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BACTEC MGIT 960-PZA-Kit - I-PAQT

1. 0 0 4 5 6 8 9 10 11 12 14 15 16 17 18 19 21 gt 21 E Number of PZA Sets Interpreted by TIP 1 30 55 40 19 12 5 6 2 0 1 1 D 0 0 0 4 Cumulative Interpreted 4 13 5 37 6 79 0 87 3 92 6 94 8 97 4 99 1 99 1 99 6 100 100 100 100 100 TIP in Days Figure 1 Distribution of BACTEC MGIT 960 PZA AST Time to Result Figure 1 Distribution du temps dans le r sultat BACTEC MGIT 960 AST PZA Abbildung 1 Verteilung der BACTEC MGIT 960 PZA AST Testdauer bis zum Erhalt eines Ergebnisses Figura 1 Distribuzione del tempo per ottenere il risultato con il BACTEC MGIT 960 PZA AST Figura 1 Distribuci n del tiempo transcurrido hasta la obtenci n del resultado con el sistema de AST BACTEC MGIT 960 PZA Frequency Distribution of PZA Time in Protocol TIP Distribution de fr quence du temps PZA dans le protocole TDP H ufigkeitsverteilung der PZA Testdauer im Protokoll TDP Frequenza di distribuzione della durata del protocollo PZA TIP Distribuci n de frecuencias del tiempo de an lisis TA de PZA Number Interpreted by TIP Nombre interpr t par TDP Anzahl der Interpretationen nach TDP Numero interpretato mediante TIP N mero interpretado por TA Cumulative Interpreted by TIP cumulatif interpr t par TDP Kumulativer Prozentsatz der Interpretationen nach TDP cumulativa interpretata mediante TIP Porcentaje acumulado interpretad
2. Test d isolats cliniques Au total 118 isolats cliniques de M tuberculosis ont t test s avec le test de sensibilit BACTEC MGIT 960 PZA et le test de sensibilite BACTEC MGIT 460TB PZA Les tests incluaient des chantillons cliniques frais et des isolats repiqu s provenant de cultures en milieux liquides et solides Deux cent vingt huit r sultats de test ont t obtenus au total Le tableau 1 pr sente les r sultats des tests effectu s avec l antibiotique PZA a 100 ug mL sur des isolats cliniques provenant de cultures source liquides de cultures source solides et des deux cultures sources combin es Tableau 1 R sultats des isolats cliniques Test de sensibilit BACTEC MGIT 960 PZA compar au test de sensibilit BACTEC 460TB Systeme BACTEC 460TB Systeme BACTEC MGIT 960 R sultats PZA attendus R sultats de sensibilit R sultats de r sistance concordant concordant Source Nb de tests Concordants par cat gorie Concordants par cat gorie IC a 95 IC 95 LIQUIDE 112 98 9 95 7 93 9 100 78 1 99 9 SOLIDE 113 97 8 87 0 92 2 99 7 66 4 97 2 TOUS 225 98 3 91 3 95 2 99 7 79 2 97 6 Trois r sultats BACTEC 460TB limites n ont pas t repris dans ce tableau Tous les isolats aux r sultats du test BACTEC MGIT 960 PZA discordants ont t test s en utilisant le test de sensibilit BACTEC 460TB PZA dans deux centres ind pendants Les r sultats discordants correspondaient au
3. De las cuatro cepas aisladas sensibles a PZA con resultados discordantes S BACTEC MGIT 960 R BACTEC 460TB una tuvo un resultado de sensibilidad en ambos centros independientes y las otras tres tuvieron resultados de resistencia en ambos centros Las tres cepas resistentes a PZA con resultados discordantes R BACTEC MGIT 960 S BACTEC 460TB tuvieron resultados de sensibilidad en ambos centros independientes Dos de las tres cepas con resultados de PZA inciertos en el an lisis BACTEC 460TB S BACTEC MGIT 960 B BACTEC 460TB tuvieron resultados de sensibilidad en ambos centros independientes Una de las tres cepas con resultados de PZA inciertos en el an lisis BACTEC 460TB R BACTEC MGIT 960 B BACTEC 460TB tuvo un resultado de sensibilidad en uno de los centros independientes El resultado en el otro centro independiente fue incierto PRESENTACI N N ref Descripci n 245128 Kit BACTEC MGIT 960 PZA caja con 2 frascos de antibi tico liofilizado y 6 frascos de suplemento PZA 245115 Medio BACTEC MGIT 960 PZA caja de 25 tubos REFERENCIAS V ase la secci n References en el texto ingl s 25 1005486 0604 qxd 08 13 2004 2 37 PM Pag 6 Frequency Distribution of PZA Time in Protocol TIP 60 0007 100 0 90 0 a 50 0 E 80 0 gt gt D 2 70 0 Y y 40 H 0 g 60 0 a a g 5 30 50 0 E x 40 0 2 20 2 30 0 5 de 3 z io 7 200 E i I 10 0
4. El segundo m todo conocido como m todo de sensibilidad radiom trica BACTEC 460TB se basa en la producci n de di xido de carbono marcado con 14C radiactivo por la micobacteria en crecimiento que se manifiesta por un aumento del ndice de crecimiento en el sistema Se desarroll una modificaci n del m todo de sensibilidad BACTEC 460TB utilizando un medio radiom trico 7H12 modificado el medio para an lisis de PZA BACTEC con un pH bajo de 6 06 A este pH la actividad de la PZA frente a la micobacteria puede determinarse sin inhibici n del crecimiento de la mayor a de las cepas aisladas de M tuberculosis El an lisis de sensibilidad BACTEC 460TB PZA utiliza una concentraci n del antibi tico pirazinamida de 100 pg mL El an lisis de sensibilidad en el sistema BACTEC 460TB ha demostrado ser satisfactorio y actualmente se considera el m todo de referencia para el an lisis de sensibilidad a PZA El Comit Nacional para los Est ndares Cl nicos de Laboratorio NCCLS National Committee for Clinical Laboratory Standards recomienda el m todo BACTEC 460TB para el an lisis de sensibilidad a PZA2 El uso del sistema BACTEC MGIT 960 en combinaci n con el kit BACTEC MGIT 960 PZA es un m todo no radiom trico para la determinaci n de la sensibilidad antimicobacteriana a PZA El kit BACTEC MGIT 960 PZA se ha desarrollado para permitir la realizaci n del an lisis de sensibilidad a una concentraci n de pirazinamida de 100 ug mL Esta concentrac
5. Bei der ersten Methode der sogenannten Proportionsmethode2 wird Middlebrook und Cohn 7H10 Agar verwendet Dabei werden Koloniezahlen auf Medien mit und ohne Arzneimittel verglichen Zur Durchf hrung von Pyrazinamid Empfindlichkeitspr fungen m ssen die herk mmlichen Methoden modifiziert werden da dieses Arzneimittel in vitro nur bei niedrigen pH Werten wirksam ist 3 Die Proportionsmethode wurde dahingehend modifiziert da ein 7H10 Agarmedium mit einem pH Wert von 5 5 und eine Arzneimittelkonzentration von 25 50 ug mL verwendet wurde 2 Eine Einschr nkung dieser Methode ist jedoch der Umstand da viele M tuberculosis Isolate bei einem pH Wert von 5 5 entweder nur schlecht oder berhaupt nicht wachsen Methoden auf Agarbasis wie die Agar Proportionsmethode haben sich f r die PZA Empfindlichkeitspr fung als nicht zufriedenstellend erwiesen da viele Isolate nicht wachsen wenn der Agar f r den PZA Test anges uert wurde Die zweite als BACTEC 460TB Radiometrie Empfindlichkeitsmethode bekannte Methode beruht auf der durch das Mykobakterienwachstum bedingten Produktion von radioaktiv markiertem Kohlendioxid C14 was durch die Zunahme des Wachstumsindex im System angezeigt wird Es wurde eine modifizierte BACTEC 460TB Empfindlichkeitsmethode entwickelt die mit einem modifizierten radiometrischen 7H12 Medium dem BACTEC PZA Testmedium und einem reduzierten pH Wert von 6 0 funktioniert Bei diesem pH Wert ist eine Bestimmung der PZA Aktivit
6. MGIT 960 PZA 17 1005486 0604 qxd 08 13 2004 2 37 PM Pag 8 1 Etichettare due provette di terreno BACTEC MGIT 960 PZA da 7 mL per ogni isolato da testare Contrassegnarne una come GC Growth Control o Controllo di crescita e una come PZA Disporre le provette secondo la sequenza corretta nel carrello per set AST per due provette vedi il Manuale d uso del BACTEC MGIT 960 Istruzioni AST 2 In ogni provetta dispensare in asepsi 0 8 mL di supplemento BACTEC MGIT 960 PZA 3 Con una micropipetta dispensare in asepsi 100 uL della soluzione 8000 ug mL di farmaco BACTEC MGIT 960 PZA nella provetta MGIT con l etichetta appropriata Non aggiungere la soluzione di PZA nella provetta MGIT GC debitamente etichettata Concentrazione del Volume dispensato Concentrazione Farmaco farmaco dopo la nelle provette MGIT finale nelle provette ricostituzione per il test MIGT MGIT PZA 8000 ug mL 100 uL 100 ug mL Per ottenere la concentrazione indicata ricostituire la PZA con 2 5 mL di acqua sterile deionizzata 4 Preparazione ed inoculazione della provetta del Controllo di crescita Per preparare la sospensione 1 10 del Controllo di crescita pipettare in asepsi 0 5 mL di inoculo AST vedi Preparazione dei campioni in 4 5 mL di soluzione fisiologica sterile Mescolare accuratamente la sospensione di Controllo di crescita Inoculare 0 5 mL della sospensione 1 10 di Controllo di crescita in una provetta MGIT con etichetta GC NOTA
7. inoculaci n para el an lisis de sensibilidad BACTEC MGIT 960 PZA Preparaci n a partir de un tubo BACTEC MGIT positivo 1 El primer d a en que el instrumento registra un resultado positivo para un tubo MGIT se considera el d a 0 2 Para la preparaci n del in culo de an lisis debe usarse un tubo MGIT de 7 mL positivo el d a despu s de que el instrumento BACTEC MGIT 960 registre por primera vez un resultado positivo d a 1 hasta el quinto d a inclusive d a 5 despu s de que el instrumento registre el resultado positivo Si un tubo ha permanecido positivo m s de cinco d as debe hacerse un subcultivo en un nuevo tubo MGIT de 7 mL que contenga suplemento para crecimiento BACTEC MGIT 960 analizarlo en el instrumento BACTEC MGIT 960 hasta que muestre positividad y utilizarlo de uno a cinco d as despu s de mostrar positividad 3 Si el tubo es positivo los d as 1 6 2 no se requiere diluci n Utilizar la soluci n resultante como in culo para AST y pasar al Procedimiento de inoculaci n para el an lisis de sensibilidad BACTEC MGIT 960 PZA 4 Si el tubo es positivo los d as 3 4 5 diluir 1 mL del caldo positivo en 4 mL de soluci n salina est ril diluci n de 1 5 Utilizar la soluci n resultante como in culo para AST y pasar al Procedimiento de inoculaci n para el an lisis de sensibilidad BACTEC MGIT 960 PZA PROCEDIMIENTO Materiales suministrados kit BACTEC MGIT 960 PZA que contiene dos frascos de a
8. le dosi occorre consultare uno specialista di malattie polmonari e o infettive esperto di tubercolosi La monoresistenza alla pirazinamide poco comune e quindi nel caso di risultati imprevisti di resistenza verificare che l identificazione dell isolato testato corrisponda a M tuberculosis Le direttive per le verifiche della purezza micobatterica sono reperibili nello standard NCCLS M24 7 18 1005486 0604 qxd 08 13 2004 2 37 PM Pag 9 Compilazione dei rapporti dei risultati del BACTEC MGIT 960 PZA Farmaco Risultati BACTEC concentrazione MGIT 960 Rapporto consigliato Intervento L isolato stato testato con Nessun intervento Suscettibile PZA 100 ug mL BACTEC MGIT 960 ed e risultato suscettibile L isolato stato testato con Se l isolato PZA 100 ug mL Resistente PZA 100 ug mL BACTEC MGIT 960 monoresistente alla ed risultato resistente PZA confermare che l isolato analizzato sia Una coltura pura di Mycobacterium tuberculosis Errore X Nessun rapporto Ripetere il test LIMITAZIONI DELLA PROCEDURA Il test di suscettibilit BACTEC MGIT 960 PZA non interpreta il grado di suscettibilit dell isolato analizzato risultati vengono riportati come suscettibile o resistente Il test di suscettibilit BACTEC MGIT 960 PZA pu essere eseguito solo con lo strumento BACTEC MGIT 960 Non possibile leggere manualmente i set PZA Usare solo colture pure di M tuberculosis in quanto le colture con
9. nglich ist nur eine geringe Fluoreszenz nachweisbar da der gel ste Sauerstoff die Emissionen der Verbindung absorbiert Sp ter nehmen die aktiv wachsenden und respirierenden Mikroorganismen den Sauerstoff auf und erm glichen das Fluoreszieren der Verbindung Das BACTEC MGIT 960 PZA Testkit ist ein qualitativer Test der 4 21 Tage dauert Der Test basiert auf dem Vergleich des Wachstums eines M tuberculosis Isolats in einem arzneimittelhaltigen R hrchen gegen ber einem arzneimittelfreien R hrchen Wachstumskontrolle Das BACTEC MGIT 960 Ger t kontrolliert die R hrchen st ndig im Hinblick auf zunehmende Fluoreszenz Die Empfindlichkeit wird vom Ger t anhand einer Analyse der Fluoreszenz des arzneimittelhaltigen R hrchens im Vergleich zur Fluoreszenz des Wachstumskontrollr hrchens bestimmt Das BACTEC MGIT 960 Ger t interpretiert diese Ergebnisse automatisch und gibt das Testergebnis empfindlich oder resistent aus REAGENZIEN Das BACTEC MGIT 960 PZA Mediumr hrchen enth lt 110 uL Fluoreszenz Indikator und 7 mL PZA Bouillon Der Indikator enth lt Tris 4 7 diphenyl 1 10 phenanthrolin rutheniumchlorid pentahydrat in einer Silikonkautschukbasis Die R hrchen sind mit einer Polypropylenkappe verschlossen Der pH Wert ist auf 5 9 eingestellt Ungef hre Zusammensetzung pro Liter destillierten Wassers Modifizierte Middlebrook 7H9 Bouillon 5 9 g Caseinpepton 1 259 Das BACTEC MGIT 960
10. non validi o non accurati Il caricamento sbagliato del set AST nello strumento pu dar luogo ad una condizione sconosciuta che deve essere risolta entro otto ore Se la condizione non viene risolta entro otto ore il set AST deve essere scartato e predisposto nuovamente Il mancato impiego del supplemento BACTEC MGIT 960 PZA nel set AST PZA pu dar luogo ad artefatti NON aggiungere il supplemento BACTEC MGIT 960 SIRE o il supplemento di crescita BACTEC MGIT 960 nel set AST PZA Il mancato impiego del terreno BACTEC MGIT 960 PZA nel set AST PZA pu dar luogo ad artefatti NON sostituire il terreno BACTEC MGIT 960 PZA con le provette di indicatore di crescita dei micobatteri BBL MGIT da 7 mL VALORI ATTESI Con il test di suscettibilit BACTEC MGIT 960 PZA sono stati analizzati in tutto 118 isolati clinici di M tuberculosis presso quattro centri in diverse aree geografiche Nell analisi sono stati inclusi isolati clinici freschi e isolati di subcolture da terreni di coltura liquidi e solidi Sono stati eseguiti in tutto 228 test di suscettibilit alla PZA su terreno liquido e solido Durante la valutazione esterna del kit BACTEC MGIT 960 PZA stato necessario ripetere la prova per nove test PZA da isolati clinici a causa di contaminazione sei isolati o di eccessiva inoculazione errori di procedura tre isolati Il tempo medio complessivo per raggiungere i risultati del test di suscettibilit BACTEC MGIT 960 PZA di sette giorni con
11. operatore Per ogni nuova partita o nuovo numero di lotto di flaconi del kit BACTEC MGIT 960 PZA o di terreno BACTEC MGIT 960 PZA si raccomanda di testare l organismo di controllo indicato di seguito L organismo di controllo deve provenire da una coltura pura preparata secondo le istruzioni contenute in PREPARAZIONE DEI CAMPIONI Il set AST per il controllo di qualit CQ deve essere preparato in osservanza delle istruzioni contenute in Procedura di inoculazione per il test di suscettibilit BACTEC MGIT 960 PZA Durante la preparazione del set AST CQ importante accertare la corretta ricostituzione del farmaco liofilizzato l uso di coltura pura e la corretta diluizione dell organismo di Controllo di qualit sia per il Controllo di crescita che per le provette PZA importante dispensare il farmaco solo nella provetta MGIT corrispondente con etichetta PZA Lo stesso organismo di controllo deve essere testato come controllo di qualit in batch una volta alla settimana quando si esegue il test di sensibilit Se entro 4 20 giorni si ottengono risultati conformi a quelli della tabella seguente i reagenti BACTEC MGIT 960 PZA sono pronti per il test degli isolati di pazienti Se non si ottengono i risultati appropriati non riportare i risultati dei pazienti Ripetere il controllo di qualit per gli isolati di pazienti associati al fallimento iniziale del controllo di qualit Se la replica del controllo di qualit non fornis
12. osservati sono stati confrontati con i risultati attesi La riproducibilit complessiva del test di suscettibilit BACTEC MGIT 960 PZA del 96 8 19 1005486 0604 qxd 08 13 2004 2 37 PM Pag 0 Valutazione con pannello di provocazione CDC Le prestazioni del test di suscettibilita BACTEC MGIT 960 PZA sono state valutate utilizzando un pannello di ceppi di provocazione ottenuto dai Centers for Disease Control and Prevention CDC Atlanta GA USA Il pannello era costituito da nove ceppi di M tuberculosis con pattern di suscettibilit accertati con il BACTEC 460TB Il pannello stato testato in triplicato con il test di suscettibilit BACTEC MGIT 960 PZA risultati dei test BACTEC MGIT 960 PZA sono stati confrontati con i risultati attesi dei CDC La concordanza complessiva con i risultati attesi dei CDC per il test di suscettibilit BACTEC MGIT 960 PZA del 98 7 Valutazione clinica Il test di suscettibilit BACTEC MGIT 960 PZA stato valutato presso quattro centri in diverse aree geografiche tra cui centri regionali di riferimento laboratori di ospedali universitari inclusi due centri fuori dagli USA Il test di suscettibilit BACTEC MGIT 960 PZA stato confrontato con il test di suscettibilit eseguito con il metodo BACTEC 460TB PZA Riproducibilit del test La riproducibilit del test di suscettibilit BACTEC MGIT 960 PZA stata valutata presso i centri clinici utilizzando un pannello di cinque isolati qualifi
13. positive then dilute 1 mL of the positive broth in 4 mL of sterile saline 1 5 dilution Use this as the AST inoculum and proceed to Inoculation Procedure for BACTEC MGIT 960 PZA Susceptibility Test PROCEDURE Materials Provided BACTEC MGIT 960 PZA Kit containing two vials each lyophilized drug and six vials of PZA Supplement approximately 50 tests per kit Materials Required But Not Provided BACTEC MGIT 960 PZA Medium 25 tubes per carton ancillary culture media reagents quality control organisms and laboratory equipment as required for this procedure Inoculation Procedure for BACTEC MGIT 960 PZA Susceptibility Test Important considerations when preparing the PZA AST Set are the proper reconstitution of the lyophilized drug use of pure culture and the proper dilution of the organism for the Growth Control and PZA tube It is important to add drug only to the corresponding MGIT tube labeled PZA Use only the BACTEC MGIT 960 PZA Supplement supplied with the kit and BACTEC MGIT 960 PZA Medium tubes when performing the PZA AST set 1 Label two 7 mL BACTEC MGIT 960 PZA Medium tubes for each test isolate Label one as GC Growth Control one as PZA Place the tubes in the correct sequence in the two tube AST set carrier see BACTEC MGIT 960 User s Manual AST Instructions 2 1005486 0604 qxd 08 13 2004 2 37 PM Pag 2 Aseptically add 0 8 mL of BACTEC MGIT 960 PZA Supplement to each tube 3 Using a micropipet asepti
14. resultados no v lidos o inexactos Si no se carga correctamente el conjunto de AST en el instrumento se originar una situaci n de identificaci n an nima que deber resolverse en el plazo de ocho horas Si la situaci n no se resuelve en ese per odo de tiempo debe desecharse el conjunto de AST y comenzar de nuevo el procedimiento Si no se utiliza el suplemento BACTEC MGIT 960 PZA en el conjunto de AST para PZA pueden obtenerse resultados inexactos NO debe agregarse suplemento BACTEC MGIT 960 SIRE ni suplemento de crecimiento BACTEC MGIT 960 al conjunto de AST para PZA Si no se utiliza el medio BACTEC MGIT 960 PZA para el conjunto de AST para PZA pueden obtenerse resultados inexactos NO debe sustituirse el medio BACTEC MGIT 960 PZA por tubos indicadores de crecimiento micobacteriano BBL MGIT de 7 ml VALORES PREVISTOS Se analiz un total de 118 cepas cl nicas de M tuberculosis con el an lisis de sensibilidad BACTEC MGIT 960 PZA en cuatro centros de distinta localizaci n geogr fica El an lisis incluy cepas aisladas subcultivadas y cepas cl nicas reci n aisladas a partir de cultivos l quidos y s lidos Se realiz un total de 228 an lisis de sensibilidad a PZA cultivos l quidos y s lidos Durante la evaluaci n externa del kit BACTEC MGIT 960 PZA fue necesario repetir nueve an lisis de PZA de cepas cl nicas debido a contaminaci n seis cepas aisladas o a inoculaci n excesiva o errores en el procedimiento tres cep
