Manuel d`utilisation du microscope confocal SP5
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1. fl che est marron Cliquer jusqu ce que cette fl che soit marron Stop Live La distance entre les deux positions Z fix es appara t en dessous dans z Volume soit d terminer le nombre de plans r aliser dans Nr of steps puls Enter le z step size est alors calcul automatiquement soit d terminer la distance souhait e entre deux plans dans z Step size puis Enter Le nombre de plans est alors calcul automatiquement Pour lancer l acquisition de la s rie z appuyer sur Start Visualisation des images cran de droite Superposition des images Overlays Projection Maximale b cin tique Le but est de faire une acquisition r p t e au cours du temps stapa c 5 z Position 34 269 Q Nr af steps z stap size z Volume e system optimized Dans l onglet Acquisition choisir a l aide du curseur dans Acquisition Mode le mode xyt ou xyzt Ouvrir la fen tre t D finir Pintervalle de temps entre deux images avec Time interval soit fixer un temps voulu soit faire une acquisition r p t e la plus rapide possible en cochant Minimize temps n cessaire pour faire un scan D finir la dur e totale de l acquisition Soit acquisition arr t e manuellement stopped soit remplir les cases jour heure min sec et msec de Duration solt d finir le nombre de fois que l on souhaite r p ter l acquisition avec Fra2. 25 0 75 Oil CS HCX PL APO 63x 1 4 0 6 Oil CS HC PL APO 20x 0 7 CS HCX PL APO 40x 0 75 UV I les filtres combinaison filtres A exc 340 380 dichr 400 emission LP 425 combinaison filtres 13 exc 450 490 dichr 510 emission LP 515 combinaison filtres N2 1 exc 515 560 dichr 580 emission LP 590 combinaison filtres BGR triple bande exc 420 30 495 15 570 20 dichr 415 510 590 emission 465 20 530 30 640 40 combinaison filtres CFP YFP Service imagerie Cellulaire et Cytom trie en flux IFR83 novembre 2008 2 d marrage du syst me a allumer la lampe mercure 100VV O l b allumer sur le contr leur PC microscope la diode du bouton doit s allumer l ordinateur et le microscope d marrent attendre 2 3 secondes c allumer le Scanner Power la diode du bouton doit s allumer attendre 2 3 secondes d mise sous tension du laser et de sa ventilation allumer le bouton Laser Power la diode du bouton s allume tourner la cl du Laser Emission de Off ON 1 la diode au dessus de la cl s allume attendre 2 3 secondes e sur l ordinateur ouvrir la session TCS user pas mot de passe f d marrer le logiciel LAS AF situ au milieu du bureau Au d marrage appara t alors la fen tre suivante v rifier le Microscope Stand cliquer dessus normalement le logiciel a defa s lectionn le microscope actif DMI6000 pour l invers ou DM6000 pour le droit si
3. image o s lectionner un spectre d mission de r f rence de votre fluorophore 6 param trer le PMT choisir les longueurs d onde r cup rer soit en faisant glisser les extr mit s du curseur du PMT soit en double cliquant sur le PMT et entrer les longueurs d onde min et max Pour une image en lumi re transmise FMT Trans 1 appuyer sur Additional Channels 2 activer le PMT Trans en cochant la case 3 s lectionner le mode d acquisition BF pour Bright Field Pol pour lumi re polaris e DIC pour Differential Interference Contrast 4 activer le laser d sir cliquer sur UV ou Visible 5 augmenter le curseur de la raie laser ex 488nm a 15 Service imagerie Cellulaire et Cytom trie en flux IFR83 novembre 2008 3 acqu rir une image XY 1 couleur b le format de l image dans la fen tre XY choisir avec le menu d roulant le nombre de pixels attribuer l image c la vitesse de scan pour une utilisation du scanner conventionnel choisir une vitesse de scan au dessus de 400Hz un zoom est automatiquement attribu pour le resonant scanner la vitesse de 8000Hz est fixe d le zoom par d faut le zoom est de 1 sauf pour une vitesse de scan sup 400Hz zoom automatique le resonant scanner zoom de 4 par d faut que l on peut baisser 1 7 minimum pour augmenter le zoom au centre de l image augmenter le gr ce au curseur zoom factor ou au control panel bouto
