Anti-HCV Elisa - DIAsource Immunoassays
Contents
1. EXTR SOLN conc S mbolos utilisados SERUM ANTISERUM IMMUNOADSORBENT NEUTR Tamp n de lavado Revision nr 1407232. absorbance moyenne du contr le n gatif Exemple N d chantillon Absorbance 1 0 045 2 0 060 3 0 051 NCx 0 045 0 060 0 051 3 0 052 Le NCx doit tre lt 0 200 sinon le test n est pas valide 4 6 2 Calcul du PCx absorbance moyenne du contr le positif Exemple N d chantillon Absorbance 1 1 510 2 1 826 PCx 1 510 1 826 2 1 668 Le PCx doit tre 2 0 600 sinon le test n est pas valide 4 6 3 Calcul de la valeur P N P N PCx NCx Exemple P N 1 668 0 051 1 617 La valeur P N doit tre gt 0 400 sinon le test n est pas valide 4 6 4 Calcul de la valeur du seuil de positivit Valeur du seuil de positivit NCx 0 100 Exemple Valeur du seuil de positivit 0 053 0 100 0 153 4 6 5 Calculer l indice du seuil de positivit des chantillons Indice du seuil de positivit Valeur DO de l chantillon Valeur du seuil de positivit Exemple La valeur de l chantillon est 0 596 Indice du seuil de positivit 0 596 0 153 3 895 4 6 6 Zone grise Indice du seuil de positivit 1 000 1 500 N de catalogue KAPG4NAE3 N de Pl 1701265 N de r vision 110711 1 4 7 Contr le qualit du run de tests 4 7 1 Le NCx doit tre lt 0 200 sinon le test n est pas valide 4 7 2 Le PCx doit tre 2 0 600 sinon le test n est pas valide 4 7 3 La valeur P N doit tre 2 0 400 sinon le test n est pas valide REMARQUE Contr le n gati
3. order to avoid hemolysis Any particulates e g fibrin clots erythrocytes contained in the specimen should be removed prior to use 4 2 2 Specimens must be stored at 2 to 8 C and avoided heat inactivation to minimize deterioration For long term storage they should be frozen below 20 C Storage in self defrosting freezer is not recommended 4 2 3 Frozen specimens must be thoroughly thawed and mixed homogenously before test 4 2 4 Avoid multiple freeze thaw procedures 4 2 5 Incompletely coagulated sera and microbial contaminated specimens should not be used 4 3 Reagents Storage 4 3 1 The kit must be stored at 2 to 8 C Do not freeze 4 3 2 Strips of the plate should be used within one month once the original aluminum foil bag is opened The unused strips should be kept in the aluminum foil bag and taped the opening tightly 4 3 3 Return reagents to 2 to 8 C immediately after use 4 3 4 Washing Solution D 20X Concentrate can be stored at room temperature to avoid crystallization because the kits are stored and shipped at 2 to 8 C If the crystal has been precipitated before use warm up the solution in 37 C water bath till crystal dissolved 4 4 Plate Washing Procedure 4 4 1 Preparation of washing solution Dilute Washing Solution D 20X Concentrate with distilled or de ionized water to 1 20 dilution Do not use tap water 4 4 2 Plate washing a For plate washer with overflow aspirating function 6 cycle
4. thodes suivantes pour la coloration A M langer imm diatement avant utilisation des volumes identiques de chromog ne TMB concentr et de tampon du substrat dans un r cipient propre Ajouter 100 ul de la solution de m lange chaque puits y compris au blanc B Ajouter tout d abord 50 ul de chromog ne TMB concentr puis ajouter 50 ul de tampon du substrat chaque puits y compris au blanc Bien m langer avec pr caution REMARQUE Le chromog ne TMB concentr doit tre incolore bleu clair sinon il faut le jeter Le m lange de chromog ne TMB concentr et de tampon du substrat doit tre utilis dans les 30 minutes apr s le m lange Le m lange doit tre tenu l cart de toute lumi re intense 4 5 15 Sceller la plaque l aide d une bande adh sive et incuber 37 1 C pendant 15 minutes 4 5 16 Stopper la r action en ajoutant 100 ul de solution d arr t chaque puits y compris au blanc 4 5 17 D terminer l absorbance des contr les et des chantillons dans les 15 minutes mesur e a 450 nm avec une longueur d onde de r f rence s lectionn e entre 620 et 690 nm Utiliser le puits blanc pour d finir le z ro du spectrophotom tre REMARQUE La couleur du blanc doit tre incolore jaune clair sinon les r sultats du test sont invalides Blanc du substrat la valeur d absorbance doit tre inf rieure une DO de 0 100 4 6 Calcul des donn es test es 4 6 1 Calcul du NCx
5. avant traitement l aide d hypochlorite de sodium tel que mentionn ci dessus et doivent tre st rilis s pendant 30 minutes pour obtenir une d sinfection effective 4 1 11 La solution d arr t est un irritant pour la peau les yeux les voies respiratoires et les muqueuses viter le contact de la solution d arr t avec la peau et les muqueuses En cas de contact laver imm diatement et abondamment l eau En cas d inhalation respirer imm diatement de l air frais et consulter un m decin en cas de douleur 4 1 12 Le chromog ne TMB concentr contient un solvant organique inflammable Le chromog ne TMB concentr contient du sulfoxyde de dim thyle un irritant pour la peau et les muqueuses 4 1 13 Bien que tous les chantillons d origine humaine soient test s exempts d HBsAg et d anti HIV et ont t inactiv s 56 C pendant une heure le r actif doit tre manipul comme une substance potentiellement infectieuse N de catalogue KAPG4NAE3 N de Pl 1701265 N de r vision 110711 1 4 2 Collecte et stockage des chantillons 4 2 1 Du s rum ou du plasma peut tre utilis avec ce kit de diagnostic Les chantillons de sang total doivent tre s par s au plus t t pour viter l h molyse Toute particule par ex caillots de fibrine rythrocytes contenue dans l chantillon doit tre retir e avant utilisation 4 2 2 Les chantillons doivent tre stock s entre 2 et 8 C et viter l inactivati
