[APTT-SiL Minus]. - Agentúra Harmony vos
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1. 96 Factor Factor VIII Seconds Factor IX Seconds Factor XI Seconds I 85 7 70 9 924 10 45 9 44 4 50 7 40 34 2 33 9 34 4 100 28 8 28 8 28 8 Upper limit of Normal for this study 34 9 seconds Heparin Sensitivity Numerous variables can affect the behaviour of heparinized plasma samples when evaluated by the APTT test As a general guideline when increasing amounts of heparin were added to normal plasma the following results were obtained using APTT SiL Minus on a photo optical instrument Heparin IU ml Clot Time seconds 0 29 9 0 2 70 0 0 4 174 APTT SiL Minus REFERENCES 2 3 Langdell R Wagner R Brinkhous K Effect of Antihemophilic Factor on One Stage Clotting Tests J Lab Clin Med 41 637 1953 Proctor R Rapaport S The Partial Thrombopastin Time with Kaolin Am J Clin Path 36 212 1961 Ratnoff O Crum S Activation of Hageman Factor by Solutions of Ellagic Acid J Lab Clin Med 63 359 1964 Hathaway W Clarke S Christian M Jacobson L Sensitivity of the Activated Partial Thromboplastin Time to Mild Factor Deficiencies in Standardization of Coagulation Assays An Overview College of American Pathologists Skokie IL pp 131 1982 Brandt J Triplett D Laboratory Monitoring of Heparin Effect of Reagents and Instruments in the Activated partial Thromboplastin Time Am J Clin Path 76 530 1981 CLSI Guidelines2. adattativo agli strumenti manuali o automatici per la rilevazione di coaguli Per ulteriori dettagli vedere le istruzioni del produttore dello strumento I Miscelare accuratamente APTT SiL Minus e il calcio cloruro a 0 025 M quindi preriscaldare a 37 C 2 Preriscaldare 0 1 ml di plasma di test in doppio a 37 C per due minuti 3 Aggiungere forzatamente 0 1 ml di reagente APTT SiL Minus preriscaldato al plasma e avviare il cronometro 4 Incubare per esattamente 5 minuti a 37 C 5 Aggiungere 0 1 ml di calcio cloruro preriscaldato a 0 025 M 6 Prendere nota del tempo necessario per la formazione di coaguli 7 Riportare il risultato come tempo APTT in secondi D Metodi automatici AC4 5558 x1000 campioni 5559 x2000 campioni Fare riferimento al manuale utente dello AC 4 appropriato per conoscere le istruzioni dettagliate Preparare tutti i reagenti secondo le istruzioni riportate nel paragrafo COMPOSIZIONE START 17s METHOD Coag MIX 0 PATIENT Pat Def Plasma DP vol 50QuL Vol 0uL pos 35 CP INCUB 300s MATH lin CLEAN 0 BUFFER BUF RIVol 50uL Vol 0uL Pos 31 RUNTIME 180s SENS T CORR 0 CLEAR CLR R2Vol 50uL S CORR 0 Vol 0uL Pos 26 17 Italiano INTERPRETAZIONE DEI RISULTATI Calcolare il tempo medio di coagulazione delle determinazioni duplicate per ciascun plasma di test e plasma di controllo La differenza tra le determinazioni in doppio non deve superare il 5 Se necessario ripe
3. CAUTIONS Tous les d chets contenant des mat riaux biologiques doivent tre tiquet s en cons quence et ne doivent pas tre stock s avec les d chets d autre type liminez tous les d chets conform ment aux r glements internationaux nationaux et locaux L analyse doit tre men e en association avec les observations cliniques et d autres analyses de laboratoire COMPOSITION REF 5558 5 x 10ml APTT SiL Minus R actif 5 x 10ml 25mM chlorure de calcium REF 5559 10 x 10ml APTT SiL Minus R actif 10 x 10ml 25mM chlorure de calcium Le r actif APTT SiL Minus contient un activateur particules semi collo dales magn sium aluminium silicate pour une sensibilit optimale aux d ficits de facteurs et l h parine Le r actif contient aussi le phospholipide avec le tampon et les agents de stabilisation Pr paration du r actif Ramenez le temp rature ambiante avant de l utiliser M langez bien en remuant ou en renversant avant d utiliser STOCKAGE ET CONSERVATION Conservez le 2 8 C sans le congeler Stable pendant 30 jours apr s ouverture vitez des r chauffements prolong s PR L VEMENT DES CHANTILLONS A Anticoagulant Utilisez la solution tampon de citrate de sodium 3 2 B Pr levez l chantillon voir par exemple les directives CLSI r f 6 APTT SiL Minus Prelevez des sp cimens sanguins veineux par ponction veineuse aseptique 2 Versez imm diatement neuf volumes de sang et un vol
4. ensayos de laboratorio 21 Espafiol RECOGIDA Y PREPARACION DE MUESTRAS A Anticoagulante Utilizar tamp n citrato s dico al 3 2 B Recogida de las muestras ver p ej las directrices CLSI Ref 6 l Extraer la sangre venosa mediante venipunci n 2 Anadir inmediatamente nueve partes de sangre a una parte de anticoagulante y mezclar bien invirtiendo el tubo con el tap n hacia abajo Centrifugar la muestra a 1500 rpm durante como m nimo 15 minutos 4 Extraer el plasma del tubo antes de 60 minutos utilizando una pipeta de pl stico y a continuaci n conservar en un tubo de pl stico 5 Analizar la muestra de plasma antes de 4 horas Tambi n se puede conservar congelada a 20 C hasta un m ximo de dos semanas o a 70 C hasta un m ximo de seis meses y descongelar una nica vez cuando se vaya a utilizar w PROCEDIMIENTO PASO A PASO A Materiales suministrados APTT SiL Minus l quido 2 Cloruro c lcico 0 025 M Materiales necesarios Aparato manual mec nico o foto ptico de detecci n de la coagulaci n Temporizador adecuado Parafilm o equivalente Pipeteador de precisi n 0 1 ml Plasmas de control NANO C Realizaci n del ensayo Para las determinaciones APTT puede utilizarse APTT SiL Minus en instrumentos manuales o autom ticos de detecci n de la coagulaci n Para m s informaci n v anse las instrucciones del fabricante del instrumento correspondiente Precalentar a 37 C el APTT SiL Minus
