QUANTA FlashTM h-tTG IgA - Annar Diagnóstica Import
Contents
1. Recogida de muestras Este procedimiento debe realizarse en una muestra de suero No deben utilizarse muestras que est n contaminadas con microorganismos que hayan recibido un tratamiento por calor o que contengan part culas visibles Muestras que conten an hasta 10 mg dL de bilirrubina 200 mg dL de hemoglobina 1 000 mg dL de triglic ridos 224 mg dL de colesterol o 500 Ul mL de factor reumatoide IgM no presentaron interferencias en el QUANTA Flash Sm Tras la recogida el suero debe separarse del co gulo El documento H18 A4 del CLSI recomienda las siguientes condiciones de almacenamiento de muestras 1 No guarde las muestras a temperatura ambiente durante m s de 8 horas 2 Si el an lisis no se efect a en un plazo de 8 horas refrigere las muestras a una temperatura de 2a8 C 3 Si el an lisis no va a realizarse en un plazo de 48 horas o si debe preparar las muestras para enviarlas cong lelas a una temperatura de 20 C o inferior Las muestras congeladas deben mezclarse bien despu s de descongelarse y antes del an lisis Procedimiento Materiales suministrados 4 4 Cartucho de reactivos QUANTA Flash Sm Tamp n de resuspensi n Pipeta de transferencia Materiales adicionales necesarios no suministrados Instrumento BIO FLASH con ordenador para manejarlo L quido de lavado del sistema BIO FLASH n mero de componente 3000 8205 Iniciadores BIO FLASH n mero de componente 3000 8204 Cubetas BIO FLASH n2. mero de componente 3000 8206 Calibradores del QUANTA Flash Sm n mero de componente 701121 Controles QUANTA Flash Sm n mero de componente 701122 Uso del analizador por quimioluminiscencia BIO FLASH 1 Consulte el manual del operador suministrado con el sistema BlO FLASH para obtener instrucciones de funcionamiento detalladas sobre el analizador por quimioluminiscencia BIO FLASH y el software BIO FLASH Para obtener m s informaci n o solucionar problemas relativos a este ensayo p ngase en contacto con el servicio t cnico de INOVA Diagnostics Inc en la direcci n o n mero de tel fono indicados al final de estas instrucciones de uso Para vaciar el recipiente de residuos s lidos abra el caj n de residuos Retire el recipiente de residuos s lidos y elimine de forma adecuada las cubetas usadas Vuelva a colocar el recipiente de residuos s lidos en su lugar cierre el caj n de residuos y haga clic en Yes en la ventana Empty Waste Drawer Para sustituir los iniciadores haga clic en el bot n Bulks Inventory F9 de la parte superior derecha a En la pantalla Inventory Bulks haga clic en el bot n Triggers situado a la izquierda Se abrir una nueva ventana Add Triggers Remove old bottles b Abra el caj n de residuos del instrumento BIO FLASH y extr igalo Deposite todas las cubetas en el caj n de residuos secos Haga clic en Yes en la ventana Empty Waste Drawer Retire los frascos del iniciador de sus sopo
3. calibrador para m s de 4 calibraciones y o durante m s de 8 horas es posible que la calibraci n del ensayo sea incorrecta lo que producir resultados err neos QUANTA Flash Sm 701122 Controles Para uso diagnostico n Vitro SOLO PARA EXPORTACION NO COMERCIALIZABLE EN ESTADOS UNIDOS Uso previsto Los controles del QUANTA Flash Sm est n destinados a utilizarse con el inmunoensayo quimioluminiscente CIA QUANTA Flash Sm en el instrumento BIO FLASH Resumen y principios del procedimiento Los controles del QUANTA Flash Sm est n constituidos por un control negativo y un control positivo Cada uno de ellos contiene una cantidad diferente de anticuerpos anti Sm El control negativo est dise ado para evaluar la precisi n y la exactitud del ensayo a niveles muy bajos de autoanticuerpos El control positivo est dise ado para evaluar la precisi n y la exactitud del ensayo a niveles de autoanticuerpos entre moderados y altos Reactivos 1 Control negativo del QUANTA Flash Sm Dos tubos con etiqueta de c digo de barras que contienen 0 5 mL de reactivo listo para usar Los controles contienen anticuerpos humanos anti Sm con estabilizantes y conservantes 2 Control positivo del QUANTA Flash Sm Dos tubos con etiqueta de c digo de barras que contienen 0 5 mL de reactivo listo para usar Los controles contienen anticuerpos humanos anti Sm con estabilizantes y conservantes Advertencias 1 Todo el material de origen humano usad