6. de la solution obtenue aux pr caution puits Incuber 37 1 C pendant 15 minutes Ajouter 100 ul de Solution d arr t chaque puits D terminer l absorbance a une longueur d onde de lecture de 450 nm avec une longueur d onde de r f rence entre 620 et 690 nm 5 BIBLIOGRAPHIE 1 Abe K Inchauspe C Shikate T and Prince AM 1992 Three different patterns of hepatitis C virus infection on chimpanzees Hepatology 15 690 2 Claets H Volckaerts A De Beenhouwer H Vermylen C 1992 Association of hepatitis C virus carrier state with the occurrence of hepatitis C virus core antibodies J Med Virol 36 259 264 3 Beach MJ et al 1992 Temporal relationship of hepatitis C virus RNA and antibody responses following experimental infection of chimpanzee J Med Virol 36 226 237 4 La longueur d onde de r f rence du spectrometre peut se situer entre 620 et 690 nm Cependant Putilisateur doit avant utilisation valider le spectrom tre par rapport au kit utilis 5 Incomplete inactivation of hepatitis B virus after heat treatment at 60 C for 10 hours J Infect Dis 138 242 244 6 The supplier is VQC AcroMetrix Jan Steenstraat 1 NL 1816 CT Alkmaar The Netherlands Type 7 is available in lyophilised or liquid format The catalogue numbers are S2233 lyophilised format and S2058 liquid format 7 National Inst For Biological Standards amp Control NIBSC Blabche Lane South Mimms Potter
7. sionis e pour obtenir une dilution 1 20 Ne pas utiliser d eau du robinet 4 4 2 Lavage de la plaque a Pour un laveur de plaques avec fonction d aspiration du trop plein 6 cycles avec au moins 0 5 ml de tampon de lavage par puits par cycle Ou b Pour un laveur de plaques sans fonction d aspiration du trop plein 8 cycles avec au moins 0 35 ml de tampon de lavage par puits par cycle 4 4 3 S cher la plaque en la retournant et en la tapotant fermement sur du papier absorbant Une trop grande quantit de tampon de lavage r siduel entra nera des r sultats erron s AVERTISSEMENT Un lavage insuffisant entra nera des r sultats erron s 4 5 Proc dure du test 4 5 1 Placer tous les r actifs et chantillons temp rature ambiante 20 30 C avant l essai R gler le bain marie ou l incubateur a 97E1 C 4 5 2 Pr paration du conjugu dilu 1 Utiliser uniquement un r cipient propre pour viter une contamination 2 Pr parer un conjugu dilu en r alisant une dilution 1 20 du conjugu HCV Ag HRPO concentr avec le diluant du conjugu ou selon le tableau de pr paration du conjugu ci dessous Remuer doucement pour bien m langer et viter la mousse 3 La solution de conjugu dilu en exc s doit tre jet e apr s utilisation Tableau de pr paration du conjugu Nombre de cute t s Volume n cessaire de diluant Volume n cessaire de conjugu HCV p du oe ml Ags HRPO conc ul 200 250 300
8. 0 A Seuil de positivit m M thode de r f rence 8 a Seuil de positivit D a 9 B e 5 E lt 10 lt 5 0 10 12 14 16 18 20 5 Dilution Steps o D EN o Dilution Step Panel de reference Anti HCV PeliCheck Anti HCV Elisa V 4 0 m M thode de r f rence Anti HCV S Co Seuil de positivit Dilution Step 4 12 4 Sensibilit clinique 1 Personnes infect es par le HCV La sensibilit diagnostique de l Anti HCV Elisa V 4 0 de DIAsource ImmunoAssays SA tait de 100 421 des 421 chantillons positifs incluant 20 chantillons par g notype pour les g notypes 1a 4a et 5 chantillons pour les g notypes 6 ont t test s et confirm s r actifs pour les anticorps dirig s contre le HCV N de catalogue KAPG4NAE3 N de PI 1701265 N de r vision 110711 1 99 05 Ortho HCV 3 0 SAVe 12 000 10 000 8 000 6 000 4 000 2 000 0 000 0 000 5 000 10 000 2 Panels commerciaux de s roconversion L essai Anti HCV Elisa V 4 0 a montr une sensibilit accrue de la seroconversion compar la m thode de r f rence choisie l anti HCV ELISA marqu CE Le nombre total d chantillons test s parmi les 22 panels de s roconversion s levait 198 Parmi eux soixante trois 63 chantillons ont t test s r actifs avec l essai Anti HCV Elisa V 4 0 tandis que seuls 44 de ces chantillons ont t test s r actif
9. 1 500 4 7 Quality Control of the Test Run Catalogue Nr KAPG4NAE3 PI number 1701265 Revision Nr 110711 1 4 7 1 NCx must be lt 0 200 otherwise the test is invalid 4 7 2 PCx must be gt 0 600 otherwise the test is invalid 4 7 3 P N Value must be 2 0 400 otherwise the test is invalid NOTE Negative Control absorbance value must be less than or equal to 0 200 after subtracting the blank 4 8 Result Interpretation 4 8 1 Specimens with CUTOFF INDEX lt 1 000 are considered NON REACTIVE by the criteria of DIAsource s Anti HCV Elisa V 4 0 4 8 2 Specimens with CUTOFF INDEX 2 1 000 are considered as initially REACTIVE They should be RETESTED in duplicate If both CUTOFF INDEXES of the duplicate are GREATER than 1 500 the specimen is considered to be repeatedly REACTIVE for Anti HCV by the criteria of DIAsource ImmunoAssays SA s Anti HCV Elisa V 4 0 Specimens repeatedly reactive in the Anti HCV Elisa V 4 0 should be further tested by additional more specific tests 4 8 3 Initially reactive specimens of which both CUTOFF INDEXES of the duplicate retest are LESS than 1 000 will be considered NON REACTIVE for Anti HCV 4 8 4 If one of the two CUTOFF INDEXES of the duplicate is GREATER than 1 000 but LESS than 1 500 the specimen may be interpreted as QUESTIONABLE and this individual should be monitored in follow up samples or additional more specific tests should be used 4 8 5 If one of the CUTOFF INDEX of the duplicate
10. 350 72 80 ren 81 96 ES E 4 5 3 Laisser un puits pour le blanc Ne pas ajouter d chantillon ou de diluant de l chantillon au puits pour le blanc 4 5 4 Pr parer le nombre n cessaire de puits y compris 1 puits pour le blanc 3 puits pour le contr le n gatif 2 puits pour le contr le positif et 1 puits pour chaque chantillon N de catalogue KAPG4NAE3 N de Pl 1701265 N de r vision 110711 1 4 5 5 Ajout de l chantillon 4 5 5 1 Ajouter 100 ul de contr le positif contr le n gatif et chantillon chaque puits appropri de la plaque d antig nes HCV 4 5 5 2 Bien m langer en tapotant la plaque REMARQUE Utiliser un nouvel embout de pipette apr s chaque pr l vement pour viter la contamination crois e 4 5 6 Sceller la plaque avec une bande adh sive 4 5 7 Incuber la plaque dans un bain marie ou un incubateur circulation d air 37 1 C pendant 60 minutes REMARQUE Ne pas empiler les plaques 4 5 8 A la fin de la p riode d incubation retirer soigneusement et jeter la bande adh sive 4 5 9 Laver la plaque selon le paragraphe 4 4 Proc dure de lavage de la plaque 4 5 10 Ajouter 100 ul de conjugu dilu chaque puits sauf au blanc 4 5 11 Sceller la plaque avec une bande adh sive 4 5 12 Incuber la plaque dans un bain marie ou un incubateur circulation 37 1 C pendant 30 minutes 4 5 13 R p ter les tapes 4 5 8 et 4 5 9 4 5 14 S lectionner l une des deux m