15. t gegen Mykobakterien ohne Wachstumshemmung der meisten M tuberculosis Isolate m glich Der BACTEC 460TB PZA Empfindlichkeitstest verwendet eine Pyrazinamid Medikamenten konzentration von 100 ug mL Die Empfindlichkeitspr fung mit dem BACTEC 460TB System hat sich als zufriedenstellend erwiesen und gilt derzeit als Referenzmethode f r PZA Empfindlichkeitspr fungen Der US amerikanische Normenausschu f r klinische Labors NCCLS National Committee for Clinical Laboratory Standards empfiehlt die BACTEC 460TB Methode f r PZA Empfindlichkeitspr fungen Der Einsatz des BACTEC MGIT 960 Systems in Verbindung mit dem BACTEC MGIT 960 PZA Kit stellt eine nicht radiometrische Methode der Bestimmung der antimykobakteriellen Empfindlichkeit im Hinblick auf PZA dar Das BACTEC MGIT 960 PZA Kit erm glicht Empfindlichkeitspr fungen bei Pyrazinamid Konzentrationen von 100 pg mL Dieser Konzentrationswert korreliert mit der am BACTEC 460TB System verwendeten Konzentration VERFAHRENSGRUNDLAGEN Das BACTEC MGIT 960 PZA Medium ist ein R hrchen das eine modifizierte Middlebrook 7H9 Bouillon enth lt die das Wachstum und den Nachweis von Mykobakterien bei einem reduzierten pH Wert von 5 9 unterst tzt Das BACTEC MGIT 960 PZA Medienr hrchen ist ein 16x100 mm R hrchen in dessen rundem Boden eine fluoreszierende Verbindung in Silikon eingebettet ist Diese fluoreszierende Verbindung spricht auf das Vorliegen von in der Bouillon gel stem Sauerstoff an Anf
16. vials On receipt store the lyophilized drug vials at 2 8 C Once reconstituted the antibiotic solution may be frozen and stored at 20 C or colder up to six months not to exceed the original expiration date Once thawed use immediately Discard unused portions BACTEC MGIT 960 PZA Supplement On receipt store in the dark at 2 8 C Avoid freezing or overheating Open and use prior to the expiration date Minimize exposure to light Directions For Use Reconstitute each BACTEC MGIT 960 PZA lyophilized drug vial with 2 5 mL of sterile distilled deionized water to make a stock solution of 8000 ug mL WARNINGS AND PRECAUTIONS For in vitro Diagnostic Use POTENTIALLY INFECTIOUS TEST SPECIMEN Pathogenic microorganisms including hepatitis viruses and Human Immunodeficiency Virus may be present in clinical specimens Standard Precautions 7 1 and institutional guidelines should be followed in handling all items contaminated with blood and other body fluids Working with M tuberculosis growth in culture requires Biosafety Level BSL 3 practices containment equipment and facilities Read and follow directions contained in all appropriate package inserts including the BBLTM MGIT 7 mL Mycobacteria Growth Indicator Tube Prior to use the user should examine the tubes and vials for evidence of contamination or damage Discard any tubes or vials if they appear unsuitable Dropped tubes should be examined carefully If dama
17. 10 correctement pr par e pour le tube GC afin d assurer des r sultats AST pr cis et d viter les erreurs de module AST PZA 5 Ensemencement d un tube contenant un antibiotique Pipeter de mani re aseptique 0 5 mL d incolum AST cf PR PARATION DE L ECHANTILLON dans le tube MGIT identifi PZA 6 Bien reboucher les tubes M langer soigneusement en renversant d licatement les tubes trois ou quatre fois 7 Entrer le module PZA dans l automate BACTEC MGIT 960 au moyen de la fonction de chargement du module AST se reporter aux instructions AST du manuel d utilisation BACTEC MGIT 960 S assurer que le tube Contr le de croissance se trouve dans le premier emplacement de tube gauche S lectionner l antibiotique PZA pour la d finition du support de portoir AST deux tubes lors du chargement du module AST 8 Inoculer 0 1 mL de la suspension de microorganisme sur une bo te de p tri de g lose Trypticase soja avec 5 de sang de mouton TSA Il Enfermer dans un sac plastique Incuber entre 35 et 37 C 9 Rechercher la pr sence de contamination bact rienne sur la g lose au sang au bout de 48 heures Si la g lose au sang ne pr sente aucune trace de d veloppement bact rien laisser le test PZA se poursuivre Si la g lose au sang pr sente un d veloppement bact rien jeter le module PZA se reporter aux instructions AST du manuel d utilisation BACTEC MGIT 960 et r p ter le test avec une culture pure de Mycob
18. 27294 Durante la evaluaci n externa del kit BACTEC MGIT 960 PZA el tiempo medio hasta el resultado para el microorganismo de control fue de siete d as con un intervalo de cuatro a once d as Las causas m s frecuentes de fallo del control de calidad durante la evaluaci n externa fue una inoculaci n excesiva de los conjuntos para PZA y la contaminaci n de los cultivos de control de calidad RESULTADOS El instrumento BACTEC MGIT 960 controlar los conjuntos de AST hasta que se obtenga una determinaci n de resistencia o sensibilidad Una vez finalizado el an lisis del conjunto el instrumento BACTEC MGIT 960 genera un informe de los resultados v ase el Manual del usuario del sistema BACTEC MGIT 960 Instrucciones para AST El instrumento BACTEC MGIT 960 informar el resultado de un conjunto de AST como Error X sin interpretaci n de la sensibilidad en ciertas situaciones que podr an influir en los resultados del an lisis Las situaciones que podr an dar lugar a un resultado de Error X se describen en el Manual del usuario del sistema BACTEC MGIT 960 Instrucciones para AST secci n 6 Resoluci n de problemas Es importante incluir el m todo de an lisis y el nombre y la concentraci n del antibi tico en el informe de los resultados Debe consultarse al especialista de Neumolog a o Enfermedades Infecciosas especializado en el control de la tuberculosis con respecto al tratamiento y la posolog a apropiados Es infrecuente la
19. A MM DD AAAA MM MM slutning af m ned JJJJ MM DD JJJJ MM MM einde maand AAAA KK PP AAAA KK KK kuu l pp VVVV KK PP VVVV KK kuukauden loppuun menness AAAA MM JJ AAAA MM MM fin du mois JJJJ MM TT JJJJ MM MM Monatsende EEEE MM HH EEEE MM MM t Xog Tou priva EEEE HH NN EEEE HH HH h nap utols napja AAAA MM GG AAAA MM MM fine mese MMMM MM DD MMMM MM MM m nesio pabaiga AAAA MM DD AAAA MM MM slutten av m neden RRRR MM DD RRRR MM MM koniec miesiaca AAAA MM DD AAAA MM MM fim do m s RRRR MM DD RRRR MM MM koniec mesiaca aaaa mm dd aaaa mm mm fin del mes AAAA MM DD AAAA MM MM slutet p m naden Catalog number Katalogov slo Katalognummer Catalogusnummer Kataloogi number Tuotenumero Num ro catalogue Bestellnummer Api8i s katad you Katal gussz m Numero di catalogo Katalogo numeris Numer katalogowy N mero do cat logo Katal gov slo N mero de cat logo Authorized Representative in the European Community Autorizovany z stupce pro Evropskou unii Autoriseret repraesentant i EU Erkend vertegenwoordiger in de Europese Unie Volitatud esindaja Euroopa N ukogus Valtuutettu edustaja Euroopan yhteis ss Repr sentant agree pour la C E E Autorisierte EG Vertretung EEouoiodotnu voc avninp ounoc omv Euportaiky Kow tnta Hivatalos k pviselet az Eur pai Uni ban Rappresentante a
20. AUTIONS R serv au diagnostic in vitro CHANTILLON CLINIQUE POTENTIELLEMENT INFECTIEUX Des microorganismes pathog nes notamment les virus de l h patite et de l immunod ficience humaine sont susceptibles d tre pr sents dans les chantillons cliniques Respecter les Pr cautions standard 7 1 et les consignes en vigueur dans l tablissement pour manipuler tout objet contamin avec du sang ou d autres liquides organiques La manipulation de M tuberculosis en culture n cessite des pratiques de s curit biologique de niveau 3 BSL ainsi que les appareils et installations de confinement correspondants Lire et suivre les instructions contenues dans toutes les notices d emploi concern es y compris la notice des tubes avec indicateur de croissance mycobact rienne BBL MGIT 7 mL Avant utilisation il convient d examiner les tubes et les flacons pour verifier l absence de contamination ou de d t rioration Jeter tout tube ou flacon apparaissant suspect Examiner avec soin les tubes tomb s 4 terre Eliminer les tubes visiblement endommag s En cas de bris de tube 1 Fermer les tiroirs de l automate 2 Eteindre l automate 3 Evacuer les lieux immediatement 4 Se reporter aux directives de l tablissement du centre pid miologique CDC Un tube ensemenc bris ou pr sentant une fuite peut produire un a rosol de mycobact ries manipuler imp rativement le tube comme il convient St riliser a l autoclav
21. BACTECTM 460TB System Product and Procedure Manual 6 Salfinger M et al 1989 Rapid radiometric method for pyrazinamide susceptibility testing of Mycobacterium tuberculosis Res Microbiol 740 301 309 7 National Committee for Clinical Laboratory Standards 2002 Approved Guideline M29 A2 Protection of laboratory workers from occupationally acquired infections NCCLS Wayne PA 8 Garner J S 1996 Hospital Infection Control Practices Advisory Committee U S Department of Health and Human Services Centers for Disease Control and Prevention Guideline for isolation precautions in hospitals Infect Control Hospital Epidemiol 17 53 80 9 U S Department of Health and Human Services 1999 Biosafety in microbiological and biomedical laboratories HHS Publication CDC 4th ed U S Government Printing Office Washington D C 10 Directive 2000 54 EC of the European Parliament and of the Council of 18 September 2000 on the protection of workers from risks related to exposure to biological agents at work seventh individual directive within the meaning of Article 16 1 of Directive 89 391 EEC Official Journal L262 17 10 2000 p 0021 0045 1005486 0604 qxd 08 13 2004 2 37 PM Pag BD Trousse BACTEC MGIT 960 PZA Pour le test de sensibilit de Mycobacterium tuberculosis aux antimycobact riens FRAN AIS APPLICATION La trousse BACTEC MGIT 960 PZA est un test de sensibilit qualitatif rapide de Mycobacterium tuberculosis en cul
22. CTEC MGIT 960 PZA 7 mL pour chaque isolat a tester Etiqueter l un des tubes GC Contr le de croissance et l autre tube PZA Placer les tubes dans l ordre appropri dans le support de portoir AST a deux tubes se reporter aux instructions AST du manuel d utilisation BACTEC MGIT 960 2 Ajouter st rilement 0 8 mL de suppl ment BACTEC MGIT 960 PZA a chaque tube 3 A l aide d une micropipette pipeter de mani re aseptique 100 pL de la solution antimycobact rienne de BACTEC MGIT 960 PZA 8000 pg mL vers le tube MGIT PZA correctement identifi Aucune solution antimycobact rienne ne doit tre ajout e au tube MGIT GC correctement identifi Concentration Volume ajout aux Concentration Antibiotique d antibiotique apr s tubes MGIT pour finale dans reconstitution le test les tubes MGIT MGIT PZA 8000 ug mL 100 uL 100 ug mL Le PZA doit tre reconstitu avec 2 5 mL d eau st rile d sionis e afin d obtenir la concentration indiqu e 4 Pr paration et ensemencement du tube Contr le de croissance Pipeter de mani re aseptique 0 5 mL d inoculum AST cf PR PARATION DE L CHANTILLON dans 4 5 mL de s rum physiologique st rile afin de pr parer une suspension au 1 10 du Contr le de croissance M langer soigneusement la solution du Contr le de croissance Inoculer 0 5 mL de la suspension au 1 10 du Contr le de croissance dans le tube MGIT tiquet GC REMARQUE Il est important d utiliser une dilution au 1
23. IT 960 PZA ne peut tre effectu qu au moyen de l automate BACTEC MGIT 960 Les modules PZA ne peuvent pas tre lus manuellement N utiliser que des cultures pures de M tuberculosis Les cultures contamin es ou qui contiennent des souches multiples de mycobact ries peuvent donner des r sultats erron s et ne doivent pas tre test es Le test direct partir d chantillons cliniques n est pas recommand Il faut laisser reposer les suspensions r alis es partir de milieux solides pendant les temps prescrits avant la normalisation Les pr parations d inoculum r alis es partir de milieux solides doivent tre compar es visuellement au standard de turbidit McFarland 0 5 pour viter tout risque de r sultats inexacts ou d erreur de module AST La non utilisation de la dilution au 1 5 de la suspension de microorganismes comme indiqu pour ensemencer les tubes contenant des antibiotiques risque d entrainer des r sultats erron s La non utilisation de la dilution au 1 10 de la suspension de microorganismes pour ensemencer le tube Contr le de croissance risque d entra ner des r sultats erron s ou de causer une erreur du module AST La non reconstitution de l antimycobact rien PZA avec le volume appropri d eau st rile distill e d sionis e risque d entrainer des r sultats erron s Il est important de bien m langer le contenu des tubes ensemenc s Un m lange imparfait peut conduire a un faux r sultat de r s
24. L tube range between 2 0 x 10 to 7 5 x 106 CFU mL Solid media The recommended procedure for preparing a PZA Set from growth on solid media up to 14 days after first visible growth is seen uses a 1 5 dilution of an organism suspension equivalent to a 0 5 McFarland Standard Internal studies show that inocula prepared from solid medium culture range between 2 1 x 105 to 3 9 x 106 CFU mL Lot Reproducibility Lot reproducibility was evaluated using twenty five M tuberculosis strains including three ATCC strains Each strain was tested in triplicate with the BACTEC MGIT 960 PZA susceptibility test Each replicate represented a separate test condition differentiated by lot of PZA drug PZA supplement and PZA medium used three lots each Observed results were compared to the expected results The overall reproducibility for the BACTEC MGIT 960 PZA susceptibility test is 96 8 CDC Challenge Panel Testing The performance of the BACTEC MGIT 960 PZA susceptibility test was evaluated using a panel of challenge strains obtained from the Centers for Disease Control and Prevention CDC Atlanta GA USA The panel consisted of nine strains of M tuberculosis with known susceptibility patterns using BACTEC 460TB The panel was tested in triplicate with the BACTEC MGIT 960 PZA susceptibility test The BACTEC MGIT 960 PZA results were compared to the CDC expected results The overall agreement with CDC expected results for the BACTEC MGIT 960 PZA su
25. PZA Kit enth lt zwei Fl schchen mit lyophilisiertem Pyrazinamid und sechs Fl schchen mit PZA Zusatz Ungef hre Zusammensetzung pro Fl schchen lyophilisiertes Arzneimittel Pyrazinamid 20 000 ug Der BACTEC MGIT 960 PZA Zusatz enth lt 15 mL Anreicherungssubstanz Ungef hre Zusammensetzung pro Liter destillierten Wassers Rinderalbumin 50 0 g Katalase ER 0 03 g Dextr se lic 20 0 g OlsdUre ce sate ral 0 19 Polyoxyethylenstearat POES 1 19 Nach Bedarf auf die Leistungskriterien abgestimmt und oder erg nzt 11 1005486 0604 qxd 08 13 2004 2 37 PM Pag 2 Aufbewahrung und Rekonstituierung der Reagenzien BACTEC MGIT 960 PZA Medium Nach Erhalt bei 2 25 C aufbewahren NICHT EINFRIEREN Die Bouillon sollte klar und farblos aussehen Bei Tr bung nicht verwenden Vor Lichteinwirkung sch tzen Gem der Kennzeichnung aufbewahrte R hrchen k nnen bis zum Verfallsdatum inokuliert werden BACTEC MGIT 960 PZA Arzneimittelfl schchen Fl schchen mit lyophilisiertem Arzneimittel nach Erhalt bei 2 8 C aufbewahren Nach dem Rekonstituieren kann die Antibiotikal sung eingefroren und bei mindestens 20 C K lte bis zu sechs Monate lang jedoch nicht ber das urspr ngliche Verfallsdatum hinaus aufbewahrt werden Sofort nach dem Auftauen verwenden Nicht verwendete Anteile entsorgen BACTEC MGIT 960 PZA Zusatz Nach Erhalt bei 2 8 C im Dunkeln aufbewahren Nicht einfrieren oder berhitzen Vor d
26. Per garantire l accuratezza dei risultati AST ed evitare gli errori del set AST PZA importante usare una diluizione 1 10 correttamente preparata per la provetta GC 5 Inoculazione delle provette contenenti farmaco Pipettare in asepsi 0 5 mL di inoculo AST vedi Preparazione dei campioni nella provetta MGIT con etichetta PZA 6 Chiudere bene le provette con il tappo Mescolare accuratamente capovolgendo con attenzione le provette tre o quattro volte 7 Introdurre il set PZA nello strumento BACTEC MGIT 960 usando la funzione di ingresso del set AST vedi il Manuale d uso del BACTEC MGIT 960 Istruzioni AST Assicurarsi che la provetta Controllo di crescita si trovi nella prima posizione di sinistra Quando si attiva la funzione di ingresso del set AST selezionare PZA come farmaco nella definizione del carrello AST a 2 provette 8 Seminare 0 1 mL di sospensione dell organismo su una piastra di Agar soia Trypticase con 5 di sangue di montone TSA Il Inserire in una busta di plastica e incubare a 35 37 C 9 Controllare la piastra di agar sangue dopo 48 ore per verificare l eventuale presenza di contaminazione batterica Se non si nota alcuna crescita sulla piastra continuare il test PZA Se si notano segni di crescita sulla piastra eliminare il set PZA vedi il Manuale d uso del BACTEC MGIT 960 Istruzioni AST e ripetere il test con una coltura pura di Mycobacterium tuberculosis Controllo di qualit a cura dell
27. R hrchen mit Kappe transferieren dabei m glichst kein Sediment transferieren und weitere 15 Minuten lang ruhen lassen 6 Den fl ssigen berstand der gleichm ig aussehen und keine Klumpen enthalten sollte in ein drittes steriles 16 5x128 mm R hrchen transferieren HINWEIS Die Organismussuspension sollte bei diesem Schritt eine Tr bung von ber 0 5 McFarland aufweisen 7 Die Suspension mittels Sichtvergleich auf einen McFarland Tr bheitsstandard von 0 5 einstellen Nicht auf einen McFarland Standard von weniger als 0 5 einstellen 8 1 0 mL der eingestellten Suspension mit 4 mL steriler Kochsalzl sung verd nnen 1 5 Verd nnung Dies als AST Inokulum verwenden und mit dem Inokulationsverfahren f r den BACTEC MGIT 960 PZA Empfindlichkeitstest fortfahren Zubereitung aus einem positiven BACTEC MGIT R hrchen 1 Der erste Tag an dem ein BACTEC MGIT R hrchen vom Ger t als positiv identifiziert wird gilt als Tag O 2 Zur Zubereitung des Testinokulums sollte ein positives MGIT 7 mL R hrchen vom ersten Tag nach dem Positivwerden im BACTEC MGIT 960 Ger t Tag 1 bis einschlie lich des f nften Tages Tag 5 verwendet werden Von einem R hrchen das bereits mehr als f nf Tage lang positiv ist sollte eine Subkultur in einem neuen MGIT 7 mL R hrchen mit BACTEC MGIT 960 Wachstumszusatz angelegt werden Diese Subkultur sollte dann im BACTEC MGIT 960 Ger t bis zum Positivwerden getestet und innerhalb von ein bis f nf Tage
28. Revisions SO 0191 5 Rev from Rev to ECO 0702 0604 1218 03 Notes 1 BD Cat Number 245128 245115 2 Blank Sheet Size Length 9 1 2 Width 12 Number of Pages 28 Number of Sheets 7 Page Size Length 9 1 2 Width 6 Final Folded Size 3 1 4 x 6 Style see illustrations below 5 HEADER HEADER aa ni DER 3 4 HEADER mA E 5 6 7 See Specification Control Number N A for Material Information Ink Colors Printed two sides Yes _ No No of Colors 1 PMS Black Graphics are approved by Becton Dickinson and Company Supplier has the responsibility for using the most current approved revision level Label Design COMPANY CONFIDENTAL THIS DOCUMENT IS a BD Becton Dickinson and Company THE PROPERTY OF BECTON DICKINSON AND RI 7 Laveton Circle Proofer COMPANY AND IS NOT TO BE USED OUTSIDE THE COMPANY WITHOUT WRITTEN PERMISSION Sparks MD 21152 USA Category and Description Sheet 1 of 29 A Package Insert L005486 BACTEC MGIT 960 PZA Kit Scale N A Checked By Part Number 1005486 0604 qxd 08 13 2004 2 37 PM Pag BD BACTEC MGIT 960 PZA Kit For the Antimycobacterial Susceptibility Testing of Mycobacterium tuberculosis English pages 1 5 Italiano pagine 16 20 L005486 Francais pages 6 10 Espanol p ginas 21 25 2004 06 Deutsch Seiten 11 15 See symbol glossary at end of insert Viz popis symbol na ko