4. lisis Limpie siempre el instrumento siguiendo las recomendaciones indicadas en el manual del operador del BIO FLASH Condiciones de almacenamiento 1 Guarde los controles no abiertos a una temperatura entre 2 y 8 C No los congele Los reactivos permanecen estables hasta la fecha de caducidad si se almacenan y manipulan como est indicado 2 Los controles abiertos son v lidos para 15 usos y pueden permanecer como m ximo 10 minutos en el instrumento en cada uso El tiempo m ximo durante el cual los tubos de control pueden permanecer destapados una vez cargados en el instrumento es de 2 5 horas o 10 minutos por uso Los controles que permanezcan destapados en el instrumento durante m s de 2 5 horas en total deben desecharse Si se utiliza el mismo tubo de contro para m s de 15 usos y o durante m s de 2 5 horas en total pueden producirse resultados err neos 3 Para conseguir una estabilidad ptima retire los controles del sistema inmediatamente despu s de tomar las muestras y almac nelos tapados entre 2 y 8 C en el vial original Procedimiento Para crear nuevos materiales de control de calidad para el ensayo Sm i Antes de utilizar los controles del QUANTA Flash Sm por primera vez en el instrumento introduzca en el software el nombre el lote la caducidad el valor o dosis y la DE objetivo 2 En la pantalla Instrument Summary haga clic en el boton de flecha Choose more options Ctrl M v Seleccione QC Ctr
5. muestras y coloque esta en el carrusel de muestras del instrumento 4 Cuando todos los materiales necesarios est n cargados en el instrumento el icono de inicio pasara a estar disponible en color verde en la parte superior de la pantalla Pulse el icono Start F4 para comenzar el an lisis Control de calidad Los controles QUANTA Flash Sm vendidos por separado numero de producto de INOVA 701122 contienen los controles positivos y negativos para h Sm Consulte el apartado Controles QUANTA Flash Sm 701122 de este documento para obtener instrucciones detalladas sobre como introducir en el software todos los datos necesarios de cada control y como analizar los controles Se recomienda analizar los controles una vez cada dia en que se utilice el ensayo aunque los usuarios tambien deben tener en cuenta los requisitos de la legislacion nacional y local Calculo de los resultados INOVA genera una curva maesira de cinco puntos para cada nuevo lote del QUANTA Flash Sm Esta curva logistica de cuatro parametros se codifica mediante el codigo de barras de cada cartucho de reactivos Una vez calibrado un cartucho de reactivos se utilizar una curva de trabajo espec fica del instrumento para convertir las URL a CU La reactividad del anticuerpo frente al Sm puede entonces clasificarse seg n la tabla siguiente Reactividad CU Negativa lt 20 Positiva 220 La reactividad expresada en CU est directamente relacionada con la valoraci n de au
6. protecci n del medio ambiente cuando elimine residuos Precauciones gt IS o Este producto est destinado a uso diagn stico n Vitro Este ensayo solo debe utilizarse con el instrumento BIO FLASH Se recomienda seguir estrictamente el protocolo de resuspensi n indicado Una vez abierto el cartucho de reactivos debe almacenarse en la bandeja de reactivos del instrumento La colocaci n del cartucho de reactivos en el instrumento por primera vez debe realizarse con todo cuidado para no derramar los reactivos Puede producirse contaminaci n qu mica de los reactivos como consecuencia de un lavado o aclarado inadecuados del instrumento Los restos de sustancias qu micas habituales en los laboratorios como formol lej a etanol o detergente pueden interferir en el an lisis Limpie siempre el instrumento siguiendo las recomendaciones indicadas en el manual del operador del BIO FLASH Condiciones de almacenamiento 1 Guarde los cartuchos de reactivos no abiertos y el tampon de resuspension a una temperatura entre 2 y 8 C No los congele Los reactivos permanecen estables hasta la fecha de caducidad si se almacenan y manipulan como esta indicado Los cartuchos de reactivos abiertos deben guardarse cargados en el instrumento y permanecen estables durante 30 dias tras lo cual deben desecharse El software BIO FLASH supervisa las fechas de caducidad de los cartuchos cargados asi como las de los lotes de cartuchos de reactivos
7. ventana que se abrir debe estar marcada la casilla Show All Assays Seleccione el ensayo Sm de la lista y haga clic en Add Haga clic en Save Realice este proceso para ambos controles Se recomienda analizar los controles del QUANTA Flash Sm una vez cada d a en que se utilice el ensayo aunque los usuarios tambi n deben tener en cuenta los requisitos de la legislaci n nacional y local Cada control debe mezclarse suavemente antes de utilizarlo para garantizar su homogeneidad Evite la formaci n de espuma ya que las burbujas pueden interferir en la detecci n del nivel de l quido de los instrumentos Destape los dos tubos del control y col quelos en una gradilla de muestras con los c digos de barras orientados hacia delante a trav s de las aberturas de la gradilla Coloque la gradilla de muestras en el carrusel de muestras del instrumento BIO FLASH y cierre la puerta El instrumento leer los c digos de barras de los tubos del control e identificar el cartucho de reactivos adecuado Consulte el manual del operador suministrado con el sistema BIO FLASH para obtener instrucciones de funcionamiento detalladas sobre el analizador por quimioluminiscencia BIO FLASH y el software BIO FLASH Trazabilidad No est disponible ning n suero de referencia internacional para los anticuerpos anti Sm que permita estandarizar los ensayos con estos anticuerpos En su lugar se ha analizado el suero de referencia del Center of Disease Control and
