PDF - Menarini Diagnostics
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1. 15 mL Acide sulfurique 0 25M DCE005 8305 0 7 Solution de lavage conc 10X 1 flacon 100 mL DCE006 8306 0 3 2 R actifs n cessaires non fournis dans le kit Eau distill e ou d ionis e 33 Mat riel et quipement auxiliaire Distributeurs automatiques Lecteur pour microplaques 450 nm 4 PRECAUTIONS e Ce kit est uniquement pour diagnostic in vitro e Suivre attentivement les instructions e Respecter la date d ch ance pr sente sur l tiquette e Ne pas m langer des r actifs de lots diff rents e Ne pas utiliser de r actifs d autres fournisseurs e est important que le temps de r action de chaque puit soit le m me pour la reproductibilit des r sultats il est donc conseill d viter le time shifting durant la distribution des r actifs e Tous les r actifs doivent tre conserv s dans le r cipient d origine entre 2 8 C avant l utilisation e Les r actifs 1 2 et 8 contiennent de petites quantit s lt 0 1 p p d azide de sodium comme conservateur Eviter le contact avec la peau ou les muqueuses e Les mat riels d origine humaine utilis s pour la pr paration de ce kit ont t analys s et sont non r actifs aux HIV 1 et 2 et aux anticorps HCV et Hbs Ag mais doivent quand m me tre trait s comme potentiellement infect s e Dans tous les cas toutes les r gles relatives la protection g n rale et individuelle pour l utilisation de ce kit doivent tre appliqu es 5 PROCED2. di produzione Data de produ o Biogef hrdung Bi0Aoytk c kiv vvoc Biological risk Riesgo biol gico Risque biologique Rischio biologico Risco biol gico Chargenbezeichnung ApiWu c napti ac Batch code C digo de lote Num ro de lot Codice del lotto Lote Inhalt ITEPIEZOUEVO TOV KIT Contents of kit Contenido del kit Contenu du coffret Contenuto del kit Conte do do kit Manufacturer Via Garibaldi 18 DiaMetra S r l Headquarter 20090 SEGRATE MI Tel 0039 02 2139184 02 26921595 Fax 0039 02 2133354 UK UNITED KINGDOM Distributed by Menarini Diagnostics Ltd 405 Wharfedale Road Winnersh Wokingham Berkshire RG41 5RA ES ESPA A Distribuido por A Menarini Diagnosticos S A Avenida del Maresme 120 08918 Badalona Barcelona PT PORTUGAL Distribuido por A Menarini Diagn sticos Lda Quinta da Fonte Edificio D Manuel 2 B 2770 203 Paco de Arcos DE DEUTSCHLAND Vertrieb durch A Menarini Diagnostics Eine Division der Berlin Chemie AG Glienicker Weg 125 12489 Berlin FR FRANCE Distribu par A Menarini Diagnostics France S A R L 3 5 Rue du Jura BP 70511 94633 Rungis Cedex Manufacturing site Via Giustozzi 35 35a Z Paciana 06034 FOLIGNO PG ITALY Tel 0039 0762 24864 Fax 0039 0762 316197 E mail info diametra com 23 23 EL Alav Metal OTNV EAAAAA arr tnv A Menarini Diagnostics S A 575 Vouliagmenis Ave 16451 Argyroupolis
3. du substrat erreurs dans l ex cution de l chantillon ex Distribution accidentelle des r actifs en s quence erron e ou provenant de flacons erron s etc R action trop faible DO trop basses conjugu non ad quat ex ne provenant pas du kit original Intra test Inter tests temps d incubation trop bref temp rature d incubation Echant Moyenne CV Echan Moyenne CV trop basse n Concentration t n Concentration R action trop intense DO trop hautes U mIl ka U ml conjugu non ad quat ex ne provenant pas du kit is Joj a 23 a orina 02 60 7 5 82 6 temps d incubation trop long temp rature d incubation ms o e wz f w top lev e 8 DISPOSITIONS POUR L ELIMINATION Les r actifs doivent tre limin s en accord avec les lois locales BIBLIOGRAPHIE Hirata Y H Ishizu N Ouchi S Motomura M Abe Y Hara H Wakasugi Takahashi H Sakano M Tanaka H Kawaao 8 T Kanesaki Insulin autoimmunity in a case with spontaneous hypoglycemia Japan J Diabet 1970 13 312 319 Palmer JP CM Asplin P Clemens K Lyen O Tatpati PK Raghu amp TL Paquette Insulin antibodies in Insulin dependent diabetes before Insulin treatment Science 1983 222 1337 1339 Palmer JP CM Asplin PK Raghu P Clemens K Lyen O Tatpati B McKnight TL Paquette M Sperling L Baker amp R Guthrie Antilnsulin antibodies in Insulin dependent diabetes before Insulin treatment a new marker for auto
