Disco de Reagente Metabólico Completo Piccolo
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1. Creatinina Doen a renal e monitoriza o de di lise renal Glicose Dist rbios do metabolismo dos hidratos de carbono incluindo diabetes mellitus e hipoglicemia em jovens e adultos Pot ssio Doen a renal glomerular ou tubular insufici ncia adrenocortical cetoacidose diab tica terap utica com pot ssio administrado por via intravenosa em excesso s psis panhipopituitarismo hem lise in vitro hiperaldosteronismo desnutri o hiperinsulinismo alcalose metab lica e perda gastrointestinal S dio Desidrata o diabetes insipidus perda de fluidos gastrointestinais hipot nicos intoxica o por sal diminui o selectiva da sensa o de sede perdas cut neas queimaduras suda o hiperaldosteronismo dist rbios do SNC hiponatremia de P gina 1 de 23 dilui o deple o e del rio e s ndrome de secre o inadequada de ADH Bilirrubina total Dist rbios hep ticos incluindo hepatite e obstru o da ves cula biliar icter cia Di xido de carbono total Alcalose e acidose metab licas prim rias e alcalose e acidose respirat rias prim rias Prote na total Doen as hep ticas renais da medula ssea dist rbios metab licos e nutricionais Azoto ureico no sangue BUN Doen as renais e metab licas Tal como acontece com qualquer procedimento de teste de diagn stico todos os outros procedimentos de teste incluindo o estado cl nico do doente devem ser considerados antes do diagn stico fina2. 5 2 4 10 0 24 5 9 143 5 2 28 1 6 120 0 2 13 1 8 0 8 0 06 8 0 5 2 0 09 1 7 21 4 2 29 10 7 10 5 0 90 8 6 6 8 0 05 0 8 4 7 0 09 2 0 Pagina 16 de 23 Total 66 1 03 1 6 278 3 84 1 4 6 12 0 32 5 7 4 10 0 26 6 3 143 5 2 28 1 6 120 0 2 13 1 8 0 8 0 07 9 3 5 2 0 15 2 8 21 4 2 29 10 7 10 5 0 90 8 6 6 8 0 08 1 2 47 0 09 2 0 Tabela 6 Precis o continua o Analito Tamanho da amostra Intra ensaio Total Azoto ureico mg dL Controlo 1 N 80 M dia 19 19 DP 0 35 0 40 CV 1 9 24 Controlo 2 M dia 65 65 DP 1 06 1 18 CV 1 6 1 8 Coeficiente Foram obtidas e analisadas amostras de sangue total heparinizado e soro no Analisador Quimico de Sangue Piccolo e por m todo s comparativo s As amostras de sangue total foram analisadas pelo Analisador Qu mico de Sangue Piccolo nos locais de colheita e as amostras de soro foram analisadas pelo Analisador Qu mico de Sangue Piccolo e por m todos comparativos Em alguns casos foram utilizadas amostras com elevada e reduzida suplementa o para cobrir o intervalo din mico As amostras foram seleccionadas de modo a cumprir os valores de distribui o da directriz NCCLS EP9 A A Tabela 7 apresenta estat sticas de correla o representativas Tabela 7 Correla o do Analisador Qu mico de Sangue Piccolo com m todo s comparativo s Intervalo da Coeficiente Declive Inter EPE N amostra Metodo de
3. respectivamente Os i es Cu II reagem com as liga es pept dicas entre os tomos de oxig nio no carbonilo e de nitrog nio no amido para formar um complexo Cu proteina colorido OH Prote na total Cu II Complexo Cu proteina A quantidade de prote na total presente na amostra directamente proporcional absorv ncia do complexo Cu proteina O teste de prote na total uma reac o de ponto final e a absorv ncia medida como a diferen a de absorv ncia entre 550 nm e 850 nm Azoto ureico no sangue BUN A ureia pode ser medida directa e indirectamente A reac o da diacetilmonoxima o nico m todo directo para medir a ureia frequentemente utilizada embora empregue reagentes perigosos Os m todos indirectos medem a am nia criada a partir da ureia a utiliza o da enzima urease aumentou a especificidade destes testes A amonia quantificada por uma variedade de m todos incluindo a nessleriza o titula o de cido a t cnica de Berthelot2 e reac es enzim ticas acopladas No entanto os procedimentos de Berthelot catalisados s o inconstantes para a medi o de am nia As reac es enzim ticas acopladas s o r pidas apresentam uma elevada especificidade para a am nia e s o frequentemente utilizadas Uma destas reac es foi proposta como candidato a m todo de refer ncia Na reac o enzim tica acoplada a urease hidrolisa a ureia em am nia e di xido de
4. rios com o estado de dispensa Laborat rios n o abrangidos pela dispensa A Abaxis recomenda que os testes de controlo sigam as directrizes federais estatais e locais 9 Resultados O Analisador Qu mico de Sangue Piccolo ou o Analisador Qu mico Piccolo xpress calcula e imprime automaticamente as concentra es do analito na amostra Os detalhes dos c lculos de reac o de ponto final e cin tica encontram se no Manual do Operador do Analisador Qu mico de Sangue Piccolo ou do Analisador Qu mico Piccolo xpress A interpreta o dos resultados descrita no Manual do Operador Os resultados s o impressos em cart es de resultados fornecidos pela Abaxis Os cart es de resultados t m um verso autocolante para facilitar a coloca o nos ficheiros dos doentes 10 Limita es do procedimento As limita es gerais do procedimento s o discutidas no Manual do Operador do Analisador Qu mico de Sangue Piccolo ou do Analisador Qu mico Piccolo xpress e O nico anticoagulante recomendado para utiliza o com o Sistema Qu mico de Sangue Piccolo ou o Analisador Qu mico Piccolo xpress a heparina de l tio A Abaxis realizou estudos que demonstram que o EDTA fluoreto oxalato e qualquer anticoagulante que contenha i es de am nio interferem com pelo menos um dos qu micos contidos no Disco de Reagente Metab lico Completo Piccolo N o utilize heparina de s dio e As amostras com hemat critos com um excesso de volume de concentr
5. 62 M dia 8 0 10 5 13 1 CV 1 7 1 5 1 4 Intervalo observado 7 1 8 4 10 1 11 0 12 6 13 4 Percentagem de 100 100 100 resultados dentro do 62 62 62 62 62 62 intervalo IC de 95 94 2 a IC de 95 94 2 a IC de 95 94 2 a 6 3 100 100 100 Cloreto CL N vel 1 N vel 2 N vel 3 N 62 62 62 M dia 94 6 106 0 115 5 CV 1 8 1 4 1 5 Intervalo observado 90 100 102 108 110 119 Percentagem de 91 9 96 8 95 2 resultados dentro do 57 62 60 62 59 62 intervalo IC de 95 82 2 a IC de 95 88 8 a IC de 95 86 5 a 2 4 97 3 99 6 99 0 Creatinina CRE Nivel 1 N vel 2 N vel 3 N 62 62 62 M dia 0 89 2 07 6 89 CV 11 0 5 0 1 6 Intervalo observado 0 7 1 2 1 8 2 3 6 5 7 2 Percentagem de 93 6 100 100 resultados dentro do 58 62 62 62 62 62 intervalo IC de 95 84 3 a IC de 95 94 2 a IC de 95 94 2 a 15 0 98 2 100 100 P gina 19 de 23 Glicose GLU Nivel 1 Nivel 2 Nivel 3 N 62 62 62 M dia 95 2 130 3 365 8 CV 1 1 1 0 0 8 Intervalo observado 93 98 125 133 351 373 Percentagem de 100 100 100 resultados dentro do 62 62 62 62 62 62 intervalo IC de 95 94 2 a IC de 95 94 2 a IC de 95 94 2 a 10 4 100 100 100 Pot ssio K Nivel 1 Nivel 2 Nivel 3 N 62 62 62 M dia 3 4 5 7 7 2 CV 3 3 2 5 2 0 Intervalo observado 3 2 3 7 5 2 5 9 6 7 7 5 Percentagem de 100 100 100 result
6. 720 721 Kramer B et al A simple technique for the determination of calcium and magnesium in small amounts of serum J Biol Chem 1921 47 475 481 Clark EP et al A study of the Tisdall method for the determination of blood serum calcium with suggested modification J Biol Chem 1925 63 461 464 Katzman E et al The determination of serum calcium by titration with ceric sulfate J Biol Chem 1937 118 539 544 Cali et al A reference method for the determination of total calcium in serum Jn Selected Methods of Clinical Chemistry Vol 8 Cooper GR ed Washington DC American Association for Clinical Chemistry 1977 3 8 Kessler G et al An automated procedure for the simultaneous determination of calcium and phosphorus Clin Chem 1964 10 686 703 Michaylova V et al Photometric determination of micro amounts of calcium with arsenazo III Anal Chim Acta 1971 53 194 198 Scarpa A et al Metallochromic indicators of ionized calctum Ann NY Acad Sci 1978 307 86 112 Ono T et al A new enzymatic assay of chloride in serum Clin Chem 1988 34 552 553 Knoll VE et al Spezifische kreatininbetimmung im serum Z Klin Chemi Clin Biochem 1970 8 582 587 Haeckel R et al Simplified determinations of the true creatinine concentration in serum and urine J Cklin Chem Clin Biochem 1980 18 385 394 Moss GA et al Kinetic enzymatic method for determining serum creatinine 1975 21 1422 1426 Jaynes PK