8. y 8 C No los congele Los reactivos permanecen estables hasta la fecha de caducidad si se almacenan y manipulan como est indicado Los calibradores abiertos deben desecharse al cabo de 8 horas Procedimiento 1 Cada nuevo lote de cartuchos de reactivos debe calibrarse antes del primer uso El software no permitir usar un lote nuevo hasta que se calibre Cada calibrador debe mezclarse suavemente antes de utilizarlo para garantizar su homogeneidad Evite la formaci n de espuma ya que las burbujas pueden interferir en la detecci n del nivel de l quido de los instrumentos Destape los dos tubos del calibrador y col quelos en una gradilla de muestras con los c digos de barras orientados hacia delante a trav s de las aberturas de la gradilla Coloque la gradilla de muestras en el carrusel de muestras del instrumento BIO FLASH y cierre la puerta El instrumento leer los c digos de barras de los tubos del calibrador e identificar el cartucho de reactivos adecuado Consulte el manual del operador suministrado con el sistema BIO FLASH para obtener instrucciones de funcionamiento detalladas sobre el analizador por quimioluminiscencia BIO FLASH y el software BIO FLASH El instrumento analizar cada calibrador por triplicado Una vez analizados los calibradores el software solicitar la validaci n de la calibraci n En la pantalla Instrument Summary haga clic en bot n de flecha Choose more options Ctrl M W Seleccione Calib
9. Prevention para anticuerpos anti Sm 152076 ANA n m 5 anti Sm y se ha determinado una concentraci n gt 693 5 CU Limitaciones Estos controles est n dise ados para 15 usos La etiqueta de cada tubo de control posee una fila de 15 casillas que pueden marcarse para controlar el n mero de usos El tiempo maximo durante el cual los tubos de control pueden permanecer destapados una vez cargados en el instrumento es de 2 5 horas o 10 minutos por uso Los controles destapados que permanezcan en el instrumento durante m s tiempo deben desecharse Si se utilizan los mismos tubos de control para m s de 15 usos y o durante m s de 2 5 horas en total pueden producirse resultados err neos Bibliograf a 1 2 Tan EM Autoantibodies to nuclear antigens ANA Their immunobiology and medicine Advances in Immunology 1982 33 167 239 Migliorini P Baldini C Rocchi V Bombardieri S Anti Sm and anti RNP antibodies Autoimmunity 2005 38 47 54 Benito Garcia E Schur PH Lahita R American College of Rheumatology Ad Hoc Committee on Immunologic Testing Guidelines Guidelines for immunologic laboratory testing in the rheumatic diseases anti Sm and anti RNP antibody tests Arthritis Rheum 2004 51 1030 1044 Egner W The use of laboratory tests in the diagnosis of SLE J Clin Pathol 2000 53 424 432 Kavanaugh A Tomar R Reveille J Solomon DH Homburger HA Guidelines for clinical use of the antinuclear antibody test and tests f
10. QUANTA Flash Sm 701123 Para uso diagnostico n Vitro SOLO PARA EXPORTACION NO COMERCIALIZABLE EN ESTADOS UNIDOS Uso previsto El QUANTA Flash Sm es un inmunoensayo quimioluminiscente CIA para la detecci n semicuantitativa de anticuerpos contra el ant geno Sm en suero humano con el instrumento BIO FLASH La presencia de anticuerpos anti Sm junto con datos cl nicos y otras pruebas de laboratorio puede servir de ayuda en el diagn stico del lupus eritematoso sist mico LES Resumen y explicaci n de la prueba Dado que los anticuerpos antinucleares ANA se encuentran en una gran variedad de enfermedades del tejido conjuntivo ETC permiten realizar ensayos de detecci n sensibles Los sueros positivos para ANA reaccionan con varios ant genos nucleares diferentes incluido el ant geno Smitn Sm El ant geno Sm es un complejo de prote nas nucleares no histonas caracterizado en 1966 que fue el primer autoantigeno prote nico nuclear descrito en el LES El ant geno al que se unen los anticuerpos anti Sm consta de una serie de prote nas B B D1 D2 D3 E F y G que forman complejos con ARN nucleares peque os U1 U2 U4 6 y U5 Esos complejos de prote nas nucleares y ARN se denominan part culas de ribonucleoproteinas nucleares peque as snRNP y son importantes para el corte y empalme del ARN mensajero Por t rmino medio entre el 5 y el 30 de los pacientes con LES presentan anticuerpos anti Sm y se consideran a
