HbA concentrations mmol mol and percentages were analyzed using statistical to
5. Sample hemolysis and dilution from primary tubes into reagent cups Capillary washing Injection of hemolyzed samples Hemoglobin separation and direct detection of the separated hemoglobins on capillaries The manual steps include Placement of sample tubes with caps in rotating sampler in positions 1 to 26 Placement of the uncapped hemolysing solution tube in rotating sampler in position 27 Placement of the Hb A1c Capillary Calibrators and Controls in rotating sampler in position 28 Placement of the rotating sampler in the MINICAP FLEX PIERCING instrument Removal of the sample tubes after analysis Removal and closing of the bins for used cups PLEASE CAREFULLY READ THE MINICAP FLEX PIERCING INSTRUCTION MANUAL 19 MINICAP Hb A1c 2013 01 PREPARATION OF MINICAP ANALYSIS 1 Switch on MINICAP FLEX PIERCING instrument and computer 2 In order to start the instrument position at least one new reagent cup on the automated loading system for cups of MINICAP FLEX PIERCING a message will be displayed if a reagent cup is missing 3 Setup the software the instrument automatically starts 4 The MINICAP Hb Atc kit is intended to run with Hb A1c analysis program from the MINICAP FLEX PIERCING instrument To select Hb A1c analysis program and place the MINICAP Hb Atc buffer vial in position B2 in the instrument please read carefully the MINICAP FLEX PIERCING instruction manual and follow
6. 3 de chlore partir d une dose concentr e de 250 mL 9 6 de chlore dilu e 1 litre volume final dans de l eau froide distill e ou d min ralis e Utilisation Pour le nettoyage de l aiguille de pr l vement de l automate pour lectrophor se capillaire MINICAP FLEX PIERCING SEBIA entretien hebdomadaire afin d liminer toute prot ine adsorb e sur l aiguille Voir le manuel d instructions de MINICAP FLEX PIERCING SEBIA ATTENTION Ne pas utiliser de tube bouch Hb A1c 2013 01 D poser 500 pL de solution d hypochlorite de sodium pr par e pr c demment dans un microtube Couper le bouchon du microtube Placerle microtube positionn sur un tube h molyse neuf qui servira de support identifi avec une tiquette code barres sp cifique de la solution d hypochlorite de sodium sur le carrousel de MINICAP FLEX PIERCING Placer une cupule r actif neuve sur le chargeur de MINICAP FLEX PIERCING pr vu cet effet en cas d absence de cupule r actif un message apparait Introduire le carrousel dans l instrument MINICAP FLEX PIERCING Fermer les portes de MINICAP FLEX PIERCING le cycle de nettoyage d marre automatiquement IMPORTANT Pour une utilisation optimale de la solution d hypochlorite de sodium sur MINICAP FLEX PIERCING il est indispensable d utiliser une tiquette code barres destin e identifier le tube h molyse servant de support au microtube contenant la s
7. Tampon pour l analyse de l HbA en lectrophor se capillaire Conservation stabilit et signes de d t rioration Le tampon doit tre conserv au r frig rateur entre 2 et 8 C Il est stable jusqu la date d expiration indiqu e sur le kit ou sur l tiquette du flacon de tampon Ne pas stocker le tampon temp rature ambiante proximit d une fen tre ou d une source de chaleur NE PAS CONGELER IMPORTANT Apr s conservation 2 8 C et avant toute utilisation il est n cessaire de ramener la temp rature du tampon la temp rature ambiante ce qui n cessite environ 3 heures pour un flacon de tampon plein Si cette pr caution n est pas respect e les performances de la technique peuvent tre affect es ATTENTION Ne pas pr chauffer le tampon au bain marie Apr s chaque utilisation le tampon doit imp rativement tre conserv au r frig rateur 2 8 C dans les plus brefs d lais il est alors stable jusqu la date d expiration indiqu e sur l tiquette du flacon de tampon En cas d utilisation d un flacon de tampon dans un d lai pr visionnel de 20 jours il est possible de le conserver temp rature ambiante Un flacon de tampon entam install sur MINICAP FLEX PIERCING est stable au maximum 20 jours cumul s temp rature ambiante de 15 30 C IMPORTANT Le temps cumul du tampon pass temp rature ambiante ne doit pas exc der 20 jours Cette dur e de conservation de 20 j
8. de 10 jours la pr sence d agglom rats visqueux dans les globules rouges est observ e il est indispensable de les liminer avant d effectuer l analyse Les chantillons de certains patients h t rozygotes A C avec Hb F peuvent pr senter une fraction Hb AO parfois mal int gr e par le logiciel Compte tenu des principes analytiques des techniques actuelles principes de l lectrophor se de zone r solution aucune garantie ne peut tre donn e quant la quantification de en pr sence de tous les variants de l h moglobine Assistance technique Contacter le Service Technique SEBIA en cas de test d fectueux Les fiches de donn es de s curit des diff rents r actifs du kit ainsi que les informations relatives au nettoyage et l limination des d chets aux r gles d tiquetage et de s curit appliqu es par SEBIA l emballage de transport pour les chantillons biologiques et la d contamination des appareils sont disponibles sur le DVD INSTRUCTIONS amp SAFETY DATA SHEETS PERFORMANCES Reproductibilit L tude de la reproductibilit de la technique MINICAP Hb Aic a t r alis e l aide des recommandations EP5 A2 Evaluation of Precision Performance of Quantitative Measurements Methods du Clinical Laboratory Standards Institute CLSI USA Les moyennes cart types et coefficients de variations CV n 120 des concentrations en mmol mol et des pourcentages de l HbA de ch
9. IMPORTANT Before filling the wash solution container it is recommended to wash the opening of the container the connector and the tube with plenty of distilled or deionized water to avoid salts deposit Storage stability and signs of deterioration Store the stock and working wash solutions in closed containers at room temperature or refrigerated The stock wash solution is stable until the expiration date indicated on the kit or wash solution vial label Working wash solution is stable for 3 months Discard working wash solution if it changes its appearance e g becomes cloudy due to microbial contamination NOTES The assays that were performed for the validation of reagents demonstrated that for the different solutions and using an adapted equipment for the reconstitution volume a variation of 5 on the final volume has no adverse effect on the analysis The distilled or deionized water used to reconstitute solutions must be free of bacterial proliferation and mold use a 0 22 um filter and have a resistivity higher than 10 Megohms x cm EQUIPMENT AND ACCESSORIES REQUIRED 1 MINICAP FLEX PIERCING instrument SEBIA PN 1232 2 Update HbA c kit for MINICAP FLEX PIERCING SEBIA PN 1238 3 Rotating sampler supplied with MINICAP FLEX PIERCING equipped with centering rings for MINICAP FLEX PIERCING specific for the MINICAP Hb A1c procedure for 13 mm diameter tubes 4 MINICAP FLEX PIERCING centering rings for 11 mm diameter
10. Les Contr les Hb A1c CAPILLAIRE SEBIA r f rence N 4774 sont obtenus partir de pools de sangs humains Un proc d de stabilisation permet de pr server les fractions de l h moglobine et de conserver les contr les sous forme lyophilis e Le Contr le 1 Hb A1c CAPILLAIRE pr sente une valeur normale d HbA le Contr le 2 Hb A1c CAPILLAIRE pr sente une valeur lev e d HbA Application Les Contr les 1 et 2 Hb A1c CAPILLAIRE sont destin s au contr le de qualit de la m thode de quantification de l h moglobine glyqu e humaine A par la technique lectrophor tique MINICAP Hb A1c r alis e sur l automate pour lectrophor se capillaire MINICAP FLEX PIERCING Les valeurs trouv es doivent tre comprises entre les valeurs sp cifiques chaque lot IMPORTANT Pour une utilisation optimale de chaque Contr le Hb A1c CAPILLAIRE sur MINICAP FLEX PIERCING il est indispensable d utiliser un tube sp cifique pr vu cet effet et son bouchon correspondant voir EQUIPEMENT ET ACCESSOIRES N CESSAIRES Tubes et bouchons pour Contr les et d identifier ce tube l aide de l tiquette code barres du contr le analys D termination des valeurs personnalis es des Contr les Hb A1c CAPILLAIRE Chaque laboratoire doit tablir les valeurs des Contr les 1 et 2 Hb A1c CAPILLAIRE propres chaque instrument MINICAP FLEX PIERCING selon le protocole d crit dans la notice d utilisation des Contr les Hb A1c CAPILLAIRE ATTENTION L
11. alis e selon le m me protocole d crit ci dessous Pour chaque contr le placer le tube identifi avec l tiquette code barres correspondante sur un carrousel de MINICAP FLEX PIERCING en position 28 pr vue cet effet position Control avec bague de centrage Mettre 5 mL de solution h molysante MINICAP Hb A1c dans un tube h molyse portant l tiquette code barres de la solution h molysante sans pr lever de bulle d air et placer ce tube en position 27 sur le carrousel position Diluent Solution sans bague de centrage en cas d absence de tube ou de solution h molysante un message apparait IMPORTANT V rifier l absence de mousse dans le tube de solution h molysante avant de le placer sur le carrousel Introduire le carrousel dans l insttument MINICAP FLEX PIERCING Fermer les portes de MINICAP FLEX PIERCING l analyse d marre automatiquement S lectionner dans la fen tre apparaissant l cran le nombre d analyses du Contr le Hb A1c CAPILLAIRE effectuer et valider Hb A1c 2013 01 Les r sultats obtenus sont alors automatiquement pris en compte par le logiciel pour le traitement des donn es Retirer le tube de contr le en position 28 d s l apparition de la fen tre indiquant de retirer le tube Proc der l analyse du deuxi me contr le selon le m me protocole ATTENTION Apr s avoir ferm les portes de l instrument si l analyse du deuxi me contr le est r alis e
12. and C or other infectious agents Therefore handle the Hb A1c CAPILLARY Calibrators as a hazardous biological material These lots of bloods were found negative on assays approved by FDA or EU equivalent regulatory agency against hepatitis B surface antigen for antibody to HCV for antibody to HIV1 and HIV2 2 Hb A1c CAPILLARY CONTROLS Composition Hb A1c CAPILLARY Controls SEBIA PN 4774 are obtained from pools of human blood samples They contain stabilizers and preservatives to maintain the stability of the hemoglobin fractions The controls are in a stabilized lyophilized form Hb A1c CAPILLARY Control 1 presents a normal HbA level and Hb A1c CAPILLARY Control 2 presents an elevated HbA level Intended use The Hb A1c CAPILLARY Controls 1 and 2 are designed for the quality control of human glycated hemoglobin A quantification with MINICAP Hb A1c electrophoresis procedure performed with the MINICAP FLEX PIERCING automated instrument for capillary electrophoresis The values obtained must fall within the range determined for each batch IMPORTANT For optimal use of each Hb A1c CAPILLARY Control with the MINICAP FLEX PIERCING instrument it is necessary to use one specific tube designed for blood controls and its corresponding cap see EQUIPMENT AND ACCESSORIES REQUIRED Tubes and caps for Controls and to identify this tube with the corresponding control bar code label Determination of customized values for Hb A1c C
13. are detected directly by scanning at 415 nm and an electrophoretic profile appears on the screen of the system N 0 8 D NOTE These automated steps are described for the two first analyzed sample tubes The electrophoretic patterns appear after about 20 minutes from the start of the analysis For the following sample tubes the first three steps bar code reading mixing and hemolysis of blood samples are performed during the analysis of the 2 previous samples Il RESULT ANALYSIS At the end of the analysis relative quantification of individual HbA fraction is performed automatically The HbA concentrations are standardized and indicated in percentages with one decimal place and in mmol mol without any decimal place according to IFCC recommendations Ragnar Hanas et al 2010 NOTE As the sample is characterized as normal or with elevated HbA level using the real value of concentration in mmol mol whole number calculated by the software for the data analysis a discordance may appear for HbA levels close to the threshold value The identification of normal blood samples and of blood samples with elevated HbA level is automatically performed and the profiles can be distinguished in the curve review window of patterns by a blue color for normal samples and a orange color for samples with elevated level Normal blood samples with normal HbA concentration lower than 42 mmol mol 6 0 or equal are i
14. distilled or deionized water PLEASE CAREFULLY READ THE MINICAP FLEX PIERCING INSTRUCTION MANUAL 21 Hb A1c 2013 01 QUALITY CONTROL After capillaries activation after each calibration of the instrument performed with the Hb A1c CAPILLARY Calibrators after a capillary cleaning sequence with CAPICLEAN and before starting a new analysis sequence it is necessary to run analyses with Hb A1c CAPILLARY Controls 1 or 2 SEBIA PN 4774 In addition for high volume testing laboratories it is advised to analyze one of the two controls after the analysis of a complete rotating sampler by alternating Hb A1c CAPILLARY Control 1 and Control 2 WARNING When controls values fall out of the customized values range the samples analyzed on the affected capillary ies since the last validated quality control must be analyzed again IMPORTANT For optimal use of the blood controls analyzed with the MINICAP FLEX PIERCING instrument it is necessary to use the specific conical tubes for controls and their corresponding caps see EQUIPMENT AND ACCESSORIES REQUIRED and the bar code labels intended to identify the tubes for controls that contain the blood control to analyze US customers Follow federal state and local guidelines for quality control RESULTS Values Direct detection at 415 nm in capillaries yields relative concentrations percentages of individual hemoglobin zones and specially the calibrated HbA concentrat