7. CV Controlo 2 M dia DP CV Aspartato aminotransferase U L Controlo 1 M dia CV Controlo 2 Calcio mg dL Controlo 1 M dia DP CV Controlo 2 M dia DP CV Cloreto mmol L Controlo 1 M dia DP CV Controlo 2 M dia DP CV Creatinina mg dL Controlo 1 M dia DP CV Controlo 2 M dia DP CV Pagina 15 de 23 Intra ensaio N 80 5 6 0 09 1 7 3 7 0 07 2 0 39 1 81 4 6 281 4 08 1 5 49 0 98 2 07 147 1 83 1 26 8 6 0 21 2 4 11 8 0 39 3 3 N 160 97 8 1 63 1 7 113 6 1 97 1 7 N 80 1 1 0 14 12 5 5 2 0 23 44 Total 5 6 0 11 2 1 3 7 0 11 2 9 39 2 29 5 8 281 8 75 3 1 49 0 98 2 07 147 1 83 1 26 8 6 0 25 2 9 11 8 0 40 3 4 97 8 1 74 1 7 113 6 2 22 2 0 1 1 0 14 13 1 5 2 0 27 5 2 Tabela 6 Precis o continua o Analito Glicose mg dL Controlo 1 M dia DP CV Controlo 2 M dia DP CV Pot ssio mmol L Controlo 1 M dia DP CV Controlo 2 M dia DP CV S dio mmol L Controlo 1 M dia DP CV Controlo 2 M dia DP CV Bilirrubina total mg dL Controlo 1 M dia DP CV Controlo 2 M dia DP CV Di xido de carbono total mmol L Controlo 1 M dia DP CV Controlo 2 M dia DP CV Proteina total mg dL Controlo 1 M dia DP CV Controlo 2 M dia DP CV Tamanho da amostra N 80 N 120 N 120 Intra ensaio 66 0 76 1 1 278 2 47 0 9 6 12 0 32
8. Indica es de instabilidade deteriora o do disco de reagente Uma bolsa rasgada ou que apresente qualquer tipo de danos pode permitir a entrada de humidade no disco n o utilizado e afectar adversamente o desempenho do reagente N o utilize um disco de uma bolsa danificada 6 Instrumento Consulte no Manual do Operador do Analisador Qu mico de Sangue Piccolo ou do Analisador Qu mico Piccolo xpress informa es completas sobre como utilizar o analisador 7 Colheita e prepara o das amostras As t cnicas de colheita das amostras s o descritas na sec o Colheita de amostras do Manual do Operador do Analisador Qu mico de Sangue Piccolo ou do Analisador Qu mico Piccolo xpress e Ovolume m nimo da amostra necess rio 100 uL de sangue total heparinizado plasma heparinizado soro ou material de controlo A c mara da amostra do disco de reagente pode conter at 120 uL de amostra e As amostras de sangue total obtidas por pun o venosa devem apresentar se homog neas antes de serem transferidas para o disco de reagente Inverta suavemente o tubo de colheita v rias vezes imediatamente antes de transferir a amostra N o agite o tubo de colheita a agita o pode provocar hem lise e A hem lise pode provocar resultados incorrectamente elevados em ensaios de pot ssio Este problema pode n o ser detectado ao analisar sangue total basta uma liberta o de pot ssio t o baixa como 0 5 dos eritr citos para poder aumenta
9. L cloreto 80 mmol L creatinina 0 2 mg dL 18 umol L glicose 10 mg dL 0 56 mmol L pot ssio 1 5 mmol L s dio 110 mmol L bilirrubina total 0 1 mg dL 1 7 pmol L di xido de carbono total 5 mmol L prote na total 2 g dL 20 g L e azoto ureico no sangue 2 0 mg dL 0 7 mmol ureia L Precis o Foram realizados estudos de precis o utilizando as directrizes NCCLS EP5 A com modifica es com base na NCCLS EP18 P para dispositivos de utiliza o unit ria Os resultados de precis o intra ensaio e total foram determinados utilizando dois n veis de materiais de controlo comercialmente dispon veis Os estudos utilizaram m ltiplos instrumentos e dois lotes de discos de reagentes Foram efectuados testes de c lcio creatinina glicose s dio e azoto ureico num local foram efectuados testes de pot ssio e di xido de carbono total em dois locais durante 20 dias foram efectuados testes de cloreto em dois locais durante um per odo de cinco dias Os resultados dos estudos de precis o s o apresentados na Tabela 6 Tabela 6 Precis o Analito Tamanho da amostra _Intra ensaio Total Alanina aminotransferase U L Controlo 1 N 80 M dia 21 21 DP 2 76 2 79 CV 13 4 13 5 Controlo 2 M dia 52 52 DP DT 3 25 CV 5 2 6 2 Pagina 14 de 23 Tabela 6 Precis o continua o Analito Tamanho da amostra Albumina g dL Controlo 1 M dia DP Cv Controlo 2 M dia DP Cv Fosfatase alcalina U L Controlo 1 M dia DP
10. Sangue Piccolo ou do Analisador Qu mico Piccolo xpress pode ser verificado atrav s do processamento de controlos Para obter uma lista dos materiais de controlo de qualidade aprovados com os intervalos de aceita o contacte a Assist ncia T cnica da Abaxis Outros controlos base de soro humano ou plasma podem n o ser compat veis Os materiais de controlo de qualidade devem ser armazenados de acordo com o folheto informativo inclu do nos controlos P gina 9 de 23 Se os resultados de controlo estiverem fora do intervalo repita o controlo uma vez Se continuarem fora do intervalo contacte a Assist ncia T cnica N o inclua os resultados no relat rio se os controlos estiverem fora dos limites rotulados Consulte no Manual do Operador do Analisador Piccolo ou Piccolo xpress uma descri o detalhada sobre o processamento registo interpreta o e representa o gr fica dos resultados de controlo Laborat rios abrangidos pela dispensa A Abaxis recomenda a realiza o de testes de controlo conforme os seguintes par metros e pelo menos a cada 30 dias e sempre que as condi es laboratoriais tiverem sofrido altera es significativas por exemplo se o Analisador Piccolo tiver sido deslocado para uma nova localiza o ou em caso de altera es no controlo da temperatura e nos casos em que seja indicada a forma o ou renova o da forma o de pessoal e com cada novo lote testes com dispensa dos crit rios CLIA em laborat
11. carbono Ao combinar am nia com a cetoglutarato e nicotinamida adenina dinucle tido NADH reduzido a enzima glutamato desidrogenase GLDH oxida NADH em NAD Urease Ureia H Q0 gt 2NH CO GLDH NH o cetoglutarato NADH L glutamato H O NAD A taxa de varia o da diferen a de absorv ncia entre 340 nm e 405 nm deve se convers o de NADH em NAD e directamente proporcional quantidade de ureia presente na amostra 4 Princ pio de funcionamento Consulte no Manual do Operador do Analisador Qu mico de Sangue Piccolo ou do Analisador Qu mico Piccolo xpress os princ pios e limita es do procedimento 5 Descri o dos reagentes Reagentes Cada Disco de Reagente Metab lico Completo Piccolo cont m esferas de reagente secas espec ficas do teste descritas abaixo inclu do em cada disco um reagente de branco de amostra seca composto por tamp o surfactantes excipientes e conservantes para utiliza o no c lculo de concentra es de alanina aminotransferase ALT albumina ALB fosfatase alcalina ALP aspartato aminotransferase AST c lcio CA cloreto CL glicose GLU pot ssio K s dio NA di xido de carbono total tCO2 prote na total TP e azoto ureico no sangue BUN S o inclu dos no disco para creatinina CRE e bilirrubina total TBIL brancos de amostra dedicados Cada disco cont m ainda um diluente composto por surfactantes e conservantes P
12. dL 1 0 4 0 mmol L Cloreto CL 80 135 mmol L 80 135 mmol L Creatinina CRE 0 2 20 mg dL 18 1768 pmol L Glicose GLU 10 700 mg dL 0 56 38 9 mmol L Pot ssio K 1 5 8 5 mmol L 1 5 8 5 mmol L S dio NA 110 170 mmol L 110 170 mmol L Bilirrubina total TBIL 0 1 30 mg dL 1 7 513 umol L Di xido de carbono total tCO 5 40 mmol L 5 40 mmol L Prote na total TP 2 14 g dL 20 140 g L Azoto ureico no sangue BUN 2 180 mg dL 0 7 64 3 mmol ureia L Se a concentra o de analitos se situar acima do intervalo de medi o intervalo din mico mas for inferior ao intervalo do sistema o cart o impresso ir indicar um sinal gt no limite superior e um asterisco depois do n mero por exemplo ALT gt 2000 U L Se for inferior ao intervalo din mico ser impresso um lt com um asterisco por exemplo ALT lt 5 U L Para valores que se situem largamente fora do intervalo de medi o intervalo do sistema ser impresso em vez de um resultado Sempre que for apresentado num cart o impresso recolha uma nova amostra e reprocesse o teste Se os resultados da segunda amostra forem novamente suprimidos contacte a Assist ncia T cnica da Abaxis Sensibilidade limites de detec o O limite inferior de detec o do intervalo report vel din mico para cada analito de alanina aminotransferase 5 U L albumina 1 g dL 10 g L fosfatase alcalina 5 U L aspartato aminotransferase 5 U L c lcio 4 0 mg dL 1 0 mmol