11. RL obtenido para cada muestra Reactivos 1 El cartucho de reactivos del QUANTA Flash Sm contiene los siguientes reactivos para 50 determinaciones a Part culas paramagn ticas recubiertas de Sm conservadas antes del primer uso b Tamp n del ensayo de color rosa que contiene soluci n salina tamponada con Tris Tween 20 estabilizantes de prote nas y conservantes C IgG trazadora anticuerpos anti lgG humana marcados con isoluminol que contiene tamp n estabilizantes de prote nas y conservante 2 Tamp n de resuspensi n de color rosa en un vial que contiene tamp n estabilizantes de prote nas y conservantes Advertencias 1 El tamp n del ensayo contiene una sustancia qu mica cloranfenicol al 0 02 que est clasificada como cancer gena por el Estado de California 2 Se utiliza azida s dica como conservante La azida s dica es una sustancia venenosa y puede resultar t xica si se ingiere o si se absorbe a trav s de la piel o los ojos La azida s dica puede reaccionar con el plomo o el cobre de las tuber as y formar azidas met licas potencialmente explosivas Si utiliza pilas de lavado para eliminar reactivos aclare con abundante cantidad de agua para evitar la formaci n de azidas met licas 3 Utilice un equipo de protecci n personal adecuado cuando trabaje con los reactivos suministrados 4 Los derrames de reactivos deben limpiarse inmediatamente Cumpla todas las normas estatales y locales sobre
12. abricado por INOVA Diagnostics Inc 9900 Old Grove Road San Diego CA 92131 Estados Unidos de Am rica Servicio t cnico solo para EEUU y Canad 877 829 4745 Servicio t cnico fuera de EEUU 00 1 858 805 7950 support inovadx com Representante autorizado en la UE Medical Technology Promedt Consulting GmBH Altenhofstrasse 80 D 66386 St Ingbert Alemania Tel 49 6894 581020 Fax 49 6894 581021 www mt procons com 621120ESP Julio de 2012 Revision 0
13. ant as de la ausencia del VIH el VHB el VHC u otros agentes infecciosos Por ello los calibradores del QUANTA Flash Sm deben manipularse como si se tratara de material potencialmente infeccioso 2 Utilice un equipo de protecci n personal adecuado cuando trabaje con los reactivos suministrados 3 Los derrames de reactivos deben limpiarse inmediatamente Cumpla todas las normas estatales y locales sobre protecci n del medio ambiente cuando elimine residuos Precauciones iP Este producto esta destinado a uso diagnostico n Vitro Los calibradores del QUANTA Flash Sm deben utilizarse con el ensayo QUANTA Flash Sm No transfiera los reactivos de los calibradores a otros tubos El instrumento utiliza los codigos de barras de los tubos para ajustar los calibradores al tipo de analisis adecuado Una vez abiertos los tubos los calibradores pueden utilizarse durante un maximo de 8 horas o 4 calibraciones transcurrido este tiempo los reactivos deben desecharse Puede producirse contaminaci n qu mica de los reactivos como consecuencia de un lavado o aclarado inadecuados del instrumento Los restos de sustancias qu micas habituales en los laboratorios como formol lej a etanol o detergente pueden interferir en el an lisis Limpie siempre el instrumento siguiendo las recomendaciones indicadas en el manual del operador del BIO FLASH Condiciones de almacenamiento 4 Guarde los calibradores no abiertos a una temperatura entre 2
14. e S poblaciones de control de la enfermedad UAL en el estudio de veleien CT AN __ Negeivo Peso _ Enfermedad hep tica autoinmune Esclerodermia Artritis reumatoide S ndrome de Sj gren Otras enfermedades reum ticas sist micas Hepatitis v rica VIH S filis Comparaci n de m todos con un instrumento destinado al mismo fin Las muestras para el an lisis de comparaci n de m todos fueron aquellas muestras de los estudios de validaci n pacientes con LES otros controles de enfermedad muestras de competencia y donantes de sangre que se encontraron dentro del IMA del ensayo Dichas muestras se analizaron mediante el QUANTA Flash Sm y un ELISA destinado al mismo fin Comparaci n de m todos ELISA para Sm Porcentaje de concordancia N 121 Intervalo de confianza 95 g Negativo ativo 76 se NON Conc pos 92 1 78 6 98 3 QUANTA Flesh raspa Gone neg 918 634965 CIA para Sm lt A a a a Total Conc total 91 7 85 3 96 0 Precisi n y reproducibilidad La precisi n intraensayo se ha evaluado analizando 7 muestras con 10 r plicas en cada sesi n Los datos obtenidos se indican a continuaci n Precisi n intraensayo del QUANTA Flash Sm Muestra 1 Muestra 2 Muestra 3 Muestra 4 Muestra 5 Muestra 6 Muestra 7 CU media DE 04 11 05 09 54 28 186 CV 34 69 22 27 25 19 31 La precisi n interensayo se ha evaluado analizando 6 muestras en dos se