29. acterium tuberculosis Contr le de qualit par l utilisateur D s r ception d un nouvel arrivage ou d un nouveau num ro de lot de flacons de trousse BACTEC MGIT 960 PZA ou de milieu BACTEC MGIT 960 PZA il est recommand de tester la souche de contr le indiqu e ci dessous La souche de contr le doit tre une culture pure pr par e conform ment aux instructions de PREPARATION DE L ECHANTILLON Le module AST de contr le de qualit QC doit tre pr par conform ment la M thode d ensemencement pour le test de sensibilit BACTEC MGIT 960 PZA Plusieurs consid rations sont importantes pour la pr paration du module CQ AST la bonne reconstitution des antibiotiques lyophilis s l utilisation d une culture pure et la dilution ad quate de la souche de contr le de qualit pour les tubes PZA et Contr le de croissance Il est important de n ajouter l antibiotique que dans le tube MGIT correspondant tiquet PZA La m me souche de contr le doit tre test e comme contr le de qualit de lot une fois par semaine lorsque le test de sensibilit est effectu L observation des r sultats corrects tels qu indiqu s ci dessous dans les 4 20 jours signifie que les r actifs BACTEC MGIT 960 PZA sont pr ts l emploi pour des tests d isolats cliniques Si les r sultats observ s ne sont pas corrects ne pas communiquer les r sultats obtenus sur les isolats cliniques R p ter les isolats cliniques et le c
30. as aisladas El tiempo medio global transcurrido hasta la obtenci n del resultado para el an lisis de sensibilidad BACTEC MGIT 960 PZA es de siete d as con un intervalo de cuatro a diecisiete d as Los datos se muestran en la Figura 1 p gina 26 CARACTER STICAS DE RENDIMIENTO Estudios anal ticos Intervalos de in culos de AST de medios l quidos y s lidos Medios l quidos el procedimiento recomendado para preparar un conjunto de PZA a partir de un tubo MGIT de 7 mL positivo utiliza un in culo directo los d as 1 y 2 despu s del registro de positividad y un in culo diluido 1 5 los d as 3 a 5 despu s del registro de positividad Los estudios internos muestran que los in culos preparados a partir de un tubo MGIT de 7 mL positivo entre los d as 1 y 5 var an entre 2 0 x 104 y 7 5 x 106 UFC mL Medios s lidos el procedimiento recomendado para preparar un conjunto de PZA a partir del crecimiento en medios s lidos hasta 14 d as despu s de observarse el primer crecimiento visible utiliza una diluci n de 1 5 de una suspensi n de microorganismos equivalente a un patr n 0 5 de McFarland Los estudios internos muestran que los in culos preparados a partir de cultivos en medios s lidos var an entre 2 1 x 103 y 3 9 x 106 UFC mL Reproducibilidad en lote La reproducibilidad en lote se evalu utilizando 25 cepas de M tuberculosis incluidas tres cepas de ATCC Cada cepa se analiz por triplicado con el an lisis de sensib
31. ati di M tuberculosis Il test di suscettibilit BACTEC 460TB PZA utilizza una concentrazione di pirazinamide di 100 ug mL Il test della suscettibilit eseguito nel sistema BACTEC 460TB risultato soddisfacente e viene attualmente considerato come il metodo di riferimento per le prove di suscettibilit alla PZA Il National Committee for Clinical Laboratory Standards NCCLS consiglia di impiegare il metodo BACTEC 460TB per l analisi della suscettibilit alla PZA 2 L uso del sistema BACTEC MGIT 960 in combinazione con il kit BACTEC MGIT 960 PZA costituisce un metodo non radiometrico per la determinazione della suscettibilit antimicobatterica alla pirazinamide Il kit BACTEC MGIT 960 PZA stato sviluppato per consentire la determinazione della suscettibilit a concentrazioni di pirazinamide pari a 100 ug mL Questa concentrazione si correla con quella utilizzata nel sistema BACTEC 460TB PRINCIPI DELLA PROCEDURA La provetta di terreno BACTEC MGIT 960 PZA contiene un brodo Middlebrook 7H9 modificato che favorisce la crescita e l individuazione dei micobatteri ad un pH ridotto pari a 5 9 La provetta di terreno BACTEC MGIT 960 PZA contiene un composto fluorescente fissato in silicone sul fondo di una provetta a base circolare da 16 x 100 mm Il composto fluorescente sensibile all ossigeno dissolto nel brodo La concentrazione iniziale di ossigeno dissolto attenua l emissione dal composto e limita l intensit della fluorescenza rilevabile Su
32. bility testing Use of the BACTEC MGIT 960 System in combination with the BACTEC MGIT 960 PZA kit is a non radiometric method of determining antimycobacterial susceptibility to PZA The BACTEC MGIT 960 PZA Kit has been developed to allow susceptibility testing at a pyrazinamide concentration of 100 ug mL This concentration correlates with the concentration used in the BACTEC 460TB System PRINCIPLES OF THE PROCEDURE BACTEC MGIT 960 PZA Medium is a tube containing a modified Middlebrook 7H9 Broth which supports the growth and detection of mycobacteria at a reduced pH of 5 9 The BACTEC MGIT 960 PZA Medium tube contains a fluorescent compound embedded in silicone on the bottom of a 16 x 100 mm round bottom tube The fluorescent compound is sensitive to the presence of oxygen dissolved in the broth The initial concentration of dissolved oxygen quenches the emission from the compound and little fluorescence can be detected Later actively growing and respiring microorganisms consume the oxygen which allows the compound to fluoresce The BACTEC MGIT 960 PZA Kit is a 4 21 day qualitative test The test is based on growth of the M tuberculosis isolate in a drug containing tube compared to a drug free tube Growth Control The BACTEC MGIT 960 instrument continually monitors tubes for increased fluorescence Analysis of fluorescence in the drug containing tube compared to the fluorescence of the Growth Control tube is used by the instrument to determine s
33. cally pipet 100 uL of the 8000 ug mL BACTEC MGIT 960 PZA drug solution to the appropriately labeled MGIT PZA tube No PZA drug solution should be added to the appropriately labeled MGIT GC tube Concentration of Volume Added to Final Concentration in Drug Drug after MGIT Tubes for Test MGIT Tubes Reconstitution MGIT PZA 8000 ug mL 100 uL 100 ug mL PZA must be reconstituted using 2 5 mL sterile deionized water to achieve the concentration indicated 4 Growth Control tube preparation and inoculation Aseptically pipet 0 5 mL of the AST inoculum see SPECIMEN PREPARATION into 4 5 mL of sterile saline to prepare the 1 10 Growth Control suspension Mix the Growth Control suspension thoroughly Inoculate 0 5 mL of the 1 10 Growth Control suspension into the MGIT tube labeled GC NOTE It is important to use an appropriately prepared 1 10 dilution for the GC tube to ensure accurate AST results and avoid PZA AST set errors 5 Drug containing tube inoculation Aseptically pipet 0 5 mL of the AST inoculum see SPECIMEN PREPARATION into the MGIT tube labeled PZA 6 Tightly recap the tubes Mix tubes thoroughly by gentle inversion three to four times 7 Enter the PZA set into the BACTEC MGIT 960 instrument using the AST set entry feature refer to the BACTEC MGIT 960 User s Manual AST Instructions Ensure that the Growth Control tube is in the first left tube position Select PZA as the drug in the 2 tube AST set carrie
34. cati risultati dei test BACTEC MGIT 960 PZA sono stati confrontati con i risultati attesi La riproducibilit complessiva del test di suscettibilit BACTEC MGIT 960 PZA del 94 Valutazione con pannello di provocazione CDC Le prestazioni del test di suscettibilit BACTEC MGIT 960 PZA sono state valutate presso ciascuno dei quattro centri clinici utilizzando un pannello di ceppi di provocazione ottenuto dai Centers for Disease Control and Prevention CDC Atlanta GA USA Il pannello era costituito da nove ceppi di M tuberculosis con pattern di suscettibilit accertati con il BACTEC 460TB Dei trentasei risultati PZA ottenuti con il test di suscettibilit BACTEC MGIT 960 PZA trentatre sono stati concordi con i risultati attesi dei CDC La concordanza percentuale calcolata con i risultati attesi dei CDC per il test di suscettibilit BACTEC MGIT 960 PZA del 91 7 Test di isolati clinici Con il test di suscettibilit BACTEC MGIT 960 PZA e con il test di suscettibilit BACTEC 460TB PZA sono stati analizzati in tutto 118 isolati clinici di M tuberculosis Nell analisi sono stati inclusi isolati clinici freschi e isolati di subcolture da terreni di coltura liquidi e solidi L analisi ha generato un totale di 228 risultati La Tabella 1 presenta i risultati ottenuti dai test di isolati clinici per la PZA alla concentrazione di 100 ug mL provenienti dai terreni di coltura liquidi da colture su terreno solido e da una combinazione di ent
35. ccessivamente i microrganismi in crescita attiva consumano l ossigeno permettendo cos una maggiore fluorescenza del composto Il kit BACTEC MGIT 960 PZA un test qualitativo di 4 21 giorni Il test basato sul confronto tra la crescita di un isolato di M tuberculosis in una provetta contenente farmaco e in una provetta senza farmaco Controllo di crescita Lo strumento BACTEC MGIT 960 controlla costantemente l aumento della fluorescenza nelle provette Per determinare i risultati di suscettibilit lo strumento rileva la fluorescenza nella provetta con il farmaco e la confronta con la fluorescenza nella provetta del Controllo di crescita Lo strumento BACTEC MGIT 960 interpreta automaticamente i risultati ottenuti e riporta un risultato di suscettibilit o di resistenza REAGENTI La provetta di terreno BACTEC MGIT 960 PZA contiene 110 uL di indicatore fluorescente e 7 mL di brodo di PZA L indicatore contiene cloruro di rutenio pentaidrato tri 4 7 difenil 1 10 fenantrolina in una base di gomma siliconica Le provette sono chiuse con un tappo di polipropilene Il pH regolato a 5 9 Formula riveduta per L di acqua purificata Brodo Middlebrook 7H9 modificato 5 9 g Peptone di caseina 1 25 g Il kit BACTEC MGIT 960 PZA contiene due flaconi di polvere liofilizzata di pirazinamide e sei flaconi di supplemento PZA Formula riveduta per flacone di farmaco liofilizzato Pirazinamide 20 000 ug I
36. ce i risultati attesi non riportare i risultati dei pazienti Non usare il prodotto finch non si sia contattato il rappresentante locale BD Ceppo GC MGIT PZA M tuberculosis Positivo Suscettibile ATCC 27294 Durante la valutazione esterna del kit BACTEC MGIT 960 PZA il risultato per l organismo di controllo stato ottenuto in media in sette giorni con un range da quattro a undici giorni Le cause pi comuni di fallimento del controllo di qualit durante la valutazione esterna sono da attribuire alla eccessiva inoculazione dei set PZA e alla contaminazione delle colture di controllo di qualit RISULTATI Lo strumento BACTEC MGIT 960 esegue il monitoraggio dei set AST fino a quando viene determinata una suscettibilit o una resistenza Una volta completato il test del set lo strumento BACTEC MGIT 960 riporta i risultati vedi il Manuale d uso del BACTEC MGIT 960 Istruzioni AST In presenza di condizioni che potrebbero influire sui risultati del test lo strumento BACTEC MGIT 960 riporter il risultato del set AST come Errore X nessuna interpretazione di suscettibilit Le condizioni che possono dar luogo ad un risultato di Errore X sono descritte nel Manuale d uso BACTEC MGIT 960 Istruzioni AST Sezione 6 Risoluzione dei problemi Nella compilazione dei rapporti dei risultati importante includere il metodo di analisi il nome e la concentrazione del farmaco Per quanto riguarda il regime terapeutico appropriato e
37. chstumskontrollsuspension gut mischen Das als WK gekennzeichnete MGIT R hrchen mit 0 5 mL der im Verh ltnis 1 10 verd nnten Wachstumskontrollsuspension inokulieren HINWEIS Die Verwendung einer korrekt zubereiteten 1 10 Verd nnung f r das WK R hrchen ist von Bedeutung f r die Erzielung korrekter AST Ergebnisse und die Vermeidung von PZA AST Ansatzfehlern 5 Inokulation der arzneimittelhaltigen R hrchen Unter Anwendung aseptischer Kautelen 0 5 mL des AST Inokulums siehe VORBEREITUNG DER PROBEN in das als PZA gekennzeichnete MGIT R hrchen pipettieren 6 Die R hrchen wieder fest verschlie en Den Inhalt der R hrchen durch drei bis viermaliges vorsichtiges Umdrehen gut mischen 7 Den PZA Ansatz mit Hilfe der AST Eingabefunktion in das BACTEC MGIT 960 Ger t eingeben siehe die Anleitungen f r das AST Verfahren im BACTEC MGIT 960 Benutzerhandbuch Sicherstellen da sich das Wachstumskontrollr hrchen in der ersten R hrchenposition links befindet Bei der Eingabe des AST Ansatzes PZA als das Arzneimittel im 2 R hrchen AST Ansatzst nder angeben 8 0 1 mL der Organismussuspension auf einer Trypticase Soja Agarplatte mit 5 Schafblut TSA II ausstreichen In einem Plastikbeutel verschlie en Bei 35 37 C inkubieren 9 Die Blutagarplatte nach 48 Stunden im Hinblick auf bakterielle Kontaminierung berpr fen Wenn die Blutagarplatte kein Wachstum aufweist die PZA Empfindlichkeitspr fung fortsetzen We
38. cl nicas reci n aisladas a partir de cultivos l quidos y s lidos Se gener un total de 228 resultados de an lisis En la Tabla 1 se presentan los resultados del an lisis de cepas cl nicas para el antibi tico PZA en una concentraci n de 100 pg mL en cultivos l quidos en cultivos s lidos y en ambos tipos de cultivo combinados Tabla 1 Resultados de cepas cl nicas an lisis de sensibilidad BACTEC MGIT 960 PZA en comparaci n con el an lisis de sensibilidad BACTEC 460TB Sistema BACTEC 460TB Sistema BACTEC MGIT 960 Resultados de PZA previstos Resultados de sensibilidad Resultados de resistencia Categor a de Categor a de N de N de porcentaje de N de porcentaje de an lisis concordancias concordancia concordancias concordancia IC 95 IC 95 LIQUIDOS 112 98 9 95 7 93 9 100 78 1 99 9 S LIDOS 113 97 8 87 0 92 2 99 7 66 4 97 2 TOTAL 225 98 3 91 3 95 2 99 7 79 2 97 6 En esta tabla no se incluyen tres resultados inciertos con el sistema BACTEC 460TB Todas las cepas aisladas con resultados discordantes en el an lisis BACTEC MGIT 960 PZA se analizaron con el an lisis de sensibilidad BACTEC 460TB PZA en dos centros independientes Los resultados discordantes correspond an a cepas cuyo resultado en el an lisis BACTEC MGIT 960 PZA era diferente al resultado del an lisis BACTEC 460TB PZA En los c lculos para el kit BACTEC MGIT 960 PZA no se incluyen los resultados inciertos B borderline
39. ctu s Pendant l valuation externe de la trousse BACTEC MGIT 960 PZA neuf tests PZA ont t men s a partir d isolats cliniques exigeant un renouvellement des tests en raison d une contamination six isolats ou d erreurs de proc dure ou d un ensemencement excessif trois isolats Le d lai moyen global d obtention d un r sultat pour le test de sensibilit BACTEC MGIT 960 PZA est de sept jours sur un intervalle de quatre dix sept jours Les donn es sont repr sent es la figure 1 page 26 PERFORMANCES CARACT RISTIQUES tudes analytiques Gammes d inoculum AST pour milieux liquides et solides Milieux liquides La proc dure recommand e de pr paration d un module PZA partir d un tube MGIT 7 mL utilise un ensemencement direct le Jour 1 et le Jour 2 suivant la d termination de la positivit et un ensemencement dilu 1 5 les Jours 3 5 suivant la d termination de la positivit Des tudes internes montrent que les inoculum pr par s partir d un tube MGIT 7 mL positif du Jour 1 au Jour 5 comptent de 2 0 x 104 7 5 x 106 CFU mL Milieux solides La proc dure recommand e de pr paration d un module PZA partir d une croissance bact rienne sur milieu solide jusqu 14 jours apr s l apparition de la premiere croissance utilise une dilution au 1 5 de la suspension de microorganismes quivalente a un standard de McFarland 0 5 Des tudes internes montrent que les inoculum pr par s a partir d une c
40. d 08 13 2004 2 37 PM Pag 1 amp BD BACTEC MGIT 960 PZA Kit Zur Empfindlichkeitspr fung von Mycobacterium tuberculosis gegen Antibiotika bzw Antituberkulotika E E VERWENDUNGSZWECK Das BACTEC MGIT 960 PZA Kit ist ein qualitatives Schnellverfahren zur Pr fung der Empfindlichkeit von Mycobacterium tuberculosis aus Kulturen gegen Pyrazinamid PZA Das BACTEC MGIT 960 PZA Kit wird mit dem BACTEC MGIT 960 System verwendet ZUSAMMENFASSUNG UND ERKL RUNG Antibiotika bzw Antituberkulotika Empfindlichkeitspr fungen sind im Hinblick auf eine angemessene Behandlung von Tuberkulose Patienten von Nutzen Tuberkulose wird normalerweise mit einer Kombination von Arzneimitteln u a dem Antituberkulotikum Pyrazinamid behandelt Dabei ist eine ausreichende Aktivit t der verordneten Antibiotika bzw Antimykotika gegen Mycobacterium tuberculosis von Bedeutung d h das Isolat mu gegen das Arzneimittel empfindlich sein Multiresistente Mycobacterium tuberculosis St mme MDR TB haben sich in j ngster Zeit zu einem ernsthaften Volksgesundheits problem entwickelt 1 Bei einer Resistenz gegen eines der Prim r Arzneimittel einschlie lich Pyrazinamid ist die Behandlung der Erkrankung schwieriger und kostenintensiver Der schnelle Nachweis dieser resistenten Isolate ist von ma geblicher Bedeutung f r eine wirksame Behandlung des Patienten Bei der Empfindlichkeitspr fung von Mykobakterien finden herk mmlicherweise zwei Methoden breite Anwendung
41. da temperatura Ohrani enie teploty Limitaci n de temperatura Temperaturbegr nsning Batch Code Lot K d slo ar e Batch kode Lot Chargenummer lot Partii kood Er koodi LOT Code de lot Lot Chargencode Chargenbezeichnung Kwdik c raptidas Naptida T tel sz ma Lot Codice del lotto partita Partijos numeris Lot Batch kode Serie Kod partii seria C digo do lote Lote K d s rie ar a C digo de lote Lote Satskod parti Contains sufficient for lt n gt tests Dostate n mno stv pro lt n gt test Indeholder tilstr kkeligt til lt n gt test Voldoende voor lt n gt tests K llaldane lt n gt testide jaoks Sis lt on riitt v lt n gt testej varten Contenu suffisant pour lt n gt tests Ausreichend f r lt n gt Tests Mepl xel enapk mov mta lt n gt eget cele lt n gt teszthez elegend Contenuto sufficiente per lt n gt test Pakankamas kiekis atlikti lt n gt testy Innholder tilstrekkelig for lt n gt tester Zawiera ilo wystarczaj c do lt n gt test w Cont mo suficiente para lt n gt testes Obsah vystac na lt n gt testov Contenido suficiente para lt n gt pruebas R ckertill lt n gt antal tester Consult Instructions for Use Prostudujte pokyny k pouziti L s brugsanvisningen Raadpleeg gebruiksaanwijzing Lugeda kasutusjuhendit Tarkista k ytt ohjeista Consulter la notice d emploi Gebrauchsa
42. de la soluci n del antibi tico BACTEC MGIT PZA 8 000 ug mL al tubo MGIT PZA que tiene la etiqueta correspondiente No debe agregarse soluci n de antibi tico al tubo MGIT etiquetado como GC control de crecimiento Concentraci n Volumen a adido Concentraci n Antibi tico del antibi tico a los tubos MGIT final en los reconstituido para el an lisis tubos MGIT MGIT PZA 8000 ug mL 100 ut 100 ug mL El antibi tico PZA debe reconstituirse con 2 5 mL de agua est ril desionizada para lograr la concentraci n indicada 4 Preparaci n e inoculaci n del tubo de control de crecimiento con una pipeta transferir as pticamente 0 5 mL del in culo para AST v ase PREPARACI N DE LAS MUESTRAS a 4 5 mL de soluci n salina est ril para preparar la suspensi n 1 10 de control de crecimiento Mezclar bien la suspensi n de control de crecimiento Inocular 0 5 mL de la suspensi n 1 10 de control de crecimiento en el tubo MGIT etiquetado como GC NOTA Es importante utilizar una diluci n 1 10 correctamente preparada para el tubo GC para garantizar la obtenci n de resultados exactos de AST y evitar errores del conjunto de AST 5 Inoculaci n de los tubos que contienen antibi tico con una pipeta transferir as pticamente 0 5 mL del in culo de AST v ase PREPARACI N DE LAS MUESTRAS en el tubo MGIT etiquetado como PZA 6 Volver a cerrar bien los tubos Mezclar bien los tubos invirti ndolos suavemente entr
