Mode d`emploi complet
Contents
1. amp Betke K 1957 Demonstration von fetalem in dem Erythrocten eines Blatausstrichs Klin Wschr 35 637 2 Interpr tation a Dacie J V amp Lewis S M 1991 Practical Haematology 7 ed 472 475 b Chanarin I et al 1989 Laboratory Haematology An account of Laboratory Techniques 15t ed 162 163 c Mollison P L Engelfriet C P amp Contreras M 1993 Blood Transfusion in Clinical Medicine 9 Ed 548 9 798 800 d Mollison P L 1972 Quantitation of Transplacental Haemorrhage Brit Med J iii 31 and 115 e Mollison P L 1984 Some aspects of Rh Haemolytic isease and its prevention in Hemolytic Disease of the Newborn ed Garraty Amer Assoc of Blood Banks VA Bibliographie The estimation of fetomaternal haemorrhage Transfusion Medicine 1999 87 92 Prepared by a working party of the BCSH Blood Transfusion and General Haematology Task Forces Fabricant Distributeur CLIN TECH Ltd LABO MODERNE Unit G Perram Works 37 rue Dombasle Merrow Lane GUILDFORD GU4 7BN 75015 PARIS A partir du 1 Juin 2006 et dans le cadre de l am lioration de la technique la concentration en Eosine du contre colorant de Shepard CL61037 est dor navant de 1 au lieu de 0 5 Remarque Les solutions 1 amp 2 du kit CL61036 doivent tre exclusivement utilis es en combin l une avec l autre Elles ne peuvent en aucun cas tre utilis es en combin ave2. KIT HEMOGLOBINE vD FOETALE CL61036 APPLICATION Le kit de coloration Shepard modifi Kleihauer est utilis pour le d pistage de l h morragie foeto maternelle passage transplacentaire de globules rouges f taux dans le sang maternel PRESENTATION DU KIT R actifs gt Solution 1 500 ml Solution alcoolique d h matoxyline gt Solution 2 250 ml Chlorure ferrique acidifi Il convient d utiliser galement gt Solution d Ethanol 80 CL61059 gt Contre colorant d Eosine 1 CL61037 OU gt Contre colorant Erythrosine 0 1 CL610610 PROTOCOLE Pr paration R actif op ratoire pr parer en m langeant 2 volumes de solution 1 avec un volume de solution 2 et 1 volume d thanol 80 Technique 1 Diluer le sang sous anticoagulant dans du s rum physiologique dans les proportions 1 2 1 3 2 Fixer dans l thanol 80 pendant 5 minutes temp rature ambiante 3 Laisser s cher 4 Colorer pendant 20 secondes dans le r actif op ratoire 5 Rincer l eau distill e 6 Contre colorer avec le contre colorant Eosine 1 ou l Erythrosine 0 1 pendant 3 minutes 7 Rincer et s cher utiliser une lame avec de l huile immersion 8 Pour l examen au microscope utiliser un objectif x10 et un oculaire x10 pour le dosage de l h moglobine f tale utiliser un objectif x40 et un oculaire x10 R sultats Les cellules contenant l h moglobine adulte sont compl teme
3. c d autres r actifs La soci t LABO MODERNE d cline toute responsabilit sur les r sultats obtenus si l utilisation n est pas strictement conforme la technique d crite ci dessus et la combinaison des deux r actifs originaux Mise jour C46 53 08 2013
4. nt lu es laissant des stromas vides Les cellules contenant l Hb F sont color es en rouge Les globules blancs sont color s en gris pourpre Notes Il est pr f rable de recueillir du sang sous anticoagulant EDTA Si n cessaire des chantillons datant de 48 heures peuvent tre utilis s 1 Le r actif op ratoire est stable pendant six semaines maximum temp rature ambiante et peut tre filtr en cas de pr cipitation 2 Hb F r siste l lution acide La modification de Shepard permet d viter les inconv nients des solutions tampon de Kleihauer 3 Il est indispensable que le m lange initial 1 2 soit pr par correctement 4 Tenir l cart des flammes NE PAS FUMER 5 Des contr les positifs et n gatifs doivent tre effectu s avec chaque lot d investigation Les contr les n gatifs sont pr par s suivant la technique ci dessus indiqu e partir d chantillons de sang adulte normal Les contr les positifs sont pr par s en m langeant 1 volume de sang de cordon ombilical avec 10 20 volumes de sang adulte et dilu avec du s rum physiologique comme indiqu au point 1 de la m thode REFERENCES 1 Technique a Human haemoglobin variants and their identification Wallet amp Robinson Laboratory Aids Series b Nierhaus K amp Betke K 1968 Eine vereinfatche modifikation der sauren Elution die cytologische Darstellung vom fetalem Haemoglobin Klin Wschr 46 47 c KleihauerE Braun H
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