11. DIA te ce Anti HCV Elisa 4 0 KAPG4NAE3 DIAsource ImmunoAssays S A Rue du Bosquet 2 B 1348 Louvain la Neuve Belgium LOT 110711 3 Anti HCV Elisa V 4 0 For in vitro qualitative detection of Antibody to Hepatitis C virus anti en HCV in human serum or plasma 0344 KAPG4NAE3 IN VITRO DIAGNOSTIC USE DIAsource ImmunoAssays SA Rue du Bosquet 2 B 1348 Louvain la Neuve Belgium Tel 32 10 84 99 11 Fax 32 10 84 99 90 1 INTENDED USE Anti HCV Elisa V 4 0 is a forth generation enzyme immunoassay diagnostic kit for in vitro qualitative detection of Antibody to Hepatitis C virus anti HCV in human serum or plasma 2 DESIGN THEORY BRIEF DESCRIPTION OF THE PRODUCT Anti HCV Elisa V 4 0 adopts the direct sandwich principle as the basis for the assay to detect antibodies to Hepatitis C virus anti HCV It is a forth generation enzyme immunoassay kit which uses recombinant HCV antigens Core NS3 and NS5 antigens for the detection of Antibody to Hepatitis C virus anti HCV in human serum or plasma These antigens which are reactive with the predominant antibodies of HCV constitute the solid phase antigenic absorbent When human serum or plasma is added to the well the HCV antigens and Anti HCV will form complexes on the wells if Anti HCV is present in the specimen The wells are washed to remove the unbound materials The diluted HCV AgeHRPO Conjugate is added to the well and results in the formation of HC
12. DTA h moglobine triglyc ride bilirubine et h parine n gatifs 14 chantillons positifs EE Er Panels d anticoagulants 25 chantillons 0 25 s rum plasma EDTA plasma h parin et plasma n gatifs Ar 7 25 0 citrat 25 chantillons positifs 128 chantillons test s 39 89 ___ 4 12 2 Sp cificit clinique Sp cificit clinique 5356 5369 99 8 Substances pouvant provoquer des interf rences n de n de n de non r actifs Sp cificit tests r actifs 5 169 5157 99 77 Echantillons cliniques hospitaliers 99 5 Echantillons s riques plasmatiques avec r action crois e 100 100 100 potentielle 5 369 5 356 99 8 4 12 3 Sensibilit analytique La sensibilit analytique de l essai Anti HCV Elisa V 4 0 est sup rieure au test de r f rence N de catalogue KAPG4NAE3 N de Pl 1701265 N de r vision 110711 1 Analytical Sensitivity PEI Reference Material Serial Dilution Positive Sample 1 30 Anti HCV Elisa V 4 0 m M thode de r f rence A Seuil de positivit Anti HCV Elisa V 4 0 m M thode de r f rence Seuil de positivit Anti HCV IgG S Co Anti HCV S Co 10 12 14 16 18 20 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 Dilution Steps Dilution Steps o D R o Serial Dilution Positive Sample 2 Serial Dilution of the Positive Control 25 35 Anti HCV Elisa V 4 0 20 m M thode de r f rence Anti HCV Elisa V 4
13. V Anti HCV HCV Ag HRPO complex After washing out the unbound conjugate TMB substrate solution is added for color development The intensity of color development is proportional to the amount of antibodies present in the specimen The reaction processes are summarized as follows A Specimen containing Anti HCV 1 Plate HCV Antigens Specimen containing Anti HCV plate HCV Antigen Anti HCV 2 Wash to remove the unbound materials 3 Plate HCV Antigen Anti HCV HCV Ag HRPO gt Plate HCV Antigen Anti HCV HCV AgsHRPO complex 4 Wash to remove the unbound materials 5 Plate HCV Antigen Anti HCV HCV Ag HRPO complex TMB Solution light blue to blue color 6 Light blue to blue color Stop Solution light yellow to yellow color measured at 450nm with a selected reference wavelength within 620 to 690nm B Specimen without human Anti HCV 1 Plate HCV Antigens Specimen without Anti HCV plate HCV Antigen 2 Wash to remove the unbound materials 3 Plate HCV Antigen HCV Ag HRPO gt plate HCV Antigen No complex will form 4 Wash to remove the unbound materials 5 Plate HCV Antigen TMB Solution colorless colorless 6 colorless Stop Solution colorless measured at 450nm with a selected reference wavelength within 620 to 690nm 3 DESCRIPTION OF PROVIDED MATERIALS amp PRODUCT CODE SYSTEM e Item 1 7 on the following reagent table should be refrigerated at 2 to 8 C W
14. al Standards amp Control NIBSC Blabche Lane South Mimms Potters Bar Herts EN6 3QG UK Anti HCV British Working Standard Product Code 02 238 004 Revision date 2011 07 11 Catalogue Nr KAPG4NAE3 PI number 1701265 Revision Nr 110711 1 Anti HCV Elisa V 4 0 Pour la d tection qualitative in vitro d anticorps dirig s contre le virus de T l h patite C anti HCV dans le s rum ou le plasma humain 0344 KAPG4NAE3 DIAGNOSTIC IN VITRO DIAsource ImmunoAssays SA Rue du Bosquet 2 B 1348 Louvain la Neuve Belgique T l 32 10 84 99 11 Fax 32 10 84 99 90 1 BUT DU DOSAGE L anti HCV Elisa V 4 0 est un kit de diagnostic par essai immuno enzymatique de quatri me g n ration pour la d tection qualitative in vitro d anticorps dirig s contre le virus de l h patite C anti HCV dans le s rum ou le plasma humain 2 TH ORIE DE FONCTIONNEMENT BR VE DESCRIPTION DU PRODUIT L anti HCV Elisa V 4 0 applique le principe du sandwich direct comme base de l essai pour d tecter les anticorps dirig s contre le virus de l h patite C anti HCV Il s agit d un kit d essai immuno enzymatique de quatri me g n ration qui utilise des antig nes HCV recombinants antigenes capsidiques NS3 et NS5 pour d tecter des anticorps dirig s contre le virus de l h patite C anti HCV dans le s rum ou le plasma humain Ces antigenes r actifs pour les anticorps pr dominants dirig s contre le HCV constituent l abso