43. die R hrchen nicht gut genug gemischt kann es f lschlicherweise zu resistent Ergebnissen kommen Wenn die R hrchen des AST Ansatzes nicht in der korrekten Anordnung im AST Ansatzst nder plaziert werden kann es zu inkorrekten Ergebnissen kommen Wenn die falsche Arzneimitteldefinition f r den Ansatzst nder gew hlt wird kann es zu ung ltigen oder inkorrekten Ergebnissen kommen Wenn der AST Ansatz nicht korrekt in das Ger t geladen wird kann es zum Fehlerzustand anonym kommen der innerhalb von 8 Stunden behoben werden mu Wenn der Fehlerzustand nicht innerhalb von 8 Stunden behoben wird mu der AST Ansatz verworfen und neu vorbereitet werden Wenn der BACTEC MGIT 960 PZA Zusatz nicht im AST Ansatz verwendet wird kann es zu inkorrekten Ergebnissen kommen KEINEN BACTEC MGIT 960 SIRE Zusatz und KEINEN BACTEC MGIT 960 Wachstumszusatz zum PZA AST Ansatz hinzuf gen Wenn das BACTEC MGIT 960 PZA Medium nicht im PZA AST Ansatz verwendet wird kann es zu inkorrekten Ergebnissen kommen KEINE BBL MGIT 7 mL Indikatorr hrchen f r Mykobakterienwachstum anstelle des BACTEC MGIT 960 PZA Mediums verwenden ERWARTETE WERTE Insgesamt wurden 118 klinische Isolate von M tuberculosis an vier verschiedenen geographischen Standorten mit dem BACTEC MGIT 960 PZA Empfindlichkeitstest getestet Die Tests wurden sowohl mit frischen klinischen Isolaten als auch mit Subkultur Isolaten aus fl ssigen und festen Kulturen durchgef hrt Insgesamt w
44. e indica los tubos pueden inocularse hasta la fecha de caducidad Frascos de antibi tico BACTEC MGIT 960 PZA tras su entrega almacenar los frascos de antibi tico liofilizado a una temperatura de 2 C a 8 C Una vez reconstituidas las soluciones de antibi tico pueden congelarse y almacenarse a una temperatura igual o inferior a 20 C o durante un m ximo de seis meses siempre que este per odo no sobrepase la fecha de caducidad original Una vez descongeladas las soluciones deben utilizarse inmediatamente Desechar cualquier porci n no utilizada Suplemento BACTEC MGIT 960 PZA tras su entrega almacenar en un lugar oscuro a una temperatura de 2 C a 8 C Evitar su congelaci n y su sobrecalentamiento Abrir y usar antes de la fecha de caducidad Reducir al m nimo la exposici n a la luz Instrucciones de uso Reconstituir cada frasco de antibi tico liofilizado BACTEC MGIT 960 PZA con 2 5 mL de agua est ril destilada desionizada para obtener una soluci n de reserva de 8 000 ug mL ADVERTENCIAS Y PRECAUCIONES Para uso diagn stico in vitro MUESTRA DE AN LISIS POTENCIALMENTE INFECCIOSA En las muestras cl nicas puede haber microorganismos pat genos como los virus de la hepatitis y el virus de la inmunodeficiencia humana Para la manipulaci n de todos los elementos contaminados con sangre u otros l quidos corporales deben seguirse las Precauciones est ndar 7 10 y las directrices del centro El trabajo con culti
45. e manuel d utilisation BACTEC MGIT 960 Il est important d inclure la m thode de test la concentration et le nom de l antibiotique en rapportant les r sultats Le sp cialiste des maladies pulmonaires et ou infectieuses dans la prise en charge de la tuberculose doit tre consult au sujet du r gime th rapeutique et des dosages appropri s La mono r sistance au pyrazinamide est peu commune en cas de r sultats indiquant une r sistance inattendue v rifier la puret et l identification de l isolat test comme tant de type M tuberculosis Les directives des contr les de puret mycobacterienne sont consign es dans la norme NCCLS M24 7 1005486 0604 qxd 08 13 2004 2 37 PM Pag Documentation des r sultats BACTEC MGIT 960 PZA Antibiotique R sultat BACTEC concentration MGIT 960 R sultat rapporter Action Isolat test avec BACTEC MGIT 960 Aucune action Sensible PZA 100 g mL r sultat sensible Isolat test avec BACTEC MGIT 960 Si l isolat est mono PZA 100 pg mL R sistant PZA 100 pg mL r sultat r sistant r sistant au PZA confirmer que l isolat test est une culture pure de Mycobacterium tuberculosis Erreur X Aucun r sultat donn Renouveler le test LIMITES DE LA M THODE Le test de sensibilit BACTEC MGIT 960 PZA n interpr te pas le degr de sensibilit de l isolat test Les r sultats donn s sont soit sensible soit r sistant Le test de sensibilit BACTEC MG
46. e polyoxy thyl ne POES 1 1g Ajust e et ou compl ment e en fonction des crit res de performances impos s Conservation et reconstitution des r actifs Milieu BACTEC MGIT 960 PZA Des r ception conserver entre 2 et 25 C NE PAS CONGELER Le bouillon doit tre limpide et incolore Ne pas l utiliser s il est trouble Maintenir a l abri de la lumi re Les tubes conserv s comme indiqu sur l tiquette peuvent tre inocul s jusqu a la date de p remption 1005486 0604 qxd 08 13 2004 2 37 PM Pag Flacons d antimycobacterien BACTEC MGIT 960 PZA Des r ception conserver les flacons d antimycobacterien lyophilis une temp rature comprise entre 2 8 C Une fois reconstitu e la solution antibiotique peut tre congel e et conserv e 20 C ou a une temp rature inf rieure jusqu six mois et sans d passer la date de p remption originelle Une fois d congel es les solutions doivent tre utilisees imm diatement Jeter les portions non utilis es Supplement BACTEC MGIT 960 PZA Des r ception conserver dans l obscurite entre 2 et 8 C Eviter de le congeler ou de le surchauffer Ouvrir et utiliser avant la date de p remption Maintenir a l abri de la lumi re Directives d emploi Reconstituer chaque flacon d antimycobacterien BACTEC MGIT 960 PZA lyophilis avec 2 5 mL d eau st rile distill e ou d sionis e pour faire une solution m re de 8000 pg mL AVERTISSEMENTS ET PREC
47. e tous les tubes MGIT avant de les jeter PR PARATION DES CHANTILLONS Toutes les pr parations d taill es ci dessous doivent provenir de cultures pures de M tuberculosis Le laboratoire doit confirmer par techniques d identification appropri es que l isolat tester est une culture pure de M tuberculosis Pr paration de l isolat partir d un milieu solide REMARQUE Il importe de pr parer l inoculum conform ment aux instructions suivantes pour obtenir la concentration de microorganismes appropri e pour le test de sensibilite 1 Ajouter 4 mL de bouillon BBL Middlebrook 7H9 ou bouillon BBL MGIT un tube st rile de 16 5 x 128 mm avec capuchon contenant 8 a 10 billes de verre 2 A l aide d une anse bact riologique st rile racler la surface d une culture de quatorze jours au maximum afin de r colter le plus de colonies possible tout en veillant a ne pr lever aucun milieu solide Suspendre les colonies dans le Bouillon Middlebrook 7H9 3 Vortexer la suspension pendant 2 3 minutes afin de briser les gros agr gats La turbidit de la suspension doit exc der le standard McFarland 1 0 4 Laisser reposer compl tement la suspension pendant 20 minutes 5 Transf rer le surnageant liquide dans un autre tube st rile de 16 5 x 128 mm avec capuchon viter de transf rer le s diment et laisser reposer nouveau pendant 15 minutes 6 Transf rer le surnageant liquide qui doit tre fluide et exempt de tout agr ga
48. e tres y cuatro veces 7 Introducir el conjunto de AST en el instrumento BACTEC MGIT 960 utilizando la funci n de introducci n del conjunto de AST v ase el Manual del usuario del sistema BACTEC MGIT 960 Instrucciones para AST Es preciso asegurarse de que el tubo de control de crecimiento est en la primera posici n de la izquierda Seleccione PZA como antibi tico en la definici n del transportador del conjunto de AST de dos tubos cuando introduzca el conjunto de AST 8 Transferir 0 1 mL de la suspensi n de microorganismos a un placa de agar de soja Trypticase con sangre de oveja al 5 TSA II Colocar la placa dentro de una bolsa de pl stico Incubar a una temperatura de 35 C a 37 C 9 Inspeccionar la placa de agar sangre a las 48 horas en busca de contaminaci n bacteriana Si la placa de agar sangre no muestra crecimiento continuar el an lisis de PZA Si la placa de agar sangre muestra crecimiento desechar el conjunto de AST v ase el Manual del usuario del sistema BACTEC MGIT 960 Instrucciones para AST y repetir el an lisis con un cultivo puro de Mycobacterium tuberculosis Control de calidad del usuario despu s de la entrega de un nuevo env o o n mero de lote de frascos del kit BACTEC MGIT 960 PZA o del medio BACTEC MGIT 960 PZA se recomienda analizar el microorganismo de control indicado a continuaci n El microorganismo de control debe ser un cultivo puro el cual debe prepararse conforme a las instrucciones descri
49. eh rde empfohlene Ma nahmen ergreifen Ein undichtes bzw zerbrochenes inokuliertes R hrchen kann ein Mykobakterien Aerosol erzeugen entsprechende Richtlinien zur Handhabung beachten Alle inokulierten MGIT R hrchen vor dem Entsorgen autoklavieren VORBEREITUNG DER PROBEN Alle im Folgenden aufgef hrten Vorbereitungsschritte sind mit M tuberculosis Reinkulturen durchzuf hren Das jeweilige Labor mu anhand geeigneter Identifizierungsmethoden best tigen da es sich bei dem zu testenden Isolat um eine Reinkultur von M tuberculosis handelt Zubereitung des Isolats aus festen Medien HINWEIS Das Inokulum mu in bereinstimmung mit den nachstehenden Anleitungen zubereitet werden um eine ordnungsgem e Organismuskonzentration f r die Empfindlichkeitspr fung zu gew hrleisten 1 In ein steriles 8 10 Glasperlen enthaltendes 16 5x128 mm R hrchen mit Kappe 4 mL BBL Middlebrook 7H9 Bouillon oder BBL MGIT Bouillon geben 2 Von einer maximal 14 Tage alten Kultur mit Hilfe einer sterilen se m glichst viele Kolonien abschaben dabei nach M glichkeit kein festes Medium mit aufnehmen Die Kolonien in der Middlebrook 7H9 Bouillon suspendieren 3 Die Suspension 2 3 Minuten lang mit dem Vortexmischer mischen um die gr eren Klumpen zu zerspalten Die Suspension sollte eine Tr bung von ber 1 0 McFarland aufweisen 4 Die Suspension 20 Minuten lang ruhen lassen 5 Den fl ssigen berstand in ein weiteres steriles 16 5x128 mm
50. elow within 4 20 days indicates that the BACTEC MGIT 960 PZA reagents are ready for use in testing patient isolates If the proper results are not observed do not report patient results Repeat QC and any patient isolates affected by the initial QC failure If the repeat QC does not perform as expected do not report patient results Do not use the product until you have contacted Technical Services at 800 638 8663 United States Only Strains GC MGIT PZA M tuberculosis Positive Susceptible ATCCTM 27294 During the external evaluation of the BACTEC MGIT 960 PZA Kit the average time to result for the control organism was seven days with a range of four to eleven days The most common causes of QC failures during the external evaluation were over inoculated PZA Sets and contaminated QC cultures RESULTS The BACTEC MGIT 960 instrument will monitor AST sets until a susceptible or resistant determination is made Once the set testing is completed the results are reported by the BACTEC MGIT 960 instrument refer to the BACTEC MGIT 960 User s Manual AST Instructions The BACTEC MGIT 960 instrument will report an AST Set result as an Error X no susceptibility interpretation when certain conditions occur that may affect the test results Conditions that may result in an Error X result are described in the AST Instructions Section 6 Troubleshooting of the BACTEC MGIT 960 User s Manual It is important to include the test method dr
51. em Verfallsdatum ffnen und verwenden Vor Lichteinwirkung sch tzen Gebrauchsanleitung Jedes BACTEC MGIT 960 PZA Fl schchen mit Iyophilisiertem Arzneimittel mit 2 5 mL sterilem destilliertem deionisiertem Wasser rekonstituieren um eine Stamml sung von 8000 pg mL herzustellen WARNHINWEISE UND VORSICHTSMASSNAHMEN In vitro Diagnostikum POTENTIELL INFEKTIOSE TESTPROBE Klinische Proben k nnen pathogene Mikroorganismen wie z B Hepatitis Viren und HIV enthalten Beim Umgang mit allen mit Blut oder anderen K rperfl ssigkeiten kontaminierten Artikeln sind die Allgemeinen VorsichtsmaBnahmen 7 19 sowie die einschl gigen Institutionsrichtlinien zu beachten Beim Umgang mit M tuberculosis Wachstumskulturen sind Laborpraktiken Sicherheitsvorkehrungen und anlagen der Biosicherheitsstufe 3 erforderlich Die Anleitungen in allen relevanten Packungsbeilagen einschlie lich der des BBL MGIT 7 mL Indikatorr hrchens f r Mykobakterienwachstum durchlesen und befolgen R hrchen und Fl schchen vor Gebrauch auf Anzeichen von Kontaminierung oder Besch digung untersuchen R hrchen oder Fl schchen die unbrauchbar erscheinen entsorgen R hrchen die fallengelassen wurden sorgf ltig untersuchen Bei Anzeichen von Besch digungen das betreffende R hrchen entsorgen Beim Bruch eines R hrchens 1 Ger teschubladen schlie en 2 Ger t abschalten 3 betroffenen Bereich unverz glich verlassen 4 von Labor Seuchenschutzb
52. em BD Contacte o seu representante local da BD para obter instru es In trukcie z skate u miestneho z stupcu spolo nosti BD Kontakta lokal Becton Dickinson representant f r anvisningar INTENDED USE The BACTEC MGIT 960 PZA Kit is a rapid qualitative procedure for susceptibility testing of Mycobacterium tuberculosis from culture to pyrazinamide PZA The BACTEC MGIT 960 PZA Kit is used with the BACTEC MGIT 960 System SUMMARY AND EXPLANATION Antimycobacterial susceptibility testing is valuable in the proper treatment of patients with tuberculosis The treatment of tuberculosis is commonly through a multiple drug regimen that includes the antimycobacterial drug pyrazinamide It is important that the antimycobacterial drugs prescribed show appropriate activity against Mycobacterium tuberculosis i e susceptibility of the isolate to the drug Multidrug resistant Mycobacterium tuberculosis MDR TB has recently become a serious public health problem Resistance to any of the primary drugs including pyrazinamide makes the disease more difficult and expensive to treat The rapid detection of these resistant isolates is critical to effective patient management Two methods have been widely used for antimycobacterial susceptibility testing The first method known as the Method of Proportion uses Middlebrook and Cohn 7H10 Agar It compares colony counts on drug containing and drug free media The testing for pyrazinamide requi
53. en dreiunddrei ig mit den CDC Referenzergebnissen berein Die berechnete prozentuale bereinstimmung der Ergebnisse des BACTEC MGIT 960 PZA Empfindlichkeitstests mit den CDC Referenzergebnissen betr gt 91 7 Testen klinischer Isolate Insgesamt wurden 118 klinische Isolate von M tuberculosis mit dem BACTEC MGIT 960 PZA Empfindlichkeitstest und dem BACTEC 460TB PZA Empfindlichkeitstest getestet Dabei wurden sowohl frische klinische Isolate als auch Subkultur Isolate aus fl ssigen und festen Kulturen getestet Hierbei ergaben sich insgesamt 228 Testergebnisse In Tabelle 1 sind die Ergebnisse der im Hinblick auf 100 ug mL des PZA Arzneimittels getesteten klinischen Isolate aufgef hrt Ergebnisse von fl ssigen Kulturen festen Kulturen und beide zusammen Tabelle 1 Ergebnisse f r klinische Isolate BACTEC MGIT 960 PZA Empfindlichkeitstest im Vergleich zum BACTEC 460TB Empfindlichkeitstest BACTEC 460TB System BACTEC MGIT 960 System Erwartete PZA Ergebnisse Empfindlich Ergebnisse Resistent Ergebnisse Anzahl Anzahl Kategorie Anzahl Kategorie der Tests der bereinstimmung der Ubereinstimmung Tests Ubereinstimmungen 95 VI Ubereinstimmungen 95 VI FLUSSIG 112 98 9 95 7 93 9 100 78 1 99 9 FEST 113 97 8 87 0 92 2 99 7 66 4 97 2 ALLE 225 179 98 3 91 3 95 2 99 7 79 2 97 6 Drei grenzwertige BACTEC 460TB Ergebnisse sind nicht in dieser Tabelle aufgef hrt Alle Isolate mit di
54. ener la concentraci n apropiada del microorganismo para el an lisis de sensibilidad 1 Agregar 4 mL de caldo BBL Middlebrook 7H9 o caldo BBL MGIT a un tubo est ril de 16 5 x 128 mm con tap n que contenga de 8 a 10 microesferas de vidrio 2 Con un asa esterilizada separar el mayor n mero posible de colonias de un cultivo de 14 d as como m ximo procurando evitar recoger medio s lido Poner en suspensi n las colonias en el caldo Middlebrook 7H9 3 Agitar la suspensi n en un agitador tipo Vortex durante 2 a 3 min para dispersar los grumos m s grandes La turbidez de la suspensi n debe superar el patr n 1 0 de McFarland 4 Dejar que la suspensi n repose durante 20 minutos sin moverla 5 Transferir el l quido sobrenadante a otro tubo est ril de 16 5 x 128 mm con tap n evitar transferir parte del sedimento y dejar reposar durante otros 15 min 6 Transferir el l quido sobrenadante ste debe estar homog neo sin grumos a un tercer tubo est ril de 16 5 x 128 mm NOTA En este paso la suspensi n del microorganismo debe ser superior al patr n 0 5 de McFarland 7 Ajustar la suspensi n a un patr n 0 5 de McFarland mediante comparaci n visual con el patr n de turbidez 0 5 de McFarland No ajustar por debajo de un patr n 0 5 de McFarland 8 Diluir 1 mL de la suspensi n ajustada en 4 mL de soluci n salina est ril diluci n de 1 5 Utilizar la soluci n resultante como in culo para AST y pasar al Procedimiento de
55. er three had resistant results from both independent sites Of the three discordant PZA resistant R BACTEC MGIT 960 S BACTEC 460TB isolates tested all isolates had susceptible results from both independent sites Two of the three BACTEC 460TB borderline PZA results S BACTEC MGIT 960 B BACTEC 460TB had susceptible results from both independent sites One of the three BACTEC 460TB borderline PZA results R BACTEC MGIT 960 B BACTEC 460TB had one independent site determine a susceptible result The other independent site determined a borderline result AVAILABILITY Cat No Description 245128 BACTEC MGIT 960 PZA Kit carton of 2 lyophilized vials and six PZA Supplements 245115 BACTEC MGIT 960 PZA Medium carton of 25 tubes REFERENCES 1 Barenfanger J 1993 Making your lab safe against multi drug resistant Mycobacterium tuberculosis Clin Microbiol Newsl 15 76 80 2 National Committee for Clinical Laboratory Standards 2001 Approved Standard M24 A Susceptibility testing of mycobacteria Nocardia and other aerobic actinomycetes NCCLS Wayne Pa 3 Butler W R and Kilburn 1982 Improved method for testing susceptibility of Mycobacterium tuberculosis to pyrazinamide J Clin Microbiol 16 1106 1109 4 Heifets L B and Iseman M D 1985 Radiometric method for testing susceptibility of Mycobacterium tuberculosis to pyrazinamide in 7H12 broth J Clin Microbiol 27 200 204 5 BD Diagnostic Systems
56. ereinstimmung des BACTEC MGIT 960 PZA Empfindlichkeitstests mit den CDC Referenzergebnissen betr gt 98 7 Klinische Beurteilung Der BACTEC MGIT 960 PZA Empfindlichkeitstest wurde an vier verschiedenen geographischen klinischen Standorten beurteilt Dabei handelte es sich um regionale Referenzzentren und Labors von Universit tskliniken in den USA einschlie lich zweier nicht in den USA liegender Standorte Der BACTEC MGIT 960 PZA Empfindlichkeitstest wurde mit dem BACTEC 460TB PZA Empfindlichkeitstest verglichen Reproduzierbarkeitstests Die Reproduzierbarkeit der Pr fungen mit dem BACTEC MGIT 960 PZA Empfindlichkeitstest wurde an den klinischen Standorten anhand eines aus f nf qualifizierten St mmen bestehenden Profils beurteilt Die Ergebnisse der BACTEC MGIT 960 PZA Pr fung wurden mit den erwarteten Ergebnissen verglichen Die insgesamte Reproduzierbarkeit des BACTEC MGIT 960 PZA Empfindlichkeitstests betrug 94 Testen eines CDC Referenzprofils Die Leistung des BACTEC MGIT 960 PZA Empfindlichkeitstests wurde an jedem der vier klinischen Standorte anhand eines Profils aus Referenzst mmen der US amerikanischen Seuchenschutzbeh rde CDC Centers for Disease Control and Prevention Atlanta GA USA beurteilt Das Profil bestand aus neun M tuberculosis St mmen mit bekannten Empfindlichkeitsmustern unter Anwendung von BACTEC 460TB Von den sechsunddrei ig mit dem BACTEC MGIT 960 PZA Empfindlichkeitstest erhaltenen Ergebnissen stimmt
