Fer-color AA
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1. CE Fer color AA M todo colorim trico directo para la determinaci n de hierro en suero o plasma SIGNIFICACION CLINICA El hierro se distribuye en el organismo de diferentes mane ras incluyendo hemoglobina hierro tisular y mioglobina El transporte de hierro de un rgano a otro se realiza me diante una prote na transportadora llamada apotransferrina El complejo que forma con el hierro se conoce como transfe rrina La ferritina localizada en casi todas las c lulas del cuerpo constituye una reserva de hierro disponible para la formaci n de la hemoglobina y otras prote nas que contienen el grupo hemo La absorci n de hierro ocurre principalmente en el duo deno Tanto la ferritina como la transferrina est n presentes en las c lulas de la mucosa intestinal y juntas regulan la absorci n de hierro Los mayores des rdenes del metabolismo de hierro se rela cionan con su deficiencia o exceso sin embargo se han ob servado alteraciones en muchas otras enfermedades inclu yendo anemia enfermedades cardiovasculares hepatitis cr nica enfermedades renales e infecciones La anemia por p rdida de hierro representa uno de los trastor nos org nicos m s frecuentes especialmente en ni os mu jeres j venes embarazadas y ancianos Tambi n las lceras g stricas o duodenales y carcinomas de est mago constitu yen causas de anemia ferrop nica Por el contrario el exceso de hierro se asocia con otros des rde2. 71 Zak B Baginski E S Epstein E y Wiener L M Clin Toxicol 4 4 621 1971 Rojk n M L Olgu n de Mariani M C Drappo G A y Albarrac n A III Congreso Argentino de Bioqu mica Bue nos Aires 1975 Young D S Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests AACC Press 4 ed 2001 SIMBOLOS Los siguientes s mbolos se utilizan en todos los kits de reac tivos para diagn stico de Wiener lab tos por la Directiva Europea 98 79 CE de productos sanitarios para el diagn stico in vitro Este producto cumple con los requerimientos previs Representante autorizado en la Comunidad Europea Uso diagn stico in vitro Contenido suficiente para lt n gt ensayos Fecha de caducidad L mite de temperatura conservar a No congelar Riesgo biol gico Volumen despu s de la reconstituci n Cont Contenido N mero de lote Elaborado por Nocivo Corrosivo Ca stico Irritante Consultar instrucciones de uso Calibr Calibrador Control Control Positivo Control Negativo A tepne N mero de cat logo wl Wiener Laboratorios S A l C Riobamba 2944 2000 Rosario Argentina http Awww wiener lab com ar Dir T c Viviana E C tola Iener a Bioqu mica E Producto Autorizado A N M A T Cert N 3193 99 2000 Rosario Argentina 870460000 00 P g 3 de 6
3. as lecturas de S y D rest ndoles los Blancos co rrespondientes S B S corregida D B BS D corregida Fe ug dl D corregida x f 100 ug dl donde f S corregida METODO DE CONTROL DE CALIDAD Procesar 2 niveles de un material de control de calidad Standatrol S E 2 niveles con concentraciones conocidas de hierro con cada determinaci n VALORES TEORICOS Hombres 65 a 175 ug dl 11 6 31 3 umol l Mujeres 50 a 170 ug dl 9 30 4 umol l VALORES DE REFERENCIA En un grupo de 20 mujeres y 20 varones sanos con edades oscilando entre los 18 y 51 a os se hall un rango de 55 a 175 ug dl con los siguientes promedios Hombres 114 6 ug dl 20 5 umol Mujeres 103 3 ug dl 18 5 umol l Valores de referencia extraidos de archivos de Wiener lab Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios valores de referencia CONVERSION DE UNIDADES AL SISTEMA SI Hierro ug dl x 0 179 Hierro umol l LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO Valores de Blanco aceptables la determinaci n de oligoele mentos requiere la prevenci n de posibles contaminacio nes del agua y los reactivos El Blanco de Reactivos ejecu tado de acuerdo al Manual de Instrucciones no debe ser superior a 0 150 D O debiendo ser adem s despreciable la contribuci n del agua en dicho Blanco Para ello se reco mienda el uso de agua de calidad comprobada conductividad menor a 0 02 uOhms Limpieza del material tod
4. e acuerdo a la normativa local vigente ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO Reactivos Provistos son estables a temperatura ambiente lt 25 C hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja Reactivo de Trabajo es estable durante 3 meses a partir de la fecha de su preparaci n conservado en refrigerador 2 10 C o 10 d as a temperatura ambiente 18 25 C INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS REACTIVOS Variaciones en las lecturas de Blancos de Reactivos y o Stan dard indican contaminaciones ocasionales agua material de vidrio etc Un aumento en el valor de los Blancos indica r una contaminaci n con hierro MUESTRA Suero o plasma a Recolecci n el paciente debe estar en ayunas y las ex tracciones deben practicarse siempre a la misma hora prefe rentemente de ma ana ya que las fluctuaciones fisiol gicas son significativas durante el d a b Aditivos en caso de utilizar pasma como muestra debe usarse heparina como anticoagulante c Sustancias interferentes conocidas no se observa in terferencia por hemoglobina hasta 90 mg dl bilirrubina hasta 15 mg dl y heparina hasta 50 Ul ml Muestras lip micas pueden conducir a resultados err neos Niveles de triglic ridos de 3 72 g l producen interferencias Si bien hem lisis ligeras no interfieren con este m todo el International Committee for Standardization in Hematology 870460000 00 P g 1 de 6 ICSH recomienda el uso de sue