4. Attiki IT ITALIA Distribuito da A Menarini Diagnostics Via Lungo l Ema 7 50012 Bagno a Ripoli Firenze
5. URE 5 1 Pr paration du Conjugu La solution anti IgG HRP humaines est stable jusqu 4 semaines entre 2 8 C apr s l ouverture 5 2 Pr paration de la Solution de lavage Pr parer une quantit suffisante de solution de lavage en diluant la solution de lavage concentr e 1 9 avec de l eau distill e ou d sionis e Par exemple diluer 50 ml de la solution concentr e avec 450 ml d eau distill e La solution ne doit pas pr senter de cristaux avant la dilution dissoudre ventuellement les cristaux en chauffant au max 37 C La solution dilu e peut tre conserv e entre 2 et 8 C jusqu 30 jours 5 3 Pr paration de l chantillon Le sang est pr lev par ponction veineuse Apr s coagulation le s rum est s par par centrifugation Ne pas utiliser d chantillons lip miques ou h molys s Il ne faut pas utiliser de plasma Les chantillons peuvent tre conserv s entre 2 8 C jusqu 3 jours La conservation long terme se fait 20 C Eviter les cycles de cong lation et d cong lation r p t s Les chantillons doivent tre dilu s 1 100 avec le Diluant chantillon Exemple 5 ul chantillon 500 ul diluant chantillon 5 4 Proc dure Le kit contient une microplaque avec 8x12 puits recouverts d antigene insuline Le nombre de barrettes utilis es dans chaque essai d pend du nombre d chantillons analyser Si on utilise les 12 barrettes ce test permet d analyser un total
6. ZENI Anti INSULINE A MENARINI diagnostics CE pour analyses de routine Test ELISA quantitatif pour Pidentification des auto anticorps circulants anti Insuline native LOT e 47 IVD SI Voir tiquette externe 2 C Y Y 96 d terminations 39597 UTILISATION PREVUE Le kit ELISA Anti Insuline IAA est un test pour la d termination quantitative des auto anticorps circulants de type IgG sp cifiques contre l insuline humaine 1 SIGNIFICATION CLINIQUE Le diab te de type 1 aussi connu comme mellitus insulinod pendant IDDM est caract ris par la destruction auto immunitaire chronique des cellules b ta qui s cretent l insuline Cette pathogen se est probablement due l exposition de sujets g n tiquement susceptibles des agents environnementaux On pense que la destruction auto immunitaire des cellules b ta pancr atiques est compl tement asymptomatique jusqu la perte de 80 90 des cellules Ce processus peut commencer tout ge et peut durer des ann es avant d tre compl tement achev La pr sence des auto anticorps anti insuline IAA chez les patients qui n ont jamais t trait s avec Insuline au contraire des anticorps Insuline lAb est la preuve du processus de destruction des cellules b ta pancr atiques dans le diab te de type 1 Les IAA sont particuli rement importantes quand on d termine le risque de diab te de type 1 car leur pr valence est significativement haute chez les
7. de 42 chantillons de s rum en double NOTE IMPORTANTE Porter tous les r actifs y compris les s rums temp rature ambiante 18 25 C avant l analyse Standard IContr les 100 uL Couvrir la microplaque et incuber pendant 15 minutes 37 C Enlever le m lange de r action laver en ajoutant dans chaque puit 0 3 mL de solution de lavage dilu e r p ter le lavage deux fois en enlevant compl tement la solution 100 uL 100 uL Substrat 100 uL Incuber 15 minutes 37 C dans l obscurit Solution 100 uL 100 uL d arr t Lire Pabsorbance E 450 nm en mettant z ro avec le blanc 100 uL La proc dure de lavage est cruciale Un lavage insuffisant entra ne une pr cision faible et une DO faussement lev e Sans agitation la DO mesur e sera 20 plus basse avec une perte de sensibilit 6 RESULTATS 6 1 Courbe standard Tracer les moyennes des r pliques des valeurs de DO des standards 1 5 sur l axe des ordonn es axe des y contre leurs concentrations respectives IAA Ab sur l axe des abscisses axe des x Tracer la courbe qui s approche le plus des points obtenus La concentration des anticorps anti insuline des contr les et des chantillons inconnus est lue directement en U ml en reportant la valeur de la DO 450 nm sur la courbe standard Le kit IAA peut aussi tre utilis avec un Computer Assisted Analysis en utilisant un logiciel capable de tracer des courbes avec spline smo