15. e anticuerpos anti Sm en suero Resumen y principios del procedimiento El CIA QUANTA Flash Sm utiliza una curva maestra predefinida espec fica de cada lote que se guarda en el c digo de barras del cartucho de reactivos Los calibradores del QUANTA Flash Sm est n dise ados para generar una curva de trabajo espec fica para el instrumento a partir de los par metros de la curva maestra con un punto de decisi n basado en las caracter sticas de rendimiento y en la evaluaci n cl nica del CIA QUANTA Flash Sm Los calibradores se analizan en varios instrumentos con diversos lotes de reactivos antes de efectuar la asignaci n de valores Reactivos 1 Calibrador 1 del QUANTA Flash Sm Dos tubos con etiqueta de c digo de barras que contienen 0 3mL de reactivo prediluido listo para usar Los calibradores contienen anticuerpos humanos anti Sm con estabilizantes y conservantes 2 Calibrador 2 del QUANTA Flash Sm Dos tubos con etiqueta de c digo de barras que contienen 0 3mL de reactivo prediluido listo para usar Los calibradores contienen anticuerpos humanos anti Sm con estabilizantes y conservantes Advertencias 1 Todo el material de origen humano usado en la preparaci n de los calibradores para este producto se ha analizado y ha arrojado resultados negativos con respecto a la presencia de anticuerpos frente al VIH el HBsAg y el VHC seg n m todos aprobados por la FDA Sin embargo ning n m todo de an lisis puede ofrecer plenas gar
16. e usa el cartucho de reactivos deben seguirse los pasos indicados a continuaci n para instalarlo adecuadamente en el instrumento BIO FLASH Nota No utilice el cartucho de reactivos si observa signos de que est da ado 1 Coloque el cartucho de reactivos sobre una superficie s lida Con una mano sostenga el cartucho de reactivos en su lugar Con la otra mano agarre con fuerza la pesta a roja de la parte posterior del cartucho de reactivos y tire de ella completamente 2 Pulse las dos pesta as laterales del tap n de perforaci n parte gris y aplique presi n a la parte superior del cartucho de reactivos hasta que descienda y alcance un tope Las pesta as deben quedar ocultas NO INVIERTA EL CARTUCHO ABIERTO 3 Resuspenda las micropart culas de Sm a Destape el vial del tamp n de resuspensi n y recoja l quido con la pipeta de transferencia suministrada Se utilizar todo el contenido del vial b Presione suavemente el lateral estrecho del cartucho de reactivos para deslizar la tapa del cartucho a la posici n abierta y mant ngala as Transfiera analiticamente todo el contenido del vial al tubo de reactivo de micropart culas a trav s del orificio nico de la parte superior del cartucho de reactivos e Mezcle el contenido del tubo de reactivo de micropart culas aspirando y dispensando el l quido al menos 30 veces Si se observan masas visibles de part culas contin e mezclando la soluci n 30
17. iguiente Los siguientes resultados se han obtenido mediante el inmunoensayo quimioluminiscente QUANTA Flash Sm de INOVA Es posible que los valores obtenidos con m todos de ensayo de otros fabricantes no sean intercambiables con dichos resultados La magnitud de los niveles de autoanticuerpos obtenidos no siempre puede correlacionarse con una valoraci n de punto final Limitaciones del procedimiento 1 No todos los pacientes con LES son positivos para anti Sm 2 Los resultados de este an lisis deben utilizarse junto con datos cl nicos y otras pruebas serol gicas 3 Si la resuspensi n de las part culas recubiertas de Sm no se efect a de un modo adecuado pueden obtenerse m s bajos que si se hubieran resuspendido correctamente 4 Las caracter sticas de funcionamiento de este ensayo no se han establecido para matrices de muestras distintas del suero Intervalo de referencia El l mite de detecci n del ensayo se ha determinado analizando un grupo de preparaci n de 258 muestras caracterizadas cl nicamente formado por 232 muestras de sujetos de referencia y 26 muestras de pacientes con LES El l mite de detecci n se ha establecido como superior al percentil 99 de los resultados obtenidos en los sujetos de referencia y se le ha asignado un valor de 20 CU Valores esperados Se analizaron los niveles de autoanticuerpos anti Sm mediante el QUANTA Flash Sm en un grupo de 101 donantes de sangre aparentemente sanos 71 mujere
18. l F2 Haga clic en el bot n New QC Material 3 Cada kit de control incluye una hoja de datos espec fica del lote En primer lugar introduzca en el software el nombre el n mero de lote y la caducidad que figuran en esta hoja de datos A continuaci n haga clic en el bot n Add Assay En la ventana que se abrir aseg rese de que est marcada la casilla Show All Assays Seleccione el ensayo Sm de la lista y haga clic en Add Por ltimo introduzca la dosis objetivo y la DE objetivo Haga clic en Save Realice este proceso para ambos controles Para crear un nuevo lote para los materiales de control de calidad existentes 1 Antes de utilizar un nuevo lote de controles del QUANTA Flash Sm por primera vez introduzca en el software el lote la caducidad el valor o dosis y la DE objetivo 2 En la pantalla Instrument Summary haga clic en el bot n de flecha Choose more options Ctrl M v Seleccione QC Ctrl F2 Marque el ensayo Sm en la columna de la izquierda A continuaci n seleccione el material de control apropiado a la derecha SmN para el control negativo o bien SmP para el control positivo Haga clic en el bot n New QC Lot 3 Cada kit de control incluye una hoja de datos espec fica del lote Introduzca la informaci n de esta hoja de datos en el software Dicha informaci n debe comprender el n mero de lote la caducidad la dosis objetivo y la DE objetivo Si es necesario haga clic en el bot n Add Assay En la