15. ashing Solution D 20X and Stop Solution can be stored at 2 to 30 C er Qt per Microtiter plate coated with HCV antigens 1 plate HCV Antigens Plate ag arp conc Contained HCV AgePeroxidase Horseradish Gone in buffer with Bovine serum 1bottle HCV Ag HRPO Preservatives 0 005 Sodium azide and 18ml Conjugate 0 05 Enzyme stabilizer ONTO EN Inactivated human plasma positive for Anti 1 bottle Anti HCV Positive HCV Preservative 0 099 Sodium azide 20 ml Control Normal human plasma non reactive for CONTROL L E Antibody to HCV Preservative 0 099 Nowe Hepatitis C Negative Sodium azide 3 0 ml Control Catalogue Nr KAPG4NAE3 PI number 1701265 Revision Nr 110711 1 PB buffer with Bovine serum and Tween 20 CONS BUF Preservatives 0 005 Sodium azide and por m 0 05 Enzyme stabilizer Conjugate Diluent CHROM TMB CONC 3 3 5 5 tetramethylbenzidine TMB in an 1 bottle organic base 12 ml Chromogenic TMB concentrate Citric acid buffer with Urea Hydrogen 1 bottle Peroxidase 12 ml Substrate Buffer i 1 bottle Phosphate buffer with Tween 20 E 110 ml Conc Washing Solution D 20X Stop Solution 1 bottle 12 ml Stop Solution e OTHER MATERIALS REQUIRED BUT NOT PROVIDED Components 50ul 100ul and 200ul 1 ml micropipettes and tips are needed Water bath at 37 1 or incubator at 37 1 Tubes for specimen dilution o0 2 EAS 4 Plate w
16. ashing equipment 6 ELISA Microwell Reader Dual wavelength 450nm with 620 690nm as reference wavelength bandwidth 10nm Purified water distilled or deionized water EE Fully automatic ElA micro plate analyzer is optional User should validate the automatic ElA micro plate analyzer in combination with the kit 8 Adhesive slip 1 2 3 4 5 6 7 8 4 INSTRUCTIONS FOR USE 4 1 Warnings 4 1 1 This reagent kit is for professional use only This reagent kit is for in vitro diagnosis only Bring all kit reagents and samples to room temperature 20 to 30 C and mix carefully before use Do not use reagent past its expiration date Do not interchange reagents between different lots Do not put pipette in mouth Do not smoke or eat in areas where specimens or reagents are handled All kit components and specimens should be regarded as potential hazards to health It should be used and discarded according to your own laboratory s safety procedures Such safety procedures probably will include the wearing of protective gloves and avoiding the generation of aerosols 4 1 9 Potential infectious specimens and non acid containing spills or leakages should be wiped up thoroughly with 5 sodium hypochlorite or treated in accordance with your practice for potential bio hazard control 4 1 10 Prior to dispose the waste of used specimens and kit reagents as general waste it should be treated in accordanc
17. azoture de sodium et 0 05 de 24 ml Diluant du conjugu stabilisateur d enzyme 3 3 5 5 t tram thylbenzidine TMB dans 1 flacon Chromog ne TMB une base organique 12 ml concentr Tampon acide citrique avec peroxydase 1 flacon 7 i l d hydrog ne ur e 12 ml Tampon du substrat 8 Tampon phosphate avec Tween 20 Solution de lavage D conc 20X 9 Solution d arr t 1 beet Solution d arr t e MATERIEL REQUIS MAIS NON FOURNI Composants 1 Micropipettes de 50 ul 100 ul 200 ul et 1 ml et des embouts sont n cessaires 2 Bain marie a 37 1 ou incubateur 37 1 3 Tubes pour la dilution de l chantillon Mat riel de lavage de la plaque 5 Lecteur de micropuits ELISA Longueur d onde double 450 nm avec longueur d onde de r f rence de 620 690 nm bande passante 10 nm purifi e eau distill e ou d sionis e 7 Un analyseur de microplaque pour ElA totalement automatique est facultatif L utilisateur doit valider l analyseur de microplaque pour ElA automatique par rapport au kit Bande adh sive 4 MODE D EMPLOI 4 1 Avertissements 4 1 1 Ce kit de r actifs est uniquement a usage professionnel 4 1 2 Ce kit de r actifs est uniquement destin a un diagnostic in vitro 4 1 3 Placer l ensemble des r actifs du kit et des chantillons temp rature ambiante 20 a 30 C et m langer soigneusement avant utilisation 4 Ne pas utiliser
18. e analytical sensitivity of Anti HCV Elisa V 4 0 assay is higher than the comparison test Analytical Sensitivity PEI Reference Material Serial Dilution Positive Sample 1 Anti HCV Elisa V 4 0 m Reference method Cutoff Anti HCV IgG S Co a Catalogue Nr KAPG4NAE3 10 12 14 16 18 20 Dilution Steps Anti HCV Elisa V 4 0 m Reference method A Cutoff Anti HCV S Co a o La o E e p o p s j 0 2 PI number 1701265 4 6 8 10 Dilution Steps 12 14 16 18 20 Revision Nr 110711 1 Serial Dilution Positive Sample 2 Serial Dilution of the Positive Control 25 Anti HCV Elisa V 4 0 20 m Reference method 4 Anti HCV Elisa V 4 0 A Cutoff m Reference method al Cutoff Anti HCV S Co 3 Anti HCV S Co 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 Dilution Steps Dilution Step PeliCheck Anti HCV Reference Panel 4 Anti HCV Elisa V 4 0 m Reference method Anti HCV S Co A Cutoff 0 2 4 6 8 10 Dilution Step 4 12 4 Clinical Sensitivity 1 HCV infected individuals The diagnostic sensitivity of the DIAsource ImmunoAssays SA Anti HCV Elisa V 4 0 was determined to be 100 421 of 421 positive samples including 20 samples per genotype for genotypes 1a 4a and 5 samples for genotype 6 were tested and confirmed reactive for HCV antibodies Total Sensitiv
19. e with your treatment practice of potential bio hazardous waste or treated as follows Both liquid and solid waste should be autoclaved at 121 for at least 30 minutes Solid waste can also be incinerated Non acidic liquid waste can be treated with sodium hypochlorite diluted to a final concentration of 1 Acidic liquid wastes must be neutralized before treatment with sodium hypochlorite as mentioned above and should stand for 30 minutes to obtain effective disinfection 4 1 11 Stop Solution is an irritant to skin eyes respiratory tract and mucous membranes Avoid contact of the Stop Solution with skin and mucous membranes In case of contact flush immediately with abundant amounts of water In case of inhalation find fresh air immediately and seek medical advice in case of pain 4 1 12 Chromogenic TMB concentrate contains organic solvent which is flammable Chromogenic TMB concentrate contains dimethyl sulfoxide an irritant to skin and mucous membranes 4 1 13 Although all human sourced material are tested free from HBsAg and Anti HIV and inactivated at 56 C for one hour the reagent should still be handled as potential infectious material de 4 1 4 1 4 1 4 1 4 1 4 1 Soo A eE Catalogue Nr KAPG4NAE3 PI number 1701265 Revision Nr 110711 1 4 2 Specimen Collection and Storage 4 2 1 Either serum or plasma can be used with this diagnostic kit Whole blood specimens should be separated as soon as possible in