15. flacon de vidange 6 Tubes de pr l vement de 13 mm de diam tre avec bouchons correspondants hauteur maximale du tube avec bouchon 100 mm diam tre maximal du bouchon 17 mm par exemple tubes de 13 x 75 mm BD Vacutainer Terumo Venosafe 5 mL Greiner Bio one Vacuette 1 2 3 ou 4 mL ou Sarstedt S Monovette 4 mL ou tubes de pr l vement de 11 mm de diam tre avec bouchons correspondants hauteur maximale du tube avec bouchon 100 mm diam tre maximal du bouchon 17 mm par exemple tubes de 11 x 66 mm Sarstedt S Monovette 2 7 mL ou Kabe Labortechnik Primavette S 2 6 mL ou tous tubes de pr l vement de dimensions quivalentes homologu s pour les tests de biologie clinique 7 Tubes et bouchons pour Contr les SEBIA r f rence N 9205 500 tubes coniques et bouchons pour l analyse des calibrateurs des sangs de contr le et des chantillons dont le volume est inf rieur 1 mL avec l instrument MINICAP FLEX PIERCING 8 Tubes h molyse diam tre de 8 16 mm et hauteur de 50 100 mm 9 Etiquettes codes barres LOW VOLUME AUTOMATIQUE SEBIA par 20 r f rence N 9208 destin es identifier les chantillons de volume inf rieur 1 mL pour une analyse en dilution automatique 10 Etiquettes codes barres LOW VOLUME MANUEL SEBIA par 20 r f rence N 9209 destin es identifier les chantillons de volume inf rieur 1 mL pour une analyse en dilution manuelle 11 Cupules r actif MINICAP SEBIA pa
16. indispensable d utiliser l tiquette code barres sp cifique pr vue cet effet 9 Introduire le carrousel dans l instrument MINICAP FLEX PIERCING 10 Fermer les portes de MINICAP FLEX PIERCING l analyse d marre automatiquement 11 Apr s analyse retirer le carrousel afin d enlever les tubes d j analys s 12 Si n cessaire retirer avec pr caution la boite contenant les cupules r actif usag es la fermer herm tiquement l aide du couvercle destin cet effet et la jeter ATTENTION Manipuler avec pr caution les bo tes contenant les cupules r actif usag es contenant des chantillons biologiques DILUTION MIGRATION DESCRIPTION DES S QUENCES AUTOMATIQUES Lecture des codes barres du carrousel et des tubes primaires d chantillon Agitation des tubes Dilution des sangs dans la solution h molysante avec rincage de l aiguille de pr l vement entre chaque dilution Lavage des capillaires Injection des chantillons dilu s dans les capillaires Migration voltage constant en temp rature r gul e par effet Peltier pendant environ 9 minutes Lecture 415 nm et apparition simultan e du profil des h moglobines sur l cran de l ordinateur B ooo mc NOTE Ces tapes sont effectu es les unes apr s les autres pour les 2 premiers tubes analys s les profils correspondant aux tubes analys s sont obtenus apr s 20 minutes environ Pour les tubes suivants les phases 1 2 et 3 lecture des codes barres agita
17. la date d expiration indiqu e sur le kit ou sur l tiquette du flacon La solution dilu e est stable pendant 3 mois liminer la solution de lavage dilu e s il y a un changement d aspect ou apparition d un trouble d une contamination microbienne NOTES Les tests r alis s lors de la validation des r actifs montrent que pour les diff rentes solutions et avec l utilisation d un mat riel adapt au volume reconstituer une variation du volume final de 5 n affecte en rien la qualit de l analyse L eau distill e ou d min ralis e utilis e pour la reconstitution des solutions doit tre exempte de colonies bact riennes et de moisissures utiliser un filtre de porosit de 0 22 um et d une r sistivit sup rieure 10 Megohms x cm QUIPEMENT ET ACCESSOIRES N CESSAIRES 1 Instrument d lectrophor se capillaire MINICAP FLEX PIERCING SEBIA r f rence N 1232 2 Kit de mise jour HbA1c pour MINICAP FLEX PIERCING SEBIA r f rence N 1238 3 Carrousel fourni avec l instrument MINICAP FLEX PIERCING quip des bagues de centrage MINICAP FLEX PIERCING sp cifiques la technique MINICAP Hb A1c pour tubes de diam tre de 13 mm 4 Bagues de centrage MINICAP FLEX PIERCING pour tubes de diam tre de 11 mm par 27 SEBIA r f rence N 1612 5 Bidons plastiques fournis avec l instrument MINICAP FLEX PIERCING flacon pour le rincage des capillaires remplir avec de l eau d min ralis e ou distill e et
18. le principe de l lectrophor se capillaire en solution libre qui repr sente la forme la plus courante de l lectrophor se capillaire ll permet la s paration de mol cules charg es en fonction de leur mobilit lectrophor tique propre dans un tampon de pH donn et selon le pH de l lectrolyte d un flux lectro osmotique plus ou moins important L instrument MINICAP FLEX PIERCING comprend 2 capillaires en parall le permettant 2 analyses simultan es pour la quantification de la fraction HbA du sang total L injection dans les capillaires de l chantillon dilu dans la solution h molysante est effectu e l anode par aspiration La s paration est ensuite r alis e en appliquant une diff rence de potentiel de plusieurs milliers de volts aux bornes de chaque capillaire La d tection directe des h moglobines est effectu e c t cathode 415 nm longueur d onde d absorption sp cifique des h moglobines elle permet une quantification pr cise de la fraction HbA de l h moglobine Les capillaires sont lav s avant chaque analyse par une solution de lavage puis par le tampon d analyse La haute r solution de la technique MINICAP Hb Atc permet la quantification pr cise de HbA en particulier en pr sence d HbA labile d h moglobines carbamyl es et ac tyl es et des principaux variants de l h moglobine Avec le tampon utilis pH basique l ordre de migration des h moglobines normales et anormales ou variants est
19. quantification de la fraction HbA par le logiciel au del de 15 d Hb F Analyse en pr sence de variants de l h moglobine Les formes glycosyl es de variants communs de l h moglobine Hb S Hb C Hb D ou Hb E par exemple migrent conjointement avec la fraction Hb AO ou les fractions Hb A1 mineures fraction other Hb A sans modification du r sultat Certains variants de l h moglobine peuvent appara tre sous forme d un paulement de la fraction Hb AO pouvant ne pas tre d tect par le logiciel Seul un examen visuel du profil lectrophor tique permet de d tecter cet paulement Ne pas rendre de r sultat de l HbA dans ce cas Une confrontation avec le bilan h matologique et une analyse compl mentaire sont alors indispensables afin de v rifier la pr sence d un variant De plus parmi les variants de migration proche de l Hb AO voire confondus avec AO certains variants peuvent donner un pic suppl mentaire X1c distinct de l HbA Le profil lectrophor tique sera pr sent avec la mention Profil atypique Ne pas rendre de r sultat de dans ce cas Lors de l analyse d chantillons sans Hb A de patients homozygotes ou avec variants h t rozygotes S S ou S C par exemple quand l Hb F est pr sente elle peut tre confondue avec l Hb AO du fait de leurs positions de migration tr s proches Aucun r sultat ne sera rendu par le logiciel en raison de l absence d HbA dans ce type
20. sur MINICAP FLEX PIERCING voir EQUIPEMENT ET ACCESSOIRES N CESSAIRES Cas particuliers IMPORTANT Les chantillons dont la pr paration est d crite ci dessous doivent tre identifi s par une tiquette code barres LOW VOLUME AUTO ou LOW VOLUME MANUAL ces tiquettes permettent l instrument d appliquer respectivement le mode de dilution automatique ou manuelle selon la m thode de pr paration de l chantillon Ces chantillons doivent tre plac s sur le carrousel au d but d une s rie d analyses en prenant bien soin de laisser le code barres de chaque tube en face de sa fen tre de lecture En l absence de code barres l analyse peut tre affect e Analyse d chantillons dont le volume est inf rieur 1 mL Agiter au vortex le tube de sang total pendant 5 secondes et pr parer l chantillon en fonction de son volume selon un des protocoles suivants 1 Volume d chantillon compris entre 200 pL et 1 D poser au minimum 200 pL de sang total analyser dans un tube conique pour contr le identifi avec une tiquette code barres LOW VOLUME AUTO et boucher le tube Placer le tube sur un carrousel de MINICAP FLEX PIERCING au d but d une s rie d analyses et introduire le carrousel dans l instrument afin de r aliser l analyse dans les plus brefs d lais Fermer les portes de MINICAP FLEX PIERCING l analyse d marre automatiquement ou 2 Volume d chantillon inf rieur 200 yL D pos
21. the within run and total instrument reagent C V ranges for the HbA concentrations in mmol mol and percentages Mean HbA Within run reproducibility Total reproducibility concentration _ mmol mol CV min CV max Total CV min Total CV max Sample No 1 33 0 9 3 5 0 9 3 5 Sample No 2 36 14 4 0 1 2 4 0 Sample No 3 47 1 2 2 6 13 2 6 Sample No 4 63 0 7 1 6 0 7 22 Sample No 5 76 0 0 1 4 0 0 1 4 Sample No 6 110 0 4 1 4 0 6 2 2 CV ranges 0 0 4 0 0 0 4 0 Mean Within run reproducibility Total reproducibility Ce HbA CV min CV max Total CV min Total CV max Sample No 1 5 2 0 9 2 0 0 9 2 2 Sample No 2 5 4 0 9 2 1 0 9 2 1 Sample No 3 6 4 0 5 1 9 0 8 1 9 Sample No 4 7 9 0 7 1 4 0 8 1 6 Sample No 5 9 1 0 0 1 1 0 0 1 1 Sample No 6 12 3 0 4 1 2 0 6 1 8 CV ranges 0 0 2 1 0 0 2 2 Linearity The linearity of the MINICAP Hb A1c procedure was evaluated in a study based on the Clinical Laboratory Standards Institute CLSI USA EP6 A guideline Evaluation of the Linearity of Quantitative Measurement Procedures A statistical Approach The results for HbA concentration mmol mol and percentage were analyzed using statistical tools recommended by CLSI 23 Hb A1c 2013 01 Two characteristic blood samples including a normal sample with HbA concentration at 29 mmol mol 4 8 HbA an elevated HbA level sample with HbA concentration at 127 mmol mol 13 8
22. tubes SEBIA 27 units PN 1612 5 Container Kit supplied with MINICAP FLEX PIERCING Rinse container to fill with distilled or deionized water and waste container 6 Collection tubes with 13 mm diameter and their corresponding caps maximal length of tube with cap 100 mm maximal diameter of cap 17 mm for example BD Vacutainer Terumo Venosafe 5 mL Greiner Bio one Vacuette 1 2 3 or 4 mL or Sarstedt S Monovette 4 mL tubes 13 x 75 mm or collection tubes with 11 mm diameter and their corresponding caps maximal length of tube with cap 100 mm maximal diameter of cap 17 mm for example Sarstedt S Monovette 2 7 mL or Kabe Labortechnik Primavette S 2 6 mL tubes 11 x 66 mm or collection tubes with equivalent dimensions approved for clinical assays 7 Tubes and caps for Controls SEBIA PN 9205 500 conical tubes and their caps to analyze calibrators blood controls and particular samples with the MINICAP FLEX PIERCING instrument 8 Hemolysing tubes with 8 to 16 mm diameter and 50 to 100 mm length 9 AUTOMATIC LOW VOLUME bar code labels SEBIA 20 units PN 9208 labels intended to identify samples with volume less than 1 mL for an analysis using the automatic dilution mode 10 MANUAL LOW VOLUME bar code labels SEBIA 20 units PN 9209 labels intended to identify samples with volume less than 1 mL for an analysis using the manual dilution mode 11 MINICAP Reagent cups SEBIA 250 units PN 2280 12 Lids f
23. 013 01 6 BINS FOR USED CUPS Use Bins intended for automated collection of used reagent cups in MINICAP FLEX PIERCING To place in MINICAP FLEX PIERCING at the location intended for this purpose WARNING Bins containing used reagent cups with biological samples have to be handled with care 7 HEMOLYSING SOLUTION BAR CODE LABELS Use Labels to identity the tube containing the hemolysing solution HbA1c HEMOLYSING SOLUTION REAGENTS REQUIRED BUT NOT SUPPLIED WARNING See the safety data sheets 1 Hb A1c CAPILLARY CALIBRATORS Composition Hb A1c CAPILLARY Calibrators SEBIA PN 4755 are obtained from pools of human blood samples They contain stabilizers and preservatives to maintain the stability of the hemoglobin fractions The calibrators are in a stabilized lyophilized form Hb CAPILLARY Calibrator 1 presents a normal HbA level and Hb A1c CAPILLARY Calibrator 2 presents an elevated HbA level Intended use The Hb A1c CAPILLARY Calibrators 1 and 2 are designed for the calibration and migration control of human glycated hemoglobin A quantification with MINICAP Hb Atc electrophoresis procedure performed with the MINICAP FLEX PIERCING automated instrument for capillary electrophoresis in order to achieve results in patient blood samples that are comparable to the DCCT study and traceable to the IFCC reference system The recommendations to calibrate are the following Perform 3 successive series of analyses with bo
24. 100 0 96 7 24 Hb A1c 2013 01 BIBLIOGRAPHIE BIBLIOGRAPHY wo 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 Abraham EC Glycosylated hemoglobins methods of analysis and clinical applications Clinical and Biochemical Analysis 1985 Vol 19 American Diabetes Association Clinical practice recommendations Standards of medical care for patients with diabetes mellitus Diabetes Care 1999 22 suppl 532 41 American Diabetes Association Standards of medical care in diabetes 2012 Diabetes Care 2012 Jan 35 Suppl 1 S11 S63 Bridges KR et al The acetylation of hemoglobin by aspirin in vitro and in vivo J Clin Invest 1975 56 201 207 Fl ckiger R et al Hemoglobin carbamylation in uremia N Engl J Med 1981 304 823 827 Garde AH Hansen AM Skovgaard LT et al Seasonal and biological variation of blood concentrations of total cholesterol dehydroepiandrosterone sulfate hemoglobin Hb A1c Ig A prolactin and free testosterone in healthy women Clin Chem 2000 46 551 559 Geistanger et al Statistical methods for monitoring the relationship between the IFCC reference measurement procedure for Hemoglobin A1c and the designated comparison methods in the United States Japan and Sweden Clin Chem 2008 54 8 1379 1385 Goldsland Intra individual variation Significa