13. determination of proteins in blood a micro method J Biol Chem 1921 49 109 113 Wolfson WQ et al A rapid procedure for the estimation of total protein true albumin total globulin alpha globulin beta globulin and gamma globulin in 10 ml of serum Am J Clin Pathol 1948 18 723 730 Saifer A Gerstenfeld S Vacsler F Photometric microdetermination of total serum globulins by means of a tryptophan reaction Clin Chem 1961 7 626 636 Saifer A Marven T The photometric microdetermination of serum total globulins with a tryptophan reaction a modified procedure Clin Chem 1966 12 414 417 Gendler SM Albumin In Clinical Chemistry Theory Analysis and Correlation 2 ed Kaplan LA Pesce AJ eds St Louis The C V Mosby Company 1989 1029 1033 Webster D Bignell AHC Attwood EC An assessment of the suitability of bromocresol green for the determination of serum albumin Clin Chim Acta 1974 53 101 108 Louderback A MealeyEH Taylor NA A new dye binding technic using bromcresol purple for determination of albumin in serum Clin Chem 1968 14 793 794 Abstract Pinnell AE Northam BE New automated dye binding method for serum albumin determination with bromcresol purple Clin Chem 1978 24 80 86 King EJ and Armstrong AR A convenient method for determining serum and bile phosphatase activity Can Med Assoc J 1934 31 376 381 Kind PRN King EJ Estimation of plasma phosphatase by determination of hydrolysed phenol with am
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15. gina 6 de 23 Tabela 1 Reagentes Componente Quantidade Disco 2 4 6 tribromo 3 cido hidroxibenz ico TBHBA 188 ug 2 cloro 4 nitrofenil a maltotri sido CNPG3 53 ug Cloridrato de 2 metil 4 isotizolina 3 ona MIT 4 2 ug 4 7 13 16 21 pentaoxa 1 10 diazabiciclo 8 8 5 tricosano Kryptofix 221 86 ug Cloridrato de 4 aminoantipirina 13 pg Adenosina 5 difosfato 36 ug Adenosina 5 trifosfato 22 ug Acido a cetoglutarico 101 pg Amilase 0 036 U Arsenazo III sal s dico 1 7 ug Ascorbato oxidase Cucurbita spp 0 3 U Bilirrubina oxidase 0 1 U P rpura de bromocresol 2 2 ug Acetato de c lcio 25 ug cido c trico sal triss dico 567 ug Creatina amidinohidrolase Actinobacillus spp 3 U Creatinina amidohidrolase Pseudomonas spp 1U Sulfato c prico 134 ug Acido etilenoglicol bis B aminoetil ter N N N N tetrac tico EGTA 4 ug Acido etileno diamino tetrac tico EDTA 178 ug Acido etileno diamino tetrac tico EDTA sal diss dico 15 ug B galactosidase 0 005 U Glicose 6 fosfato desidrogenase leveduras 0 05 U Glutamato desidrogenase figado bovino 0 01 U Glutamina sintetase 0 17 U Hexoquinase leveduras 0 1 U Imidazol 29 ug Lactato desidrogenase 0 27 U L alanina 874 ug Acido L aspartico 426 ug Acido L glut mico 9 2 ug Cloreto de magn sio 3 pg Sulfato de magn sio 33 ug Malato desidrogenase cora o de porco 0 1U Cloreto de mangan s 10 ug N acetilcisteina 60 ug B nicotinamida adenina dinucle tido NAD 40 ug B nic
16. hospitalizados forneceram um intervalo da amostra mais amplo e possivelmente mais til do que as amostras de sangue total venoso de doentes em ambulat rio As estat sticas de correla o para o teste de c lcio Piccolo resultam destas amostras s ricas Resultados do estudo com utilizadores sem forma o Foi realizado um estudo com utilizadores sem forma o no qual os participantes receberam apenas as instru es do teste e lhes foi solicitado que realizassem testes em 3 discos com amostras aleatorizadas e com oculta o As amostras consistiam em pools de soro preparados a tr s niveis para cada um dos catorze analitos ALT albumina ALP AST c lcio cloreto creatinina glicose pot ssio s dio bilirrubina total di xido de carbono total prote na total e azoto ureico no sangue BUN Os participantes n o receberam qualquer forma o sobre a utiliza o do teste No total foram inscritos aproximadamente 60 participantes de 3 locais representando uma popula o demogr fica educa o idade sexo etc variada As tabelas abaixo apresentam o resumo do desempenho para cada analito Alanina aminotransferase ALT N vel 1 N vel 2 N vel 3 N 62 62 62 M dia 45 4 U L 98 9 U L 184 3 U L CV 3 7 1 7 1 5 Intervalo observado 42 53 96 103 175 191 Percentagem de 98 4 100 100 resultados dentro do 61 62 62 62 62 62 intervalo IC de 95 91 3 a IC de 95 94 2 a IC de 95 94 2 a 1
17. s o geralmente associados a um aumento do risco de resultados adversos de DRC O c lculo da TFGe realizado pelo Piccolo utilizando a idade o sexo e a ra a do doente O m todo Piccolo para a creatinina rastre vel ao m todo de refer ncia de IDMS para creatinina pelo que poss vel utilizar a seguinte forma da equa o MDRD para calcular a TFGe TFG mL min 1 73 m 175 x Sa x Idade x 0 742 para mulheres x 1 212 para afro americanos Glicose GLU As primeiras medi es da concentra o de glicose foram realizadas utilizando m todos de redu o de cobre como o de Folin Wu e Somogyi Nelson A falta de especificidade das t cnicas de redu o de cobre conduziu ao desenvolvimento de procedimentos quantitativos que utilizam as enzimas hexoquinase e glicose oxidase O teste de glicose incorporado no Disco de Reagente Metab lico Completo consiste numa vers o modificada do m todo de hexoquinase que foi proposto como a base para o m todo de refer ncia de glicose A reac o da glicose com trifosfato de adenosina ATP catalisada por hexoquinase HK produz glicose 6 fosfato G 6 P e difosfato de adenosina ADP A glicose 6 fosfato desidrogenase G 6 PDH catalisa a reac o de G 6 P em 6 fosfogliconato e a redu o de nicotinamida adenina dinucle tido NAD em NADH HK Glicose ATP G 6 P ADP G 6 PDH G 6 P NAD gt gt gt 6 fosfogliconato NADH H Pot ssio K Foram desenvo
18. t cnicas de fraccionamento e o teor de triptofano das globulinas gt Estes m todos s o de realiza o insustent vel e n o possuem uma especificidade elevada Duas t cnicas imunoqu micas s o consideradas como m todos de refer ncia mas s o dispendiosas e morosas As t cnicas de liga o por corante s o os m todos mais frequentemente utilizados para medir a albumina O verde de bromocresol BCG o m todo de liga o por corante mais frequentemente utilizado mas pode sobrestimar a concentra o de albumina especialmente no limite inferior do intervalo normal O purpura de bromocresol BCP o corante mais espec fico utilizado Quando ligado albumina o p rpura de bromocresol BCP muda de cor de amarelo para azul A absorv ncia m xima varia com a mudan a de cor Surfactantes BCP Albumina Complexo albumina BCP pH cido A albumina ligada proporcional concentra o de albumina na amostra Trata se de uma reac o de ponto final que medida como a diferen a de absorv ncia entre 600 nm e 550 nm Fosfatase alcalina ALP As t cnicas de medi o da fosfatase alcalina foram inicialmente desenvolvidas h mais de 60 anos V rios destes m todos espectrofotom tricos de ponto final ou de dois pontos gt s o actualmente considerados obsoletos ou pouco pr ticos A utiliza o de fosfato p nitrofenil p NPP aumentou a velocidade da reaccao A fiabilidade desta t c
19. 1 Helgerson RC et al Host guest Complexation 50 Potassium and sodium ion selective chromogenic ionophores J Amer Chem Soc 1989 111 6339 6350 Kumar A et al Chromogenic ionophore based methods for spectrophotometric assay of sodium and potassium in serum and plasma Clin Chem 1988 34 1709 1712 Berry MN et al Enzymatic determination of sodium in serum Clin Chem 1988 34 2295 2298 Malloy HT and Evelyn KA The determination of bilirubin with the photoelectric colorimeter J Biol Chem 1937 119 481 490 Meites S Bilirubin direct reacting and total modified Malloy Evelyn method In Selected Methods of Clinical Chemistry vol 9 Faulkner WR Meites S eds Washington DC American Association for Clinical Chemistry 1982 119 124 Pagina 22 de 23 13 51 52 Perry B et al Measurement of total bilirubin by use of bilirubin oxidase Clin Chem 1986 32 329 332 54 55 56 57 Weichselbaum TE An accurate and rapid method for the determination of proteins in small amounts of blood serum and 59 60 61 62 Chaney et al Urea and ammonia determinations Clin Chem 1962 8 130 132 64 65 66 67 68 69 70 71 72 13 74 75 76 TI 78 79 80 81 82 Bibliografia continua o Murao S Tanaka N A new enzyme bilirubin oxidase produced by Myrothecium verrucaria MT 1 Agric Biol Chem 1981 45 2383 2384 Osaki S Anderson S Enzymatic determination of bilirubin Cl
