Bouillon de MacCONKEY
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1. 07 F 2003 01 4 3 3 Biokar Diagnostics Rue des Quarante Mines ZAC de Ther Allonne B P 10245 F60002 Beauvais Cedex France T l 33 0 3 44 14 33 33 Fax 33 0 3 44 14 33 34 www biokar diagnostics fr2. Bouillon de MacCONKEY DOMAINE D UTILISATION Le bouillon de MacConkey est utilis comme milieu pr somptif de d tection des bact ries coliformes dans l eau le lait et les produits de la mer hu tres HISTORIQUE Le bouillon de MacConkey constitue une modification de la formule du milieu d crit originellement par MacConkey en 1901 Celui ci contenait du taurocholate de sodium comme agent inhibiteur et du tournesol comme indicateur En 1905 MacConkey sugg ra l emploi du rouge neutre au lieu d indicateur au tournesol Ult rieurement Childs et Allen d montr rent l effet inhibiteur du rouge neutre et lui ont substitu l emploi de pourpre de bromocr sol moins inhibiteur PRINCIPES La pr sence de bile purifi e inhibe la croissance des microorganismes Gram positif La fermentation du lactose par les coliformes est mise en vidence par l acidification du milieu qui provoque le virage au jaune de l indicateur pH pourpre de bromocr sol ainsi que par la production de gaz dans les cloches de Durham PREPARATION Milieu simple concentration Mettre en solution 35 0 g de milieu d shydrat BK107 dans 1 litre d eau distill e ou d min ralis e Agjiter lentement jusqu dissolution compl te R partir en tubes munis d une cloche de Durham __ St riliser autoclave 121 C pendant 15 minutes Apr s refroidissement les cloches de Durham ne doivent pas contenir d air Milieu double concentr
3. ation Mettre en solution 70 0 g de milieu d shydrat BK107 dans 1 litre d eau distill e ou d min ralis e Agiter lentement jusqu dissolution compl te R partir en tubes 20 x 200 mm sans cloche de Durham raison de 10 mL par tube __ St riliser l autoclave 121 C pendant 15 minutes 1 3 Biokar Diagnostics Rue des Quarante Mines ZAC de Ther Allonne B P 10245 F60002 Beauvais Cedex France T l 33 0 3 44 14 33 33 Fax 33 0 3 44 14 33 34 www biokar diagnostics fr MODE D EMPLOI Milieu simple concentration __Ensemencer les tubes avec 1 mL d inoculum et de ses dilutions d cimales successives Milieu double concentration Ensemencer les tubes avec 10 mL d inoculum Recouvrir d un bouchon de g lose st rile Agar bact riologique type E A1012 pr alablement maintenue 44 47 C Incubation Pour les coliformes incuber pendant 24 heures 30 ou 37 C suivant le protocole analytique respecter Pour les coliformes thermotol rants incuber 24 heures 44 5 C partir des tubes double concentration transf rer une se boucl e de culture dans un tube simple concentration et incuber nouveau pendant 24 heures avant d effectuer la lecture LECTURE La fermentation du lactose qui se traduit par l apparition de gaz dans les cloches de Durham volume au minimum gal au 1 10 me du volume de la cloche en 24 heures indique le pr sen
4. ce de coliformes L identification des germes peut tre pratiqu e partir des tubes gazog nes au moyen de subcultures sur des milieux g los s appropri s g lose lactos e au BCP BK023 ou g lose EMB Levine BK056 FORMULE TYPE pouvant tre ajust e de fa on obtenir des performances optimales Pour 1 litre de milieu lt TYPING PR aa a SEON E a a aA a SESA 20 00 g Bile de boeuf bact riologique 5 00 g D LEE 6 0 TE e a EOE E 10 00 g Pourpre de bromocr sol 0 01 g pH du milieu pr t l emploi 25 C 7 3 0 2 2 3 Biokar Diagnostics Rue des Quarante Mines ZAC de Ther Allonne B P 10245 F60002 Beauvais Cedex France T l 33 0 3 44 14 33 33 Fax 33 0 3 44 14 33 34 www biokar diagnostics fr CONTR LE QUALITE Milieu d shydrat poudre beige beige vert fluide et homog ne Milieu pr par solution violac e limpide R ponse culturale typique apr s 48 heures d incubation 30 C Microorganismes Croissance Escherichia coli ATCC 25922 bonne score 2 positive 1 Citrobacter freundii ATCC 43864 bonne score 2 positive Enterococcus faecalis ATCC 29212 partiellement inhib e n gative score 0 1 Staphylococcus aureus ATCC 25923 inhib e score 0 inoculum lt 10 microorganismes STOCKAGE CONSERVATION Milieu d shydrat 2 30 C La date de p remption e
5. st mentionn e sur l tiquette Milieu pr par en tubes ou en flacons 6 mois 2 8 C l abri de la lumi re titre indicatif PRESENTATION Code Milieu d shydrat Flacon de 500 g BK107HA REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES McCONKEY A and HILL C A 1901 Bile salt broth Thompson Yates Laboratories Report VI 1 McCONKEY A 1905 Lactose fermenting bacteria in feces Journal of Hygiene 5 333 379 McCONKEY A 1908 Bile salt media and their advantages in some bacteriological examinations Journal of Hygiene 8 322 334 XP CEN ISO TS 11133 2 V 08 104 2 Janvier 2004 Microbiologie des aliments Guide pour la pr paration et la production des milieux de culture Partie 2 Guide g n ral pour les essais de performance des milieux de culture Pharmacop e Europ enne 5 6 01 2007 20613 2 6 13 Contr le microbiologique des produits non st riles Recherche de microorganismes sp cifi s Solution et milieux de culture recommand s 4679 4682 United States Pharmacopeia 30 2007 Microbiological Tests Microbiological Examination Recommended Solutions and Culture Media 96 97 Les mentions port es sur l tiquette sont pr dominantes sur les formules ou les instructions d crites dans ce document Les informations et les sp cifications contenues dans cette fiche technique ont t tablies la date du 2009 02 10 Elles sont susceptibles d tre modifi es tout moment sans pr avis Code document BK1
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