5. n anticoagulante sangre incorrecta Bw DT B Tecnicas de laboratorio l Realizar los ensayos a 37 C 2 Utilizar nicamente agua de elevada pureza 3 El valor ptimo de pH es de 7 0 7 5 23 Espa ol CARACTERISTICAS FUNCIONALES Helena BioSciences o sus representantes han determinado las siguientes caracteristicas de rendimiento como directriz Cada laboratorio debe establecer sus propios datos de rendimiento Estudios de precision Los resultados son los siguientes Dentro de las pruebas TTPa en segundos Se realizaron estudios de precisi n por duplicado con el Sysmex CA1500 usando dos niveles de materiales control Control Mean CV N Norm Trol I 33 0 36 10 Ab Trol 3 779 0 31 10 Entre pruebas TTPa en segundos Los estudios de precisi n se realizaron del mismo modo utilizando dos niveles de material de control durante tres pruebas para evaluarlos Control Mean CV N Norm Trol I 32 9 2 41 100 Ab Trol 3 78 3 0 77 100 Sensibilidad a los factores Se han realizado estudios para valorar la sensibilidad del reactivo APTT SiL Minus frente a diferentes deficits de factor obteniendose los siguientes resultados Limite superior de la normalidad para este estudio 34 9 seg de factor seg Factor VIII seg Factor IX seg Factor XI seg I 85 7 70 9 924 10 45 9 44 4 50 7 40 34 2 33 9 34 4 100 28 8 28 8 28 8 Sensibilidad a la he
6. M pr chauff Notez le temps de formation de caillots Exprimez les r sultats APTT en secondes M thodes automatis es AC 4 5558 x1000 chantillons 5559 x2000 chantillons Se conformer au manuel d utilisation de AC 4 correspondant pour avoir des instructions d taill es Pr parer tous les r actifs en suivant les indications du paragraphe Composition START 17s METHOD Coag MIX 0 PATIENT Pat Def Plasma DP vol 50uL Vol 0uL pos 35 CP INCUB 300s MATH lin CLEAN 0 BUFFER BUF RIVol 50uL Vol 0uL Pos 31 RUNTIME 180s SENS T CORR 0 CLEAR CLR R2Vol 50uL S CORR 0 Vol 0uL Pos 26 Fran ais INTERPRETATION DES RESULTATS Calculez le temps moyen de coagulation des analyses en double dosage pour chaque chantillon test et plasma de contr le La difference entre les dosages doubles ne doit pas exc der les 5 r p tez le test si n cessaire Notez le temps APTT en secondes parall lement l chelle de valeurs normale Les plasmas de contr les doivent servir a garantir que les variables du type temp ratures reactifs instruments pipettes etc fonctionnent correctement Nous ne recommandons pas d attacher les valeurs de contr le aux r sultats enregistr s pour le patient CONTR LE QUALIT On devra analyser des plasmas de contr le Helena de coagulation normaux et anormaux parall lement aux chantillons de patients Nous recommandons d utiliser au moins un contr le normal et un
7. cloruro c lcico y se mide el tiempo de coagulaci n en segundos Los d ficits de aproximadamente el 40 o inferiores de los factores VIII IX XI y XII producen un aumento del APTT La heparina en presencia de cantidades adecuadas de AT Ill tambi n produce un aumento del APTT ADVERTENCIAS Y PRECAUCIONES Todos los residuos que contienen material biol gico deben ser adecuadamente etiquetados y conservados y deben mantenerse separados de los dem s residuos Eliminar los residuos de acuerdo con las normativas internacionales nacionales y locales COMPOSICION REF 5558 5 x 10ml APTT SiL Minus Reactivo 5 x 10ml 25mM cloruro c lcico REF 5559 10 x 10ml APTT SiL Minus Reactivo 10 x 10ml 25mM cloruro c lcico El reactivo APTT SiL Minus contiene un activador de particulas casi coloidal magnesio aluminio silicato que permite una sensibilidad ptima frente a los d ficits de factor y frente a la heparina El reactivo contiene asimismo un fosfolipido con tampon y estabilizadores B Preparaci n de los reactivos Antes de utilizar esperar a que alcance la temperatura ambiente Antes de utilizar mezclar bien mediante agitaci n suave o inversi n ALMACENAMIENTO Y PER ODO DE VALIDEZ Conservar a una temperatura entre 2 8 C No congelar Tras su apertura el producto es estable durante 30 d as Evitar un calentamiento prolongado El ensayo debe utilizarse conjuntamente con las observaciones cl nicas y con los resultados de otros
8. les r sultats suivants ont t obtenus avec APTT SiL Minus sur un instrument photo optique H parine Ul ml Temps de coagulation sec 0 29 9 0 2 70 0 0 4 174 9 Francais BIBLIOGRAPHIE 2 3 Langdell R Wagner R Brinkhous K Effect of Antihemophilic Factor on One Stage Clotting Tests J Lab Clin Med 41 637 1953 Proctor R Rapaport S The Partial Thrombopastin Time with Kaolin Am J Clin Path 36 212 1961 Ratnoff O Crum S Activation of Hageman Factor by Solutions of Ellagic Acid J Lab Clin Med 63 359 1964 Hathaway W Clarke S Christian M Jacobson L Sensitivity of the Activated Partial Thromboplastin Time to Mild Factor Deficiencies in Standardization of Coagulation Assays An Overview College of American Pathologists Skokie IL pp 131 1982 Brandt J Triplett D Laboratory Monitoring of Heparin Effect of Reagents and Instruments in the Activated partial Thromboplastin Time Am J Clin Path 76 530 1981 CLSI Guidelines for the Standardized Collection Transport and Preparation of Blood Specimens for Coagulation Testing and Performance of Coagulation Assays H21 A4 APTT SiL Minus VERWENDUNGSZWECK Der Test zur Bestimmung der aktivierten partiellen Thromboplastinzeit APTT dient haupts chlich zum Nachweis von Mangelzust nden der Faktoren der Phase insbesondere der Faktoren VIII IX XI und XII Der APTT Test wurde durch di