25. 180 200 220 240 260 280 sho Figure 2 Profil avec HbA augment e Pattern with elevated HbA level HbA 8 3 68 mmol mol Hb Hb Aic Other Hb A Hb A2 D q 20 40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 sho 26 Hb 1 2013 01 SCH MAS FIGURES PROFILS LECTROPHOR TIQUES ELECTROPHORETIC PATTERNS Figure 3 Profil avec variant Hb S suspect e Pattern with variant suspected Hb S S Hb Hb Aic Other Hb q 20 40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 4 Profil avec variant Hb suspect e Pattern with variant suspected Hb C Hb C A2 Hb A0 Cid Other Hb J i 20 40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 spo 27 Hb A1c 2013 01 SCH MAS FIGURES PROFILS LECTROPHOR TIQUES ELECTROPHORETIC PATTERNS Figure 5 Profil avec Hb F Pattern with Hb F Hb Hb Aic _ Other Hb HbF or variant Hb Mp N 0 20 40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 28 sebla Benelux SCS Comm Jan O
26. APILLARY Controls Each laboratory must establish values for Hb 1 CAPILLARY Controls 1 and 2 that are specific for each MINICAP FLEX PIERCING automated instrument according to the procedure indicated in the package insert of the Hb A1c CAPILLARY Controls WARNING The determination of controls values must always be performed after the first calibration of the MINICAP FLEX PIERCING instrument after having changed one or many capillaries after having changed the lot number of calibrators or controls See the package insert of the Hb A1c CAPILLARY Controls Quality control The recommendations to analyze one of the two controls on both capillaries are the following after capillaries activation after each calibration of the instrument performed with the Hb A1c CAPILLARY Calibrators after a capillary cleaning sequence with CAPICLEAN before starting a new analysis sequence after the analysis of a complete rotating sampler by alternating Hb Alc CAPILLARY Control 1 and Control 2 for high volume testing laboratories Reconstitute each lyophilized Hb A1c CAPILLARY Control 1 and 2 vial with the volume of distilled or deionized water indicated in the package insert of the Hb A1c CAPILLARY Controls Allow to stand for 30 minutes and mix gently avoid formation of foam NOTE The precision of the reconstitution volume to be maintained is 1 0 96 Apply each reconstituted control in a tube designed for blood cont
27. IN DE SEQUENCE D ANALYSE Une proc dure d extinction doit tre lanc e par l op rateur en fin de session de travail afin de conserver les capillaires dans des conditions optimales IMPORTANT Placer une cupule r actif neuve sur le chargeur de MINICAP FLEX PIERCING pr vu cet effet en cas d absence de cupule r actif un message apparait IV REMPLISSAGE DES FLACONS DE R ACTIFS L automate MINICAP FLEX PIERCING permet une gestion automatique des r actifs IMPORTANT Il est n cessaire de suivre la proc dure pr vue pour le changement des flacons et de respecter le code couleur flacon raccord rapide lors de chaque remplacement de flacon L apparition de la fen tre de gestion des r actifs indique qu il est n cessaire de changer un ou plusieurs r actifs mise en place d un nouveau flacon de tampon d analyse et ou remplissage du flacon de lavage avec la solution de lavage reconstitu e et ou remplissage du flacon de rin age par de l eau d min ralis e ou distill e filtr e et ou vidange du flacon de vidange ATTENTION Ne pas utiliser d eau d min ralis e du commerce eau pour fer repasser par exemple risque de d t rioration importante des capillaires Utiliser exclusivement de l eau de qualit ultrapure type eau pour pr paration injectable IMPORTANT Avant de remplir le flacon de rincage il est recommand de le rincer abondamment avec de l eau d min ralis e ou distill e LIRE ATTENTIVE
28. MENT LE MANUEL D INSTRUCTIONS DE MINICAP FLEX PIERCING MINICAP Hb A1c 2013 01 CONTR LE QUALIT Apr s activation des capillaires apr s chaque calibration de l instrument r alis e avec les Calibrateurs Hb A1c CAPILLAIRE apr s un cycle de nettoyage des capillaires avec CAPICLEAN et avant de lancer une nouvelle s rie d analyses il est n cessaire d effectuer une analyse avec les Contr les Hb A1c 1 ou 2 CAPILLAIRE SEBIA r f rence N 4774 De plus dans le cas de grandes s ries d chantillons il est conseill d analyser un des deux contr les apr s l analyse d un carrousel complet en alternant le Contr le 1 et le Contr le 2 Hb A1c CAPILLAIRE ATTENTION Dans le cas o l analyse des contr les donne un r sultat situ hors des valeurs personnalis es les chantillons analys s sur le s capillaire s concern s depuis le dernier contr le valide doivent tre nouveau analys s IMPORTANT Pour une utilisation optimale des sangs de contr le sur MINICAP FLEX PIERCING il est indispensable d utiliser les tubes coniques sp cifiques pr vus cet effet et leurs bouchons correspondants voir QUIPEMENT ET ACCESSOIRES N CESSAIRES et d identifier chacun de ces tubes l aide d une tiquette code barres du sang de contr le analys R SULTATS Valeurs La d tection directe sur le capillaire 415 nm permet de d finir les valeurs relatives pourcentages de chaque fraction notamment la concentration calibr e de
29. PIERCING instrument it is necessary to use one bar code label intended to identify the hemolysing tube holding the microtube which contains the diluted CAPICLEAN solution cut the cap of the microtube before using it Storage stability and signs of deterioration Store CAPICLEAN refrigerated 2 8 C It is stable until the expiration date indicated on the vial label DO NOT FREEZE Precipitate or combined particles in suspension floccules may be observed in the CAPICLEAN vial without any adverse effects on its utilization Do not dissolve this precipitate or these particles It is recommended to collect only the supernatant For later use store the tube containing the diluted solution at 2 8 C It must be used within the day 5 SODIUM HYPOCHLORITE SOLUTION for sample probe cleaning Preparation Prepare a sodium hypochlorite solution 2 to 3 chloride by diluting 250 mL 9 6 chloride concentrated solution to 1 liter with cold distilled or deionized water Use For the sample probe cleaning in the MINICAP FLEX PIERCING instrument weekly maintenance in order to eliminate adsorbed proteins from the probe See the SEBIA MINICAP FLEX PIERCING instruction manual WARNING Do not use a capped tube Apply in a microtube 500 pL of diluted chlorinated solution previously prepared Cut the cap of the microtube Place the microtube located on a new hemolysing tube used as a support identified with one bar code label spec
30. PILLARY Calibrators Mix gently the calibrator vial to dissolve the whole lyophilized blood ensure that no liquid contacts the cap Allow to stand for 30 minutes at 2 8 C and mix gently avoid formation of foam NOTE The precision of the reconstitution volume to be maintained is 1 0 96 Apply each reconstituted calibrator in a tube designed for blood control Close the tube with its cap Identify the tube with the specific bar code label of the calibrator The analysis of each calibrator must be performed according to the same procedure as described below For each calibrator place the tube identified with the Calibrator bar code label in position No 28 on a MINICAP FLEX PIERCING rotating sampler Control position with centering ring Pour 5 mL of MINICAP Hb A1c hemolysing solution in a hemolysing tube identified with the hemolysing solution bar code label without introducing air bubbles and place it in position No 27 on the rotating sampler Diluent Solution position without any centering ring A message will be displayed if the tube or the hemolysing solution is missing IMPORTANT Ensure the absence of foam in the tube before placing it on the rotating sampler Do not place any sample tube in positions 1 to 26 of the rotating sampler Slide the rotating sampler into the MINICAP FLEX PIERCING instrument Close the doors of the MINICAP FLEX PIERCING instrument the analysis starts automatically E
31. T The accumulated time of the buffer stored at room temperature must not exceed 20 days This time of 20 day storage takes account of the time for the buffer to come to room temperature Discard buffer if it changes its appearance e g becomes cloudy due to microbial contamination NOTE During storage the buffer may present a slight color without any adverse effects on its performance 2 HEMOLYSING SOLUTION Preparation Hemolysing Solution is ready to use It contains components nonhazardous at the concentration used necessary for optimum performance Use To dilute and hemolyze whole blood Storage stability and signs of deterioration Store hemolysing solution at room temperature 15 to 30 C or refrigerated 2 to 8 C It is stable until the expiration date indicated on the kit package or hemolysing solution vial label DO NOT FREEZE Discard hemolysing solution if it changes its appearance e g becomes cloudy due to microbial contamination NOTE During storage hemolysing solution may turn yellow without any adverse effects on its performance 3 WASH SOLUTION Preparation The vial of the stock wash solution should be diluted up to 250 mL with distilled or deionized water After dilution the wash solution contains an alkaline solution pH 12 Use For washing the capillaries before HbA electrophoresis IMPORTANT Before filling the wash solution container it is recommended to wash the connector and the tube w
32. a d termination des valeurs des contr les doit tre r alis e apr s la premi re calibration de l automate MINICAP FLEX PIERCING apr s changement d un ou de plusieurs capillaires lors de chaque changement de lot de calibrateurs ou de contr les Voir la notice d utilisation des Contr les Hb A1c CAPILLAIRE Contr le Qualit Analyser un des deux contr les sur l ensemble des 2 capillaires selon les recommandations suivantes apr s activation des capillaires apr s chaque calibration de l instrument r alis e avec les Calibrateurs Hb A1c CAPILLAIRE apr s un cycle de nettoyage des capillaires avec CAPICLEAN avant de lancer une nouvelle s rie d analyses apr s l analyse d un carrousel complet en alternant le Contr le 1 et le Contr le 2 Hb A1c CAPILLAIRE dans le cas de grandes s ries d chantillons Reconstituer chaque flacon lyophilis de Contr le 1 et 2 Hb A1c CAPILLAIRE avec le volume d eau distill e ou d min ralis e indiqu dans la notice d utilisation des Contr les Hb A1c CAPILLAIRE Laisser reposer 30 minutes et agiter doucement viter la formation de mousse NOTE La pr cision du volume de reconstitution respecter est de 1 0 D poser chaque contr le reconstitu dans un tube pour contr le pr vu cet effet Fermer le tube avec son bouchon Identifier le tube avec l tiquette code barres sp cifique du contr le L analyse de chaque contr le doit tre r
33. age d alerte analyse du contr le non conforme En mode Contr le Qualit 1 r p ter l analyse en position 28 partir du m me flacon message d alerte analyse 2 r p ter l analyse sur un nouveau flacon du contr le non conforme 3 contacter le Service Technique SEBIA en cas de probl me r aliser une nouvelle confirm calibration Message d alerte Suspecter la DO faible pr sence d un lt 0 07 pour Pas de valeur variant ou un chantil profil atypique et d HbA affich e si d faut de 99 n n HbA Sang de patient Hb F gt 15 recentrage des p suspecter la paulement de profils s 9r pr sence d un l HbA ou de Hb 0 lectrophor tiques idee co Ton variant Hb r p ter sisi la valeur d HbA peut paur eonrmaon tre prise en compte En cas d chantillon pr sentant un pourcentage d Hb A2 sup rieur 3 0 un point d exclamation appara t associ au nom de la fraction Hb 2 Un cas de b ta thalass mie susceptible d alt rer la synth se de l HbA peut alors tre suspect cas d interf rence physio pathologique esi recommand d analyser l chantillon dans la technique MINICAP HEMOGLOBIN E afin de v rifier le pourcentage d Hb A2 et d tudier le dossier clinique du patient Le dosage de l HbA peut cependant tre utilis pour le suivi du m me patient LIRE ATTENTIVEMENT LE MANUEL D INSTRUCTIONS DE MINICAP FLEX PIERCING F
34. aires de sang total avec bouchons sur le carrousel quip des bagues de centrages sp cifiques positions 1 26 en prenant bien soin de laisser le code barres de chaque tube en face de sa fen tre de lecture Mettre la solution h molysante MINICAP Hb A1c dans un tube h molyse sans bouchon portant l tiquette code barres de la solution h molysante sans pr lever de bulle d air raison de 2 mL pour l analyse d 1 ou de 2 chantillons ou de 5 mL pour l analyse de 12 chantillons Placer ce tube en position 27 sans bague de centrage sur le carrousel de l automate position Diluent Solution NOTE 5 mL de solution h molysante d pos s dans un tube de 13 x 75 mm permettent d effectuer 12 analyses 10 mL de solution h molysante dans un tube de 16 x 100 mm permettent d effectuer 24 analyses IMPORTANT V rifier l absence de mousse dans le tube de solution h molysante avant de le placer sur le carrousel Placer un des 2 Contr les Hb A1c Capillaire en position 28 sur le carrousel position Control et s lectionner le nombre d analyses effectuer selon les indications du paragraphe pr c dent Contr les Hb A1c Capillaire partie Contr le qualit IMPORTANT En cas d absence de tubes en positions No 1 chantillon 27 solution h molysante et 28 sang de contr le ou calbrateur l analyse ne peut pas d marrer et un message apparait NOTE Lors de l utilisation d un sang de contr le ou d un calibrateur il est
35. ans les 2 techniques d analyse et selon les m mes recommandations Cent cinq 105 chantillons de sang dont 30 chantillons pr sentant un taux d HbA normal et 75 chantillons pr sentant un taux d HbA augment ont t analys s en parall le dans la technique MINICAP Hb A1c sur l instrument MINICAP FLEX PIERCING et dans une technique de quantification de l h moglobine A par lectrophor se capillaire disponible dans le commerce conforme la standardisation NGSP La corr lation entre ces deux techniques sur la concentration et le pourcentage d HbA a t d termin e l aide d outils statistiques de r gression in aire Les r sultats obtenus ont montr une parfaite corr lation entre les deux techniques pour la quantification de Les param tres de corr lation entre les 2 syst mes d analyse MINICAP Hb A1c sont pr sent s dans le tableau ci dessous la sensibilit et la sp cificit de la technique MINICAP Hb 1 par rapport la technique de r f rence ont t calcul es selon la m thode recommand e Wendling 1986 Er Limites des HbA CES ne avec Pente valeurs Sensibilit Sp cificit y MINICAP Hb Aic Concentration 0 998 1 149 0 987 28 131 100 0 96 7 mmol mol Pourcentage 0 998 0 128 0 987 4 7 14 2 100 0 96 7 212 Hb A1c 2013 01 INTENDED USE The MINICAP Hb 1 kit is designed for separation and qu