57. findlichkeitsgrad des getesteten Isolats Als Ergebnis wird entweder empfindlich oder resistent berichtet Der BACTEC MGIT 960 PZA Empfindlichkeitstest kann nur mit dem BACTEC MGIT 960 Ger t durchgef hrt werden Die PZA Ans tze k nnen nicht manuell interpretiert werden Nur Reinkulturen von M tuberculosis verwenden Kontaminierte Kulturen oder Kulturen mit mehreren Mykobakterien Spezies k nnen zu fehlerhaften Ergebnissen f hren und sollten nicht getestet werden Direkttests klinischer Proben werden nicht empfohlen Aus festen Medien hergestellte Suspensionen m ssen sich vor der Standardisierung die vorgeschriebene Zeitspanne lang absetzen Inokula die aus festen Medien zubereitet wurden sollten visuell mit einem 0 5 McFarland Tr bheitsstandard verglichen werden andernfalls kann es zu inkorrekten Ergebnissen oder AST Ansatzfehlern kommen Wenn bei entsprechender Indikation keine 1 5 Verd nnung der Organismussuspension zur Inokulation des Arzneimittelr hrchens verwendet wird kann es zu inkorrekten Ergebnissen kommen Wenn zur Inokulation des Wachstumskontrollr hrchens keine 1 10 Verd nnung der Organismussuspension verwendet wird kann es zu inkorrekten Ergebnissen oder AST Ansatzfehlern kommen Wird das PZA Arzneimittel nicht mit der korrekten Menge sterilen destillierten deionisierten Wassers rekonstituiert kann dies zu inkorrekten Ergebnissen f hren Gutes Mischen der inokulierten R hrchen ist von Bedeutung Werden
58. ge is seen the tube should be discarded In the event of tube breakage 1 Close the instrument drawers 2 Turn off the instrument 3 Vacate the area immediately 4 Consult your facility CDC guidelines An inoculated leaking or broken tube may produce an aerosol of mycobacteria appropriate handling should be observed Autoclave all inoculated MGIT tubes prior to disposal SPECIMEN PREPARATION All preparations detailed below must be from pure cultures of M tuberculosis The laboratory should confirm by appropriate identification techniques that the isolate to be tested is a pure culture of M tuberculosis Preparation of the Isolate from Solid Media NOTE It is important to prepare the inoculum according to the following instructions to obtain the appropriate organism concentration for the susceptibility test 1 Add 4 mL of BBL Middlebrook 7H9 Broth or BBL MGIT broth to a 16 5 x 128 mm sterile tube with cap containing 8 10 glass beads 2 Scrape with a sterile loop as many colonies as possible from growth no more than fourteen days old trying not to remove any solid medium Suspend the colonies in the Middlebrook 7H9 Broth 3 Vortex the suspension for 2 3 minutes to break up the larger clumps The suspension should exceed a 1 0 McFarland standard in turbidity 4 Let the suspension sit for 20 minutes without disturbing 5 Transfer the supernatant fluid to another 16 5 x 128 mm sterile tube with cap avoid transferring any of t
59. he sediment and let sit for another 15 minutes 6 Transfer the supernatant fluid it should be smooth free of any clumps to a third 16 5 x 128 mm sterile tube NOTE The organism suspension should be greater than a 0 5 McFarland standard at this step 7 Adjust the suspension to a 0 5 McFarland standard by visual comparison to a 0 5 McFarland turbidity standard Do not adjust below a 0 5 McFarland standard 8 Dilute 1 mL of the adjusted suspension in 4 mL of sterile saline 1 5 dilution Use this as the AST inoculum and proceed to Inoculation Procedure for BACTEC MGIT 960 PZA Susceptibility Test Preparation from a Positive BACTEC MGIT Tube 1 The first day of an instrument positive BACTEC MGIT tube is considered Day 0 2 For the preparation of the test inoculum a positive 7 mL MGIT tube should be used the day after it first becomes positive on the BACTEC MGIT 960 instrument Day 1 up to and including the fifth day Day 5 after instrument positivity A tube which has been positive longer than five days should be subcultured to a fresh 7 mL MGIT tube containing BACTEC MGIT 960 Growth Supplement and tested on the BACTEC MGIT 960 instrument until positive and used from one to five days following positivity 3 If the tube is a Day 1 or Day 2 positive no dilution is required Use this as the AST inoculum and proceed to Inoculation Procedure for BACTEC MGIT 960 PZA Susceptibility Test 4 If the tube is a Day 3 Day 4 or Day 5
60. i n muestra una correlaci n con la concentraci n utilizada en el sistema BACTEC 460TB PRINCIPIOS DEL PROCEDIMIENTO El medio BACTEC MGIT 960 PZA es un tubo que contiene un caldo Middlebrook 7H9 el cual permite el crecimiento y la detecci n de micobacterias a un pH bajo de 5 9 El tubo de medio BACTEC MGIT 960 PZA contiene un compuesto fluorescente incluido en silicona que se encuentra en la parte inferior de un tubo de 16 x 100 mm de fondo redondo El compuesto fluorescente es sensible a la presencia de ox geno disuelto en el caldo La concentraci n inicial de ox geno disuelto apaga las emisiones procedentes del compuesto por lo que se detecta poca fluorescencia M s tarde los microorganismos al respirar y crecer activamente consumen el ox geno lo cual permite la fluorescencia del compuesto El kit BACTEC MGIT 960 PZA es un an lisis cualitativo de 4 a 21 d as El an lisis se basa en la comparaci n del crecimiento de la cepa aislada de M tuberculosis en un tubo que contiene antibi tico con el crecimiento en un tubo sin antibi tico control de crecimiento El instrumento BACTEC MGIT 960 controla los tubos continuamente para detectar un aumento de su fluorescencia El instrumento utiliza el an lisis de la fluorescencia del tubo con antibi tico en comparaci n con la fluorescencia del tubo de control de crecimiento para determinar los resultados de sensibilidad El instrumento BACTEC MGIT 960 interpreta autom ticamente estos resultad
61. ien zum Testen von Patientenisolaten verwendet werden Werden die korrekten Ergebnisse nicht erzielt keine Patientenergebnisse berichten Den Test des Qualit tskontrollorganismus und aller von dem urspr nglichen QK Fehler betroffenen Patientenisolate wiederholen Wenn auch die erneute Qualit tskontroll pr fung nicht die erwarteten Ergebnisse erbringt keine Patientenergebnisse berichten Das Produkt nicht verwenden und den technischen Kundendienst verst ndigen Stamm WK MGIT PZA M tuberculosis Positiv Empfindlich ATCC 27294 Bei der extern durchgef hrten Beurteilung des BACTEC MGIT 960 PZA Kits betrug die durchschnittliche Zeitspanne bis zum Erhalt eines Ergebnisses f r den Kontrollorganismus sieben Tage Bereich vier bis elf Tage Bei der extern durchgef hrten Beurteilung waren die h ufigsten Ursachen f r das Scheitern von Qualit tskontrolltests ber inokulierte PZA Ans tze und kontaminierte QK Kulturen ERGEBNISSE Das BACTEC MGIT 960 Ger t berwacht die AST Ans tze bis zu deren Bestimmung als empfindlich oder resistent Nachdem das Testen der Ans tze abgeschlossen ist werden die Ergebnisse vom BACTEC MGIT 960 Ger t ausgegeben siehe die Anleitungen f r das AST Verfahren im BACTEC MGIT 960 Benutzerhandbuch Das BACTEC MGIT 960 Ger t gibt das Ergebnis eines AST Ansatzes als Fehler X aus d h ohne Empfindlichkeitsinterpretation wenn bestimmte Bedingungen vorliegen die das Testergebnis beeintr chtigen k
62. ilidad BACTEC MGIT 960 PZA Cada duplicado representaba una situaci n de an lisis distinta diferenciada por lote de antibi tico PZA por suplemento PZA y por medio PZA utilizado tres lotes cada uno Se compararon los resultados observados con los resultados previstos La reproducibilidad global del an lisis de sensibilidad BACTEC MGIT 960 PZA es del 96 8 24 1005486 0604 qxd 08 13 2004 2 37 PM Pag 5 An lisis del panel de referencia de los CDC El rendimiento del an lisis de sensibilidad BACTEC MGIT 960 PZA se evalu por medio de un panel de cepas aisladas de referencia obtenido de los Centers for Disease Control and Prevention CDC Atlanta Georgia EE UU El panel estaba constituido por nueve cepas de M tuberculosis con patrones de sensibilidad conocidos por medio del sistema BACTEC 460TB El panel se analiz por triplicado con el an lisis de sensibilidad BACTEC MGIT 960 PZA Se compararon los resultados del an lisis BACTEC MGIT 960 PZA con los resultados previstos conforme a los CDC La coincidencia global con los resultados previstos conforme a los CDC para el an lisis de sensibilidad BACTEC MGIT 960 PZA es del 98 7 Evaluaci n cl nica El an lisis de sensibilidad BACTEC MGIT 960 PZA se evalu en cuatro centros cl nicos de distinta localizaci n geogr fica que inclu an centros regionales de referencia y laboratorios de hospitales universitarios incluidos dos centros de fuera de Estados Unidos Se compar el an l
63. isis de sensibilidad BACTEC MGIT 960 PZA con el m todo de an lisis de la sensibilidad BACTEC 460TB PZA An lisis de la reproducibilidad La reproducibilidad del an lisis de sensibilidad BACTEC MGIT 960 PZA se evalu en los centros cl nicos utilizando un panel de cinco cepas validadas Se compararon los resultados del an lisis BACTEC MGIT 960 PZA con los resultados previstos La reproducibilidad global del an lisis de sensibilidad BACTEC MGIT 960 PZA es del 94 An lisis del panel de referencia de los CDC El rendimiento del an lisis de sensibilidad BACTEC MGIT 960 PZA se evalu en los cuatro centros cl nicos por medio de un panel de cepas aisladas de referencia obtenido de los Centers for Disease Control and Prevention CDC Atlanta Georgia EE UU El panel estaba constituido por nueve cepas de M tuberculosis con patrones de sensibilidad conocidos por medio del sistema BACTEC 460TB De los 36 resultados de PZA obtenidos con el an lisis de sensibilidad BACTEC MGIT 960 PZA 33 concordaron con los resultados previstos conforme a los CDC El porcentaje de concordancia calculado con respecto a los resultados previstos conforme a los CDC para el an lisis BACTEC MGIT 960 PZA es del 91 7 An lisis de cepas cl nicas Se analiz un total de 118 cepas cl nicas de M tuberculosis con el an lisis de sensibilidad BACTEC MGIT 960 PZA y el an lisis de sensibilidad BACTEC 460TB PZA El an lisis incluy cepas aisladas subcultivadas y cepas
64. istance Ne pas charger les tubes du module AST dans le support de portoir AST en dehors de l ordre indiqu cela risquerait d entra ner des r sultats erron s Une mauvaise selection de definition d antibiotique pour le support de portoir risque d entrainer des r sultats non valides ou inexacts Le mauvais chargement du module AST dans l automate se traduit par une condition d erreur anonyme qui doit tre r solue dans les huit heures Si la condition d erreur n est pas r solue dans les huit heures le module AST doit tre limin et configur de nouveau La non utilisation du suppl ment BACTEC MGIT 960 PZA dans le portoir AST PZA risque d entrainer des r sultats erron s NE PAS ajouter de suppl ment BACTEC MGIT 960 SIRE ou de suppl ment de croissance BACTEC MGIT 960 au portoir AST PZA La non utilisation du suppl ment BACTEC MGIT 960 PZA dans le portoir AST PZA risque d entrainer des r sultats erron s NE PAS remplacer les tubes d indicateur de croissance de mycobact rie BBL MGIT 7 mL par un milieu BACTEC MGIT 960 PZA VALEURS ATTENDUES Au total 118 isolats cliniques de M tuberculosis ont t test s avec le test de sensibilit BACTEC MGIT 960 PZA dans quatre centres investigateurs loign s g ographiquement Les tests incluaient des chantillons cliniques frais et des isolats repiqu s provenant de cultures en milieux liquide et solide Au total 228 tests de sensibilit PZA liquides et solides ont t effe
65. l Giorno 1 o Giorno 2 non necessaria alcuna diluizione Usare questa soluzione come inoculo AST e passare alla Procedura di inoculazione per il test di suscettibilit con il kit BACTEC MGIT 960 PZA 4 Se la provetta positiva nel Giorno 3 Giorno 4 o Giorno 5 diluire 1 mL di brodo positivo in 4 mL di soluzione fisiologica sterile diluizione 1 5 Usare questa soluzione come inoculo AST e passare alla Procedura di inoculazione per il test di suscettibilit con il kit BACTEC MGIT 960 PZA PROCEDURA Materiali forniti Kit BACTEC MGIT 960 PZA contenente due flaconi di ciascun farmaco liofilizzato e sei flaconi di supplemento PZA circa 50 test per kit Materiali richiesti ma non forniti Terreno BACTEC MGIT 960 PZA 25 provette per scatola terreni di coltura ausiliari reagenti organismi per il controllo di qualit e attrezzatura di laboratorio necessaria per questa procedura Procedura di inoculazione per il test di suscettibilit con il kit BACTEC MGIT 960 PZA Durante la preparazione del set AST PZA importante accertare la corretta ricostituzione del farmaco liofilizzato l uso di coltura pura e la corretta diluizione dell organismo sia per il Controllo di crescita che per la provetta PZA importante dispensare il farmaco solo nella provetta MGIT corrispondente con etichetta PZA Durante l esecuzione del set AST PZA usare solo il supplemento BACTEC MGIT 960 PZA fornito con il kit e le provette di terreno BACTEC
66. l supplemento BACTEC MGIT 960 PZA contiene 15 mL di terreno di arricchimento Formula riveduta per L di acqua purificata Albumina bovina 50 0 g Catalasi 0 03 g Destrosio 20 0 g Acido oleico 0 19 Stearato di poliossietilene POES 1 19 Compensata elo corretta per soddisfare i criteri di rendimento Conservazione e ricostituzione dei reagenti Terreno BACTEC MGIT 960 PZA Alla consegna conservare a 2 25 C NON CONGELARE Il brodo deve essere limpido e incolore Non usarlo se torbido Ridurre al minimo l esposizione alla luce Le provette non ancora utilizzate e conservate come indicato sull etichetta possono essere inoculate fino alla data di scadenza 16 1005486 0604 qxd 08 13 2004 2 37 PM Pag 7 Flaconi di farmaci BACTEC MGIT 960 PZA Alla consegna conservare i flaconi dei farmaci liofilizzati a 2 8 C Una volta ricostituita la soluzione di antibiotico pud essere congelata e conservata a temperatura di 20 C o inferiore fino a sei mesi ma non oltre la data di scadenza originaria Una volta scongelata la soluzione usarla immediatamente Eliminare le aliquote non utilizzate Supplemento BACTEC MGIT PZA Alla consegna conservare il prodotto al buio a 2 8 C Non congelare o riscaldare eccessivamente Aprire ed usare prima della data di scadenza Ridurre al minimo l esposizione alla luce Istruzioni per l uso Ricostituire ogni flacone di polvere liofili
67. la M thode d ensemencement pour le test de sensibilit BACTEC MGIT 960 PZA 4 Si le tube est positif du Jour 3 du Jour 4 ou du Jour 5 diluer 1 mL du bouillon positif dans 4 mL de s rum physiologique st rile dilution 1 5 Utiliser cela comme inoculum AST et passer la M thode d ensemencement pour le test de sensibilit BACTEC MGIT 960 PZA METHODE Mat riel fourni La trousse BACTEC MGIT 960 PZA contient deux flacons d antimycobact rien lyophilis s et six flacons de suppl ment PZA environ 50 tests par trousse Materiels requis mais non fournis Milieu BACTEC MGIT 960 PZA 25 tubes par carton avec milieux de culture auxiliaires r actifs souches de contr le de qualit et mat riel de laboratoire n cessaires a la r alisation de cette m thode M thode d ensemencement pour le test BACTEC MGIT 960 de sensibilit au PZA Plusieurs consid rations sont importantes pour la pr paration du module AST PZA la bonne reconstitution des antibiotiques lyophilis s l utilisation d une culture pure et la dilution ad quate de la souche pour le tube PZA et Contr le de croissance Il est important de n ajouter l antibiotique que dans le tube MGIT correspondant tiquet PZA Utiliser uniquement le suppl ment BACTEC MGIT 960 PZA fourni avec la trousse et les tubes de milieu BACTEC MGIT 960 PZA en effectuant le module AST PZA 1005486 0604 qxd 08 13 2004 2 37 PM Pag 1 Etiqueter deux tubes de milieu BA
68. lit BACTEC MGIT 960 PZA a t valu dans quatre centres investigateurs loign s g ographiquement comprenant des centres de r f rencement r gionaux et des laboratoires de CHU parmi lesquels deux centres situ s hors des tats Unis Le test de sensibilit BACTEC MGIT 960 PZA a t compar a la m thode de test de sensibilit BACTEC 460TB PZA Test de reproductibilit La reproductibilit du test de sensibilit BACTEC MGIT 960 PZA a t valu e dans les centres investigateurs en utilisant un panel de cinq souches qualifi es Les r sultats obtenus avec BACTEC MGIT 960 PZA ont t compar s aux r sultats attendus La reproductibilit globale du test de sensibilit BACTEC MGIT 960 PZA est de 94 Test du panel d preuve du CDC Les performances du test de sensibilit BACTEC MGIT 960 PZA ont t valu es dans chacun des quatre centres investigateurs en utilisant un panel de souches d preuve obtenu aupr s du Centers for Disease Control and Prevention Centre pid miologique d Atlanta aux tats Unis Le panel se composait de neuf souches de M tuberculosis aux profils de sensibilit connus en utilisant le BACTEC 460TB Sur les trente six r sultats PZA recueillis avec le test de sensibilit BACTEC MGIT 960 PZA trente trois concordaient avec les r sultats attendus du CDC Le pourcentage de concordance avec les r sultats attendus du CDC calcul pour le test de sensibilit du BACTEC MGIT 960 PZA est de 91 7
69. monorresistencia a pirazinamida por lo que en caso de obtener resultados inesperados de resistencia debe comprobarse la pureza y la identificaci n de la cepa aislada analizada como M tuberculosis La norma M24 del NCCLS contiene directrices para las comprobaciones de pureza para micobacterias 23 1005486 0604 qxd 08 13 2004 2 37 PM Pag 4 Informe de resultados de PZA con el sistema BACTEC MGIT 960 Antibi tico Resultado de concentraci n BACTEC MGIT 960 Informe recomendado Acci n Cepa aislada analizada con BACTEC No se requiere Sensible MGIT 960 PZA 100 ug mL con ninguna acci n resultado de sensibilidad Cepa aislada analizada con BACTEC Si la cepa aislada es PZA 100 pg mL Resistente MGIT 960 PZA 100 ug mL con monoresistente a PZA resultado de resistencia confirmar que la cepa aislada analizada es un cultivo puro de Mycobacterium tuberculosis Error X No generar informe Repetir el an lisis LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO El an lisis de sensibilidad BACTEC MGIT 960 PZA no interpreta el grado de sensibilidad de la cepa aislada analizada Los resultados se informan como sensibilidad o resistencia El an lisis de sensibilidad BACTEC MGIT 960 PZA s lo puede realizarse con el instrumento BACTEC MGIT 960 Los conjuntos de PZA no pueden leerse manualmente S lo deben utilizarse cultivos puros de M tuberculosis No deben analizarse cultivos que est n contaminados o que puedan contener varia