9. performances suivantes Chaque laboratoire doit tablir ses propres donn es de performance Etudes de pr cision Les r sultats sont indiqu s ci dessous Intra analyse APTT en secondes Des tudes de pr cision ont t r alis es en double en analysant avec l automate Sysmex CA1500 deux contr les offrant des APTT diff rents Control Mean c v N Norm Trol I 33 0 3696 10 Ab Trol 3 779 0 31 10 Inter analyses APTT en secondes Des tudes de pr cision ont t r alis es dans la m amp me facon a l aide de deux contr les offrant des APTT different qui ont t analys s trois fois Control Mean c v N Norm Trol I 32 9 2 4196 100 Ab Trol 3 78 3 0 7796 100 Sensibilit aux facteurs Des tudes ont t effectu es pour d terminer la sensibilit du r actif APTT SiL Minus diff rents d ficits de facteur Les r sultats suivants ont ainsi t obtenus Limite sup rieure des valeurs normales pour cette tude 34 9 secondes 96 facteur Facteur VIII secondes Facteur IX secondes Facteur XI secondes I 85 7 70 9 924 10 45 9 44 4 50 7 40 34 2 33 9 34 4 100 28 8 28 8 28 8 Sensibilit a l h parine De nombreuses variables peuvent affecter le comportement des chantillons h parinis s lorsqu ils sont soumis au test APTT G n ralement lorsque des quantit s croissantes d h parine ont t ajout es du plasma normal
10. pp 131 1982 Brandt J Triplett D Laboratory Monitoring of Heparin Effect of Reagents and Instruments in the Activated partial Thromboplastin Time Am J Clin Path 76 530 1981 CLSI Guidelines for the Standardized Collection Transport and Preparation of Blood Specimens for Coagulation Testing and Performance of Coagulation Assays H21 A4 20 APTT SiL Minus USO PREVISTO El ensayo del tiempo de tromboplastina parcial activado APTT se utiliza principalmente para detectar deficits de los factores de la Fase factores VIII IX xl ly XII Desde su definici n por parte de Langdell et al y tras diversas aportaciones de otros cient ficos el ensayo del tiempo de tromboplastina parcial activado lleva siendo ampliamente utilizado desde hace afios como un an lisis prequir rgico para valorar ciertos factores de coagulaci n y para monitorizar el tratamiento con heparina Todos los factores de la via intrinseca son necesarios para obtener resultados normales en el ensayo APTT El ensayo APTT tambien se utiliza para monitorizar el tratamiento con heparina UFH observandose un aumento de los resultados en el ensayo a partir aproximadamente de 0 1 unidades ml Este ensayo tambi n se utiliza para la cuantificaci n ensayos de factor de los factores VIII IX XI y XII El ensayo APTT mide el tiempo de coagulaci n del plasma problema Tras la activaci n inicial del reactivo APTT con el plasma problema se realiza la adici n de
11. variazioni causate da fattori apparentemente insignificanti A Campionamento EVITARE L uso di vetro utilizzare solo plastica Ritardi nel miscelare sangue e anticoagulante Emolisi o campioni lipemici Contaminazione con tromboplastina tissutale Squilibri nelle proporzioni tra anticoagulante e sangue YN Tecniche di laboratorio Eseguire i test a una temperatura pari a 37 C Utilizzare solo acqua ultrapura Il pH ottimale compreso tra 7 e 7 5 WN_m APTT SiL Minus CARATTERISTICHE PRESTAZIONALI Le caratteristiche prestazionali sotto riportate sono state determinate da Helena BioSciences o dai propri rappresentanti a titolo di linee guida Ciascun laboratorio dovr pertanto elaborare i propri dati prestazionali STUDI DI PRECISIONE risultati appaiono come segue Entro la serie aPTT in secondi Gli studi di precisione sono stati eseguiti in replicato sul Sysmex CAI 500 utilizzando due livelli di materiali di controllo Control Mean CV N Norm Trol I 33 0 36 10 Ab Trol 3 779 0 31 10 Tra le serie aPTT in secondi Gli studi di precisione sono stati eseguiti nello stesso modo utilizzando due livelli di materiale di controllo durante tre cicli per la relativa valutazione Control Mean CV N Norm Trol I 32 9 2 41 100 Ab Trol 3 78 3 0 77 100 Sensibilit ai fattori Sono stati eseguiti studi di sensibilit ai fattori per valutare la sensibilit del reagent
12. 60 min using a plastic pipette and store in a plastic tube Test plasma sample within 4 hours otherwise store frozen at 20 C for up to two weeks or 70 C for up to six months and thaw once just prior to use STEP BY STEP PROCEDURE A l 2 SAWN_W C Materials Provided APTT SiL Minus liquid 0 025 M Calcium chloride Materials Required A manual mechanical or photo optical means of clot detection Suitable timer Parafilm or equivalent Precision pipettor 0 1 ml Control Plasmas Performance of Test The use of APTT SiL Minus in the performance of APTT determinations is adaptive to manual or automated instruments for clot detection See instrument manufacturers instructions for full details OS UR OX I D Prewarm well mixed APTT SiL Minus and 0 025 M Calcium Chloride to 37 C Prewarm 0 1 ml test plasma in duplicate to 37 C for 2 minutes Forcibly add 0 1 ml prewarmed APTT SiL Minus to plasma and start timer Incubate for exactly 5 minutes at 37 C Add 0 1 ml prewarmed 0 025 M Calcium Chloride Note time for clot formation Report result as APTT time seconds Automated Methods AC 4 5558 x1000 samples 5559 x2000 samples Refer to the appropriate AC 4 Operators Manual for detailed instructions Prepare all reagents as instructed under composition START 17s METHOD Coag MIX 0 PATIENT Pat Def Plasma DP vol 50uL Vol 0uL pos 35 CP INCUB 300s MATH lin CLEAN 0 BUFFER BU
13. Ab Trol 3 779 0 31 10 Zwischen L ufen aPTT in Sekunden In derselben Weise wurden Pr zisionstudien zur Evaluierung mit Kontrollmaterial aus zwei unterschiedlichen Stufen in drei L ufen durchgef hrt Control Mean CV N Norm Trol 32 9 2 41 100 Ab Trol 3 78 3 0 77 100 Faktor Empfindlichkeit Es wurden Studien durchgef hrt um die Sensitivit t des APTT SiL Minus Reagenzes gegen ber Mangelzust nden verschiedener Faktoren zu ermitteln Dabei wurden die folgenden Ergebnisse erhalten Faktor Faktor VIII Sekunden Faktor IX Sekunden Faktor XI Sekunden I 85 7 70 9 924 10 45 9 44 4 50 7 40 34 2 33 9 34 4 100 28 8 28 8 28 8 Oberer Grenzwert des Normalbereichs f r diese Studie 34 9 Sekunden Heparin Sensitivit t Das Verhalten von heparinisierten Plasmaproben kann bei der Auswertung mit dem APTT Test durch zahlreiche Variablen beeinflusst werden Bei der Zugabe von steigenden Mengen Heparin zu normalem Plasma wurden folgende Ergebnisse als allgemeine Richtlinie mit dem APTT SiL Minus Test auf einem photooptischen Instrument erhalten Heparin IU ml Gerinnungszeit sec 0 29 9 0 2 70 0 0 4 174 APTT SiL Minus LITERATUR 2 3 Langdell R Wagner R Brinkhous K Effect of Antihemophilic Factor on One Stage Clotting Tests J Lab Clin Med 41 637 1953 Proctor R Rapaport S The Partial Thrombopastin Time w