19. mp n A continuaci n se coloca el cartucho de reactivos en el instrumento BIO FLASH Mediante el instrumento se diluye una muestra de suero del paciente en una cubeta desechable de pl stico Se combinan y se mezclan en una segunda cubeta peque as cantidades de suero del paciente diluido las part culas de Sm y el tampon del ensayo Esta cubeta se incuba a 37 C y despu s se magnetizan las part culas y se lavan varias veces A continuaci n se a aden anticuerpos anti IgG humana conjugados con isoluminol a la cubeta y se incuba a 37 C De nuevo las part culas se magnetizan y se lavan repetidamente El conjugado de isoluminol produce una reacci n luminiscente cuando se a aden a la cubeta los reactivos iniciadores La luz generada por la reacci n se mide como unidades relativas de luz URL mediante el sistema ptico del BIO FLASH El n mero de URL es proporcional a la cantidad de conjugado de isoluminol ligado que a su vez es proporcional a la cantidad de anticuerpos anti Sm unidos al Sm de las part culas El ensayo QUANTA Flash Sm utiliza una curva maestra predefinida espec fica para cada lote que se carga en el instrumento mediante el c digo de barras del cartucho de reactivos A partir de los resultados obtenidos mediante el an lisis de dos calibradores se genera una curva de trabajo espec fica para el instrumento que el software utiliza para calcular las unidades de quimioluminiscencia CU bas ndose en el valor en U
20. nticuerpos marcadores junto a los anti ADNbc Los anticuerpos anti Sm se han incluido en los criterios del American College of Rheumatology para la clasificaci n del LES La reacci n inmunol gica anti Sm consiste en la uni n de m ltiples anticuerpos a m ltiples ant genos proteicos Por tanto los anticuerpos anti Sm se describen actualmente como un sistema de anticuerpos Los principales autoant genos en el LES son las prote nas Sm D y B aunque la presencia de anti Sm D se considera la especificidad m s importante Se han utilizado varios m todos incluidas la doble difusi n de Ouchterlony y la aglutinaci n pasiva para detectar anticuerpos anti Sm Tambi n se han desarrollado ensayos ELISA con utilidad cl nica para detectar anticuerpos anti Sm El QUANTA Flash Sm es un inmunoensayo quimioluminiscente muy sensible para la detecci n y la determinaci n de anticuerpos anti Sm que proporciona resultados semicuantitativos en un amplio rango de medici n y ofrece la comodidad de un acceso aleatorio una carga continua de muestras y un corto tiempo de an lisis Principios del procedimiento Se recubren part culas paramagn ticas con ant geno Sm purificado nativo y se guardan en el cartucho de reactivos en unas condiciones que mantienen el ant geno en su estado reactivo Cuando el cartucho del ensayo est preparado para el primer uso se a ade una soluci n tamp n al tubo que contiene las part culas y estas se mezclan con el ta
21. o en la preparaci n de los controles para este producto se ha analizado y ha arrojado resultados negativos con respecto a la presencia de anticuerpos frente al VIH el HBsAg y el VHC seg n m todos aprobados por la FDA Sin embargo ning n m todo de an lisis puede ofrecer plenas garant as de la ausencia del VIH el VHB el VHC u otros agentes infecciosos Por ello los controles del QUANTA Flash Sm deben manipularse como si se tratara de material potencialmente infeccioso 2 Utilice un equipo de protecci n personal adecuado cuando trabaje con los reactivos suministrados 3 Los derrames de reactivos deben limpiarse inmediatamente Cumpla todas las normas estatales y locales sobre protecci n del medio ambiente cuando elimine residuos Precauciones 1 Este producto est destinado a uso diagn stico In Vitro Los controles del QUANTA Flash Sm deben utilizarse con el ensayo QUANTA Flash Sm No transfiera los reactivos de los controles a otros tubos El instrumento utiliza los c digos de barras de los tubos para identificar al control 4 Cada tubo de control una vez abierto es valido para 15 usos y puede permanecer como maximo 10 minutos en el instrumento en cada uso 5 Puede producirse contaminaci n qu mica de los reactivos como consecuencia de un lavado o aclarado inadecuados del instrumento Los restos de sustancias qu micas habituales en los laboratorios como formol lej a etanol o detergente pueden interferir en el an