4. lt co LL HA X 4 lt o 2 c 0 E O gt o o ES gt c o g E o gt re o Uu z u sed np uirir92 0 beuuol iupuo3 linu 015 VN 5211 J199 qo ung09 0 z uolnios ki np uriz 0 0 106 25 AX uonnios tJj 4 169 0 01551 n npuo7 TS co o o cN o c Q o gt o lt co LL HA X 4 lt o 2 c 0 E O gt o o ES gt c o g E o gt re o Uu z 4 sed np uT OT 11 linu UOISISUWUUI VN X 9 H lqo 122 0 z uolnios ki np uri 90 0 beuuol iupuo3 AX 40111099 url L 0 UOISSILUS D n npuo7 TS co o o cN o c Q o gt o lt co LL HA X 4 lt o 2 c 0 E O gt o o ES gt c o g E o gt re o Uu
5. une position choisir avec le curseur la position liminer puis clic sur l ic ne ns mm Pour modifier une position Sama Stack for all Positions Choisir la position modifier avec le curseur Position2 par exemple clic sur l ic ne EH modifier la position X Y Z avec le joystick recliquer sur Tic ne EH Lorsque toutes les positions sont enregistrees commencer Pacquisition Start BIOLOGIE N r Service imagerie Cellulaire et Cytom trie en flux IFR83 novembre 2008 IFR 83 6 acqu rir des piles d images a s rie en z Le but est de faire une acquisition sur plusieurs plans en profondeur dans l chantillon la dimension en 2 Dans l onglet Acquisition choisir l aide du curseur dans Acquisition Mode le mode xyz ou xyzt Ouvrir la fenetre Z stack Faire une acquisition Live sur les param tres ou couleurs qui vont d terminer le mieux le d but et la fin de la pile d images Modifier la position Z l aide du Control Panel bouton Z position se placer en d but de la pile acqu rir cliquer sur la fl che pr s de Begin La position Z est enregistr e lorsque cette fl che est marron Cliquer jusqu ce que cette fl che Soit marron Remodifier la position Z l aide du Control Panel Z position et se placer en fin de pile acqu rir cliquer sur la fl che pr s de End La position Z est enregistr e lorsque cette
6. Manuel d utilisation du microscope confocal SP5 Service imagerie Cellulaire et Cytom trie en flux IFR83 novembre 2008 1 introduction du syst me 2 d marrage du syst me 2a allumer la lampe 2b allumer microscope et PC 2c mise sous tension de la t te scan 2d mise sous tension de la ventilation laser 2e ouvrir la session TCS user 2f d marrer le logiciel LAS AF choix de scan 2g pre reglages configuration 3 acqu rir une image XY 1 couleur 3a les param tres d illumination 3b le format de l image 3c la vitesse de scan 3d le zoom 3e la rotation T le pinhole 3g le moyennage 3h les modes d acquisition live capture image 4 acquerir une image XY a plusieurs couleurs 4a acquisition simultanee 4b acquisition sequentielle 5 acqu rir une image XY sur plusieurs positions ba tablir une carte de l chantillon 5b d finir des positions parpill es 6 acqu rir des piles d images 4a s rie en z 4b cin tique 4c spectres 7 Sauver ses donn es 8 changer de scanner pendant une s ance ou comment r agir en cas de bug 9 teindre le syst me Service imagerie Cellulaire et Cytom trie en flux IFR83 novembre 2008 1 introduction du systeme Le microscope confocal Leica de type SP5 AOBS Tandem a te installe dans notre service durant les mois de avril mai 2006 Cet quipement est relativement complet et permet un nombre vari d applications double statif La t te confocale peut tre in
7. acquerir une image XY a plusieurs couleurs a acquisition simultanee Ce mode d acquisition consiste a exciter avec plusieurs raies laser et r colter les fluorescences mises avec 2 ou 3 PMTs maxi simultan ment Dans les param tres dillumination il suffit de d finir les lasers et la puissance des raies laser a utiliser ainsi que d activer les PMT choisis cocher PMT choisir une pseudocouleur et un spectre de r f rence Exemple d image 3 couleurs DAPI diode 405 PMT 1 Alexa 488 raie 488 PMT2 Alexa 568 raie 561 PMT3 Appuyer sur Live Apparaft alors sur l cran de droite X cadres pour X couleurs Cliquer sur l ic ne fausse couleur pour s lectionner la gamme Glow O amp U Cliquer sur le premier cadre r gler le gain par le Control Panel Smart Gain ainsi que l offset S lectionner l autre cadre et r gler de m me le gain et l offset jh Arr ter le Live R gler le format de l image le moyennage puis Start Visualisation des images Canal 1 Canal 2 Superposition des diff rents canaux Service imagerie Cellulaire et Cytom trie en flux IFR83 novembre 2008 4 acqu rir une image XY a plusieurs couleurs b acquisition sequentielle Ce mode d acquisition consiste acqu rir une image de chaque fluorophore l une apr s l autre II faut imp rativement utiliser cette proc dure en cas d tude de co localisation Dans un premier temps cliquer sur UV e