36. antification of the HbA glycated fraction of hemoglobin in human blood by capillary electrophoresis in alkaline buffer pH 9 4 with the MINICAP FLEX PIERCING instrument The MINICAP FLEX PIERCING instrument is an automated analyzer which performs a complete hemoglobin profile for the quantitative analysis of HbA fraction The hemoglobins separated in silica capillaries are directly detected by their absorbance at 415 nm The assay is performed on the hemolysate of whole blood samples collected in tubes containing K EDTA or K EDTA as anticoagulant Quantitative determination of hemoglobin is effective in monitoring middle term blood glucose control in diabetic individuals The MINICAP Hb A1c procedure performed with the MINICAP FLEX PIERCING instrument has been certified by the National Glycohemoglobin Standardization Program NGSP For Vitro Diagnostic Use PRINCIPLE OF THE TEST Hemoglobin glycation is a non enzymatic reaction between the intra erythrocyte glucose and the N terminal amino group of the hemoglobin B chains This reaction takes place during the entire life of the red blood cells The rate of glycated hemoglobin formation is related to the glycemia insofar as the intra erythrocyte glucose concentration does not depend on insulin but only on the glycemia It accumulates in red blood cells during the 120 days of their life The level of glycated hemoglobin corresponds to the integration of all the glycemic variations du
37. aque chantillon ont t calcul s l aide d outils statistiques recommand s par le CLSI Reproductibilit inter lots et inter instruments Six 6 chantillons de sang diff rents ont t analys s dans la technique MINICAP Hb sur les 2 capillaires de instruments MINICAP FLEX PIERCING et avec lots de kits MINICAP Hb Atc Les chantillons de sang analys s comprenaient 2 chantillons avec HbA normale No 1 et 2 1 chantillon avec HbA proche du seuil No 3 et chantillons avec HbA augment e No 4 5 et 6 Dans cette tude chaque sang a t analys sur les 2 capillaires de chaque instrument raison de 60 s quences d analyses sur une dur e de 10 jours 2 instants diff rents de la journ e Lors de chaque s quence l analyse des chantillons a t dupliqu e Les tableaux suivants pr sentent les gammes de CV obtenus pour la r p tabilit et la reproductibilit totale inter lots et inter instruments pour les concentrations en HbA en mmol mol et les pourcentages Moyenne R p tabilit Reproductibilit totale concentration HbA mmol mol CV min CV max CV min total CV max total Sang No 1 33 0 9 3 5 0 9 3 5 Sang No 2 36 1 1 4 0 1 2 4 0 Sang No 3 47 1 2 2 6 1 3 2 6 Sang No 4 63 0 7 1 6 0 7 2 2 Sang No 5 76 0 0 1 4 0 0 1 4 Sang No 6 110 0 4 1 4 0 6 22 Gamme des CV 0 0 4 0 0 0 4 0 Moyenne R p ta
38. ateur placer le tube portant l tiquette code barres de ce calibrateur sur un carrousel de MINICAP FLEX PIERCING en position 28 pr vue cet effet position Control avec bague de centrage Mettre 5 mL de solution h molysante MINICAP Hb A1c dans un tube h molyse portant l tiquette code barres de la solution h molysante sans pr lever de bulle d air et placer ce tube en position 27 sur le carrousel position Diluent Solution sans bague de centrage en cas d absence de tube ou de solution h molysante un message apparait IMPORTANT V rifier l absence de mousse dans le tube de solution h molysante avant de le placer sur le carrousel Ne pas placer de tubes d chantillons en positions 1 26 du carrousel Introduire le carrousel dans l instrument MINICAP FLEX PIERCING Fermer les portes de MINICAP FLEX PIERCING l analyse d marre automatiquement Saisir dans la fen tre apparaissant l cran les caract ristiques du calibrateur analys indiqu es dans la notice d utilisation des Calibrateurs Hb A1c CAPILLAIRE concentration en HbA en mmol mol num ro de lot et date d expiration s lectionner le nombre d analyses du calibrateur effectuer selon les cas d crits pr c demment et valider NOTE La concentration en est exprim e en unit IFCC mmol mol Hb A1c 2013 01 Les r sultats obtenus sont alors automatiquement pris en compte par le logiciel pour le traitement des d
39. au cours du cycle de nettoyage CAPICLEAN IMPORTANT R aliser un cycle de nettoyage avec CAPICLEAN au minimum une fois par semaine et au maximum une fois par jour ou toutes les 500 analyses quand elles sont r alis es en moins d une semaine Voir la notice d utilisation de CAPICLEAN SEBIA ATTENTION Ne pas utiliser de tube bouch IMPORTANT Pour une utilisation optimale de CAPICLEAN sur MINICAP FLEX PIERCING il est indispensable d utiliser une tiquette code barres destin e identifier le tube h molyse servant de support au microtube contenant la solution CAPICLEAN dilu e couper le bouchon du microtube lors de son utilisation Conservation stabilit et signes de d t rioration CAPICLEAN doit tre conserv au r frig rateur entre 2 et 8 C Il est stable jusqu la date d expiration indiqu e sur l tiquette du flacon NE PAS CONGELER Un pr cipit ou des particules agr g es en suspension floculat peuvent tre observ s dans le flacon de CAPICLEAN sans que cela n affecte son utilisation Ne pas remettre en suspension ce pr cipit ou ces particules Il est recommand de ne pr lever que le surnageant Pour une utilisation diff r e placer le tube contenant la solution dilu e au r frig rateur II doit tre utilis dans la journ e 5 SOLUTION D HYPOCHLORITE DE SODIUM pour le nettoyage de l aiguille de pr l vement Pr paration Pr parer une solution d hypochlorite de sodium eau de Javel 2
40. bilit Reproductibilit totale Ce CV min CV max CV min total CV max total Sang No 1 5 2 0 9 2 0 0 9 2 2 Sang No 2 5 4 0 9 2 1 0 9 2 Sang No 3 6 4 0 5 1 9 0 8 1 9 Sang No 4 7 9 0 7 1 4 0 8 1 6 Sang No 5 9 1 0 0 1 1 0 0 1 1 Sang No 6 12 3 0 4 12 0 6 18 Gamme des CV 0 0 2 1 0 0 2 2 sd MINICAP Hb 1 2013 01 Linearit L tude de la lin arit de la technique MINICAP Hb A1c a t r alis e l aide des recommandations EP6 A Evaluation of the Linearity of Quantitative Measurement Procedures A statistical Approach du Clinical Laboratory Standards Institute CLSI USA Les concentrations en mmol mol et pourcentages de HbA ont t analys s l aide d outils statistiques recommand s par le CLSI L analyse d un m lange en proportions variables de deux chantillons de sang diff rents dont un chantillon normal contenant 29 mmol mol d HbA soit 4 8 d HbA et un chantillon HbA augment e contenant 127 mmol mol soit 13 8 d HbA a montr que le pourcentage de la fraction HbA est parfaitement corr l la proportion des 2 sangs dans le m lange et que toute variation est d tect e de mani re lin aire dans la technique MINICAP Hb A1c Pour chaque m lange l analyse avait t dupliqu e La technique MINICAP Hb A1c est parfaitement lin aire pour l HbA dans la gamme des concentrations tudi es jusqu un maximum de l ordre de 127 mm
41. d chantillon 1 aucun r sultat ne sera rendu 10 Hb A1c 2013 01 Dans le cas de patients ayant pr sent des h morragies importantes r centes le taux d HbA peut tre sous valu du fait d une forte proportion dans le sang d h maties nouvellement synth tis es Une dur e de vie anormale des h maties comme dans le cas d an mies h molytiques ou l ablation de la rate peuvent affecter le taux d HbA Toutefois un tel dosage peut tre utilis pour le suivi du m me patient Limites Voir CHANTILLONS ANALYSER Analyser uniquement des chantillons contenus dans les tubes de pr l vement recommand s dans le paragraphe QUIPEMENT ET ACCESSOIRES N CESSAIRES ou tous tubes de dimensions quivalentes homologu s pour les tests de biologie clinique Contacter le Service Technique SEBIA pour toute information relative ces dispositifs Ne pas utiliser directement d chantillon dont le volume est inf rieur 1 mL Ne pas utiliser des chantillons de sangs anciens ou conserv s dans de mauvaises conditions la pr sence d h moglobines d grad es peut tre observ e sur le profil lectrophor tique sous forme d art facts plus ou moins nombreux apr s 7 jours de conservation Une fraction suppl mentaire migre en particulier au niveau de l Hb A2 et ou en position anodique par rapport l Hb AO dans la zone de migration autres Hb A dans ce type d chantillons Au del
42. dans la m me journ e que celle du premier contr le d marrer cette analyse l aide du bouton Forcer le passage du contr le en position 28 Ne pas placer de tubes d chantillons en positions 1 26 du carrousel V rifier les valeurs de concentrations et de pourcentages d HbA obtenues sur les analyses des contr les par rapport aux valeurs personnalis es d termin es sur l instrument Elles doivent tre comprises entre les limites sp cifiques chaque lot Dans le cas contraire refaire une calibration de l instrument l aide des Calibrateurs Hb A1c CAPILLAIRE voir CALIBRATEURS Hb A1c CAPILLAIRE NOTE La concentration en HbA affich e par le logiciel est exprim e en mmol mol sans d cimale conform ment aux recommandations de Cette d cimale est toutefois prise en compte pour la caract risation de l chantillon sang normal ou sang HbA augment e les calculs de statistiques et les graphiques selon Levey Jennings IMPORTANT Pour une utilisation optimale de chaque Contr le Hb A1c CAPILLAIRE il est indispensable d utiliser une tiquette code barres destin e identifier le tube pour contr le contenant le sang de contr le analys fermer ce tube avec son bouchon sp cifique lors de son utilisation Conservation stabilit et signes de d t rioration Voir la notice d utilisation des Contr les Hb A1c CAPILLAIRE ATTENTION Aucun test ne pouvant prouver l absence des virus VIH virus de l
43. doors of the MINICAP FLEX PIERCING instrument the analysis starts automatically The results are then automatically considered by the software for the data analysis NOTES The minimal volume of sample to analyze in a conical tube is 200 uL Without any bar code label on the conical tube the sample cannot be identified and the dilution mode automatic or manual according to the sample preparation procedure cannot be applied Samples to avoid Avoid coagulated blood samples Avoid aged improperly stored blood samples the automated hemolysis of samples may be disturbed by viscous aggregates in red blood cells Then degradation products as artefacts may affect the electrophoretic pattern an additional fraction may migrate particularly to Hb A2 position or more anodically than Hb AO in the other Hb A position when analyzing such samples In these 2 previous cases aggregates in red blood cells may affect the collection of the sample by the probe Do not analyze directly tubes containing less than 1 mL of blood sample the analysis should be affected see particular cases PROCEDURE The MINICAP FLEX PIERCING instrument is a multiparameter instrument for hemoglobins analysis on parallel capillaries The hemoglobins assay uses 2 capillaries to run the samples The sequence of automated steps is as follows Bar code reading of rotating sampler and sample tubes for up to 26 tubes Mixing of blood samples before analysis
44. dure to verify the Hb A2 percentage and to study the patient s clinical data However the HbA quantification represents a useful relative follow up index for the same patient PLEASE CAREFULLY READ THE MINICAP FLEX PIERCING INSTRUCTION MANUAL Ill END OF ANALYSIS SEQUENCE At the end of each analysis sequence the operator must initiate the shut down procedure of the MINICAP FLEX PIERCING in order to store capillaries in optimal conditions IMPORTANT Position at least one new reagent cup on the automated loading system for cups of MINICAP FLEX PIERCING a message will be displayed if a reagent cup is missing IV FILLING OF REAGENT CONTAINERS The MINICAP FLEX PIERCING instrument has a reagent automatic control IMPORTANT Please refer to the instructions for replacement of reagent containers respecting color code for vials and connectors A message will be displayed when it is necessary to perform one of the following tasks Place a new buffer vial and or Fill the container with working wash solution and or Fill the container with filtered distilled or deionized water for rinsing capillaries and or Empty the waste container WARNING Do not use marketed deionized water such as water for ironing for example risk of important capillaries damage Use only water with ultrapure quality such as injection grade water IMPORTANT Before filling the rinse container it is recommended to wash it with plenty of
45. emplacer syst matiquement les filtres chaque renouvellement de kit Visser un filtre sur chaque embout de tuyau plongeant dans les flacons de tampon de solution de lavage et d eau distill e ou d min ralis e Lors de la mise en place des filtres sur l appareil rincer les connecteurs et les tuyaux l eau distill e ou d min ralis e Conservation Avant utilisation les filtres doivent tre conserv s dans leur emballage herm tiquement clos dans un endroit sec et temp rature ambiante ou au r frig rateur Hb A1c 2013 01 6 BO TES POUR CUPULES USAG ES Utilisation Bo tes destin es la r cup ration automatique des cupules r actif usag es sur MINICAP FLEX PIERCING positionner sur FLEX PIERCING l emplacement pr vu cet effet ATTENTION Manipuler avec pr caution les bo tes contenant les cupules r actif usag es contenant des chantillons biologiques 7 TIQUETTES CODE BARRES SOLUTION HEMOLYSANTE Utilisation Etiquettes destin es identifier le tube de solution h molysante Hb A1c HEMOLYSING SOLUTION R ACTIFS N CESSAIRES NON FOURNIS ATTENTION Voir les fiches de donn es de s curit 1 CALIBRATEURS Hb A1c CAPILLAIRE Composition Les Calibrateurs Hb A1c CAPILLAIRE SEBIA r f rence N 4755 sont obtenus partir de pools de sangs humains Un proc d de stabilisation permet de pr server les fractions de l h moglobine et de conserver les calibrate