22. or specific autoantibodies to nuclear antigens American College of Pathologists Arch Pathol Lab Med 2000 124 71 81 Tan EM Cohen AS Fries JF et al The 1982 revised criteria for the classification of systemic lupus erythematosus Arthritis Rheum 1982 25 1271 1277 Hochberg M Updating the American College of Rheumatology revised criteria for the classification of systemic lupus erythematosus Arthritis Rheum 1997 40 1725 1734 Mahler M Fritzler MJ Bl thner M Identification of a SmD3 epitope with a single symmetrical dimethylation of an arginine residue as a specific target of a subpopulation of anti Sm antibodies Arthritis Res Ther 2005 7 R19 29 Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories BMBL 5 Edition Centers for Disease Control National Institute of Health 2009 Simbolos utilizados AE LOT agers a o 7 OL ONTROL DEES i Producto sanitario para diagn stico n Vitro Consulte las instrucciones de uso L mites de temperatura No reutilizar Riesgos biol gicos C digo del lote N mero de cat logo Fecha de caducidad Fabricante Representante autorizado Contenido suficiente para n an lisis Control positivo Control negativo Calibrador 1 Calibrador 2 Caja de cart n reciclable Mantener en esta posici n QUANTA Flash es una marca comercial registrada de INOVA Diagnostics Inc BIO FLASH es una marca comercial registrada de Biokit SA O 2012 F
23. ration Ctrl F3 En la ventana Calibration marque el ensayo deseado y haga clic en Details En la ventana Calibration Details que se abrir seleccione la calibraci n que acaba de efectuar La curva maestra se visualizar como una l nea discontinua y la nueva curva maestra como una l nea continua Si los resultados de la calibraci n son v lidos en la parte inferior izquierda de la pantalla aparecer un bot n de validaci n Haga clic en el bot n Validate Calibration Una vez validada la calibraci n el lote de cartuchos de reactivos calibrado estar listo para usar Se recomienda analizar los controles del QUANTA Flash Sm vendidos por separado n mero de producto 701122 tras calibrar un lote de cartuchos de reactivos Trazabilidad No est disponible ning n suero de referencia internacional para los anticuerpos anti Sm que permita estandarizar los ensayos con estos anticuerpos En su lugar se ha analizado el suero de referencia del Center of Disease Control and Prevention para anticuerpos anti Sm 152076 ANA num 5 anti Sm y se ha determinado una concentraci n gt 693 5 CU Limitaciones Estos calibradores est n dise ados para realizar 4 calibraciones El tiempo m ximo durante el cual los tubos del calibrador pueden permanecer destapados una vez cargados en el instrumento es de 8 horas Si los calibradores permanecen destapados en el instrumento durante m s de 8 horas deben desecharse Si se utilizan los mismos tubos de
24. rtes y haga clic en el bot n Next Desenrosque los frascos viejos del iniciador de sus tapones y sustit yalos por nuevos iniciadores Realice la operaci n frasco a frasco y respete el c digo de color de los tapones blanco blanco rojo rojo c Siga las instrucciones de la ventana que se abrir Add Triggers Add Trigger 2 bottle Una vez aceptado el c digo de barras coloque el iniciador 2 en el soporte de color blanco Haga clic en Next d Siga las instrucciones de la ventana Add Triggers Add Trigger 1 bottle Una vez aceptado el c digo de barras coloque el iniciador 1 en el soporte de color rojo Haga clic en Finish Vuelva a colocar el caj n de residuos en su lugar y ci rrelo Para sustituir el recipiente de l quido de lavado del sistema haga clic en el bot n Bulks Inventory F9 en la esquina superior derecha En la pantalla Inventory Bulks haga clic en el bot n Sys Rinse En la ventana que se abrir Add System Rinse Remove bottles haga clic en Next Siga las instrucciones de la nueva ventana Add System Rinse Add bottle Una vez aceptado el c digo de barras haga clic en Finish si es necesario Para vaciar el recipiente de residuos l quidos en la pantalla Inventory Bulks haga clic en el bot n Fluid Waste Extraiga el residuo l quido y elim nelo Haga clic en Next Una vez sustituido el frasco vac o haga clic en Finish M todo Preparaci n del cartucho de reactivos La primera vez que s
25. s y 30 hombres de edades comprendidas entre 18 y 55 a os con una edad media y una mediana de edad de 34 a os Con un l mite de detecci n de 20 CU 1 de las muestras 1 0 fue positiva en el QUANTA Flash Sm La concentraci n media fue de 3 6 CU y los valores oscilaron entre lt 3 3 CU y 20 5 CU Sensibilidad y especificidad cl nicas En un estudio de validaci n cl nica se utilizaron en total 471 muestras que incluyen 146 muestras de pacientes con LES procedentes de dos cohortes distintas Como controles se incluyeron 160 muestras de pacientes con enfermedades reum ticas 2 de pacientes con enfermedad hep tica autoinmune y 29 de pacientes con varios anticuerpos de enfermedad infecciosa Adem s se analizaron 33 muestras de competencia procedentes del College of American Pathologists CAP y del National External Quality Assessment Service del Reino Unido UKNEQAS que se utilizaron solo en el estudio de comparaci n de m todos Sensibilidad y especificidad cl nicas para el LES n 146 usando la poblaci n de control n 191 del QUANTA Flash Sm An lisis cl nico An lisis n 337 Sin LES intervalo de confianza 95 Positivo 21 6 27 Sensibilidad 14 4 9 1 21 1 QUANTA Flash Positivo 21 S 27 Sm Especificidad 96 9 93 3 98 8 Total 146 191 887 PO Cuatro muestras procedian de pacientes con ES una de un donante de sangre aparentemente sano y una de un paciente con el VIH Distribuci n d