8. ce imagerie Cellulaire et Cytom trie en flux IFR83 novembre 2008 X IFR 83 Microscope invers 16000 Service imagerie Cellulaire et Cytom trie en flux IFR83 novembre 2008 Face avant Blocs filtres Ouvrir ou fermer le shutter devant la lampe fluo Filtres N2 1 fluo rouge exc 450 490 yr ee dichr 510 emission LP 515 a Filtre double band CFP et YFP Filtre A DAPI Hoechst exc 340 380 dichr 400 emission LP 425 Filtres I3 fluo verte exc 515 560 dichr 580 emission LP 590 Ecran d information non tactile Shutter ouvert ou ferm TL pour transmitted Light FLUO SCAN objectifs et milieu d immersion o Intensit de la lampe et ouverture du diaphragme de fluo Ou du diaphragme d ouverture de la lumi re blanche Position en z par rapport au l allumage Pas du z fine ou coarse BIOLOGIE N GRATIVE Service imagerie Cellulaire et Cytom trie en flux IFR83 novembre 2008 IFR 83 C t droit Changement d objectif Changement d objectifs plus gros grossissement b ee Changement d objectifs x Dius petit grossissement C t gauche Lumi re transmise BF bright field POL polariseur DIC polariseur et analyseur Variation de l intensit de la lampe blanche ou de la lampe fluo bouton haut pour augmenter bouton bas pour dimin
9. ce n est pas le cas le s lectionner v rifier la configuration choix du logiciel LAS AF Machine Simulator LAS Life Simulator SP5 Simulator SPE Choisir Machine si ce n est pas d j le cas Attention d s l ouverture du logiciel choisir le mode de scanner pour le scan conventionnel la case Resonant Scanner ne doit pas tre coch e puis OK pour le Resonant Scanner cocher la case Activate Resonant Scanner puis OK lu a Contiquration Microscope Stand 4 Activate Resonant Scanner Pendant Tinitialisation le logiciel demande s il doit ou non initialiser la platine motoris e XY initialize stage DMI6000 S la platine n est pas utilis e pendant la s quence cliquer sur NO si la platine est utilis e pendant la session alors v rifier que la tourelle des objectifs est en position basse et r pondre YES Service imagerie Cellulaire et Cytom trie en flux IFR83 novembre 2008 2 d marrage du syst me g pr r glage configuration A l ouverture du logiciel s lectionner l onglet Configuration microscope Seul le personnel du Service Imagerie est autoris lancer le logiciel de configuration du statif par Run LAS Objectifs H acc s la liste des objectifs enregistr s et leur position sur la tourelle des objectifs il est possible d interchanger les objectifs entre le statif droit et invers en respectant leur ordre sur la tourelle C la
10. ge XY sur plusieurs positions Le microscope invers et le microscope droit sont quip s d une platine motoris e qui permet d enregistrer des coordonn es XY et de scanner en diff rents points Au d marrage du logiciel pour le scan conventionnel comme pour le RS il faut avoir r pondu yes a la question initialize stage DM160002 pour avoir acc s aux ic nes contr lant la platine motoris e a tablir une carte de l chantillon Le principe est de d terminer le d but en haut gauche et la fin en bas droite de la zone scanner La platine se d placera alors de champ en champ pour faire la carte totale de l chantillon Dans l onglet Configuration Dans l onglet Acquire puis l onglet Acquisition cliquer sur l ic ne Map dans Acquisition Mode une nouvelle fen tre appara t Tile Scan D terminer les param tres d acquisition d une ou plusieurs couleurs sur la position o les fluorescences sont les plus lev es Etre en acquisition Live se mettre en position en haut gauche de l chantillon puis enregistrer cette position en cliquant sur m Toujours pendant l acquisition Live d placer l chantillon a l aide du Joystick en position bas droite de l chantillon puis recliquer sur E x Pos mm y Pus Lorsque l ic ne LE est activ tous les champs ScanField scanner apparaissent Leur nombre est donn B s n m B roue automati