20. el VHC formar n complejos con anti VHC Se lavan los pocillos para eliminar el material que no se ha unido Se agrega el conjugado diluido HVC Ag HRPO a los pocillos lo que resulta en la formaci n de un complejo VHC e Anti VHC VHC Ag HRPO Despu s de eliminar por lavado el complejo que no se ha unido se agrega una soluci n de sustrato TMB para desarrollar color La intensidad del color es proporcional a la cantidad de anticuerpos presentes en la muestra Los procesos reactivos est n resumidos como sigue A Muestra que contiene anti VHC Placa VHC Ag muestra que contiene Anti VHC gt placa VHC Ag Anti VHC Lave para eliminar el material que no se ha unido Placa VHC Ag Anti VHC VHC AgeHRPO gt placa VHC Ag Anti VHC VHC Ag eHRPO complejo Lave para eliminar el material que no se ha unido Placa VHC Ag Anti VHC VHC AgeHRPO complejo soluci n de sustrato TMB de color azul claro a azul De color azul claro a azul soluci n de parada de color amarillo p lido a amarillo medido a 450nm con una longitud de onda seleccionada entre 620 y 690nm oe ra B Muestra sin anti VHC Placa VHC Ag muestra sin Anti VHC placa VHC Ag Lave para eliminar el material que no se ha unido Placa VHC Ag VHC AgeHRPO placa VHC Ag no se formara un complejo Lave para eliminar el material que no se ha unido Placa VHC Ag soluci n de sustrato TMB incolora incolora Incolora s
21. et que l autre est INFERIEUR 1 000 cela indique une erreur exp rimentale inhabituelle Le test doit tre refait 4 9 R solution des probl mes Si le r sultat ne peut tre reproduit r aliser une proc dure de contr le pr liminaire en v rifiant les possibilit s ci dessous 4 9 1 Proc dure de lavage de la plaque inappropri e 4 9 2 Contamination avec un chantillon positif 4 9 3 Volume incorrect d chantillon conjugu ou substrat 4 9 4 Contamination du bord du puits avec un conjugu 4 9 5 Echantillon inappropri par exemple s rum ou plasma h molys chantillon contenant des s diments et chantillon insuffisamment m lang avant utilisation 4 9 6 Dur e ou temp rature d incubation incorrecte 4 9 7 T te et aiguilles d aspiration distribution du laveur obstru es ou partiellement obstru es 4 9 8 Aspiration insuffisante 4 10 Limites et interf rences 4 10 1 Ce kit de r actifs doit tre uniquement utilis pour du s rum ou du plasma humain non mis en pool 4 10 2 Ce kit de r actifs n a pas t valid pour une utilisation avec des chantillons pr lev s sur des cadavres 4 10 3 Les chantillons pr sentant un tr s faible taux d anti HCV peuvent ne pas tre continuellement positifs Dans ce cas il est recommand de tester des chantillons de suivi 4 10 4 Un r sultat anti HCV n gatif n exclut pas la possibilit d une infection par HCV 4 10 5 Des r sultats faux po
22. f la valeur d absorbance doit tre inf rieure ou gale 0 200 apr s avoir soustrait le blanc 4 8 Interpr tation des r sultats 4 8 1 Les chantillons avec INDICE DU SEUIL DE POSITIVITE lt 1 000 sont consid r s comme NON REACTIFS par les crit res de l Anti HCV Elisa V 4 0 de DlAsource 4 8 2 Les chantillons avec un INDICE DU SEUIL DE POSITIVITE 2 1 000 sont consid r s comme initialement REACTIFS Ils doivent tre TESTES A NOUVEAU en doublon Si les deux INDICES DU SEUIL DE POSITIVITE du doublon sont SUPERIEURS a 1 500 l chantillon est consid r comme REACTIF r it r pour les anti HCV par les crit res de l Anti HCV Elisa V 4 0 de DIAsource ImmunoAssays SA Les chantillons r actifs r it r s de l Anti HCV Elisa V 4 0 doivent tre encore test s par des tests suppl mentaires plus sp cifiques 4 8 3 Les chantillons initialement r actifs dont les INDICES DU SEUIL DE POSITIVIT du nouveau test en double sont INF RIEURS 1 000 seront consid r s comme NON REACTIFS pour les anti HCV 4 8 4 Si l un des deux INDICES DU SEUIL DE POSITIVITE du test en doublon est SUPERIEUR 1 000 mais INFERIEUR 1 500 l chantillon peut tre interpr t comme DISCUTABLE et cette personne doit tre surveill e par des chantillons de suivi ou des tests suppl mentaires plus sp cifiques doivent tre effectu s 4 8 5 Si l un des INDICES DU SEUIL DE POSITIVITE du doublon est SUPERIEUR 1 500
23. is GREATER than 1 500 and the other one is LESS than 1 000 this indicates unusual experimental error The test should be repeated again 4 9 Troubleshooting If the result cannot be reproduced please do your own preliminary troubleshooting by checking the possibilities listed below 4 9 1 Improper washing procedure 4 9 2 Contaminated with positive specimen 4 9 3 Add wrong volume of sample conjugate or substrates 4 9 4 The well rim is contaminated with conjugate 4 9 5 Improper specimen such as hemolyzed serum or plasma specimen containing precipitate and specimen not being mixed well before use 4 9 6 Wrong incubation time or temperature 4 9 7 Obstructed or partial obstructed washer aspirate dispense head and needles 4 9 8 Insufficient aspiration 4 10 Limitations and Interferences 4 10 1 This reagent kit is to be used for un pooled human serum or plasma only 4 10 2 The reagent kit has not been validated for use with cadaveric samples 4 10 3 Specimens with very low level of Anti HCV may not consistently repeat positive In this case it is recommended to test follow up samples 4 10 4 Anti HCV negative result does not preclude the possibility of infection with HCV 4 10 5 Non repeatable false positive results may occur due to non specific binding of the sample and conjugate to the wall of the well s 4 10 6 Potential Interfering Substances there is no significant influence on Anti HCV Elisa V 4 0 4 11 S