14. F RIVol 50uL Vol 0uL Pos 31 RUNTIME 180s SENS T CORR 0 CLEAR CLR R2Vol 50uL S CORR 0 Vol 0uL Pos 26 APTT SiL Minus INTERPRETATION OF RESULTS Calculate the mean clotting time of duplicate determinations for each test plasma and Control Plasmas The difference between duplicate determinations should not exceed 5 repeat if necessary Report the APTT time result in seconds along with the Normal Range Control Plasmas are to be used to help assure that test variables such as temperature reagents instrumentation pipettes etc are functioning properly It is not recommended that Control values be reported with patient results QUALITY CONTROL Helena Normal and Abnormal Coagulation Control Plasmas should be tested in conjunction with patient samples It is recommended that at least one Normal and one Abnormal be run at each shift A Control Range should be established by the laboratory to determine the allowable variation in day to day performance of each Control Plasma EXPECTED VALUES Typical Normal results using Helena APTT SiL Minus are approximately 30 40 seconds However each laboratory should establish its own Normal Range using the reagents instrumentation and techniques commonly in use in the laboratory A Normal Range should be established using individuals representative of the population being tested within the laboratory A new Normal Range should be established with any change in instrumentatio
15. H21 A4 25 Espanol Helena Biosciences Europe Queensway South Team Valley Trading Estate Gateshead Tyne and Wear NEI 0SD Tel 44 0 191 482 8440 Fax 44 0 191 482 8442 Email info helena biosciences com www helena biosciences com HL 2 1787P 2008 03 1
16. Instructions For Use APTT SiL Minus REF 5558 5559 APTT SiL Minus Fiche technique APTT SiL Minus Anleitung APTT SiL Minus Istruzioni per l uso APTT SiL Minus Instrucciones de uso Contents English Francais Deutsch Italiano Espanol helena Biosciences Europe Partners in Good Science Il 16 21 APTT SiL Minus INTENDED USE The Activated Partial Thromboplastin Time APTT test is used principally to detect deficiencies in the Stage Factors namely Factors VIII IX XI and XII From its origins through the work of Langdell and coworkers and later modified by others the Activated Partial Thromboplastin Time test has been widely used for a number of years as a pre surgical screen for assessing certain coagulation factors and in monitoring Heparin therapy All Factors of the Intrinsic Pathway are necessary for normal results when performing the APTT test The APTT test is also used to monitor Heparin UFH therapy showing prolonged test results at approximately 0 1 units ml and above The test is also used in the quantitative determination Factor Assays of Factors VIII IX XI XII The APTT test measures the clotting time of test plasma An initial activation of the APTT reagent with the test plasma is followed by the addition of calcium chloride and the clotting time is measured in seconds Deficiencies of approximately 40 and lower of Factors VIII IX XI and XII will result in a prolonged APTT Hepari
17. autre anormal pour chaque s rie Une fourchette de valeurs de contr le doit tre tablie pour chaque laboratoire afin d tablir les taux permissibles de variation dans l ex cution quotidienne de chaque plasma de contr le VALEURS DE R F RENCE Les r sultats normaux types avec le r actif Helena APTT SiL Minus sont d environ 30 40 secondes Chaque laboratoire doit toutefois tablir ses propres normes en utilisant les r actifs instruments et techniques utilis s sur place d ordinaire Les normes doivent amp tre tablies en utilisant des individus repr sentatifs de la population test e dans le laboratoire L chelle de normes doit tre v rifi e chaque changement d instruments de techniques de pr l vements sanguins d anticoagulant ou de lots de r actifs LIMITES On devra prendre grand soin de minimiser les variations qui pourraient r sulter de facteurs apparemment insignifiants A Prelevement des echantillons VITER Usage du verre N utilisez que du plastique Retard dans le m lange du sang avec l anticoagulant chantillons h molytiques ou lip miques Contamination avec thromboplastine tissulaire Taux incorrects d anticoagulant par rapport au sang mS Techniques de laboratoire Effectuez les tests 37 C N utilisez que de l eau hautement purifi e Le pH optimal est de 7 0 7 5 New APTT SiL Minus PERFORMANCES Helena BioSciences ou ses repr sentants ont determine titre indicatif les
18. biente Miscelare accuratamente con il vortex o capovolgere pi volte prima di utilizzare il reagente CONSERVAZIONE E STABILIT Conservare a una temperatura compresa tra 2 8 C Non congelare Il reagente rimane stabile per 30 giorni dopo l apertura Evitare il riscaldamento prolungato APTT SiL Minus RACCOLTA E PREPARAZIONE DEI CAMPIONI Anticoagulante Utilizzare tampone sodio citrato al 3 2 Campionamento vedere ad esempio le linee guida CLSI rif 6 Raccogliere un campione di sangue tramite venipuntura asettica Miscelare immediatamente nove parti di sangue con una parte di anticoagulante capovolgendo pi volte la provetta Centrifugare il campione a 1500 x g per almeno 15 minuti Rimuovere il plasma dalla provetta entro 60 minuti con una pipetta di plastica quindi conservare in una provetta di plastica 5 Analizzare il campione di plasma entro quattro ore in caso contrario congelare a 20 C per un massimo di due settimane o a 70 C per un massimo di sei mesi e scongelare solo prima dell uso MIU p PROCEDURA A Materiali forniti I APTT SiL Minus liquido 2 Calcio cloruro a 0 025 M Materiali necessari Strumento manuale meccanico o foto ottico di rilevazione dei coaguli Cronometro appropriato Parafilm o altra pellicola sigillante da laboratorio Pipettatore di precisione da 0 1 ml Plasma di controllo mu wn C Esecuzione del test L uso del reagente APTT SiL Minus per le determinazioni APTT