11. is cocher Line Average Frame average Line accumulation Frame accumulation Cette fonction vous permet d acqu rir vos images s quentielles avec des moyennages et des accumulations diff rents pour chaque image Scan 1 Scan 2 3 acqu rir une image XY 1 couleur S lectionner l onglet Acquire dessous apparaissent les onglets Experiments liste des dossiers et des fichiers image Acquisition les diff rentes fen tres de parametre d acquisition S lectionner l onglet Acquisition En fonction du mode d acquisition s lectionn e diff rentes fen tres apparaissent dans l onglet Acquisition Le mode d acquisition par d faut est XYZ et les fen tres ouvertes sont Acquisition Mode XY Z stack Service imagerie Cellulaire et Cytom trie en flux IFR83 novembre 2008 3 acqu rir une image XY 1 couleur a d finir les param tres d illumination 0 0 15 0 0 0 0 41 458 476 488 496 514 561 image en soit choisir des parametres d j enregistr s cliquer sur Load Save single setting et selectionner le programme SO t configurer soi m me le scan 1 activer le laser d sire cliquer sur UV ou Visible 2 augmenter le curseur de la raie laser ex 488nm a 1596 3 s lectionner un PMT cocher la case Active sous le PMT d sir 4 choisir une fausse couleur attribuer a
12. mes clic sur Acquire until Cliquer sur Accept puis Start q 00 00 00 h 1 0000 01 304 h o ni Time interval h lm 1151304 ms 21 Minimize Acquire until stopped Duration og Ouf ml l 0 QI Frames 5 Service imagerie Cellulaire et Cytom trie en flux IFR83 novembre 2008 Sauver ses donn es S lectionner l onglet Acquire dessous apparaissent les onglets Experiments liste des dossiers et des fichiers image En Les exp riences apparaissent sous forme de dossiers et les images sous forme de fichiers renommer les fichiers clic droit souris rename Series1 donner le nouveau nom sauver l exp rience clic sur Save All fen tre interactive cr er un nouveau dossier son nom dans le dossier correspondant au mois et au jour de la session donner un nom l exp rience L exp rience est alors sauv e en lif sauvegarder les param tres d acquisition sur le fichier de l image clic droit Properties Sauver la nouvelle fen tre qui s ouvre sous format xml Faire cette sauvegarde pour toutes les acquisitions exporter l exp rience en tif la fin de l acquisition exporter globalement toutes les images en tif sur le dossier de l exp rience clic droit export experiment as TIFF Fen tre interactive cocher 8 changer de scanner pendant une s ance ou comment r agir en cas de bug a quitter le logiciel b sortir de la session en ba
13. n zoom pour zoomer dans une region d termin e cliquer sur le zoom in puis s lectionner l outil rectangle sur la bande gauche de l image et s lectionner la zone d int r t sur l image e la rotation de la zone scann e Par d faut l angle de rotation est de Modifier l angle avec le curseur Rotation ou le Control Panel bouton Sacn Field rotation f le pinhole Cliquer sur le bouton Pinhole une nouvelle fen tre appara t Cliquer sur Airy1 pour la meilleure r solution confocale sinon modifier le curseur ou modifier le pinhole par le bouton du Control Panel g le moyennage L image finale acquise peut tre une image moyenn e de plusieurs passages du laser Line Average ce moyennage est effectu apr s chaque ligne Frame Average ce moyennage se fait apr s chaque image h l acquisition Lic ne Live en bas de la fen tre cran gauche permet de faire une acquisition en continu Le laser balaie l chantillon image appara t alors sur l cran de droite C est alors le moment de r gler le gain et Poffset du PMT avec le Control Panel Lic ne Capture image concerne l acquisition d une image moyennee sur 1 plan Lic ne Start enclenche l acquisition d une s quence d images BIOLOGIE INT GRATIVE Pinhole Configuration Acquire Process Experiments Acquisition Acquisition Mode xyz 4112 Speed 1 Bidirectional X Zoom facto
