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1. BIOLABO RE www biolabo fr TE FABRICANTE o BIOLABO SAS gt Les Hautes Rives BIOLABO 02160 Maizy France 80025 R120X10mL 80225 R1 10x125 mLREF 80325 SOPORTE TECNICO Y PEDIDOS Tel 33 03 23 25 15 50 Fax 33 03 23 256 256 AST GOT IFCC Monoreactivo Reactivo para la determinaci n cuantitativa de la actividad aspartato aminotranstferasa AST EC 2 6 1 1 en suero o plasma humano REF 80125 R18x30 mL R1 6 x 200 mL CODIGO CNQ SB USO IN VITRO E A A UN SIGNIFICACION CL NICA 1 2 El AST est muy esparcido en todos los tejidos del cuerpo pero la actividad m s importante se mide en el h gado el coraz n los m sculos esquel ticos y los eritrocitos Se mide una actividad m s d bil en la piel los ri ones y el p ncreas Aunque la actividad del AST y del ALT en el suero est aumentada en todo los casos donde la integridad de las c lulas hep ticas se afecta hepatitis viral necrosis hep tica cirrosis Un aumento de la actividad AST en el suero o el plasma aparece despu s de un infarto de miocardio en 97 de los casos La actividad AST elevada y ocasionalmente ALT se puede encontrar en los casos de distrofia muscular progresiva embolia pulmonar pancreatitis aguda A PRINCIPIO 4 5 M todo desarrollado por Karmen y Al y optimizada por Henry y Al conforme a las recomendaciones del FCC El esquema reacci nale es el siguiente AST L Aspartato 2 O
2. con reactivo comercial y 1 0265 x 0 9906 r 0 9983 AAA AAA LIMITE DE LINEALIDAD La reacci n es lineal hasta 350 UI L Si AAbs min gt 0 200 disminuir el volumen muestra o diluir la muestra con NaCl 9 g L teniendo en cuenta el factor de diluci n en el c lculo del resultado El l mite de linealidad depende de la relaci n de diluci n muestra reactivo el z IVD X A MODO DE EMPLEO TECNICA MANUAL Poner los reactivos y muestras a temperatura ambiente Introducir en una cuba de lectura de 1 cm de trayecto ptico Dejar la temperatura equilibrarse a 37 C 30 C y luego a adir Mezclar Despu s de 1 minuto leer la absorbencia inicial a 340 nm y todos los minutos durante 3 minutos Calcular la media de las variaciones de absorbencia por minuto AAbs min Nota Procedimientos espec ficos est n disponibles para los analizadores autom ticos Contactar el servicio t cnico BIOLABO a CALCULO El resultado est determinado seg n la siguiente f rmula Con factor te rico Ul L AAbs min x 1746 UI L 60 Con multicalibrador s rico pKat L AAbs min Prueba AAbs min Calibrador Actividad AST x Concentraci n del Calibrador AE BIBLIOGRAFIA 1 TIETZ N W Text book of clinical chemistry 3 Ed C A Burtis E R Ashwood W B Saunders 1999 p 652 656 2 Clinical Guide to Laboratory Test 4 Ed N W TIETZ 2006 p 154 159 3 YOUNG D S Effect of Drugs on Clinical
3. laboratory Tests 4 Ed 1995 p 3 68 to 3 79 4 HENRY R J etal Am J clin Path 1960 34 381 398 5 IFCC Method for L Aspartate aminotransferase J Clin Chem Clin Biochem 1986 24 p 497 510 6 M MATHIEU et col SFBC Comit de Standardisation Recommandations pour la mesure de l activit catalytique de l Aspartate aminotransf rase dans le s rum a 30 C Ann Biol Clin 1976 34 291 297 Lii LOT AN w gt Fabricante Fecha de caducidad Uso in vitro Temperatura de conservaci n Referencia del producto Consultar instrucciones Numero de lote Protegido de la luz Suficiente para Diluir con Made in France Ultima Versi n www biolabo fr Versi n 18 12 2014
4. r un objeto no cortante para quitar la c psula A adir sin demora la cantidad de agua desmineralizada indicada en la etiqueta Agitar suavemente hasta su completa disoluci n antes de utilizar el reactivo aproximadamente 2 minutos ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO Almacenar a 2 8 C en el vial de origen bien cerrado protegido de la luz e Antes de abrir los reactivos son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta de la caja si son utilizados y almacenados en las condiciones adecuadas e Despu s de reconstituci n el reactivo de trabajo es estable 60 d as en ausencia de contaminaci n e No utilizar el reactivo si hay turbidez o si la absorbencia medida a 340 nm lt 1 000 e No utilizar el reactivo de trabajo despu s de la fecha de caducidad indicada en la etiqueta de la caja TOMA Y PREPARACION DE LA MUESTRA 2 Suero no hemolizados No utilizar plasma heparinizados El AST es estable en el suero o el plasma e 24 horas a temperatura ambiente e 28 d as a 2 8C e Al menos 1 a o a 20 C El a adir piridoxal fosfato 0 1 mM permite su estabilidad durante 7 d as a temperatura ambiente INTERFERENCIAS 3 6 60 Hemoglobina Interferencia positiva a partir de 150 mol L Hem lisis Interferencia positiva debida a la AST contenida en los eritrocitos Turbidez No hay interferencia Bilirrubina total Interferencia negativa a partir de 20 mg dL La LDH contenida en el reactivo permi