20. 5 0 100 100 100 s hy pais a a x Esta percentagem baseia se no pressuposto de que nao se consegue distinguir devidamente entre valores normais e anormais quando os erros s o superiores a um quarto do intervalo normal Foi considerado o intervalo de 10 U L 47 U L Albumina ALB N vel 1 N vel 2 N vel 3 N 62 62 62 M dia 3 0 g dL 3 5 g dL 4 2 g dL CV 2 7 2 5 1 8 Intervalo observado 2 9 3 2 3 3 3 7 4 0 4 4 Percentagem de 100 100 100 resultados dentro do 62 62 62 62 62 62 intervalo IC de 95 94 2 a IC de 95 94 2 a IC de 95 94 2 a 12 5 100 100 100 P gina 18 de 23 Fosfatase alcalina ALP Nivel 1 Nivel 2 Nivel 3 N 62 62 62 M dia 94 5 U L 171 5 U L 337 5 U L CV 5 2 3 2 2 4 Intervalo observado 85 106 160 184 287 388 Percentagem de 100 100 100 resultados dentro do 62 62 62 62 62 62 intervalo IC de 95 94 2 a IC de 95 94 2 a IC de 95 94 2 a 15 0 100 100 100 Aspartato aminotransferase AST N vel 1 N vel 2 N vel 3 N 62 62 62 M dia 56 0 120 4 276 3 CV 2 4 1 1 1 0 Intervalo observado 54 60 117 124 266 285 Percentagem de 100 100 100 resultados dentro do 62 62 62 62 62 62 intervalo IC de 95 94 2 a IC de 95 94 2 a IC de 95 94 2 a 15 0 100 100 100 C lcio CA N vel 1 N vel 2 N vel 3 N 62 62
21. Disco de Reagente Metab lico Completo Piccolo Ce Servi o de Apoio ao Cliente e de Assist ncia T cnica 800 822 2947 Aplic vel apenas a clientes nos EUA Os clientes fora dos EUA dever o contactar o representante Dispensa dos crit rios CLIA Utilizar local da Abaxis para solicitar o servi o de apoio ao cliente apenas sangue total com heparina de l tio Complexidade moderada Utilizar sangue total com heparina de l tio plasma com heparina de l tio ou soro Fevereiro 2014 PN 400 7139 Rev M 2003 Abaxis Inc Union City CA 94587 1 Aplica o O Disco de Reagente Metab lico Completo Piccolo utilizado com o Analisador Qu mico de Sangue Piccolo ou o Analisador Qu mico Piccolo xpress destina se a ser utilizado para a determina o quantitativa in vitro de alanina aminotransferase ALT albumina fosfatase alcalina ALP aspartato aminotransferase AST c lcio cloreto creatinina glicose pot ssio s dio bilirrubina total di xido de carbono total proteina total e azoto ureico no sangue BUN em sangue total heparinizado plasma heparinizado ou soro em laborat rios cl nicos ou locais de presta o de cuidados Apenas para clientes nos EUA Os testes contidos neste painel est o dispensados ao abrigo dos regulamentos CLIA de 1988 Se um laborat rio modificar as instru es do sistema de testes estes ser o considerados de elevada complexidade e sujeitos a todos os requisitos CLIA Nos laborat rios com dis
22. Sarcosina HO 0 _ Glicina Formaldeido H O Peroxidase HO TBHBA 4 AAP 1 _ Corante quinoneimina vermelho H O S o utilizadas duas cuvetes para determinar a concentra o de creatinina na amostra A creatina end gena medida na cuvete de branco que subtraida da creatina end gena combinada e da creatina formada a partir das reac es enzim ticas na cuvete de teste Quando a creatina end gena for eliminada dos c lculos a concentra o de creatinina ser proporcional intensidade da cor vermelha produzida A reac o de ponto final medida como a diferen a de absorv ncia entre 550 nm e 600 nm TFGe calculada A creatinina no soro regularmente medida como indicador da fun o renal Uma vez que a creatinina influenciada pela idade pelo sexo e pela ra a a doen a renal cr nica DRC pode n o ser detectada utilizando apenas a creatinina no soro Assim o Programa Nacional de Educa o para a Doen a Renal EUA recomenda vivamente que os laborat rios comuniquem regularmente uma Taxa de Filtra o Glomerular estimada TFGe quando se medir a creatinina no soro em doentes com idades iguais ou superiores a 18 anos A comunica o regular da TFGe com todas as determina es de creatinina no soro permite que os laborat rios ajudem a identificar indiv duos com uma fun o renal reduzida e a facilitar a detec o de DRC Os valores de TFGe calculados lt 60 mL min
23. a 11 de 23 Consulte a Tabela 3 para obter uma lista de analitos nos quais foi observada interfer ncia Tabela 3 As subst ncias seguintes apresentaram uma varia o superior a 10 nos resultados para uma amostra de intervalo normal Concentra o que de interfer ncia produz interfer ncia observada gt 10 Alanina aminotransferase cido asc rbico 20 aum 11 Oxalacetato Albumina Acetoacetato 102 dim 18 Ampicilina 30 dim 12 Cafe na 10 dim 14 Cloreto de c lcio 20 dim 17 Cefalotina Keflin 400 aum 13 Ibuprofeno 50 aum 28 a cetoglutarato 5 dim 11 Nitrofurantoina 20 dim 13 Prolina 4 aum 12 Sulfadiazina 10 dim 14 Sulfanilamida 50 dim 12 Teofilina 20 dim 11 Fosfatase alcalina Teofilina 20 dim 42 Creatinina Acido asc rbico 20 dim 11 Dopamina 19 dim 80 L dopa 5 dim 71 Epinefrina 1 dim 45 Glutationa 30 dim 13 Glicose Oxalacetato 132 dim 11 Piruvato 44 dim 13 Pot ssio Penicilina G 100 aum 17 Sulfadiazina 150 dim 12 S dio Cefalotina 400 aum 12 Metotrexato 0 5 aum 11 Penicilina G 100 aum 10 Bilirrubina total Dopamina 19 dim 55 L dopa 5 dim 17 Di xido de carbono total Acetaminofeno 100 aum 11 cido asc rbico 20 dim 12 Cefalotina 400 aum 13 Cimetidina 16 dim 19 P gina 12 de 23 Tabela 3 As subst ncias seguintes apresentaram uma varia o superior a 10 nos resultados para uma amostra de intervalo normal continua o Concentra
24. a em plasma ou soro e armazenada num tubo de amostra com tampa no escuro a baixas temperaturas e Para as amostras de sangue total ou de plasma utilize apenas tubos de colheita de amostras evacuados com heparina de l tio tampa verde Para as amostras de soro utilize tubos de colheita de amostras evacuados sem aditivos tampa vermelha ou tubos para separa o de soro tampa vermelha ou vermelha preta e Inicie o teste no prazo de 10 minutos ap s a transfer ncia da amostra para o disco de reagente e A concentra o de di xido de carbono total determinada com maior exactid o quando o ensaio processado imediatamente ap s a abertura do tubo e o mais rapidamente poss vel ap s a colheita e processamento do sangue no tubo fechado O ar ambiente cont m muito menos di xido de carbono do que o plasma e di xido de carbono dissolvido gasoso escapa da amostra para o ar com uma consequente diminui o no valor de di xido de carbono at 6 mmol L no decorrer de 1 hora 8 Procedimento Materiais fornecidos e Um Disco de Reagente Metab lico Completo PN 400 1028 uma caixa de discos PN 400 0028 Materiais necess rios mas n o fornecidos e Analisador Qu mico de Sangue Piccolo ou Analisador Qu mico Piccolo xpress e As pipetas de transfer ncia de amostras volume fixo de aproximadamente 100 uL e as pontas s o fornecidas com cada Analisador Qu mico de Sangue Piccolo ou com o Analisador Qu mico Piccolo xpress e podem ser enco
25. ado de eritr citos de 62 65 uma frac o de volume de 0 62 0 65 podem apresentar resultados inexactos As amostras com um n vel elevado de hemat critos podem ser inclu das nos relat rios como hemolisadas Estas amostras podem ser centrifugadas de forma a obter plasma e reprocessadas num novo disco de reagente e Qualquer resultado de um determinado teste que exceda o intervalo de ensaio dever ser analisado atrav s de outro m todo de teste aprovado ou enviado para um laborat rio de refer ncia N o dilua a amostra e processe novamente no Analisador Qu mico de Sangue Piccolo ou no Analisador Qu mico Piccolo xpress Advert ncia Testes extensivos com o Analisador Qu mico de Sangue Piccolo ou o Analisador Qu mico Piccolo xpress demonstraram que em casos muito raros a amostra distribu da no disco de reagente pode n o fluir devidamente para a c mara da amostra Devido ao fluxo n o uniforme poss vel que seja analisada uma quantidade de amostra inadequada e v rios resultados poder o encontrar se fora dos intervalos de refer ncia A amostra pode ser reprocessada utilizando um novo disco de reagente Interfer ncia Foram testadas subst ncias como interferentes com os analitos Foram preparados pools de soro humano A concentra o a que cada subst ncia potencialmente interferente foi testada baseou se nos n veis de teste da directriz NCCLS EP7 P Ffeitos de subst ncias end genas e As subst ncias interferentes f