70. n PZA AST Ansatz ausschlie lich den die mit dem Kit gelieferten BACTEC MGIT 960 PZA Zusatz und BACTEC MGIT 960 PZA Medienr hrchen verwenden 1 F r jedes zu testende Isolat zwei BACTEC MGIT 960 PZA 7 mL Medienr hrchen kennzeichnen Eines als WK Wachstumskontrolle und eines als PZA kennzeichnen Die R hrchen in der korrekten Anordnung in einem 2 R hrchen AST Ansatzst nder plazieren siehe die Anleitungen f r das AST Verfahren im BACTEC MGIT 960 Benutzerhandbuch 2 Unter Anwendung aseptischer Kautelen in jedes R hrchen 0 8 mL BACTEC MGIT 960 PZA Zusatz geben 3 Mit Hilfe einer Mikropipette und unter Anwendung aseptischer Kautelen 100 uL der 8000 ug mL BACTEC MGIT 960 PZA Arzneimittell sung in das entsprechend gekennzeichnete MGIT PZA R hrchen pipettieren In das entsprechend gekennzeichnete MGIT WK R hrchen keine PZA Arzneimittell sung geben Konzentration des Den MGIT R hrchen Endkonzentration in Arzneimittel Arzneimittels nach zugegebene den MGIT R hrchen der Rekonstituierung Volumina MGIT PZA 8000 ug mL 100 uL 100 ug mL Zum Erhalt der angegebenen Konzentration PZA mit 2 5 mL sterilem deionisiertem Wasser rekonstituieren 4 Vorbereitung und Inokulation des Wachstumskontrollr hrchens Zur Vorbereitung der im Verh ltnis 1 10 verd nnten Wachstumskontrollsuspension 0 5 mL des AST Inokulums siehe VORBEREITUNG DER PROBEN unter Anwendung aseptischer Kautelen in 4 5 mL sterile Kochsalzl sung pipettieren Die Wa
71. n nach dem positiven Ergebnis verwendet werden 3 Handelt es sich bei der R hrchen Positivit t um Tag 1 oder 2 ist keine Verd nnung erforderlich Dies als AST Inokulum verwenden und mit dem Inokulationsverfahren f r den BACTEC MGIT 960 PZA Empfindlichkeitstest fortfahren 4 Handelt es sich bei der R hrchen Positivit t um Tag 3 4 oder 5 1 mL der positiven Bouillon in 4 mL steriler Kochsalzl sung verd nnen 1 5 Verd nnung Dies als AST Inokulum verwenden und mit dem Inokulationsverfahren f r den BACTEC MGIT 960 PZA Empfindlichkeitstest fortfahren VERFAHREN Mitgelieferte Materialien BACTEC MGIT 960 PZA Kit mit je zwei Fl schchen der Iyophilisierten Arzneimittel sowie sechs Fl schchen PZA Zusatz ca 50 Tests pro Kit Ben tigte jedoch nicht mitgelieferte Artikel BACTEC MGIT 960 PZA Medium 25 R hrchen pro Karton zus tzliche Kulturmedien Reagenzien Qualit tskontrollorganismen und die f r dieses Verfahren ben tigten Laborutensilien 12 1005486 0604 qxd 08 13 2004 2 37 PM Pag 3 Inokulationsverfahren f r den BACTEC MGIT 960 PZA Empfindlichkeitstest Wichtige Parameter bei der Zubereitung des PZA AST Ansatzes sind die ordnungsgem e Rekonstituierung der lyophilisierten Arzneimittel die Verwendung einer reinen Kultur und die korrekte Organismusverd nnung f r die Wachstumskontrolle und PZA R hrchen Das Arzneimittel darf nur in das als PZA gekennzeichnete MGIT R hrchen gegeben werden F r de
72. nce pour tester la sensibilit au PZA Le National Committee for Clinical Laboratory Standards NCCLS recommande la m thode BACTEC 460TB pour les tests de sensibilit au PZA 2 L utilisation du syst me BACTEC MGIT 960 associ e la trousse BACTEC MGIT 960 PZA assure une m thode non radiom trique pour d terminer la sensibilit antimycobact rienne au PZA La trousse BACTEC MGIT 960 PZA a t mise au point de fa on pouvoir effectuer des tests de sensibilit une concentration en pyrazinamide de 100 ug mL Cette concentration correspond celle utilis e dans le syst me BACTEC 460TB PRINCIPES DE LA M THODE Le milieu BACTEC MGIT 960 PZA est un tube contenant un bouillon modifi de Middlebrook 7H9 qui assure la croissance et la d tection de mycobact ries un pH r duit de 5 9 Le tube de milieu BACTEC MGIT 960 PZA contient un compos fluorescent incorpor la silicone pr sente au fond du tube de 16 x 100 mm fond rond Le compos fluorescent est sensible la pr sence d oxyg ne dissous dans le bouillon La concentration d oxyg ne dissous initiale teint la fluorescence du compos et l mission d tectable est tr s faible Par la suite la croissance et la respiration des microorganismes consomment l oxyg ne du milieu et permettent la fluorescence de s exprimer La trousse BACTEC MGIT 960 PZA est un test qualitatif de 4 21 jours Le test est bas sur une comparaison de la croissance d un isolat de M tuberc
73. nci p balov ho let ku Se symbolglossaret i slutningen af indl gssedlen Zie lijst met symbolen aan het einde van de bijsluiter Vaadake s mbolite seletust infolehe l pus Katso pakkausselosteen lopussa olevaa kuvamerkkien sanastoa Voir le glossaire des symboles la fin de la notice Siehe Symbol Erkl rungen am Ende der Packungsbeilage Acte TO yAwoo pio Twv CULBOAWV OTO TEAOG TOU VBETOU A jelmagyar zat a haszn lati utas t s v g n tal lhat Vedere il glossario dei simboli alla fine del foglio illustrativo r informacinio lapelio pabaigoje pateikiam simboli glosarij Se i symbolforklaringen p slutten av produktvedlegget Zobacz obja nienie symboli na ko cu ulotki Consulte o gloss rio de s mbolos no fim do folheto informativo Pozri slovn k symbolov na konci let ka Consulte el glosario de s mbolos al final del prospecto Se symbolf rteckningen vid slutet av bipacksedeln Contact your local BD representative for instructions Pokyny v m poskytne m stn z stupce spole nosti BD Kontakt den lokale BD repr sentant for at f instruktioner Kasutusjuhiste suhtes kontakteeruge oma kohaliku BD esindajaga Emkoivwvrjote pe TOV TOMIK avrinp owno TNG BD yia o nyiec A haszn lati utas t st k rje a BD helyi k pviselet t l Naudojimo instrukcij teiraukit s vietos BD galiotojo atstovo Aby uzyska instrukcje u ytkowania skontaktuj si z lokalnym przedstawicielstw
74. nn die Blutagarplatte Wachstum aufweist den PZA Ansatz verwerfen siehe die Anleitungen f r das AST Verfahren im BACTEC MGIT 960 Benutzerhandbuch und den Test mit einer Mycobacterium tuberculosis Reinkultur wiederholen Qualit tssicherung durch den Benutzer Es wird empfohlen bei Erhalt einer neuen Sendung oder Chargennummer von BACTEC MGIT 960 PZA Kitr hrchen oder BACTEC MGIT 960 PZA Medium den nachstehend aufgef hrten Kontrollorganismus zu testen Der Kontrollorganismus sollte eine Reinkultur sein die in bereinstimmung mit den Anleitungen unter VORBEREITUNG DER PROBEN angelegt werden sollte Der AST Qualit tskontrollansatz sollte in bereinstimmung mit den Anleitungen unter Inokulationsverfahren f r den BACTEC MGIT 960 PZA Empfindlichkeitstest zubereitet werden Bei der Zubereitung des AST Qualit tskontrollansatzes mu auf die ordnungsgem e Rekonstituierung des lyophilisierten Arzneimittels die Verwendung einer reinen Kultur und die korrekte Verd nnung des Qualit tskontrollorganismus f r die Wachstumskontrolle und PZA R hrchen geachtet werden Das Arzneimittel darf nur in das als PZA gekennzeichnete MGIT R hrchen gegeben werden Der gleiche Kontrollorganismus sollte bei der Durchf hrung von Empfindlichkeitspr fungen einmal w chentlich als Qualit ts kontrolle getestet werden Wenn die nachstehend aufgef hrten korrekten Ergebnisse innerhalb von 4 20 Tagen erzielt werden k nnen die BACTEC MGIT 960 PZA Reagenz
75. nnten Bedingungen die zu einem Fehlerergebnis X f hren k nnen sind in den Anleitungen f r das AST Verfahren in Kapitel 6 Fehlersuche des BACTEC MGIT 960 Benutzerhandbuchs aufgef hrt Die Angabe der Testmethode des Arzneimittelnamens und der Konzentration im Ergebnisbericht ist von Bedeutung Bez glich der Wahl der geeigneten Therapie und Dosierung sollte ein Facharzt f r Lungen und oder Infektionskrankheiten mit entsprechenden TB Kenntnissen hinzugezogen werden Mono Resistenz gegen Pyrazinamid ist ungew hnlich weshalb bei au ergew hnlichen Resistenzergebnissen die Reinheit und Identifikation des als M tuberculosis getesteten Isolats zu best tigen sind Richtlinien f r Mykobakterien Reinheitspr fungen enth lt die Norm NCCLS M24 7 13 1005486 0604 qxd 08 13 2004 2 37 PM Pag 4 BACTEC MGIT 960 PZA Ergebnisbericht Arzneimittel BACTEC MGIT Konzentration 960 Ergebnis Empfohlener Bericht Ma nahmen Isolat mit BACTEC MGIT 960 Keine Ma nahmen Empfindlich PZA 100 ug mL getestet Ergebnis empfindlich Isolat mit BACTEC MGIT 960 Weist das Isolat eine PZA 100 pg mL Resistent PZA 100 ug mL getestet Mono Resistenz gegen Ergebnis resistent PZA auf best tigen da es sich bei dem getesteten Isolat um eine Reinkultur von Mycobacterium tuberculosis handelt Fehler X Kein Bericht Test wiederholen VERFAHRENSBESCHR NKUNGEN Der BACTEC MGIT 960 PZA Empfindlichkeitstest beurteilt nicht den Emp
76. ntibi tico liofilizado y seis frascos de suplemento PZA aproximadamente 50 an lisis por kit Materiales necesarios no suministrados medio BACTEC MGIT 960 PZA 25 tubos por caja medios de cultivo auxiliares reactivos microorganismos para control de calidad y el equipo de laboratorio necesario para este procedimiento 22 1005486 0604 qxd 08 13 2004 2 37 PM Pag 3 Procedimiento de inoculaci n para el an lisis de sensibilidad BACTEC MGIT 960 PZA Algunas consideraciones importantes al preparar el conjunto de AST para PZA son la correcta reconstituci n del antibi tico liofilizado el uso de un cultivo puro y la correcta diluci n del microorganismo para los tubos de control de crecimiento y de PZA Es importante agregar el antibi tico nicamente al tubo MGIT correspondiente que tiene la etiqueta PZA S lo deben utilizarse para el conjunto de AST de PZA el suplemento BACTEC MGIT 960 PZA suministrado con el kit y los tubos de medio BACTEC MGIT 960 PZA 1 Etiquetar dos tubos de medio BACTEC MGIT 960 PZA de 7 mL para cada cepa aislada que se vaya a analizar Etiquetar uno como GC control de crecimiento y otro como PZA Colocar los tubos en la secuencia correcta en el transportador del conjunto de AST de dos tubos v ase el Manual del usuario del sistema BACTEC MGIT 960 Instrucciones para AST 2 Agregar as pticamente 0 8 mL de suplemento BACTEC MGIT 960 PZA a cada tubo 3 Con una micropipeta transferir as pticamente 100 uL
77. nuti 6 Trasferire il supernatante dovrebbe essere omogeneo e privo di grumi in una terza provetta sterile da 16 5 x 128 mm NOTA Durante questo passaggio la torbidit della sospensione di organismi deve essere superiore allo standard 0 5 McFarland 7 Regolare la torbidit della sospensione sullo standard 0 5 McFarland confrontandola visivamente con lo stesso standard Non regolare ad una torbidit inferiore allo standard 0 5 McFarland 8 Diluire 1 mL della sospensione cos regolata in 4 mL di soluzione fisiologica sterile diluizione 1 5 Usare questa soluzione come inoculo AST e passare alla Procedura di inoculazione per il test di suscettibilit con il kit BACTEC MGIT 960 PZA Preparazione a partire da una provetta positiva BACTEC MGIT 1 Viene considerato Giorno 0 il primo giorno in cui si ottiene sullo strumento una provetta BACTEC MGIT positiva 2 Per la preparazione dell inoculo da testare usare una provetta positiva MGIT da 7 mL a partire dal giorno successivo alla comparsa di positivit Giorno 1 sullo strumento BACTEC MGIT 960 fino al quinto giorno compreso di positivit Giorno 5 Una provetta positiva da oltre cinque giorni deve essere sottoposta a subcoltura in una nuova provetta MGIT da 7 mL contenente supplemento di crescita BACTEC MGIT 960 testata sullo strumento BACTEC MGIT 960 fino alla comparsa di positivit e quindi usata tra il primo e il quinto giorno dalla positivit 3 Se la provetta positiva ne
78. nweisung beachten Zuu ouAeuteite TIC o nyleg xprjong Olvassa el a haszn lati utas t st Consultare le istruzioni per l uso Skaitykite naudojimo instrukcijas Se i bruksanvisningen Zobacz instrukcja u ytkowania Consulte as instru es de utiliza o Pozri Pokyny na pou vanie Consultar las instrucciones de uso Se bruksanvisningen Keep away from light Nevystavujte sv tlu M ikke udsaettes for lys Weghoudvan licht Hoida eemal valgusest Suojattava valolta Conserver l abri de la lumi re Vor Licht sch tzen OUAGETE To nakp d ard To PWG F ny nem rheti Tenere al riparo dalla luce Laikyti atokiau nuo ilumos altini Ma ikke utsettes for lys Przechowywa z dala od r de wiat a Manter ao abrigo da luz Uchov vajte mimo dosahu svetla Mantener alejado de la luz Far ej uts ttas f r ljus 27 1005486 0604 qxd 08 13 2004 2 38 PM Pag 8 Becton Dickinson and Company 7 Loveton Circle Sparks Maryland 21152 U S A 800 638 8663 BENEX Limited Bay K 1a d Shannon Industrial Estate Shannon County Clare Ireland Tel 353 61 47 29 20 Fax 353 61 47 25 46 ATCC is a trademark of the American Type Culture Collection BD BD Logo BACTEC BBL MGIT and Trypticase are trademarks of Becton Dickinson and Company 2004 BD
79. o por TA Number of PZA Sets Interpreted by TIP Nombre de modules PZA interpr t s par TDP Anzahl interpretierter PZA Ans tze nach TDP Numero di set PZA interpretati mediante TIP N mero de conjuntos de PZA interpretados por TA Cumulative Interpreted cumulatif interpr t Kumulativer Interpretationsprozentsatz cumulativa interpretata Porcentaje acumulado interpretado 26 1005486 0604 qxd 08 13 2004 2 38 PM Pag 7 nl 2 Di Do not reuse Nepouzivejte opakovan M ikke genbruges Niet opnieuw gebruiken Mitte kasutada korduvalt Ei saa k ytt uudelleen Usage unique Nicht wiederverwenden Mnv To Zavaxpnoyuonols te Egyszer haszn latos Non riutilizzare Tik vienkartiniam naudojimui Ma ikke gjenbrukes Nie stosowa powt rnie Nao reutilizar Nepou vajte opakovane No reusar Far ej teranv ndas Manufacturer V robce Producent Fabrikant Tootja Valmistaja Fabricant Hersteller KataokeuactT s Gy rt Ditta produttrice Gamintojas Producent Fabricante Vyrobca Tillverkare Use by Spotfebujte do Anvendes for Houdbaar tot Kasutada enne Viimeink ytt p iv A utiliser avant Verwendbar bis Huepoun a AnEns Felhaszn lhat s g d tuma Usare entro Naudokite iki Brukes for Stosowa do Utilizar em Pou ite do Usar antes de Anv nd f re YYYY MM DD YYYY MM MM end of month RRRR MM DD RRRR MM MM konec m sice AAA
80. oneous results and should not be tested Direct testing from clinical specimens is not recommended Suspensions made from solid media must be allowed to settle for the prescribed times prior to standardization Inoculum preparations made from solid media should be visually compared to a 0 5 McFarland turbidity standard failure to do so may give inaccurate results or cause an AST Set error Failure to use the 1 5 dilution of the organism suspension when indicated to inoculate the drug containing tubes may give inaccurate results Failure to use a 1 10 dilution of the organism suspension for the inoculation of the Growth Control tube may give inaccurate results or cause an AST Set error Failure to reconstitute the PZA drug with the appropriate volume of sterile distilled deionized water may give inaccurate results Thorough mixing of inoculated tubes is important Failure to mix the tubes adequately may lead to false resistant results Failure to load the tubes of the AST Set into the AST Set Carrier in the proper sequence may give inaccurate results Failure to select the appropriate set carrier drug definition may result in invalid or inaccurate results Failure to load the AST Set into the instrument correctly will result in an anonymous condition that must be resolved within eight hours If condition is not resolved within eight hours the AST Set must be discarded and set up again Failure to use the BACTEC MGIT 960 PZA Supplement in the PZA AST
81. ontr le de qualit concern s par l chec du contr le de qualit initial Si le nouveau contr le de qualit ne donne pas les r sultats escompt s ne pas communiquer les r sultats cliniques Ne pas utiliser le produit avant d avoir contact votre repr sentant local BD Souche GC MGIT PZA M tuberculosis Positif Sensible ATCC 27294 Pendant l valuation externe de la trousse BACTEC MGIT 960 PZA le temps moyen jusqu a l obtention du r sultat de la souche de contr le tait de sept jours avec une plage de quatre onze jours Un ensemencement excessif des modules PZA et une contamination des cultures de contr le de qualit taient l origine des checs les plus fr quents du contr le de qualit pendant l valuation externe RESULTATS L automate BACTEC MGIT 960 contr le les modules AST jusqu a ce que la determination de sensibilit ou de r sistance soit effectuee Une fois que le test est termin les r sultats sont donn s par l automate BACTEC MGIT 960 se reporter aux instructions AST du manuel d utilisation BACTEC MGIT 960 automate BACTEC MGIT 960 donne un r sultat d erreur X al ou d absence d interpr tation de sensibilit pour le module AST lorsque certaines conditions susceptibles d influer sur les r sultats du test sont rencontr es Les conditions susceptibles de se traduire par un r sultat d erreur X sont d crites dans les instructions AST la Section 6 R solution des probl mes dans l
82. or Intern durchgef hrte Studien zeigten da Inokula die aus einem festen Kulturmedium zubereitet wurden zwischen 2 1 x 10 und 3 9 x 10 KBE mL enthalten Reproduzierbarkeit von Charge zu Charge Die Reproduzierbarkeit von Charge zu Charge wurde anhand von f nfundzwanzig M tuberculosis St mmen einschlie lich drei ATCC St mmen beurteilt Jeder Stamm wurde im Dreifachansatz mit dem BACTEC MGIT 960 PZA Empfindlichkeitstest getestet Jedes Replikat repr sentierte eine andere Testbedingung die sich hinsichtlich der Charge des PZA Arzneimittels des PZA Zusatzes und des PZA Mediums je drei Chargen unterschieden 14 1005486 0604 qxd 08 13 2004 2 37 PM Pag 5 Die erzielten Ergebnisse wurden mit den erwarteten Ergebnissen verglichen Die insgesamte Reproduzierbarkeit f r den BACTEC MGIT 960 PZA Empfindlichkeitstest betrug 96 8 Testen eines CDC Referenzprofils Die Leistung des BACTEC MGIT 960 PZA Empfindlichkeitstests wurde anhand eines Profils aus Referenzst mmen der US amerikanischen Seuchenschutzbeh rde CDC Centers for Disease Control and Prevention Atlanta GA USA beurteilt Das Profil bestand aus neun M tuberculosis St mmen mit bekannten Empfindlichkeitsmustern unter Anwendung von BACTEC 460TB Das Profil wurde im Dreifachansatz mit dem BACTEC MGIT 960 PZA Empfindlichkeitstest getestet Die Ergebnisse der Pr fungen mit dem BACTEC MGIT 960 PZA Test wurden mit den CDC Referenzergebnissen verglichen Die insgesamte b
83. os y genera un informe con un resultado de sensibilidad o resistencia REACTIVOS El medio BACTEC MGIT 960 PZA contiene 110 uL de indicador fluorescente y 7 mL de caldo para PZA El indicador contiene cloruro pentahidratado de Tris 4 7 difenil 1 10 fenantrolina rutenio en una base de silicona Los tubos est n cerrados mediante un tap n de polipropileno El pH est ajustado a 5 9 F rmula aproximada por litro de agua purificada Caldo Middlebrook 7H9 modificado 5 9 g Peptona de case na 1 259 El kit BACTEC MGIT 960 PZA contiene dos frascos liofilizados de pirazinamida y seis frascos de suplemento PZA F rmula aproximada por frasco de antibi tico liofilizado pirazinamida 20 000 ug El suplemento BACTEC MGIT 960 PZA contiene 15 mL de suplemento F rmula aproximada por litro de agua purificada Alb mina bovina 50 0 g Catalasa 0 03 g Dextrosa iii terre nas 20 0 g Acido oleico 0 19 Estearato de polioxietileno POES 1 1g Ajustada y o enriquecida para satisfacer los criterios de rendimiento 21 1005486 0604 qxd 08 13 2004 2 37 PM Pag 2 Almacenamiento y reconstituci n de los reactivos Medio BACTEC MGIT 960 PZA tras su entrega debe almacenarse a una temperatura de 2 C a 25 C NO CONGELAR El caldo debe estar transparente e incoloro No utilizar si est turbio Reducir al m nimo la exposici n a la luz Si se almacenan tal como s