8. i re phase du test les anticorps anti Insuline de l chantillon dilu se fixent l insuline adsorb e sur les micropuits Apr s une incubation de 60 minutes 37 C les compos s non fix s sont limin s par lavage 10 23 Dans la phase suivante les anticorps fix s r agissent avec le conjugu anti lgG humaines coupl l horseradish peroxydase HRP ajout Le conjugu en exc s est limin par un autre lavage apr s une incubation de 15 minutes 37 C L HRP qui reste li la plaque convertit la couleur du substrat TMB ajout en un produit bleu La r action enzymatique est bloqu e par ajout d une solution acide apr s 15 minutes a 37 C L absorbance du produit jaune obtenu est mesur e 450 620 nm dans les 30 minutes La DO obtenue est directement proportionnelle la quantit d anticorps fix s 3 REACTIFS MATERIELS ET EQUIPEMENT 3 1 R actifs et mat riels fournis dans le kit 1 Standards IAA 5x 1 flacon 1mL STD1 REFDCE002 8307 0 STD2 REFDCE002 8308 0 STD3 REFDCE002 8309 0 STD4 REFDCE002 8310 0 STD5 REFDCE002 8311 0 2 Contr le Positif 1 mL REFDCE045 8302 0 3 Conjugu 15 mL REFDCE002 8302 0 Conjugu Anti IgG HRP humaines 4 Diluant chantillon 1 bouteille 100 mL REFDCE018 8318 0 5 Microplaque recouverte 1 microplaque Insuline adsorb e sur la microplaque REFDCE002 8303 0 5 1 Solution substrat 1 bouteille 15 mL REFDCE004 8304 0 6 Solution d arr t 1 bouteille
9. i diagnostica in vitro Dispositivos m dicos para diagnostico in vitro Bestellnummer Apiu c katad yov Catalogue number N mero de cat logo R f rences du catalogue Numero di catalogo N mero do cat logo Verwendbar bis letzter Tag des Monats Xphon oc n tedevta a nu pa tov UVA Use by last day of the month Fecha de caducidad usar antes del ltimo d a del mes Utiliser avant dernier jour du mois indiqu Utilizzare prima del ultimo giorno del mese Utilizar at antes do ltimo dia do m s Gebrauchsanweisung beachten 2uvufovAevtelte tis OONy eC YPAONG Read instructions for use Consultar las instrucciones de uso Consulter le mode d emploi Consultare le istruzioni per luso Consultar instru es para uso Ausreichend f r n Tests To repiey uevo enrapKe yia n OKULOG EC Contents for n tests Contenido suficiente para n ensayos 6622 Contenu suffisant pour n tests T Contenuto sufficiente per n saggi 66 a2 Conte do suficiente para n testes Temperaturbereich Opra Bepuokpactoc Temperature interval Temperatura de conservaci n Limites de temp rature de conservation Limiti di temperatura Intervalo de temperatura 22125 Hergestellt von KatackevacotTis Manufacturer Fabricado por Fabriqu par Fabbricante Produzido por Herstellungsdatum Huepounv a Ko TOOKEeu S Date of manufacture Fecha de producci n Date de fabrication Data
10. immune beta cell damage Pediatr Adolesc Endocrinol 1986 15 111 116 Ziegler AG R Ziegler P Vardi RA Jackson JS Soeldner amp GS Eisenbarth Life table Analysis of Progression to Diabetes od Anti Insulin Autoantibody positive Relatives of Individuals with Type 1 Diabetes Diabetes 1989 38 1320 1325 12 23 mauvaise qualit de l eau utilis e pour la solution de lavage faible degr de d ionisation lavages insuffisants conjugu non compl tement enlev Valeurs inexplicables hors chelle contamination de pipette embouts ou r cipients lavages insuffisants conjugu pas compl tement enlev CV intra test lev r actifs et ou strip non port s temp rature ambiante avant l utilisation le laveur pour microlamelles ne lave pas correctement suggestion nettoyer la t te du laveur CV inter test lev conditions d incubation non constantes temp rature contr les et chantillons non distribu s en m me temps avec les m mes intervalles contr ler la s quence de distribution variabilit intrins que des op rateurs dur e ou Ed 10 2009 Verwendete Symbole Ere nynon ovuboicov Explanation of symbols Explicacion de los simbolos Explication des symboles Spiegazione dei simboli Significado dos s mbolos In vitro Diagnostikum In vitro OLayVOOTIKN 1ATPIK OVOKEVN In vitro diagnostic medical device Para diagn stico in vitro Dispositif m dical de diagnostic in vitro Dispositivo d