26. ados dentro do 62 62 62 62 62 62 intervalo IC de 95 94 2 a IC de 95 94 2 a IC de 95 94 2 a 8 6 100 100 100 S dio NA N vel 1 N vel 2 N vel 3 N 62 62 62 M dia 122 1 140 8 157 5 CV 1 0 0 8 1 0 Intervalo observado 118 127 138 143 154 162 Percentagem de 98 4 100 100 resultados dentro do 61 62 62 62 62 62 intervalo IC de 95 91 3 a IC de 95 94 2 a IC de 95 94 2 a 3 1 100 100 100 Bilirrubina total TBIL N vel 1 N vel 2 N vel 3 N 62 62 62 M dia 0 86 mg dL 2 5 mg dL 5 7 mg dL CV 6 1 2 6 1 8 Intervalo observado 0 8 1 0 2 3 2 6 5 4 5 9 Percentagem de 100 100 100 resultados dentro do 62 62 62 62 62 62 intervalo IC de 95 94 2 a IC de 95 94 2 a IC de 95 94 2 a 15 0 100 100 100 Di xido de carbono total tCO2 N vel 1 N vel 2 N vel 3 N 62 62 62 M dia 20 3 27 6 34 4 CV 5 1 4 6 3 7 Intervalo observado 18 23 23 30 32 38 Percentagem de 100 98 4 100 resultados dentro do 62 62 61 62 62 62 intervalo IC de 95 94 2 a IC de 95 91 3 a IC de 95 94 2 a 14 7 100 100 100 Pagina 20 de 23 Proteina total TP Nivel 1 Nivel 2 Nivel 3 N 62 62 62 M dia 4 8 g dL 5 7 g dL 7 1 g dL CV 2 0 1 5 1 5 Intervalo observado 4 6 5 3 5 3 5 9 6 7 7 5 Percentagem de 98 4 100 100 resultados dentro do 61 62 62 62 62 62 intervalo IC de 95 91 3 a IC de 95 94 2 a IC de 95 94 2 a 5 9 100 100 100 Azoto ureic
27. alactosidase Bilirrubina total TBIL Os n veis de bilirrubina total t m sido normalmente medidos por testes que utilizam cido sulfan lico diazotado Foi desenvolvido um m todo mais recente e mais espec fico utilizando a enzima bilirrubina oxidase 2 Al m de utilizar o m todo de teste de bilirrubina total mais espec fico a fotodegrada o do analito minimizada nos analisadores Piccolo uma vez que a amostra pode ser testada imediatamente ap s a colheita No procedimento enzim tico a bilirrubina oxidada pela bilirrubina oxidase em biliverdina Bilirrubina oxidase Bilirrubina O gt Biliverdina H O A bilirrubina quantificada como a diferen a de absorv ncia entre 467 nm e 550 nm A absorv ncia inicial desta reac o de ponto final determinada pela cuvete de bilirrubina de branco e a absorv ncia final obtida a partir da cuvete de teste de bilirrubina A quantidade de bilirrubina na amostra proporcional diferen a entre as medi es de absorv ncia inicial e final Di xido de carbono total tCO O di xido de carbono total no soro ou plasma existe sob a forma de di xido de carbono dissolvido derivados carbamino de prote nas i es de bicarbonato e carbonato e cido carb nico O di xido de carbono total pode ser medido atrav s do indicador de pH do el ctrodo de CO e m todos enzim ticos espectrofotom tricos os quais produzem todos resultados exa
28. as ex genas e terap uticas e Foram seleccionadas trinta e cinco subst ncias ex genas e terap uticas como potencialmente interferentes para os m todos de teste da Abaxis com base nas recomenda es de Young A interfer ncia significativa define se como um desvio no resultado superior a 4 10 para uma amostra de intervalo normal Os pools de soro humano foram suplementados com concentra es conhecidas dos f rmacos ou qu micos e posteriormente analisados Consulte a Tabela 2 para obter uma lista de subst ncias ex ge nas e terap uticas avaliadas Consulte a TABELA 3 para obter uma lista de analitos nos quais foi observada interfer ncia Tabela 2 Subst ncias ex genas e terap uticas avaliadas Subst ncia potencialmente interferente Concentra o mais elevada testada mg dL a menos que especificado de outro modo Acetaminofeno 100 Acetoacetato 102 Acido acetilsalicilico 50 Ampicilina 30 Acido asc rbico 3 Cafeina 10 Cefalotina Keflin 400 Cloranfenicol 100 Cimetidina 16 Dopamina 13 Epinefrina 1 Eritromicina 10 Glutationa 30 Hidroclorotiazida 7 5 Ibuprofeno 50 Isoniazida 4 Cetoprofeno 50 L dopa 5 Lidocaina 1 Lactato de litio 84 Meticilina 100 Metotrexato 0 5 Metronidazol 5 Nafcilina 1 Nitrofurantoina 20 Oxacilina 1 Oxalacetato 132 Penicilina G 100 Fenitoina 5 5 difenilhidantoina 3 Prolina 4 Rifampicina 0 5 Acido salicilico 50 Sulfadiazina 150 Sulfanilamida 50 Teofilina 20 Pagin
29. cas O operador n o entra em contacto com as esferas de reagente se os procedimentos recomendados forem seguidos Na eventualidade de manuseamento das esferas por exemplo durante a limpeza depois de um disco cair e se partir evite a ingest o o contacto com a pele ou a inala o das esferas de reagente Instru es para o manuseamento de reagentes poss vel utilizar os discos de reagente directamente a partir do frigor fico sem aquecer N o permita que os discos selados em bolsas de alum nio permane am temperatura ambiente durante mais de 48 horas antes da utiliza o Abra a bolsa de alum nio selada retire o disco e utilize de acordo com as instru es fornecidas no Manual do Operador do Analisador Qu mico de Sangue Piccolo ou do Analisador Qu mico Piccolo xpress Um disco que n o seja utilizado dentro de 20 minutos ap s a abertura da bolsa dever ser eliminado Armazenamento Armazene os discos de reagente nas respectivas bolsas seladas a 2 8 C 36 46 F N o exponha os discos abertos ou fechados a luz solar directa ou a temperaturas superiores a 32 C 90 F Pode utilizar os discos de reagente at ao prazo de validade inclu do na embalagem O prazo de validade tamb m est codificado no c digo de barras impresso no anel de c digo de barras Ser apresentada uma mensagem de erro no visor do Analisador Qu mico de Sangue Piccolo ou do Analisador Qu mico Piccolo xpress se os reagentes estiverem fora do prazo
30. correla o cep o mmol L comparativo Alanina 0 981 0 905 1 3 3 21 86 10 174 Paramax aminotransferase U L 0 985 0 946 2 5 2 84 67 10 174 Technicon 0 854 1 001 0 3 0 22 261 1 1 5 3 Paramax Albumina g dL 0 896 0 877 0 1 0 21 100 1 5 5 0 Beckman f 0 988 0 970 5 9 3 97 99 27 368 Paramax Fosfatase alcalina U L 0 929 1 136 17 6 479 80 26 150 Technicon Aspartato 0 93 0 87 5 3 2 76 159 13 111 Paramax aminotransferase U L 1 0 0 97 3 0 19 46 13 252 DAX Pa 0 991 0 990 0 4 0 17 25 5 2 11 9 Paramax Calcio mg dL 0 673 0 742 1 8 0 22 81 8 1 9 9 Beckman Cloreto mmol L 0 978 0 982 1 1 1 84 120 71 118 Vitros 950 0 993 0 926 0 0 0 15 260 0 4 14 7 Paramax Creatinina ma dL 0 987 0 866 0 1 0 16 107 0 4 7 5 Beckman Paramax 0 987 1 009 2 8 3 89 25 72 422 ficas TRIAT 0 997 0 943 12 469 9 56 646 Benen Pot ssio mmol L 0 969 0 863 0 6 0 14 58 2 0 6 8 Radiometer otassio O gt E gt gt gt gt KNA 2 Pagina 17 de 23 Tabela 7 Correla o do Analisador Qu mico de Sangue Piccolo com o m todo s comparativo s continua o sae Radiometer S dio mmol L 0 937 0 782 27 7 3 79 113 116 154 KNATM9 Di xido de carbono 0 947 0 903 2 4 0 84 60 6 39 Cobas Fara total mmol L 0 849 0 932 0 6 0 19 251 5 7 9 2 Paramax Prote na total g dL 0 873 0 935 0 3 0 16 92 6 5 9 2 Beckman Azoto ureico no 0 964 0 923 0 5 1 08 251 6 52 Paramax 0 983 0 946 0 0 0 66 92 6 38 Beckman sangue mg dL As amostras de soro de doentes