19. e APTT SiL Minus ai diversi deficit di fattori Di seguito sono riportati i risultati ottenuti fattore Fattore VIII secondi Fattore IX secondi Fattore XI secondi I 85 7 70 9 924 10 45 9 44 4 50 7 40 34 2 33 9 34 4 100 28 8 28 8 28 8 Il limite superiore del range normale per questo studio pari a 34 9 secondi Sensibilit all eparina Sono numerose le variabili che possono influire sul comportamento di campioni di plasma eparinizzato durante il test APTT Come indicazione generale quando al plasma normale sono state aggiunte quantit crescenti di eparina sono stati ottenuti i risultati riportati di seguito utilizzando il reagente APTT SiL Minus su uno strumento foto ottico Eparina in IU ml Tempo di coagulazione secondi 0 29 9 0 2 70 0 0 4 174 19 Italiano BIBLIOGRAFIA 2 3 Langdell R Wagner R Brinkhous K Effect of Antihemophilic Factor on One Stage Clotting Tests J Lab Clin Med 41 637 1953 Proctor R Rapaport S The Partial Thrombopastin Time with Kaolin Am J Clin Path 36 212 1961 Ratnoff O Crum S Activation of Hageman Factor by Solutions of Ellagic Acid J Lab Clin Med 63 359 1964 Hathaway W Clarke S Christian M Jacobson L Sensitivity of the Activated Partial Thromboplastin Time to Mild Factor Deficiencies in Standardization of Coagulation Assays An Overview College of American Pathologists Skokie IL
20. e Arbeit von Langdell und Mitarbeitern konzipiert und sp ter durch andere modifiziert Seit etlichen Jahren wird er breitl ufig bei der pr operativen Ermittlung gewisser Gerinnungsfaktoren und bei der berwachung der Heparintherapie angewendet Um mit dem APTT Test normale Ergebnisse zu erhalten sind alle Faktoren des intrinsischen Gerinnungssystems erforderlich Der APTT Test wird auch zur berwachung einer Heparin UFH Therapie eingesetzt Hier ergeben sich verl ngerte Testergebnisse von etwa 0 1 Einheiten ml und mehr Weiterhin dient der Test zur quantitativen Bestimmung Faktortests der Faktoren VIII IX XI XII Beim APTT Test wird die Gerinnungszeit des Testplasmas gemessen Nach einer anf nglichen Aktivierung des APTT Reagenzes mit dem Testplasma folgt die Zugabe von Kalziumchlorid die Gerinnungszeit wird in Sekunden gemessen Ein Mangel von etwa 40 oder mehr an den Faktoren VIII IX XI und XII f hrt zu einer verl ngerten APTT Heparin f hrt bei Vorhandensein entsprechender Mengen von AT IIl ebenfalls zu einer verl ngerten APTT WARNHINWEISE UND VORSICHTSMASSNAHMEN Alle Abf lle die biologisches Material enthalten m ssen ordnungsgem gekennzeichnet und von anderem Abfall getrennt gelagert werden Entsorgen Sie alle Abf lle unter Beachtung der vorgeschriebenen internationalen nationalen und rtlichen Bestimmungen Der Test muss in Zusammenhang mit klinischen Beobachtungen und den Ergebnissen anderer Labortests bet
21. e genaue Anleitung Alle Reagenzien wie unter Inhalt beschrieben vorbereiten START 17s METHOD Coag MIX 0 PATIENT Pat Def Plasma DP vol 50uL Vol 0uL pos 35 CP INCUB 300s MATH lin CLEAN 0 BUFFER BUF RIVol 50uL Vol 0uL Pos 31 RUNTIME 180s SENS T CORR 0 CLEAR CLR R2Vol 50uL S CORR 0 Vol 0uL Pos 26 12 APTT SiL Minus AUSWERTUNG DER ERGEBNISSE Berechnen Sie die mittlere Gerinnungszeit aus den Doppelbestimmungen f r alle Test und Kontrollplasmen Der Unterschied der Doppelbestimmungen darf 5 nicht berschreiten n tigenfalls wiederholen Zeichnen Sie das Ergebnis f r die APTT Zeit in Sekunden zusammen mit dem Normalbereich auf Die Kontrollplasmen sind dazu vorgesehen das ordnungsgem e Funktionieren der Testvariablen wie der Temperatur der Reagenzien Ger te Pipetten usw sicherzustellen Es wird nicht empfohlen die Kontrollwerte zusammen mit den Patientenergebnissen anzugeben QUALIT TSKONTROLLE Zusammen mit den Patientenproben m ssen Helena Normale und Anomale Koagulationskontrollplasmen getestet werden Es wird empfohlen in jeder Schicht mindestens eine normale und eine anomale Kontrolle zu testen Das Labor muss selbst einen Kontrollbereich festlegen mit dem die zul ssige t gliche Abweichung f r jedes Kontrollplasma bestimmt wird REFERENZWERTE Die typischen mit dem Helena APTT SiL Minus Test erhaltenen Normalwerte liegen etwa zwischen 30 und 40 Sekunden Jedes Labor mus
22. for the Standardized Collection Transport and Preparation of Blood Specimens for Coagulation Testing and Performance of Coagulation Assays H21 A4 5 English UTILISATION Le dosage APTT sert avant tout d tecter les d ficits en facteurs de premier niveau a savoir les facteurs VIII IX XI et XII Des le d but avec les travaux de Langdell et de ses associ s plus tard modifi s par d autres chercheurs le test du temps de cephaline activee a t couramment employ pendant plusieurs ann es pour le d pistage pr op ratoire de certains facteurs de coagulation et dans le suivi des traitements l h parine Tous les facteurs de la voie endog ne sont requis pour obtenir des r sultats normaux dans les tests APTT Les tests APTT servent galement suivre le traitement l h parine HNF en faisant apparaitre des r sultats prolong s environ 0 1 unit ml et au del lls sont galement utilis s pour l analyse quantitative titrages de facteur des facteurs VIII IX XI XII Le test APTT mesure le temps de coagulation du plasma analyser L activation initiale du r actif APTT avec le plasma en question est suivie par l ajout de chlorure de calcium le temps de coagulation est mesur en secondes Les d ficits inf rieurs ou peu pr s gaux 40 en facteurs VIII IX XI et XII donneront un APTT prolong En pr sence d une quantit appropri e d AT Ill l h parine donnera elle aussi un APTT prolong PR