24. ity n 421 12 000 10 000 99 05 8 000 6 000 Ortho HCV 3 0 SAVe 4 000 2 000 0 000 0 000 5 000 10 000 15 000 20 000 25 000 30 000 35 000 Anti HCV Elisa V 4 0 100 2 Commercial seroconversion panels Anti HCV Elisa V 4 0 assay showed a higher seroconversion sensitivity in comparison with the chosen reference method which is CE marked anti HCV ELISA The total number of tested samples from the 22 seroconversion panels amounted to 198 Sixty three 63 of these samples were tested reactive with Anti HCV Elisa V 4 0 assay whereas only 44 of these samples were found to be reactive with the reference method 4 12 5 Precision Catalogue Nr KAPG4NAE3 PI number 1701265 Revision Nr 110711 1 1 Intra assay Reproducibility 2 Total Imprecision Lot C68332PT Run No_ 1 O OA Y OO a fF OUN 15 7 08 18 7 08 18 7 08 21 7 08 22 7 08 22 7 08 23 7 08 23 7 08 24 7 08 24 7 08 Catalogue Nr KAPG4NAE3 CUTOFF INDEX Day 1 Day 2 Day 3 4 13 Flow chart of the test procedure Positive Serum 1 Positive Serum 2 Mean CV Mean Cv Positive Control Nu Cas es eso sa 26a 19 8 08 19 8 08 20 8 08 21 8 08 21 8 08 22 8 08 22 8 08 25 8 08 25 8 08 26 8 08 Add 100ul of Controls 3 X NC 2 X PC and 100ul per Specimen into wells Reserve 1 well for blank Mix the Chromogenic TMB concentrate and Substrate Buffer by the equal volume Add 100ul of the mixed substrate solutio
25. les r actifs apr s la date d expiration 5 Ne pas changer les r actifs entre diff rents lots 4 1 6 Ne pas porter la pipette la bouche 7 Ne pas fumer ou manger dans les zones ou des chantillons ou des r actifs sont manipul s 8 Tous les composants du kit et les chantillons doivent tre consid r s comme potentiellement dangereux pour la sant Ils doivent tre utilis s et limin s conform ment aux proc dures de s curit de votre laboratoire Ces proc dures de s curit incluent probablement le port de gants de protection et viter de produire des a rosols 4 1 9 Les chantillons potentiellement infectieux et les d versements ou fuites non acides doivent tre nettoy s minutieusement l aide d hypochlorite de sodium 5 ou trait s selon votre proc dure de contr le des risques biologiques potentiels 4 1 10 Avant d liminer les chantillons et les kits de r actifs usag s dans les ordures m nag res ils doivent tre trait s conform ment la proc dure locale de traitement des d chets biologiques potentiellement dangereux ou comme suit Les d chets liquides et solides doivent tre st rilis s par autoclave 121 C pendant au moins 30 minutes Les d chets solides peuvent galement tre incin r s Les d chets liquides non acides peuvent tre trait s l aide d hypochlorite de sodium dilu une concentration finale de 1 Les d chets liquides acides doivent tre neutralis s
26. n to wells Incubate at 37 1 Add 50ul of Chromogenic TMB concentrate to wells and then add 50pl of Substrate Buffer Carefully mix well C for 15 minutes tE tE PI number 1701265 CV Revision Nr 110711 1 Add 100ul of Stop Solution into each well Determine absorbance using 450 nm as reading wavelength with 620 690nm reference wavelength 5 BIBLIOGRAPHY 1 Abe K Inchauspe C Shikate T and Prince AM 1992 Three different patterns of hepatitis C virus infection on chimpanzees Hepatology 15 690 2 Claets H Volckaerts A De Beenhouwer H Vermylen C 1992 Association of hepatitis C virus carrier state with the occurrence of hepatitis C virus core antibodies J Med Virol 36 259 264 3 Beach MJ et al 1992 Temporal relationship of hepatitis C virus RNA and antibody responses following experimental infection of chimpanzee J Med Virol 36 226 237 4 The reference wavelength of spectrometer could be 620nm to 690nm However user should validate the spectrometer in combination with this kit before use 5 Incomplete inactivation of hepatitis B virus after heat treatment at 60 C for 10 hours J Infect Dis 138 242 244 6 The supplier is VQC AcroMetrix Jan Steenstraat 1 NL 1816 CT Alkmaar The Netherlands Type 7 is available in lyophilised or liquid format The catalogue numbers are 2233 lyophilised format and S2058 liquid format 7 National Inst For Biologic
27. oluci n de parada incolora medida a 450nm con una longitud de onda de referencia seleccionada de 620 a 690nm ee ee te 3 DESCRIPCION DE MATERIALES SUMINISTRADOS amp SISTEMA DE CODIGOS DE PRODUCTOS e Item 7 en la siguiente tabla de reactivos deben permanecer refrigerados entre 2 y 8 C La Soluci n de Lavado 20X y la soluci n de parada pueden almacenarse entre 2 y 30 C ITEMS Componentes Descripci n Cant para 96 ensayos Una microplaca recubiertos con 1 placa VHC Ag Placa antigenos VHC Catalogo Nr KAPG4NAE3 PI Numero 1701265 Revision Nr 110711 1 P I Number 1701000 INC BUF ACETONITRILE SERUM ANTISERUM IMMUNOADSORBENT Used symbols Manufacturer Contains sufficient for lt n gt tests Incubation buffer Acetonitrile HRP Conjugate HRP Conjugate concentrate Wash buffer Revisi
28. on nr 140723 P I Number 1701000 INC BUF ACETONIT RILE SERUM DIL SPE DIL BUF ANTISERUM IMMUNOADSORBENT DIL CAL REC S OLN NEUTR SOLN TRACEUR BUF Symboles utilis s EXTR SOLN conc Tampon de lavage Revision nr 140723 P I Number 1701000 INC ACETONITRILE DIL SPE DIL BUF CAL SOLN TRACEUR
29. on par la chaleur pour minimiser la d t rioration Pour un stockage de longue dur e ils doivent tre congel s en dessous de 20 C Un stockage en cong lateur d givrage automatique n est pas recommand 4 2 8 Les chantillons congel s doivent tre enti rement d congel s et m lang s de fa on homog ne avant le test 4 2 4 Eviter les proc dures de cong lation d cong lation multiples 4 2 5 Les s rums partiellement coagul s et les chantillons avec une contamination bact rienne ne doivent pas tre utilis s 4 3 Stockage des r actifs 4 3 1 Le kit doit tre conserv entre 2 et 8 C Ne pas congeler 4 3 2 Les barrettes de la plaque doivent tre utilis es dans le mois suivant l ouverture du sachet en aluminium d origine Les barrettes non utilis es doivent tre conserv es dans le sachet en aluminium qui doit tre solidement ferm 4 3 3 Replacer les r actifs entre 2 et 8 C imm diatement apr s utilisation 4 3 4 La solution de lavage concentr e 20X peut tre conserv e temp rature ambiante pour viter la cristallisation car les kits sont conserv s et exp di s entre 2 et 8 C Si des cristaux se sont form s avant utilisation r chauffer la solution dans un bain marie 37 C jusqu dissolution des cristaux 4 4 Proc dure de lavage de la plaque 4 4 1 Pr paration de la solution de lavage Diluer la solution de lavage D concentr e 20X avec de l eau distill e ou d