31. ctos e precisos O m todo enzim tico bastante adequado para utiliza o num analisador qu mico de sangue de rotina sem adicionar complexidade No m todo enzim tico a amostra primeiramente alcalinizada para converter todas as formas de di xido de carbono CO3 em bicarbonato HCO Em seguida o fosfoenolpiruvato PEP e HCO reagem para formar oxaloacetato e fosfato na presen a de fosfoenolpiruvato carboxilase PEPC A malato desidrogenase MDH catalisa a reac o de oxaloacetato e nicotinamida adenina dinucle tido NADH reduzido em NAD e malato A taxa de varia o de absorv ncia devido convers o de NADH em NAD directamente proporcional quantidade de tCO na amostra PEPC PEP HCO __ Oxaloacetato Fosfato MDH Oxaloacetato NADH H NAD Malato Proteina total TP O m todo de prote na total uma modifica o da reac o do biureto conhecida pela sua precis o exactid o e especificidade Foi originalmente desenvolvido por Riegler e modificado por Weichselbaum Doumas et al A reac o do biureto candidata ao m todo de refer ncia para a prote na total P gina 5 de 23 Na reac o do biureto a solu o proteica tratada com i es c pricos Cu II num meio alcalino forte S o adicionados tartarato de pot ssio e s dio e iodeto de pot ssio para evitar a precipita o de hidr xido de cobre e a auto redu o de cobre
32. d reaction for emergency blood urea estimation Clin Chim Acta 1971 35 33 37 Patton et al Spectrophotometric and kinetics investigation of the Berthelot reaction for the determination of ammonia Anal Chem 1977 49 464 469 Sampson EJ et al A coupled enzyme equilibrium method for the measuring urea in serum optimization and evaluation of the AACC study group on Urea Candidate reference method Clin Chem 1980 26 816 826 National Committee For Clinical Laboratory Standards Physician s office laboratory guidelines tentative guideline ont ed NCCLS Document POL1 T2 Wayne PA NCCLS 1992 Scott MG Electrolytes and Blood Gases In Tietz Textbook of Clinical Chemistry 3 ed Burtis CA Ashwood ER eds Philadelphia WB Saunders Company 1999 1058 1059 National Committee for Clinical Laboratory Standards Procedures for the handling and processing of blood specimens tentative standard NCCLS Document H18 A2 Wayne PA NCCLS 1999 Overfield CV et al Glycosis a re evaluation of the effect on blood glucose Clin Chim Acta 1972 39 35 40 Rehak NN Chiang BT Storage of whole blood effect of temperature on the measured concentration of analytes in serum Clin Chem 1988 34 2111 4 Sherwin JE Obernolte R Bilirubin In Clinical Chemistry Theory Analysis and Correlation Kaplan LA Pesce AJ comps St Louis The C V Mosby Company 1989 1009 1015 Henry RJ et al Clinical Chemistry Principles and Technics 2nd ed New Yo
33. des comuns Unidades SI Alanina aminotransferase ALT 10 47 U L 10 47 U L Albumina ALB 3 3 5 5 g dL 33 55 g L Fosfatase alcalina ALP homem 53 128 U L 53 128 U L Fosfatase alcalina ALP mulher 42 141 UL 42 141 U L Aspartato aminotransferase AST 11 38 U L 11 38 U L Calcio CA 8 0 10 3 mg dL 2 0 2 58 mmol L Cloreto CL 98 108 mmol L 98 108 mmol L Creatinina CRE 0 6 1 2 mg dL 53 106 pmol L Glicose GLU 73 118 mg dL 4 05 6 55 mmol L Pot ssio K 3 6 5 1 mmol L 3 6 5 1 mmol L S dio NA 128 145 mmol L 128 145 mmol L Bilirrubina total TBIL 0 2 1 6 mg dL 3 4 27 4 umol L Di xido de carbono total tCO 18 33 mmol L 18 33 mmol L Prote na total TP 6 4 8 1 g dL 64 81 g L Azoto ureico no sangue BUN 7 22 mg dL 2 5 7 9 mmol ureia L 12 Caracteristicas de desempenho Linearidade A qu mica de cada analito linear no intervalo din mico abaixo indicado quando o Analisador Qu mico de Sangue Piccolo ou o Analisador Qu mico Piccolo xpress utilizado de acordo com o procedimento recomendado consulte o Manual do Operador do Analisador Qu mico de Sangue Piccolo ou do Analisador Qu mico Piccolo xpress P gina 13 de 23 Tabela 5 Intervalos din micos do Analisador Piccolo Analito Unidades comuns Unidades SI Alanina aminotransferase ALT 5 2000 U L 5 2000 U L Albumina ALB 1 6 5 g dL 10 65 g L Fosfatase alcalina ALP 5 2400 U L 5 2400 U L Aspartato aminotransferase AST 5 2000 U L 5 2000 U L Calcio CA 4 0 16 0 mg
34. in Chem 1984 30 971 Abstract Skeggs LT Jr An automatic method for the determination of carbon dioxide in blood plasma Am J Clin Pathol 1960 33 181 185 Korzun WJ Miller WG Carbon Dioxide In Clinical chemistry theory analysis and correlation 2 ed Kaplan LA Pesce AJ eds St Louis The CV Mosby Company 1989 869 872 Koller A Kaplan LA Total serum protein In Clinical Chemistry Theory Analysis and Correlation 2nd ed Kaplan LA Pesce AJ eds St Louis The C V Mosby Company 1989 1057 1060 Reigler E Eine kolorimetrische Bestimmungsmethode des Eiweisses Z Anal Chem 1914 53 242 245 plasma Am J Clin Path 1946 16 40 49 Doumas BT et al A candidate reference method for determination of total protein in serum I Development and validation Clin Chem 1981 27 1642 1650 Fales FW Urea in serum direct diacetyl monoxime method In Selected Methods of Clinical Chemistry Vol 9 Faulkner WR Meites S eds Washington DC American Association for Clinical Chemistry 1982 365 373 Van Slyke et al A permanent preparation of urease and its use in the determination of urea J Biol Chem 1914 19 11 228 Fawcett JK et al A rapid and Precise method for the determination of urea J Clin Pathol 1960 13 156 159 Talke H et al Enzymatische harnstoffbestimmung in blut and serum im optischen Test nach Warburg Klin Wochensch 1965 43 174 175 Hallett et al Reduced nicotinamide adenine dinucleotide couple
35. ino antipyrine J Clin Pathol 1954 7 322 326 Ohmori Y Uber die Phosphomonoesterase Enzymologia 1937 4 217 231 Petitclerc C Delisle M Martel M Mechanism of action of Mg2 and Zn2 on rat placental alkaline phosphatase I Studies on the soluble Zn2 and Mg2 alkaline phosphatase Can J Biochem 1975 53 1089 1100 Pagina 21 de 23 13 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 3T 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 Bibliografia continua o Tietz NW et al A reference method for measurement of alkaline phosphatase activity in human serum Clin Chem 1983 29 751 761 Bowers GN Jr et al IFCC methods for the measurement of catalytic concentration of enzymes Part I General considerations concerning the determination of the catalytic concentration of an enzyme in the blood serum or plasma of man Clin Chim Acta 1979 98 163F 174F Karmen A A note on the spectrophotometric assay of glutamic oxalacetic transaminase in human blood serum J Clin Invest 1955 34 131 133 Bergmeyer HU et al Provisional recommendations on IFCC methods for the measurement of catalytic concentrations of enzymes Part 2 IFCC method for aspartate aminotransferase Clin Chem 1977 23 887 899 Bergmeyer HU et al Provisional recommendations on IFCC methods for the measurement of catalytic concentrations of enzymes Part 2 Revised IFCC method for aspartate aminotransferase Clin Chem 1978 24
36. isiol gicas hem lise icter cia e lip mia provocam altera es nas concentra es apresentadas de alguns analitos Os ndices de amostra encontram se impressos na parte inferior de cada cart o de resultado para informar o operador dos n veis de subst ncias interferentes presentes em cada amostra e O Analisador Qu mico de Sangue Piccolo ou o Analisador Qu mico Piccolo xpress suprime quaisquer resultados que sejam afectados por gt 10 de interfer ncia resultante de hem lise lip mia ou icter cia A indica o HEM LIP ou ICT respectivamente impressa no cart o de resultado em vez do resultado P gina 10 de 23 e N veis de amilase extremamente elevados gt 9 000 U L ter o um efeito significativo aumento gt 10 nos resultados de cloreto O sistema Piccolo n o avalia a concentra o de amilase para cada amostra e O ensaio de pot ssio no sistema Piccolo um ensaio acoplado de piruvato quinase PK lactato desidrogenase LDH Assim em casos de traumatismo muscular extremo ou de n veis altamente elevados de creatina quinase CK o Piccolo pode recuperar um valor de pot ssio K falsamente elevado Nesses casos necess rio a confirma o de recupera es de n veis elevados de pot ssio inesperadas utilizando uma metodologia diferente e Para obter mais informa es sobre os n veis m ximos de subst ncias end genas contacte a Assist ncia T cnica da Abaxis Efeitos de subst nci