26. siones por d a una por la ma ana y una por la tarde durante 3 d as Los datos obtenidos se presentan a continuaci n Precisi n interensayo del QUANTA Flash Sm oume eae Miera a Muestras Muestras Muestras Muestras De Tag L mites de detecci n intervalo lineal e intervalo de medici n anal tica El l mite inferior de detecci n de este ensayo determinado seg n el documento EP17 A del CLSI es de 678 URL que se encuentra muy por debajo del IMA inferior 3 3 CU El IMA completo que va de 3 3 CU a 693 5 CU es lineal Se ha realizado un estudio de linealidad conforme al documento EP6 A del CLSI utilizando 4 muestras de suero con diferentes concentraciones de anticuerpo anti Sm Las 4 muestras presentaron linealidad de diluci n individualmente y los datos combinados generaron los resultados siguientes con regresi n lineal anal tico CU IC del 95 IC del 95 3 2 a 742 59 0 997 0 979 a 1 015 0 018 3 983 a 4 019 MES muestras QUANTA Flash Sm 701121 Calibradores Para uso diagn stico n Vitro SOLO PARA EXPORTACI N NO COMERCIALIZABLE EN ESTADOS UNIDOS Uso previsto Los calibradores del QUANTA Flash Sm est n destinados a utilizarse con el inmunoensayo quimioluminiscente CIA QUANTA Flash Sm en el instrumento BIO FLASH Cada calibrador establece un punto de referencia para la curva de trabajo utilizada en la determinaci n de los valores en unidades de quimioluminiscencia CU para la medici n d
27. toanticuerpos en la muestra del paciente Los aumentos y disminuciones de las concentraciones de autoanticuerpos en los pacientes se reflejar n en un correspondiente aumento o disminuci n de la CU que es proporcional a la cantidad de anticuerpos El intervalo de medici n anal tica IMA del ensayo va de 3 3 CU a 693 5 CU Si el resultado de un paciente es inferior a 3 3 CU el sistema BIO FLASH indicar lt 3 3 CU Dado que es un valor inferior a 20 CU se considera un resultado negativo Si el resultado de un paciente es superior a 693 5 CU el sistema BIO FLASH indicar gt 693 5 CU Este valor se considera un resultado positivo El software BIO FLASH dispone de una opci n denominada Auto Rerun Si esta opci n est seleccionada el instrumento volver a analizar autom ticamente cualquier muestra que presente un resultado superior a 693 5 CU diluy ndola otra vez seg n un factor de 10 y calcular la CU real a partir de este factor de diluci n adicional Interpretaci n de los resultados El ensayo QUANTA Flash permite detectar peque as diferencias en las poblaciones de pacientes Se aconseja que cada laboratorio verifique el rango de referencia indicado por el fabricante y si lo desea establezca su propio rango normal a partir de sus propios controles y su poblaci n de pacientes de acuerdo con sus procedimientos particulares Es recomendable que los resultados comunicados por el laboratorio incluyan la informaci n s
28. veces m s Si las micropart culas no se resuspenden NO UTILICE EL CARTUCHO d Aseg rese de dispensar todo el l quido antes de retirar la pipeta del tubo y desecharla 4 Retire el adhesivo de la parte superior del cartucho de reactivos para descubrir los otros tres orificios 5 Coloque el cartucho de reactivos en cualquier ranura abierta del carrusel de reactivos del instrumento BIO FLASH Calibraci n del ensayo 1 Cada nuevo lote de cartuchos de reactivos debe calibrarse antes del primer uso El software no permitira usar un lote nuevo hasta que se calibre 2 Consulte el apartado Calibradores del QUANTA Flash Sm 701121 de este documento para obtener instrucciones de uso detalladas sobre como calibrar el cartucho de reactivos 3 Una vez validada la calibracion el lote de cartuchos de reactivos en el que se ha efectuado la calibracion estara preparado para utilizarse Programacion y analisis de las muestras 1 Pulse el boton Worklist de la parte superior de la pantalla y seleccione la pestana Racks de la parte inferior 2 Seleccione la gradilla de muestras que se utilizara marcandola en la pantalla o escaneando su c digo de barras con el lector manual Escanee o escriba el nombre de la muestra indique el tipo de muestra elija el tipo de recipiente tubo copa y seleccione Sm en el panel del ensayo Repita estos pasos para todas las muestras 3 Cargue las muestras en las posiciones seleccionadas de la gradilla de
Download Pdf Manuals
Related Search