46. er au niveau de l Hb A2 et ou en position anodique par rapport AO dans la zone de migration autres Hb A dans ce type d chantillons Dans ces 2 cas la pr sence d agglom rats de globules rouges peut emp cher le pr l vement de l chantillon Ne pas utiliser directement de tube contenant moins de 1 mL d chantillon de sang analyser l analyse peut tre affect e voir cas particuliers TECHNIQUE MINICAP FLEX PIERCING est un instrument multiparam trique automatique qui assure l analyse des h moglobines sur 2 capillaires en parall le selon les tapes suivantes lecture des codes barres du carrousel et des tubes primaires jusqu 26 agitation des chantillons avant analyse h molyse et dilution des chantillons partir des tubes primaires dans les cupules r actif lavage des capillaires injection des chantillons h molys s s paration et d tection directe des h moglobines dans les capillaires Hb A1c 2013 01 Les tapes manuelles sont les suivantes mise en place des tubes primaires avec bouchons sur le carrousel en positions 1 26 mise en place du tube de solution h molysante sans bouchon en position 27 sur le carrousel mise en place des Calibrateurs et des Contr les Hb A1c Capillaire en position 28 sur le carrousel introduction du carrousel dans l instrument MINICAP FLEX PIERCING r cup ration des tubes apr s analyse r c
47. er 50 pL de sang total analyser dans un tube conique pour contr le identifi avec une tiquette code barres LOW VOLUME MANUAL et 250 pL de solution h molysante Hb A1c et boucher le tube Agiter au vortex pendant 5 secondes Placer le tube sur un carrousel de MINICAP FLEX PIERCING au d but d une s rie d analyses et introduire le carrousel dans l instrument afin de r aliser l analyse dans les plus brefs d lais Fermer les portes de MINICAP FLEX PIERCING l analyse d marre automatiquement Les r sultats obtenus sont alors automatiquement pris en compte par le logiciel pour le traitement des donn es NOTES Le volume minimal d chantillon analyser dans un tube conique est de 200 uL En l absence de code barres sur le tube conique l chantillon n est plus identifi et le type de dilution automatique ou manuelle selon la m thode de pr paration de l chantillon ne peut pas tre appliqu chantillons viter viter d utiliser des chantillons pr sentant un d but de coagulation Ne pas utiliser des chantillons de sangs anciens ou conserv s dans de mauvaises conditions l h molyse automatique des chantillons risque d tre perturb e par la pr sence d agglom rats visqueux entre les globules rouges le profil lectrophor tique peut galement tre affect par des produits de d gradation des h moglobines ou art facts en effet une fraction suppl mentaire migre en particuli
48. et cela tout au long de la vie du globule rouge La proportion de cette h moglobine glyqu e est donc fonction de la glyc mie dans la mesure o le taux de glucose intra rythrocytaire ne d pend pas de l insuline mais uniquement de la glyc mie Elle s accumule dans les h maties durant les 120 jours de leur existence Le dosage de ces h moglobines glyqu es repr sente donc l int gration des variations glyc miques pendant les semaines pr c dant le pr l vement Il peut tre utilis comme index de contr le du diab te sucr et permet ainsi de juger de l efficacit des traitements moyen terme L lectrophor se est une analyse tr s utile en laboratoire d analyses cliniques pour la mesure des composants des liquides biologiques dont l h moglobine glyqu e Parall lement aux techniques d lectrophor se sur diff rents supports dont le gel d agarose et la chromatographie technique d lectrophor se capillaire s est d velopp e car elle offre l avantage d une automatisation compl te de l analyse de s parations rapides et d une bonne r solution Elle se d finit comme une technique de s paration lectrocin tique effectu e dans un tube de diam tre interne inf rieur 100 um rempli d un tampon compos d lectrolytes Par de nombreux aspects elle se pr sente comme un interm diaire entre l lectrophor se classique de zone sur support et la chromatographie liquide L instrument MINICAP FLEX PIERCING utilise
49. globin A1c can be analyzed in blood kept frozen at 80 C and is not commonly affected by hemolysis in the general population Metabolism 2004 53 11 1496 1499 Sacks DB Bruns DE Goldstein DE et al Guidelines and recommendations for laboratory analysis in the diagnosis and management of diabetes mellitus Clin Chem 2002 48 436 472 Schoos R et al Les H moglobines Glycosyl es Bull Soc Lux Biol Clin 1981 No 4 Skeie S Thue G Sandberg S Interpretation of hemoglobin A1c Hb A1c values among diabetic patients Implications for quality specifications for Hb A1c Clin Chem 2001 47 1212 1217 The Diabetes Control and Complications Trial Research Group The effect of intensive treatment of diabetes on the development and progression of long term complications in insulin dependant diabetes mellitus N Eng J Med 1993 329 977 86 Wendling A Proc dures de diagnostic ou de d pistage Justification et validit d un test de diagnostic ou de d pistage sensibilit sp cificit Impact Internat 1986 Sept 93 97 25 Hb 1 2013 01 SCH MAS FIGURES PROFILS LECTROPHOR TIQUES ELECTROPHORETIC PATTERNS Figure 1 Profil normal Normal pattern HbA 5 1 33 mmol mol Hb Hb HA Ad lae cil 20 40 60 80 100 120 140 160
50. h patite B virus de l h patite C ou tout autre agent infectieux les Contr les Hb A1c CAPILLAIRE doivent tre manipul s avec les pr cautions habituelles pour viter toute contamination Ces sangs test s l aide de techniques agr es par une autorit comp tente FDA ANSM sont n gatifs en antig ne de surface de l h patite B anticorps anti VHC anticorps anti VIH 1 et anti VIH 2 3 EAU DISTILL E OU D MIN RALIS E Utilisation Pour le rincage des capillaires de l automate pour lectrophor se capillaire MINICAP FLEX PIERCING SEBIA ll est recommand d utiliser de l eau distill e ou d min ralis e filtr e sur filtre de porosit lt 0 45 um Afin d viter les contaminations microbiennes renouveler l eau chaque jour En cas de conservation prolong e ajouter 350 uL L de CLEAN PROTECT SEBIA r f rence N 2059 1 flacon de 5 mL IMPORTANT Avant de remplir le flacon de rin age il est recommand de le rincer abondamment avec de l eau d min ralis e ou distill e 4 CAPICLEAN Pr sentation Le flacon de solution enzymatique concentr e CAPICLEAN SEBIA r f rence N 2058 1 flacon de 25 mL contient enzymes prot olytiques surfactants et composants sans danger aux concentrations utilis es n cessaires pour des performances optimales Utilisation Pour le nettoyage de l aiguille de pr l vement de l automate pour lectrophor se capillaire MINICAP FLEX PIERCING SEBIA
51. iability and longitudinal changes in glycaemic control in patients with type 1 diabetes mellitus Diabet Med 2000 17 451 456 Kilpatrick ES Meylor PW Keevil BG Biological variation of glycated hemoglobin Implications for diabetes screening and monitoring Diabetes Care 1998 21 261 264 Landers JP Clinical Capillary Electrophoresis Clin Chem 41 495 509 1995 Little RR Rohlfing CL Wiedmeyer HM et al for the NGSP Steering Committee The national glycohemoglobin standardization program A fiveyears progress report Clin Chem 2001 47 1985 1992 Mayer TK and Freedman ZR Protein glycosylation in diabetes mellitus a review of laboratory measurements and of their clinical utility critical review Clinica Chimica Acta 1983 127 147 184 Oda RP et al Capillary electrophoresis as a clinical tool for the analysis of protein in serum and other body fluids Electrophoresis 18 1715 1723 1997 Phillipou G Phillips PJ Intraindividual variation of glycohemoglobin Implications for interpretation and analytical goals Clin Chem 1993 39 2305 2308 Ragnar Hanas Garry John and on behalf of the International HbA1c Consensus Committee 2010 Consensus Statement on the Worldwide Standardization of the Hemoglobin A1c Measurement Preamble Clin Chem Aug 2010 56 8 1362 1364 Rohlfing C Wiedmeyer HM Little R et al Biological variation of glycohemoglobin Clin Chem 2002 48 1116 1118 Rolandsson O et al Hemo
52. ific to the sodium hypochlorite solution on the rotating sampler of MINICAP FLEX PIERCING sd7 Hb A1c 2013 01 Position a new reagent cup on the automated loading system for cups of MINICAP FLEX PIERCING a message will be displayed if the reagent cup is missing Slide the rotating sampler into the MINICAP FLEX PIERCING instrument Close the doors of the MINICAP FLEX PIERCING instrument the cleaning sequence starts automatically IMPORTANT For optimal use of the sodium hypochlorite solution with the MINICAP FLEX PIERCING instrument it is necessary to use one bar code label intended to identify the hemolysing tube holding the microtube which contains the solution cut the cap of the microtube before using it Storage stability and signs of deterioration Store the working chlorinated solution at room temperature in a closed container it is stable for 3 months Avoid storage in sunlight close to heat and ignition source and to acids and ammonia 6 CAPILLARYS MINICAP WASH SOLUTION Preparation Each vial of the stock CAPILLARYS MINICAP Wash solution SEBIA PN 2052 2 vials 75 mL should be diluted up to 750 mL with distilled or deionized water After dilution the wash solution contains an alkaline solution pH 12 For MINICAP FLEX PIERCING it is convenient to dilute only 25 mL of the stock solution to 250 mL with distilled or deionized water Use For washing the MINICAP FLEX PIERCING capillaries
53. ion Hemoglobin A normal values lt 42 mmol mol 6 0 Geistanger et al 2008 For further information please refer to http Avww ifcchbaic net IFCC 08 asp typezN Interpretation See ELECTROPHORETIC PATTERNS Interferences NOTE The common interfering factors with the MINICAP Hb A1c procedure triglycerides bilirubin ascorbic acid urea rheumatoid factor glybenclamide carbamylated hemoglobin labile HbA and Hb were evaluated in studies based on the Clinical Laboratory Standards Institute CLSI USA EP7 A2 guideline Interference Testing in Clinical Chemistry The results are summarized below No interference with the MINICAP Hb A1c procedure was detected due to the blood sample s high concentration of the following interfering factors tested at levels equal to the concentrations listed below Interfering factor Concentration Triglycerides 3 07 g dL 35 1 mM Bilirubin 25 8 mg dL 442 uM Ascorbic acid 60 mg dL 3 41 mM Urea 291 mg dL 48 5 mM Rheumatoid factor 2178 IU mL Glybenclamide 3 mg dL No interference with the MINICAP Hb Atc procedure was detected due to the presence of carbamylated hemoglobin s 8 7 and labile HbA lt 14 8 Levels of Hb F up to 15 in the blood sample do not interfere with HbA fraction quantification but no HbA result will be reported by the software when Hb F level is higher than 15 Analysis with hemoglobin variants
54. ith plenty of distilled or deionized water to avoid salts deposit Storage stability and signs of deterioration Store the stock and working wash solutions in closed containers at room temperature or refrigerated The stock wash solution is stable until the expiration date indicated on the kit or wash solution vial label Working wash solution is stable for 3 months Discard working wash solution if it changes its appearance e g becomes cloudy due to microbial contamination 4 REAGENT CUPS Use Single use cups for blood samples dilution and migration on the automated instrument To place on the automated loading system for cups of MINICAP FLEX PIERCING One cup is intended for the analysis of 2 blood samples WARNING Reagent cups with biological samples have to be handled with care 5 FILTERS Use Disposable filters for filtration of analysis buffer working wash solution and distilled or deionized water used for capillaries rinsing IMPORTANT Replace all filters simultaneously upon opening a new kit Screw one filter at the connector situated at the extremity of each tube that plunges in the vials of buffer wash solution and distilled or deionized water When setting filters on MINICAP FLEX PIERCING instrument rinse the connectors and the tubes with distilled or deionized water Storage Before use store the filters in their sealed package in a dry place at room temperature or refrigerated 14 Hb A1c 2
55. ition No 28 on the rotating sampler Control position and select the number of analyses to perform according to the indications previously described see Hb A1c Capillary Controls paragraph part Quality control IMPORTANT If a tube is missing in position No 1 sample tube in position No 27 hemolysing solution tube and in position No 28 blood control or calibrator tube the analysis cannot start and a message will be displayed NOTE When using a control blood or a calibrator it is necessary to use the specific bar code label 9 Slide the rotating sampler into the MINICAP FLEX PIERCING instrument 10 Close the doors of the MINICAP FLEX PIERCING instrument the analysis starts automatically 11 After the analysis remove the rotating sampler with analyzed sample tubes 12 If necessary take off carefully the bin containing used reagent cups close it tightly with the corresponding lid and discard it WARNING Bins containing used reagent cups with biological samples have to be handled with care DILUTION MIGRATION DESCRIPTION OF THE AUTOMATED STEPS Bar codes are read on both rotating sampler and sample tubes Mixing of tubes Samples are diluted in hemolysing solution and the sample probe is rinsed after each sample Capillaries are washed Diluted samples are injected into capillaries Migration is carried out under constant voltage for about 9 minutes and the temperature is controlled by Peltier effect Hemoglobins