11. othing fit Exemple Echantillon DO a 450 nm DO b DO 450 nm moyenne Standard 5 2 697 2 607 Contr le Pos 1 360 1 323 Patient 1 0 540 0 530 0 535 Crit re de validation Les chantillons avec une DO plus lev e par rapport au Standard 5 doivent tre dilu s avec le diluant chantillon et la concentration des anticorps de IAA IA doit tre calcul e en appliquant le facteur de dilution Echantillon dilu Valeurs de r f rence Standard 100 uL des S1 S5 24 Un 2 4 Um Couvrir la microplaque et incuber pendant 1 heure 37 C Enlever le m lange de r action laver en ajoutant dans chaque puit 0 3 mL de solution de lavage dilu e r p ter le lavage deux fois en enlevant compl tement la solution Il est recommand que chaque laboratoire tablisse ses propres plages de r f rences normales et pathologiques pour les niveaux d anticorps anti lAA dans le s rum Donc les valeurs report es ci dessus doivent tre consid r es uniquement comme indication Conjugu di dd PE 7 CARACTERISTIQUES DE LA PROCEDURE 7 1 Calibration 11 23 Le kit IAA est calibr artificiellement et les concentrations de IAA sont exprim s en U ml 7 2 Lin arit En consid rant la nature h t rog ne de la population des anticorps leur sp cificit et affinit les valeurs th oriques attendues pour les dilutions des anticorps IAA pourraient dans certains cas ne pas correspondre la concent
12. ration mesur e au cours d un test de r cup ration 7 3 Sp cificit et Sensibilit Les r sultats disponibles montrent une sensibilit relative de 60 et une sp cificit relative de 90 Les valeurs relatives pour la sensibilit et la sp cificit se r f rent aux r sultats obtenus avec le Golden Standard IAA RIA On ne conna t pas d autres possibilit s pour la mesure des anticorps Insuline pour l utilisation en routine 7 4 Limite de d tection La sensibilit analytique limite de d tection ou plus faible quantit d tectable 0 3 DS est tablie 0 08 U ml La sensibilit fonctionnelle est mesur e comme 20 du CV inter tests 0 9 U ml 7 5 Variation Intra et inter tests Williams AJK PJ Bingley E Bonifacio JP Palmer 8 Eam Gale A novel Micro assay for Insulin Autoantibodies J Autoimmunity 1997 10 473 478 Lindberg B SA Ivarsson M Landin Olsson G Sundkvist L Svanberg A Lernmark Islet autoantibodies in cord blood from Children who developed Type Insulin dependent diabetes mellitus before 15 years of age Diabetologia 1999 42 181 187 Potter KN amp T J Wilkins The molecular specificity of Insulin autoantibodies Diabetes Metab Res Rev 2000 16 338 353 SUGGESTIONS POUR LA RESOLUTION DES PROBLEMES TROUBLESHOOTING ERREURS CAUSES POSSIBLES SUGGESTIONS Aucune r action colorim trique de l chantillon absence distribution du conjugu contamination du conjugu et ou
13. sujets qui d veloppent la maladie dans l enfance et par ailleurs ce sont le plus souvent les premiers auto anticorps tre d tect s avant le d but de la maladie La pr valence des IAA est inversement li e l ge du diagnostic Chez les patients diab tiques de type 1 avec un d veloppement r cent de la maladie un ge inf rieur 5 ans les IAA peuvent tre d termin s chez plus de 90 des patients tandis que chez les diab tiques de type 1 de plus de 20 ans la pr valence des IAA est sup rieure 20 La mesure des IAA associ e celle des anticorps contre l acide glutamique d carboxylase Ac GAD65 de l antig ne prot ine tyrosine phosphatase lA2 et des antig nes des cellules des lots pancr atiques ICA forme la base de la strat gie actuelle pour la pr diction du d veloppement futur du diab te de type 1 En plus des auto anticorps contre l insuline humaine on peut souvent trouver des anticorps induits par un traitement l insuline Ces anticorps sont pr sents une concentration beaucoup plus lev e et sont principalement dirig s contre les fractions d natur es conformations diff rentes de l Insuline utilis e Ceci conduit la formation de complexes antig nes anticorps et r duit ainsi l activit de l Insuline inject e Pour une gestion optimale de la maladie quand on utilise de l insuline il faut soumettre les patients des tests r guliers 2 PRINCIPE DE LA METHODE Dans la prem
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