14. quement dans Scan Field Le logiciel peut reconstruire automatiquement l chantillon avec tous les champs acquis clic sur Merge Images Pour pouvoir sauvegarder chaque champ clic sur Keep Raw Images Puis Start Service imagerie Cellulaire et Cytom trie en flux IFR83 novembre 2008 5 acqu rir une image XY sur plusieurs positions b enregistrer des positions aleatoires Le principe est de d terminer les diff rents champs r partis de mani re al atoire et d acqu rir des images ou stacks sur ces diff rents points Le scanner ira automatiquement d une position l autre Cette proc dure est particuli rement appr ci e pour des cin tiques et de multiplier ainsi les points exp rimentaux Dans l onglet Acquire puis l onglet Acquisition cliquer sur l ic ne Point dans Acquisition Mode une nouvelle fen tre appara t Mark amp Find D terminer les param tres d acquisition d une ou plusieurs couleurs 20 Aux occulaires choisir une r gion int ressante Sur le logiciel faire une image Live affiner la position XY et Z Fixer la position Z begin et Z end ainsi que le pas Stop Live puis enregistrer la position clic sur l ic ne E les coordonn es X pos y Pos et z Pos begin end pas sont enregistr es comme position 1 Rechoisir une autre position aux occulaires puis recommencer la proc dure R Pus 5 73 mm Pour supprimer
15. r XI Zoom in d SIA Image Size 775 00 pm 775 00 pm 1 52 um 1 52 pm 54 op Fame Average GED Y Pixel Siza Line Average Accumulation Rotation Z Stack mopem 60 63 m Capture Image Service imagerie Cellulaire et Cytom trie en flux IFR83 novembre 2008 3 acqu rir une image XY 1 couleur h la visualisation de l image l image appara t sur l cran de droite et des ic nes apparaissent gauche de cet cran La fl che permet de s lectionner une image une chelle ou une r gion d j d finies Pour indiquer une chelle dans image cliquer sur l ic ne chelle u d placer la souris sur l image clic gauche de d but de l chelle d placer la souris clic gauche pour fin de l chelle Automatiquement l chelle se dessine avec la longueur indiqu e du trait dessin Clic droit sur l chelle puis Properties pour d finir une longueur pr cise La longueur de la barre s adapte la longueur indiqu e Les fausses couleurs en cliquant sur cet ic ne on change la gamme couleur en niveau de gris en d grad d une couleur choisie au niveau du PMT ou en couleur Glow OSU qui correspond un d grad de orange marron avec la valeur 0 en vert et la valeur maximale 255 en 8 bits en bleu Cette gamme couleur Glow O amp U est tr s adapt pour les r glages de gain et Offset du PMT Service imagerie Cellulaire et Cytom trie en flux IFR83 novembre 2008 4
16. s du bureau appuyer sur start puis Log Out c teindre sur le contr leur le Scanner Power d attendre une dizaine de secondes e allumer sur le contr leur le Scanner Power f r ouvrir la session TCS user pas de mot de passe g red marrer le logiciel LAS AF au milieu du bureau h Lorsque le logiciel d marre cocher ou non Activate Resonant Scanner i Recommencer la proc dure de d marrage du syst me a partir de 2 g BIOLOGIE N r Service imagerie Cellulaire et Cytom trie en flux IFR83 novembre 2008 IFR 83 9 eteindre le systeme a eteindre les lasers dans Ponglet Configuration s lectionner l ic ne Lasers baisser le curseur a du laser Argon puis d cocher tous les lasers ou diodes allum s b tourner la cl du Laser Emission de ON1 a Off c quitter le logiciel LAS AF File Exit d teindre sur le controleur Scanner Power e teindre l ordinateur f teindre sur le controleur PC microscope g teindre la lampe mercure h Attention la ventilation du laser s arr te automatiquement c est audible A partir de ce moment et uniquement a partir de ce moment eteindre sur le controleur le Laser Power Encas de doute ne pas eteindre ce dernier bouton BIOLOGIE q E H 0 H gt SS b s H 0 Seulement a la fin de la ventilation automatique N GRATIVE Servi
17. sers L J cocher les lasers ou diodes utiliser pendant la session Pour le laser Argon cocher la case puis d placer le curseur jusqu 30 Service imagerie Cellulaire et Cytom trie en flux IFR83 novembre 2008 2 d marrage du syst me g pre reglage configuration Le Control Panel L m Le Control Panel est un raccourci de fonctions existantes dans le logiciel l existe une configuration de base mais une autre fonction peut tre attribuee chaque bouton selon la volont de l utilisateur en cliquant sur Ctrl Panel La configuration par d faut de gauche droite est la suivante Smart Gain le gain de chaque d tecteur PMT Smart Offset l offset de chaque PMT Scan Field Rotation rotation de la zone scann e en degre Pinhole zoom Z position settings Choisir le nombre de bits attribu s votre image 8 12 ou 16 bits Par d faut 8 bits est s lectionn Possibilit d acqu rir l image Live en image moyenn e en cochant la case Line Average during Live Acquisition Cocher la case Online Maximum Projection during acquisition pour obtenir la projection maximale la fin d une pile en Z au cours d une acquisition par exemple une cin tique XYZt Service imagerie Cellulaire et Cytom trie en flux IFR83 novembre 2008 2 d marrage du syst me g pr r glage configuration IPS Masks S lectionner Confocal Sequential Stack Pu