30. ping the plate gently NOTE Use a new pipette tip after each sampling to avoid cross contamination Catalogue Nr KAPG4NAE3 PI number 1701265 Revision Nr 110711 1 4 5 6 Seal the Plate with an Adhesive Slip 4 5 7 Incubate the plate in a 37 1 C water bath or circulative incubator for 60 minutes NOTE Do not stack plates 4 5 8 At the end of the incubation period remove carefully the adhesive slip and discard 4 5 9 Wash the plate according to section 4 4 Plate Washing Procedure 4 5 10 Add 100ul of the Diluted Conjugate in each well except the blank 4 5 11 Seal the plate with an Adhesive Slip 4 5 12 Incubate the Plate in a 37 1 C water bath or circulative incubator for 30 minutes 4 5 13 Repeat step 4 5 8 and 4 5 9 4 5 14 Select one of the following methods for color development A Mix equal volumes of Chromogenic TMB concentrate and Substrate Buffer in a clean container immediately prior to use Add 100ul of the mixture solution to each well including the blank B Add 50ul of Chromogenic TMB concentrate first and then add 50ul of Substrate Buffer into each well including the blank Carefully mix well NOTE Chromogenic TMB concentrate should be colorless to light blue otherwise it should be discarded The mixture of Chromogenic TMB concentrate and Substrate Buffer should be used within 30 minutes after mix The mixture should be avoided from intense light 4 5 15 Seal the plate with an Adhesive Slip and incubate a
31. rbant antig nique de la phase solide Lorsque le s rum ou le plasma humain est ajout aux puits les antigenes HCV et Panti HCV forment des complexes sur les puits si des anti HCV sont pr sents dans l chantillon Les puits sont rinc s pour retirer le mat riel non li Le conjugu HCV AgeHRPO dilu est ajout aux puits et entra ne la formation du complexe HCV Anti HCV HCV Ag HRPO Apr s lavage du conjugu non li une solution de substrat TMB est ajout e pour coloration L intensit de la coloration est proportionnelle la quantit d anticorps pr sents dans l chantillon Les processus de r action sont d crits ci dessous A chantillon contenant des Anti HCV 1 Plaque antigenes HCV chantillon contenant des Anti HCV plaque antig ne HCV Anti HCV 2 Laver pour retirer le mat riel non li 3 Plaque antig ne HCV Anti HCV HCV Ag HRPO gt Plaque complexe antig nes HCV Anti HCV HCV Ag HRPO 4 Laver pour retirer le mat riel non li 5 Plaque complexe antig nes HCV Anti HCV HCV Ag HRPO solution TMB couleur bleu clair bleu 6 Couleur bleu clair bleu solution d arr t couleur jaune clair jaune mesur e 450 nm avec une longueur d onde de r f rence s lectionn e entre 620 et 690 nm B chantillon sans anti HCV humain Plaque antigenes HCV chantillon sans Anti HCV plaque antig ne HCV Laver pour retirer le mat riel non li Plaque an
32. s avec la m thode de r f rence 4 12 5 Pr cision 1 Reproductibilit intra essai 2 Impr cision totale INDICE DU SEUIL 20 000 Anti HCV Elisa V 4 0 100 25 000 30 000 35 000 S rum positif 1 S rum positif 2 Contr le positif CV CV CV Moyenne as7 es oo e moa 0 Lot C68332PT Run No_ 1 2 3 4 5 6 7 8 9 15 7 08 18 7 08 18 7 08 21 7 08 22 7 08 22 7 08 23 7 08 23 7 08 24 7 08 24 7 08 N de catalogue KAPG4NAE3 CUTOFF INDEX 4 73 8 83 0 52 11 05 N de PI 1701265 19 8 08 19 8 08 20 8 08 21 8 08 21 8 08 22 8 08 22 8 08 25 8 08 25 8 08 26 8 08 Runbate wc pst Ps2 re EC N de r vision 110711 1 4 13 Repr sentation graphique de la proc dure de test Ajouter 100 ul des contr les 3 X NC 2 X PC et 100 ul d chantillon aux puits Laisser un puits pour le blanc Incuber la plaque 37 1 C pendant 60 minutes Laver la plaque i lt _ lt Pr parer au pr alable le conjugu dilu Ajouter 100 ul de conjugu dilu chaque puits sauf au blanc Incuber la plaque 37 1 C pendant 30 minutes Laver la plaque lt lt tE Ajouter 50 ul de M langer des volumes Chromog ne TMB identiques de concentr puis ai puis ajouter chromog ne TMB 50 pl de tampon du concentr et de tampon eubstrat du substrat Ajouter 100 Ull Bien m langer avec
33. s Bar Herts EN6 3QG UK Anti HCV British Working Standard Product Code 02 238 004 Date de r vision 2011 07 11 N de catalogue KAPG4NAE3 N de Pl 1701265 N de r vision 110711 1 Anti HCV Elisa V 4 0 Para la detecci n cualitativa in vitro del Anticuerpo contra el virus de la e S Hepatitis C anti VHC en suero o plasma humano 0344 KAPG4NAE3 PARA USO DE DIAGN STICO IN VITRO 1 2 DIAsource ImmunoAssays SA Rue du Bosquet 2 B 1348 Louvain la Neuve Belgium Tel 32 10 84 99 11 Fax 32 10 84 99 90 USO PREVISTO El kit de diagn stico Anti HCV Elisa V 4 0 es un inmunoensayo enzim tico de cuarta generaci n para la detecci n cualitativa in vitro del anticuerpo contra el virus de la Hepatitis C anti VHC en suero o plasma humano TEOR A DEL DISE O BREVE DESCRIPCI N DEL PRODUCTO Elisa V 4 0 Anti VHC adopta el principio del s ndwich directo como la base del ensayo para detectar anticuerpos contra el virus de la Hepatitis C anti VHC Es un kit de inmunoensayo enzim tico de cuarta generaci n que usa ant genos recombinantes del VHC ant genos Core NS3 y NS5 para la detecci n del virus de la Hepatitis C anti VHC en suero o plasma humano Estos ant genos que reaccionan con los anticuerpos predominantes contra el VHC constituyen la fase solida antig nica absorbente Cuando el suero o plasma humano se agrega a los pocillos si anti VHC est presente en la muestra los ant genos d