5. nes como hemosiderosis hemocromatosis y anemia siderobl stica FUNDAMENTOS DEL METODO El hierro s rico se libera de la uni n con su prote na transpor tadora espec fica la transferrina en buffer acetato pH 4 5 y en presencia de un reductor el cido asc rbico Posterior mente reacciona con el reactivo de color piridil bis fenil triazina sulfonato ferrozina dando un complejo color magenta que se mide a 560 nm REACTIVOS PROVISTOS A Reactivo A soluci n de acetato 150 mmol l para pH 4 5 conteniendo guanidina B Reactivo B cido asc rbico C Reactivo C soluci n estabilizada de ferrozina S Standard soluci n de ones Fe IlI equivalente a 100 ug dl Concentraciones finales Acetato eneeeseesenernnnerinrnrnrrrnrerrnrrrnne 150 mmol l pH 4 5 Ferrozina acsneseseseesrsrnenernenrnnerrrrnrrerennrrrerrnne 0 2 mmol l Acido ASCO PIO ada 0 03 mol l O a aiaa ienai 4 0 mol l REACTIVOS NO PROVISTOS Calibrador A plus de Wiener lab Agua bidestilada INSTRUCCIONES PARA SU USO Reactivo C listo para usar Standard listo para usar Reactivo de Trabajo transferir al vial de Reactivo B la canti dad de Reactivo A indicada en el r tulo Colocar fecha de pre paraci n PRECAUCIONES Los reactivos son para uso diagn stico in vitro Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales de trabajo en el laboratorio de qu mica cl nica Todos los reactivos y las muestras deben descartarse d
6. o el material de laboratorio em pleado debe estar libre de hierro para lo cual debe ser su mergido durante 6 horas en HCI p a 10 15 eliminando la acidez con numerosos lavados con agua libre de hierro Secar el material preferentemente a no m s de 80 C en cestillas de acero inoxidable o revestidos con pl stico Todo el material debe ser empleado exclusivamente para la de terminaci n de hierro PERFORMANCE a Reproducibilidad procesando replicados de las mismas muestras en un mismo d a se obtuvieron los siguientes datos Nivel D S C V 146 5 ug dl 1 93 ug dl 1 32 324 6 ug dl 1 76 ug dl 0 54 Procesando la misma muestra en d as diferentes se obtuvie ron los siguientes resultados Nivel D S CV 142 8 ug dl 2 50 ug dl 1 75 314 0 ug dl 3 93 ug dl 1 25 b Recuperaci n agregando cantidades conocidas de Fe ll a al cuotas de un mismo suero se recuper entre 90 y 103 c Linealidad la reacci n es lineal hasta 1000 ug dl d L mite de detecci n 6 05 ug dl PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS Para las instrucciones de programaci n debe consultarse el 870460000 00 P g 2 de 6 Manual del Usuario del Analizador en uso Para la calibra ci n debe emplearse Calibrador A plus de Wiener lab de acuerdo a los requerimientos del analizador PRESENTACION 5 x 20 ml C d 1492003 BIBLIOGRAFIA Dixon K Ann Clin Biochem 10 5 127 1973 1 C S H Am J Clin Path 56 4 543 19
7. ro libre de hem lisis Referirse a la bibliograf a de Young para los efectos de las drogas en el presente m todo d Estabilidad e instrucciones de almacenamiento el sue ro o plasma heparinizado pueden conservarse hasta una se mana en refrigerador 2 10 C MATERIAL REQUERIDO no provisto Espectrofot metro o fotocolor metro Micropipetas y pipetas para medir los vol menes indicados Tubos o cubetas espectrofotom tricas CONDICIONES DE REACCION Longitud de onda 560 nm en espectrofot metro o 540 560 nm en fotocolor metro con filtro verde Temperatura de reacci n temperatura ambiente Tiempo de reacci n 5 minutos Volumen de muestra 200 ul Volumen total de reacci n 1 4 ml PROCEDIMIENTO En tres tubos marcados B Blanco de Reactivos S Stan dard y D Desconocido colocar B S D Agua bidestilada 200 ul Standard 200 ul Muestra 200 ul Reactivo de Trabajo 1ml 1ml 1ml Mezclar Leer la absorbancia del tubo D Blanco de Suero BS en espectrofot metro a 560 580 nm o en fotocolor metro con filtro verde 540 560 nm llevando a cero el apa rato con agua Luego agregar Reactivo C 200 ul 200 ul 200 ul Mezclar inmediatamente Volver a leer cada tubo a los 5 minutos llevando el aparato a cero con agua ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL Los tubos deben ser le dos entre 5 y 60 minutos luego de completados los pasos del procedimiento CALCULO DE LOS RESULTADOS Corregir l
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