18. stall e soit sur le microscope invers DMI6000 configuration par d faut soit sur le microscope droit DM6000 la demande Seul le personnel du Service imagerie est habilit permuter la t te confocale Tandem scanner La t te confocale SP5 est quip e de deux scanners un scan conventionnel vitesse de scan variable un scan rapide 8000 2 dit resonant scanner particuli rement adapt l imagerie du vivant AOBS Notre systeme est implemente du systeme AOBS Acousto Optical Beam Splitter brevet Leica qui de ce fait supprime l utilisation des filtres dichroiques en mode scan platines Chaque statif est quip surplatine vous garantissant un repositionnement ultrarapide et pr cis de la platine en Z Z galvo pr cision de 40 nm sur une paisseur de 1 5 mm d une platine motoris e XY vous permettant de faire du mapping sur votre chantillon et de reconstituer image globale ou d enregistrer des positions parpill es sur votre chantillon et de vous repositionner sur ces diff rents points pendant une cin tique par exemple les sources d excitation diode 50mVV 405nm laser Argon 100mVV 458 476 488 496 514 nm diode 561 nm 10mVV 561 nm laser He Ne 10mvv 633 nm 3 photomultiplicateurs en fluorescence de 400 a 800 nm et 1 photomultiplicateur Trans Bright field DIC les objectifs communs aux deux statifs HC PL APO 20 0 7 imm Corr CS HC PL APO 40x 1
19. t ou visible et choisir une puissance laser pour toutes les raies utilis es pendant l exp rience ainsi que tous les PMTs qui seront utilis s M me proc dure que pour l acquisition simultan e 18 0 18 0 Hi 3 pattrormetar 1 3 500 S 2 800 Dans l onglet Acquisition Mode cliquer sur l ic ne Seq Apparait alors un nouvel ONE Sequential Scan between frames R between stacks Cliquer sur pour rajouter autant de scans que de fluorophores d tecter Choisir ensuite between frames Cliquer sur Scan 1 liminer le laser ou les raies laser et PMTs qui ne seront pas utilis s pour le 1 r fluorophore Live r gler le gain et l offset du PMT Stop Live Fixer le moyennage et ou A Paccumulation de ce scan Cliquer sur Scan 2 liminer le laser ou les raies laser et PMTs qui ne seront pas utilis s pour le 2272 fluorophore Live r gler le gain et Poffset du PMT Stop Live Fixer le moyennage et ou Paccumulation de ce scan Cliquer sur Scan 3 liminer le laser ou les raies laser et PMTs qui ne seront pas utilis s pour le 3 me fluorophore Live r gler le gain et l offset du PMT Stop Live Fixer le moyennage et ou l accumulation de ce scan Puis Start uu Visualisation des images voir acquisition simultan e 810 LOGIE Service imagerie Cellulaire et Cytom trie en flux IFR83 novembre 2008 5 acqu rir une ima
20. uer Passage de lumi re blanche TL pour transmitted light la fluo IL pour illuminated light Ouverture des diaphragmes bouton gauche pour ouvrir bouton droit pour fermer FD field diaphragm diaphragme de champ pour la fluo forme ronde ou rectangle AP aperture diaphragme d ouverture pour la lumi re transmise Service imagerie Cellulaire et Cytom trie en flux IFR83 novembre 2008 Le Joystick Mouvement Z des objectifs Mouvement X et Y de la platine Le pas du mouvement Z Le pas du mouvement XY fine ou coarse fine ou coarse Service imagerie Cellulaire et Cytom trie en flux IFR83 novembre 2008 1 51550 saide in lqol ins 1112541 in lqoll nbu wnu VN UOISSILI9 P y VN Yr1 zxq DIXD U0 1n osS24 9 Axq 0J 1D v rnyos u TS co o o cN o c Q o gt o lt co LL HA X 4 lt o 2 c 0 E O gt o o ES gt c o g E o gt re o Uu 2 0204u09 ldo sod lul nbiydo uolin os i z u sed np UuT 6GG 0 4 inu UOISISUWUI VN 0 XOS 0214 1682 z uolnios ki np 8210 106 25 AX UOolinlos ki 0 1662 0 UOISSILU D n npuo7 TS co o o cN o c Q o gt o
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