37. l 3 Princ pio do procedimento Alanina aminotransferase ALT A alanina aminotransferase ALT tem sido medida segundo tr s m todos Dois destes m todos a t cnica colorim trica de acoplamento de dinitrofenilhidrazina e o ensaio enzim tico fluorescente raramente s o utilizados A t cnica mais comum para determinar as concentra es de ALT no soro consiste no m todo enzim tico baseado na obra de Wroblewski e LaDue Foi proposto um procedimento de Wr blewski e LaDue modificado como o procedimento recomendado pela Federa o Internacional de Quimica Cl nica International Federation of Clinical Chemistry IFCC O m todo desenvolvido para utiliza o nos Analisadores Piccolo uma modifica o do procedimento recomendado pela IFCC Nesta reac o a ALT catalisa a transfer ncia de um grupo amino de L alanina para o cetoglutarato para formar L glutamato e piruvato A lactato desidrogenase catalisa a convers o de piruvato em lactato Concomitantemente o NADH oxidado em NAD conforme ilustrado no seguinte esquema de reac o ALT L alanina a cetoglutarato L glutamato Piruvato LDH Piruvato NADH H Lactato NAD A taxa de varia o da diferen a de absorv ncia entre 340 nm e 405 nm deve se convers o de NADH em NAD e directamente proporcional quantidade de ALT presente na amostra Albumina ALB Os m todos iniciais utilizados para medir a albumina inclu am
38. lvidos m todos espectrofotom tricos que permitem a medi o da concentra o de pot ssio na instrumenta o de qu mica cl nica padr o O m todo enzim tico da Abaxis baseia se na activa o de piruvato quinase com pot ssio e apresenta uma excelente linearidade e susceptibilidade insignificante a subst ncias end genas A interfer ncia de i es de s dio e am nio minimizada com a adi o de Kryptofix e de glutamina sintetase respectivamente Na reac o enzim tica acoplada a piruvato quinase PK desfosforila o fosfoenolpiruvato PEP para formar piruvato A lactato desidrogenase LDH catalisa a convers o de piruvato em lactato Concomitantemente o NADH oxidado em NAD P gina 4 de 23 K PK ADP PEP gt Piruvato ATP LDH Piruvato NADH H gt _ Lactato NAD A taxa de varia o da diferen a de absorvancia entre 340 nm e 405 nm deve se convers o de NADH em NAD e directamente proporcional quantidade de pot ssio presente na amostra S dio NA Foram desenvolvidos m todos colorim tricos e enzim ticos que permitem medir a concentra o de s dio na instrumenta o de qu mica cl nica padrao Na reac o enzim tica da Abaxis a B galactosidase activada pelo s dio na amostra A enzima activada catalisa a reac o de o nitrofenil B D galactopiran sido ONPG em o nitrofenol e galactose Na ONPG ___ 0 NITROFENOL Galactose B g
39. mendadas novamente junto da Abaxis e Reagentes de controlo dispon veis no mercado recomendados pela Abaxis contacte a Assist ncia T cnica da Abaxis para obter mais informa es sobre os materiais de controlo e os valores esperados e Temporizador Par metros de teste O Analisador Qu mico de Sangue Piccolo ou o Analisador Qu mico Piccolo xpress funciona a temperaturas ambiente entre os 15 C e os 32 C 59 90 F O tempo de an lise de cada Disco de Reagente Metab lico Completo Piccolo inferior a 14 minutos Os analisadores mant m o disco de reagente temperatura de 37 C 98 6 F durante o intervalo de medi o Procedimento de teste Os procedimentos completos de colheita da amostra e os procedimentos passo a passo relativos ao funcionamento s o descritos no Manual do Operador do Analisador Qu mico de Sangue Piccolo ou do Analisador Qu mico Piccolo xpress Calibra o O Analisador Qu mico de Sangue Piccolo ou o Analisador Qu mico Piccolo xpress encontra se calibrado pelo fabricante antes do envio O c digo de barras impresso no anel de c digo de barras indica ao analisador os dados de calibra o espec ficos do disco Consulte o Manual do Operador do Analisador Qu mico Piccolo Controlo de qualidade Consulte a Sec o 2 4 do Manual do Operador do Analisador Piccolo ou a Sec o 6 Calibra o e controlo de qualidade do Manual do Operador do Analisador Piccolo xpress O desempenho do Analisador Qu mico de
40. nica foi significativamente melhorada com a utiliza o de um tamp o de i es met licos para manter a concentra o de i es de magn sio e zinco na reac o O m todo de refer ncia da Associa o Americana de Qu mica Cl nica American Association for Clinical Chemistry AACC utiliza o p NPP como substrato e um tamp o de ides met licos O procedimento Piccolo consiste numa modifica o dos m todos da AACC e da IFCC A fosfatase alcalina hidrolisa o p NPP num tamp o de i es met licos e forma p nitrofenol e fosfato P gina 2 de 23 ALP Fosfato p nitrofenil p p NITROFENOL Fosfato Zn Mg A quantidade de ALP na amostra proporcional taxa de aumento da diferen a de absorv ncia entre 405 nm e 500 nm Aspartato aminotransferase AST O teste de aspartato aminotransferase AST baseia se no m todo da taxa de Karmen conforme modificado por Bergmeyer O actual m todo de refer ncia da Federa o Internacional de Quimica Clinica IFCC utiliza a t cnica de Karmen Bergmeyer de acoplamento da malato desidrogenase MDH e dinucle tido de nicotinamida NADH reduzido na detec o de AST no soro A lactato desidrogenase LDH adicionada reac o para reduzir a interfer ncia provocada pelo piruvato end geno A AST catalisa a reac o do L aspartato e do o cetoglutarato em oxalacetato e L glutamato O oxalacetato convertido em malato e o NADH oxidado em NAD pelo catalisador MDH AST L asparta
41. o no sangue BUN N vel 1 N vel 2 N vel 3 N 62 62 62 M dia 15 1 41 0 72 2 CV 2 3 2 5 1 8 Intervalo observado 14 16 37 43 68 75 Percentagem de 100 100 100 resultados dentro do 62 62 62 62 62 62 intervalo IC de 95 94 2 a IC de 95 94 2 a IC de 95 94 2 a 15 0 100 100 100 13 Bibliografia 1 2 10 11 12 13 14 15 16 17 Fujita H Uber die Mikrobestimmung der Blutphosphatase J Biochem Japan 1939 30 69 87 19 Tonhazy NE White NG Umbreit WW A rapid method for the estimation of the glutamic aspartic transaminase in tissues and its application to radiation sickness Arch Biochem 1950 28 36 42 Reitman S Frankel S A colorimetric method for the determination of serum glutamic oxalacetic and glutamic pyruvic transaminases Am J Clin Pathol 1957 28 56 63 Murray RL Alanine aminotransferase In Clinical Chemistry Theory Analysis and Correlation 2 ed Kaplan LA Pesce AP eds St Louis The C V Mosby Company 1989 895 898 Wroblewski F LaDue JS Serum glutamic pyruvic transaminase in cardiac and hepatic disease Proc Soc Exp Biol Med 1956 91 569 571 Bergmeyer HU M Horder IFCC methods for the measurement of catalytic concentration of enzymes Part 3 IFCC method for alanine aminotransferase J Clin Chem Clin Biochem 1980 18 521 534 Howe PE The use of sodium sulfate as the globulin precipitant in the determination of proteins in blood J Biol Chem 1921 49 93 107 Howe PE The
42. o que de interfer ncia produz interfer ncia observada gt 10 Eritromicina 10 dim 21 Lidocaina 1 aum 23 Metotrexato 0 5 dim 80 Nitrofurantoina 20 aum 13 Acido salicilico 50 dim 17 Sulfadiazina 150 dim 25 Kees os ae ues x a i x a o Dim diminui o na concentra o do analito especificado Aum aumento na concentra o do analito especificado e Para o ensaio de cloreto o brometo em n veis t xicos gt 15 mmol L pode originar um efeito significativo aumento gt 10 no resultado de cloreto O iodeto em concentra es muito elevadas 30 mmol L nivel mais elevado testado n o tem qualquer efeito N veis fisiol gicos normais de brometo e iodeto n o interferem com o Sistema de Testes de Cloreto Piccolo 11 Valores esperados Foram analisadas amostras de 60 140 adultos do sexo masculino e feminino no Analisador Qu mico de Sangue Piccolo para determinar os intervalos de refer ncia Estes intervalos foram calculados com base no intervalo de refer ncia de 95 estimado a partir de valores combinados globais obtidos dos indiv duos de refer ncia Estes intervalos s o fornecidos apenas como orienta o Os n veis de ALP em crian as em fase de crescimento s o altamente vari veis Recomenda se que o seu departamento ou a sua institui o estabele am os intervalos normais para a sua popula o de doentes espec fica Tabela 4 Intervalos de refer ncia do Analisador Piccolo Analito Unida