5. te durante la fase de preincubaci n reducir el piruvato end geno que si no producir a una interferencia positiva De la misma manera el oxaloacetato producto de la reacci n puede ser decarboxilado para formar piruvato Este tambi n ser consumido por la LDH presente en el reactivo y no interferir con la prueba Young D S ha publicado una lista de las sustancias que interfieren con la prueba REACTIVOS Y MATERIAL COMPLEMENTARIOS 1 Equipamiento de base del laboratorio de an lisis m dico 2 Sueros de controles normales y patol gicos 3 Agua desmineralizada para la reconstituci n del reactivo Versi n 18 12 2014 HS CALIBRACION La validez de los resultados depende de la exactitud de la calibraci n del instrumento de la justa medida del tiempo del respeto de la relaci n volumen reactivo volumen muestra y del control de la temperatura e utilizar el factor te rico CALCULO e O BIOLABO Multicalibrator REF 95015 valores determinados utilizando t cnicas estad sticas validadas e un material bajo control metrol gico e o cualquier otro calibrador trazable sobre un m todo o un material de referencia CONTROL DE CALIDAD e BIOLABO EXATROL N Tasa REF 95010 BIOLABO EXATROL P Tasa ll 95011 e O cualquier otro suero de control titulado para este m todo e Programa externo de control de calidad Se recomienda controlar en los siguientes casos e Al menos un control por rutina e Al menos un con
6. trol cada 24 horas e Cambio de vial del reactivo e Despu s de operaci n de mantenimiento sobre el analizador Cuando un valor de control se encuentra fuera de los l mites de confianza recomendados aplicar las siguientes acciones correctivas 1 Repetir el test utilizando el mismo control 2 Si el valor obtenido queda fuera de los l mites preparar un suero de control reci n reconstituido y repetir el test 3 Si el valor obtenido queda fuera de los l mites verificar los par metros del an lisis longitud de onda temperatura volumen muestra volumen reactivo tiempo de medida y factor de calibraci n 4 Si el valor obtenido queda fuera de los l mites utilizar otro vial de reactivo y repetir el test 5 Si el valor obtenido queda fuera de los l mites contactar el servicio t cnico BIOLABO o el distribuidor local CODIGO CNQ SB A INTERVALOS DE REFERENCIA 1 2 Ul L a 30 C a 37 C Reci n nacido 25 75 39 117 Ni o 15 60 23 94 Adulto 8 20 13 31 Se recomienda a cada laboratorio definir sus propios intervalos de referencias para la poblaci n estimada AAA PRESTACIONES Intra serie Tasa Tasa Inter serie Tasa Tasa N 30 normal elevada N 33 normal elevada Media UI L 31 6 161 1 Media UI L 34 4 179 3 S D UI L 1 22 3 06 S D UI L 0 58 2 62 C V 3 89 1 90 C V 1 69 1 46 L mite de detecci n aproximadamente 3 UI L Sensibilidad para 17 Ul L aproximadamente 0 010 Abs min a 340 nm Comparaci n
7. xoglutarato a Oxaloacetato L Glutamato MDH Oxaloacetato NADH H 3 gt L Malato NAD La disminuci n de la absorbancia debida a la conversi n del NADH en NAD es proporcional a la actividad AST en la muestra medida a 340 nm La ausencia de PsP contribuye a una gran mejora de la estabilidad del reactivo reconstituido REACTIVOS REACTIVO DE TRABAJO EDTA 5 mmol L 2 Oxoglutarato 12 mmol L L Aspartato 200 mmol L MDH 495 UI L LDH 820 UI L NADH lt 0 18 mmol L Tamp n Tris 80 mmol L pH a 30 C 7 80 0 1 Conservante Antes de reconstituci n Xn Nocivo R22 32 Nocivo en caso de ingesti n Al contacto con un acido libera un gas muy toxico Despu s de reconstituci n No hay S22 S28 No respirar los polvos En caso d contacto con la piel lavarse inmediatamente con agua abundante AAA PRECAUCIONES Los reactivos BIOLABO est n destinados nicamente a profesionales para uso in Vitro e Verificar la integridad de los reactivos antes de su utilizaci n e Utilizar equipamientos de protecci n bata guantes gafas e No pipetear con la boca e En caso de contacto con la piel o los ojos enjuagar abundantemente y consultar al m dico e Los reactivos contienen azida de sodio concentraci n lt 0 1 que puede reaccionar con metales como el cobre o el plomo de las tuber as Enjuagar con abundancia Made in France Ultima Versi n www biolabo fr PREPARACION DE LOS REACTIVOS 80025 Utiliza
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