23. ieren Sie sie andernfalls bis zu zwei Wochen lang bei 20 C oder bis zu sechs Monaten bei 70 C ein und tauen Sie die Probe nur einmal unmittelbar vor dem Gebrauch auf SCHRITT F R SCHRITT METHODE A l 2 VER wa C Gelieferte Materialien APTT SiL Minus fl ssig 0 025 M Kalziumchlorid Erforderliche Materialien Ein manuelles mechanisches oder photooptisches Hilfsmittel zum Nachweis von Blutgerinnseln Geeigneter Timer Parafilm oder gleichwertige Vorrichtung Pr zisionspipettor 0 1 ml Kontrollplasmen Durchf hrung des Tests Die Durchf hrung von APTT SiL Minus mit dem APTT Si Test kann an manuelle und automatische Instrumente zum Nachweis von Blutgerinnseln angepasst werden Entnehmen Sie die vollst ndigen Einzelheiten der Anweisung des Instrumentenherstellers W rmen Sie gut gemischtes APTT SiL Minus und 0 025 M Kalziumchlorid auf 37 C vor l 2 W rmen Sie zwei Proben des Testplasmas von 0 1 ml 2 Minuten lang auf 37 C vor 3 Geben Sie 0 1 ml vorgew rmtes APTT SiL Minus zu dem Plasma hinzu und starten Sie den Timer 4 Inkubieren Sie genau 5 Minuten lang bei 37 C 5 F gen Sie 0 1 ml von den vorgew rmten 0 025 M Kalziumchlorid hinzu 6 Notieren Sie die Zeit der Gerinnselbildung 7 Zeichnen Sie das Ergebnis als die APTT Zeit in Sekunden auf D Automatisierte Methoden AC 4 5558 x1000 Proben 5559 x2000 Proben Siehe Bedienungsanleitung des verwendeten Ger ts f r ein
24. ith Kaolin Am J Clin Path 36 212 1961 Ratnoff O Crum S Activation of Hageman Factor by Solutions of Ellagic Acid J Lab Clin Med 63 359 1964 Hathaway W Clarke S Christian M Jacobson L Sensitivity of the Activated Partial Thromboplastin Time to Mild Factor Deficiencies in Standardization of Coagulation Assays An Overview College of American Pathologists Skokie IL pp 131 1982 Brandt J Triplett D Laboratory Monitoring of Heparin Effect of Reagents and Instruments in the Activated partial Thromboplastin Time Am J Clin Path 76 530 1981 CLSI Guidelines for the Standardized Collection Transport and Preparation of Blood Specimens for Coagulation Testing and Performance of Coagulation Assays H21 A4 15 Deutsch USO PREVISTO Il test APTT viene utilizzato principalmente per rilevare i deficit dei fattori della fase I pi propriamente i fattori VIII IX XI e XII Sin dalle origini grazie all opera di Langdell e dei suoi collaboratori modificati successivamente da altri il test di tromboplastina parziale attivato APTT stato ampiamente utilizzato per diversi anni come screening preoperatorio per la valutazione di alcuni fattori di coagulazione e nel monitoraggio della terapia eparinica Per risultati normali durante esecuzione del test APTT sono necessari tutti i fattori della via intrinseca Il test APTT viene inoltre utilizzato per il monitoraggio della terapia eparinica UFH mos
25. n blood collection techniques anticoagulant and when changing to new lots of reagents LIMITATIONS Great care must be taken to minimize variations which may occur by seemingly insignificant factors A Specimen Collection AVOID Use of glass Use only plastic Delayed mixing of blood with anticoagulant Hemolysis or lipemic samples Contamination with tissue thromboplastin Improper ratio of anticoagulant with blood DI Laboratory Techniques Perform tests at 37 C Use only high purity water Optimum pH is 7 0 7 5 nm 3 English PERFORMANCE CHARACTERISTICS Helena BioSciences or their representatives have determined the following performance characteristics as a guideline Each laboratory should establish it s own performance data Precision Studies Results are shown below Within Run aPTT in seconds Precision studies were performed in replicate on the Sysmex CAI500 using two levels of control materials Control Mean CV N Norm Trol I 33 0 36 10 Ab Trol 3 779 0 31 10 Between Run aPTT in seconds Precision studies were performed in the same manner using two levels of control material during three runs for evaluation Control Mean c v N Norm Trol I 32 9 2 4196 100 Ab Trol 3 78 3 0 7796 100 Factor Sensitivity Studies were performed to assess the sensitivity of APTT SiL Minus reagent to various Factor Deficiencies The following results were obtained
26. n in the presence of adequate amounts of AT IIl will also result in a prolonged APTT WARNINGS AND PRECAUTIONS All wastes containing biological material should be properly labelled and stored separately from other wastes Dispose of all waste materials according to prescribed international national and local regulations The test should be used in conjunction with clinical observations and results of other laboratory tests COMPOSITION REF 5558 5 x 10ml APTT SiL Minus Reagent 5 x 10ml 25mM Calcium Chloride REF 5559 10 x 10ml APTT SiL Minus Reagent 10 x 10ml 25mM Calcium Chloride APTT SiL Minus reagent contains a near collodial particle activator magnesium aluminum silicate for optimum sensitivity to Factor deficiencies and to Heparin The Reagent also contains phospholipids with buffer and stabilizers Preparation for use Bring to room temperature prior to use Mix well by swirling or inversion prior to use STORAGE AND STABILITY Store at 2 8 C Do not freeze Stable for 30 days after opening Avoid prolonged heating I English SAMPLE COLLECTION AND PREPARATION A B l 2 gt Anticoagulant Use buffered sodium citrate 3 2 Specimen Collection Obtain venous blood by clean venipuncture Immediately mix nine parts blood with one part anticoagulant mix well by inversion of tube against the stopper Centrifuge the specimen at 1500 x g for no less than 15 minutes Remove plasma from the tube within
