Gélose KING B
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1. G lose KING B DOMAINE D UTILISATION La g lose King B permet la production de fluoresc ine ou pyoverdine pigment jaune vert fluorescent sous lumi re ultra violette par certains Pseudomonas Le milieu est utilis principalement dans l analyse de l eau pour la d tection et la diff renciation de Pseudomonas aeruginosa qui produit ce pigment fluorescent contrairement certaines esp ces de Pseudomonas qui n en produisent pas HISTORIQUE Le milieu a t d crit par King Ward et Raney en 1954 puis la formule a t modifi e selon les recommandations de la Pharmacop e am ricaine Les auteurs ont galement mis au point le milieu King A qui favorise la production de pyocyanine pigment fluorescent bleu au d triment de la pyoverdine PRINCIPES La g lose King B favorise la production de pyoverdine et inhibe par ailleurs la production de pyocyanine La fluoresc ine produite par les Pseudomonas est un pigment jaune vert fluorescent qui est facilement d tect sur ce milieu Le phosphate dipotassique augmente la concentration en phosphore apport par la peptone et stimule ainsi la production de fluoresc ine tout en inhibant la production de pyocyanine Le sulfate de magn sium apporte les cations n cessaires la production de pyoverdine PREPARATION Faire fondre les tubes de milieu pendant le minimum de temps n cessaire la reliqu faction puis les incliner de mani re obtenir une pente oblique apr2. ney D E 1954 Two simple media for the demonstration of pyocyanin and fluorescein J Lab Clin Med 44 301 United States Pharmacopeia 25 2002 Microbial Limit Tests 1874 1878 NF T 90 461 Juillet 2001 et NF T 90 461 A1 Juin 2005 Qualit de l eau Microbiologie Contr le qualit des milieux de culture NF EN ISO 16266 T90 419 Ao t 2008 Qualit de l eau D tection et d nombrement de Pseudomonas aeruginosa M thode par filtration sur membrane Les mentions port es sur les tiquettes sont pr dominantes sur les formules ou les instructions d crites dans ce document Les informations et les sp cifications contenues dans cette fiche technique ont t tablies la date du 2011 02 14 Elles sont susceptibles d tre modifi es tout moment sans pr avis Code document BK172 F 2003 10 7 3 3 Biokar Diagnostics Rue des Quarante Mines ZAC de Ther Allonne B P 10245 F60002 Beauvais Cedex France T l 33 0 3 44 14 33 33 Fax 33 0 3 44 14 33 34 www biokar diagnostics fr
3. s refroidissement NOTA 1 Une liqu faction partielle de lagar entra nera in vitablement une alt ration significative de la consistance du gel du milieu solidifi apr s st rilisation et refroidissement NOTA 2 Il est recommand lorsque le milieu n est pas utilis dans les 8 jours qui suivent sa pr paration de le reliqu fier au bain marie bouillant et de le solidifier nouveau en bonne position 1 3 Biokar Diagnostics Rue des Quarante Mines ZAC de Ther Allonne B P 10245 F60002 Beauvais Cedex France T l 33 0 3 44 14 33 33 Fax 33 0 3 44 14 33 34 www biokar diagnostics fr MODE D EMPLOI A partir de chaque colonie suspecte pr lev e sur le milieu d isolement s lectif puis purifi e sur g lose nutritive ensemencer la surface inclin e de g lose King B par des stries serr es Il est n cessaire d utiliser des cultures pures pr lev es au centre de colonies bien isol es sinon les r actions crois es rendent l identification impossible r aliser Incuber 36 2 C pendant 24 heures et jusqu 5 jours capsul favoriser les changes gazeux LECTURE Les colonies pr sentant 360 nm sont consid r es comme positives pour le contr le des eau dans la norme NF EN ISO 16266 FORMULE TYPE du milieu complet pouvant tre ajust e de fa on obtenir des performances optimales Pour 1 litre de milieu es desserr es de mani re une fl
4. uorescence jaune verte d tectable sous ultra violets x Suivant la m thode d crite POPNE 2 eee nn a 20 0 g LEINO SE aa ma te es 10 0 mL Phosphate dipotassique 5 4rsenitursrtanietianeenetemetannssees 1 59 Sulfate de magn sium 7 HO 1 5g Agar agar DAGI rIOIOOIQU het teen dts 15 0 g pH du milieu pr t l emploi 25 C 7 2 0 2 CONTR LE QUALITE Milieu complet g lose ambr e T90 461 Microorganismes Croissance Pseudomonas aeruginosa CIP 82 118 positive ATCC 10145 positive ATCC 27853 positive ATCC 11775 positive CIP 53 154 positive Pseudomonas aeruginosa Pseudomonas aeruginosa Escherichia coli Staphylococcus aureus 2 3 R ponse culturale typique apr s 24 heures d incubation 36 2 Fluorescence 360 nm positive positive positive n gative n gative Biokar Diagnostics Rue des Quarante Mines ZAC de Ther Allonne B P 10245 F60002 Beauvais Cedex France T l 33 0 3 44 14 33 33 Fax 33 0 3 44 14 33 34 www biokar diagnostics fr C NF EN ISO 16266 NF STOCKAGE CONSERVATION Milieu complet pr t liqu fier en tubes Stocker entre 2 et 8 C l abri de la lumi re La date de p remption est mentionn e sur l tiquette PRESENTATION Code Milieu pr t liqu fier complet avec glyc rol en tubes Sachet de 7 tubes de 7 mL BM10508 REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES King E O Ward M K and Ra
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