34. s with at least 0 5ml washing buffer per well per cycle Or b For plate washer without overflow aspirating function 8 cycles with at least 0 35ml washing buffer per well per cycle 4 4 3 Blot dry by inverting the plate and tapping firmly onto absorbent paper Too much residual wash buffer will cause false results WARNING Improper washing will cause false results 4 5 Test Procedure 4 5 1 Bring all reagents and specimens to room temperature 20 to 30 C before assay Adjust water bath or incubator to 37 1 C 4 5 2 Preparation of Diluted Conjugate 1 Use only clean container to avoid contamination 2 Prepare diluted conjugate by making 1 20 dilution of Conc HCV Ag HRPO conjugate with conjugate diluent or following Conjugate Preparation Chart below Swirl gently to mix thoroughly and avoid foaming 3 Excess diluted conjugate solution should be discarded after use Conjugate Preparation Chart Volume of Conjugate Diluent Volume of Conc HCV Age HRPO Number of Wells used needed ml conjugate needed ul 4 5 3 Reserve one well for blank Do not add any specimen or specimen diluent into the well for blank 4 5 4 Prepare the needed number of wells including 1 well for Blank 3 wells for Negative Control 2 wells for Positive Control and 1 well for each Specimen 4 5 5 Sample input 4 5 5 1 Add 100ul of Positive Control Negative Control and specimen to each appropriate well of HCV Antigens Plate 4 5 5 2 Mix well by tap
35. sitifs non r it rables peuvent se produire en raison d une liaison non sp cifique de l chantillon et du conjugu sur la paroi des puits 4 10 6 Substances pouvant provoquer des interf rences il n existe aucune influence significative sur l Anti HCV Elisa V 4 0 4 11 Conditions de stockage et stabilit l Temp rature de KIT Anti HCV Elisa V 4 0 2 8 C Contr le Anti HCV positif 2 8 C a E Contr le H patite C n gatif 2 8 C Plaque d antigenes HCV 2 8 C Solution du conjugu HCV antigen HRPO 24 8 C N de catalogue KAPG4NAE3 N de Pl 1701265 N de r vision 110711 1 Solution du conjugu antig ne HCV HRPO Temp ambiante Diluant du conjugu 2 8 C F Solution de lavage D concentr e 20X Temp ambiante Solution de lavage dilu e 20X ae Chromog ne TMB concentr 2 8 C Tampon du substrat 2 8 C M lange de solution du substrat TMB Temp ambiante Solution d arr t Temp ambiante 4 12 Performance 4 12 1 Sp cificit analytique Substances pouvant provoquer des interf rences il n existe aucune influence significative sur l Anti HCV Elisa V 4 0 Substances pouvant provoquer des interf rences S rum avec des substances provoquant des interf rences en proportions fixes 50 tests Triglyc rides h moglobine bilirubine IgG et IgM monoclonales et facteur rhumato de Panels d inhibition 14 chantillons E
36. t 37 1 C for 15 minutes 4 5 16 Stop the reaction by adding 100ul of Stop Solution to each well including the blank 4 5 17 Determine the absorbance of Controls and test specimens within 15 minutes measured at 450nm with a selected reference wavelength within 620 to 690nm Use the blank well to blank the spectrophotometer NOTE The color of the blank should be colorless to light yellowish otherwise the test results are invalid Substrate blank absorbance value must be less than 0 100 OD A ee gt 4 6 Calculation of Tested Data 4 6 1 Calculation of the NCx Mean Absorbance of Negative Control Example Sample No Absorbance 1 0 045 2 0 060 3 0 051 NCx 0 045 0 060 0 051 3 0 052 NCx must be lt 0 200 otherwise the test is invalid 4 6 2 Calculation of PCx Mean Absorbance of Positive Control Example Sample No Absorbance 1 1 510 2 1 826 PCx 1 510 1 826 2 1 668 PCx must be 2 0 600 otherwise the test is invalid 4 6 3 Calculation of P N Value P N PCx NCx Example P N 1 668 0 051 1 617 P N Value must be gt 0 400 otherwise the test is invalid 4 6 4 Calculation of the Cutoff Value Cutoff Value NCx 0 100 Example Cutoff Value 0 053 0 100 0 153 4 6 5 Calculate the cut off index of the specimens Cutoff Index Sample OD Value Cutoff Value Example Sample Value is 0 596 Cutoff Index 0 596 0 153 3 895 4 6 6 Gray Zone Cut off index 1 000
37. tig nes HCV HCV Ag HRPO plaque antigenes HCV Aucun complexe ne se forme Laver pour retirer le mat riel non li Plaque antig nes HCV solution TMB incolore incolore Incolore solution d arr t incolore mesur a 450 nm avec une longueur d onde de r f rence s lectionn e entre 620 et 690 nm O O1 ND 3 DESCRIPTION DU MAT RIEL FOURNI ET DU SYST ME DE CODE DU PRODUIT e Les articles 1 7 du tableau de r actifs suivant doivent tre r frig r s entre 2 et 8 C La solution de lavage D 20X et la solution d arr t peuvent tre conserv es entre 2 et 30 C ARTICL ae Qt par Plaque de microtitration tapiss e d antig nes 1 Plaque antigenes HCV 1 plaque HCV A CONC s mr cone Contient de HCV Ag Peroxydase raifort 2 Conjugu dans un tampon avec du s rum bovin HCV Ag HRPO Conservateurs 0 005 d azoture de concentr sodium et 0 05 de stabilisateur d enzyme CONTROL ES Plasma humain inactiv positif pour l anti HCV Conservateur 0 099 d azoture de 1 raon Contr le Anti HCV sodium 2 0 ml positif Plasma humain normal non r actif pour les anticorps dirig s contre l HCV 1 flacon Conservateurs 0 099 d azoture de 3 0 ml Contr le H patite C codun n gatif N de catalogue KAPG4NAE3 N de PI 1701265 N de r vision 110711 1 Tampon PB avec du s rum bovin et du Tween 20 Conservateurs 0 005 1 flacon d
38. torage Conditions and Stability Kit components Storage condition State Stability Anti HCV Elisa V 4 0 KIT 2 to 8 C Anti HCV Positive Control 2 to 8 C Hepatis C Negative Control 2 to 8 C HCV Antigens Plate 2 to 8 C Conc HCV Antigen HRPO Sicha 18 months Conjugate Solution 2 to 48 C Diluted Conjugate Diluent 2 to 8 C Washing Solution D Concentrate 20X 24 months Catalogue Nr KAPG4NAE3 PI number 1701265 Revision Nr 110711 1 open mem 20X Diluted Washing Solution Chromogenic TMB concentrate 2 to 8 C Substrate Buffer 2 to 8 C 4 12 Performance Characteristics 4 12 1 Analytical Specificity 210 48 C Diluted Potential Interfering Substances There is no significant influence on Anti HCV Elisa V 4 0 Potential Interfering Substances Serum with interfering substances in fixed ratios Triglycerides hemoglobin bilirubin monoclonal IgG and IgM and rheumatoid factor Inhibition panels EDTA hemoglobin triglyceride bilirubin and heparin Anticoagulant Panels Serum EDTA plasma heparinized plasma and citrated plasma 4 12 2 Clinical Specificity Clinical specificity 5356 5369 99 8 Potentially cross reacting serum plasma specimens 100 0 100 100 50 tests 14 negative samples A 14 positive samples 25 negative samples 25 positive samples 128 tested samples _ 39 89 5369 5356 99 8 4 12 3 Analytical Sensitivity Th
Download Pdf Manuals
Related Search