27. parina Existen ciertas variables que pueden afectar al comportamiento de las muestras de plasma heparinizadas cuando estas son evaluadas mediante el ensayo APTT A modo de guia cabe mencionar que cuando utilizando APTT SiL Minus en un instrumento foto ptico se a adieron cantidades crecientes de heparina a un plasma normal se obtuvieron los siguientes resultados Heparina Ul ml Tiempo de coagulaci n seg 0 29 9 0 2 70 0 0 4 174 24 APTT SiL Minus BIBLIOGRAFIA 2 3 Langdell R Wagner R Brinkhous K Effect of Antihemophilic Factor on One Stage Clotting Tests J Lab Clin Med 41 637 1953 Proctor R Rapaport S The Partial Thrombopastin Time with Kaolin Am J Clin Path 36 212 1961 Ratnoff O Crum S Activation of Hageman Factor by Solutions of Ellagic Acid J Lab Clin Med 63 359 1964 Hathaway W Clarke S Christian M Jacobson L Sensitivity of the Activated Partial Thromboplastin Time to Mild Factor Deficiencies in Standardization of Coagulation Assays An Overview College of American Pathologists Skokie IL pp 131 1982 Brandt J Triplett D Laboratory Monitoring of Heparin Effect of Reagents and Instruments in the Activated partial Thromboplastin Time Am J Clin Path 76 530 1981 CLSI Guidelines for the Standardized Collection Transport and Preparation of Blood Specimens for Coagulation Testing and Performance of Coagulation Assays
28. rachtet werden INHALT REF 5558 5 x 10ml APTT SiL Minus Reagenz 5 x 10ml 25mM Kalziumchlorid REF 5559 10 x 10ml APTT SiL Minus Reagenz 10 x 10ml 25mM Kalziumchlorid Das Reagenz APTT SiL Minus enth lt einen Aktivator aus nahezu kolloiden Partikeln Magnesium Aluminium Silikat mit dem eine optimale Sensitivit t gegen ber Faktor Mangelzust nden und Heparin erreicht wird Au erdem enth lt das Reagenz Phospholipid mit Puffer und Stabilisatoren Reagenzvorbereitung Bringen Sie es vor der Verwendung auf Raumtemperatur Vor dem Gebrauch gut mischen durch Verwirbeln oder Umdrehen LAGERUNG UND STABILIT T Bei 2 8 C lagern Nicht einfrieren Das Produkt ist nach dem Offnen 30 Tage lang stabil Vermeiden Sie lang andauerndes Erhitzen Il Deutsch PROBENENTNAHME UND VORBEREITUNG A B l 2 gt Antikoagulans Gepuffertes Natriumcitrat von 3 2 verwenden Probensammlung siehe z B die CLSI Richtlinien Literaturangabe 6 Entnehmen Sie unter sauberen Bedingungen ven ses Blut mittels Venenpunktur Versetzen Sie sofort neun Teile Blut mit einem Teil Antikoagulans und mischen Sie gut indem Sie das mit einem Stopfen versehene R hrchen umdrehen Zentrifugieren Sie die Probe mindestens 15 Minuten lang bei 1500 x g Entfernen Sie innerhalb von 60 Minuten das Plasma mit einer Kunststoffpipette aus dem R hrchen und bewahren Sie es in einem Kunststoffr hrchen auf Testen Sie die Plasmaprobe innerhalb von 4 Stunden fr
29. registrar los valores de los controles junto con los resultados de la muestra del paciente CONTROL DE CALIDAD Los controles normal y patol gico de coagulaci n de Helena deben ser analizados junto con las muestras problema Se recomienda utilizar al menos un control normal y un control patol gico en cada ciclo Cada laboratorio debera definir su propio intervalo de control para determinar la variacion aceptable de rendimiento de cada control en diferentes dias VALORES DE REFERENCIA El intervalo normal tipico cuando se utiliza APTT SiL Minus de Helena es de aproximadamente 30 40 segundos Sin embargo cada laboratorio debera definir su propio intervalo normal utilizando sus reactivos instrumentaci n y tecnicas habituales Este intervalo normal se definira utilizando sujetos representativos de la poblaci n analizada habitualmente en el laboratorio Debera determinarse un nuevo intervalo normal cada vez que se realice un cambio en la instrumentaci n las tecnicas de extracci n de sangre o los anticoagulantes o al comenzar a utilizar un nuevo lote de reactivo LIMITACIONES Es importante que las variaciones debidas a factores aparentemente no significativos sean minimas A Recogida de las muestras DEBERA EVITARSE El uso de vidrio Utilizar nicamente plastico Una tardanza en el mezclado de la sangre con el anticoagulante El uso de muestras hemolizadas o lipemicas La contaminaci n con tromboplastina tisular Una proporci
30. s jedoch seinen eigenen Normalbereich unter Ber cksichtigung der gew hnlich verwendeten Reagenzien Ger te und Techniken festlegen Der Normalbereich muss mit repr sentativen Proben der im Labor getesteten Population aufgestellt werden Bei jeder nderung der Apparatur der Probennahmetechniken des Antikoagulans und bei Wechsel zu einer neuen Reagenzcharge muss der Normalbereich neu festgelegt werden EINSCHR NKUNGEN Es muss sorgf ltig darauf geachtet werden Variationen durch scheinbar unwesentliche Faktoren zu minimieren A Probenentnahme VERMEIDEN SIE die Verwendung von Glas Verwenden Sie nur Kunststoff ein verz gertes Mischen des Blutes mit Antikoagulans H molyse oder lip mische Proben Verunreinigung mit Gewebethromboplastin ein unrichtiges Antikoagulans Blut Verh ltnis Qr de ei aiar Labortechniken F hren Sie die Tests bei 37 C durch Verwenden Sie nur hochreines Wasser Der optimale pH Wert betr gt 7 0 7 5 42 gt B 13 Deutsch LEISTUNGSEIGENSCHAFTEN Die folgenden Leistungseigenschaften wurden von Helena BioSciences oder in ihrem Auftrag als Richtlinien ermittelt Jede Labor muss seine eigenen Werte ermitteln Pr zisionstudien Ergebnisse wie unten gezeigt Innerhalb eines Laufs aPTT in Sekunden Pr zisionsstudien wurden im Doppelansatz mit Kontrollmaterial aus zwei unterschiedlichen Stufen auf dem Sysmex CAI 500 durchgef hrt Control Mean CV N Norm Trol I 33 0 36 10