56. la fraction Valeurs normales de l h moglobine lt 42 mmol mol 6 0 Geistanger et al 2008 Pour plus d informations se r f rer http www ifcchbatc net IFCC 08 asp type N Interpr tation Voir PROFILS LECTROPHOR TIQUES Interf rences NOTE L tude des interf rents commun ment rencontr s dans l analyse de l HbA triglyc rides bilirubine acide ascorbique facteur rhumato de glibenclamide h moglobine carbamyl e HbA labile et Hb F a t r alis e l aide des recommandations EP7 A2 Interference Testing in Clinical Chemistry du Clinical Laboratory Standards Institute CLSI USA Les r sultats sont pr sent s ci dessous Dans la technique MINICAP Hb Atc la pr sence dans l chantillon de sang de taux lev s d interf rents test s aux concentrations indiqu es dans le tableau suivant n interf re pas sur la quantification de l HbA Interf rent Concentration Triglyc rides 3 07 g dL 35 1 mM Bilirubine 25 8 mg dL 442 uM Acide ascorbique 60 mg dL 3 41 mM Ur e 291 mg dL 48 5 mM Facteur rhumatoide 2178 IU mL Glibenclamide 3 mg dL Dans la technique MINICAP Hb 1 la pr sence dans l chantillon de sang d h moglobine carbamyl e jusqu 8 7 et d HbA labile jusqu 14 8 n interf re pas sur la quantification de l HbA La pr sence d Hb F jusqu 15 dans l chantillon de sang n interf re pas sur la
57. le suivant de la cathode vers l anode A2 C E S D F AO autres Hb dont Hb A1 mineure et Atc R ACTIFS FOURNIS DANS LE KIT MINICAP Hb 1 ATTENTION Voir les fiches de donn es de s curit COMPOSANTS R F N 2215 Tampon pr t l emploi 2 flacons de 250 mL Solution h molysante pr te l emploi 1 flacon de 225 mL Solution de lavage solution concentr e 1 flacon de 25 mL Cupules r actif 1 sachet de 125 Filtres 3 filtres Bo tes pour cupules usag es 4 bo tes tiquettes code barres solution h molysante 5 planches de 4 tiquettes Durant le transport le kit peut rester temp rature ambiante entre 15 et 30 C pendant 15 jours sans que cela n affecte la qualit du test POUR DES R SULTATS OPTIMUMS Les l ments d un m me kit doivent tre utilis s ensemble et selon les instructions de la notice LIRE ATTENTIVEMENT LA NOTICE D UTILISATION ATTENTION Ne pas utiliser d eau d min ralis e du commerce eau pour fer repasser par exemple risque de d t rioration importante des capillaires Utiliser exclusivement de l eau de qualit ultrapure type eau pour pr paration injectable 1 NOTICE D UTILISATION SEBIA Fran ais Hb A1c 2013 01 1 TAMPON Pr paration Le tampon est pr t l emploi Il contient tampon pH 9 4 0 5 composants sans danger aux concentrations utilis es n cessaires pour des performances optimales Utilisation
58. lieslagerslaan 41 1800 Vilvoorde Belgique Belgi T l 32 0 2 702 64 64 Fax 32 0 2 702 64 60 e mail sebia benelux sebia be sebia Brasil Edificio Baker Office Tower Rua Bardo do Triunfo 73 conjunto 51 CEP 04602 000 Bairro Brooklin Paulista S o Paulo SP Brasil Te 55 11 3849 0148 Fax 55 11 3841 9816 e mail sebia sebia com br sebla GmbH M nsterfeldallee 6 36041 Fulda Deutschland Tel 49 0 661 3 30 81 Fax 49 0 661 3 18 81 e mail sebia sebia de sebla Hispania s a C Sicilia n 394 08025 Barcelona Espa a Tel 3493 208 15 52 Fax 34 93 458 55 86 e mail sebia sebia es sebla Inc 400 1705 Corporate Drive Norcross GA 30093 U S A Te 1 770 446 3707 Fax 1770446 8511 e mail info sebia usa com sebia Italia S r l Via Antonio Meucci 15 a 50012 Bagno a Ripoli FI talia el 39055 24851 Fax 39 055 2485400 e mail infoGsebia it sebia UK Ltd River Court Meadows Business Park Station Approach Blackwater Camberley Surrey GU17 9AB United Kingdom el 44 0 1276 600636 Fax 44 0 1276 38827 e mail info sebia co uk sebla Shanghai Representative Office e Cross Tower Room 2306 07 sebia 318 Fuzhou Road Shanghai 200001 Parc Technologique L onard de Vinci China CP 8010 Lisses 91008 EVRY Cedex France Te 0086 21 6350 1655 T l 33 0 1 69 89 80 80 e mail sebia sebia com Fox 200 85 21 6361 2011 e mail sebia sebia cn
59. lution and prepared for the next analysis with buffer Direct detection provides accurate relative quantification of individual hemoglobin A fraction In addition the high resolution of MINICAP Hb A1c procedure allows the quantification of carbamylated and acetylated hemoglobins and major hemoglobin variants By using alkaline pH buffer normal and abnormal or variant hemoglobins are detected in the following order from cathode to anode A2 C E S D F AO other Hb including minor Hb A1 and then A and particularly even in the presence of labile HbA 1c e REAGENTS AND MATERIALS SUPPLIED IN THE MINICAP Hb A1c KIT WARNING See the safety data sheets ITEMS PN 2215 Buffer ready to use 2 vials 250 mL each Hemolysing solution ready to use 1 vial 225 mL Wash solution stock solution 1 vial 25 mL Reagent cups 1 pack of 125 Filters 3 filters Bins for used cups 4 bins Hemolysing solution bar code labels 5 sheets of 4 labels During transportation the kit can be kept without refrigeration 15 to 30 C for 15 days without any adverse effects on performance FOR OPTIMAL RESULTS All reagents from the same kit must be always used together and according to the package insert instructions PLEASE READ THE PACKAGE INSERT CAREFULLY WARNING Do not use marketed deionized water such as water for ironing for example risk of important capillaries damage Use only water with ultrap
60. manual dilution mode according to the sample preparation procedure These samples must be placed on the rotating sampler at the beginning of an analysis series and the bar code of each tube must be visible in the opening of the rotating sampler Without any bar code label the analysis should be affected Analysis of samples with volume below 1 mL Vortex for 5 seconds the whole blood sample and prepare the sample according to its volume following one of the 2 protocols 1 Volume of sample comprised between 200 pL and 1 mL Apply at least 200 pL of whole blood to analyze in a conical tube for control identified with a LOW VOLUME AUTO bar code label and cap the tube Place the tube on the rotating sampler of the MINICAP FLEX PIERCING instrument at the beginning of an analysis series and slide the rotating sampler into the instrument to run the analysis without any delay Close the doors of the MINICAP FLEX PIERCING instrument the analysis starts automatically or 2 Volume of sample below 200 yL Apply 50 uL of whole blood to analyze in a conical tube for control identified with a LOW VOLUME MANUAL bar code label 250 uL of MINICAP Hb A1c hemolysing solution and cap the tube Vortex for 5 seconds Place the tube on the rotating sampler of the MINICAP FLEX PIERCING instrument at the beginning of an analysis series and slide the rotating sampler into the instrument to run the analysis without any delay Close the
61. ndicated in blue color Blood samples with elevated HbA concentration higher than 42 mmol mol 6 0 are indicated in orange color Electrophoretic patterns with abnormality such as an additional fraction or deletion of a normal fraction among HbA Other Hb A Hb AO and Hb A2 fractions are indicated in purple color with Atypical profile and Hb A1c indications Patterns are automatically adjusted with regard to Hb AO fraction to facilitate their interpretation 20 MINICAP Hb A1c 2013 0 The following table presents the warning and message signals that are displayed and the procedures to follow according to the analyzed sample A A A value outside No detection of Insufficient optical HbA value outside the specifications for AO and or HbA density expected values for controls calibrators fraction for Hb AO fraction analyzed with the Quality Control QC mode Warning signal Atypical profile presence of an additional fraction or deletion of a normal Analyzed fraction sample Warning message analysis of the calibrator not in conformity analyze a control blood in position 28 or repeat the calibration in case of invalid calibration on one or 2 capillary ies the capillary ies is are deactivated the HbA level from blood samples and controls on the concerned capillary ies is then not displayed Calibrators identified with bar code labels With the Quality Cont
62. nt changes in parameters of lipids and carbohydrate metabolism in the individual and intraindividual variation in different test populations Ann Clin Biochem 1985 22 618 624 Goldstein DE et al Glycated hemoglobin methodologies and clinical applications Clin Chem 1986 32 B64 B70 Goldstein DE Little R England JD Wiedmeyer H M Mc Kenzie EM Methods for quantitating glycosylated hemoglobins high performance liquid chromatography and thiobarbituric acid colorimetry In Clarke WL Larner J Pohl SL eds Methods of diabetes research Vol 2 Clinical methods New York John Wiley 1986 475 504 Hanas R John G 2010 Consensus statement on the worldwide standardization of the Hemoglobin A1c measurement Clin Chem 2010 Hoelzel W Weykamp C Jeppsson JO Miedema Barr JR Goodall Hoshino T John WG Kobold U Little Mosca A Mauri P Paroni Susanto F Takei Thienpont L Umemoto M Wiedmeyer HM IFCC Reference System for Measurement of Hemoglobin A1c in human blood and the national standardization schemes in the United States Japan and Sweden a method comparison study Clin Chem 2004 50 166 174 Jellum E et al Diagnostic applications of chromatography and capillary electrophoresis J Chromatogr B 689 155 164 1997 Jeppsson OJ Kobold U Barr J et al Approved IFCC reference method for the measurement of Hb A1c in human blood Clin Chem Lab Med 2002 40 78 89 Jorde R Dundsfjord J Intra individual var
63. nter in the window which appears on the screen the parameters of the analyzed calibrator indicated in the package insert of the Hb Atc CAPILLARY Calibrators HbA level in mmol mol lot number and expiration date select the number of analyses of the calibrator to perform according to the indications previously described and validate NOTE HbA concentration is indicated in IFCC unit mmol mol 15 MINICAP Hb A1c 2013 01 The results are then automatically considered by the software for the data analysis Remove the tube with calibrator from position 28 as soon as the window appears indicating to remove the tube When the analysis of the first calibrator is completed perform the analysis of the second calibrator according to the same procedure WARNING After having closed the doors of the instrument start the analysis of the second calibrator using the Click to run the control in position 28 button IMPORTANT For optimal use of each Hb A1c CAPILLARY Calibrator it is necessary to use one bar code label intended to identify the tube for control which contains the calibrator close the tube with its specific cap before using it The software displays the HbA value for both calibrators that has been entered by the operator Storage stability and signs of deterioration See the package insert of the Hb A1c CAPILLARY Calibrators WARNING No test method can provide an absolute assurance of the absence of HIV hepatitis B
64. ntrols as a hazardous biological material These lots of bloods were found negative on assays approved by FDA or EU equivalent regulatory agency against hepatitis B surface antigen for antibody to HCV for antibody to HIV1 and HIV2 3 DISTILLED OR DEIONIZED WATER Use For rinsing capillaries in automated instrument MINICAP FLEX PIERCING SEBIA for capillary electrophoresis It is recommended to filter distilled or deionized water with 0 45 filter before use To prevent microbial proliferation change the water every day In case of longer storage add 35 1 01 of CLEAN PROTECT SEBIA PN 2059 5 mL IMPORTANT Before filling the rinse container it is recommended to wash it with plenty of distilled or deionized water 4 CAPICLEAN Composition The vial of CAPICLEAN concentrated solution SEBIA PN 2058 25 mL contains proteolytic enzymes surfactants and additives nonhazardous at concentrations used necessary for optimum performances Use For sample probe cleaning in the SEBIA MINICAP FLEX PIERCING automated instrument for capillary electrophoresis during the CAPICLEAN cleaning sequence IMPORTANT Launch a CAPICLEAN cleaning sequence at least once a week and at maximum once a day or after every 500 analyses when performed within less than one week See the instruction sheets of CAPICLEAN SEBIA WARNING Do not use a capped tube IMPORTANT For optimal use of the CAPICLEAN solution with the MINICAP FLEX
65. ol mol entre 4 8 et 13 8 d HbA De plus les analyses d un sang normal contenant 31 mmol mol d HbA 5 0 d HbA d un chantillon avec proche du seuil contenant 46 mmol mol d HbA1c 6 3 d HbA et d un sang HbA augment e contenant 79 mmol mol d HbA 9 3 d HbA dilu s en s rie dans solution h molysante ont montr que la technique MINICAP Hb Atc est parfaitement lin aire dans la gamme des concentrations tudi es entre 2 5 et 31 1 g dL d h moglobine totale et que les concentrations et pourcentages de la fraction HbA sont ind pendants de la concentration en h moglobine totale de l chantillon dans la gamme des concentrations tudi es Exactitude Corr lation interne L tude de corr lation interne de la technique MINICAP Hb Atc r alis e sur l instrument MINICAP FLEX PIERCING a t r alis e l aide des recommandations EPO9 A2 Method Comparison and Bias Estimation Using Patient Samples Approved Guideline Second Edition Interim Revision du Clinical Laboratory Standards Institute CLSI USA Les concentrations en mmol mol et pourcentages de l HbA ont t analys s l aide d outils statistiques recommand s par le CLSI NOTE Les chantillons de sang utilis s dans l tude de corr lation interne pr sent e ci dessous ont t fournis par 6 laboratoires situ s en France aux Pays Bas et aux USA Tous les chantillons ont t analys s en parall le d
66. ols recommended by CLSI NOTE The results presented below have been obtained from 1 internal accuracy study The analyzed blood samples were provided by 6 laboratories in France the Netherlands and USA All the samples were exactly treated the same way with both techniques and followed the same guidelines in regards to sample integrity The levels of HbA were measured 105 blood samples including 30 samples with normal HbA levels and 75 samples with elevated HbA levels both by electrophoretic separations obtained with MINICAP Hb A1c procedure with the MINICAP FLEX PIERCING instrument and a commercially available capillary electrophoresis technique for HbA quantification that is NGSP standardized The measured values of HbA concentrations and percentages from both procedures were analyzed by a linear regression statistical procedure The obtained results have demonstrated a perfect correlation between both procedures for HbA quantification The results of linear regression analysis are tabulated below MINICAP Hb 1 the sensibility and specificity of the MINICAP Hb A1c procedure compared to the reference procedure have been calculated using the recommended method Wendling 1986 Correlation Range of values ie f ie fo HbA coefficient y Intercept Slope MINICAP Hb Aic Sensibility Specificity Conoanirafon 0 998 1 149 0 987 28 131 100 0 96 7 mmol mol Percentage 0 998 0 128 0 987 4 7 14 2