43. otinamida adenina dinucle tido NADH reduzido 48 ug o nitrofenil B D galactopiranosido ONPG 22 ug Peroxidase rabano silvestre 1U Fosfoenol piruvato 57 ug Fosfoenol piruvato carboxilase 0 001 U p NPP 56 ug Ferricianeto de potassio 0 4 ug Iodeto de pot ssio 28 ug Piruvato quinase 0 01 U Sarcosina oxidase microrganismo 1U Tartarato de pot ssio e s dio 343 ug Urease ervilha sabre 0 05 U Sulfato de zinco 3 ug Tamp es surfactantes excipientes e conservantes P gina 7 de 23 Advert ncias e precau es e Para utiliza o em diagn stico in vitro e O recipiente de diluente no disco de reagente automaticamente aberto ao fechar a gaveta do analisador N o poss vel reutilizar um disco com um recipiente de diluente aberto Certifique se de que a amostra ou o controlo foi colocada o no disco antes de fechar a gaveta e Os discos de reagente usados cont m fluidos corporais humanos Siga as boas pr ticas de seguran a laboratorial quando manusear e eliminar discos usados Consulte no Manual do Operador do Analisador Qu mico de Sangue Piccolo ou do Analisador Qu mico Piccolo xpress as instru es de limpeza de derrames biologicamente perigosos e Os discos de reagente s o de pl stico e podem rachar ou partir se se ca rem Nunca utilize um disco que tenha ca do uma vez que pode espalhar materiais biologicamente perigosos no interior do analisador e As esferas de reagente podem conter cidos ou subst ncias c usti
44. pensa dos crit rios CLIA apenas pode ser testado sangue total com heparina de l tio Em laborat rios de complexidade moderada poss vel utilizar sangue total heparinizado com l tio plasma heparinizado com l tio ou soro necess rio um Certificado de Dispensa dos Crit rios CLIA para realizar testes com dispensa dos crit rios CLIA poss vel obter um Certificado de Dispensa junto dos Centros de Servi os Medicare e Medicaid CMS Contacte a Comiss o para Acredita o de Laborat rios Commission on Laboratory Accreditation COLA atrav s do n mero 1 800 981 9883 para saber como obter um Certificado 2 Resumo e explica o dos testes O Disco de Reagente Metab lico Completo Piccolo e o Analisador Qu mico de Sangue Piccolo cont m um sistema de diagn stico in vitro que ajuda o m dico no diagn stico das seguintes patologias Alanina aminotransferase Doen as hep ticas incluindo hepatite viral e cirrose ALT Albumina Doen a hep tica e renal Fosfatase alcalina ALP Doen as hep ticas sseas da paratir ide e intestinais Aspartato aminotransferase Doen as hep ticas incluindo hepatite e icter cia viral choque AST C lcio Doen as da paratir ide doen as sseas e doen as renais cr nicas tetania Cloreto Desidrata o diarreia prolongada e v mitos doen a tubular renal hiperparatiroidismo queimaduras doen as renais com perda de sal excesso de hidrata o e terap utica tiaz dica
45. r o n vel s rico de pot ssio em 0 5 mmol L Adicionalmente mesmo amostras n o hemolisadas que n o sejam imediatamente processadas podem ter aumentado os n veis de pot ssio devido a fuga de pot ssio intracelular e As amostras de sangue total por pun o venosa devem ser processadas no prazo de 60 minutos ap s a colheita As concentra es de glicose s o afectadas pelo tempo decorrido desde a ltima refei o do doente e pelo tipo de amostra P gina 8 de 23 colhida Para determinar os resultados de glicose com precis o as amostras devem ser colhidas de um doente que tenha estado em jejum durante pelo menos 12 horas A concentra o de glicose diminui aproximadamente 5 12 mg dL no espa o de 1 hora em amostras n o centrifugadas armazenadas temperatura ambiente e A refrigera o de amostras de sangue total pode provocar altera es significativas nas concentra es de aspartato aminotransferase creatinina e glicose A amostra pode ser separada em plasma ou soro e armazenada em tubos de amostra com tampa a 2 8 C 36 46 F caso n o seja poss vel processar a amostra no prazo de 60 minutos e Os resultados de bilirrubina total podem ser adversamente afectados pela fotodegrada o As amostras de sangue total que n o sejam processadas imediatamente n o devem ser armazenadas no escuro durante um per odo superior a 60 minutos Se n o for poss vel analisar a amostra dentro desse per odo dever ser separad
46. rk Harper and Row 1974 417 421 1058 1059 Scott MG Electrolytes and Blood Gases In Tietz Textbook of Clinical Chemistry 3 ed Burtis CA Ashwood ER eds Philadelphia WB Saunders Company 1999 1065 1066 National Committee for Clinical Laboratory Standards Interference testing in clinical chemistry proposed guideline NCCLS Document EP7 A Wayne PA NCCLS 2002 Young DS Effects of drugs on clinical laboratory tests 3rd ed Washington DC AACC Press 1990 National Committee for Clinical Laboratory Standards How to define and determine reference intervals in the clinical laboratory approved guidelines 2 ed NCCLS Document C28 A2 Wayne PA NCCLS 2000 Painter PC Cope JY Smith JI Reference Information for the clinical laboratory In Burtis CA Ashwood ER eds Tietz Textbook of Clinical Chemistry 3 ed Philadelphia WB Saunders Company 1999 pp 676 684 National Committee for Clinical Laboratory Standards Evaluation of precision performance of clinical chemistry devices approved guideline NCCLS Document EP5 A Wayne PA NCCLS 1999 National Committee for Clinical Laboratory Standards Quality management for unit use testing proposed guideline NCCLS Document EP18 A Wayne PA NCCLS 2002 National Committee for Clinical Laboratory Standards Method comparison and bias estimation using patient samples approved guideline NCCLS Document EP9 A2 Wayne PA NCCLS 2002 Pagina 23 de 23
47. tivada pela adi o do i o de cloreto permitindo ao c lcio reassociar se enzima A reactiva o da actividade da a amilase proporcional concentra o de ides de cloreto na amostra A a amilase reactivada converte o substrato 2 cloro p nitrofenil a D maltotri sido CNPG3 em 2 cloro p nitrofenol CNP produzindo cor e a maltotriose G3 A reac o medida bicromaticamente e o aumento em termos de absorv ncia directamente proporcional actividade de a amilase reactivada e concentra o de i es de cloreto na amostra ot amilase CNPG3 CNP G3 CI Ca Creatinina CRE O m todo de Jaffe introduzido pela primeira vez em 1886 continua a ser um m todo frequentemente utilizado na determina o dos n veis de creatinina no sangue O m todo de refer ncia actual combina a utiliza o de terra de Fuller floridina com a t cnica de Jaffe para aumentar a especificidade da reac o Foram desenvolvidos m todos enzim ticos mais espec ficos para creatinina do que as v rias modifica es da t cnica de Jaffe gt Os m todos que utilizam a enzima creatinina amidohidrolase eliminam o problema da interfer ncia de i es de am nio detectada nas t cnicas que utilizam a creatinina iminohidrolase P gina 3 de 23 Creatinina amidohidrolase Creatinina H O gt Creatina Creatina amidinohidrolase Creatina HO _ gt Sarcosina Ureia Sarcosina oxidase
48. to a cetoglutarato _ Oxaloacetato L glutamato MDH Oxaloacetato NADH H gt Malato NAD A taxa de varia o da absorv ncia a 340 nm 405 nm provocada pela convers o de NADH em NAD directamente proporcional quantidade de AST presente na amostra C lcio CA Os primeiros m todos utilizados para analisar o c lcio envolveram a precipita o do c lcio com um excesso de ani es m todos de precipita o s o trabalhosos e frequentemente imprecisos O m todo de refer ncia para o c lcio a espectroscopia por absor o at mica contudo este m todo n o adequado utiliza o de rotina Os m todos espectrofotom tricos que utilizam complexona de o cresolftaleina ou arsenazo III como indicadores metalocr micos s o utilizados com maior frequ ncia O arsenazo III tem uma grande afinidade relativamente ao c lcio e n o depende da temperatura como a CPC 25 26 27 Os O c lcio na amostra do doente liga se ao arsenazo III para formar um complexo de c lcio corante Ca Arsenazo II Complexo de Ca Arsenazo III A reac o de ponto final monitorizada a 405 nm 467 nm e 600 nm A quantidade de c lcio na amostra proporcional absorv ncia Cloreto CL Este m todo baseia se na determina o da activa o dependente de cloreto da actividade de a amilase A a amilase desactivada reac
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