31. tere l operazione Riportare il risultato del tempo APTT in secondi unitamente al range normale Utilizzare i plasma di controllo per accertare il corretto funzionamento delle variabili di test quali temperatura reagenti strumentazione pipette e cosi via Non amp consigliabile riportare i valori di controllo con i risultati del paziente CONTROLLO QUALIT plasma di controllo Helena per coagulazione normale e per coagulazione anormale devono essere testati unitamente ai campioni da paziente Si consiglia di eseguire un test di coagulazione normale e uno di coagulazione anormale ad ogni turno Ogni laboratorio deve definire un range di controllo che consenta di determinare le variazioni consentite quotidianamente per ciascun plasma di controllo VALORI DI RIFERIMENTO risultati normali standard ottenuti con il reagente Helena APTT SiL Minus sono compresi tra 30 e 40 secondi Tuttavia ogni laboratorio deve definire il proprio range normale utilizzando i reagenti la strumentazione e le tecniche comunemente in uso Per la definizione del range normale opportuno utilizzare individui rappresentativi della popolazione da testare nell ambito del laboratorio quindi necessario definire un nuovo range normale in caso di qualsiasi variazione nella strumentazione nelle tecniche di raccolta del sangue nell anticoagulante e quando si utilizza un nuovo lotto di reagenti LIMITAZIONI Cercare per quanto possibile di ridurre al minimo le
32. trando risultati di test prolungati a circa 0 1 unit ml e oltre Il test viene impiegato anche nella determinazione quantitativa analisi dei fattori dei fattori VIII IX XI XII Il test APTT misura il tempo di coagulazione del plasma di test Dopo l attivazione iniziale del reagente APTT con il plasma di test viene aggiunto calcio cloruro e viene misurato il tempo di coagulazione in secondi deficit di entit pari a circa il 4096 o meno dei fattori VIII IX XI e XII verranno evidenziati in un risultato di test APTT prolungato cosi come l eparina in presenza di quantit adeguate di AT III AVVERTENZE E PRECAUZIONI Tutti i rifiuti contenenti materiale biologico devono essere adeguatamente etichettati e conservati separatamente dagli altri rifiuti Smaltire tutti i rifiuti secondo le norme internazionali nazionali e locali Il test deve essere utilizzato in abbinamento alle osservazioni cliniche ed ai risultati di altri test di laboratorio COMPOSIZIONE REF 5558 5 x 10ml APTT SiL Minus Reagent 5 x 10ml 25mM calcio cloruro REF 5559 10 x 10ml APTT SiL Minus Reagent 10 x 10ml 25mM calcio cloruro Il reagente APTT SiL Minus contiene un attivatore di particelle paracolloidale silicato di magnesio ed alluminio per una maggior sensibilit nei confronti di deficit di fattori e dell eparina Il reagente contiene inoltre un fosfolipide con tampone e stabilizzatori Preparazione del reagente Prima dell uso portare a temperatura am
33. ume d anticoagulant m langez bien en renversant le tube sur le bouchon 3 Centrifugez le sp cimen 1500 x g pendant au moins 15 minutes 4 Retirez le plasma du tube dans les 60 minutes en utilisant une pipette en plastique et conservez le dans un tube en plastique 5 Testez les chantillons dans les 4 heures ou congelez les 20 C pendant un maximum de deux semaines ou 70 C pendant un maximum de six mois decongelez une seule fois juste avant utilisation M THODOLOGIE A Mat riaux fournis APTT SiL Minus liquide 2 Chlorure de calcium a 0 025 M B Materiaux requis Un dispositif de d tection manuelle m canique ou photo optique des caillots 2 Coagulometre adapte 3 Parafilm ou equivalent 4 Pipette de pr cision 0 1 ml 5 Plasmas de contr le C Ex cution du test L utilisation des tests APTT SiL Minus doit tre adapt e pour ex cuter les analyses APTT selon que les dispositifs de d tection de caillots sont manuels ou automatiques Voir les instructions du fabricant du dispositif utilis pour les d tails OUT D Pr chauffez le m lange d APTT SiL Minus et de chlorure de calcium 0 025 M 37 C Pr chauffez 0 1 ml de plasma analyser en dosage double 37 C pendant 2 minutes Ajoutez nergiquement 0 1 ml d APTT SiL Minus pr chauff au plasma et lancez le coagulom tre Laissez incuber pendant 5 minutes exactement 37 C Ajoutez 0 1 ml de chlorure de calcium a 0 025
34. y el cloruro c lcico 0 025 M bien mezclados Precalentar 0 1 ml de plasma problema por duplicado a 37 C durante 2 minutos A adir 0 1 ml de APTT SiL Minus precalentado al plasma y activar el temporizador Incubar durante exactamente 5 minutos a 37 C A adir 0 1 ml de cloruro c lcico 0 025 M precalentado Anotar el momento de la formaci n del co gulo Registrar el resultado como tiempo APTT en segundos D gui ch T D M todos automatizados AC 4 5558 x1000 muestras 5559 x2000 muestras Cons ltese el Manual del Operador del AC 4 adecuado para instrucciones detalladas Preparar todos los reactivos como se indica en composici n 22 START 17s METHOD Coag MIX 0 PATIENT Pat Def Plasma DP vol 50uL Vol 0uL pos 35 CP INCUB 300s MATH lin CLEAN 0 BUFFER BUF RIVol 50uL Vol 0uL Pos 31 RUNTIME 180s SENS I T CORR 0 CLEAR CLR R2Vol 50uL S CORR 0 Vol 0uL Pos 26 APTT SiL Minus INTERPRETACION DE RESULTADOS Calcular el tiempo medio de coagulaci n de las determinaciones realizadas por duplicado para cada plasma problema y los plasmas de control La diferencia entre las determinaciones duplicadas no debe ser superior al 5 repetir en caso necesario Registrar el tiempo APTT en segundos junto con el intervalo normal Deben utilizarse los plasmas de control para comprobar que las variables del ensayo temperatura reactivos instrumentaci n pipetas etc son correctas No se recomienda
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