84. provetta inoculata rotta o che perde pu produrre un aerosol di micobatteri e pertanto deve essere trattata in modo opportuno Prima di eliminare tutte le provette MGIT inoculate sterilizzarle in autoclave PREPARAZIONE DEI CAMPIONI Le modalit di preparazione illustrate qui di seguito si riferiscono a colture pure di M tuberculosis Il laboratorio deve confermare mediante tecniche di identificazione appropriate che l isolato da testare una coltura pura di M tuberculosis Preparazione dell isolato da terreno solido NOTA Al fine di ottenere la concentrazione appropriata di organismi per il test di suscettibilit importante preparare l inoculo in osservanza delle seguenti istruzioni 1 Aggiungere 4 mL di brodo BBL Middlebrook 7H9 o brodo BBL MGIT in una provetta sterile da 16 5 x 128 mm con tappo e contenente 8 10 microsfere di vetro 2 Con un ansa sterile prelevare quante pi colonie possibile da una crescita di non oltre quattordici giorni cercando di non rimuovere terreno solido Sospendere le colonie nel brodo Middlebrook 7H9 3 Agitare con vortex per 2 3 minuti la sospensione per frammentare i grumi pi grossi La torbidit della sospensione deve essere superiore allo standard 1 0 McFarland 4 Lasciar riposare la sospensione per 20 minuti senza disturbarla 5 Trasferire il supernatante in un altra provetta sterile da 16 5 x 128 mm con tappo evitare di trasferire il sedimento e lasciar riposare per altri 15 mi
85. r definition when performing the AST set entry 8 Streak 0 1 mL of the organism suspension to a Trypticase Soy Agar with 5 Sheep Blood TSA II plate Enclose in a plastic bag Incubate at 35 37 C 9 Check the blood agar plate at 48 hours for bacterial contamination If the blood agar plate shows no growth then allow PZA testing to proceed If the blood agar plate shows growth discard the PZA set refer to the BACTEC MGIT 960 User s Manual AST Instructions and repeat testing with a pure culture of Mycobacterium tuberculosis User Quality Control Upon receipt of a new shipment or lot number of BACTEC MGIT 960 PZA Kit vials or BACTEC MGIT 960 PZA Medium it is recommended that the control organism shown below be tested The control organism should be a pure culture and the culture should be prepared according to SPECIMEN PREPARATION instructions The quality control QC AST Set should be prepared according to the Inoculation Procedure for BACTEC MGIT 960 PZA Susceptiblity Test instructions Important considerations when preparing the QC AST Set are the proper reconstitution of the lyophilized drug use of pure culture and the proper dilution of the QC organism for the Growth Control and PZA tubes It is important to add drug only to the corresponding MGIT tube labeled PZA The same control organism should be run as batch QC once each week when susceptibility testing is performed Observation of the proper results as shown b
86. rambe le colture Tabella 1 Risultati di isolati clinici Test di suscettibilit BACTEC MGIT 960 PZA rispetto al test BACTEC 460TB di suscettibilit Sistema BACTEC 460TB Sistema BACTEC MGIT 960 Risultati PZA previsti Risultati di suscettibilit Risultati di resistenza di accordo di accordo Terreno No di della No di della di risultati categoria risultati categoria provenienza concordi 95 CI concordi 95 CI LIQUIDO 98 9 95 7 93 9 100 78 1 99 9 SOLIDO 97 8 87 0 92 2 99 7 66 4 97 2 TUTTI 225 98 3 91 3 95 2 99 7 79 2 97 6 Tre risultati BACTEC 460TB borderline non sono inclusi in questa tabella Tutti gli isolati con risultati del test BACTEC MGIT 960 PZA discordi sono stati testati con il test di suscettibilit metodo BACTEC 460TB PZA presso due centri indipendenti ceppi con risultati discordi sono stati quelli in cui il risultato del test BACTEC MGIT 960 PZA era diverso dal risultato del test BACTEC 460TB PZA risultati borderline non sono stati inclusi nei calcoli delle prestazioni del kit BACTEC MGIT 960 PZA Dei quattro isolati discordi PZA suscettibili S BACTEC MGIT 960 R BACTEC 460TB uno risultato suscettibile presso entrambi i centri indipendenti e gli altri tre sono risultati resistenti presso entrambi i centri indipendenti tre isolati PZA resistenti discordi R BACTEC MGIT 960 S BACTEC 460TB sono risultati suscettibili presso entrambi i centri indipendenti Due dei t
87. re risultati PZA borderline BACTEC 460TB S BACTEC MGIT 960 B BACTEC 460TB sono risultati suscettibili presso entrambi i centri indipendenti Uno dei tre risultati PZA borderline BACTEC 460TB R BACTEC MGIT 960 B BACTEC 460TB risultato suscettibile presso un centro indipendente L altro centro indipendente ha ottenuto un risultato borderline DISPONIBILIT N di cat Descrizione 245128 Kit BACTEC MGIT 960 SIRE confezione da 2 fiale di farmaco liofilizzato e sei supplementi PZA 245115 Terreno BACTEC MGIT 960 PZA scatola da 25 provette RIFERIMENTI Vedere la sezione References nel testo inglese 20 1005486 0604 qxd 08 13 2004 2 37 PM Pag ge amp BD Kit BACTEC MGIT 960 PZA Para el an lisis de sensibilidad antimicobacteriana de Mycobacterium tuberculosis ar USO PREVISTO El kit BACTEC MGIT 960 PZA es un procedimiento cualitativo r pido para el an lisis de la sensibilidad de Mycobacterium tuberculosis obtenida en cultivo a pirazinamida El kit BACTEC MGIT 960 PZA se utiliza con el sistema BACTEC MGIT 960 RESUMEN Y EXPLICACI N El an lisis de sensibilidad antimicobacteriana es til para el tratamiento adecuado de pacientes con tuberculosis El tratamiento de la tuberculosis se realiza mediante polifarmacoterapia que incluye el antimicobacteriano pirazinamida Es importante que los antibi ticos antimicobacterianos recetados presenten la actividad apropiada frente a Mycobacte
88. rences im englischen Text 15 1005486 0604 qxd 08 13 2004 2 37 PM Pag 6 amp BD Kit BACTEC MGIT 960 PZA Per il test di suscettibilita del Mycobacterium tuberculosis agli agenti antimicobatterici ITALIANO USO PREVISTO Il kit BACTEC MGIT 960 PZA un procedimento qualitativo rapido per analizzare la suscettibilit alla pirazinamide PZA del Mycobacterium tuberculosis da coltura Il kit BACTEC MGIT 960 PZA viene usato con il sistema BACTEC MGIT 960 SOMMARIO E SPIEGAZIONE Il test di suscettibilit antimicobatterica importante per stabilire la terapia corretta dei pazienti affetti da tubercolosi La terapia della tubercolosi si basa generalmente su un regime a pi farmaci che includa la pirazinamide importante che i farmaci antimicobatterici prescritti manifestino attivit specifica contro il Mycobacterium tuberculosis ossia che il ceppo isolato sia sensibile al farmaco L incidenza di ceppi multiresistenti di Mycobacterium tuberculosis MDR TB diventata recentemente un serio problema di sanit pubblica La possibile resistenza a uno dei quattro farmaci primari inclusa la pirazinamide rende la malattia ancora pi difficile e costosa da curare pertanto la rilevazione rapida di questi ceppi essenziale ai fini di un trattamento efficace dei pazienti metodi pi comunemente usati per il test di suscettibilit agli agenti antimicobatterici sono due Il primo conosciuto come metodo delle p
89. res some modification from the general methods because the drug is active in vitro only at lower pH values 3 A modification to the method of proportion method was developed using a 7H10 agar medium at pH 5 5 with a drug concentration of 25 50 ug mL A limitation of the method is that at a pH of 5 5 many isolates of M tuberculosis either fail to grow or grow poorly Agar based methods such as the agar proportion method have not proven to be satisfactory for PZA susceptibility testing because of the failure of many isolates to grow when the agar has been acidified for the PZA test The second method known as the BACTEC 460TB radiometric susceptibility method 5 is based on the production of radioactive 14C labeled carbon dioxide by the growing mycobacteria manifested by a Growth Index increase in the system A modification to the BACTEC 460TB susceptibility method was developed using a modified 7H12 radiometric medium BACTEC PZA Test Medium with a reduced pH of 6 0 8 At this pH PZA activity against mycobacteria can be determined without inhibiting the growth of most M tuberculosis isolates The BACTEC 460TB PZA susceptibility test uses a pyrazinamide drug concentration of 100 ug mL Susceptibility testing in the BACTEC 460TB System has proven to be satisfactory and is presently considered the reference method for PZA susceptibility testing The National Committee for Clinical Laboratory Standards NCCLS recommends the BACTEC 460TB method for PZA suscepti
90. rium tuberculosis es decir que la cepa aislada sea sensible al antibi tico Las cepas de Mycobacterium tuberculosis multirresistente TB MR se han convertido ltimamente en un problema grave para la salud publica La resistencia a cualquiera de los antibi ticos principales incluida la pirazinamida hace que la enfermedad sea m s dif cil y costosa de tratar La r pida detecci n de estas cepas aisladas resistentes es esencial para proporcionar un tratamiento eficaz al paciente Para el an lisis de la sensibilidad antimicobacteriana se han utilizado generalmente dos m todos El primer m todo conocido como m todo de las proporciones utiliza el agar Middlebrook y Cohn 7H10 Este m todo compara el n mero de colonias en medios con y sin antibi tico El an lisis de pirazinamida requiere cierta modificaci n de los m todos generales ya que el antibi tico es activo in vitro s lo con valores de pH bajos3 Se desarroll una modificaci n del m todo de las proporciones utilizando un medio de agar 7H10 a pH 5 5 con una concentraci n de antibi tico de 25 pg mL a 50 ug mL4 Una limitaci n del m todo es que con un pH de 5 5 muchas cepas aisladas de M tuberculosis no crecen o crecen muy poco Los m todos que utilizan agar como el m todo de las proporciones no han demostrado ser satisfactorios en el an lisis de sensibilidad a PZA debido a que muchas cepas aisladas no crecen cuando el agar ha sido acidificado para el an lisis de PZA
91. roporzioni utilizza Agar Middlebrook e Cohn 7H10 e confronta i conteggi delle colonie presenti su terreni contenenti e su terreni senza farmaci Il test di suscettibilit alla pirazinamide richiede alcune modifiche rispetto ai metodi convenzionali in quanto il farmaco attivo in vitro solo ai valori inferiori di pH 3 Una modifica del metodo delle proporzioni stata realizzata utilizzando un terreno agar 7H10 a pH 5 5 con una concentrazione di farmaco di 25 50 ug mL 4 Questo metodo presenta tuttavia una limitazione in quanto ad un pH di 5 5 molti isolati di M tuberculosis non crescono o esibiscono una crescita inadeguata metodi su base agar come il metodo delle proporzioni non sono risultati soddisfacenti per il test della suscettibilit alla PZA in quanto la crescita di molti isolati venuta meno quando l agar stato acidificato per il test PZA Il secondo metodo noto come metodo della suscettibilit radiometrica BACTEC 460TB basato sulla produzione di anidride carbonica radioattiva marcata con 14C da parte dei micobatteri in crescita Tale produzione evidenziata da un aumento dell indice di crescita nel sistema Una modifica del metodo della suscettibilit BACTEC 460TB stata realizzata utilizzando un terreno radiometrico 7H12 modificato il terreno per test BACTEC PZA con un pH ridotto pari a 6 0 6 A tale pH possibile determinare l attivit antimicobatterica della PZA senza inibire la crescita della maggior parte degli isol
92. s especies de micobacterias ya que pueden producir resultados err neos No se recomienda el an lisis directo de muestras cl nicas Se debe permitir que las suspensiones preparadas a partir de medios s lidos reposen durante el tiempo especificado antes de realizar la estandarizaci n Las preparaciones de in culos a partir de medios s lidos deben compararse visualmente con un patr n de turbidez 0 5 de McFarland en caso contrario pueden obtenerse resultados inexactos o puede producirse un error del conjunto de AST Si no se utiliza la diluci n de 1 5 de la suspensi n de microorganismos en los casos en que est indicado para inocular los tubos que contienen el antibi tico pueden obtenerse resultados inexactos Si no se utiliza una diluci n de 1 10 de la suspensi n de microorganismos para inocular el tubo de control de crecimiento pueden obtenerse resultados inexactos o puede producirse un error del conjunto de AST Si no se reconstituye el antibi tico PZA con el volumen adecuado de agua est ril destilada desionizada pueden obtenerse resultados inexactos Es importante mezclar bien los tubos inoculados En caso contrario pueden obtenerse resultados falsos de resistencia Si no se colocan los tubos del conjunto de AST en el transportador del conjunto de AST en el orden correcto pueden obtenerse resultados inexactos Si no se selecciona la definici n apropiada de antibi ticos del transportador del conjunto de AST pueden obtenerse
93. sceptibility test is 98 7 Clinical Evaluation The BACTEC MGIT 960 PZA susceptibility test was evaluated at four geographically diverse clinical sites composed of regional reference centers and university hospital based laboratories including two ex US sites The BACTEC MGIT 960 PZA susceptibility test was compared to the BACTEC 460TB PZA susceptibility test method Reproducibility Testing The reproducibility of the BACTEC MGIT 960 PZA susceptibility test was evaluated at the clinical sites using a panel of five qualified strains The BACTEC MGIT 960 PZA test results were compared to the expected results The overall reproducibility for the BACTEC MGIT 960 PZA susceptibility test is 94 CDC Challenge Panel Testing The performance of the BACTEC MGIT 960 PZA susceptibility test was evaluated at each of the four clinical sites using a panel of challenge strains obtained from the Centers for Disease Control and Prevention CDC Atlanta GA USA The panel consisted of nine strains of M tuberculosis with known susceptibility patterns using BACTEC 460TB Of the thirty six PZA results collected with the BACTEC MGIT 960 PZA susceptibility test thirty three agreed with the CDC expected results The calculated percent agreement to the CDC expected results for the BACTEC MGIT 960 PZA susceptibility test is 91 7 1005486 0604 qxd 08 13 2004 2 37 PM Pag Clinical Isolate Testing A total of 118 clinical isolates of M tuberculosis were tested
94. set may give inaccurate results DO NOT add BACTEC MGIT 960 SIRE Supplement or BACTEC MGIT 960 Growth Supplement to the PZA AST set Failure to use BACTEC MGIT 960 PZA Medium for the PZA AST set may give inaccurate results DO NOT substitute BBL MGIT 7 mL Mycobacteria Growth Indicator Tubes for BACTEC MGIT 960 PZA Medium EXPECTED VALUES A total of 118 clinical isolates of M tuberculosis were tested with the BACTEC MGIT 960 PZA susceptibility test at four geographically diverse sites The testing included both fresh clinical and subcultured isolates from both liquid and solid culture sources A total of 228 PZA susceptibility tests liquid and solid were performed During the external evaluation of the BACTEC MGIT 960 PZA Kit there were nine PZA tests from clinical isolates that required repeat testing due to contamination six isolates or overinoculation procedural errors three isolates The average time to result for the BACTEC MGIT 960 PZA susceptibility test is seven days with a range from four to seventeen days The data are shown in Figure 1 page 26 PERFORMANCE CHARACTERISTICS Analytical Studies Liquid and Solid Media AST Inoculum Ranges Liquid media The recommended procedure for preparing a PZA Set from a positive MGIT 7 mL tube uses a direct inoculum on Day 1 and Day 2 post positivity and a dilute 1 5 inoculum on Day 3 to Day 5 post positivity Internal studies show that inocula prepared from a Day 1 to Day 5 positive MGIT 7 m
95. skrepanten BACTEC MGIT 960 PZA Testergebnissen wurden an zwei unabh ngigen Standorten mit dem BACTEC 460TB PZA Empfindlichkeitstest getestet Bei den diskrepanten Ergebnissen handelte es sich um diejenigen St mme bei denen das BACTEC MGIT 960 PZA Testergebnis vom BACTEC 460TB PZA Testergebnis abwich Grenzwertige Ergebnisse gingen nicht in die Leistungsberechnungen f r das BACTEC MGIT 960 PZA Kit ein Von den vier diskrepanten Isolaten S BACTEC MGIT 960 R BACTEC 460TB mit PZA Empfindlichkeit erbrachte eines an beiden Standorten empfindlich Ergebnisse die anderen drei erbrachten an beiden Standorten resistent Ergebnisse Alle drei diskrepanten Isolate R BACTEC MGIT 960 S BACTEC 460TB mit PZA Resistenz erbrachten an beiden unabh ngigen Standorten empfindlich Ergebnisse Zwei der drei grenzwertigen BACTEC 460TB PZA Ergebnisse S BACTEC MGIT 960 B BACTEC 460TB erbrachten empfindlich Ergebnisse an beiden unabh ngigen Standorten Eines der drei grenzwertigen BACTEC 460TB PZA Ergebnisse R BACTEC MGIT 960 B BACTEC 460TB erbrachte ein empfindlich Ergebnis an einem unabh ngigen Standort Der andere unabh ngige Standort ermittelte ein grenzwertiges Ergebnis LIEFERBARE PRODUKTE Best Nr Beschreibung 245128 BACTEC MGIT 960 PZA Kit Karton mit 2 Fl schchen Iyophilisierten Arzneimittels und sechs Fl schchen PZA Zusatz 245115 BACTEC MGIT 960 PZA Medium Karton mit 25 R hrchen LITERATUR Siehe den Abschnitt Refe
96. t dans un troisi me tube st rile de 16 5 x 128 mm REMARQUE A ce stade la turbidit de la suspension de microorganismes devrait tre sup rieure au standard McFarland 0 5 7 Ajuster la suspension a une turbidit equivalente au standard McFarland 0 5 en la comparant visuellement a un standard de turbidit McFarland 0 5 La turbidit ne doit pas tre inf rieure au standard McFarland 0 5 8 Diluer 1 mL de la suspension ajust e dans 4 mL de s rum physiologique st rile dilution 1 5 Utiliser cela comme inoculum AST et passer a la M thode d ensemencement pour le test de sensibilit BACTEC MGIT 960 PZA Pr paration a partir d un tube BACTEC MGIT positif 1 Le premier jour d un tube BACTEC MGIT positif dans l automate est consid r comme Jour 0 2 Pour la pr paration de l inoculum pour le test un tube MGIT 7 mL positif doit tre utilis le jour suivant celui ou il a t d termin comme positif par l automate BACTEC MGIT 960 Jour 1 et au plus dans les cing jours Jour 5 suivant l apparition de la positivit Un tube positif depuis plus de cing jours doit tre repiqu dans un nouveau tube MGIT 7 mL contenant le suppl ment de croissance BACTEC MGIT 960 et teste sur l automate BACTEC MGIT 960 jusqu a ce qu il soit d termin comme positif puis utilis dans les cing jours qui suivent 3 Si le tube est positif du Jour 1 ou du Jour 2 aucune dilution n est requise Utiliser cela comme inoculum AST et passer a
97. taminate o contenenti ceppi multipli di micobatteri possono dare luogo ad artefatti e di conseguenza non devono essere analizzate Non si consiglia l analisi diretta da campioni clinici Prima di standardizzare le sospensioni preparate da terreni solidi lasciarle riposare per il tempo stabilito Le preparazioni per inoculo provenienti da terreni solidi devono essere confrontate visivamente ad uno standard di torbidit 0 5 McFarland in quanto altrimenti potrebbero dar luogo a risultati non accurati o causare un errore del set AST Qualora si ometta di eseguire la diluizione 1 5 della sospensione di batteri se indicata per inoculare le provette di farmaco possibile incorrere in risultati non accurati Qualora si ometta di eseguire la diluizione 1 10 della sospensione di batteri per inoculare la provetta del Controllo di crescita possibile incorrere in risultati non accurati o causare un errore del set AST La mancata ricostituzione della pirazinamide con il volume corretto di acqua distillata deionizzata sterile pu dar luogo a risultati non accurati importante che il contenuto delle provette inoculate venga mescolato bene in quanto una miscelazione inadeguata pu dar luogo a falsi risultati di resistenza Il mancato caricamento delle provette del set AST nel carrello secondo l ordine appropriato pu dar luogo a risultati non accurati La selezione di una definizione errata di farmaci nel carrello del set pu dar luogo a risultati