67. olution couper le bouchon du microtube lors de son utilisation Conservation stabilit et signes de d t rioration La solution d hypochlorite de sodium dilu e peut tre conserv e 3 mois temp rature ambiante dans un r cipient en plastique ferm herm tiquement l abri des rayonnements solaires et de toute source de chaleur ou d ignition et l cart des acides et de l ammoniaque 6 SOLUTION DE LAVAGE CAPILLARYS MINICAP Pr paration Chaque flacon de solution de lavage concentr e CAPILLARYS MINICAP SEBIA r f rence N 2052 2 flacons de 75 mL doit tre compl t 750 mL avec de l eau distill e ou d min ralis e Apr s dilution la solution de lavage contient une solution basique pH 12 Pour MINICAP FLEX PIERCING il est recommand de pr lever la solution de lavage par quantit de 25 mL et compl ter 250 mL avec de l eau distill e ou d min ralis e Utilisation Pour le lavage des capillaires de MINICAP FLEX PIERCING IMPORTANT Avant de remplir le flacon de solution de lavage il est recommand de rincer abondamment l eau distill e ou d min ralis e le col du flacon le connecteur et le tuyau afin d viter l accumulation de sels Conservation stabilit et signes de d t rioration Les solutions de lavage concentr e et dilu e doivent tre conserv es temp rature ambiante ou au r frig rateur en flacons ferm s pour viter l vaporation La solution concentr e est stable jusqu
68. on de lavage contient une solution basique pH 12 Utilisation Pour le lavage des capillaires avant s paration lectrophor tique de IMPORTANT Avant de remplir le flacon de solution de lavage il est recommand de rincer abondamment l eau distill e ou d min ralis e le connecteur et le tuyau afin d viter l accumulation de sels Conservation stabilit et signes de d t rioration Les solutions de lavage concentr e et dilu e doivent tre conserv es temp rature ambiante ou au r frig rateur en flacons ferm s pour viter l vaporation La solution concentr e est stable jusqu la date d expiration indiqu e sur le kit ou sur l tiquette du flacon de solution de lavage La solution dilu e est stable pendant 3 mois liminer la solution de lavage dilu e s il y a un changement d aspect ou apparition d un trouble d une contamination microbienne 4 CUPULES R ACTIF Utilisation Cupules usage unique pour la dilution et la migration des chantillons de sang par l automate placer sur le chargeur de MINICAP FLEX PIERCING Une cupule est destin e l analyse de 2 chantillons ATTENTION Manipuler avec pr caution les cupules r actif contenant des chantillons biologiques 5 FILTRES Utilisation Filtres usage unique pour la filtration du tampon de la solution de lavage reconstitu e et de l eau distill e ou d min ralis e utilis e pour le rincage des capillaires IMPORTANT R
69. onn es Retirer le tube de calibrateur en position 28 d s l apparition de la fen tre indiquant de retirer le tube D s que l analyse du premier calibrateur est termin e proc der l analyse du deuxi me calibrateur selon le m me protocole ATTENTION Apr s avoir ferm les portes de l instrument d marrer l analyse du deuxi me calibrateur l aide du bouton Forcer le passage du contr le en position 28 IMPORTANT Pour une utilisation optimale de chaque Calibrateur Hb Aic CAPILLAIRE il est indispensable d utiliser une tiquette code barres destin e identifier le tube pour contr le contenant le calibrateur fermer ce tube avec son bouchon sp cifique lors de son utilisation Le logiciel affiche la valeur de l HbA des 2 calibrateurs saisie par l op rateur Conservation stabilit et signes de d t rioration Voir la notice d utilisation des Calibrateurs Hb A1c CAPILLAIRE ATTENTION Aucun test ne pouvant prouver l absence des virus VIH virus de l h patite B virus de l h patite C ou tout autre agent infectieux les Calibrateurs Hb A1c CAPILLAIRE doivent tre manipul s avec les pr cautions habituelles pour viter toute contamination Ces sangs test s l aide de techniques agr es par une autorit comp tente FDA ANSM sont n gatifs antig ne de surface de l h patite enanticorps anti VHC anticorps anti VIH 1 et anti VIH 2 2 CONTR LES Hb 1 CAPILLAIRE Composition
70. or bins for used reagent cups SEBIA 12 units PN 2286 lids to close the bins containing used cups SAMPLES FOR ANALYSIS Sample collection and storage Fresh anticoagulated whole blood samples collected in tubes containing K EDTA or K EDTA as anticoagulant are recommended for analysis Blood must be collected according to established procedures used in clinical laboratory testing Samples can be stored for 7 days maximum between 2 and 8 C or 18 hours maximum at room temperature between 15 and 30 C For longer storage samples can be frozen at 80 C within 8 hours of collection without any preparation Frozen blood samples are stable for 3 months maximum at 80 C IMPORTANT For optimal storage of blood samples store them at 80 C Do not store at 20 C 18 Hb A1c 2013 01 Sample preparation Use directly whole blood samples Check that all the tubes contain 1 mL minimum of blood and are perfectly closed Vortex for 5 seconds blood samples stored at 2 8 C for one week or stored at 80 C WARNING The tubes must be closed with their corresponding caps designed for the MINICAP Hb A1c procedure with the MINICAP FLEX PIERCING instrument see EQUIPMENT AND ACCESSORIES REQUIRED Particular cases IMPORTANT The following samples must be identified with the LOW VOLUME AUTO or LOW VOLUME MANUAL bar code label these labels allow the instrument to apply respectively the automatic or
71. ours tient compte de la dur e de remise temp rature ambiante du tampon liminer le tampon s il y a un changement d aspect ou apparition d un trouble d une contamination microbienne d un pr cipit ou de particules en suspension NOTE Au cours du temps une l g re coloration du tampon peut tre observ e sans que cela n affecte la qualit du test 2 SOLUTION H MOLYSANTE Pr paration La solution h molysante est pr te l emploi Elle contient composants sans danger aux concentrations utilis es n cessaires pour des performances optimales Utilisation Pour la dilution et l h molyse du sang total Conservation stabilit et signes de d t rioration La solution h molysante peut tre conserv e temp rature ambiante de 15 30 C ou au r frig rateur entre 2 et 8 C Elle est stable jusqu la date d expiration indiqu e sur le kit ou sur l tiquette du flacon de solution h molysante NE PAS CONGELER Eliminer la solution h molysante s il y a un changement d aspect ou apparition d un trouble d une contamination microbienne d un pr cipit ou de particules en suspension NOTE Au cours du temps un l ger jaunissement de la solution h molysante peut tre observ sans que cela n affecte la qualit du test 3 SOLUTION DE LAVAGE Pr paration Le flacon de solution de lavage concentr e doit tre compl t 250 mL avec de l eau distill e ou d min ralis e Apr s dilution la soluti
72. r 250 r f rence N 2280 12 Couvercles pour bo tes cupules r actifs MINICAP usag es par 12 SEBIA r f rence N 2286 couvercles destin s fermer les boites pour cupules usag es MINICAP Hb A1c 2013 01 CHANTILLONS ANALYSER Pr l vement et conservation des chantillons L analyse se fait sur chantillons de sang total frais pr lev s sur anticoagulant contenant de l EDTAK ou EDTAK Les sangs doivent tre pr lev s selon la proc dure utilis e pour tout test de laboratoire d analyses cliniques Les sangs peuvent tre conserv s au maximum 7 jours au r frig rateur entre 2 et 8 C ou au maximum 18 heures temp rature ambiante entre 15 et 30 C Pour des conservations prolong es congeler rapidement les chantillons 80 C sans pr paration pr alable au maximum dans les 8 heures apr s le pr l vement Les sangs congel s 80 C sont stables au maximum 3 mois IMPORTANT Pour une conservation optimale des chantillons ne pas les conserver 20 C mais 80 C Pr paration des chantillons Utiliser directement les chantillons de sang total V rifier que tous les tubes contiennent au minimum 1 mL de sang et qu ils sont parfaitement bouch s Agiter au vortex pendant 5 secondes les sangs conserv s 2 8 C pendant 1 semaine ou conserv s 80 C ATTENTION Les tubes doivent tre bouch s avec leurs bouchons correspondants adapt s la technique MINICAP Hb Atc
73. ring the previous weeks It can be used as an index of diabetes control This quantification allows to evaluate the middle term efficiency of treatments Electrophoresis is a well established technique routinely used in clinical laboratories for measuring components from body fluids including HbA glycated fraction The MINICAP FLEX PIERCING instrument has been developed to provide complete automation of this testing with fast separation and good resolution In many aspects the methodology can be considered as an intermediary type of technique between classical zone electrophoresis and liquid chromatography The MINICAP FLEX PIERCING instrument uses the principle of capillary electrophoresis in free solution With this technique charged molecules are separated by their electrophoretic mobility in an alkaline buffer with a specific pH Separation also occurs according to the electrolyte pH and electroosmotic flow The MINICAP FLEX PIERCING instrument has silica capillaries functioning in parallel allowing 2 simultaneous analyses for HbA quantification from whole blood sample A sample dilution with hemolysing solution is prepared and injected by aspiration at the anodic end of the capillary A high voltage protein separation is then performed and direct detection of the hemoglobins is made at the cathodic end of the capillary at 415 nm which is the absorbance wave length specific to hemoglobins Before each run the capillaries are washed with a wash so
74. rol Close the tube with its cap Identify the tube with the specific bar code label of the control The analysis of each control must be performed according to the same procedure as described below For each control place the tube identified with the Control bar code label in position No 28 on a MINICAP FLEX PIERCING rotating sampler Control position with centering ring Pour 5 mL of MINICAP Hb A1c hemolysing solution in a hemolysing tube identified with the hemolysing solution bar code label without introducing air bubbles and place it in position No 27 on the rotating sampler Diluent Solution position without any centering ring A message will be displayed if the tube or the hemolysing solution is missing IMPORTANT Ensure the absence of foam in the tube before placing it on the rotating sampler Slide the rotating sampler into the MINICAP FLEX PIERCING instrument Close the doors of the MINICAP FLEX PIERCING instrument the analysis starts automatically In the window which appears on the screen select the number of analyses of the Hb A1c CAPILLARY Control to perform and validate The results are then automatically considered by the software for the data analysis 16 MINICAP Hb A1c 2013 01 Remove the tube with control from position 28 as soon as the window appears indicating to remove the tube Perform the analysis of the second control according to the same procedure WARNING After ha
75. rol mode or identification according to the HbA level compared to the customized values entered by the operator No HbA value displayed Controls identified with bar code labels With the Quality Control mode if the warning message analysis of the control not in conformity is displayed repeat the calibration Warning message analysis of the control not in conformity I 1 repeat the analysis using the same vial in position 28 2 repeat the analysis with a new vial 3 call SEBIA Technical Service if the failure is confirmed Blood sample from No value displayed when Suspect the presence of a Hb variant or a failure in the adjustment of Warning message too low OD 0 07 for a blood sample that is not abnormal atypical profile and HbAtc suspect 9 patient Pr 197 the electrophoretic repeat the analysis if the presence of a Hb shoulder on HbA 1 patterns repeat the the result is variant or on Hb A0 analysis for confirmation confirmed the level can be reported When a sample has a Hb A2 percentage higher than 3 0 an exclamation mark is displayed near the name of the fraction Hb A2 Then a beta thalassemia syndrome that could affect the HbA synthesis may be suspected case of physio pathological interference It is recommended to analyze the sample with the MINICAP HEMOGLOBIN E proce
76. s and information on cleaning and waste disposal labeling and safety rules applied by SEBIA packaging for the transportation of biological samples and instruments cleaning are available on the INSTRUCTIONS amp SAFETY DATA SHEETS DVD PERFORMANCE DATA Precision The precision of the MINICAP Hb A1c procedure was evaluated in a study based on the Clinical Laboratory Standards Institute CLSI USA EP5 A2 guideline Evaluation of Precision Performance of Quantitative Measurements Methods The means standard deviations and coefficients of variation CV s n 120 were calculated for HbA concentration mmol mol and percentage 96 for each sample using statistical tools recommended by CLSI Reproducibility between lots and instruments Six 6 different blood samples were run using the MINICAP Hb A1c procedure in both capillaries of 3 different MINICAP FLEX PIERCING instruments and with 3 lots of MINICAP Hb A1c kits The analyzed blood samples included 2 samples with normal HbA level No 1 and 2 1 sample with HbA level close to the cut off value No 3 and samples with elevated HbA level No 4 5 and 6 In this study each blood sample was analyzed on both capillaries from each instrument including 60 runs over 10 working days at 2 different times of the day Within each run samples were analyzed in duplicate The following tables summarize
77. th calibrators forthe first use of the Hb A1c analysis program with the MINICAP FLEX PIERCING instrument after having changed a capillary after having changed the lot number of calibrators Perform 1 series of analyses with both calibrators and then with 1 of the 2 controls before starting a new analysis sequence after having changed the lot number of analysis buffer after technical operation in case of analyses of controls giving HbA values outside the expected values and after having confirmed this deviation by a second analysis of blood controls atleast every 2 months NOTE It is not necessary to calibrate the instrument after having changed the lot number of hemolysing solution Use IMPORTANT For optimal use of each Hb A1c CAPILLARY Calibrator with the MINICAP FLEX PIERCING instrument it is necessary to use one specific tube designed for blood controls and its corresponding cap see EQUIPMENT AND ACCESSORIES REQUIRED Tubes and caps for Controls and to identify this tube with the corresponding calibrator bar code label Both calibrators must imperatively be analyzed for an effective calibration the run order of both calibrators is indifferent but they must be analyzed within the same working day Reconstitute each lyophilized Hb A1c CAPILLARY Calibrator 1 and 2 vial with the volume of distilled or deionized water and according to the procedure indicated in the package insert of the Hb A1c CA
78. the instructions displayed on the screen 5 Position new reagent cups on the automated loading system for cups of MINICAP FLEX PIERCING a message will be displayed if the reagent cups are missing 6 Position a bin for used cups in MINICAP FLEX PIERCING at the location intended for this purpose 7 Checkthe fill level of the reagent vials add reagent if necessary and empty the waste container In the window Check reagent levels update the software by moving the cursor buttons 8 The rotating sampler contains 28 positions for sample tubes Place up to 26 capped sample tubes with whole blood on the rotating sampler with specific centering rings positions No 1 to 26 the bar code of each tube must be visible in the opening of the rotating sampler Pour the MINICAP Hb A1c hemolysing solution in an uncapped hemolysing tube identified with the hemolysing solution bar code label without introducing air bubbles 2 mL for the analysis of 1 or 2 samples 5 mL for the analysis of 12 samples Place this tube in position No 27 without any centering ring on the rotating sampler Diluent Solution position NOTE 5 mL of hemolysing solution applied in a 13 x 75 mm tube will allow to perform 12 analyses 10 mL of hemolysing solution applied in a 16 x 100 mm tube will allow to perform 24 analyses IMPORTANT Ensure the absence of foam in the tube before placing it on the rotating sampler Place one of the 2 Hb A1c Capillary Controls in pos
79. tion et h molyse des sangs se font en temps masqu pendant l analyse des 2 tubes pr c dents TRAITEMENT DES DONN ES D s la fin de l analyse la quantification de la fraction HbA est automatiquement effectu e Les valeurs d HbA sont standardis es et sont exprim es conform ment aux recommandations de l IFCC en avec une d cimale et en mmol mol sans d cimale Ragnar Hanas et al 2010 NOTE La caract risation de l chantillon sang normal ou sang HbA augment e tant bas e sur la valeur r elle de la concentration en HbA en mmol mol nombre entier calcul par le logiciel de traitement des donn es une discordance peut apparaitre pour des valeurs proches du seuil L identification des sangs normaux et des sangs avec HbA augment e est automatiquement r alis e et les profils peuvent tre distingu s dans la mosa que des courbes comme normaux en bleu ou avec HbA augment e en orange Les chantillons normaux dont la concentration en HbA dite normale est inf rieure ou gale 42 mmol mol ou 6 0 sont pr sent s en bleu Les chantillons HbA augment e dont la concentration HbA est sup rieure 42 mmol mol 6 0 sont pr sent s en orange Les profils lectrophor tiques pr sentant une anomalie avec pr sence d un pic suppl mentaire ou absence d un pic parmi les fractions normales Other Hb A Hb 0 et Hb A2 sont pr sent s en violet avec les mentions Profil atypiq
80. tomate Utilisation IMPORTANT Pour une utilisation optimale de chaque Calibrateur Hb A1c CAPILLAIRE sur MINICAP FLEX PIERCING il est indispensable d utiliser un tube sp cifique pr vu cet effet et son bouchon correspondant voir QUIPEMENT ET ACCESSOIRES N CESSAIRES Tubes et bouchons pour Contr les et d identifier ce tube l aide d une tiquette code barres du calibrateur analys Les 2 calibrateurs doivent imp rativement tre analys s pour que la calibration soit effective l ordre d analyse est indiff rent mais ils doivent tre analys s dans la m me journ e de travail Reconstituer chaque flacon lyophilis de Calibrateur 1 et 2 Hb A1c CAPILLAIRE avec le volume d eau distill e ou d min ralis e et selon le protocole indiqu s dans la notice d utilisation des Calibrateurs Hb A1c CAPILLAIRE Incliner le flacon et l agiter doucement afin de dissoudre la totalit du lyophilisat sans que le liquide ne touche le bouchon Laisser reposer 30 minutes 2 8 C et agiter doucement viter la formation de mousse NOTE La pr cision du volume de reconstitution respecter est de 1 0 D poser chaque calibrateur reconstitu dans un tube pour contr le pr vu cet effet Fermer le tube avec son bouchon Identifier le tube avec l tiquette code barres sp cifique du calibrateur L analyse de chaque calibrateur doit tre r alis e selon le m me protocole d crit ci dessous Pour chaque calibr
81. tsplenectomy may affect the levels of HbA However the values represent a useful relative follow up index for the same patient Limitations See SAMPLES FOR ANALYSIS Analyze only blood samples contained in collection tubes indicated in the paragraph EQUIPMENT AND ACCESSORIES REQUIRED or tubes with equivalent dimensions approved for clinical assays Call SEBIA technical service for further information on these devices Do not analyze directly tubes containing less than 1 mL of blood sample Avoid aged improperly stored blood samples degradation products or artefacts may affect the electrophoretic pattern after 7 days storage When analyzing such samples an additional fraction may migrate particularly to Hb A2 position or more anodically than Hb AO in the other Hb A position After 10 days storage viscous aggregates composed in red blood cells may appear they must be discarded before analysis some blood samples from A C heterozygous patients with Hb F the Hb AO fraction may be quantified with imprecision Due to the resolution and sensitivity limits of zone electrophoresis it is possible that HbA may not be quantified in presence of all hemoglobin variants with this method Troubleshooting Call SEBIA Technical Service of the supplier when the test fails to perform while the instruction for the preparation and storage of materials and for the procedure were carefully followed Kit reagent Safety Data Sheet
82. ue et Hb A1c HbA 1c Les profils sont automatiquement recentr s par rapport au pic d Hb AO afin de faciliter leur interpr tation Le tableau suivant pr sente les symboles et les messages d alerte affich s ainsi que les proc dures suivre selon l chantillon analys Hb A1c 2013 01 Symbole d alerte A Valeur d HbA hors Absence de d tection A Densit optique du pic Profil atypique pr sence d un pic suppl mentaire ou A Valeur d HbA hors des sp cifications pour les calibrateurs des pics d Hb et ou HbA d Hb A0 insuffisante absence d un pic normal valeurs attendues pour les contr les analys s en mode Contr le Qualit QC chantillon analys Message d alerte analyse du calibrateur non conforme analyser un contr le en position 28 ou r p ter la calibration en cas d absence de calibration valide sur un ou 2 I capillaire s ce s capillaire s est sont d sactiv s l analyse de l HbA des chantillons et des contr les sur le s capillaire s concern s n est pas r alis e Calibrateurs identifi s par tiquettes code barres En mode Contr le Qualit identification ou Pas de valeur selon la valeur d HbA d HbA affich e 1 obtenue par rapport aux Contr les identifi s valeurs personnalis es par tiquettes code saisies par l op rateur barres Mess
83. up ration et fermeture des boites pour cupules usag es LIRE ATTENTIVEMENT LE MANUEL D INSTRUCTIONS DE MINICAP FLEX PIERCING PR PARATION DE L ANALYSE LECTROPHOR TIQUE 1 Mettre MINICAP FLEX PIERCING et l ordinateur de contr le sous tension 2 Pour le d marrage placer au moins une cupule r actif neuve sur le chargeur de MINICAP FLEX PIERCING pr vu cet effet en cas d absence de cupule r actif un message apparait 3 D marrer le logiciel l automate est alors automatiquement initialis 4 Utiliser le kit MINICAP Hb A1c avec le programme d analyses Hb 1 Pour s lectionner le programme d analyses Hb 1 et mettre en place le flacon de tampon Hb Atc en position B2 sur l appareil lire attentivement le manuel d instructions de MINICAP FLEX PIERCING et suivre les instructions apparaissant l cran 5 Placer les cupules r actif neuves sur le chargeur de MINICAP FLEX PIERCING pr vu cet effet en cas d absence de cupule r actif un message apparait 6 Placer une boite pour cupules usag es dans MINICAP FLEX PIERCING l emplacement pr vu cet effet 7 V rifier le niveau de remplissage des diff rents flacons de r actifs compl ter les volumes si n cessaire et vider le flacon de vidange Dans la fen tre V rifier le niveau des bidons r actualiser le logiciel de contr le au moyen des curseurs 8 Lecarrousel poss de 28 emplacements pour tubes Placer jusqu 26 tubes prim
84. ure quality such as injection grade water 13 SEBIA INSTRUCTIONS English Hb A1c 2013 01 1 BUFFER Preparation The buffer is ready to use It contains buffer solution pH 9 4 0 5 additives nonhazardous at concentrations used necessary for optimum performance Use Buffer for analysis of HbA with capillary electrophoresis Storage stability and signs of deterioration Store the buffer refrigerated 2 to 8 C It is stable until the expiration date indicated on the kit package or buffer vial labels Avoid storage at room temperature for a long time or close to a window or to a heat source DO NOT FREEZE IMPORTANT When stored at 2 8 C and prior to use it is necessary for the buffer to reach room temperature when it is full let the buffer vial at room temperature for at least 3 hours prior to use If this precaution is not respected the performances of the procedure may be affected WARNING Do not pre heat the buffer in hot water After each use the buffer must imperatively be stored refrigerated between 2 and 8 C without any delay it is then stable until the expiration date indicated on the buffer vial label If the buffer vial is planned to be used within 20 days it may be stored at room temperature Once the buffer vial has been opened and positioned on the MINICAP FLEX PIERCING instrument it is stable for a maximum of 20 days accumulated at room temperature 15 to 30 C IMPORTAN
85. urs sous forme lyophilis e Le Calibrateur 1 Hb A1c CAPILLAIRE pr sente une valeur normale d HbA le Calibrateur 2 Hb A1c CAPILLAIRE pr sente une valeur lev e dHbA Application Les Calibrateurs 1 et 2 Hb A1c CAPILLAIRE sont destin s la calibration et au contr le de migration de la m thode de quantification de l h moglobine glyqu e humaine par la technique lectrophor tique MINICAP Hb A1c r alis e sur l automate pour lectrophor se capillaire MINICAP FLEX PIERCING afin d obtenir des r sultats conformes au DCCT et tablis selon le syst me de r f rence IFCC Analyser les calibrateurs selon les recommandations suivantes R aliser 3 s ries d analyses successives des 2 calibrateurs lors de la premi re utilisation du programme d analyses Hb 1 sur l automate MINICAP FLEX PIERCING apr s chaque changement de capillaire apr s chaque changement de lot de calibrateurs R aliser une s rie d analyses des 2 calibrateurs puis d un des 2 contr les avant l analyse des chantillons apr s chaque changement de lot de tampon d analyse apr s intervention du service technique en cas d analyse des sangs de contr le donnant une valeur hors des valeurs limites attendues et apr s confirmation de cet cart apr s une seconde analyse des sangs de contr le au minimum tous les 2 mois NOTE Le changement de lot de solution h molysante ne n cessite pas de calibration de l au
86. ving closed the doors of the instrument if the analysis of the second blood control is performed within the same day than that of the first blood control start this analysis using the Click to run the control in position 28 button Do not place any sample tube in positions 1 to 26 of the rotating sampler Check the concentration levels and percentages for HbA fraction obtained from the analyses of controls with established customized values of the instrument They must fall within the range determined for each batch If not calibrate again the instrument with the Hb A1c CAPILLARY Calibrators see 8 Hb A1c CAPILLARY CALIBRATORS NOTE HbA concentration displayed by the software is indicated in mmol mol without any decimal place according to IFCC recommendations This decimal place is however considered for the characterization of the sample as normal sample or sample with elevated HbA level statistics and Levey Jennings charts IMPORTANT For optimal use of each Hb A1c CAPILLARY Control it is necessary to use one bar code label intended to identify the tube for control which contains the blood control close the tube with its specific cap before using it Storage stability and signs of deterioration See the package insert of the Hb A1c CAPILLARY Controls 1 and 2 WARNING No test method can provide an absolute assurance of the absence of HIV hepatitis B and C or other infectious agents Therefore handle the Hb A1c CAPILLARY Co

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