98. tas en el apartado PREPARACI N DE LAS MUESTRAS El conjunto de AST de control de calidad QC debe prepararse conforme a las instrucciones descritas en el apartado Procedimiento de inoculaci n para el an lisis de sensibilidad BACTEC MGIT 960 PZA Algunas consideraciones importantes al preparar el conjunto de AST de QC son la correcta reconstituci n del antibi tico liofilizado el uso de un cultivo puro y la correcta diluci n del microorganismo de QC para los tubos de control de crecimiento y de PZA Es importante agregar el antibi tico nicamente al tubo MGIT correspondiente que tiene la etiqueta PZA Cuando se realicen an lisis de sensibilidad deber analizarse el mismo microorganismo de control como control de calidad de lote Una vez a la semana La observaci n de los resultados apropiados mostrados a continuaci n en el plazo de 4 a 20 d as indica que los reactivos BACTEC MGIT 960 PZA est n listos para usarse en el an lisis de cepas aisladas de pacientes Si no se observan los resultados apropiados no deben informarse los resultados del paciente Debe repetirse el control de calidad y toda cepa aislada de pacientes afectada por el fallo inicial del control de calidad Si el control de calidad repetido no produce los resultados esperados no deben informarse los resultados del paciente No utilizar el producto hasta contactar con el representante local de BD Cepa GC MGIT PZA M tuberculosis Positivo Sensible ATCC
99. ture au pyrazinamide PZA La trousse BACTEC MGIT 960 PZA est utilis e avec le syst me BACTEC MGIT 960 R SUM ET EXPLICATION Le test de sensibilit aux antimycobact riens est pr cieux pour un traitement appropri des patients atteints de tuberculose Le traitement de la tuberculose consiste en g n ral administrer un ensemble de plusieurs antibiotiques dont un antimycobact rien le pyrazinamide Il importe que les antimycobact riens prescrits d montrent une activit sp cifique contre Mycobacterium tuberculosis v rifi e par la sensibilit de l isolat ces antibiotiques Des souches de Mycobacterium tuberculosis r sistantes plusieurs m dicaments MDR TB cr ent depuis peu un probl me de sant publique s rieux La r sistance l un des antibiotiques primaires y compris le pyrazinamide rend le traitement de la maladie plus difficile et plus co teux La d tection rapide de ces isolats r sistants est essentielle pour une prise en charge efficace des patients Deux m thodes ont t largement utilis es pour tester la sensibilit aux antimycobact riens La premi re m thode dite M thode des Proportions utilise la g lose de Middlebrook et Cohn 7H10 Elle compare le nombre de colonies sur g lose contenant l antibiotique celui obtenu sur milieu sans antibiotique Le test pour le pyrazinamide requiert quelques modifications de la m thode g n rale parce que cet antibiotique n est actif in vitro qu aux pH pl
100. ug name and concentration when reporting results The Pulmonary and or Infectious Disease specialist in TB control should be consulted concerning the appropriate therapeutic regimen and dosages Mono resistance to pyrazinamide is uncommon therefore in the event of unexpected resistant results verify purity and identification of the isolate tested as M tuberculosis Guidelines for mycobacterial purity checks can be found in the NCCLS M24 standard BACTEC MGIT 960 PZA result reporting Drug BACTEC MGIT concentration 960 result Recommended Report Action Isolate tested with BACTEC MGIT 960 No action Susceptible PZA 100 pg mL and result is susceptible Isolate tested with BACTEC MGIT 960 If isolate is mono PZA 100 pg mL Resistant PZA 100 pg mL and result is resistant resistant to PZA confirm that isolate tested is a pure culture of Mycobacterium tuberculosis Error X No report Repeat test 1005486 0604 qxd 08 13 2004 2 37 PM Pag LIMITATIONS OF THE PROCEDURE The BACTEC MGIT 960 PZA susceptibility test does not interpret the degree of susceptibility of the isolate being tested Results are reported as either susceptible or resistant The BACTEC MGIT 960 PZA susceptibility test can only be performed using the BACTEC MGIT 960 instrument The PZA Sets cannot be read manually Use only pure cultures of M tuberculosis Cultures that are contaminated or that may contain multiple species of mycobacteria may give err
101. ulosis dans un tube contenant un antibiotique avec celle obtenue dans un tube sans antibiotique Contr le de croissance L automate BACTEC MGIT 960 contr le en permanence les tubes pour d celer toute augmentation de fluorescence L automate compare la fluorescence du tube contenant l antibiotique celle du tube Contr le de croissance pour tablir les r sultats de sensibilit L automate BACTEC MGIT 960 interpr te automatiquement ces r sultats et donne un r sultat de sensibilit ou de r sistance R ACTIFS Le tube de milieu BACTEC MGIT 960 PZA contient 110 uL d un indicateur fluorescent et 7 mL de bouillon pour PZA L indicateur contient du Tris 4 7 diph nyl 1 10 ph nanthroline ruth nium chlorure pentahydrat dans une base de silicone lastom re Les tubes sont bouch s avec des capuchons en polypropyl ne Le pH est ajust 5 9 Formule approximative par L d eau purifi e Bouillon modifi de Middlebrook 7H9 5 9 g Peptone cas ine 1 259 La trousse BACTEC MGIT 960 PZA contient deux flacons lyophilis s de pyrazinamide et six flacons de suppl ment PZA Formule approximative par flacon d antibiotique lyophilis Pyrazinamide 20 000 ug Le supplement BACTEC MGIT 960 PZA contient 15 mL de compl ment d enrichissement Formule approximative par L d eau purifi e Albumine bovine Catalase 0 03 g Dextrose conil ee oes Acide ol ique 0 19 St arate d
102. ulture sur milieu solide comptent de 2 1 x 105 3 9 x 106 CFU mL Reproductibilit de lot La reproductibilit de lot a t valu e en utilisant vingt cing souches de M tuberculosis y compris trois souches ATCC Chaque souche a t test e en triple exemplaire avec le test de sensibilit BACTEC MGIT 960 PZA Chaque r p tition de test repr sentait une condition de test distincte diff renci e par les lots d antibiotique PZA de suppl ment PZA et de milieu PZA utilis s trois lots chacun Les r sultats obtenus taient compar s aux r sultats attendus La reproductibilit globale du test de sensibilit BACTEC MGIT 960 PZA est de 96 8 1005486 0604 qxd 08 13 2004 2 37 PM Pag 0 Test du panel d preuve du CDC Les performances du test de sensibilit BACTEC MGIT 960 PZA ont t valu es en utilisant un panel de souches d preuve obtenu aupr s du Centers for Disease Control and Prevention Centre pid miologique d Atlanta aux Etats Unis Le panel se composait de neuf souches de M tuberculosis aux profils de sensibilit connus en utilisant le BACTEC 460TB Chaque panel a t test en triple exemplaire avec le test de sensibilit BACTEC MGIT 960 PZA Les r sultats obtenus avec BACTEC MGIT 960 PZA ont t compar s aux r sultats attendus du CDC La concordance globale avec les r sultats attendus du CDC pour le test de sensibilit BACTEC MGIT 960 PZA est de 98 7 Evaluation clinique Le test de sensibi
103. un range da quattro a diciassette giorni dati sono illustrati nella Figura 1 pagina 26 PRESTAZIONI METODOLOGICHE Studi analitici Range per inoculi AST su terreni liquidi e solidi Terreni liquidi Per preparare un set PZA da una provetta MGIT da 7 mL positiva la procedura consigliata prevede l impiego di un inoculo diretto nel Giorno 1 e nel Giorno 2 post positivit e di un inoculo diluito 1 5 dal Giorno 3 al Giorno 5 post positivit Gli studi interni indicano che gli inoculi preparati dal Giorno 1 al giorno 5 da una provetta MGIT da 7 mL positiva rientrano in un range tra 2 0 x 104 e 7 5 x 106 CFU mL Terreni solidi Per preparare un set PZA da una crescita di terreni solidi fino a 14 giorni dalla prima crescita osservata la procedura consigliata prevede l impiego di una diluizione 1 5 di una sospensione di batteri equivalente ad uno standard 0 5 McFarland Gli studi interni indicano che gli inoculi preparati da coltura su terreno solido sono compresi in un range tra 2 1 x 105 e 3 9 x 106 CFU mL Riproducibilit tra i lotti La riproducibilit tra i lotti stata valutata usando venticinque ceppi di M tuberculosis inclusi tre ceppi ATCC Ogni ceppo stato testato in triplicato con il test di suscettibilit BACTEC MGIT 960 PZA Ogni replicato ha rappresentato una condizione di analisi separata differenziata in base al lotto di farmaco PZA al supplemento PZA e al terreno PZA utilizzati tre lotti di ciascuno I risultati
104. urden 228 PZA Empfindlichkeitspr fungen fl ssiger und fester Kulturen durchgef hrt Bei der extern durchgef hrten Beurteilung des BACTEC MGIT 960 PZA Kits erforderten neun PZA Tests klinischer Isolate erneute Tests aufgrund von Kontaminierung sechs Isolate oder ber Inokulation Verfahrensfehlern drei Isolate Die durchschnittliche Zeitspanne bis zum Erhalt eines Ergebnisses betr gt beim BACTEC MGIT 960 PZA Empfindlichkeitstest sieben Tage Bereich vier bis siebzehn Tage Diese Daten sind in Abbildung 1 aufgef hrt Seite 26 LEISTUNGSMERKMALE Analytische Studien AST Inokulationsbereiche bei fl ssigen und festen Medien Fl ssige Medien Das empfohlene Verfahren zur Zubereitung eines PZA Ansatzes aus einem positiven MGIT 7 mL R hrchen schreibt die Verwendung eines direkten Inokulums von Tag 1 und Tag 2 nach dem Positivwerden und eines im Verh ltnis 1 5 verd nnten Inokulums von Tag 3 bis Tag 5 nach dem Positivwerden vor Intern durchgef hrte Studien zeigten da Inokula die aus einem positiven MGIT 7 mL R hrchen von Tag 1 bis Tag 5 nach dem Positivwerden zubereitet wurden zwischen 2 0 x 10 und 7 5 x 10 KBE mL enthalten Feste Medien Das empfohlene Verfahren zur Zubereitung eines PZA Ansatzes aus dem Wachstum eines festen Mediums bis zu 14 Tage nach Erscheinen des ersten sichtbaren Wachstums schreibt die Verwendung einer im Verh ltnis 1 5 verd nnten Organismussuspension mit einer Tr bung entsprechend 0 5 McFarland v
105. us faibles Une modification de la m thode des proportions a t mise au point en utilisant un milieu g los 7H10 pH 5 5 avec une teneur en antimycobact rien de 25 50 ug mL 4 Le probl me de cette m thode est qu pH 5 5 de nombreux isolats de M tuberculosis ne se d veloppent pas du tout ou se d veloppent tr s peu Les m thodes sur g lose telles que la m thode des proportions n ont pas donn satisfaction dans le cas du test de sensibilit au PZA en raison de l incapacit de nombreux isolats se d velopper sur une g lose qui a t acidifi e sp cialement pour ce test de sensibilit au PZA La seconde m thode ou m thode de respirom trie radiom trique BACTEC 460TB utilise la production de dioxyde de carbone radioactif marqu au 14C par le d veloppement mycobact rien qui se traduit par une augmentation de l indice de croissance dans le syst me Une modification de la m thode de sensibilit BACTEC 460TB a t mise au point en utilisant un milieu radiom trique 7H12 modifi le milieu de test BACTEC PZA avec un pH r duit de 6 0 ce pH l activit PZA contre les mycobact ries peut tre d termin e sans inhiber la croissance de la plupart des isolats de M tuberculosis Le test de sensibilit BACTEC 460TB PZA utilise une concentration de pyrazinamide de 100 g mL Les tests de sensibilit dans le syst me BACTEC 460TB se sont av r s satisfaisants et sont actuellement consid r s comme m thode de r f re
106. usceptibility results The BACTEC MGIT 960 instrument automatically interprets these results and reports a susceptible or resistant result REAGENTS The BACTEC MGIT 960 PZA Medium tube contains 110 uL of fluorescent indicator and 7 mL of PZA broth The indicator contains Tris 4 7 diphenyl 1 10 phenanthroline ruthenium chloride pentahydrate in a silicone rubber base The tubes are capped with a polypropylene cap The pH is adjusted to 5 9 Approximate Formula Per L of Purified Water Modified Middlebrook 7H9 broth 5 99 Casein peptone 1 25g BACTEC MGIT 960 PZA Kit contains two lyophilized vials of pyrazinamide and six vials of PZA Supplement Approximate Formula Per Vial Lyophilized drug Pyrazinamide 20 000 ug 1005486 0604 qxd 08 13 2004 2 37 PM Pag BACTEC MGIT 960 PZA Supplement contains 15 mL of enrichment Approximate Formula Per L Purified Water Bovine albumin 50 0g Catalase 0 03 g Dextrose sr eg 20 0 g Oleic Acid 0 19 Polyoxyethylene stearate POES 1 1g Adjusted and or supplemented as required to meet performance criteria Storage and reconstitution of reagents BACTEC MGIT 960 PZA Medium On receipt store at 2 25 C DO NOT FREEZE Broth should appear clear and colorless Do not use if turbid Minimize exposure to light Tubes stored as labeled prior to use may be inoculated up to the expiration date BACTEC MGIT 960 PZA Drug
107. utorizzato nella Comunit europea Jgaliotasis atstovas Europos Bendrijoje Autorisert representant i EU Autoryzowane przedstawicielstwo w Unii Europejskiej Representante autorizado na Uni o Europeia Autorizovan z stupca v Eur pskom spolo enstve Representante autorizado en la Comunidad Europea Auktoriserad representant i EU In Vitro Diagnostic Medical Device L ka sk za zen ur en pro diagnostiku in vitro In vitro diagnostisk medicinsk anordning Medisch hulpmiddel voor in vitro diagnose In vitro diagnostika meditsiiniaparatuur L kinn llinen in vitro diagnostiikkalaite Dispositif m dical de diagnostic in vitro Medizinisches In vitro Diagnostikum In vitro dtayvworikr tatpiKr ouokeun In vitro diagnosztikai orvosi eszk z Dispositivo medico diagnostico in vitro In vitro diagnostikos prietaisas In vitro diagnostisk medisinsk utstyr Urz dzenie medyczne do diagnostyki in vitro Dispositivo m dico para diagn stico in vitro Medic nska pom cka na diagnostiku in vitro Dispositivo m dico de diagn stico in vitro Medicinsk anordning f r in vitro diagnostik Temperature limitation Teplotn omezen Temperaturbegr nsning Temperatuurlimiet Temperatuuri piirang L mp tilarajoitus Temp rature limite Zul ssiger Temperaturenbereich Opto Bepuokpac as H mersekleti hat r Temperatura limite Laikymo temperat ra Temperaturbegrensning Ograniczenie temperatury Limita o
108. vos de M tuberculosis requiere procedimientos equipo de contenci n e instalaciones de nivel 3 de seguridad biol gica Lea y siga las instrucciones contenidas en los prospectos de los diferentes componentes incluido el tubo indicador de crecimiento micobacteriano BBL MGIT de 7 mL Antes de usarlos el usuario debe revisar los tubos y frascos en busca de indicios de contaminaci n o da os Deben desecharse los tubos o frascos que no parezcan aptos Deben examinarse detenidamente los tubos que se hayan ca do Deben desecharse los tubos que presenten da os En caso de que se rompa un tubo 1 cerrar los cajones del instrumento 2 apagar el instrumento 3 desalojar la zona inmediatamente 4 consultar las normas del centro o de los CDC Un tubo inoculado que tiene p rdidas o est roto puede producir un aerosol de micobacterias deben observarse las normas de manipulaci n adecuadas Todos los tubos MGIT inoculados deben ser esterilizados en autoclave antes de su eliminaci n PREPARACI N DE LAS MUESTRAS Todas las preparaciones detalladas a continuaci n deben realizarse a partir de cultivos puros de M tuberculosis El laboratorio debe confirmar mediante t cnicas de identificaci n apropiadas que la cepa aislada que se va a analizar sea un cultivo puro de M tuberculosis Preparaci n de la cepa aislada a partir de medios s lidos NOTA Es importante preparar el in culo conforme a las instrucciones presentadas a continuaci n para obt
109. with the BACTEC MGIT 960 PZA susceptibility test and the BACTEC 460TB PZA susceptibility test This included testing of both fresh clinical and subcultured isolates from both liquid and solid culture sources This generated a total of 228 test results Table 1 presents the results from clinical isolate testing for PZA drug at 100 ug mL from liquid source cultures from solid source cultures and both source cultures combined Table 1 Clinical Isolate Results BACTEC MGIT 960 PZA susceptibility test compared to BACTEC 460TB susceptibility test BACTEC 460TB System BACTEC MGIT 960 System Expected PZA Results Susceptible Results Resistant Results Category Category Tests agreement agreement 95 CH 95 CI LIQUID 112 98 9 95 7 93 9 100 78 1 99 9 SOLID 113 97 8 87 0 92 2 99 7 66 4 97 2 ALL 225 179 98 3 91 3 95 2 99 7 79 2 97 6 Three BACTEC 460TB borderline results are not included in this table All isolates with discordant BACTEC MGIT 960 PZA test results were tested using the BACTEC 460TB PZA susceptibility test at two independent sites Discordant results were those strains where the BACTEC MGIT 960 PZA test result differed from the BACTEC 460TB PZA test result Borderline results are not included in the performance calculations for the BACTEC MGIT 960 PZA Kit Of the four discordant PZA susceptible S BACTEC MGIT 960 R BACTEC 460TB isolates tested one had susceptible results from both independent sites and the oth
110. x souches dont le r sultat du test BACTEC MGIT 960 PZA diff rait du r sultat du test BACTEC 460TB PZA Les r sultats limites ne font pas partie des calculs de performances li s la trousse BACTEC MGIT 960 PZA Parmi les quatre isolats test s discordants pour la sensibilit PZA S BACTEC MGIT 960 R BACTEC 460TB un isolat a donn lieu un r sultat de sensibilit sur les deux centres ind pendants et les trois autres isolats ont donn lieu un r sultat de r sistance sur les deux centres ind pendants Parmi les trois isolats test s discordants pour la r sistance PZA R BACTEC MGIT 960 S BACTEC 460TB tous les isolats pr sentaient des r sultats de sensibilit sur les deux centres ind pendants Deux des trois r sultats PZA limites obtenus avec le test BACTEC 460TB S BACTEC MGIT 960 B BACTEC 460TB pr sentaient des r sultats de sensibilit dans les deux centres ind pendants L un des trois r sultats PZA limites obtenus avec le test BACTEC 460TB R BACTEC MGIT 960 B BACTEC 460TB pr sentaient des r sultats de sensibilit dans un centre ind pendant L autre centre ind pendant d terminait un r sultat limite CONDITIONNEMENT R f Description 245128 Trousse BACTEC MGIT 960 PZA carton de 2 flacons lyophilis s et de 6 suppl ments PZA 245115 Milieu BACTEC MGIT 960 PZA carton de 25 tubes R F RENCES Voir la section References dans la notice en anglais 10 1005486 0604 qx
111. zzata di streptomicina del kit BACTEC MGIT 960 PZA con 2 5 mL di acqua distillata deionizzata sterile per ottenere una soluzione stock di 8000 ug mL AVVERTENZE E PRECAUZIONI Per uso diagnostico in vitro CAMPIONI DI ANALISI POTENZIALMENTE INFETTI campioni clinici possono contenere microrganismi patogeni inclusi i virus dell epatite e il virus dell immunodeficienza umana Nel maneggiare qualsiasi oggetto contaminato con sangue o altri liquidi biologici occorre attenersi alle direttive del presidio locale e alle precauzioni standard 710 Quando si lavora con una coltura in crescita di M tuberculosis necessario attenersi alle procedure di sicurezza biologica BSL di livello 3 e disporre di attrezzature e recipienti conformi alle misure di contenimento Leggere e seguire le istruzioni contenute nei fogli illustrativi contenuti nelle rispettive confezioni compreso quello della provetta di indicatore di crescita dei micobatteri BBL MGIT da 7 mL Prima dell uso esaminare le provette e i flaconi per accertarsi che non siano contaminati o danneggiati Eliminare le provette e i flaconi che risultano non idonei Esaminare con attenzione le provette cadute ed eliminarle se risultano danneggiate In caso di rottura di una provetta 1 chiudere i cassetti dello strumento 2 spegnere lo strumento 3 sgombrare immediatamente la zona 4 consultare i regolamenti del laboratorio utilizzato o dei CDC Centers for Disease Control Una

BACTEC MGIT 960-PZA-Kit - I-PAQT

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